MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales

Reactivos

1 Gradilla
1 Vaso de precipitado de 500 mL
12 Tubos de ensaye de 13 x 100
2 Vasos de precipitado de 250 mL
7 Vasos de precipitado de 50 mL
2 Pipetas de 5 mL
3 Pipetas de 1 mL
1 Pinza para tubo de ensaye
1 Mechero
1 Tripi
Tela de asbesto

Albumina al 0.1 %
Alanina al 0.1 %
Tirosina al 0.1 %
Triptfano al 0.1 %
cido Asprtico al 0.1 %
Arginina al 0.1 %
Gelatina al 0.1 %
Solucin de ninhidrina al 0.1 %
Piridina
Reactivo del milln
cido ntrico concentrado
Hidrxido de amonio concentrado
Reactivo de Hopkins-Cole
cido sulfrico concentrado
Hidrxido de sodio al 0.5 y 10 %
Solucin de -naftol al 0.2 %
Hipodromito alcalino
Solucin de urea al 40 %

PROCEDIMIENTO
1.- Con un mechero, tripie, tela de asbesto y un vaso de precipitado de 250 mL
preparar un
bao de agua hirviendo.

2.- Marcar los siete vasos de precipitado de 50 mL con los nombres de las
sustancias que se
van a utilizar en la prctica: Albmina, Alanina, Citosina, Triptfano, cido
Asprtico,
Arginina, Gelatina.
3.- Con los vasos as titulados tome 20 mL de albmina, 15 mL de alanina y 10 mL
de los
restantes reactivos de muestra.

4.1 REACCIN DE LA NINHIDRINA

1.- Coloque en la gradilla siete tubos de ensaye y titlelos con los nombres de los
reactivos,
con la finalidad de poder reportar resultados correctamente.
2.- Poner 3.0 mL de cada una de las muestras a sus correspondientes tubos.
Cuidar de no
contaminar las muestras.
3.- Checar el pH de las muestras, con papel indicador, si no tienen pH neutro,
ajustarlo con
mucho cuidado.
4.- Aadir 1.5 mL de ninhidrina al 0.1 % a cada uno de los tubos de ensaye y luego
aadir 5
gotas de piridina a cada tubo de ensaye.
5.- Colocar los tubos en el bao de agua hirviendo y dejarlos por unos minutos. En
cuanto los
tubos den la prueba positiva retrelos del agua. Si alguno de los tubos no dio la
reaccin
despus de 10 minutos retrelo y considere la prueba negativa.
6.- Observe el color desarrollado y anote el tiempo y el color para cada tubo.

4.2 REACCIN DEL MILLON

1.- Coloque en una gradilla cuatro tubos de ensaye y titlelos as: Tirosina,
Alanina,
Albumina, Gelatina.
2.- Aada 3.0 mL de las soluciones correspondientes a los tubos.
3.- Agregar 5 gotas del reactivo del Billn a cada uno de los tubos.
4.- Coloque los tubos en el bao de agua hirviendo y djelos por 5 minutos.
5.- Saque los tubos y haga las observaciones correspondientes.

4.3 REACCCIN XANTOPROTEICA

1.- Coloque en la gradilla cinco tubos de ensaye y titlelos as: Tirosina, Triptfano,
Alanina,
Albumina, Gelatina.
2.- Aada 2.0 mL de las soluciones correspondientes
3.- Agregar con cuidado a cada uno de los tubos 1.0 mL de cido ntrico
concentrado.
4.- Coloque los tubos en el bao de agua hirviendo y djelos por 5 minutos.
5.- Despus de ese tiempo sacarlos y enfriarlos en agua
6.- Aadir a cada tuvo con cuidado y por las paredes 2.0 mL de hidrxido de
amonio
Concentrado.
7.- Observar el resultado y hacer las anotaciones correspondientes

4.3 REACCIN HOPKINS-COLE

1.- Preparar un bao de hielo, poniendo hielo picado en un vaso de precipitado de
600 mL

2.- Coloque tres tubos de ensaye conteniendo 5 mL de Asprtico, Arginina y

Albumina, en el
bao de hielo
3.- Aada 1.0 mL de hidrxido de sodio al 10 % y 2.0 mL de -naftol al 0.2% a
cada tubo.
Mezclar y dejarlos reposar por 3 minutos en el bao de hielo.
4.- Aadir 1.0 mL de hipodromito alcalino y despus de un minuto agregue 1.0 mL
de la
solucin de urea al 40 % (para destruir el exceso de hipodromito), mezclar muy
bien.
5.- Observar el resultado y hacer las anotaciones correspondientes