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RESUMEN
metales, una vez que se incorporan a una cadena trfica difcilmente salen de ella. Debido al
problema ambiental que se platea, este trabajo busca remover dichos metales simultneamente
de aguas de desecho. Se utilizar el alga Chlorella sp. viva, no viva, pretratada qumicamente e
inmovilizada en espuma de poliuretano.
El alga se cultivar utilizando nutrifoliar como medio de cultivo, se someter a un ciclo de 12
horas de luz y 12 horas de oscuridad. Posteriormente la biomasa se secar a una temperatura
entre 60 80 C durante 14 h, luego se pulverizar. Luego esta biomasa se usar para realizar
ensayos de isoterma de adsorcin en suspensin empleando diferentes concentraciones de plomo
y zinc ajustndolo a todos los parmetros de cultivo.
Adems el alga se inmovilizar en discos de espuma de poliuretano. Una vez listo el proceso de
movilizacin ser introducido en la solucin que contendr ambos metales, se le aplicar
agitacin
El ser humano en el afn de hacer la vida ms cmoda, ha desarrollado tecnologas que le ayudan
a que se cumpla ese fin, pero en la trayectoria de su avance se generan residuos que se acumulan
y son causante de problemas ambientales y en la salud humana; algunos de estos residuos son
metales pesados que se generan en la industria metalrgica, plantas productoras de bateras,
galvanizadoras, la minera, entre otras profesiones. Debido a esta problemtica nace la necesidad
de desarrollar rutas para disminuir la concentracin de metales pesados en el ambiente; el
implemento de tecnologas a base de micro-organismos para la eliminacin de metales pasados
ha demostrado tener potencial de remocin a bajos costos, estos micro-organismos pueden ser:
algas, bacterias, hongos y levaduras que han demostrado ser potencialmente sorbentes de metales
pesados [3] [4] [5] [6] [7].
3. JUSTIFICACIN.
En vista de la problemtica ambiental que se presenta hoy en da por la contaminacin de los
recursos hdricos del planeta, se plantea un mtodo de remocin de metales pesados de aguas
residuales. Desde hace tiempo se viene implementando el uso de biomasa para la remocin y
recuperacin de metales pesados y la recuperacin de metales preciosos [3] [4] [5] [6] [7].
La utilizacin de biomasa para este tratamiento resulta una alternativa que podra ser efectiva
gracias a la variedad de los grupos funcionales presentes en la pared celular quienes se coordinan
con los iones metlicos favoreciendo la remocin. Una ruta alternativa es la utilizacin de esos
metales como fuente de alimento, en algunos casos (hierro, cobalto zinc) y dependiendo de las
concentraciones de estos metales, quienes son metabolizados por los micro-organismos y as
separados del medio ambiente.
En este estudio se utilizar el alga Chlorella sp. quien ha demostrado sea fin a muchos metales
polivalentes como (Cu2+, Pb2+, Cr6+, Zn2+, etc.) [9] dando como resultado la eliminacin de estos
metales pesados del medio ambiente. En funcin de lo anterior se plantea la remocin de los
iones Pb2+ y Zn2+ por medio de biomasa algal de Chlorella sp. Viva, no viva, pre-tratada
qumicamente e inmovilizada.
4. OBJETIVOS
usando la microalga
5. MARCO DE REFERENCIA
El trmino metal pesado, a pesar de ser ampliamente utilizado entre los profesionales y
cientficos, no tiene una base cientfica rigurosa o una definicin qumica. Aunque muchos de los
elementos que se enlistan en este trmino, tienen una gravedad especfica mayor que cinco,
existen diversas excepciones a esta regla [1].
Estrictamente, y desde el punto de vista qumico, los metales pesados estn constituidos por
elementos de transicin y post-transicin incluyendo algunos metaloides como el arsnico y
selenio. Estos elementos tienen una gravedad especfica significativamente superior a la del
sodio, calcio, y otros metales ligeros. Por otro lado, estas sustancias se presentan en diferentes
estados de oxidacin en agua, aire y suelo. Adems presentan diversos grados de reactividad,
carga inica y solubilidad en agua [1].
Una forma opcional de nombrar a este grupo es como elementos txicos, los cuales, de acuerdo
a la lista de contaminantes prioritarios de la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados
Unidos (EPA), incluyen a los siguientes elementos: arsnico, cromo, cobalto, nquel, cobre, zinc,
plata, cadmio, mercurio, titanio, selenio y plomo [1].
Los metales pesados se encuentran en forma natural en la corteza terrestre. Estos se pueden
convertir en contaminantes si su distribucin en el ambiente se altera mediante actividades
humanas. En general esto puede ocurrir durante la extraccin minera, el refinamiento de
productos mineros o por la liberacin al ambiente de efluentes industriales y emisiones
vehiculares. Por otro lado, la inadecuada disposicin de residuos metlicos tambin ha
ocasionado la contaminacin del suelo, agua superficial, subterrnea y de ambientes acuticos
[1].
Tanto las fuentes naturales como antropognicas pueden contribuir importantemente a la emisin
de elementos metlicos a la atmsfera. Cabe sealar que al comparar las emisiones globales, la
emisin de elementos como selenio, mercurio y manganeso se realizan en su mayora por fuentes
naturales; sin embargo, en el plano regional las fuentes antropognicas pueden contribuir de
manera importante y estos metales se convierten en contaminantes en la escala local [1].
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5.1. Plomo
Las intoxicaciones ocasionadas por plomo, conocidas desde la antigedad, se han debido al
consumo de bebidas contaminadas por este metal, principalmente de fabricacin clandestina,
como el vino. Ms comn, sobre todo en pases en desarrollo, es la intoxicacin provocada por el
consumo de alimentos preparados o almacenados en recipientes de barro vidriado de los cuales se
desprende plomo [1].
En las zonas urbanas con intenso trfico vehicular, la principal fuente de exposicin al plomo
resulta de la inhalacin de partculas extremadamente pequeas que persisten en el aire durante
algunas semanas antes de sedimentarse y que son emitidas por los autotransportes que consumen
gasolinas que contienen tetraetilo de plomo. Se ha visto que el plomo es el principal
contaminante metlico en la atmsfera. En los pases en los cuales se han empleado pinturas de
interiores conteniendo xidos de plomo, es comn la intoxicacin de nios al ingerir la pintura
descascarada [1].
La evidencia epidemiolgica muestra que puede ocurrir la inhibicin de enzimas involucradas en
la sntesis del grupo hemo de la hemoglobina, como la delta aminolevulnico deshidratasa a
concentraciones entre 30 y 40 g/100 mL de sangre, aun cuando no se produzcan
manifestaciones clnicas. En tanto que la intoxicacin en adultos ocurre a concentraciones
superiores a los 80 g/100 ml de sangre [1].
La intoxicacin aguda se presenta acompaada de alteraciones digestivas, dolores epigstricos y
abdominales, vmitos, alteraciones renales y hepticas, convulsin y coma. En tanto que la
intoxicacin crnica puede involucrar neuropatas, debilidad y dolor muscular, fatiga, cefalea,
alteraciones del comportamiento, parestesias, alteraciones renales, aminoaciduria, hiperfosfaturia,
glucosuria, nefritis crnica, encefalopata, irritabilidad, temblor, alucinaciones con prdida de
memoria, clicos, alteraciones hepticas, entre otros. No obstante todo lo anterior, la intoxicacin
con plomo es prevenible [1].
Para la biota, incluido el ser humano, el plomo es un elemento no esencial y potencialmente
nocivo. Cuando este metal alcanza niveles txicos provoca la disminucin de la fotosntesis
vegetal y el desarrollo de anemia en mamferos. En las plantas adems del efecto ya mencionado,
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Actualmente la mayor parte del zinc producido se emplea en la galvanizacin del hierro y acero,
as como en la manufacturacin del latn. Los objetos galvanizados (alambres, clavos, lminas,
etc.) se emplean en la industria del automvil, la construccin, equipamientos de oficinas y
utensilios de cocina, etc. Tambin se utilizan grandes cantidades de zinc en la obtencin de
aleaciones, y en polvo se utiliza como agente reductor. Dentro de los compuestos, el xido de
zinc es el ms importante cualitativo y cuantitativamente [2].
Existen ciertos trabajos que indican el posible desarrollo de alteraciones como consecuencia de la
ingestin de dosis moderadamente elevadas durante perodos de tiempo ms o menos largos. Se
ha demostrado como en hombres, un elevado consumo de suplementos de zinc produce un riesgo
significativamente mayor de cncer avanzado de prstata, as como la inhibicin de los efectos
beneficiosos de los biofosfonatos, el incremento de los niveles de testosterona, incremento de
colesterol, reduccin de los niveles de HDL (High Density Lipoprotein Cholesterol) y puede
fomentar una disfuncin inmune [2].
Una suplementacin con zinc, especialmente en altas dosis, tambin puede producir otros efectos
adversos como interferir y disminuir el estatus corporal de cobre [2].
5.3. Algas
Las algas son microorganismos de agua dulce y salada, que pueden ser considerados como
plantas fotosintticas no vasculares que
Tradicionalmente, las algas formaban un grupo sistemtico que ha perdido precisin conforme se
iba progresando en el conocimiento de los organismos que inclua. El trmino alga se aplicaba a
todos los vegetales unicelulares (constituidos por una sola clula), cenobiales (constituidos por
varias clulas sin divisin entre s) y talfitos (no estructurados en raz, tallo y hojas) que viven
en aguas dulces o marinas, y que estaban provistos de pigmentos de asimilacin (euglenofceas,
crisofceas, pirrofceas, xantofceas, etc.). En la actualidad las algas se engloban dentro de los
Protistas. Para el estudio de los ficofitos nos referiremos preferentemente a aquellos en que
domina la pluricelularidad, es decir, las denominadas algas superiores o verdaderas, las algas
verdes, pardas y rojas (clorofceas, feofceas y rodofceas) [9].
Chlorella sp. (Figura 1a y b) es un gnero de algas verdes de unicelulares, del filo Chlorophyta.
Tiene forma esfrica, midiendo de 2 a 10 m de dimetro, y no posee flagelo. Chlorella contiene
los pigmentos verdes fotosintetizadores clorofila-a y -b en su cloroplasto. A travs de la
fotosntesis se multiplica rpidamente, requiriendo slo dixido de carbono, agua, luz solar y
pequeas cantidades de minerales [8] [9].
El nombre Chlorella proviene del griego chloros: verde; y del sufijo diminutivo latino -ella:
"pequeo" [8].
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6. METODOLOGIA.
La temperatura de los cultivos ser la del ambiente, se realizan lecturas, por lo menos 3 veces
al da con la ayuda de un termmetro manual. A los cultivos se les inducir aireacin con el
objeto de mantenerlos agitados y proporcionarles un mejor crecimiento [9].
6.2. CONTEO CELULAR.
Del cultivo madre (cultivo de alta densidad celular) se tomaran alcuotas de 1 ml las cuales
sern diluidas. Luego estas sern sometidas a conteo directo al microscopio en una cmara
Neubauer (0.1 mm de profundidad) para obtener la densidad celular de las alcuotas diluidas y
tambin se les medirn la absorbancia a 647 nm a cada una para obtener la densidad ptica
(D.O.). Teniendo estos datos se proceder hacer una curva de calibracin que relacion D.O.
(absorbancia) con la densidad celular (cel/ml) [9].
6.3. SEPARACIN DE LA BIOMASA.
Despus de 15 das de crecimiento del cultivo, la microalga se separar por centrifugacin a una
velocidad de 3000 rpm por 7 minutos. La biomasa se lavar con agua desionizada para disolver
cualquier tipo de sal presente en exceso [9].
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La biomasa se secar a una temperatura 60-80 C por 14 h, una vez seca se pulverizar en un
mortero y se pesa para determinar el porcentaje de rendimiento [9].
6.4. DETERMINACIN DE LA ISOTERMA DE EQUILIBRIO DE LA BIOMASA
MUERTA EN SUSPENSIN.
El experimento se realizar en beackers de 100 mL, colocando 50 mg de biomasa en 25 mL de
solucin metlica de concentracin inicial conocida. La suspensin se mezclar con un agitador
rotatorio a 60 Hz por noventa minutos a temperatura ambiente. El pH inicial de las soluciones se
ajusta con NaOH y HNO3
biomasa con
mantengan en un valor de 5. Luego se lavar la biomasa varias veces para remover el exceso de
cloruro de calcio sobre ella. Despus del lavado, la biomasa se secar a 80C durante 24 horas
[5] [6] [9].
Se cultivar el alga de la misma manera que se har un cultivo normal en presencia y ausencia de
nutrientes. El volumen final ser de 300 mL, el cual contendr 0.1 de absorbancia en Chlorella
sp. medio de cultivo 4 mM de nitrgeno (presencia de nutrientes) y las mismas concentraciones
de plomo y zinc que se usaron en los ensayos en suspensin. Al final del crecimiento se filtrar y
el sobrenadamente se analizar por Absorcin Atmica. Todos los ensayos se realizaran por
duplicado.
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6.10.
6.12.
EQUILIBRIO.
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7. CRONOGRAMA
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8. PRESUPUESTO
Materiales
Justificacin
Vidriera
100000
Reactivos y solventes
382800
TOTAL
(miles de $)
482800
Tipo de servicio
Anlisis espectroscpicos
Justificacin
Caracterizacin de los productos finales de las
Valor
(miles de $)
185000
reacciones
TOTAL
185000
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9. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
22(1):101-107.
[4] HIDESHI SEKI AND AKIRA SUZUKI. Biosorption of Heavy Metal Ions to Brown Algae,
Macrocystis pyrifera, Kjellmaniella crassiforia, and Undaria pinnatifida. Journal of colloid and
interface science 206, 297301 (1998).
[5] ZHEN CHEN, WEI MA, MEI HAN.; Bioadsorcin de nquel y cobre sobre alga tratada
(Undaria
pinnatifida):
Aplicacin
de
modelos
cinticos
isotrmicos
de
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%26hl%3Des-419%26biw%3D1600%26bih%3D771%26prmd%3Dimvns&sa=X&ei=6zZUPOkKLSA0AGkuIFo&ved=0CEUQ7gEwBw
[9] GISELA E. ARROYO MUNIVE, YANCE R. PEA MEJIA. Remocin de plomo en
solucin acuosa por medio de chlorella sp. en suspensin, pretratada e inmovilizada. Tesis de
grado 2002.
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