Resumen

Histricamente, Lewis complejos de coordinacin cidos metlicos ha

jugado un papel giratorio y definitivo en el amplio campo de reconocimiento
molecular y ms expresamente en el sentir y el secuestro de especie
biolgicamente relevante aninica. Ms recientemente, con el inters que se
ampla a la biologa qumica, hubo un resurgimiento en el empleo de
complejos de coordinacin, expresamente, por su uso como la teraputica
medicinal y chemo/biosensors. De la interrupcin de interacciones de
protena de protena oncogenic al sentir fluorescente de PTP1B phosphatase
la actividad de enzima, la potencia poderosa obligatoria de complejos de
coordinacin ha sido enjaezada al gran efecto. El ingenio de los ligandos de
coordinacin racionalmente diseados ha facilitado la diversidad de papeles
jugados por complejos de metal de Lewis. Aqu, repasaremos los avances
recientes en el uso de complejos de coordinacin en papeles medicinales y
chemo/biosensory durante la dcada pasada. En particular, esta revisin
enfocar Cu (II) y Zn (II) complejos de coordinacin.
2. Zn (II) y Cu (II) complejos de coordinacin como protena y pptido
biosensors.
2.1. Zn Fluorescente (II) - complejos de coordinacin en usos biosensory
La incorporacin tanto fluorophores orgnico como inorgnico en andamios
de reconocimiento moleculares se ha hecho un rasgo de diseo estndar de
sistemas de deteccin biosensory [41-46]. En la dcada pasada, una pltora
de Zn fluorescentemente etiquetado (II) complejos de coordinacin han sido
sintetizados y usados para el pptido selectivo y la protena biosensing. Un
cuerpo significativo de este trabajo ha sido conducido por Hamachi y
colegas.
2.1.1. deteccin fluorescente de (i, i + n) bis-fosforilada secuencias de
fosfopptidos.
Despus de los estudios seminales pyrophosphate fluorescenteschemosensor de Vance y Czarnik [47], Hamachi y colegas mostr que
anthracene-etiquet Zn (II)-dipicolylamine (DPA) 1 y Zn (II) 2bisdipicolylamine (BDPA) 2 chemosensors, sidos capaz de con criterio
selectivo atar phosphopeptides polianinico en relacin con pptidos
nonphosphorylated en condiciones fisiolgicas (el Higo 2A) [48]. Hamachi et
al. mostr que la unin del receptor a la fosforilada pptido aument la
intensidad de fluorescencia de la antraceno fluorforo (Fig. 2B (A)). Esto se
atribuy a una disminucin de carcter catinico parcial de las piridinas
flanqueantes de el ligando DPA, y una reduccin correspondiente en la fotoinducida de electrones (PET) de enfriamiento del antraceno fluorforo de
estado excitado [48]. La correspondencia non-phosphorylated tyrosine el
conteniendo de secuencias fue mostrada para conferir cambios
insignificantes de la fluorescencia. En un estudio subsecuente, Hamachi y
colegas demostr que este acercamiento satisfactoriamente podra ser
aplicado a la supervisin de protena tyrosine phosphatase 1B (PTP1B) cataliz acontecimientos dephosphorylation por va de fluorescentemente el
sentir el estado de phosphorylation de acuerdo general EGFR secuencias de
pptido (DADE-pY-LIPNNG (988-998 fragmento de EGFR)) sabido para actuar

como sustratos para phosphatases (el Higo 2B (B)) [49]. Adems, complejos
de coordinacin fluorescentes han sido empleados para con criterio
selectivo reconocer secuencias de pptido que contienen residuos
phosphotyrosine de proximidad (yo, yo + n) comparando con secuencias
mono-phosphorylated. La utilizacin de un ditopic Zn (II) sistema 2-BDPA,
donde el enlazador entre dos Zn (II) unidades-DPA puede fcilmente
modulado, Hamachi y colegas fue capaz cooperativamente ate (o ' el
eslabn enfadado ') dos residuos separados phosphorylated sobre una
secuencia sola, y confiera la especificidad de secuencia mayor (la estrategia
conceptual perfilada en el Higo 3A) [50]. Zn bivalente (II) estrategia 2-BDPA
'que une cruz' satisfactoriamente ha sido aplicado para con criterio selectivo
reconocer y atar medicinalmente importante otra!-phosphorylated
secuencias de pptido. Por ejemplo, Hamachi. Se desarroll fluorescente 2,2
-bipyridine uni Zn (II) 2-BDPA chemosensors (el Higo 3B) para doblemente
phosphorylated pptidos que usan tres diferente - pptidos helicoidales
modelos que contienen dos phosphorylated serine residuos [50]. En relacin
con su selectividad para los pptidos mono-fosforilado, Zn (II) 2-BDPA-5,5?
Receptores -bipyridine vinculados (ejemplo representativo 3, Fig. 3B) fueron
altamente selectiva para secuencias de pptidos bis-fosforilados con una
distancia interphosphate de ~ 10A, se aproxima a la distancia entre i y
residuos de la cadena i + 7 secundarios en?-hlices. En contraste, la
selectividad entre los pptidos fosforilados en el (i, i + 7) posiciones fue
moderada. Hamachi y compaeros de trabajo aplicados con xito su
estrategia de vinculacin cruzada con plomo Zn (II) 2-BDPA-5,5? -bipyridine
Compleja 3, contra una insulina bifosforilado (i, i + 7) quinasa del receptor
(IRK) pptido [50]. ? En apoyo de sus estudios de modelos, el Zn (II) 2-BDPA5,5 andamio -bipyridine 3 mostr una proporcin de 1: 1 de unin con la
secuencia de IRK, segn la evaluacin de cambios en la fluorescencia, y se
inform de que una excelente afinidad de 1,7 106M-1 de unin.
En un estudio similar, Hamachi y sus colaboradores desarrollaron un sensor
qumico fluorescente secuencia selectivo para (i, i + 1) pptidos
bifosforilado [51]. En este caso, el andamio rgida a base de estilbeno 4 (Fig.
3B (ii)) orienta dos Zn (II) restos de unin 2-DPA en una conformacin
adecuada para el reconocimiento adyacente fosforilada residuos de
aminocido. Pretenciosamente, los autores demostraron que este receptor
fue capaz de distinguir otra!-phosphorylated pptidos sobre la base del
pariente la proximidad de los dos grupos de fosfato. La afinidad constants,
como medido por un cambio de seal de fluorescencia de emisin dual, era
la ms alta para el (yo, yo + 1) otra!-phosphorylated el pptido Tau (400409), conteniendo un adorno pYpS, mientras afinidades para el (yo, yo + n)
otra!-phosphorylated el pptido, donde la n = 2-6, se disminuido con la
distancia creciente entre sitios de phosphorylation. De un modo alentador,
mono-phosphorylated pptidos no indujo un cambio del espectro
fluorescente del receptor [51]. En otro ejemplo, un diseo racional de Zn (II)
2-BDPA basados en receptores 5 se inform de atar y etiquetar de manera
no covalente de un pptido-bis fosforilada en el i e i + 4 posiciones [52].
Boron-dipyrromethene (BODIPY)-etiquetados Zn (II) 2-DPA se utilizan para
etiquetar selectivamente y detectar los ovillos neurofibrilares (NFTs) de
protenas tau hiperfosforilada, comnmente asociados con la enfermedad de
Alzheimer [53]. El compuesto 5 (que se muestra en la Fig. 3B (iii)),

compuestas por dos cadenas de Zn (II) unidades de 2-DPA atados a travs

de un enlazador fluorescente BODIPY, activar la visualizacin fluorescente
de los ONF (hiperfosforilada) en el tejido del hipocampo tomadas de
pacientes con enfermedad de Alzheimer, diferenciando entre NFTs y? placas
amiloide prevalentes (no fosforilada). Especfico para la i y i + 4 sitios bisfosforilacin, este mismo complejo se utiliz con xito para controlar la
actividad de la glucgeno sintasa quinasa 3? (GSK 3?), Una protena
implicada en la diabetes y la neurodegeneracin [54], para que tau es un
sustrato natural [52,55-57]. El secuestro de protenas naturales, endgenos
para los propsitos biosensoriales ha surgido como una estrategia
interesante para el desarrollo de sensores con un alto grado de selectividad
(modelo conceptual se ilustra en la Fig. 4A). Con este fin, Hamachi et al.
receptor desarrollada 6, compuesto de un Zn (II) -DPA complejo acoplado a
un grupo maleimida reactiva a travs de un enlazador stilbazole rgido (Fig.
4B). En un estudio de prueba de concepto, 6 se incorpor covalentemente
(a travs del grupo tiol de un residuo de cistena) en una fosfoprotena Pin1
WW dominio de unin, el suministro de este modo un biosensor hbrido
fluorescente capaz de distinguir entre varios fosfopptidos biolgicamente
relevantes (Fig. 5) [58].
2.1.2. Uso de Zn fluorescente (II) - complejos de coordinacin en pares de
etiqueta/sonda de pptido.
El etiquetaje selectivo de protenas en sistemas complicados biolgicos
generalmente requiere tanto etiqueta de pptido genticamente
incorporada en la protena, como una sonda complementaria molecular, por
lo general fluorescente, que es presentado exgenamente [60-64]. Aunque
varios pares de etiqueta/sonda de pptido satisfactoriamente hayan sido
desarrollados, como el Ni (II) cido/nitrilotriacetic (NTA) y sistemas
FLAG/ANTI-FLAG [62], hay disponibilidad limitada de pares capaces de
imagimtica de protena en tiempo real in vitro. Con el objetivo de
desarrollar un par de etiquetas / sonda ortogonal a los mtodos existentes
para la formacin de imgenes protena fluorescente, Hamachi y sus
colaboradores disearon un elegante sistema que utiliza la qumica de
coordinacin multivalente entre un genticamente codificable secuencia de
oligo-aspartato (etiqueta D4), elegido por sus numerosos metlica de
carboxilato Unin grupos, y una serie de correspondientes D4 de unin,
multinuclear (Zn (II) 2-BDPA) n basados en complejos de coordinacin (Cy5
marcado fluorescentemente, ejemplo 7, Fig. 6A) [65]. Con un objetivo de
desarrollar una etiqueta/sonda se aparean ortogonal a mtodos existentes
para la imagimtica de protena fluorescente, Hamachi y los colegas
disearon un sistema elegante que usa la qumica de coordinacin
multivalent entre un genticamente encodable oligo-aspartate la secuencia
(D4 la etiqueta), escogido para su numeroso metal carboxylate grupos
obligatorios, y una serie de corresponder la encuadernacin de D4,
multinuclear (Zn (II) 2-BDPA) complejos de coordinacin a base de n (Cy5fluorescentemente etiquetado, el ejemplo 7, el Higo 6A) [65].
Sintticamente, los autores prepararon una serie de ditopic Zn (II) complejos
2-BDPA unidos va una serie de aminocido y/o enlazadores fluorescentes
(cyanine 5 (Cy5)) y fluorescein isothiocyanate (FITC). De modo interesante,
las sondas

Conclusin
La dcada pasada ha visto una explosin de crecimiento en el uso de Zn (II)
y Cu (II) complejos en el campo de biologa qumica, expresamente en su
uso como instrumentos poderosos sensoriales as como aparicin la
teraputica medicinal para cnceres humanos y VIH. En esta revisin hemos
intentado demostrar la diversidad impresionante de usos en los cuales
complejos metlicos juegan un papel importante. Numerosos grupos de
investigacin han desarrollado complejos metlicos para una amplia
variedad de usos fluorescentes y luminiscentes biosensory, incluyendo el
etiquetaje de protena y el reconocimiento de pptido sequencespecific.
Adems, racionalmente diseado Zn (II) y Cu (II) complejos metlicos
satisfactoriamente han sido empleados para alcanzar efectos dirigidos
bioqumicos por el pptido proteolytic bondcleavage, la protena
denaturation y la estabilizacin de estados de protena inactivated. Los
complejos de coordinacin racionalmente diseados as ganan la traccin
como las clases alternativas de teraputica innovadora molecular. En
particular, su potencial para interrumpir interacciones de protena de
protena notoriamente difciles es sumamente atractivo, sobre todo
considerando el xito limitado alcanzado por pequeos accesos de molcula
hasta ahora. Mientras el biosensory y los papeles de qumica medicinales de
Zn (II) y Cu que (II) complejos todava desarrollan, el innovador y la tierra
que rompe el trabajo repasado aqu sugieren que los complejos de
coordinacin tengan un papel principal para jugar tanto en la qumica clnica
medicinal como en el reconocimiento biosensory molecular.