Tema 8.

- Oxidaciones,
Reducciones e hidrlisis
OXIDACIONES
- Monooxigenasas dep. CYP450

(tema 7)

- Monooxigenasas dependientes FAD

- OXIDACIONES NO MICROSOMALES
Deshidrogenasas
MonoAminoOxidasas
DiAminoOxidasas
Peroxidasas (cooxidaciones)

Monooxigenasas
dependientes de FAD
Oxidaciones

Enzimas que catalizan la oxidacin de XBs

orgnicos que contienen heterotomos.
TIPOS DE REACCIONES:
-

N-Oxidacin de aminas

S-oxidacin de tioles y disulfuros

P-oxidacin de fosfinas, fosfonatos,

Desulfuracin de tio- y ditio-carbamidas

Otras oxidaciones (iones)

Monooxigenasas
dependientes de FAD, ejemplos
Oxidaciones

Algunas reacciones son catalizadas por

ambas MO: stas y las de Cyt P450
Oxidaciones
catalizadas
por FMPO
N-oxidacin
y Desulfuracin
FMO3

oxidativa.
Ismero trans
(orina de
fumadores)

FMO1
Dos Ismeros
(orina de
fumadores)

Monooxigenasas
dependientes de FAD: estructura,
Oxidaciones

localizacin e isoenzimas
Son protenas monomricas
Llevan un nucleotido de FAD
Estn asociadas al retculo endoplsmico
Presentan diversas isoformas (FMO1, FMO2, etc.)

La isoenzima FMO3 acta frecuentemente en la

biotransformacin de XBs
La deficiencia en FMO3 es posible detectarla con la
aparicin en orina de un metabolito propio del catabolismo
de la ACETILCOLINA, la TMA (sndrome del olor a pescado)

Monooxigenasas
dependientes de FAD
Ciclo cataltico
Oxidaciones

Requieren
NADPH y O2
Son termolbiles,
Sin NADPH a 50C

El hidroperxido
de FAD es un
oxidante fuerte

Peroxi-flavina

FAD
en el Ciclo Cataltico de estas
Monooxigenasas
PARTICIPACIN deL

Oxidaciones

proceso red-ox

Oxidaciones

Caractersticas de las
Monooxigenasas
dependientes de FAD,
contraste con las del Cyt P450
Ambas enzimas actan sobre xenobiticos
Ambas radican en el reticulo endoplsmico
y se aislan en la fraccin microsomal

Metodos de diferenciacin de ambas actividades:

Inhibicin de Cyt P450 con anticuerpos

Desactivacin de las FMO con calor (50C)

Las E del Cyt P450 son inducibles y los

XBs hacen variar su actividad

Las FMO no son inducibles

Oxidaciones
no microsomales
Oxidaciones

Fraccin soluble
Isoenzimas
hepticas

Oxidacin no-microsomal del alcohol etlico

Oxidaciones no microsomales:
Aminooxidasas
Oxidaciones

MAO y DAO, degradacin de aminas

bigenas

Frac. Soluble
Con PPal

Oxidaciones
no microsomales
Aminooxidasas
Oxidaciones

MAO: Son enzimas mitocondriales

Son flavoprotenas
Oxidaciones no microsomales

Fenil-etil-amina

Fenil-acetilaldehido

Reacciones de
cooxidacin: Peroxidasas
Prostaglandina Sintasa
Oxidaciones

Aspirina
inhibe

ciclooxigenasa

ciclooxigenasa

Cooxidacin de acetaminofen
por la Prostaglandina sintasa
(hidroperoxidasa)
Oxidaciones

Prostaglandina G
Ac. araquidnico
2

PG hidroperoxidasa

Acetaminofen

CONJUGADOS
PG hidroperoxidasa

Prastaglandina H

Aspirina
inhibe

Glutation-Stransferasa
N-acetil-benzoquinoneimida

Unin covalente
a macromolculas
Toxicidad celular

Reducciones

R. de Reduccin
Reductasas
aldehidos, cetonas
nitro, azo, metales.

DT-diaforasa
DDT-dehidroclorinasa

Reacciones de reduccin
GRUPOS FUNCIONALES

PROCESOS

Reducciones
Reduccin de aldehidos

Reduccin de cetonas

Reduccin de sulfxidos
Reduccin de disulfuros

Reduccin de alquenos

Azo-reducciones

Nitro-reducciones

PRODUCTOS

Reduccin de quinonas
DT diaforasa
Reducciones

DT-diaforasa
reduce quinonas
a hidroquinonas,
sin generar
radicales libres

Menadona

Hidroquinona

Citocromo
P-450 reductasa

A. superxido

Cyt P450 puede

reducir a las
Quinonas con 1 ea semiquinonas.
--> radicales libres

R. perhidroxilo

Perxido de H.
Radical semiquinona
R. hidroxilo

Dao celular por unin

a protenas y DNA

Peroxidacin de lpidos

Formacin de radicales
y especies reactivas de O2
Reducciones

El sistema NADPH-Cyt P450 reductasa puede

reducir a las quinonas con 1 e- hasta radical
semiquinona y en consecuencia se pueden
generar --> radicales libres

Los radicales semiquinnicos forman especias reactivas de

O2 (O2-, H2O2, ) y despus aparece el estrs oxidativo.
O2H2O2
H2O+O2
SOD
Catalasa
El corazn tiene baja actividad SOD, este mecanismo
explica la cardiotoxicidad de la adriamicina y doxorrubicina
El higado est protegido contra el estrs oxidativo por la
presencia de DT-diaforasa (formacin de hidroquinonas).
Las hidroquinonas son sustratos fciles de las reacciones
de fase II: conjugaciones

Deshalogenacin reductora
del DDT a DDE
Reducciones

DDT-Dehidroclorinasa, fraccin
soluble, requiere glutation reducido,
es estereoespecfica (pp-DDT).
DDT-DESHIDROCLORINASA

La actividad de esta enzima est relacionada con la

resistencia al DDT en insectos
En algunos casos se ha demostrado que la proteina
recombinante GSTe2 posee actividad DDT dehidrochlorinasa

Metabolismo del DDT

en diferentes ambientes
Reducciones

DDT-dehidroclorinasa

Deshalogenaciones
del DDT:
aerobia y anaerobia

Reacciones de
Hidrlisis

hidrlisis

Catalizadas, en general, por Hidrolasas,

en fracciones soluble y microsomal.

Hidrlisis de steres:
Hidrlisis de amidas.

Esterasas:

ESTERASAS
AMIDASAS

Carboxilesterasas (steres)
Non-carboxylesterases
Acetilcolinesterasa (ACh)
paraoxonasa/arilesterasa

En relacin con los XBs, las carboxiesterasas:

A-Esterasas:
B-esterasas:

(CYS) hidrolizan steres alifticos

(SER) hidrolizan ms tipos de steres
y SON INHIBIDAS por Organo-P
i.e., Acetilcolinesterasa

Esterasas
Hidrolizan steres: organofosforados, carbamatos, etc

Hidrlisis

Hidrlisis

Localizacin

de la carboxiesterasa
en el retculo endoplsmico

Citosol

Carboxilesterasa

Sitio de unin

Producto

Sustrato

Hidrlisis de steres
por acetilcolineterasa
Hidrlisis

La acetilcolinesterasa tiene un OH de un resto de SER en el

centro activo, es una esterasa tipo B.
En relacin con los XBs:
A-Esterasas:
con CYS
Hidrolizan a los OP
B-esterasas:
con SER
SON INHIBIDAS por OP
i.e., Acetilcolinesterasa

Hidrlisis

Biotransformaciones del
Malation en diferentes
especies animales
Malation

Los mamferos
tienen mas
actividades
carboxiesterasas
o esterasas tipo A,
que les permite
degradar ms
fcilmente a los
steres,
organofosforados
y carbamatos

INSECTOS

oxidacin

Hidrlisis
esterasas

MAMFEROS

Malaoxon

Relacin de las esterasas

con la toxicidad
Hidrlisis

Los animales con mayores niveles de esterasas en

plasma son los menos susceptibles a la toxicidad por
compuestos tipo ster.
Los mamferos tienen altos niveles de esterasas en
plasma.
Las aves y los insectos tienen bajos niveles de esterasas
A en plasma.
i.e., Los insectos resistentes al malation
suelen tener altos niveles de esterasas tipo A.
Las carboxiesterasas determinan el comportamiento de la actividad
de muchos principios activos.
ANESTESICOS
procaina, se hidroliza rpido
procainamida, se hidroliza mas lento y llega a circular

Relacin de las esterasas

con la toxicidad
Hidrlisis

Las carboxiesterasas determinan el comportamiento de la

actividad de muchos principios activos.
ANESTESICOS
procaina, se hidroliza rpido
procainamida, se hidroliza mas lento y llega a circular
La transesterificacin (hidrlisis en presencia de R-OH) puede
generar problemas de toxicidad, I.E.
Cocaina y etanol, se potencin la accin: la etilcocaina es
mas lipfilica que la cocaina

Epoxi hidrolasas
Hidrlisis

Estas
enzimas
detoxifican
epoxis Son
estereoespecficas
e
inducibles

Los derivados epoxi son electroflicos

reactivos con biomolculas y txicos
Hidrlisis de epxidos por accin de la
epoxi-hidrolasa.

Formacin de derivados
carcingenos del benzopireno
Hidrlisis

Los benzopirenos pueden seguir varias vas

de transformacin
NO Epoxi
hidrolasa
Epoxi
hidrolasa

Benzo(a)pireno

7,8-0xido-Benzo(a)pireno

7,8-Dihidrodiol-Benzo(a)pireno

7,8-Dihidrodiol-9,10-epoxi
Benzo(a)pireno
Resistente a hidroxilacin
Por epoxi hidrolasa
Unin covalente a DNA

Epoxi
hidrolasa

Mutacin de el condon 12
del oncogen H-ras

Tumor piel y pulmn

4,5-oxido-Benzo(a)
pireno

4,5-DihidrodiolBenzo(a)pireno