INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

INGENIERA EN SISTEMAS AMBIENTALES

MICROBIOLOGA AMBIENTAL

PRCTICA NO. 6:
Efecto de los factores ambientales en la
distribucin de microorganismos en un ecosistema

EQUIPO 2
Albores Garca Juan Carlos
Oneto Gorocica Levi
Reyes Ibarra Rodrigo
EQUIPO 6
lvarez Ramrez Erik
Hernndez Villeda Daniela

Grupo: 5AV1
Dra. Gisella Boll Argello

Entrega: 19 de Octubre de 2016

OBJETIVOS
Observar la distribucin de microorganismos en una columna de agua-sedimento.
Relacionar su presencia con las caractersticas del microhbitat.
RESULTADOS
Tabla 1.Observaciones de la columna de Winogradsky (equipo 6).
Fecha y
hora

05/09/201
6

Tiempo
de
incubac
in
Da 0

Tratamiento

Indicador
oxido
reduccin

1.
2.
3.
4.
1.
2.
3.
4.

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad
Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

1. Azul
2.Azul
3.Azul
4.Azul
1.Gris
2.Azul
3.Azul
4.Azul

06/09/201
6

Da 1

08/09/201
6

Da 3

1.
2.
3.
4.

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

1.Gris
2.Azul rey
3.Azul
4.Azul rey

12/09/201
6

Da 7

1.
2.
3.
4.

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

1.Morado/azul
cielo/caf
2.Caf
3.Azul
4.Caf/azul /
morado

14/09/201
6

Da 9

1.
2.
3.
4.

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

1.Cafe
2.No hay
3.Azul
4.Negro

21/09/201
6

Da 16

1.
2.
3.
4.

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

1.negro
2.blanco
3.Azul
4.Negro

03/10/201
6

Da 28

1. Iluminacin
2. Sacarosa

1.negro/gris
2.Blanco

papel filtro

Columna de
agua

Sediment

1.Arenoso
2. Arenoso
3.Arenoso
5.Arenoso
1.Sin cambio
2.Sin cambio
3.No se puede ver
4.Sin cambios

1.Transparente
2.Transparen
te
3.Turbia/azul
4.Transparente

1.Partculas
adheridas
2.Partculas
adheridas
3.No se puede ver
4.Partculas
adheridas( manch
as amarillas)
1.Partculas
adheridas
2.Partculas
adheridas
3.Partculas
adheridas
4. Partculas
adheridas
(manchas amarillas)
1. Partculas
adheridas
2. Partculas
adheridas
3. Partculas
adheridas
4. Partculas
adheridas
(manchas amarillas
1. Partculas
adheridas,
desgastada(manc
has amarillas, se
pint de negro)
2. Partculas
adheridas
3.No se puede ver
4. Partculas
adheridas
(manchas amarillas)
1. Partculas
adheridas,

1.Transparente
2.Turbia/
burbujas
3.Turbia/azul
4.Transparente

1.Transparente
2.Turbio
3.Turbia/azul
4.Transparente

1.
Transparente
2.Transparente
/ burbujas
3. Turbia/azul
4.Transparente

1.
Transparente
2.Turbia/
burbujas
3. Turbia/azul
4.Transparente

1.
Transparente

10/10/201
6

Lectura
final,
da 33

3. Detergente
4. Obscuridad

3.Azul
4.Negro

1.
2.
3.
4.

1.Negro/gris
2.Blanco
3.Azul/blanc
o
4.Negro

Iluminacin
Sacarosa
Detergente
Obscuridad

desgastada(mancha
s amarillas, se pint
de negro)
2. Partculas
adheridas
3. Partculas
adheridas
4. Partculas
adheridas
(manchas amarillas)
(Color
amarillo/naranja
en las paredes del
vaso, columna 1)
1. Partculas
adheridas,
desgastada(manc
has amarillas, se
pint de negro)
2. Partculas
adheridas
3. Partculas
adheridas
4. Desgastado,
partculas adheridas
(manchas amarillas,
color negro en la
parte de abajo)

2.Turba/
burbujas
3. Turbia
4.Transparente

1.
Transparente
2.Turba
3. Turbia
4.Transparente

Tabla 2.Observaciones al microscopio de la columna de winogradsky (equipo 6).

Column
a

Aerobia
(Tipos de organismo
observados)

2
3
4

Diatomeas
tabellaria(algas)
(Daadas, no tienen
color)
Partes del fierro
oxidado
Naviculas (algas,
fotosintticas)
Nada
Nada
Nada

Microaerfila
(Tipos de
organismo
observados)
Navculas
Euglena

Nada
Nada
Mucopolisacaridos
con muchas clulas
(seguramente con
bacterias)

Anaerobia
(Tipos de
organismo
observados)
Protozoarios
flagelados

Nada
Nada
Nada

Portaobjetos
(Tipos de organismo
observados)

Tabla 3.Observaciones de la columna de Winogradsky (equipo 2).

Quistes de
amibas
Ciliados

Nada
Nada
Protozoarios
ciliados grandes
y chicos
Quistes de
amiba
Bacterias
Grnulos de
azufre

Fecha y
hora

Tiempo de
incubacin

Columna

05/09/2016

Da 0
0:00 hrs.
Da 0
0:00 hrs.
Da 0
0:00 hrs.
Da 0
0:00 hrs.
Da 7
168 hrs.

Indicador de
xido
reduccin
Mucho oxgeno

Mucho oxgeno

Mucho oxgeno

Mucho oxgeno

Da 7
168 hrs.
Da 7
168 hrs.

Da 7
168 hrs.
Da 9
216 hrs.

14/09/2016

Da 9
216 hrs.

14/09/2016

Da 9
216 hrs.

14/09/2016

Da 9
216 hrs.
Da 21
504 hrs.

26/09/2016

Da 21
504 hrs.

Presencia de
gas

26/09/2016

Da 21
504 hrs.

26/09/2016

Da 21
504 hrs.

28/09/2016
7:25 pm
28/09/2016
7:25 pm
28/09/2016
7:25 pm

05/09/2016
05/09/2016
05/09/2016
12/09/2016

12/09/2016
12/09/2016
12/09/2016
14/09/2016

26/09/2016

Papel filtro

Columna de
agua

Sedimento

Agua clara azul

Agua clara azul

Agua clara ms
azul
Agua clara azul

Poca presencia
de oxgeno

Completo
blanco
Completo
blanco
Completo
blanco
Completo
blanco
Poco
deterioro

Arenoso
caf
Arenoso
caf
Arenoso
caf
Arenoso
caf
Arenoso
caf

Presencia de
gas
Poca reduccin
de sulfato

Poco
deterioro
Muy poco
deterioro

Agua turbia

Sulfato
reduccin
An poca
oxidacin

Ms
deteriorado
Poco
deterioro

Presencia de
microorganismos
Agua poco turbia,
crecimiento de
microorganismos

Arenoso
negro
Arenoso
caf

Continua
produccin de
gas
Poca reduccin
de sulfato

Poco
deterioro

Agua turbia, poco

crecimiento

Arenoso
negro-caf

Poco
deterioro

Ms turbidez

Arenoso
caf oscuro

Sulfato
reduccin
Mayor
concentracin
de azufre

Ms
deteriorado
Ms
deteriorado y
un poco
negro
Papel
amarillento

Presencia de
microorganismos
Mucha turbidez y
crecimiento

Arenoso
negro
Arenoso
caf-negro

Ms turbidez

Arenoso
negro-caf

Poca reduccin
de sulfato

Poco deterioro

Ms turbidez

Arenoso caf
oscuro

Sulfato reduccin

Negro-amarilloblanco

Ms crecimiento

Arenoso
negro

Da 23
552 hrs.

Sin oxgeno
Reduccin de
H2S

Turbia con
crecimiento

Arenoso
negro

Da 23
552 hrs.
Da 23
552 hrs.

No hay oxgeno

Deteriorado
negroamarillentoblanco
Poco deterioro

Sin oxgeno

Poco deterioro

Turbia con
crecimiento
Manchas amarillas,
agua turbia

Arenoso
negro-caf
Arenoso
negro-caf

Agua poco turbia,

crecimiento de
microorganismos

Agua poco turbia

arenoso
negro-caf
Arenoso
caf oscuro

28/09/2016
7:25 pm

Da 23
552 hrs.

Mucha reduccin
de azufre

Amarillentonegro

Turbia con
crecimiento

Arenoso
negro

03/10/2016
6:55 pm

Da 28
672 hrs.

Se rompi

Bacterias prpuras

Arenoso
negro

03/10/2016
6:55 pm

Da 28
672 hrs.

Sin oxgeno
Reduccin de
H2S
No hay oxgeno,
si reduccin de
azufre

Poco deterioro

Turbia, menos
crecimiento

Arenoso ms
oscuro

03/10/2016
6:55 pm

Da 28
672 hrs.

Reduccin de
H2S

Deterioro, ms
oscuro

Manchas amarillas

Arenoso ms
oscuro

03/10/2016
6:55 pm

Da 28
672 hrs.

Mucha reduccin
de azufre

Mucho
deterioro

Turbia con mucho

crecimiento

Arenoso
negro

05/10/2016
7:21 pm

Da 30
720 hrs.

Arenoso
negro

Da 30
720 hrs.

Amarillento,
consumido a la
mitad
Mucho ms
deterioro

Turbia con mucho

crecimiento

05/10/2016
7:21 pm

Turbia poco
crecimiento

Arenoso
oscuro

05/10/2016
7:21 pm

Da 30
720 hrs.

Sin oxgeno
Reduccin de
H2S
Sin oxgeno
Reduccin de
H2S
Reduccin de
H2S

Deterioro, ms
oscuro

Turbia con manchas

amarillas

Arenoso
oscuro

05/10/2016
7:21 pm

Da 30
720 hrs.

Mucho ms
reduccin de H2S

Muy
deteriorado, la
mitad ya se
consumi

Agua clara muy poco

crecimiento

Arenoso
negro

DISCUSIN
Durante 33 das se hicieron observaciones de las columnas como se muestra en la tabla 1 y 2, las
cuatro columnas fueron enriquecidas con sulfato de calcio, sin embargo para obtener una gama de
sistemas diferentes se prepararon algunas columnas cambiando algunas variables, para lo cual la
columna 1, 2 y 3 se dejaron a la luz, con esto se favorecera a los fototrofos y en cambio en la
columna 4 se veran inhibidos ya que esta fue cubierta con una bolsa negra.
Al finalizar la prctica se hicieron observaciones al microscopio, para lo cual se apoy de acuerdo a
que en las columnas se establecen tres tipos de ambientes: el anaerobio, el microaerfila y el
aerobio, en donde se desarrollan comunidades de microorganismos especficas, organizados en tres
diferentes zonas a lo largo de la columna.

Equipo 6

Columna 1
En consecuencia en las columnas se presentaron diferentes cambios durante todos los das,
algunos ms significativos que otros, en la columna 1 el indicador de xido reduccin (azul de
metileno) cambio desde el primer da de color azul a gris y as hasta obtener un color negro/gris, por
consecuencia de las bacterias reductoras del azufre (quimiohetertroficas), las cuales pueden
utilizar estos subproductos de la fermentacin (etanol, cido actico, cido succinico, etc) para su
respiracin anaerobia, usando sulfato, u otras formas parcialmente oxidadas de azufre como el
tiosulfato, generando grandes cantidades de SH2 en el proceso. Este SH2 reaccionar con cualquier

hierro presente en el sedimento, produciendo sulfuro ferroso, que da el color negro. De acuerdo a las
tres diferentes zonas a lo largo de la columna, en la zona aerobia se encontraron Naviculas este
gnero es uno de los ms extensos dentro de las algas diatomeas, tambin se encontraron
Diatomeas tabellaria que tambin son algas, estas estaban daadas y no presentaban color, estos
microorganismos son fotosintticas, se pudieron ver partes del fierro. En la zona microaerfila se
encontraron Naviculas y Euglenas, esta ltima es fotohetertrofica y es un miembro de protozoarios.
En la zona anaerobia se observaron protozoarios flagelados. En el portaobjetos se vieron quistes de
amibas y ciliados, los quistes pueden sobrevivir a condiciones ambientales mucho ms duras que la
ameba original.
Columna 2
Para la columna 2 el indicador de xido reduccin (azul de metileno) no tuvo cambios significativos
durante la primer semana paso de azul, azul rey, caf, hubo un momento en que no haba nada,
para despus quedar de color blanco, indicando pobreza de materia orgnica. Al ser enriquecida con
sacarosa en esta columna se observaron burbujas, las cuales indican que hay mucha fermentacin,
al estar enriquecido todos los hetertrofos agotaron el oxgeno, por tal motivo se vieron inhibidos por
los anaerobios hubo una relacin de tipo antagonismo y favorecindose un ambiente anoxico. Al
existir dichas condiciones se desprendi un olor muy desagradable, el cual se debe a los cidos
orgnicos que son subproductos de la fermentacin.
De acuerdo a las tres diferentes zonas a lo largo de la columna, en ninguna de las tres zonas se
encontraron microorganismos, tampoco en el portaobjetos que se encontraba enterrada en el
sedimento, esto no quiere decir que no haban, lo que pudo suceder es que al ser muy pequeos no
fue posible verlos con el objetivo que usamos.
Columna 3
En la columna 3, la cual contena detergente, el indicador oxido siempre se mantuvo en color azul,
no as al realizar la ltima lectura ya que presento un color azul/blanco, el agua siempre permaneci
turbia.
No hubo presencia de microorganismos, ya que sta estaba enriquecida con sulfatos y el detergente
seguramente inhibi la carga microbiana.
Columna 4
Para la columna 4, el indicador oxido reduccin cambio de azul a azul rey en la primera semana,
hasta quedar de color negro indicando que hubo presencia de SH 2 que reacciono con hierro presente
en el sedimento, produciendo sulfuro ferroso, que da el color negro, el agua siempre permaneci
transparente.
Esta columna que se encontraba en total oscuridad, no se observ nada en la zona aerobia ya que
se vio inhibido el crecimiento de microorganismos fotosintticos. En la zona microaerfila se pudo
encontrar mucopolisacaridos con muchas clulas (seguramente con bacterias) las cuales
probablemente eran quimiotrofas.
En la zona anaerobia no se pudo observar nada, en el portaobjetos se tuvo la presencia de
protozoarios ciliados grandes y chicos, quistes de amibas y bacterias.
Si comparamos esta con la primera columna la cual se us como testigo, ambas fueron las que
tuvieron presencia de microorganismos, ya que estas no se vieron afectadas por alguna variable
significativa a excepcin de la luz.

Equipo 2

Columna 1:
En esa columna conservaba la iluminacin al inicio despus se fue presentando turbidez el
sedimento era arenoso caf y posterior a negro eso indica de manera indirecta haba una cantidad
de materia orgnica.
Al trmino de la primera semana se fue presentando turbidez y el precipitado azul sobre el sedimento
fue desapareciendo de la misma manera se fue presentando un poco de burbujeo, las bateras
aerobias consuman poco a poco parte de la materia orgnica disuelta y las fuentes de carbono
adicionales, el oxgeno se fue agotando poco apoco en el fondo y haba una mayor concentracin en
la parte superior.
2
A las dos semanas se present un precipitado negro esto sucede por la reduccin de SO
a

4
H2S el cido sulfhdrico reacciona con el hierro presente en el sedimento formando as el precipitado
(reduccin desasimilatoria) el cual lo realizo las bacteria procariontes en condiciones anxicas, el
olor se hizo ms desagradable por descomposicin de la materia orgnica.
Columna 2:
En esta columna se agreg un extra que fue la sacarosa el cual es un disacrido de glucosa y
fructosa por lo que los hetertrofos se vean favorecidos.
En este columna no se tuvieron grandes cambios el azul de metileno precipito en el la segunda
seccin y posterior mente desapareci en la semana.
En esta columna hay presencia de Clostridium pues esta bacteria es fermentadora de la lactosa una
bacteria quimioorganoheterotrfica liberando materia orgnica en forma de alcoholes, CO 2 y cidos
orgnicos, esto se present en la parte superior de la columna y tuvo el olor ms desagradadle.
La columna termin teniendo un color beige y posterior mente el papel filtro se mantuvo casi intacto,
la columna estaba enriquecida que no pudieron terminar con el O 2 presente, de esta manera no se
present el precipitado negro de H2S.
Columna 3:
En esta columna se agredo detergente, el detergente tiene sulfatos se pudo a ver pensado en una
reduccin desasimilatoria del azufre sin embargo el detergente acta en disminuir la carga
bacteriana por lo que el crecimiento de los microorganismos en la columna se vio afectado y no se
pudo tener un desarrollo completo en ese ambiente.
Al trmino de los 15 das se not una especia de manchas amarillas.
Columna 4:
En esta columna se mantuvo en la oscuridad esto afecto principalmente en la fotosntesis pues por la
bolsa negra no dejaba el paso de luz para realizarla, los pocos organismos que pudieron sobrevivir
fueron quimitrofos los cuales de un cierto tiempo terminaron de consumir el oxgeno que presentaba
su forma de energa.
Una vez que se agot el oxgeno presidente en la columna las bacterias que sobrevivieron fueron
anaerobias, esta columna se cubri de cido sulfhdrico en su totalidad pues carecan de oxigeno de
esto modo se present una reduccin desasimilatoria por parte de desulfovibrio.
Las bacterias Clostridium estn obligadas a estar en las condiciones anaerobias, las clulas
vegetativas mueren al exponerse al oxigeno estas bacterias degradan la celulosa a glucosa y

posteriormente fermenta la glucosa para as poder obtener la energa que necesitan produciendo
compuestos orgnico simples.
CONCLUSION
Los microorganismos observados en las columnas de Winogradsky se encontraban distribuidos
segn sus caractersticas y necesidades fsicas y qumicas. De igual forma se vio la influencia en la
presencia de ciertos microorganismos de acuerdo al tratamiento que se le dio a la columna, es decir
las condiciones del medio en el que se encontraban. Adems, conforme transcurra el tiempo, las
condiciones de las columnas cambiaban, por lo tanto, tambin cambiaba la diversidad microbiana,
aunque algunos microorganismos pudieron haber sido capaces de adaptarse a las nuevas
condiciones del microhbitat.
CUESTIONARIO
1. Describa que es un indicador oxido-reduccin, de dos ejemplos y mencione los
cambios que se observaran en distintos grados de oxidacin.
Los indicadores redox son sustancias que presentan un color bien definido en cada uno de
sus estados de oxidacin (oxidado o reducido). Se utilizan en reacciones que no son coloridas.
Indicador

Color
oxidado

Color
reducido

Azul de
metileno

Azul

Incoloro

Resazurina

Rosa

Incoloro

2. En sus columnas, o en la de sus compaeros, se present crecimiento de

microorganismos con coloracin verde a amarilla en la superficie; verde y/o roja en el
fondo? Mencione a que grupos microbianos pueden pertenecer y explique por qu.
Equipo 1: Columna 1 verde en la superficie y rojo en el fondo.
Equipo 2: Columna 1 coloracin verde y amarilla en la superficie.
Columna 2 poca coloracin verde en la superficie.
Equipo 3: Columna 1 coloracin verde en la superficie.
Equipo 4: Columna 3 coloracin verde en la superficie y en el fondo y columna 1
coloracin verde en el fondo.
Equipo 5:No
Equipo 6:No
Equipo 7: No
Equipo 8: Coloracin verde en la superficie.
Bacterias verdes y purpura del azufre

3. Diga los grupos microbianos (gremios) que se enriquecieron en las columnas de acuerdo al
tratamiento que tuvieron (CaSO4, sacarosa, detergente, iluminacin u obscuridad)

Equipo 6

1. Columna 1: (CaSO4 e iluminacin)

Diatomeas tabellaria (algas)
Naviculas (algas, fotosintticas)
Euglena
Protozoarios flagelados
Ciliados
2. Columna 2: (sacarosa e iluminacin)
Nada
3. Columna 3: (detergente e iluminacin)
Nada
4. Columna 4 (CaSO4 y obscuridad)
Bacterias
Protozoarios ciliados grandes y chicos

Equipo 2
1. Columna 1: (CaSO4 e iluminacin)
Bacterias purpuras del Azufre
Bacterias verdes del Azufre
Diatomeas tabellaria (algas)
Naviculas (algas, fotosintticas)
Euglena
Protozoarios flagelados
Ciliados
Amebas
2. Columna 2: (sacarosa e iluminacin)
Ciliados
3. Columna 3: (detergente e iluminacin)
Bacterias purpuras del Azufre
Bacterias verdes del Azufre
Naviculas
Diatomeas tabellaria (algas)
Thiothix
Ciliados
Protozoarios Ciliados
4. Columna 4 (CaSO4 y obscuridad)
Bacterias purpuras del azufre
Protozoarios ciliados grandes y chicos
Diatomeas
Thiotrix

REFERENCIAS
1. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Formadeprepararlacolumnayejemplosdealgunosmi
croorganismosquesepuedenobservar_21240.pdf, fecha de consulta: 17 de septiembre de
2016

ANEXOS
Equipo 6
Da 0 (05/09/2016)

Da (06/09/2016)

Da (07/09/2016)

Da

(05/10/2016)

Equipo 1
Da 0 (05/09/2016)

Da (06/09/2016)

Da (08/09/2016)

Da (14/09/2016)

Da (19/09/2016)

Da (28/09/2016)

Da (05/10/2016)