TIEMPO DE SANGRADO

Objetivo:
Al terminar la prctica el alumno ser capaz de:
1. reconocer la utilidad clnica de la medicin de sangrado
2. ejecutar correctamente la tcnica de tiempo de sangrado
3. conocer 2 tcnicas para la medicin del tiempo de sangrado
Introduccin:
Cuando existe una lesin vascular, por reflejo nervioso y espasmo muscular del vaso, sobreviene una contraccin del
mismo, fenmeno que dura segundos y tiene como finalidad lograr la estasis de la circulacin y favorece la formacin
del tapn plaquetario.
En lesiones de capilares, esta vasoconstriccin, refleja es suficiente para permitir la adhesin plaquetaria y la
detencin de la hemorragia.
El tapn hemosttico plaquetario primario es una masa de plaquetas que se acumulan en el punto lesionado de la
pared vascular, como resultado de su adherencia, al colgeno del tejido subendotelial que ha quedado expuesto
(adhesin) y luego entre s (cohesin y agregacin). Los tapones primarios son inestables y fcilmente eliminados.
Un tiempo de sangrado normal indica una retraccin normal de los capilares y la existencia de un nmero suficiente
de plaquetas, con actividad normal.
Fundamento:
Al realizar una puncin de tamao y profundidad estandarizados, la accin conjunta de los vasos y plaquetas
detendr el sangrado en un corto tiempo, el cual es medido y comparado con el normal.
Material y equipo:
Lancetas estriles
Torundas de algodn con alcohol (70%)
Papel filtro
Un Cronometro
Metodologa:
Mtodo de Duke:
1. selecciona uno de los lbulos de la oreja del paciente (que est libre de lesiones), dar un masaje suave (esto
favorece a la circulacin) hasta que la zona este tibia.
2. limpiar el lbulo de la oreja con una torunda de algodn con alcohol dejar secar la regin limpiada.
3. se hace una puncin con la lanceta en el sitio elegido, al mismo tiempo echar a andar el cronometro. La puncin
debe hacerse en un solo movimiento, y sin hacer movimientos laterales para no rasgar la piel.
4. sin tocar la piel ni comprimir se seca la vota de sangre que salga por el sitio de la puncin con papel filtro cada 15
segundos.
5. cuando el papel filtro ya no absorba sangre parar el cronometro.
6. anotar el tiempo.
Mtodo de Ivy:
1. Con un bahumanometro en el brazo del paciente, ejercer una presin de 40mm de Hg. Que se deber mantener
constante durante toda la prueba.
2. Buscar en el antebrazo una zona vascular.
3. Hacer la asepsia con una torunda impregnada con alcohol, dejar secar.
4. Con una lanceta estril y desechable, hacer una puncin de un solo golpe y sin hacer. rasgaduras laterales, echar
a andar el cronometro.
5. En el momento en que sale la gota de sangre, secar con el papel filtro sin tocar la piel.
6. Repetir esto cada 15 segundos hasta que el papel filtro no absorba sangre.
7. Anotar el tiempo.
Comentarios:
El tiempo de sangrado es una prueba de pantalla para los desrdenes cualitativos y cuantitativos de las plaquetas y
para la enfermedad de von willebrand, independientes de los mecanismos de coagulacin, aunque en los daos
severos de estos, tambin suele resultar prolongado.
El tiempo de sangrado anormal es evidente de defecto en la fase paquetera y/o en fase vascular.
Valores de referencia:
Mtodo de duke 1 a 3 minutos
Mtodo de IVY 2 a 6 minutos

TIEMPO DE COAGULACIN EN SANGRE TOTAL

Objetivo:
Al trmino de la prctica el alumno:
1. Ejecutar correctamente la determinacin del tiempo de coagulacin en sangre total por el mtodo de Lee-White y
mtodo capilar.
2. Identificara la utilidad diagnostica y las limitaciones de tiempo de coagulacin.
Introduccin:
A la transformacin de fibringeno en fibrina se le llama coagulacin, por que se pasa de un estado lquido
(fibringeno) a solido (fibrina).esta transformacin ocurre en 3 fases, en la primera se desarrolla actividad de
tromboplastina por acciones de factores de coagulacin en la sangre y por adicin de jugos y plasma tisulares. Los
sistemas sanguneos (intrnsecos) y tisulares (extrnsecos) son los responsables del desarrollo de la actividad de
tromboplastina, ambos funcionan en defensa fisiolgica de la hemostasia.
El sistema intrnseco. Se denomina as porque es iniciada a travs de estimulacin de factores aislados que se
encuentran en el propio plasma y cuyas reacciones culminan con la generacin de fibrina. Comienza con activacin
del factor XII que puede ser iniciado por mltiples actividades como colgena, fosfolpidos, liposacaridos, etc. El
factor XII tiene capacidad de activar otras molculas del factor VII y de precalicreina; con esto la reaccin se hace
expansiva. En presencia del calcio se activa el factor XI, con lo que continua el proceso. El factor XI activado en
presencia de calcio, acta sobre el factor IX activndolo, y junto con el factor 3 plaquetario, calcio y el factor VIII se
forma el complejo activador del factor X.
El sistema extrnseco: se inicia como respuesta a estimulacin extrnseca a la sangre, como la tromboplastina tisular.
Cuando la sangre entra en contacto con la tromboplastina tisular, el factor VII forma un complejo enzimtico con los
fosfolpidos tisulares. Mediante iones calcio y adquiere actividad enzimtica capaz de activar el factor X.
La segunda fase de coagulacin es la conversin de protrombina en trombina. Se inicia con el factor X activado por
cualquiera de los sistemas intrnseco y extrnseco, y con el factor V, factor 3 plaquetario y calcio integra otro complejo
que tiene accin sobre la trombina, por lo que acta sobre ella convirtindola en trombina
La tercera fase de la coagulacin sangunea es la conversin del fibringeno en fibrina por accin de la trombina.
Fundamento:
El tiempo necesario para que la primera sangre se coagule en tubo de crista es la medida de la actividad total des
sistema intrnseco de la coagulacin. La inspeccin peridica del coagulo permite la valoracin de las propiedades
fsicas del coagulo (tamao, aspecto y fuerza mecnica).
Metodologa:
Mtodo de Lee-White:
1. Colocar 3 tubos de 13 x100 mm en el bao mara a 37c.
2. Obtener 5 mililitros de sangre venosa por una puncin limpia y extrada con una jeringa de plstico. Con el mximo
cuidado de evitar que la sangre se espume
3. Colocar 1ml de sangre en cada tubo numerado del 1 al 3.
4. Poner en marcha el cronometro cuando la sangre entra en el tubo numero 1.
5. Cada 30 segundos se inclinan suavemente los tubos hasta que se vea un coagulo en uno de ellos; se para el
cronometro en ese momento y se calcula el tiempo.
Mtodo capilar:
1. Limpiar la zona de puncin con una torunda con alcohol (de preferencia el pulpejo del dedo anular).
2. Dejar que el alcohol seque.
3. Puncionar hasta la profundidad de 3 mm. Con una lanceta estril. Poner en marcha el cronometro.
4. Se desecha la primera gota de sangre, a continuacin se llena el capilar sin heparina hasta las dos terceras partes.
5. A partir del tercer minuto de la puncin, se invierte el capilar constantemente hasta observar que no haya
desplazamiento de la sangre. Si es necesario, se rompe el capilar para observar el tiempo en que se forman los hilos
de fibrina o en su efecto, tratar que una gota de la punta caiga sobre un papel, para poder observar si se observa un
hilo entre el capilar y el papel.
6. Si ya no hay desplazamiento o se observan los primeros hilos de fibrina, es el momento en que se detiene el
cronometro.
Comentarios:
El tiempo de coagulacin sangunea es una prueba muy poco sensible y nunca se debe utilizar como prueba
selectiva. Se usa a menudo para guiar a la teraputica heparinica, pero los resultados obtenidos son a menudo
inseguros, por esto son preferibles pruebas como el tiempo de tromboplastina parcial activa.
Valores de referencia:
Mtodo de Lee-White oscila 4 a 8 minutos.
Mtodo capilar de 3 a 5 minutos.

TIEMPO DE PROTROMBINA
Objetivo
Al trmino de la prctica, el alumno ser capaz de:
1. Describir y comprender el fundamento del mtodo
2. Ejecutar correctamente la prueba y la calibracin.
3. Identificar la utilidad clnica de la medicin del tiempo de protrombina.
Introduccin
La protrombina es una protena estable del tipo de globulinas alfa que contiene unos 18 aminocidos. Su
concentracin normal es la sangre es de aproximadamente de 20 Mg. Por 100 ml. En presencia de iones de calcio,
se transforma en trombina por la accin enzimtica de las tromboplastinas extrnseca e intrnseca. Es producida por
el hgado bajo la influencia de la vitamina liposoluble. La protrombina est relacionada con el factor VII, tambin
producida por el hgado. La trombina se transforma en trombina en la etapa segunda de la coagulacin.
El tiempo de protrombina es una etapa de Quick. Se trata de un tiempo de coagulacin obtenida el agregar el plasma
en exceso de tromboplastina hitica y calcio. Mide los niveles de factor I Factor II y factor V, VII y X. Es decir que el
nombre de esta prueba dara una idea equivocada, por que no solo el factor II el que se determina.
Fundamento
Al plasma anticuagulado se le induce una coagulacin respondiendo el calcio que fue inactivado con el
anticoagulante y agregando una tromboplastina completa para activar la va extrnseca. Se mide el tiempo
transcurrido, desde la activacin hasta la formacin del cogulo, es decir, hasta la formacin de fibrina.
Material y aparatos
Tubos de ensayo 10x75
Pipetas serolgica de 1.0 ml
Gradilla para tubos de ensayo
Pipeta Pasteur con bulbo
Equipo para puncin sistema vacutainer
Tubos al vacio con citrato de sodio al 3.8%
Papel milimtrico
Cronometro
Bao maria de 37C
Centrifuga
Reactivos
Tromboplastina clcica con ndice de sensibilidad internacional (ISI)
Solucin salina isotnica.
Material biolgico
Sangre venoso obtenida con citrato de sodio.
Metodologa
Tiempo de protrombina
1. Todas las muestras se deben realizar siempre por duplicado.
2. 2) antes de transcurridos 30m minutos de la extraccin, centrifugar la sangre a 750rpm, durante 5 minutos.
3. Separa el plasma y conservarlo en refrigeracin hasta su proceso.
4. Procesar simultneamente un testigo normal al da.
5. En el tubo de ensayo poner 0.2ml. de la tromboplastina clcica
6. Incubar por unos 2 minutos.
7. Transcurrido ese tiempo con la tromboplastina agregar 0.1ml. de plasma problema echando a andar
simultneamente, el cronometro.
8. Al iniciarse el coagulo el cronometro de detendr. Anotar el tiempo, em segundos, en que esto ocurri.
9. Calcular el porcentaje de actividad usando la curva de calibracin realizada previamente en el mismo laboratorio.
10. Convertir el resultado en tiempo, en ndice normalizado internacional.
11. Debido a que se calculara el porcentaje de actividad de protrombina en la miestra problema, comparada con un
normal con actividad de 100% es necesario hacer previamente una curva de calibracin.
Curva de calibracin
1. Obtener sangre en un tubo con citrato de sodio, de 5 6 personas normales.

2. Centrifugar la muestra a 750rpm, durante 5 minutos.

3. Tomar de 1.5 a 2 ml. De cada plasma y mezclarlos en un tubo de ensayo.
4. Preparar una serie de tubos de esta manera:

5. Realizar a cada tubo un tiempo de protrombina por duplicado, la diferencia entre ambos tubos debe ser inferior a
0.5 segundos, en caso contrario se deber repetir la prueba.
6. Promediar los tiempos obtenidos para cada par de tubos y graficar en papel milimtrico logartmico resultado una
recta o una parbola, respectivamente. En ningn caso es valido calcular el porcentaje de actividad obteniendo el
factor de calibracin por regla de tres con el tiempo del testigo normal.
Comentarios:
Dado que el tiempo de protombina mide la va intrnseca, es el mtodo ideal para el monitoreo de los anticoagulantes
orales. La mayororia, como antagonistas de la vitamina K, actan sobre esta va. por ello, es indispensable utilizar
tromboplastina estandariza con ISI que permite obtener el INR, para poder estandarizar los rangos teraputicos.
Valores de referencia
Porcentaje de actividad 70 a 10%
INR 1 a 2
En segundos 12-15
http://pruebasdelaboratorioenhemostasia.blogspot.pe/2011/11/tiempo-de-sangrado.html