Fraksionasi biomassa merupakan pemisahan komponen utama biomassa tanpa
merusak ataupun mengubah komponen-komponen yang ada didalamnya. Tiga komponen utama biomassa yang akan dipisahkan dalam fraksionasi biomassa yaitu selulosa, hemiselulosa dan lignin. Percobaan fraksionasi memakai bahan baku yaitu ampas tebu sebanyak 40 gram, dengan menggunakan variasi waktu pemasakan 60 dan 75 menit. Kemudian dilakukan perangkaian alat yang terdiri dari reaktor (erlenmeyer 2 L) , kondensor, dan pemanas. Ampas tebu dimasukkan kedalam erlenmeyer 2 L kemudian ditambahkan pelarut asam formiat dengan konsentrasi 98%. Setelah itu pemanas dihidupkan dan katalis HCl dimasukkan kedalam erlenmeyer pada saat refluk pertama kali yaitu ketika bahan mulai mendidih, sekitar 8-10 menit. Waktu reaksi fraksionasi dilakukan dengan variasi yang telah ditentukan. Setelah waktu reaksi dicapai, pulp dan black liquor didinginkan selama 10 menit lalu dipisahkan secara filtrasi. Pulp dibilas dengan akuades sebanyak dua kali pembilasan. Pulp kemudian diblender dan dikeringkan di udara terbuka selama sehari ( 24 jam), kemudian pulp kering di oven hingga beratnya konstan. Black liquor yang didapat disentrifugasi untuk mendapatkan endapan lignin. Yield pulp untuk waktu pemasakan yaitu 70,58% dan waktu 75 menit yaitu 84,42%. Pada recovery lignin digunakan 1:8 dan 1:16 ml (black liquor : aquadest) sebagai larutan pembanding. Pada waktu pemasakan selama 60 menit dengan perbandingan 1:8 ml didapat 46,70% lignin bahan baku, dan perbandingan 1:16 ml didapat 93,38% lignin bahan baku. untuk pemasakan selama 75 menit dengan perbandingan 1:8 ml didapat 39,45% lignin bahan baku dan perbandingan 1:16 ml didapat 94,46% lignin bahan baku. Dari hasil percobaan didapat kesimpulan bahwa semakin lama pemasakan maka jumlah pulp dan lignin yang dihasilkan semakin besar nilai presentasinya, pada proses pemisahan lignin dengan menggunakan perbandingan antara black liquor dengan aquades didapatkan hasil pada rasio 1:16 didapat hasil yang lebih baik. Kata kunci : black liquor, fraksionasi biomassa, selulosa, lignin, pulp