UNIVERSIDAD DE CORDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGA
CURSO: GENTICA BSICA
Prctica N 1. MITOSIS
Introduccin
La particularidad principal de las clulas y de los organismos es la capacidad para
reproducirse. El tipo de divisin ms simple implica la divisin de una clula parental en
dos clulas hijas, esto se lo logra duplicando primero su contenido y luego dividindose en
dos. Esta divisin ocurre como parte del ciclo celular que se puede definir como una serie
ordenada de acontecimientos macromoleculares que preparan a la clula para dividirse
seguido por el proceso real de divisin, denominado mitosis.
El ciclo celular de las eucariotas se divide en cuatro fases principales: M (Mittica) o de
divisin celular y una etapa previa de no divisin que comprende las fases G1, S y G2 que
en conjunto se conocen como interfase.

Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una clula da origen a dos
clulas hijas con igual dotacin de cromosomas. Aunque la mitosis, de por s es un
proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas consecutivas de acuerdo
a los cambios morfolgicos que va experimentando la clula y que se continan con la
citocinesis
Objetivo:
Observar todas las etapas de la mitosis en clulas del meristema apical (pice de la raz)
de cebolla.
Materiales:

pices de cebolla.
HCl diluido.
Colorante aceto - orcena.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Papel toalla.
Aguja de diseccin.
Aceite de inmersin

Continuacin laboratorio # 1

Preparativos Previos:
1. Preparacin de la aceto - orcena:
Aadir 2 g de orcena a 45 ml de cido actico caliente (80 a 90 C) y agitar
rpidamente.
Aadir gradualmente a esta solucin, 55 ml de agua destilada a temperatura
ambiente.
Dejar enfriar.
Filtrar dos (2) veces.
Guardar en botella oscura.
2. Obtencin de pices de raz de cebolla:
Tomar una cebolla pequea o mediana y qutele la cscara con cuidado.
Raspe cuidadosamente la parte inferior de la cebolla, en donde estn las races
secas, con una navaja afilada.
Coloque la cebolla sobre un frasco o recipiente pequeo que contenga agua (agua
suficiente para tocar la parte inferior en donde brotarn las races); no permita que
la cebolla caiga dentro del recipiente sino que quede suspendida sobre el agua (si
es necesario, inserte unos palillos de dientes en los lados de la cebolla para que la
sostengan).
Espere que aparezcan las races en la cebolla (esto puede tardar 3-5 das).
Corte los ltimos 10mm de cada raz (entre 10:00 a.m. y 12:00 m.d.) y colquelos
en la solucin fijadora de tejido llamada Carnoi (dejarlas all por 24 horas).
Despus de 24 horas de estar en solucin Carnoi, transfiera las races a alcohol
etlico al 70% (all podrn permanecer por varios meses a temperatura ambiente).

Procedimiento:
1. Enjuague los pices de cebolla (fijados) en agua destilada por 5 minutos.
2. Observe los pices mediante un microscopio de diseccin.
3. Corte y conserve la porcin del pice que posea un tejido blanquecino (casi 2-3
mm del extremo de la raz) y deseche el resto.
4. Tome un cubreobjetos y produzca incisiones con su borde a lo largo del pice de
cebolla (los pasos del 1-3 deben realizarse rpidamente tratando de que el tejido
no se deshidrate).
5. Coloque el tejido en HCl 1% por 15 min. en un plato Petri (esto se hace para
romper la pared celular).
6. Transferir los pices a agua destilada y dejarlos all 5 min.
7. Coloque el tejido sobre un portaobjetos.
8. Agregue dos gotas de aceto-orcena sobre el tejido y caliente la muestra
suavemente por 5-7 minutos, por medio de toques intermitentes sobre la superficie
de un plato de calentamiento o "hot plate" (durante este tiempo vigile que el tejido
permanece humedecido con el colorante, no permita que hierva ni que se seque;
agregue ms colorante si es necesario).
9. Coloque un cubreobjetos sobre el tejido (sobre l se coloca un trozo de papel
toalla) y presione fuerte y cuidadosamente por medio de un borrador de lpiz (esta
tcnica se llama "extendido por aplastamiento" o "squach" ). Recuerde que
mientras ms aplastado, mejor; as las clulas se encontrarn en el mismo plano.

Continuacin laboratorio # 1

10. Si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de una aguja de

diseccin
y agregue una gota adicional de aceto-orcena; coloque nuevamente el cubreobjetos
sobre la muestra.
11. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el rea adecuada,
luego pase a 40x y finalmente a 100x para observar con detalles).
12. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, adems observe la apariencia de las
clulas que se encuentran en interfase (aquellas que no estn en mitosis).
Bibliografa:
Avers, Charlotte. Biologa Celular.
De Robertis & De Robertis. Biologa Celular y Molecular.
Investigar:
Las caractersticas de cada etapa de la mitosis.
Comparacin entre mitosis en clulas vegetales y animales.
Diferencia entre citocinesis y cariocinesis.
Diferencia entre citocinesis en clula vegetal y animal.
Qu es el fragmoplasto y placa celular?