DETERMINACIN Y CUANTIFICACIN DE ACETAMINOFEN POR

ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA
Universidad Del Valle
Facultad De Ciencias Naturales y Exactas
Departamento De Qumica
08/04/2011
RESUMEN
Por espectrofotometra ultravioleta, se determin la concentracin de cetaminofen
(AC) en una muestra de tabletas farmacuticas a partir de las absorbancias obtenidas
por los mtodos de calibracin regular y de adicin estndar, esto se hizo a la longitud
de onda de mxima absorcin (la cual fue a 243nm), obtenindose concentraciones de
(95.23)ppm y un porcentaje de error de 9.05% para el mtodo regular de calibracin y
(100.87)ppm con un porcentaje de 15.51% para la adicin estndar.
Palabras claves: espectrofotometra, acetaminofen, curva de calibracin, adicin
estndar
ANALISIS DE RESULTADOS
El acetaminofn es un frmaco con
propiedades analgsicas que se obtiene
mediante la reaccin del p-aminofenol
con anhdrido actico, producindose la
acetilacin del primero y obtenindose
como productos el paracetamol o
acetaminofen y cido actico.

El acetaminofen se compone de un
grupo aceto unido mediante un enlace
sencilo a un grupo amino que a su ves
liga con un fenol.

Experimentalmente
se realizo la
cuantificacin de acetaminofen en una
muestra farmacutica (acetaminofen)
por el mtodo ultravioleta. Para que una
sustancia absorba las radiaciones
propias del uv se requiere que esta
posea grupos cromoforos, un grupo
cromoforo es aquel que absorbe luz
independientemente de que presente
color o no, Para ello necesitan
electrones que puedan entrar en
resonancia, entonces en general
cuando se habla de un cromoforo se
habla de dobles enlaces conjugados
coplanares presentes en las molculas.
Los llamados grupos auxocromos
tambin cumplen un papel determinante

en la cuantificacin uv, pues estos

amplan
la
conjugacin
de
un
cromforos mediante la comparticin de
electrones de no enlace.
Las transiciones que se dan en el
acetaminofen y que hacen posible su
anlisis por la tcnica ultravioleta son
las siguientes:
n

Correspondientes a un rango de
longitud de onda 150-200 nm: son
caractersticas de hidrocarburos que
poseen tomos con pares de electrones
no compartidos (en el acetaminofen
estos tomos son el N y el O). La
energa necesaria para que se produzca
esta transicin es alta (aunque menor
que en las *) perteneciendo sta a
la regin espectral UV Lejano.

espectro.
Para realizar la cuantificacin del
acetaminofen se hizo uso de un
espectrofotmetro UV-Vis (SHIMADZU1700). Este espectrofotmetro se
constituye de dos fuentes: una lmpara
de deuterio y una de filamentos de
tungsteno. La lmpara de deuterio
produce un espectro continuo en la
regin ultravioleta que va desde unos
160nm hasta el inicio de la regin visible
(375nm). El espectro continuo en esta
regin, se logra excitando una molcula
de deuterio (D2) por medio de una
diferencia de potencial entre un
filamento calentado recubierto de oxido
y un electrodo metlico, dicha excitacin
va seguida de la disociacin de la
molcula excitada para dar dos
especies atmicas, ms un fotn
ultravioleta.
D2 + Energa D2 * D + D + hv

Transiciones n

*y

Son transiciones que se encuentran en

un rango de longitudes de onda 200700 nm: la mayora de las aplicaciones
de espectroscopia UV-Visible estn
basadas en transiciones que ocurren en
esta zona. Se requiere que las especies
participantes aporten un sistema de
electrones (grupos cromforos,
sistemas aromticos multicclicos, etc.).
Las energas de excitacin en las
transiciones * son medianamente
altas, correspondiendo a la regin UV
lejano y prximo, mientras que las n
* son considerablemente menores,
correspondiendo a la regin visible del

Para las mediciones en la regin del

visible, este espectrofotmetro emplea
una
lmpara de filamentos de
tungsteno, esta lmpara emite entre 350
y 2500nm, su distribucin de energa se
aproxima a la de un cuerpo negro y por
tanto depende de la temperatura,
aunque en la mayora de los
instrumentos
de
absorcin
la
temperatura de trabajo del filamento es
de 2870K, este tipo de lmparas
requieren un estricto control del voltaje
pues la salida de energa de ellas varia
de acuerdo a la cuarta potencia de ste.

La seleccin de la longitud de onda de

la radiacin se hace mediante un
monocromador, ste dispositivo es
capaz de resolver longitudes de onda
adyacentes con una anchura espectral
muy angosta.
Los recipientes o celdas que contienen
la muestra eran de cuarzo, se emplea el
cuarzo en las medidas de absorcin
ultravioleta debido a que este material
es transparente en dicha regin, un
material que tambin es transparente en
esta regin es la slice fundida. Para las
medidas en la regin del visible lo ms
comn es emplear vidrios de silicatos
aunque tambin se emplean recipientes
de plstico.
El espectrofotmetro empleado es de
doble haz, estos instrumentos suelen
ser de tipo nulo, en los cuales un espejo
sectorizado rotatorio dirige la radiacin
procedente
de
la
fuente,
alternativamente, a la cubeta de
referencia y a la cubeta de la muestra.
Los pulsos de radiacin se recombinan
por medio de un espejo reticular que
refleja uno de los haces y transmite el
otro hacia el detector. En este tipo de
instrumentos el haz que atraviesa la
referencia se atena mecnicamente
hasta que su intensidad se iguala con la
del haz de la muestra; la anulacin
puede hacerse de forma alternativa
mediante
un
circuito
de
retroalimentacin electrnico que actu
sobre el pulso correspondiente al ciclo
de referencia.
Los instrumentos de doble haz
proporcionan una seal libre, en gran
parte, de las derivas de la fuente y el
detector sin necesidad de una fuente

altamente estable y unos componentes

altamente costosos.
Los instrumento de doble haz resultan
ser mucho mas ventajosos que los de
haz simple puesto que estos necesitan
una fuente estabilizadora de voltaje para
evitar errores que resultaran de
variaciones en la intensidad del haz
entre la medida del blanco y la de la
muestra por su parte el instrumento de
doble haz Compensa todas las
fluctuaciones de la radiacin de la
fuente, as como la deriva del detector y
del procesador; tambin compensa las
variaciones de las distintas longitudes
de onda procedentes de la fuente y su
diseo se adapta bien a un registro
continuo
de
los
espectros
de
transmitancia o de absorbancia.
El sistema de deteccin del
SHIMADZU-1700 se compone de serie
lineal de fotodiodos, stos son
fabricados con silicio y se montan sobre
un chip del mismo material, cada uno de
ellos consiste
en una unin pn
polarizada inversamente, la polarizacin
inversa crea una capa de deplecin que
reduce casi a cero la conductancia de la
unin. Sin embargo cuando incide la
radiacin sobre los fotodiodos se forman
agujeros y electrones que dan lugar a
una corriente que es proporcional a la
potencia radiante. El trmino pn se
refiere a pastillas de tipo p sobre un
sustrato de silicio de tipo n, todo esto
con el fin de originar una regin
superficial consistente en una serie de
elementos colaterales que tienen
dimensiones caractersticas de 2.5 por
0.025mm. Este tipo de detectores son
ms sensibles que un simple fototubo
de vacio pero menos que un tubo
fotomultiplicador.
El procesador de seales es un sencillo
dispositivo electrnico que amplifica la

seal electrnica del detector, aunque

estos dispositivos son sencillos permiten
eliminar
componentes
indeseados
alterando la seal de corriente continua
a alterna (o a la inversa), cambiar de
fase
y
filtrarla.
Asimismo
los
procesadores de seales realizan
operaciones matemticas con la seal
tales como diferenciar, integrar o
convertir en logaritmo. Despus de
procesar la seal, esta se muestra en
un moderno dispositivo de lectura
(display) el cual permite conocer la
lectura y dar los mandos al equipo.
Para la cuantificacin del acetaminofen
se realizo un barrido espectral entre 200
y 300 nm obteniendose un mximo de
absorbancia a 243nm.

Grafica 2. Curva regular de calibracin.

Absorbancia Vs concentracin (ppm).

Se encontr una concentracin del

analito en la muestra correspondiente a
95.23 ppm con un porcentaje de error
igual a 9.05%, este porcentaje se
atribuye a malos manejos de las pipetas
volumtricas y a deficiencias en el
pesaje de la muestra ocasionadas por
falencias en la balanza analtica.
La cuantificacin de la muestra por el
mtodo de adicion estndar (grafica3)
1.5
f(x) = 0.06x + 0.3
R = 0.99

1
0.5
0
0

Grafica 1. Barrido espectral del compuesto

AC. Absorbancia Vs longitud de onda(nm).

Al cuantificar la muestra mediante una

curva regular de calibracin (grafico 2)

1.5
1

f(x) = 0.06x + 0.05

R = 1

0.5
0
2

10 12 14 16 18

8 10 12 14 16 18

Grafica 3. Curva de adicion estndar.

Absorbancia Vs concentracin (ppm)

Obtuvo
una
concentracin
de
acetaminofen igual a 100.87 ppm con
un porcentaje de error de 15,51% el
cual nos indica que el medicamento en
realidad
traa
menos
de
la
concentracin del analito que en su
empaque deca contener (500mg).
CONCLUSIONES
1. La tcnica de analtica por
espectroscopia ultravioleta es
aplicada no solo a elementos
metlicos, sino tambin es
posible
analizar
estructuras

orgnicas complejas, como el

acetaminofen.
2. Los compuestos orgnicos que
tengan una estructura que posea
instauraciones o electrones des
localizados,
absorben
la
radiacin
ultravioleta
siendo
activos en su determinacin por
esta tcnica.
3. La espectrofotometra es un
mtodo analtico indirecto porque
se basa en la medicin de la
absorbancia o transmitancia de
las radiaciones; es de gran
utilidad en la actualidad para la
identificacin de un analito en
una muestra problema. Es el
mtodo ms usado, debido a que
es sencillo, especfico y sensible.
BIBLIOGRAFIA
1.D. C. Harris, J. Chem. Ed. 1978
Anlisis qumico cuantitativo. Paginas:
55, 539.
2.
SKOOG,
HOLLER,NIEMAN.
Principios de anlisis instrumental. 5ta
ed. Editorial Mc Graw Hill. Ao 2001.
Pagina 308.

m= cantidad de lecturas de la muestra

desconocida
Donde SR (desviacin estndar de la
regresin ) y se determina por medio
de la siguiente ecuacin:

ANEXOS
Ecuacin de la recta de regresin
curva de calibracion :
Y= 0,0620 x+ 0,0525
Concentracin de acetaminofen en la
solucin
[AC ]= 0.900 - 0.0525 = 13.66ppm
0.062

S yyb 2 S xx
SR=
n2
Para calcular el vaLor de b en la
anterior ecuacin se tiene que:
b = Sxy = 4,96 = 0.062025
Sxx
80
Calculo de la desviacin
estndar de la regresin.

0.3080,0038(80)
2

13.66 mg x 25 ml
1000ml
= 227.6ppm
1.5ml x 1L
1000mL
Factor de dilucin
227.6 mg/L X 0.1 L = 22.76 mg de AC
Total de AC pesado: 23.9mg
Total de AC macerado: 2863mg

SR=

(22.76mg /23.9mg ) x100= 95.23 %AC

S Xo=0.309

2.5g x 100 = 87.32

2.8630g
95.2387.32
%ERROR=
X 100=9.05
87.32
Desviacin estndar de la
concentracin

SX =
O

SR 1 1 yo y
+ +
b m n
b

Donde
n= num de datos

) S1

xx

S R =0,0447

desviacin estndar de la
concentracin:
S Xo=0.720

1 1 0.9000.672 2 1
+ +
x
1 4
0.062
80

Intervalo de confianza al 95%.

x 0 t n2 S Xo
13,661 4.30 X 0.309

13.661 1.3287
Para el mtodo de adicion estndar:
b = Sxy
Sxx

= 2,0208= 0.06315
32

a = yy -b xy = 0.81-0.06315 x8
a = 0.3048

Ecuacin de la regresin para el

mtodo de adicion estandar:
Y = 0,06315x + 0,3048

Sr

Cuando y = 0
0.3048
|0,06315
|=x=4.82mg/ L

Desviacin estndar de la regresin

= 0,037

1 1 0.9000.81
1
+ +
x
1 5
0,063
32

iguales

0.016+0.05
=0.097
7

|0.0620.063|

1 1
0.097
+
80 32

=0.049

critico (p:0.05 y f:4)=1.46

tcal<<<<critico

Prueba t
b1 b2
Sr

SR=

son

SXo = 0,651

tcal

Ho= Las pendientes

estadsticamente

tcal=

Desviacin estndar de la
concentracin:
S Xo=0.58

Syy b 2 Sxx
n2

100.8787.32
X 100=15.51
87.32

Syy ( yi y prom ) 2

24.11 mg
x 100=100.87 %AC
23.9 mg

0.12890,0039(32)
SR=
3

f1s1 f 2 s2
f1 f 2

Sxx ( xi x prom ) 2

4.82 mg 25
X
X 0.1 L=24.11 mg
L
0.5

ERROR=

b= es la pendiente de la recta
Sr= es el promedio ponderado de las
desviaciones estndar

1
1

Sxx1
Sxx2

Donde
f= grados de libertad, es decir n-2

Conclusin: La hiptesis nula se

mantiene por tanto se concluye que no
hay diferencia entre las dos pendientes
de los mtodos y por consiguiente no
hay efecto matriz.
Tabla1. Datos
calibracin

curva

regular

de

ppm

abs

0.311

0.528

12

0.807

16

1.045

Tabla 2. Cuadro regresin lineal del mtodo regular de calibracin

Tabla3. Datos curva de adicin estndar

ppm
0.00
4.00
8.00
12.00
16.00

abs
0.309
0,600
0,753
1,032
1,356

Tabla 4. Cuadro regresin lineal para mtodo de adicin estndar