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METABOLISMO MICROBIANO
MICROBIOLOGA DE LOS
PROCESOS DE TRATAMIENTO
DE AGUAS RESIDUALES
Mara Cecilia Escobar
METABOLISMO MICROBIANO
Conjunto ordenado de reacciones qumicas
que tienen lugar dentro de una clula
microbiana.
En este conjunto ordenado de reacciones qumicas, tienen un
papel muy importante unas molculas llamadas enzimas, todas las
enzimas son protenas, por lo tanto empezaremos con una
introduccin general al tema de protenas y enzimas para abordar
el tema de metabolismo.
PROTENAS
Las protenas desempean papeles cruciales en
prcticamente todos los procesos biolgicos, un
procariote contiene aproximadamente 1850 clases
diferentes de protenas.
Funciones de las protenas:
Estructural:
Forman parte integral de
la estructura de las
membranas, paredes
celulares y componentes
citoplasmticos
Transporte:
Hemoglobina para transportar oxgeno en la
sangre.
Protenas de transporte a travs de membranas.
Protenas de superficie celular:
Protenas receptoras.
Protenas de defensa:
Los anticuerpos son protenas que el sistema
Inmunolgico produce en respuesta a la presencia
de una sustancia extraa en el organismo.
Protenas de reserva en las semillas de plantas.
Protenas con funciones enzimticas o catalticas.
NH2
OH
Grupo
Carboxilo
Grupo amino
H2O
R1
R1
Enlace peptdico
O
H2N
H3C
CH3
Valina (Val)
CH3
Alanina
(Ala)
OH
CH2
OH
Serina (Ser)
OH
La unin de 2 aminocidos
Forman un Dipptido
La unin de 3 aminocidos
Forman un Tripptido
Forman un
Polipptido
CATALIZADOR
Sustancia que sirve para bajar la energa libre de
activacin de una reaccin.
Incrementa la velocidad de una reaccin.
ENZIMA
E + S
E-S
Complejo enzima-sustrato
unin en el centro activo de
la enzima
E + P
Extracelulares o
exoenzimas
Coenzima
molcula orgnica
(vitaminas)
Cofactor
In metlico
(Mg, Mn, Fe, Zn etc)
Holoenzima
activa
3. pH
Los cambios de pH afectan el
grado de ionizacin de los
residuos amino, carboxilos y otros
tipos ionizables de una protena.
En los sitios activos de la mayora
de las enzimas se pueden encontrar
residuos de aminocidos ionizables
que pueden tener la funcin de
mantener la conformacin de las
protenas.
No todas las enzimas tienen
una actividad ptima al mismo
pH.
4. Temperatura
Enzimas
constitutivas
Enzimas
adaptativas
o
inducidas
Inhibidores reversibles:
Se asocian de manera transitoria a la enzima, en donde
los grupos funcionales de la enzima no se modifican,
puede ser de dos tipos:
1. Competitiva: El inhibidor compite con el sustrato por el sitio
activo de la enzima, puede revertirse la inhibicin
incrementando la concentracin del sustrato
Reaccin cataltica
Transferasas
Hidrolasas
Liasas
Isomerasas
Ligasas
HOCH
CH2OPO3H2
H
C
Aldolasa
HCOH
HCOH
CH2OH
CH2OPO3H2
HCOH
CH2OPO3H2
Fructosa 1,6 bifosfato
Fosfato de
dihidroxiacetona
Gliceraldehdo 3
fosfato
HCOH
+ NAD+ + H3PO4
CH2OPO3H2
Gliceraldehdo 3
fosfato
C
Gliceraldehdo
3 fosfato
deshidrogenasa
+ NADH + H
HCOH
CH2OPO3H2
Acido 1,3
difosfoglicrico
1. CATABOLISMO O PROCESO DE
RESPIRACIN
Proceso mediante el cual una clula degrada o descompone
los sustratos o nutrientes presentes en el medio en sustancias
mas simples, durante este proceso LIBERA la ENERGA
almacenada en dichos nutrientes y la utiliza en procesos
celulares tales como: movimiento, transporte de molculas
hacia el interior o hacia el exterior de la clula y procesos de
ANABOLISMO.
2. ANABOLISMO
Proceso mediante el cual una clula se construye a partir de
nutrientes simples tomados del medio exterior, dando como
resultado la BIOSNTESIS qumica de nuevo material celular.
Es un proceso que requiere Energa (generalmente en forma
de ATP).
Molculas pequeas + ATP
Componentes
celulares:
polisacridos, cidos
nuclicos, protenas,
lpidos etc.
TRANSPORTADORES DE ENERGIA
La energa liberada luego de las reacciones de catabolismo se
conserva en diferentes compuestos como energa qumica para ser
utilizada en las diferentes funciones celulares.
NH2
Adenina
CH
HC
O
O P O
O
P O P
O
Unidad trifosfato
C N
C N
OCH2
HO
OH
Ribosa
NH2
C
ATP + H2O
ADP + Pi + H+
Unidad difosfato
C N
O P O P
C N
CH
HC
O
Adenina
OCH2
H
H
H
HO
OH
Ribosa
NH2
ATP + H2O
AMP + P Pi + H+
CH
HC
O
O P
O
Adenina
C N
C N
OCH2
H
Unidad monofosfato HO
H
H
OH
Ribosa
2. Guanosin trifosfato
(GTP)
3. cido 1,3-difosfoglicrido
4. Acetil fosfato
5. cido fosfoenolpirvico
(PEP)
2 + 2H+
Donador de electrones
sustancia oxidada
H2 + O
O2 + 2 + 2H+
Aceptor de electrones
sustancia reducida
H2O
H2O
FAD/FADH
NAD/NADH
NADP/NADPH
PROCESOS DE CATABOLISMO
EN LA RESPIRACIN
AEROBICA
CATABOLISMO DE POLISACRIDOS
La gluclisis, ruta
metablica comn a
todos los organismos
Ciclo de Krebs o
Ciclo del cido
tricarboxlico
(ATC)
Sustancia reducida
Cadena de transporte
de electrones
Sustancia oxidada
NAD+
NADH2
ATP
ADP + P
Flavoprotena
FMNH2
FMN
FADH2
FAD
CoQ
Secuencia de reacciones de
oxidacin-reduccin para la
generacin de ATP por
Fosforilacin oxidativa
Coenzima Q
CoQH2
Citocromo b-
Fe+3
H+
Fe+2
ADP + P
ATP
Fe+3
Citocromo c1-
Citocromo c-
Fe+2
Fe+2
Fe+3
Fe+3
Citocromo a-/a3
Fe+2
ADP + P
ATP
H2O
O2
Enzimas
CATABOLISMO DE LIPIDOS
Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas, la mayora
biomolculas, compuestas principalmente por carbono e hidrgeno
y en menor medida oxgeno, aunque tambin pueden contener
fsforo, azufre y nitrgeno. Los lpidos mas abundante son las
grasas, que pueden ser de origen animal o vegetal, cumplen
funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de
reserva energtica (triglicridos), la estructural (fosfolpidos de las
bicapas) y la reguladora (esteroides).
Alimentos ricos en grasas: Aceites, Mantequilla, Margarinas, Grasa,
Carnes y sus derivados, Hamburguesas elaboradas fuera del hogar,
Quesos sobre todo si son maduros, Leche entera, Yogur entero, Huevo,
Salsas como mayonesa, ktchup, Snacks, Galletas.
cido graso
CH2
CH2
C O
CH
CH2
cido graso
CH2
CH2
(CH2)n
CH3
CH2
CH2
(CH2)n
CH3
O
O
cido graso
Glicerol
Glicerol
Glicerol
quinasa
+
ATP
ADP
+
Mg+2
Glicerol3 fosfato
NAD
+
Glicerol
3 fosfato
Glicerol
fosfato
deshidro
genasa
NADH2
+
Fosfato de
dihidroxi
acetona
(DHAP)
H3C
(CH2)n
CH2
COOH
CH2
cidos grasos
O
H3C
(CH2)n
CH2
CoA
CH2
H3C
(CH2)n
CH
CoA
CH
O
H3C
H3C
H3C
(CH2)n
CHOH
(CH2)n
(CH2)n
CoA
CH2
O
CH2
CoA
CoA + H3C
-Oxidacin de los
CoA
Acetil-CoA
En resumen:
Las molculas de Glicerol entran a la va ATC por Glicerol 3-fostato
y/o fosfato de dihidroxiacetona para sufrir posteriores oxidaciones.
Los cidos grasos entran a la va ATC por Acetil CoA para sufrir
posteriores oxidaciones.
cidos
grasos
Glicerol
CATABOLISMO DE PROTENAS
Protenas
proteasas
Cadena
lateral
Carbono
Pptidos
H
NH2
peptidasas
OH
Aminocidos
Grupo
Carboxilo
Grupo amino
Otros
aminocidos
de ms de
3C
Ciclo de Krebs o
Ciclo del cido
tricarboxlico (ATC)
O2
SINTESIS
NITROGENO ORGNICO
BIOMASA
LISIS Y AUTOOXIDACIN
Nitritos
(NO-2)
O2
Nitratos
(NO-3)
EFLUENTE
DESNITRIFICACIN
ACTIVIDAD BACTERIAL
NITROGENO
GASEOSO( N2
C6H12O6
azcar
6O2 =
CH2COO(CH2)2(CH2)nCH3
H3C(CH2)n(CH2)2COOCH
lpido
CH2COO(CH2)2(CH2)nCH3
Grupo bacterianos
Bacterias
desnitrificantes
Bacterias
reductoras
de azufre
Bacterias
Metanognicas
(grupo principal
de Archaea)
y bacterias
Acetognicas
Reduccin del
hierro frrico
N2O, NO, N2
Aceptor de electrones
SO42-
SH2
Aceptor de electrones
4H2 + H+ + HCO3
CH4 + 3 H2O
Aceptor de electrones
CH3COO- + 4 H2O
4H2+H++HCO3
Comentarios
Estas bacterias cumplen un papel bien
importante en el ciclo del Nitrgeno en
suelos y aguas. Como los productos de
la desnitrificacin son todos gaseosos
se pierden con facilidad del medio, por
ello este proceso se llama
desnitrificacin.
La actividad volcnica es una fuente
importante de compuestos azufrados
Estas bacterias utilizan donadores de
electrones tanto orgnicos como
inorgnicos, los mas comunes: H2,
lactato y piruvato
Muchas de estas bacterias utilizan H2
como fuente de energa (donador de
electrones), pero los productos finales
son diferentes
Aceptor de electrones
Fe 3+
Fe 2+
Aceptor de electrones
CAH4
EJEMPLO DE UN PROCESO
METABOLICO ANAEROBIO
BACTERIAS ACETOGNICAS:
SO42-
Bacterias reductoras
de sulfatos
H2S
Bacterias formadoras
de metano
CH4
Desulfovibrio sp.
Desulfomarculum sp.
Desulfobulbus
1. Temperatura
2. Tiempo de retencin hidrulica
3. pH
4. Composicin del desperdicio
5. Competencia entre bacterias presentes en el reactor.
6. Compuestos txicos: oxgeno, amonaco, solventes clorados,
benceno, formaldehdo, cidos voltiles, etc.
Potenciales de reduccin de
algunos pares de xido-reduccin
Par xido-reductor
SO42- / HSO32H+ / H2
S2O32- / HS- + HSO3Ferredoxin ox / red
NAD+/NADH
(o NADP+/NADPH)
Citocromo c3 ox /red
CO2 / acetato
So /HSCO2 / CH4
SO42- / HSPiruvato- / LactatoHSO3- / HSFumarato2- / succinato2Citocromo b ox /red
Ubiquinona ox /red
Citocromo c1 ox /red
NO2- / NO
Citocromo a3 ox / red
NO3- / NO2Fe3+ / Fe2+
O2 / H2O
N2O / N2
Eo(V)
-0.52
-0.41
-0.40
-0.39
-0.32
-0.29
-0.29
-0.27
-0.24
-0.22
-0.19
-0.11
+0.033
+0.035
+0.115
+0.23
+0.36
+0.385
+0.43
+0.77
+0.82
+1.36
Ejemplo de un proceso de
fermentacin en donde el acido
pirvico (que hace parte de la
ruta metablica) acta como
aceptor de electrones.
HOOC-CH2-CH2-COOH (C4H6O4)
cido succnico
cido actico
+ cido frmico
cido pirvico
(CH3COOH)
CH-C-CH (C3H6O)
Acetona
Alcohol etlico
(C2H5OH)
(HCOOH)
Acetaldehdo
cido frmico
cido actico
CO2
(CH3COOH)
cido actico
H2
RESPIRACION ANAEROBICA
materia
orgnica
CH
CH4 + CO2 + H2 + NH3 + H2S +H2O +ATP
QUIMIOLITOTROFIA
La mayor parte de las bacterias quimiolitotrofas son capaces
de obtener todo su carbono del CO2 empleando el ciclo de Calvin
y por consiguiente son tambin autotrofos.
Existen muchas fuentes potenciales de donadores inorgnicos de
electrones: fuentes geolgicas y biolgicas, la actividad volcnica,
operaciones agrcolas y mineras, la degradacin de combustibles
fsiles y la acumulacin de desechos industriales
Cada grupo fisiolgico de quimiolitotrofos, como lo muestra el
siguiente cuadro, usa un tipo diferente de donador de electrones
inorgnico:
Grupo de bacterias
Fuente de Energa
(donador de electrones)
Comentarios
Cuando crecen con CO2 (autotrofos):
6H2 + 2 O2 + CO2
Bacterias
oxidantes
de hidrgeno
H2
Bacterias incoloras
del azufre
material celular
SO42- + 2H+
H2S + 2O2
HS + O2 + H+
S+ H2O
S+ H2O + O2
SO42- + 2H+
SO42-+ 2H+
Bacterias oxidantes
del hierro
Bacterias oxidantes
de amonaco y
nitritos
en agua
NH3
NO2-
(CH2O) + 5H2O
NO3-
REACCIONES ANABOLICAS
Porcentaje de
peso seco
Molculas/clula
Clases diferentes
Total macromolculas
96
24,610,000
~2500
Protenas
55
2,350,000
~1850
Polisacridos
4,300
Lpidos
DNA
9.1
3.1
22,000,000
2.1
4
1
RNA
20.5
255,500
Total monmeros
3.5
~350
Aminocidos y precursores
0.5
Azcares y precursores
~100
~50
Nucletidos
0.5
Iones inorgnicos
~660
~200
~18
Lpidos
Polisacridos
Protenas
FASE I
Hexosas
Pentosas
Acidos grasos
Glicerina
Aminocidos
Gliceraldehido 3-fosfato
Fosfoenolpirvato
FASE II
.Pirvico
Acetil CoA
Acido Ctrico
A. Oxaloactico
Acido Mlico
Ciclo de los
cidos
tricarboxlicos
Acido Isoctrico
Acido
- cetoglutrico
Acido Fumrico
Acido Succnico
CO2
Succinil
CoA
FASE III
MICROBIOLOGA DE LOS
PROCESOS DE TRATAMIENTO
DE AGUAS RESIDUALES
Niveles de Tratamiento
de las Aguas Residuales
Tratamientos
primarios
Tratamientos preliminares
Tratamientos
secundarios
Lodos
activados
Sedimentador
secundario
Sedimentacin
primaria
Rejillas
Flotacin
Tanque bombeo Medidor
igualacin
flujo
Coagulacin
qumica
Remocin
material grueso
Lagunas
oxidacin
Lodos
Desarenador
Zanjas de
oxidacin
Influente
Tanques
imhoff
Efluente
Biodiscos
Tratamientos terciarios
Remocin Nitrgeno
Remocin Fsforo
Relleno sanitario
Fertilizante
Disposicin final
Incineracin
Deshidratacin
Digestin
Concentracin
Efluente clarificado
Filtros
percoladores
Procesos Biolgicos:
En los procesos biolgicos los compuestos orgnicos presentes en las aguas
residuales (AR) son degradados por diferentes microorganismos (bacterias,
hongos, protozoos, rotferos etc.) en igual forma que ocurrira en una
corriente receptora, estos microorganismos entran en estrecho contacto con la
materia orgnica la cual es utilizada como su alimento, convirtindola en
CO2, H2O y nuevo material celular
Un tratamiento secundario remueve aproximadamente 85% de la DBO y segn
el diseo y operacin proyectado tambin se pueden remover cantidades
significativas de nitrgeno, fsforo, DQO y bacterias patgenas
Los principales
procesos de
este tipo
Reactores de
medio
suspendido
Reactores de
lecho fijo
Lodos activados
Lagunas de oxidacin
Filtros percoladores
Biodiscos
PROCESOS BIOLGICOS
UTILIZANDO REACTORES
EN MEDIO SUSPENDIDO
LODOS ACTIVADOS
Tratamientos
terciarios
Desecho
Lodo
orgnico + activado + O2
(COHNPS)
Lodo activado
incrementado
1 Biosntesis
2 Biodegradacin
En el tanque de aireacin
Las bacterias utilizan el oxgeno
suministrado artificialmente para
oxidar los compuestos orgnicos e
inorgnicos que a su vez son
utilizados para su crecimiento
Corynebacterium
Comamonas
Brevibacterium
Acinetobacter
Bacterias filamentosas
(Sphaerotilus, Beggiatoa)
Cianobacterias
HONGOS
Los lodos activados usualmente no favorecen el crecimiento
de hongos
Sin embargo se ha observado ocasionalmente la presencia
de hongos filamentosos
Los hongos crecen abundantemente bajo condiciones de
pH bajo.
Los gneros predominantes:
Geotrichum (especie candidum)
Penicillium
Cephalosporium
Cladosporium
Alternaria
En el sedimentador secundario
Se da la separacin del lodo formado en el tanque de
aireacin, del efluente tratado.
Parte del lodo es reciclado al tanque de aireacin y el
lodo restante es transferido a un digestor aerbico o
anaerbico para su estabilizacin o tratamiento.
La densidad de las clulas microbianas presentes en los
floc es suficiente para que se sedimenten en el fondo del
tanque.
Selectores biolgicos
Tanques o compartimentos en los cuales ciertos parmetros son
manipulados para inhibir el crecimiento de filamentosas luego
se mezclan con el agua a tratar.
Control biolgico
Se usa principalmente bacterias y actinomycetos que tengan
actividad ltica o ingieran las filamentosas.
Lodo flotante o
de poco peso
BACTERIAS
Eficiencia en la remocin de 80% a 99%
Son removidas por inactivacin, depredacin por protozoos,
adsorcin en los slidos del lodo y/o encapsulacin dentro del
Floc seguido de la sedimentacin.
VIRUS
Eficiencia en la remocin entre un 90-99%.
Son removidos por adsorcin o encapsulamiento con slidos del
lodo.
Por inactivacin por bacterias, algunas bacterias tienen actividad antiviral
Por ingestin por protozoos y nematodos.
PROTOZOOS Y HELMINTOS
Eficiencia en la remocin mayor del 8%.
Los quistes de protozoos son atrapados en los floc del lodo.
Los huevos de helmintos son removidos por sedimentacin.
LAGUNAS DE ESTABILIZACIN
O LAGUNAS DE OXIDACIN
Radiacin
solar
Vientos
CO2
Carbono
Inorgnico
NyP
O2
CH4
Fotosntesis
Nuevas algas
Afluente con materia
orgnica
Slidos orgnicos
Solubles N,P
Slidos
sedimentables
O2
Slidos
CO2
Algas
CO2, NH3, PO4,H2O
Bacterias
Nuevas
bacterias
Efluente
Slidos
CH4, H2S, NH3, CO2
Descomposicin anaerobia
Ventajas
Desventajas
La concentracin de slidos
suspendidos es alta (100 mg/L),
obliga a implementar mtodos
La remocin de DBO es muy de remocin (lechos de arena etc)
buena
Se limita a regiones donde hay
Es un mtodo econmico y de suficiente tierra disponible
PROCESOS BIOLGICOS
UTILIZANDO REACTORES
EN MEDIO FIJO
FILTROS PERCOLADORES
Agua residual
1.0 a 2.5
m de
profun
didad
10 rpm
Lecho de piedra
Clarificador 2rio
Recirculacin
Relleno
sanitario
Fertilizante
Disposicin
final
Incineracin
Deshidratacin
Digestin
Concentracin
Digestor
anaerobio
Bacterias:
Zooglea
Pseudomonas
Flavobacterium
Alcalgenes
Bacillus
Achromobacter
Nitrosomonas
Nitrobacter
(Sphaerotilus, Beggiatoa)
Cianobacterias
Hongos:
Predominan bajo condiciones de pH bajo, como el que
presentan algunos desechos industriales cidos.
Los principales grupos son:
Geotrichum , Penicillium, Fusarium
Aspergillus, Mucor, levaduras
Algas:
Producen oxgeno y algunas especies de algas verdeazules
pueden fijar Nitrgeno. Contrario a un Proceso por Lodos
Activados, las algas y hongos son componentes importantes
del biofilm en los filtros percoladores.
Protozoos y rotferos :
Estos organismos eucarioticos unicelulares se alimentan de
bacterias del biofilm, lo que ayuda a equilibrar la tasa de
reproduccin. Los principales son: flagelados, ciliados,
amebas.
Macroinvertebrados :
Los principales: nemtodos, lombrices, larvas de insectos,
Estos organismos se alimentan del biofilm y ayudan a controlar
su espesor para evitar el taponamiento del filtro por
exopolmeros microbianos.
Sin mebargo cuando las larvas son adultos se convierten en una
molestia para su control por parte de los operadores
BIODISCOS
1-2 rpm
30-40 cm
1-2 cm (espesor)
40% sumergidos
Relleno
sanitario
Fertilizante
Disposicin
final
Incineracin
Deshidratacin
Digestin
Concentracin
Digestor
anaerobio
DISPOSICIN DE LODOS
Criba
Tanque
Sedimentador 1rio
Tanque
aireacin
Corriente
receptora
Tanque
Sedimentador 2rio
Afluente
Efluente
Tratamientos
terciarios
Exceso
de lodo
Relleno
sanitario
Fertilizante
Disposicin
final
Incineracin
Deshidratacin
Digestin
Concentracin
Digestor
anaerobio
Protena animal
Nitrgeno orgnico
Alimento
Nitrgeno atmosfrico
N2
NH2
Protena vegetal
Nitrgeno orgnico
Fertilizacin
Biomasa microbiana
Nitritos
2NH3 + 3/2 O2
NO2- + H2O + H+
Nitrosomonas
Asimilacin
Bacterias simbiticas y
no simbiticas y algas
Hidrlisis
Descomposicin
biolgica
R - CH - COOH + NH4
NH3/NH4
amonaco/amonio
Fijacin de nitrgeno
Orina - urea
Materia fecal
Nitrgeno orgnico
NH2
R - CH - COOH + O2
Bacterias y hongos
Amonificacin o mineralizacin
Hemoglobina (Fe+) + O2
Oxihemoglobina
Metahemoglobina
Baja afinidad por O2
(sndrome del beb azul)