Ekstrak Dragons Blood mengandung

efek antitrombotik, mempengaruhi fungsi

agregasi platelet dan aktivitas
antikoagulan
AHMAD SATRIO
1211014015

Metode yang digunakan

pada jurnal ini
1. Efek antitrombotik EA dan PB pada tikus
menggunakan trombosis vena cava inferior model
in vivo
2. Efek antitrombotik EA dan PB pada mencit in vivo
3. Pengaruh EA dan PB pada adhesi platelet,
agregasi, dan sekresi hormon dalam darah stasis
pada tikus kelompok Model
4. Pengaruh EA dan PB di FIB, PT dan APTT di stasis
darah
kelompok tikus model
5. Analisis statistik

Efek antitrombotik EA dan PB pada tikus menggunakan

trombosis vena cava inferior model in vivo
Sebanyak 30 tikus jenis Wistar dibagi menjadi 5 kelompok (n = 6 untuk setiap
kelompok). Kelompok 1 (kelompok kontrol) dan kelompok 2 (kelompok
model) yang menerima 0,5% CMC-Na dengan volume yang sama.
Kelompok 3 (kelompok positif), 4 (kelompok EA) dan 5 (kelompok PB)
diberikan secara oral Xuesaitong tablet, EA dan PB masing-masing 0,10, 1,07
dan 0,82 g/kg/hari .
Semua kelompok diberikan secara oral sekali sehari selama 7 hari.
Pada hari ke-5 setelah pemberian, kelompok model stasis darah akut
dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya. Secara singkat, semua
kelompok kecuali kelompok kontrol yang diinjeksikan dengan 0,8 ml/kg
adrenalin hidroklorida dua kali dengan
selang waktu 4 jam. Setelah injeksi pertama, tikus - tikus tersebut dibiarkan
berenang ke dalam air es selama 5 menit, dalam keadaan puasa.
Semua tikus dibius dengan natrium pentobarbital 3% dengan
dosis 40 mg/kg (0,13 ml/100 g, ip) diberikan melalui Vena cava inferior (IVC)
pada semua kelompok sebagai kontrol. Dimana kelompok tersebut terligasi
di pembuluh vena ginjal kiri. Kemudian, tikus dijahit dan diberi makanan
secara normal. setelah enam jam, pembuluh vena yang telah diikat sudah
tersumbat sekitar 2 cm dan telah terbentuk trombus. Berat ditimbang
sebelum dan setelah pengeringan selama 24 jam pada suhu 55 C.

Efek antitrombotik EA dan PB pada mencit in vivo

50 mencit jenis Kunming dibagi menjadi 5 kelompok (n=10
mencit tiap kelompok). Kelompok 1 (kelompok kontrol) dan
kelompok 2 (kelompok model) diberikan 0.5% CMC-Na.
Kelompok 3 (kelompok positif), kelompok 4 (kelompok EA) dan 5
(kelompok PB) diberikan Xuesaitong tablets, EA dan PB melalui
oral 0.23, 2.47 dan 1.89 g/kg/hari. Diberikan sekali sehari selama 7
hari.
Induser trombosis disiapkan seperti yang sudah dijelaskan
sebelumnya. Semua kelompok sebagai kontrol diinjeksikan
dengan 0.1 ml diikuti dengan induser. Kelompok kontrol
menerima NaCl dengan jumlah yang sama. Kemudian, mencit
dibiarkan selama 5 menit dan perhatikan mencit yang
mengalami hemiplegia dan tidak kembali normal setelah 15
menit untuk mengevaluasi efek perlindungan dari ekstrak
Dragons blood. Penurunan reflek menandakan terjadinya
hemiplegia. Paru-paru dan serebrum difiksasi dengan larutan
formalin 10% untuk fotomikrograf patologis

Pengaruh EA dan PB pada adhesi platelet, agregasi, dan sekresi

hormon dalam darah stasis pada tikus kelompok Model
kelompok hewan, administrasi obat dan model yang
sama dengan metode pertama. hiting trombosit dievaluasi
dengan PCE-170 1 jam setelah pemberian terakhir. Kemudian, diukur
lagi setelah adhesi dalam FX4010HS pada 5 rpm selama 15 menit. nilai trombosit
dihitung sebagai berikut: tingkat adhesi platelet = (jumlah trombosit
sebelum adhesi - jumlah trombosit setelah adhesi) / jumlah trombosit
sebelum adhesi 100%.
Darah masing-masing kelompok disentrifugasi selama 5 menit pada 1000 rpm dan
300 l trombosit kaya plasma diperoleh untuk inkubasi pada suhu
37 C. Kemudian, 10 l diagregasi platelet stimulus adenosin difosfat (ADP, 5 M)
ditambahkan ke dalam trombosit kaya plasma. tingkat kolektif maksimum dalam 10
menit itu diukur dan nilai inhibitive dihitung dengan turbidimetri
menggunakan LG-PABER-I analyzer sebagai berikut:. Inhibitive
rate = (tingkat kolektif maks kelompok kontrol - tingkat kolektif maks
Model / kelompok diuji) / tingkat kolektif max dari kelompok kontrol 100%
. Darah tiap kelompok diinkubasi dengan antikoagulan dengan indometasin-EDTA
Na2 dan disentrifugasi pada 3500 rpm selama 15 menit,4 C. Prostasiklin (PGI2) dan
tromboksan B2 (TxB2) hormontingkat dalam plasma diukur dengan menggunakan kit
sesuai dengan instruksi.

Pengaruh EA dan PB di FIB, PT dan APTT di stasis darah

kelompok tikus model

kelompok hewan, administrasi obat dan pemodelan

sama dengan metode yang pertama. Plasma tiap
kelompok diperoleh melalui sentrifugasi pada 3000
rpm selama 15 menit. Fibrinogen (FIB),waktu
protrombin (PT) dan waktu aktivasi tromboplastin
parsial(APTT) diukur dengan menggunakan kit sesuai
dengan petunjuk

Analisis statistik

SPSS13.0 (SPSS, Chicago, IL, USA) digunakan untuk

analisis statistik.Nilai dinyatakan sebagai mean
Standard Deviasi (S.D.) Data dianalisis
menggunakan ANOVA satu arah, diikuti oleh t-test
dua sisi dari mahasiswa untuk dibandingan antara
dua kelompok. p <0,05 adalah dianggap signifikan.

Hasil yang didapatkan pada penelitian di jurnal ini

pengaruh antitrombotik in vivo ekstrak dragon's blood pada tikus yang

berbeda pada kelompok trombosis vena cava inferior

Sebuah trombosis vena cava inferior pada tikus

digunakan untuk menentukan efek antitrombotik dari
fraksi EA dan PB . dibandingkan dengan kelompok
kontrol, kelompok model mengandung jumlah trombus
yang signifikan (p <0,01;. Gambar 2), sesuai dengan
model ini. Efek antitrombotik dari EA dan PB
dibandingkan dengan model dan kelompok positif. EA
memiliki efek antitrombotik signifikan yang sama
besarnya seperti kelompok positif dibandingkan dengan
kelompok model (p <0,05; Gambar 2.). Sebaliknya, efek
antitrombotik dari PB tidak signifikan lebih baik daripada
kelompok model. ini disarankan senyawa antitrombotik
dragon's blood yang terbatas pada fraksi EA.

Efek antitrombotik in vivo dari EA dan PB pada mencit

efek antitrombotik dari fraksi EA dan PB diuji lebih lanjut dengan menggunakan
kelompok model mencit. Delapan puluh persen tikus kelompok model yang telah
terinduksi meninggal setelah 5 menit dan dua puluh persen lainnya tidak pulih dari
hemiplegia dalam 15 menit, yang secara signifikan berbeda dengan kelompok kontrol
(p <0,01; Tabel 1). EA menunjukkan efek pelindung yang signifikan sebagai agen
antitrombotik in vivo dibandingkan dengan kelompok model (p <0,05; Tabel 1), yang
juga kurang signifikan dibandingkan dengan kelompok positif (p <0,01; Tabel 1).
Meskipun PB juga mengurangi angka kematian dan memiliki beberapa pengaruh
pada pemulihan hemiplegia, namun efeknya tidak signifikan (Tabel 1).
pengamatan patologis paru-paru dan serebrum yang sudah terdapat trombosis
menunjukkan bahwa kelompok model tidak hanya berwarna merah dan tercampur
dengan trombus di paru-paru, tetapi juga terdapat perdarahan yang serius, stasis
darah dan trombus yang banyak pada serebrum (Gambar. 3a, d). Mencit yang
diobati
dengan EA memiliki trombus yang lebih sedikit pada paru-paru dan serebrum, serta
menunjukkan efek protektif dan antitrombotik tertentu (Gambar. 3b, e). Sebaliknya,
tikus yang diobati dengan PB menunjukkan perubahan patologis yang lebih serius
seperti perdarahan dan terdapatnya darah dalam paru-paru, serta terdapat banyak
miikrotrombus di serebrum (Gambar. 3c, f). Secara bersama-sama, hasil ini
menunjukkan bahwa EA memiliki efek antitrombotik positif in vivo pada mencit dan
tikus, sementara PB tidak

Efek dari EA dan PB pada adhesi platelet, agregasi, dan

Kegiatan sekresi hormon dalam darah stasis kelompok
model tikus

Untuk mengevaluasi kemampuan mekanisme ekstrak

Dragon's Blood terhadap efek antitrombotik, adhesi
trombosit, agregasi dan sekresi hormon yang
mengatur agregasi platelet dianalisis. Dibandingkan
dengan kelompok model, EA dan PB tidak memiliki
efek nyata pada penurunan fungsi adhesi platelet,
penurunan kadar tromboksan B2 (TxB2), atau
peningkatan prostasiklin (PGI2) (p> 0,05;Tabel 2).
Sebaliknya, EA memiliki dampak yang signifikan
dalam menghambat platelet agregasi (p <0,01; Tabel
2). Ini menunjukkan bahwa efek utama antitrombotik
dari EA adalah untuk mencegah agregasi platelet.

Pengaruh EA dan PB terhadap aktivitas pembekuan darah pada

kelompok model tikus

Selanjutnya, fibrinogen (FIB), waktu protrombin (PT)

dan waktu aktivasi parsial tromboplastin (APTT)
kelompok tikus model dianalisis. Dibandingkan
dengan kelompok model, EA secara signifikan
menurunkan kadar FIB, dan memperpanjang PT dan
APTT dengan besar yang sama dengan kelompok
positif (p <0,05-0,01; Gambar 4.). Sebaliknya, PB tidak
punya pengaruh yang signifikan (p> 0,05; Gambar 4.).
Kesimpulannya, semua hasil ini menunjukkan bahwa
hanya EA memiliki efek antitrombotik dan efeknya
terutama menghambat agregasi platelet dengan
mengurangi kadar FIB serta meningkatkan PT
danAPTT.

Kesimpulan
Kesimpulannya, semnyawa antitriombotik pada EA
yang berasal dari Dragons Bloog bisa digunakan
sebagai obat untuk mencegah stadium lanjut dari
pembentukan trombosis. Proses yang lebih molekular
dari senyawa antitrombotik tersebut yang mencegah
agregasi platelet, koagulasi ekstrinsik dan intrinsik,
membutuhkan penelitian lebih lanjut

TERIMA KASIH