UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE ZOOTECNIA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS PECUARIAS

DETERMINACION DE MATERIA SECA, NITROGENO, GRASAS Y FIBRA

CURSO

NUTRICION ANIMAL

DOCENTE

DR. Rizal Robles Huaynate

ESTUDIANTES

DEL AGUILA SOTO, Oger Ernesto

LAURA SACACA, Richard
PINEDO CHUMBICO, Wendy
VALLES RENJIFO, Maglluri Nubita

CICLO

2016-II

FECHA DE ENTREGA

10/10/2016

TINGO MARIA - PER

I.

INTRODUCCION

Los instrumentos de laboratorio son herramientas de suma importancia para

anlisis de cualquier sustancia, cumplen un rol muy importante en el
desarrollo de las practicas pues se complementan unos a otros para poder
conseguir el resultado con mayor exactitud, todo esto va a ser posible si los
alumnos y profesores dan el uso adecuado a estos instrumentales de
laboratorio.

OBJETIVOS

Reconocer los principales materiales y equipos del laboratorio con

que cuenta la Universidad.

Aprender el funcionamiento y formas de preservar correctamente

los materiales y equipos de laboratorio.

Conocer las reglas y procedimientos requeridos en el laboratorio

para poder accionar con mayor confianza y responsabilidad.

II.

REVISION BILIOGRAFICA

2.1 Determinacin de Humedad

Durante el balanceo de la racin, es fundamental conocer el contenido de agua
en cada uno de los elementos que la compondrn; as mismo, es necesario
vigilar la humedad en el alimento preparado, ya que niveles superiores al 8%
favorecen la presencia de insectos y arriba del 14%, existe el riesgo de
contaminacin por hongos y bacterias (Cockerell et al., 1971). El mtodo se
basa en el secado de una muestra en un horno y su determinacin por
diferencia de peso entre el material seco y hmedo.
2.1.1 Aparatos

Estufa: Este equipo se utiliza en la determinacin del porcentaje de

humedad y materia seca de un determinado insumo para la alimentacin
animal. Por ejemplo se toma una cierta cantidad de pasto de varias zonas de
un pastizal para luego homogeneizar, y moler cierta cantidad de la que solo se
saca 5gr. para colocar en la estufa sobre una caja petrick bien desecada, todo
a una temperatura de 105 C. por 5 6 horas. Cumpliendo esta fase se lleva al
desecador que elimina toda la humedad relativa del medio ambiente, luego
llevamos a la balanza analtica. Este resultado se resta el peso de la caja
petrick, para tener el total de materia seca que luego se resta con los 5 gr. de
masa estndar, para obtener el valor de la humedad por otro lado de la materia
seca se puede determinar las valores de protena y lpidos.

Mufla: Es un hornillo semicilndrico o en forma de copa, que se coloca

dentro de un horno para reconcentrar el calor y conseguir la fusin de diversos
cuerpos. Ayuda en la determinacin de las cenizas, tiene formas y tamaos
variables en este caso es de forma cilndrica se sella hermticamente con
una palanca. La mufla en la actualidad tiene la capacidad de calentar a una
temperatura de 2000 C. Para realizar la determinacin se lleva la muestra a
la mufla y se aumenta la temperatura progresivamente hasta aprox. 600 C.
Despus de todo este procedimiento se consigue los
oligoelementos
(minerales de mayor porcentaje en un determinado organismo) y los
elementos traza (se encuentran en cantidades menores). Todas estas
sustancias se guardan en agua bidestilada.
2.1.2 Procedimiento
1.

Pese alrededor de 510 g de la muestra previamente molida.

2.

Coloque la muestra en un horno a 105C por un mnimo de 12 h.

3.

Deje enfriar la muestra en un desecador.

4.
Pese nuevamente cuidando de que el material no este expuesto al
medio ambiente.
2.1.3 Clculos:
Contenido de humedad (%) = 100(((B-A) - (C-A))/(B-A))
Dnde:
A = Peso de la charolilla seca y limpia (g)
B = Peso de la charolilla + muestra hmeda (g)
C = Peso de la charolilla + muestra seca (g)

FIGURA 1
Determinacin del contenido de humedad en insumos alimenticios

2.2 DETERMINACION DE NITROGENO

El mtodo Kjeldahl se utiliza en qumica analtica para la determinacin del

contenido de nitrgeno en muestras orgnicas lo cual es de gran inters en
mbitos de tanta transcendencia hoy en da como son el alimentario y el
medioambiental.

2.2.1

Aplicaciones

Desde 1883 en que John Kjeldahl present sus trabajos, su mtodo ha

ganado una gran aceptacin y se aplica en una amplia variedad de trabajos
para los anlisis de alimentos, bebidas, piensos, grano, carnes, aguas
residuales, suelos para cultivos y otros. Hoy por hoy es el mtodo ms usado
para el anlisis de protenas y se efecta mediante la determinacin de
nitrgeno orgnico. Esto es as porque los diferentes tipos de protenas
coinciden todas ellas en una proporcin similar de dicho nitrgeno orgnico. En
la mayora de los casos de utiliza el factor de clculo siguiente:
Contenido de protenas = Contenido de nitrgeno orgnico x 6.25

En esta tcnica se digieren las protenas y otros compuestos orgnicos de los

alimentos en una mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. El
nitrgeno orgnico total se convierte en sulfato de amonio mediante la
digestin. La mezcla resultante se neutraliza con una base y se destila. El
destilado se recoge en una solucin de cido brico. Los aniones de borato as
formado se titulan con HCL estandarizado para determinar el nitrgeno
contenido en la muestra.
2.2.2 Procedimiento
El mtodo consta de tres etapas: DIGESTIN DESTILACIN TITULACIN.
En la DIGESTIN se produce la descomposicin del nitrgeno que contienen las
muestras orgnicas utilizando una solucin de cido concentrado. Esto se obtiene
haciendo hervir la muestra en una concentracin de cido sulfrico. El resultado es
una solucin de sulfato de amonio.
En la etapa de DESTILACIN se libera amoniaco, el cual es retenido en una solucin
con una cantidad conocida de cido brico. Inicialmente se realiza una destilacin con
vapor por el mtodo de arrastre de vapor de agua, mediante la cual acelera la
obtencin del destilado.
Al final, se utiliza la TITULACIN para valorar finalmente la cantidad de amonio
presente en la muestra destilada.

2.2.2 Equipos para realizar la determinacin de Nitrgeno

Desde hace unos aos, se vienen desarrollando nuevos equipos y

perfeccionado las tecnologas para ejecutar estas tcnicas analticas.
2.2.2.1 Digestor: Permite la digestin simultnea de hasta 6 muestras. La
exactitud y la precisin de la temperatura estn garantizadas gracias al
regulador digital, que incorpora adems, un sistema de proteccin contra el
sobrecalentamiento para garantizar la seguridad del operador. Los humos
cidos, producidos durante la digestin, son conducidos a travs de las
campanas de vidrio y de los tubos cido-resistentes, que componen la
chimenea, hacia el sistema de eliminacin elegido. El equipo puede albergar
hasta 6 tubos estndares de 250 ml. Bajo peticin, es posible adquirir una
versin especial para utilizar tubos Kjeldahl tipo Bchi.
Caractersticas tcnicas:
- Construccin externa en acero inoxidable.
- Termorregulador digital.
- Regulacin de temperatura ambiente a 450C.
- Uniformidad de calefaccin.
- Fcil conexin a un scrubber (opcional).
2.2.2.2 Microckjendal: Determina la protena total de cualquier organismo o
alimento, consta de una cocina y un destilador este mtodo cuantifica la
fraccin de nitrgeno total. Que tiene como principio una solucin cida o
bsica. Una vez realizad la parte del cido se coloca en un baln destilador
10ml. De NAO y que hierba en otro recipiente en un viere se pone una
solucin de 20 ml de cido brico y se coloca en un indicador 2g de azul de
metileno, cuando hierve se agrega, luego se titula y el gasto es nitrgeno.
Protena.
2.3 Determinacin de Lpidos (Grasas)
En este mtodo, las grasas de la muestra son extradas con ter de petrleo y
evaluadas como porcentaje del peso despus de evaporar el solvente.
2,3,1 Equipos

Aparato de extraccin Soxhlet.

El extractor Soxhlet o simplemente Soxhlet (en honor a su inventor Franz von

Soxhlet) es un tipo de material de vidrio utilizado para la extraccin de
compuestos, generalmente de naturaleza lipdica, contenidos en un slido, a
travs de un disolvente afn. El condensador est provisto de una chaqueta de
100 mm de longitud, con espigas para la entrada y salida del agua de
enfriamiento. El extractor tiene una capacidad, hasta la parte superior del sifn,

de 10 mL; el dimetro interior del extractor es de 20 mm y su longitud de 90

mm. El matraz es de 500 mL capacidad.
Est conformado por un cilindro de vidrio vertical de aproximadamente un pie
de alto y una pulgada y media de dimetro. La columna est dividida en una
cmara superior y otra inferior. La superior o cmara de muestra sostiene un
slido o polvo del cual se extraern compuestos. La cmara de disolvente,
exactamente abajo, contiene una reserva de disolvente orgnico, ter o
alcohol. Dos tubos vacos, o brazos, corren a lo largo a un lado de la columna
para conectar las dos cmaras. El brazo de vapor corre en lnea recta desde la
parte superior de la cmara del disolvente a la parte superior de la cmara del
slido. El otro brazo, para el retorno de disolvente, describe dos U
sobrepuestas, que llevan desde la cmara de la muestra el disolvente hasta la
cmara de disolvente. El soxhlet funciona cclicamente, para extraer las
concentraciones necesarias de algn determinado compuesto.
ste funciona de la siguiente forma: Cuando se evapora, el disolvente sube
hasta el rea donde es condensado; aqu, al caer y regresar a la cmara de
disolvente, va separando los compuestos hasta que se llega a una
concentracin deseada. Esto puede ocasionar problemas con algunos
compuestos, que con los ciclos llevan a la ruptura del baln, como lo es en la
extraccin del mbar.

FIGURA 2
1. buzo / agitador / granallas o esfera 2. Baln 3.Brazo para ascenso del vapor12 4.cartucho
de extraccin o cartucho Soxhlet 5. Muestra (residuo) 6. Entrada del sifn 7. Descarga del
sifn 8. Adaptador 9. Refrigerante (condensador) 10. Entrada de agua de refrigeracin
11.salida de agua de refrigeracin.

Horno de laboratorio ajustado a 105C.

Desecador.

Dedales de extraccin.

2.3.2 Procedimiento
1.
Saque del horno los matraces de extraccin sin tocarlos con los dedos,
enfrelos en un desecador y pselos con aproximacin de miligramos.
2.
Pese en un dedal de extraccin manejado con pinzas, de 3 a 5g de la
muestra seca con aproximacin de miligramos y colquelo en la unidad de
extraccin. Conecte al extractor el matraz con ter de petrleo a 2/3 del
volumen total.
4.
Lleve a ebullicin y ajuste el calentamiento de tal manera que se
obtengan alrededor de 10 reflujos por hora. La duracin de la extraccin
depender de la cantidad de lpidos en la muestra; para materiales muy
grasosos ser de 6 horas.
5.
Al trmino, evapore el ter por destilacin o con rotovapor. Coloque el
matraz en el horno durante hora y media para eliminar el ter. Enfre los
matraces en un desecador y pselos con aproximacin de miligramos. La
muestra desengrasada puede usarse para la determinacin de fibra cruda.
2.3.3 Clculos
A = Peso del matraz limpio y seco (g)
B = Peso del matraz con grasa (g)
C = Peso de la muestra (g)
Contenido de lpidos crudos (%) = 100((B - A)/C)

FIGURA 3
Determinacin de lpidos por el mtodo de Soxhlet

2.4 Determinacin de Fibra

Este mtodo permite determinar el contenido de fibra en la muestra, despus
de ser digerida con soluciones de cido sulfrico e hidrxido de sodio y
calcinado el residuo. La diferencia de pesos despus de la calcinacin nos
indica la cantidad de fibra presente.

2.4.1 Equipos para realizar la determinacin de Fibra Cruda

2.4.1.1 Condensador
El aparato de Fibra Cruda se utiliza en la determinacin de fibra cruda en
comida, alimentos y otros productos agrcolas. El Aparato es un condensador
de reflujo diseado para operar con velocidad y precisin. Este aparato se
utiliza ampliamente por laboratorios de control estatal, federal e industriales y
las metodologas estn registradas por AOAC.
El procedimiento incluye someter una muestra a la accin simulada del sistema
digestivo. Las muestras se hiervan en cido y se lavan, luego se hiervan en
lcali y se lavan de nuevo. Los slidos restantes se aslan y se denominan fibra
insoluble o fibra cruda - como son la celulosa y otros materiales agrcolas
indigeribles.

2.4.1.2 Caractersticas y Beneficios

Construccin
Una firme armazn de aluminio anodizado sostiene el colector mltiple.
Calentadores elctricos
El equipo se proporciona con seis calentadores de 350 vatios. Seis botones de
control infinito dirigen la entrada de calor variable de 20-100% de capacidad. La
conexin de compresin de resorte entre el vaso de precipitado y el elemento
condensador, mantiene el vaso de precipitado en su lugar, evitando sacudidas
y posible rotura cuando comienza la ebullicin. El sello hermtico mantiene el
cido y el lcali a volmenes constantes durante las etapas de la ebullicin,
aun as es fcilmente liberado al bajar el ensamblaje del calentador.
Condensadores
El condensador de acero inoxidable tiene una base de cono invertido. Este
cono regresa el condensado hacia los lados del vaso de precipitado, lo cual

ayuda a lavar la espuma y la fibra que pueda adherirse a los lados del vaso de
precipitado.
Cristalera
Con el equipo se proporcionan doce vasos de precipitados altos, de lados
rectos de 600 ml fabricados con vidrio grueso durable de borosilicato.
Conexciones de tubera
El Aparato de Fibra Cruda est completamente armado de fbrica. Las nicas
conexiones requeridas para su operacin son un toma de agua y un
receptculo elctrico.
ACCESORIOS
Filtro Oklahoma State
Modelo 5521000
Diseado pra usarse con succin. El montaje de pantallla de filtro est hecho
completamente de acero inoxidable y consiste de un embudo de una pieza con
una tapa enroscada. La tapa mantiene un filtro de mallas finas de acero
inoxidable contra una placa de apoyo perforada para fcil substitucin. El
montaje entero est pulido y armado a mquina para disminuir la prdida de
fibra. Filtro de repuesto Modelo #55201 Place de apoyo Modelo #55202

Embudo California Buechner

Modelo 5510000
Este embudo Buechner de polietileno estndar de dos piezas se modifica con
la adicin de un filtro 200 de mallas finas de acero inoxidable el cual es
firmemente sellado a base de calor en el fondo de la seccin superior.

Vasos de Precipitados de respuesto para

Fibra Cruda
Modelo 3004300
Los vasos de precipitados alto de 600 ml se usan con el Aparato Labconco de
Fibra Cruda.
Fabricado de vidrio durable grueso de borosilicato con graduaciones
volumtricas a 600 ml.
Seis por paquete.

2.4.2 Procedimiento
1. Las muestras y el reactivo se colocan en un vaso de precipitado de 600 ml.
2. El vaso de precipitado se coloca en el calentador elctrico, el cual se eleva
hasta que se hace una conexin de compresin de resorte entre el vaso de
precipitado y el condensador.
3. Se aplica el calor. A medida que aumenta la temperatura, la solucin de
ebullicin alcanza el condensador y se inicia el proceso de reflujo.
4. Se proporciona un control infinito de calor para cada calentador elctrico, lo
que permite controlar el calor progresivo para obtener la ebullicin apropiada y
la velocidad de reflujo.
5. Despus de un perido especificado, los contenidos del vaso de precipitado
se filtran, para que luego se laven repetidamente en agua hirviendo.
6. El residuo en el filtro se hierve con reactivos custicos y se filtra de nuevo.
7. El residuo restante se seca, enfra, pesa y registra como fibra cruda.

2.4.2 Clculos
A = Peso del crisol con el residuo seco (g)
B = Peso del crisol con la ceniza (g)
C = Peso de la muestra (g)
Contenido de fibra cruda (%)= 100((A - B)/C)