Universidade de So Paulo

Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz

Comparao de metodologias para a estimativa do nmero mais

provvel (NMP) de coliformes em amostras de gua

Marina Chiarelli Marquezi

Dissertao apresentada para obteno do ttulo de

Mestre em Cincias. rea de concentrao: Cincia e
Tecnologia de Alimentos

Piracicaba
2010

Marina Chiarelli Marquezi

Bacharel em Cincias dos Alimentos

Comparao de metodologias para a estimativa do nmero mais provvel (NMP)

de coliformes em amostras de gua

Orientador:

Prof. Dr. CLUDIO ROSA GALLO

Dissertao apresentada para obteno do ttulo de

Mestre em Cincias. rea de concentrao: Cincia e
Tecnologia de Alimentos

Piracicaba
2010

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao

DIVISO DE BIBLIOTECA E DOCUMENTAO - ESALQ/USP

Marquezi, Marina Chiarelli

Comparao de metodologias para a estimativa do nmero mais provvel (NMP) de
coliformes em amostras de gua / Marina Chiarelli Marquezi. - - Piracicaba, 2010.
113 p. : il.
Dissertao (Mestrado) - - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, 2010.
Bibliografia.
1. gua 2. Bactrias 3. Coliformes 4. Escherichia coli 5. Qualidade da gua - Metodologia
Ttulo
CDD 628.16
M357c

Permitida a cpia total ou parcial deste documento, desde que citada a fonte O autor

Deus,
que me deu a vida e a sabedoria para chegar at aqui.
Aos meus pais,
pelo carinho, compreenso e apoio.
Dedico.

AGRADECIMENTOS
Ao meu orientador, Prof. Dr. Cludio Rosa Gallo pela amizade, dedicao,
orientao e apoio.
CAPES, pela concesso da bolsa de mestrado.
Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz e ao Departamento de
Agroindstria, Alimentos e Nutrio pela oportunidade e colaborao para o
desenvolvimento deste trabalho.
Aos meus pais, Carlinhos e Cristina por terem me dado a vida, e pelo amor,
carinho, dedicao e compreenso. Por dividirem sempre comigo as alegrias de minhas
conquistas e me apoiarem nos momentos difceis de minha vida. Pelo exemplo de
dignidade e honestidade. Por sempre acreditarem em mim.
Ao meu irmo Fbio e minha cunhada Fabiana, pela fora, unio, amizade e
apoio.
Aos meus amigos Amanda, Filipe, Jean, Lvia, Luciana e Mara que sempre me
deram fora para conseguir chegar aonde cheguei e por estarem sempre ao meu lado.
E a todos os outros amigos no citados pela amizade, companheirismo e apoio.
s colegas de mestrado Bruna Mengai, Bruna Travagin, Tarsila, Milla, Ana Paula,
pela ajuda e amizade. Danielle, pela convivncia quase diria no laboratrio, pela
ajuda constante e amizade.
s tcnicas do laboratrio Clo, Ceclia e Rose, pelas ajudas indispensveis no
laboratrio, pela amizade e convivncia, pela fora e dedicao. Sem vocs seria
impossvel chegar at aqui.
Ao Prof. Dr. Carlos Tadeu dos Santos Dias, pela valiosa ajuda nas anlises
estatsticas.

SUMRIO

RESUMO................................................................................................................9
ABSTRACT...........................................................................................................11
LISTA DE FIGURAS.............................................................................................13
LISTA DE TABELAS.............................................................................................15
1 INTRODUO ..................................................................................................17
2 DESENVOLVIMENTO.......................................................................................19
2.1 Objetivos.........................................................................................................19
2.2 Reviso de Literatura......................................................................................19
2.2.1 Recursos hdricos........................................................................................19
2.2.2 gua e sade pblica..................................................................................25
2.2.3 Contaminao da gua................................................................................29
2.2.4 guas de superfcie.....................................................................................32
2.2.5 gua tratada................................................................................................34
2.2.6 Nascentes (bicas) .......................................................................................38
2.2.7 Microrganismos indicadores........................................................................40
2.2.7.1 Grupo coliforme........................................................................................42
2.2.7.2 Escherichia coli.........................................................................................43
2.2.8 Mtodos para a avaliao da gua..............................................................45
2.2.8.1 Mtodos convencionais para a avaliao da gua...................................46
2.2.8.1.1 Tcnica da fermentao em tubos mltiplos.........................................46
2.2.8.2 Mtodos rpidos substratos cromognicos e fluorognicos..................48
2.2.8.2.1 Colilert (IDEXX).....................................................................................50
2.2.8.2.2. Colitag (HEXIS)....................................................................................53
2.3 Material e mtodos.........................................................................................54
2.3.1 Amostragem................................................................................................54
2.3.2 Coleta das amostras....................................................................................54
2.3.3 Preparao das amostras para anlise.......................................................55
2.3.4 Anlise de coliformes...................................................................................56

2.3.4.1 Tcnica da fermentao em tubos mltiplos (FTM).................................56

2.3.4.2 Colilert.......................................................................................................59
2.3.4.3 Colitag.......................................................................................................62
2.3.5 Anlise estatstica........................................................................................62
2.4 Resultados e discusso..................................................................................62
2.4.1 Comparao das metodologias para anlise de coliformes totais e
E. coli...........................................................................................................62
2.4.1.1 Comparao de metodologia em cada ponto analisado..........................75
2.4.1.2 Anlise estatstica dos mtodos...............................................................79
2.4.1.3 Discusso dos resultados da comparao das metodologias..................85
2.4.2 Comparao entre coliformes termotolerantes e E. coli pelo mtodo
fermentao em tubos mltiplos (FTM).......................................................90
3 CONCLUSO..................................................................................................101
REFERNCIAS..................................................................................................103

RESUMO
Comparao de metodologias para a estimativa do nmero mais provvel (NMP)
de coliformes em amostras de gua
Em quase todos os ambientes aquticos so encontrados diversos
microrganismos, entre eles alguns patognicos ao homem, que tem como rota de
transmisso o ciclo fecal-oral. Pelo fato de a gua ser o alimento mais consumido pela
populao, ela est associada a diversos casos de doenas e de riscos sade
pblica. Assim, o controle da qualidade da gua antes do seu consumo essencial, e
para a garantia de sua qualidade devem ser feitas anlises que buscam indicar a
contaminao por material de origem fecal. O grupo de bactrias mais usado para a
determinao de contaminao fecal o grupo coliformes totais, que tem como
subgrupo os coliformes termotolerantes. A bactria Escherichia coli integrante do
grupo coliforme termotolerante, e a mais indicada para determinao de
contaminao fecal pelo fato de estar presente em grande quantidade em fezes de
humanos e animais de sangue quente. Para a anlise de bactrias do grupo coliformes
totais e E. coli h diversos mtodos, entre eles o mtodo convencional de fermentao
em tubos mltiplos (FTM) e os mtodos rpidos Colilert e Colitag. Este trabalho teve
como objetivo comparar estes trs mtodos para tais anlises em amostras de gua
provenientes de pontos com contaminaes distintas (abastecimento, bica e rio), assim
como comparar as contagens encontradas de coliformes termotolerantes e E. coli pelo
mtodo FTM. Os mtodos rpidos Colilert e Colitag se mostraram equivalentes ao FTM
nas anlises de coliformes totais em amostras de gua provenientes de bica e de
abastecimento, e nas anlises de E. coli em amostras de gua de abastecimento, da
bica e do rio. Para as anlises de coliformes totais em amostras de gua do rio o
mtodo FTM apresentou uma diferena significativa em relao ao mtodo Colilert e
Colitag. Ambos os mtodos rpidos no diferiram entre si. A diferena encontrada entre
estes mtodos nestas anlises pode ter ocorrido devido presena de Aeromonas nas
amostras, que podem ter gerado resultados falso-positivos nos mtodos rpidos,
superestimando a contagem de coliformes totais; ou pela maior capacidade dos
mtodos rpidos em recuperar clulas injuriadas de coliformes totais, detectando uma
quantidade maior destas bactrias. Na comparao das contagens encontradas para
coliformes termotolerantes e E. coli nas mesmas amostras foi encontrada uma diferena
significativa. Este resultado explicado pelo fato de o grupo coliforme termotolerante
incluir bactrias de origem no exclusivamente fecal, tais como Enterobacter e
Klebsiella, o que pode superestimar a contaminao fecal da amostra. J a E. coli tem
origem exclusivamente fecal, sendo mais indicada para tal anlise. Assim, como os
mtodos rpidos se mostraram equivalentes ao mtodo convencional estudado, devese preferir o uso dos mtodos rpidos, que do o resultado em 24 horas, indicando a
qualidade da gua a tempo de evitar o uso desta pela populao. Na escolha entre as
bactrias do grupo coliformes termotolerantes e a E. coli para a indicao da
contaminao fecal, deve-se preferir o uso da E. coli.
Palavras-chave: gua; Coliformes; Metodologia

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ABSTRACT
Comparison of methodologies for estimating the most probable number (MPN) of
coliform in water samples
In almost all aquatic environments are found in various microorganisms, including
some pathogenic to man, which route of transmission is the fecal-oral cycle. Because
the water is the food most consumed by people, it is associated with several cases of
diseases and risks to public health. Thus, control of water quality prior to consumption is
essential, and to guarantee its quality must be made analysis seeking to indicate
contamination by fecal material of origin. The group of bacteria most commonly used for
the determination of fecal contamination is the total coliform group, which has as
subgroup thermotolerant coliforms. The bacterium Escherichia coli is a member of the
group thermotolerant coliform, and is most suitable for determination of fecal
contamination by being present in large quantities in feces of humans and warmblooded animals. For the analysis of bacteria of the group coliform and E. coli there are
several methods, including the conventional method Multiple Tube Fermentation (MTF),
and the rapid methods Colilert and Colitag. This study aimed to compare these three
methods for analysis in water samples from different points with different contamination
(supply, fountain and river) and compare the count found for thermotolerant coliform and
E. coli by the method FTM. The methods Colilert, Colitag and FTM were equivalent in
the analysis of total coliform in water samples from the fountain and supply, and the
analysis of E. coli in samples of supply, fountain and river. For analysis of total coliform
in water samples from the river, FTM method showes a significant difference compared
to the methods Colilert and Colitag. Both rapid methods did not differ. The difference
between these methods in these tests may be due to the presence of Aeromonas in the
samples, which may have generated false-positive results in rapid methods,
overestimating the total coliform count; or the largest capacity of rapid methods in
recovering injured cells of coliforms, detecting a larger amount of these bacteria.
Comparing the scores found for thermotolerant coliform and E. coli in the same samples
was found a significant difference. This result is explained by a thermotolerant coliform
group include bacteria not exclusively fecal origin, such as Klebsiella and Enterobacter,
which may overestimate the faecal contamination of the sample. Since E. coli is
exclusively fecal origin, being more suitable for such analysis. So, as rapid methods
showed to be equivalent to the conventional method studied, one should prefer the use
of rapid methods that give results in 24 hours, indicating the water quality in time to
prevent its use in the population. In choosing between coliform thermotolerant bacteria
and E. coli for the indication of fecal contamination, it is preferable to use E. coli.
Keywords: Water; Coliforms; Methodology

12

13

LISTA DE FIGURAS
Figura 1 - Total de gua na Terra....................................................................................20
Figura 2 - Distribuio de gua doce na Terra................................................................20
Figura 3 - Distribuio de recursos hdricos no mundo...................................................21
Figura 4 - Distribuio de recursos hdricos no Brasil.....................................................22
Figura 5 - Mecanismo de deteco de coliformes totais.................................................51
Figura 6 - Mecanismo de deteco de E. coli.................................................................52
Figura 7 - Resultados da anlise pelo Colilert.................................................................53
Figura 8 - Esquema da determinao do NMP de coliformes totais, coliformes
termotolerantes e E. coli pela fermentao em tubos mltiplos.....................56
Figura 9 - Tubo contendo caldo LST e o tubo de Durhan...............................................57
Figura 10 - Tubo com o Caldo CVBLB positivo...............................................................58
Figura 11 - Tubos com o Caldo EC em banho-maria......................................................58
Figura 12 - Tubos com o Caldo EC positivo e negativo respectivamente.......................58
Figura 13 - Tubos com o Caldo EC sob luz UV...............................................................59
Figura 14 - Esquema da determinao da presena/ausncia de coliformes totais e
E. coli pelo Colilert.........................................................................................59
Figura 15 - Determinao do NMP de coliformes totais e E. coli pelo Colilert................60
Figura 16 - Tubos positivos e negativos para coliformes totais pelo mtodo Colilert......62
Figura 17 - Tubo negativo e positivo respectivamente para E. coli pelo mtodo
Colilert..........................................................................................................62
Figura 18 - Mdias das contagens de coliformes totais nos diferentes pontos
analisados, incluindo os diferentes mtodos utilizados.................................72
Figura 19 - Mdias das contagens de E. coli nos diferentes pontos analisados,
incluindo os diferentes mtodos utilizados....................................................73
Figura 20 - Mdias das contagens de coliformes totais pelos mtodos utilizados
na escala transformada (incluindo todos os pontos).....................................74
Figura 21 - Mdias das contagens de E. coli pelos mtodos utilizados na
escala transformada (incluindo todos os pontos)..........................................75

14

Figura 22 - Mdias das contagens para coliformes totais e E. coli em amostras

de gua provenientes da bica na escala transformada.................................76
Figura 23 - Mdias das contagens para coliformes totais e E. coli em amostras de
gua provenientes do rio na escala transformada........................................78
Figura 24 - Contagens de coliformes totais em cada mtodo dentro de cada ponto......81
Figura 25 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua de
abastecimento...............................................................................................82
Figura 26 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua da bica...............83
Figura 27 - Mdias das contagens de E. coli em amostras de gua do rio.....................84
Figura 28 - Mdias encontradas para as anlises de coliformes termotolerantes e
E. coli.............................................................................................................96
Figura 29 - Mdias encontradas nas anlises de gua da bica......................................97
Figura 30 - Mdias encontradas nas anlises de gua do rio.........................................99

15

LISTA DE TABELAS
Tabela 1 - Distribuio de recursos hdricos e da populao no Brasil...........................21
Tabela 2 - Principais microrganismos patognicos na gua de consumo......................28
Tabela 3 - Padro microbiolgico de potabilidade da gua para consumo humano.......36
Tabela 4 - Resultados das anlises de coliformes totais pelos mtodos Colilert,
Colitag e FTM em amostras de gua da bica e as mdias das
contagens encontradas em cada dia de coleta (NMP/100mL)......................64
Tabela 5 - Resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert, Colitag
e FTM em amostras de gua da bica e as mdias das
contagens encontradas em cada dia de coleta (NMP/100mL)......................66
Tabela 6 - Resultados das anlises de coliformes totais e E. coli pelos mtodos
Colilert, Colitag e FTM em amostras de gua de abastecimento
(NMP/100mL)...............................................................................................68
Tabela 7 - Resultados das anlises de coliformes totais pelos mtodos Colilert,
Colitag e FTM em amostras de gua do rio (NMP/100mL)...........................69
Tabela 8 - Resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert, Colitag
e FTM em amostras de gua do rio (NMP/100mL).......................................71
Tabela 9 - Contagens de coliformes totais em cada mtodo dentro de cada ponto.......80
Tabela 10 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua da bica..............83
Tabela 11 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua do rio.................84
Tabela 12 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli pelo
mtodo FTM em amostras de gua de abastecimento (NMP/100mL)........91
Tabela 13 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli pelo
mtodo FTM em amostras de gua da bica (NMP/100mL).........................92
Tabela 14 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli
pelo mtodo FTM em amostras de gua do rio (NMP/100mL)...................94
Tabela 15 - Mdias encontradas para as anlises de coliformes termotolerantes e
E. coli ..........................................................................................................95
Tabela 16 Mdias encontradas nas anlises de gua da bica.....................................97
Tabela 17 Mdias encontradas nas anlises de gua do rio.......................................98

16

17

1 INTRODUO
A gua considerada um bem essencial para as atividades humanas e
indispensvel para a sobrevivncia do homem (SILVA; SALGUEIRO, 2001). Porm, por
ser o alimento mais consumido pela populao, a gua est associada a grandes riscos
sade pblica. Uma vez contaminada com microrganismos patognicos pode causar
diversos tipos de doenas, podendo at mesmo levar morte. Assim, a gua tambm
pode ser considerada um importante veculo de transmisso de doenas (MACEDO,
2007).
Os microrganismos so encontrados em quase todos os ambientes aquticos,
desde pequenos riachos aos grandes oceanos, uma vez que estes ambientes oferecem
uma grande variedade de habitao e nichos ecolgicos (MENDONA-HAGLER;
HAGLER, 1991).
Segundo a Organizao Mundial de Sade (OMS), cerca de 80% das doenas
relatadas em pases em desenvolvimento tem como veculo de transmisso a gua de
m qualidade, sendo o seu tratamento uma importante ferramenta contra essas
enfermidades (MACEDO, 2007). Por isso, no final do sculo XIX e incio do sculo XX,
a qualidade da gua destinada ao consumo humano se tornou uma questo de sade
pblica (DGUILA et al., 2000; SANTOS, 2007).
Muitos microrganismos veiculados pela gua tm como meio de transmisso a
rota fecal-oral, onde os mesmos so eliminados nas fezes de humanos e animais
contaminados. Assim, a disseminao de patgenos pela gua ocorre atravs da
contaminao desta com esgoto no tratado ou tratado inadequadamente. Uma vez
contaminada com fezes de humanos ou animais, a gua se torna um reservatrio para
diversos patgenos, especialmente aqueles que causam doenas gastrintestinais, tais
como clera, shigelose e leptospirose (TORTORA; FUNKE; CASE, 2005).
A importncia da gua para o homem no se restringe apenas no consumo
direto, mas tambm em atividades como a produo de alimentos, energia, bens de
consumo, transporte e lazer, alm de seu papel na manuteno e no equilbrio
ambiental dos ecossistemas terrestres (LIMA, 2001).
Diversos mtodos microbiolgicos so empregados no controle da qualidade da
gua, e os nveis de contaminantes tolerveis e padres de qualidade so pr-

18

estabelecidos de acordo com seu destino (MACEDO, 2007). Assim, necessrio o

controle da qualidade da gua usada pelo homem, seja ela usada para o consumo,
recreao, irrigao, aqicultura ou outros (RIBEIRO, 2006).
Devido ao fato de ser mais difcil identificar os patgenos presentes na gua, dse preferncia para anlise dos microrganismos indicadores de contaminao, tais
como as bactrias do grupo coliforme (FRANCO; LANDGRAF, 2008). A anlise deste
grupo de microrganismos a mais importante na classificao de uma amostra em
potvel ou no (RIEDEL, 1992)
Dentre as vantagens de usar como indicador de contaminao fecal as bactrias
do grupo coliforme esto os fatos de estas estarem presentes normalmente no intestino
humano e de animais, e serem eliminadas em grandes quantidades nas fezes destes
(3,0 x 108 UFC/g). Essas bactrias tambm prevalecem nos esgotos, podendo ser
quantificadas em gua contaminada recentemente e por mtodos simples. Dentre as
limitaes pode-se citar o fato deste grupo incluir espcies de origem no fecal que
tambm so capazes de se multiplicar em guas poludas (SILVA et al., 2005).
As densidades de bactrias do grupo coliforme e E. coli so usadas para avaliar
o grau de poluio e a qualidade sanitria da gua. Esses resultados tm sido utilizados
como padres para a qualidade bacteriolgica de gua (HUNT; RICE, 2005).
Desta forma, a metodologia utilizada para a anlise de bactrias do grupo
coliforme em gua extremamente importante e deve ser precisa.
Dentre os mtodos usados para a anlise de coliformes esto a tcnica de
fermentao em tubos mltiplos (FTM) e os mtodos rpidos Colilert (IDEXX) e Colitag
(HEXIS). Segundo Greghi (2005), a primeira tcnica muito trabalhosa, e envolve
grandes quantidades de meios de cultura, vidrarias, repiques e necessita de um longo
tempo de incubao (at 96 horas para a enumerao de coliformes totais e fecais). Os
demais mtodos so mais rpidos e prticos, conseguindo-se os resultados em 24
horas.

19

2 DESENVOLVIMENTO
2.1 Objetivos
O objetivo principal deste trabalho foi comparar trs diferentes mtodos para
determinao do nmero mais provvel (NMP) de coliformes (tcnica da fermentao
em tubos mltiplos, Colilert e Colitag) em amostras de gua oriundas de trs diferentes
pontos (abastecimento, bica e rio) quanto equivalncia de seus resultados.
O objetivo secundrio foi comparar as contagens de coliformes termotolerantes e
de E. coli encontradas em amostras de gua de diferentes pontos (abastecimento, bica
e rio) pelo mtodo de fermentao em tubos mltiplos.

2.2 Reviso de literatura

2.2.1 Recursos hdricos
A gua considerada um bem renovvel devido ao ciclo hidrolgico que envolve
esta substncia em seu estado lquido, slido e gasoso. As guas dos rios, oceanos,
mares, lagos e transpirao vegetal so evaporadas, formando as nuvens que
precipitam em forma de chuva. Parte da gua da chuva atinge o solo, infiltra e abastece
as reservas aqferas, e parte tem como destino os rios, lagos, mares e oceanos,
reiniciando assim o ciclo (CONSOLI et al., 2006).
A importncia da gua para todos os seres vivos tambm digna de nota, sendo
sua presena essencial para o funcionamento das atividades celulares e orgnicas.
Alm disso, corresponde a 2/3 da massa corporal do ser humano (VASCONCELOS;
AQUINO, 1995).
No dia a dia, dentre os diversos usos da gua podem ser citados o
abastecimento pblico, industrial e agropecurio, a preservao da vida aqutica, a
recreao e o transporte (VENDEMIATTI, 2003).
Segundo a Universidade da gua (UNIAGUA) (2008) apesar de, no Planeta
Terra, 2/3 ser constitudo de gua, nos oceanos e mares so encontrados 97,5% desse
total, nas geleiras ou regies subterrneas de difcil acesso esto 2,5% e apenas
0,007% da gua doce e disponvel para o uso, em lagos, rios e atmosfera.
A Figura 1 mostra o total de gua na Terra, e a Figura 2, a distribuio da gua
doce.

20

gua doce; 2,50%

gua salgada ;
97,50%

Figura 1 - Total de gua na Terra

Fonte: LIMA, 2001

Outros; 1,20%
gua no subsolo;
30,10%

gua congelada;
68,70%

Figura 2 - Distribuio de gua doce na Terra

Fonte: LIMA, 2001

O consumo de gua no mundo no ano 2000 foi estimado em 3.940 km3, volume
inferior a 10% da gua disponvel no mundo. Este dado d a falsa sensao de que no
h problemas com escassez de gua, porm, como esta distribuda desigualmente
em todo o mundo, assim como a populao mundial, algumas reas sofrem
permanentemente com a sua falta (LIMA, 2001).
No Brasil esto 11,6% da gua doce superficial disponvel no planeta, porm em
nosso territrio ela se encontra distribuda desigualmente, assim como a populao
(Tabela 1) (UNIAGUA, 2008).

21

Tabela 1 Distribuio dos recursos hdricos e da populao no Brasil

REGIO

% RECURSOS HDRICOS

% DA POPULAO

Norte

68,5

6,98

Centro-Oeste

15,7

6,41

Sul

6,5

15,05

Sudeste

42,65

Nordeste

3,3

28,91

Fonte: UNIAGUA, 2008.

A gua tem diversos destinos, sendo o principal em todo o mundo a agricultura
(70%), seguido pelas indstrias (22%), como parte dos produtos elaborados, na limpeza
de matrias-primas e instalaes ou na gerao de energia (vapor), entre outros.
Apenas 8% so destinados ao uso municipal ou residencial, e esse uso desigual para
ricos e pobres (Figura 3) (DAVID et al., 1999; JULIO, 2003; ORGANIZAO DAS
NAES UNIDAS - ONU, 2005; UNIAGUA 2008). A Figura 4 mostra esta distribuio
no Brasil.

Abastecimento; 8%

Indstria ; 22%

Agricultura; 70%

Figura 3 Distribuio dos recursos hdricos no mundo

Fonte: Adaptao UNIAGUA (2008)

22

Abastecimento; 18%

Indstria; 9,50%

Agricultura; 72,50%

Figura 4 Distribuio dos recursos hdricos no Brasil

Fonte: LIMA (2001)

Com o crescimento da populao aumenta tambm a demanda por alimentos,

pressionando a agricultura a produzir mais e conseqentemente a utilizar mais gua na
irrigao. Caso no ocorra o aprimoramento dos meios de irrigao, em 2050 a
Organizao das Naes Unidas (ONU) estima que a demanda da gua para a
agricultura passar de 70% para 90% (RELATRIO..., 2009).
O uso da gua na agricultura freqentemente no sustentvel, esgotando as
reservas de aqferos subterrneos e degradando o ecossistema. Em mdia, para a
produo de 1 quilo de arroz so gastos 2.400 litros de gua, sendo que na ndia so
gastos 3.700 litros de gua para obter a mesma produo (ONU, 2005).
Segundo Macedo (2007),f em pases desenvolvidos a porcentagem de gua
utilizada na indstria supera a da agricultura.
Apesar dos apelos para armazenar e diminuir o uso da gua, este bem est se
tornando cada vez mais escasso e de qualidade inferior a desejvel (FREITAS;
BRILHANTE; ALMEIDA, 2001).
Esse decrscimo na qualidade da gua utilizada pela populao, tanto para
consumo como para recreao e outras atividades, tem sido relacionado ao
desenvolvimento industrial, ao crescimento demogrfico e ocupao de forma intensa
e acelerada do solo, que tem como conseqncia o comprometimento de recursos
hdricos disponveis para consumo humano. Este fato observado principalmente em
pases em desenvolvimento (KINDLER, 1992). Segundo o Programa das Naes
Unidas para o Desenvolvimento - PNUD (2006), cerca de 1,1 bilho de pessoas no

23

mundo (um quinto da populao) no tem acesso gua potvel, e 40% da populao
mundial no tem condies sanitrias bsicas.
Segundo a Organizao das Naes Unidas (ONU), 29 pases j no possuem
mais gua doce para toda a populao. Em 2025, estima-se que esse problema seja
enfrentado por 48 pases e, em 2050, por cerca de 50 pases. O consumo de gua em
pases onde a disponibilidade deste recurso atinge nveis crticos menor, como
observado em pases africanos onde o consumo de 10 a 15litros/habitante/dia. Em
New York (EUA) o consumo de gua per capita dirio de 2.000L (GUA...1999;
COMPANHIA DE TECNOLOGIA DE SANEAMENTO AMBIENTAL CETESB, 2001).
De acordo com a ONU, estima-se que a populao mundial em 2012 chegue a 7
bilhes e em 2050 passe de 9 bilhes. A populao em pases em desenvolvimento em
2009 era de 5,6 bilhes e em 2050 deve chegar a 7,9 bilhes. Nas regies mais
desenvolvidas, a populao em 2009 atingiu 1,23 bilhes, e em 2050 deve atingir 1,28
bilhes. O aumento da populao nestes pases se deve s imigraes de pases em
desenvolvimento, pois sem este fator estima-se que a populao diminuiria para 1,15
bilhes. Com o aumento na populao mundial aumentam tambm a demanda por
gua, alimentos e moradia (CENTRO REGIONAL DE INFORMAES DAS NAES
UNIDAS UNRIC, 2010; LIMA, 2001).
Cerca de 1/5 da populao mundial no tem acesso gua potvel (ONU, 2006)
e de acordo com um artigo publicado no jornal O Globo, Relatrio...(2009), a ONU
prev que mais da metade da populao mundial (cerca de 3 bilhes de pessoas),
sofrer com a escassez de gua em 2025. Este ser o resultado das secas, do
aumento populacional, da crescente urbanizao, das mudanas climticas, da
proliferao indiscriminada do lixo e da m administrao dos recursos.
Cerca de 300 milhes de pessoas na frica j no tem mais acesso gua
potvel e meio bilho de pessoas sofrem com falta de saneamento bsico. Pases como
Mauritnia,

Tunsia,

Uzbequisto

Jordnia

apresentam

as

mais

baixas

disponibilidades hdricas por habitante (menos de 500m /hab/ano), seguidos da Arglia,

Paquisto e Lbano (de 500 a 1000m3/hab/ano). Em 11 pases da frica e em 9 do
Oriente Mdio j no h mais gua suficiente, e no Mxico, Hungria, ndia, China,

24

Tailndia e Estados Unidos a situao j crtica (LIMA, 2001; ONU, 2005;

RELATRIO..., 2009; UNIAGUA, 2008).
O consumo mdio de gua no mundo aumenta com o aumento da renda per
capita, sendo que

para

populao de

baixa renda

o consumo

de

386m3/habitante/ano, para a de mdia renda, 453m3/habitante/ano e de alta renda

1.167 m3/habitante/ano (UNIAGUA, 2008).
Apesar da gua ser um dos poucos produtos que consumido por toda a
populao, sem exceo (PARSEKIAN, 1998), nem todos tem acesso gua de
qualidade, sendo que trs bilhes de pessoas usam guas contaminadas,
principalmente por poluio biolgica devido descarga de esgotos domsticos em rios
sem o devido tratamento. Em pases em desenvolvimento, aproximadamente 90% dos
esgotos in natura so lanados nos cursos dgua, resultando em mais de 5 milhes
de mortes anuais devido a doenas de veiculao hdrica. Pelo menos da
humanidade ainda no tem acesso a gua potvel e saneamento (JULIO, 2003).
De acordo com a World Health Organization (WHO) (2009), 2,4 bilhes de
indivduos no tm acesso ao saneamento bsico, sendo a maioria dessas pessoas
encontrada em pases em desenvolvimento. Cerca de 1,5 milhes de crianas morrem
por ano de diarria, o que corresponde a 15% das mortes de crianas de at 5 anos em
pases em desenvolvimento.
De acordo com o Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE) (2009a),
no Brasil h 56,3 milhes de domiclios, onde 16,7% no so atendidos pela rede geral
de abastecimento de gua, 26,4% no possuem rede geral de esgoto sanitrio e 12,5%
no tem coleta de lixo.
Dos municpios urbanos, 91,4% tem abastecimento de gua, e dos rurais, 25,7%.
A coleta de esgoto atende 75% dos municpios urbanos e 16% dos rurais. Apenas 14%
dos municpios brasileiros possuem estaes de tratamento de esgoto e apenas 35%
de todo o esgoto coletado recebe algum tipo de tratamento. Estes dados revelam que
milhes de pessoas no tem acesso gua potvel, o que leva grande maioria desta
populao a consumir guas oriundas de poos e nascentes. neste quadro de falta de
distribuio de gua potvel e de coleta e tratamento de esgoto que so registrados
inmeros casos de doenas intestinais e outras (BRASIL, 1998; BRASIL, 2006).

25

Conflitos blicos devido escassez de gua j so registrados em algumas

regies do mundo, sendo o mais grave vivenciado por israelenses e palestinos, pois
seus mananciais dependem de acordos entre Jordnia, Sria, Lbano, Egito e Arbia
Saudita. O territrio palestino, que controlado por Israel desde 1967, a rea de
recarga dos aqferos da regio, que caracterizada pela escassez em recursos
hdricos (LIMA, 2001).

2.2.2 gua e sade pblica

Dentre todas as substncias ingeridas pelo homem, a gua a que aparece em
maior quantidade e tambm a principal substncia excretada pelo homem. Diariamente
o ser humano chega a ingerir mais de 2 litros de gua, ou cerca de 3% de seu peso
corporal, e em torno de 80% deste peso gua. Assim, a gua est sempre em contato
direto com o homem, o que justifica o fato de os parasitas micro e macroscpicos a
escolherem para ento entrarem em contato com o homem e assim contamin-lo. O
homem fica freqentemente exposto aos contaminantes qumicos e microbiolgicos
presentes na gua (RIEDEL, 1992).
Em pases em desenvolvimento, o maior veculo de transmisso de
microrganismos patognicos a gua distribuda populao, embora a falta de
saneamento e os alimentos tambm sejam importantes veculos (ASHBOLT, 2004).
Em 2000, o nmero de pessoas atendidas pela rede de abastecimento pblico
de gua era de 4,9 bilhes (82% da populao mundial), e 3,6 bilhes de pessoas
(60%) tinham acesso ao saneamento bsico. Das doenas diarricas ocorridas em todo
o mundo, 88% so decorrentes do consumo de gua de m qualidade, falta de
saneamento ou higiene (WHO, 2002). Segundo a ONU, cerca de 87% da populao
mundial tem acesso gua potvel e 40% (2,6 bilhes de pessoas) no tem acesso a
instalaes sanitrias adequadas (ONU, 2010).
A grande maioria das doenas em pases em desenvolvimento (80%) devido
qualidade insatisfatria da gua, resultando em 3 milhes de mortes precoces por ano.
Por dia morrem cinco mil crianas de diarria em todo o mundo, sendo que 10% destes
casos poderiam ser evitados com saneamento bsico e melhores condies de higiene
(DI BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005; RELATRIO..., 2009). Nestes locais

26

ainda so encontradas reas urbanas densamente povoadas e com saneamento ainda

precrio, onde a gua apontada como a responsvel por um grande nmero de
doenas de veiculao hdrica (FREITAS; BRILHANTE; ALMEIDA, 2001).
Aproximadamente 3,1% das mortes em todo o mundo (1,7 milhes) so
atribudas m qualidade da gua, saneamento ou higiene. Cerca de 99,8% destas
mortes so em pases em desenvolvimento, sendo que 90% destas so de crianas
(WHO, 2002).
De acordo com Kindhauser (2003), em 2001, 14,7 milhes de pessoas morreram
no mundo em decorrncia de doenas infecciosas, sendo que o simples acesso gua
e alimentos livres de contaminao fecal seria suficiente para evitar quase 2 milhes de
mortes. Das 14,7 milhes de mortes, 1,9 milhes foram decorrentes de doenas
diarricas, 3,9 milhes por doenas respiratrias, 2,9 milhes por AIDS, 1,6 milhes por
tuberculose e 1,1 milho por malria. Estas 5 doenas foram responsveis por
aproximadamente 78% das mortes devido s doenas infecciosas.
No Brasil, 60% das internaes hospitalares esto relacionadas com a
deficincia de saneamento bsico, sendo que cerca de 90% destas doenas ocorrem
devido falta de gua em quantidade e/ou qualidade satisfatria para o consumo. No
Brasil, em algumas regies comum a distribuio de gua que no atende aos
padres de potabilidade (DI BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005).
De acordo com a OMS, no Brasil, cerca de 20 mil crianas menores de 5 anos
morrem anualmente como conseqncia de diarrias, vmitos e desnutrio devido ao
consumo de gua contaminada. Esse elevado nmero de doenas de veiculao
hdrica ocorre especialmente devido falta de saneamento bsico em cerca de 54%
dos domiclios do pas (SILVA; SALGUEIRO, 2001).
De acordo com uma pesquisa realizada pelo IBGE (2002), no Brasil cerca de
97,9% dos municpios so atendidos pelo servio de abastecimento de gua. Apenas
116 municpios no so atendidos, sendo a maioria situada na regio norte e nordeste.
Porm, nesta pesquisa no foi divulgada a cobertura, eficcia ou nmero de ligaes
domiciliares, ou seja, o fato do municpio ser atendido pela rede de abastecimento de
gua no significa que toda a populao deste municpio seja atendida.

27

Em relao aos domiclios, 63,9% dos recenseados em 2000 eram atendidos

pela rede de abastecimento de gua. Porm este atendimento desigual, sendo que na
regio sudeste, 70,5% dos domiclios eram atendidos; na regio sul, 69,1%; na regio
centro-oeste 66,3%; na regio nordeste 52,9% e na regio norte 44,3% (IBGE, 2002).
Em 2008, o percentual de domiclios atendidos pela rede de abastecimento de
gua foi de 83,9%, 0,7% a mais que em 2007. A coleta de lixo atendeu 87,9% dos
domiclios (50,6 milhes), o que significou um aumento de 0,6% em relao a 2007
(IBGE, 2009b).
Muitas cidades no possuem gua potvel para toda a populao devido a falhas
ou deficincia de projeto ou por operao e manuteno inadequadas (DI BERNARDO;
DI BERNARDO DANTAS, 2005).
Dos servios de saneamento bsico oferecidos, o que abrange uma menor
parcela da populao o esgotamento sanitrio. Segundo dados do IBGE (2002),
apenas 52,2% dos municpios eram atendidos por este servio, sendo que somente
33,4% dos domiclios eram atendidos pela rede geral de abastecimento de esgoto, e
este abastecimento, assim como o da gua, desigual em todo o pas. O menor
nmero de municpios atendidos era encontrado na regio Norte (2,4%), seguido da
regio nordeste (14,7%), sul (22,5%) e centro-oeste (28,1%). A regio com um maior
nmero de domiclios atendidos era a sudeste (53,0%), o que ainda pouco, j que
contempla um pouco mais da metade dos municpios da regio.
Por volta de 80% do esgoto lanado em rios, mares, lagos e mananciais no
Brasil no passa por nenhum tipo de tratamento, levando contaminao e
deteriorao da gua usada como fonte de abastecimento (DI BERNARDO; DI
BERNARDO DANTAS, 2005).
Os microrganismos patognicos encontrados na gua so transmitidos
principalmente pela rota fecal-oral, ou seja, so excretados nas fezes dos indivduos
contaminados, que contaminam a gua e o solo. Esses microrganismos so ento
ingeridos atravs de gua ou alimento contaminado, podendo causar enfermidades
diarricas. Assim, a transmisso de microrganismos patognicos pode ocorrer de
pessoa para pessoa ou at mesmo de animal para humanos (WHO, 1996).

28

Diversas doenas podem ser associadas ingesto de gua de m qualidade;

falta de acesso e distribuio de gua, assim como higiene inadequada; falta de
saneamento; contato com guas contaminadas; e gerenciamento inadequado de
recursos hdricos (WHO, 2002). Dentre as doenas de veiculao hdrica pode-se
destacar a febre tifide, clera, salmonelose, shigelose, poliomielite, hepatite A,
parasitoses, giardase e amebases. Vrios surtos dessas doenas j foram registrados,
e em alguns deles a taxa de mortalidade, principalmente a infantil, elevada (FREITAS;
BRILHANTE; ALMEIDA, 2001). Os principais microrganismos patognicos encontrados
na gua de consumo no adequadamente tratada esto descritos na Tabela 2.
Tabela 2 Principais microrganismos patognicos na gua de consumo

BACTRIAS

VRUS

PROTOZORIOS

Campylobacter jejuni

Adenovrus (31 tipos)

Balantidium coli

Escherichia coli

Enterovrus (71 tipos)

Entamoeba hystolitica

Salmonella (1700 spp.)

Hepatite A

Giardia lamblia

Shigella (4 spp.)

Agente de Norwalk

Cryptosporidium spp.

Vibrio cholerae

Reovrus

Yersinia enterocolitica

Rotavrus

Helicobacter pylori

Vrus coxsackie

Fonte: CHAVES, 2004.

Epidemias de veiculao hdrica vm sendo relatadas em diversos pases, sendo

que nos Estados Unidos, entre 1990 e 1992, 1.768 casos de epidemias ocorreram,
provocando 1.091 mortes (MULLER, 1999).
Devido ao fato de a gua destinada para o consumo humano ser um dos mais
importantes veculos de transmisso de doenas, a anlise da qualidade da gua uma
atividade de grande importncia, sendo a deteco de bactrias indicadoras, como as
do grupo coliforme, o mtodo mais indicado, uma vez que elas revelam a possvel
presena de patgenos (GREGHI, 2005).

29

A determinao das caractersticas biolgicas das guas feita atravs de

exames bacteriolgicos e hidrobiolgicos. Os exames hidrobiolgicos identificam e
quantificam as espcies de organismos presentes na gua, tais como plnctons, algas,
protozorios, rotferos, crustceos, vermes e larvas de insetos. Estes exames ajudam a
entender as outras anlises, principalmente no que diz respeito poluio da gua (DI
BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005).
A Organizao Mundial de Sade (OMS) determina que a gua deve passar por
anlises de controle de qualidade regularmente, pois a contaminao varia muito e um
exame nico ou em uma pequena amostra no capaz de determinar a contaminao
desta (CHALMERS; AIRD; BOLTON, 2000).
Assim, toda gua destinada ao consumo humano deve atender aos padres de
potabilidade estabelecidos pela legislao e esto sujeitas a vigilncia da qualidade (DI
BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005).

2.2.3 Contaminao da gua

Dentre as fontes de contaminao dos recursos hdricos, as mais importantes
so os esgotos sem tratamento lanados em rios e lagos; aterros sanitrios, que afetam
os lenis freticos; defensivos agrcolas, que escoam com as guas das chuvas,
atingindo rios e lagos; garimpos e indstrias, que lanam seus resduos txicos e
produtos qumicos em rios, lagos e crregos (EMBRAPA, 1994; ROYAL SOCIETY OF
CHEMISTRY - RSC, 1992).
Dentre as impurezas presentes na gua, vrias so incuas, poucas so
desejveis e algumas so prejudiciais, as quais incluem os vrus, bactrias, parasitos,
substncias txicas e elementos radioativos (RICHTER; AZEVEDO NETTO, 1995).
As chuvas e as mars (no caso de rios que encontram o mar) afetam a
contaminao da gua por E. coli. A enxurrada formada aps um perodo de chuva ou
tempestade capaz de carrear estes microrganismos presentes no prprio solo ou
carrear as fezes de animais depositadas no solo para o rio. As mars, quando
aumentam, elevam o volume de gua do rio, que passa a cobrir uma parte maior de
terra. Ao diminuir a mar, e conseqentemente o volume de gua do rio, o

30

microrganismo presente no solo encoberto carregado para o leito do rio (SOLOGABRIELE et al., 2000).
Sendo a E. coli capaz de crescer em solos secos ou midos, os bancos de terra
que beiram os rios se tornam fontes constantes de contaminao por este
microrganismo (SOLO-GABRIELE et al., 2000).
Segundo Santos (2007), os aumentos da populao e das atividades
econmicas aumentam ainda mais as impurezas encontradas nas guas, o que torna
insegura para consumo direto qualquer fonte de gua superficial, sendo necessria a
realizao de um tratamento prvio desta.
Quando usada como via para a eliminao de excretas e outros dejetos
orgnicos a gua passa a ser um importante veculo de transmisso de muitos
microrganismos, especialmente as bactrias intestinais. Desta forma, o controle
sanitrio exerce um papel importante na difuso destas bactrias. Exame de qualidade
microbiolgica da gua indica a presena de certos grupos de bactrias, assim como a
recente contaminao da gua por material fecal ou matria orgnica (ISAACMRQUEZ et.al., 1994)
As fontes de gua devem ser protegidas de dejetos humanos ou de animais, que
podem conter uma grande variedade de bactrias, vrus, protozorios e helmintos, que
podem ser patognicos ao homem. Falhas na proteo das fontes e no tratamento da
gua podem expor a populao a riscos de desenvolverem doenas intestinais ou
infecciosas. Os grupos de riscos para estas doenas so principalmente crianas,
idosos, pessoas com a sade debilitada ou que vivem em condies de saneamento
precrio. Para essas pessoas, a dose infectiva menor que para o resto da populao
(WHO, 1996).
Como o risco de adquirir tais doenas est relacionado com o consumo de gua
contaminada com excretas humanas ou de animais, o fornecimento de gua de
qualidade microbiolgica satisfatria para toda a populao reduz estes riscos (WHO,
1996).
Dos agentes biolgicos encontrados na gua contaminada, os principais so as
bactrias patognicas causadoras de doenas, como enterites, diarrias infantis,
doenas epidmicas (febre tifide e clera, por exemplo). Tambm podem ser

31

encontrados vrus, como os da poliomielite e da hepatite infecciosa. Dentre os parasitas

ingeridos com as guas contaminadas podem estar a Entamoeba hystolitica causadora
da amebase (DGUILA et al., 2000) e a Giardia lamblia, causadora da giardase.
As doenas relacionadas com a gua so classificadas em doenas de
transmisso hdrica e doenas de origem hdrica. As doenas de transmisso hdrica
geralmente so causadas por microrganismos patognicos presentes nas fezes
humanas e de animais, que contaminam a gua ao entrar em contato com ela. Neste
caso, a gua atua como veculo do agente infeccioso. Essas doenas geralmente
causam problemas no aparelho gastrintestinal e so causadas por bactrias, vrus,
protozorios e helmintos (VERTONI; GALLO, 1994).
As doenas de origem hdrica so aquelas causadas por substncias qumicas,
orgnicas ou inorgnicas, presentes na gua em concentraes inadequadas. Essas
substncias podem ser originrias do prprio manancial ou resultarem de poluio.
Alguns exemplos dessas doenas so: saturnismo (provocada pelo excesso de chumbo
na gua), a meta-hemoglobinemia (altas concentraes de nitrato) e outras doenas
com efeitos a curto ou longo prazo (VERTONI; GALLO, 1994)
A qualidade da gua definida por sua composio qumica, fsica e
microbiolgica, sendo que as caractersticas exigidas dependem da sua utilizao. Para
o consumo humano a gua deve ser livre de qualquer matria suspensa visvel, cor,
gosto e odor, organismos patognicos e substncias orgnicas ou inorgnicas
prejudiciais sade (RICHTER; AZEVEDO NETTO, 1995).
A gua pode ser classificada em potvel, poluda, nociva e contaminada. Para
ser considerada potvel a gua deve seguir os padres encontrados na Portaria n 518
de 25 de maro de 2004 (BRASIL, 2004). A gua poluda aquela que apresenta
modificaes fsicas ou qumicas que tornam esta gua imprpria para determinados
fins, porm no necessariamente prejudicial sade. A gua nociva aquela que,
devido presena de certos agentes fsicos, qumicos ou biolgicos, se torna prejudicial
sade. A gua contaminada considerada um veculo de transmisso de doenas por
conter bactrias, ovos ou larvas de helmintos ou vrus (RIEDEL, 1992).
O controle das doenas veiculadas pela gua se baseia na interrupo do ciclo:
fezes humanas ou de animais suprimento de gua consumo por humanos, que

32

podero adoecer e eliminar estes microrganismos em suas fezes, recomeando o ciclo

(PELCZAR; CHAN; KRIEG, 1996).
Em relao aos alimentos, a gua utilizada na lavagem, manipulao e preparo
destes no deve ser um veculo de transmisso de microrganismos ou substncias
qumicas que podem causar danos sade do consumidor. Desta forma, deve-se fazer
o uso de gua potvel para estes fins. Na agricultura, a qualidade da gua tambm
deve ser monitorada, devendo-se evitar o uso de gua contaminada ou nociva, para
que estas no ajam como veculo de transmisso de microrganismos para as plantas,
que sero posteriormente consumidas pelo homem (RIEDEL, 1992).

2.2.4 guas de superfcie

Com o aumento populacional e da industrializao a contaminao dos
mananciais tem se intensificado cada vez mais, tornando indispensvel o tratamento da
gua antes do consumo (DI BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005).
De acordo com David et al. (1999), para que as guas superficiais de rios e lagos
possam ser usadas para abastecimento pblico e consumo humano elas devem estar
dentro de certos padres fsicos, qumicos e microbiolgicos, para ento serem
consideradas potveis.
As caractersticas do manancial a ser utilizado para a captao de gua a ser
tratada esto intimamente ligadas com a possibilidade ou no da gua, depois de
tratada, ser considerada potvel (MACEDO, 2007).
O Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA) classifica os mananciais de
gua para abastecimento pblico em todo o Brasil atravs da Resoluo n357 de 17
de maro de 2005 e, em cada classe so estabelecidos limites para parmetros de
qualidade (BRASIL, 2005).
No Brasil, um dos maiores problemas de contaminao na gua se deve ao fato
de 80% do esgoto ser lanado em rios e mares (ALVES, 2007). Dentre os
microrganismos de origem intestinal ou de esgoto encontrados na gua podem ser
citados: Salmonella, Shigella, Streptococcus, Clostridium, Escherichia, Aerobacter,
Proteus (AMERICAN WATER WORLD ASSOCIATION, 1964).

33

As alteraes de suprimento alimentar, temperatura, luz, sedimentao e

atuao de outros seres na gua afetam o crescimento e desenvolvimento das
bactrias (AMERICAN WATER WORLD ASSOCIATION, 1964).
Segundo Solo-Gabriele et al. (2000), o nmero de E. coli na gua de rios
bastante varivel, e a maior fonte deste microrganismo o prprio solo. Fatores
ambientais como temperatura e regime de chuvas podem levar a um aumento neste
nmero, uma vez que as chuvas so capazes de carregar as fezes localizadas nas
margens ou em bancos de areias de rios e represas ou infiltrarem nos solos, criando
uma conexo indireta com o rio. O nmero de E. coli no rio se eleva aps uma
tempestade.
Muller (1999) analisou diferentes tipos de gua (superficial e gua tratada) em
duas estaes de tratamento de gua (ETA) na regio metropolitana de So Paulo.
Foram encontrados coliformes totais e E. coli em todas as amostras de gua superficial
(que abasteciam as ETAs estudadas). Em uma das ETAs, a contagem de E. coli em
todas as amostras de gua bruta analisadas estava acima do tolerado pela Resoluo
n20 de 18 de junho de 1986 do CONAMA, vigente no perodo (BRASIL, 1986). Para
guas superficiais captadas para abastecimento, tal legislao (revogada) previa que a
contagem de coliformes fecais no deveria exceder 1000/100mL de gua em 80% ou
mais de pelo menos 5 amostras mensais colhidas em qualquer ms. Caso no
houvesse a possibilidade de se realizar as anlises de coliformes fecais, o ndice limite
era de at 5000 coliformes totais/100mL de gua em 80% ou mais de pelo menos 5
amostras mensais colhidas em qualquer ms.
A resoluo n 357 de 17 de maro de 2005, do CONAMA, que revoga a
resoluo anterior e est em vigor atualmente, prev que, para gua destinada ao
abastecimento no dever exceder o limite de 1000 coliformes termotolerantes/100 mL
de gua em 80% ou mais de pelo menos 6 ou mais amostras coletadas durante o
perodo de um ano, com freqncia bimestral. A deteco de E. coli pode ser usada
como substituta para a deteco de coliformes termotolerantes (BRASIL, 2005).

34

2.2.5 gua tratada

Nem sempre a gua encontrada na natureza considerada potvel, sendo ento
necessrios tratamentos que a torne adequada ao consumo humano e que garantam
sua qualidade desde a sada da estao de tratamento at o consumo (RIEDEL, 1992).
As guas destinadas ao abastecimento pblico so provenientes de mananciais
superficiais, tais como rios e lagos, que apresentam uma grande variabilidade na
salinidade, presena de metais e no metais, substncias em suspenso, presena de
colides e microrganismos. Desta forma, antes de serem usadas pela populao elas
devem estar dentro de padres qumicos, fsicos e microbiolgicos, para ento serem
consideradas potveis (DAVID et al., 1999; PARSEKIAN, 1998).
A gua tratada destinada ao abastecimento pblico captada de mananciais
superficiais e bombeada para a estao de tratamento de gua, onde produtos
qumicos so adicionados a fim de trat-la (PARSEKIAN, 1998).
Nesta etapa de tratamento a gua submetida filtrao (eliminao de
impurezas de grande dimenso), adio de coagulante (auxilia a precipitao de
impurezas), decantao (separa as impurezas precipitadas), adio de alcalinizantes
(neutraliza os coagulantes) e desinfeco (elimina os microrganismos) (DAVID et al.,
1999).
O objetivo principal do tratamento de gua torn-la adequada para o consumo
humano, uma vez que esta deve ser potvel quando chega ao consumidor. Porm,
grande parte desta gua destinada para outros fins, tais como lavagem, jardinagem,
usos industriais, e recreao (PARSEKIAN, 1998; RIEDEL, 1992).
Devido contnua queda na qualidade dos recursos hdricos, a avaliao da
qualidade higinico sanitria da gua produzida pelas estaes de tratamento uma
atividade de extrema importncia (CANTUSIO NETO, 2001).
A qualidade da gua que chega para a populao depende da seleo e
proteo eficaz e permanente dos mananciais, do tratamento adequado, da concepo,
construo e explorao correta de sistemas de distribuio, manuteno de redes de
tubos e reservatrios de armazenamento, diagnstico peridico e sistemtico da
qualidade da gua distribuda e da realizao de aes corretivas caso seja
diagnosticada alguma inadequao no processo. O diagnstico de inadequao feito

35

por freqentes anlises fsicas, qumicas e microbiolgicas da gua desde a recepo

desta na estao de tratamento at a sua distribuio, o que inclui as etapas do
tratamento (CHAVES, 2004).
A qualidade da gua que chega populao nem sempre a mesma de quando
ela saiu da ETA. Isto ocorre devido contaminao por bactrias nas paredes das
tubulaes e nos reservatrios, por falhas no processo de tratamento ou por possveis
fontes de contaminao no sistema de distribuio. Estas bactrias podem resistir s
etapas de tratamento da gua atravs da associao com outros organismos ou
partculas em suspenso, formando comunidades microbianas denominadas biofilmes.
Sob a forma de biofilmes, os microrganismos resistem clorao e as demais etapas
de tratamento de gua e podem ser introduzidos gua circulante por arraste ou por
eroso, podendo causar danos sade da populao (ALVES, 2007; BURBARELLI,
2004; CHAVES, 2004).
Muitos microrganismos podem no ter capacidade de se desenvolverem e
multiplicarem no sistema de distribuio de gua, porm podem ser capazes de
sobreviverem neste ambiente por longos perodos e, assim que encontram um
ambiente vivel, voltam a se desenvolverem (ALEGRE, 1994 apud CHAVES, 2004).
Mas nem todos os microrganismos encontrados na gua so prejudiciais ao homem
(CHAVES, 2004).
O Ministrio da Sade, atravs da Portaria n 518 de 25 de maro de 2004,
determina o nmero mnimo de amostras ou planos de amostragem, alm dos padres
para gua potvel restritos ao trecho que se inicia na captao e se encerra nas
ligaes domiciliares. A gua potvel definida como a gua destinada ao consumo
humano cujos parmetros microbiolgicos, fsicos, qumicos e radioativos atendam ao
padro de potabilidade e no oferea riscos sade (BRASIL, 2004). Os padres
microbiolgicos da gua potvel esto descritos na Tabela 3.

36

Tabela 3 - Padro microbiolgico de potabilidade da gua para consumo humano

PARMETRO

VMP(1)

gua para consumo humano(2)

Escherichia coli ou coliformes
termotolerantes

Ausncia em 100mL

(3)

gua na sada do tratamento

Coliformes totais

Ausncia em 100mL

gua tratada no sistema de distribuio (reservatrios e rede)

Escherichia coli ou coliformes

Ausncia em 100mL

termotolerantes (3)
Coliformes totais

Sistemas que analisam 40 ou

mais amostras por ms:
ausncia em 100mL em 95%
das amostras examinadas do ms;
Sistemas que analisam menos
de 40 amostras por ms:
apenas uma amostra poder
apresentar mensalmente resultado
positivo em 100mL

FONTE: Brasil (2004)

NOTAS: (1) Valor mximo permitido.
(2) gua para consumo humano em toda e qualquer situao, incluindo fontes individuais como
poos, minas, nascentes, dentre outras.
(3) a deteco de Escherichia coli deve ser preferencialmente adotada.

37

A presena de qualquer microrganismo do grupo coliforme na gua tratada indica

que o tratamento feito foi inadequado ou que a gua foi contaminada aps a
desinfeco. O grupo coliforme considerado um indicador realista da eficincia do
tratamento da gua, e indica a possvel presena de patgenos no sistema de
distribuio desta (COVERT et al., 1989).
Alves (2007) analisou amostras de gua ao longo dos sistemas de
abastecimento no municpio de Piracicaba, desde a sua captao, tratamento,
distribuio e estocagem residencial, a fim de observar os possveis pontos de
contaminao at o seu consumo. Este estudo evidenciou alguns problemas, tais como
a baixa concentrao de cloro residual nos reservatrios domiciliares, o que aumenta o
risco de proliferao de microrganismos e a presena de microrganismos resistentes ao
tratamento da gua, que apesar de ser considerado eficiente nessa cidade, a presena
desses microrganismos e a sua disseminao na rede de distribuio compromete a
qualidade desta e conseqentemente a sade da populao.
O Instituto Tecnolgico do Estado de Pernambuco ITEP realizou, em 1993,
avaliaes da potabilidade da gua consumida nas residncias, empresas e hospitais,
com o objetivo de traar um perfil higinico-sanitrio. Foram observadas contaminaes
com coliformes totais (64%), Pseudomonas aeruginosa (33%), coliformes fecais (25%)
e Staphylococcus aureus (13%). Nas empresas, 64% das amostras foram consideradas
insatisfatrias. Nas residncias, 50% apresentaram contaminao por coliformes. Estes
altos ndices de contaminao foram devido falta de manuteno da higiene em redes
internas de fornecimento, ou seja, cisternas, caixas dgua, torneiras e bebedouros
(ALVES; ODORIZZI; GOULART, 2002).
Outro problema enfrentado a ocupao desordenada e o uso inadequado do
solo nas proximidades dos mananciais, que levam poluio destes, aumentando o
uso de produtos qumicos e de tecnologias mais avanadas para tornar a gua potvel.
Estes processos refletem no aumento do custo da gua para o consumidor
(PARSEKIAN, 1998).

38

2.2.6 Nascentes (bicas)

Normalmente guas oriundas de poos rasos e nascentes so fontes
susceptveis contaminao. Nesses locais, a gua de escoamento superficial contribui
para o decrscimo da qualidade microbiolgica da gua consumida, uma vez que, com
ela, so tambm arrastadas as fezes humanas e de animais, contaminando as fontes e
nascentes. Como essa gua no passa por um tratamento antes de ser consumida,
aumentam os casos de doenas de veiculao hdrica (AMARAL et al., 2003).
No caso da gua subterrnea (poos, fontes ou nascentes) ser considerada
potvel, esta deve ser protegida contra novas contaminaes, ou seja, o local de sada
da gua deve ser protegido contra a entrada de gua da superfcie (enxurrada) e contra
poeira, insetos e seres vivos (RIEDEL, 1992).
guas subterrneas que brotam nas superfcies dando origem s nascentes so
predominantemente colonizadas por bactrias e algas, prevalecendo os gneros
bacterianos Alcaligenes, Flavobacterium, Acinetobacter, Moraxella, Pseudomonas,
Micrococcus, Nocardia,

Cytophaga,

alm

das bactrias

ramificadas

como

Hypomycrobium, Caulobacter e Gallionella. Em nascentes com alto teor de matria

orgnica

propagao

de

espcies

das

famlias

Pseudomonadaceae,

Enterobacteriaceae e Bacillaceae aumenta (BATISTA, 1996).

O consumo de guas subterrneas tem aumentado muito nas ltimas dcadas, e
a tendncia aumentar ainda mais (LIMA, 2001). Esta fonte de abastecimento e
consumo importante para a populao que no tem acesso rede pblica ou o
fornecimento de gua irregular (FREITAS; BRILHANTE; ALMEIDA, 2001). De acordo
com o IBGE (1994) no Brasil aproximadamente 6,5 milhes de domiclios (19% do total)
eram abastecidos por aqferos subterrneos, sendo que destes, 68,78% estavam
localizados em reas rurais e englobavam 11,94% de toda a populao.
Dentre os municpios brasileiros onde se faz o uso de gua de poos destacamse So Lus (MA), Natal e Mossor (RN), Macei (AL), e cerca de 76% das cidades do
estado de So Paulo, 90% das cidades do Paran e Rio Grande do Sul (LIMA, 2001).
Assim como os mananciais, a qualidade das guas subterrneas cada vez
mais precria. Este quadro ainda mais grave em regies onde o tratamento e
distribuio de gua so deficientes, o que resulta em srios problemas de sade

39

pblica (DI BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005). Desta forma, a maioria das
doenas de veiculao hdrica em pessoas que consomem guas originrias de poos
ou nascentes pode ser reduzida com o aumento do monitoramento da qualidade da
gua, assim como um maior acesso gua potvel (MISRA, 1975).
As guas subterrneas esto sujeitas s contaminaes por aes antrpicas
uma vez que no existe solo ou rocha completamente impermevel (VENDRAMEL,
2004). Dentre as fontes de contaminao esto os prprios poos, ou seja, a forma que
o poo construdo fundamental para a qualidade da gua captada. Dentre as
contaminaes que podem surgir esto: contaminao por parte das rochas mais
superficiais, e conseqentemente mais vulnerveis contaminao; ausncia de lajes
de proteo sanitria na boca do poo; proximidade de fossas, postos de gasolina e
lixes, que so fontes potenciais de contaminao; falta de desinfeco do poo aps a
construo. A presena de coliformes em guas provenientes de poos est
diretamente relacionada a poos mal construdos, sem laje de proteo e tubo de boca,
situados em locais inadequados ou mal protegidos (BRASIL, 2007; CETESB, 2004).
A falta de saneamento tambm pode ser um fator de contaminao da gua
subterrnea, uma vez que a infiltrao de fossas negras e escoamento superficial
podem infiltrar no solo e atingir a gua subterrnea. Este problema detectado pela
presena de nitrato na gua e surgimento de bactrias patognicas e vrus (BRASIL,
2007).
Os resduos slidos em aqferos e a falta de coleta de lixo, que pode vir a
produzir chorume, tambm so fontes de contaminao. Esta decomposio
anaerbica da matria orgnica produz gases, como sulfdrico, metano e mercaptano.
Esses gases apresentam odores desagradveis e, no caso do metano, ainda
inflamvel. O chorume pode infiltrar no solo e atingir a gua subterrnea. Uma soluo
seria a coleta de lixo e impermeabilizao de aterros sanitrios, sendo o lixo uma
forma no muito apropriada para depsito de lixo (BRASIL, 2007);
A proximidade da gua subterrnea de cemitrios leva contaminao da gua,
j que os microrganismos provenientes da decomposio de corpos podem vir a atinglas. Estes microrganismos podem ser patognicos, sendo a gua ento considerada um
veculo de transmisso de doena, que pode ter como sintomas alguns distrbios

40

gastrintestinais como vmito, nuseas e diarria. Dentre as doenas mais comuns

nestes casos esto: hepatite, leptospirose, febre tifide e clera. Para regulamentar
esta situao, em 2003 foi publicada pelo CONAMA a Resoluo n335, que dispe
sobre o licenciamento para a construo de cemitrios (BRASIL, 2007).
Em Piracicaba, comum o consumo de guas de nascentes (bicas) pela
populao. Um estudo avaliou a qualidade de 18 amostras quinzenais de 8 nascentes
neste municpio quanto presena de dois indicadores de contaminao fecal:
coliformes e Enterococcus. Destas, apenas 1 nascente no apresentou contaminao
por coliformes fecais e Enterococcus, e foi considerada potvel, as outras 7 se
encontraram fora dos padres de potabilidade bacteriolgica, sendo ento imprprias
para o consumo humano. A incidncia de coliformes variou entre os perodos de chuva
e estiagem, sendo que nos primeiros a incidncia foi maior devido ao arraste de
excrementos e contaminantes pelas enxurradas para o local da coleta da gua
(BATISTA, 1996).

2.2.7 Microrganismos indicadores

Os microrganismos indicadores refletem a qualidade microbiolgica de um
alimento, tendo assim relao com a sua vida de prateleira e segurana, uma vez que
podem indicar a presena de microrganismos patognicos (JAY, 2005).
Como os microrganismos patognicos veiculados pela gua e por alimentos so
de origem fecal, ou seja, so provenientes de fontes intestinais, os indicadores
sanitrios foram usados visando deteco de contaminao por fezes. A presena
destes microrganismos na gua indica a ocorrncia de contaminao de origem fecal e
conseqentemente

possvel

presena

de

patgenos

intestinais

(FRANCO;

avaliar

qualidade

LANDGRAF, 2008; JAY, 2005).

Os

microrganismos

indicadores

so

usados

para

microbiolgica da gua, seja ela para consumo, residuria ou destinada recreao

(ASHBOLT; GRABOW; SNOZZI, 2001).
Embora j seja possvel detectar a presena de diversos patgenos em gua, os
mtodos de isolamento e enumerao destes so complexos e demorados, tempo
suficiente para que muitas pessoas consumam essa gua possivelmente contaminada.

41

Alm disso, estes microrganismos esto presentes apenas esporadicamente no

ambiente hdrico, e sobrevivem sob essas condies por um perodo de tempo curto.
Desta forma, fazer a anlise de microrganismos patognicos em gua se torna invivel
para o monitoramento da sua qualidade. Assim, a anlise de microrganismos
normalmente presentes em fezes de humanos ou animais de sangue quente a melhor
maneira de avaliar a qualidade da gua, assim como a eficcia do tratamento e
desinfeco no caso de gua tratada (CHAVES, 2004; PELCZAR; CHAN; KRIEG, 1996;
WHO, 1996).
Um bom microrganismo indicador de contaminao fecal em gua deve
apresentar as seguintes caractersticas:
1.

Estar presente em guas poludas e ausentes nas no poludas;

2.

Estar presente quando microrganismos patognicos esto presentes;

3.

Ter sobrevida igual ou maior que os patgenos na gua;

4.

Ser inofensivo ao homem;

5.

Ser facilmente detectado por testes laboratoriais rpidos, simples e

precisos;

6.

Ter como habitat exclusivo o trato intestinal humano e de animais;

7.

Ocorrer em nmeros muito altos em fezes;

8.

Apresentar alta resistncia ao ambiente extra-enteral;

(FRANCO; LANDGRAF, 2008; PELCZAR; CHAN; KRIEG, 1996).

Como nenhum microrganismo atende a todos esses requisitos, sugeriram-se
alguns microrganismos que so carreados juntamente com os dejetos humanos para o
ambiente, como indicadores alternativos de contaminao fecal. Tais microrganismos
so: Streptococcus faecalis ou Enterococos, Clostridium perfringens, vrus entricos,
coliformes e Escherichia coli (BURBARELLI, 2004).
Os mais usados so os coliformes, que apresentam como vantagens o fato de
estarem presentes no intestino de animais de sangue quente e serem eliminados em
grandes quantidades nas fezes destes (cerca de 3,0 x 108 UFC/g). A sua presena na
gua tambm indica que a contaminao desta com material fecal recente, e a sua
quantificao simples (HUNT; RICE, 2005; SILVA et al., 2005).

42

2.2.7.1 Grupo coliforme

A anlise de bactrias do grupo coliforme usada como indicador do grau de
contaminao e qualidade sanitria da gua h mais de meio sculo. Ela avalia a
poluio recente da gua por fezes e eventualmente a sua contaminao. Porm, a
presena de coliformes na gua no indica necessariamente presena de patgenos, j
que para estes estarem presentes na gua eles devem ser oriundos de fezes de
indivduos ou animais contaminados, enquanto que a presena de coliformes totais e
termotolerantes depende apenas da existncia de despejo orgnico, no estril,
estranho ao corpo receptor. Porm, quanto maior for o numero de coliformes
encontrados na gua, maior a probabilidade de se encontrar microrganismos
patognicos (DI BERNARDO; DI BERNARDO DANTAS, 2005; ISAAC-MARQUZ et al.,
1994).
A ausncia de bactrias do grupo coliforme indica que a gua no teve contato
com fezes, estando livre de bactrias patognicas, ovos, larvas ou vrus veiculados
pelas fezes (RIEDEL, 1992).
O grupo coliforme definido como: bactrias aerbias ou anaerbias facultativas,
Gram-negativas, no esporuladas e na forma de bastonetes. Elas fermentam a lactose
produzindo gs e cido dentro de 48 horas a 35C (HUNT; RICE, 2005). Tambm so
capazes de crescer na presena de sais biliares ou agentes tensoativos e podem
apresentar atividade da enzima -galactosidase (BRASIL, 2004).
So bactrias pertencentes famlia Enterobacteriaceae, dos gneros
Escherichia, Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella. Elas podem ser encontradas no
ambiente, em solos e vegetais, ou em fezes de humanos ou animais de sangue quente
(FRANCO; LANDGRAF, 2008). Assim, o uso de bactrias do grupo coliforme como
indicador apresenta como limitao o fato de algumas representantes deste grupo no
serem de origem fecal, mas que so capazes de se multiplicarem em guas poludas
(SILVA et al., 2005). Por este motivo, a presena de coliformes totais utilizada como
indicador de higiene (SANTANA et. al., 2003).
Os coliformes fecais, ou termotolerantes, so definidos da mesma forma que os
coliformes totais, porm eles so capazes de fermentar a lactose com produo de gs
em 24 horas em uma temperatura de 44,5 45,5C. So usados para identificar uma

43

contaminao de origem fecal. Pelo menos trs gneros fazem parte desse grupo:
Escherichia, Enterobacter e Klebsiella. Os gneros Enterobacter e Klebsiella incluem
algumas cepas de origem no fecal, que podem ser encontradas em guas ricas em
matria orgnica, proveniente de efluentes industriais ou material oriundo de planta em
decomposio ou solo (SILVA et al., 2005; WHO, 1996).
Por este motivo, a contagem de coliformes totais em gua ou alimentos menos
representativa para a determinao da contaminao fecal que os coliformes
termotolerantes ou E. coli (SILVA et al., 2005).
A Escherichia coli de origem especificamente fecal e raramente encontrada em
gua ou solo no contaminados com material fecal. Este fato torna a presena de
coliformes termotolerantes em gua e alimentos menos representativa quanto
contaminao fecal que a enumerao de E. coli, porm mais representativa que a
contagem de coliformes totais (SILVA et al., 2005; WHO, 1996).
O nmero de coliformes termotolerantes e o nmero de E. coli encontrados na
gua apresentam uma relao devido alta incidncia de E. coli no grupo fecal. Assim,
como o termo coliformes fecais, que muito usado, envolve certas espcies que no
tem origem necessariamente fecal, este passa a ser inapropriado, sendo mais
adequado o termo coliforme termotolerante (SILVA et al., 2005; WHO, 1996).

2.2.7.2 Escherichia coli

Em 1855, Theodore Escherich descreveu um microrganismo que era encontrado
com freqncia nas fezes humanas e causava diarria infantil, nomeando-o de
Bacterium coli. Em 1958 esta bactria passou a ser chamada de Escherichia coli em
homenagem ao seu descobridor (KUHNERT; BOERLIN; FREY, 2000). Em 1892 foi
proposto o uso da E. coli como indicador de contaminao fecal em gua, uma vez que
esta bactria encontrada no intestino humano e de animais de sangue quente
(FRANCO; LANDGRAF, 2008).
A E. coli pertence famlia Enterobacteriaceae e ao grupo coliforme, tendo assim
as caractersticas deste grupo. Alm destas caractersticas, a E. coli uma bactria
que pode ou no apresentar motilidade, capaz de crescer em ambientes aerbicos ou
anaerbicos facultativos. Seu metabolismo tanto respiratrio quanto fermentativo,

44

produtora de cido pela fermentao da glicose e da lactose, catalase positiva e capaz

de reduzir nitrato a nitrito (WHO, 1996).
Nas fezes de humanos e de animais a contagem desta bactria pode chegar a
109 bactrias por grama de fezes. Assim, a presena de E. coli em gua um bom
indicador de contaminao potencialmente perigosa (WHO, 1996).
A E. coli tem como habitat primrio o intestino humano e de animais de sangue
quente, embora j tenha sido observada sua ausncia em intestinos de porcos. Seu
habitat secundrio a gua, o solo e os sedimentos. Esses habitats se diferem quanto
oferta de nutrientes (maior no primrio), no modo de respirao (anaerbica no
primrio e aerbica no secundrio), temperatura (constante no primrio 37C; varivel
no secundrio) (JAY, 2005; SAVAGEAU, 1983). Na gua para consumo conservada a
15 18C, a E. coli sobrevive de 4 a 12 semanas (EDBERG et al., 2000).
Dos coliformes encontrados nas fezes humanas e de animais, 95% so E. coli, e
dentro das bactrias do grupo coliforme termotolerante, ela a mais conhecida e mais
facilmente diferenciada dos membros no fecais. Seu isolamento e identificao em
gua so fceis e podem ser feitos por tcnicas simples e rpidas, seu perodo de
sobrevivncia semelhante ao dos patgenos mais comuns, porm no so to
resistentes quanto os vrus intestinais. Devido a essas caractersticas, essa bactria
considerada a melhor indicadora de contaminao fecal. Atualmente, a tendncia usar
a deteco especfica de E. coli (JAY, 2005; SILVA et al., 2005).
Devido grande degradao dos recursos hdricos, a investigao de E. coli em
guas tem se tornado cada vez mais necessria e para isto, esta investigao deve ser
rpida e precisa (CANTUSIO NETO, 2001). Como conseqncia, diversos mtodos
rpidos para a enumerao desta espcie vm sendo desenvolvidos
A maioria das linhagens desta bactria comensal, porm, algumas de suas
linhagens so enterotoxignicas (GALLO, 1992). Essas linhagens podem causar
doenas gastrintestinais e se ligam nas clulas do epitlio intestinal atravs das fmbrias
especializadas presentes nelas. Algumas tambm podem produzir toxinas que
provocam distrbios intestinais (TORTORA; FUNKE; CASE, 2005). As linhagens de E.
coli consideradas patognicas so: E. coli enteropatognica clssica (EPEC), E. coli

45

enteroinvasiva (EIEC), E. coli enterotoxignica (ETEC), E. coli entero-hemorrgica

(EHEC) e E. coli enteroagregativa (EAggEC) (FRANCO; LANDGRAF, 2008).
As ETECs no so invasivas, porm produzem toxinas que causam uma diarria
aquosa, lembrando um tipo de clera. As EIECs invadem a parede intestinal, causando
inflamao, febre e disenteria similar a causada pela Shigella (TORTORA; FUNKE;
CASE, 2005).
Nas linhagens de EHECs h diversos sorotipos, sendo o mais importante o
O157:H7, que alm de aderir mucosa intestinal produz a toxina Shiga, que geralmente
causa apenas uma diarria autolimitante, porm h relatos de inflamao no clon com
sangramento profuso e sndrome hemoltico-urmica (sangue na urina, que muitas
vezes leva insuficincia renal) (TORTORA; FUNKE; CASE, 2005).
Assim como as outras bactrias causadoras de infeces alimentares, a E. coli
ingerida atravs de alimentos ou gua contaminados com fezes de humanos

ou

animais (RIBEIRO, 2006).

2.2.8 Mtodos para a avaliao da gua

As anlises relacionadas determinao da sanidade da gua devem ser
simples e rpidas na deteco da bactria indicadora de contaminao fecal
(ASHBOLT; GRABOW; SNOZZI, 2001).
Existem diversos mtodos para a anlise de bactrias do grupo coliforme e E.
coli em gua, entre eles a tcnica do Nmero Mais Provvel (NMP), que estima
aproximadamente o nmero de microrganismos presentes na amostra original. Em
tubos de ensaio so adicionados os meios e alquotas de amostras das diversas
diluies. Aps o perodo de incubao os tubos so caracterizados como positivos ou
negativos. Com o auxlio da tabela do Nmero mais Provvel possvel saber
aproximadamente quantos dos microrganismos que foram analisados esto presentes
na amostra (HUNT; RICE, 2005).
Este mtodo usado para anlises de coliformes em gua e alimentos, assim
como de Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus e Clostridium perfringens (SILVA et
al., 2005).

46

Os meios de crescimento, as condies de incubao e a natureza da amostra

de gua podem influenciar as espcies isoladas e sua contagem. Desta forma, a
padronizao de mtodos e procedimentos laboratoriais de extrema importncia na
uniformizao dos critrios para a avaliao microbiolgica da qualidade da gua em
laboratrios de diferentes pases (WHO, 1996).

2.2.8.1 Mtodos convencionais para a avaliao da gua

Os mtodos convencionais foram desenvolvidos h muitos anos, e so utilizados
como mtodos oficiais em diversos laboratrios brasileiros e em outros pases. So
mtodos descritos em diversas publicaes internacionais e considerados como
referncias (FRANCO; LANDGRAF, 2008).
Para coliformes totais e fecais, dentre os mtodos convencionais esto a tcnica
de fermentao em tubos mltiplos e a tcnica da membrana filtrante. Esses mtodos
analisam a capacidade do microrganismo em fermentar a lactose, produzindo colnias
tpicas, gs ou cido e gs (COVERT et al., 1989; ECKNER, 1998). Ambos os mtodos
necessitam de testes confirmatrios e no isolam as espcies, ou seja, detectam
apenas a presena e enumeram os coliformes totais e termotolerantes (EDBERG;
ALLEN; SMITH, 1988).
Por serem demorados, ao serem usados na monitorao da qualidade da gua,
estes mtodos podem no impedir o consumo da gua antes que os resultados sejam
obtidos. Dessa forma, se no caso a gua estivesse contaminada com patgenos,
poderia causar doenas (HSIEH, 2008).

2.2.8.1.1 Tcnica da fermentao em tubos mltiplos

Esta tcnica foi inicialmente adotada como padro pelo primeiro US Public
Health Service Drinking Water Standard em 1914, e era aplicada a todas as fontes de
gua. Este mtodo simples e requer 48 horas para o teste presuntivo, seguido de 48
horas para o teste confirmativo (WOLF 1972).
indicada para a determinao de alguns microrganismos, como coliformes
totais e termotolerantes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus,
Clostridium perfringens e S. aureus. O que diferencia uma anlise de outra o meio a

47

ser utilizado, que especfico para cada microrganismo (FRANCO; LANDGRAF, 2008;
SILVA et al., 2005).
um mtodo de anlise quantitativa que permite saber o Nmero Mais Provvel
de microrganismos pela distribuio de alquotas em sries de tubos contendo o meio
de cultura diferenciado para o microrganismo alvo. Por clculo de probabilidade, podese estimar a densidade inicial dos microrganismos, atravs dos tubos positivos e
negativos (SILVA et al., 2005).
A preciso do mtodo est relacionada com a quantidade de tubos utilizados por
srie (3 ou 5) (HUNT; RICE, 2005).
Para a contagem presuntiva de coliformes por esta metodologia o meio de cultivo
utilizado o Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), que permite um enriquecimento
seletivo dos coliformes, recuperando as clulas injuriadas. O crescimento com produo
de gs nos tubos de Durhan indica positividade (HAJDENWURCEL, 1998).
Para a confirmao de coliformes totais o meio de cultivo utilizado o Caldo
Verde Bile Brilhante, que apresenta em sua formulao sais biliares, que inibem o
crescimento de microrganismos Gram positivos, e a lactose, que utilizada como
substrato para a produo de gs pelos coliformes. A positividade neste teste
indicada

pelo

crescimento

com

produo

de

gs

no

tubo

de

Durhan

(HAJDENWURCEL, 1998).
Para a confirmao de coliformes termotolerantes o meio de cultivo utilizado o
Caldo EC (Escherichia coli), que seletivo para os microrganismos Gram positivos
devido presena de sais biliares. A incubao temperatura de 45C em banho-maria
por 24 horas permite evidenciar a presena de coliformes termotolerantes uma vez que
eles apresentam a capacidade de fermentar lactose com produo de gs
temperaturas mais elevadas (HAJDENWURCEL, 1998).
So considerados coliformes aqueles microrganismos que, por esta tcnica,
sejam capazes de fermentar lactose nos testes presuntivos e confirmativos, com
produo de gs a 35C e a 45C (BRASIL, 1990).

48

2.2.8.2 Mtodos rpidos substratos cromognicos e fluorognicos

A partir da dcada de 70, com a necessidade de obter dados analticos mais
rapidamente, e assim aumentar a produtividade laboratorial, comearam a ser
desenvolvidos os mtodos rpidos. Esses mtodos simplificaram o trabalho e reduziram
os custos das anlises. Dependendo do mtodo utilizado, a sensibilidade e
especificidade destes so ainda maiores que a dos mtodos convencionais (FRANCO;
LANDGRAF, 2008).
Os mtodos rpidos, alm de estimar mais rapidamente a qualidade
bacteriolgica da gua, devem dar resultados reais e ter sensibilidade igual aos
mtodos

convencionais

utilizados

rotineiramente

para

anlise

do

mesmo

microrganismo (HUNT; RICE, 2005).

A descoberta de uma metodologia que detecta a presena de uma determinada
enzima usando um substrato apropriado (cromognico e fluorognico) levou ao
desenvolvimento de diversos mtodos para identificao de microrganismos (MANAFI,
2000).
Os mtodos que utilizam substratos definidos no apresentam agentes seletivos
nos meios, e sim substratos, que permitem a identificao de microrganismos alvos.
Naqueles que utilizam os substratos cromognicos e/ou fluorognicos, os substratos
so modificados por determinadas enzimas especficas da bactria alvo. Depois desta
modificao, os substratos cromognicos levam a uma alterao na cor do meio e o
fluorognico na fluorescncia do mesmo (ASHBOLT; GRABOW; SNOZZI, 2001).
Tanto a deteco de bactrias do grupo coliforme como de E. coli so
importantes indicadores de contaminao em gua. Desta forma, a deteco
simultnea de coliformes totais e E. coli garante um melhor controle da qualidade da
gua. Diversos meios foram desenvolvidos neste sentido (MANAFI, 2000), destacando
os mtodos Colilert e Colitag.
O substrato cromognico utilizado nesses mtodos orto-nitrofenil--Dgalactopiranosdeo (ONPG), e o fluorognico, 4-metilumbeliferil--D-glucorondeo
(MUG) (SILVA et al., 2005). A alterao da cor do meio pela ao do substrato
cromognico ocorre devido s reaes qumicas. O substrato fluorognico MUG
solvel em gua e altamente sensvel e especfico. Devido sua dependncia do pH,

49

alta difuso em meios slidos e necessidade de uma fonte de luz UV, o uso do MUG se
torna limitado (MANAFI, 2000).
As anlises de E. coli pelos mtodos convencionais utilizados so complicadas, e
sua deteco envolve meios complexos e incubao uma temperatura restrita (44C
45C) em combinao com a produo de cido e gs, reaes bioqumicas especficas
como a produo de indol, o teste de atividade da -glucoronidase, e a ausncia de
atividade da urease (WHO, 1996). Assim, a anlise da ao da enzima -glucoronidase
tem sido muito utilizada em todo o mundo para a deteco de E. coli tanto em amostras
de gua como de alimentos, facilitando assim a deteco de contaminao fecal desses
produtos (MANAFI, 2000). Alguns mtodos que utilizam este mecanismo tem se
mostrado mais especficos que aqueles que utilizam a fermentao da lactose e
produo de indol a 44C (FRICKER et al., 2008a).
Por detectar simultaneamente as bactrias do grupo coliforme total e E. coli, o
uso de meios que utilizam a deteco de enzimas constituintes destes microrganismos
tem sido cada vez mas difundido. Como a enzima -glucoronidase no especfica da
E. coli, ou seja, outros microrganismos tambm a possuem, os meios devem ser
formulados de modo a minimizar os resultados falsos-positivos. Alguns meios inibem as
bactrias Gram-positivas. Alm dos falso-positivos serem indesejados, no caso de
anlise de gua potvel os falso-negativos so ainda mais preocupantes (FRICKER et
al., 2008b).
Nos ltimos anos diversos mtodos que detectam simultaneamente coliformes
totais e E. coli tem sido desenvolvidos e aprovados pelos rgos responsveis para a
analise de gua. Durante a dcada de 90 foram aprovados pela United States
Environmental Protection Agency (USEPA) os mtodos Colilert, Colilert-18 e Colisure.
Recentemente, outros sete mtodos foram aprovados, o MI gar (USEPA Federal
Register 1998), m-Coli Blue 24, E*Colite (USEPA Federal Register 1999), Readycult
Coliforms 100, Chromocult (USEPA Federal Register 2002), Colitag (USEPA Federal
Register 2004) e Coliscan (USEPA Laboratory Certification Manual 2005) (OLSTADT et
al., 2007).

50

2.2.8.2.1 Colilert (IDEXX)

A Tcnica do Substrato Cromognico Enzimtico Colilert surgiu com o objetivo
de superar as limitaes e problemas enfrentados pelos mtodos tradicionais. Este
mtodo se baseia na identificao dos microrganismos pela anlise de suas enzimas
constitutveis (COVERT et al., 1989).
Ele contm os substratos cromognico orto-nitrofenil--D-galactopiranosdeo
(ONPG) e o fluorognico 4-metilumbeliferil--D-glucorondeo (MUG), que detectam
simultaneamente as bactrias do grupo coliforme total e E. coli em amostras de gua
(MANAFI, 2000).
A deteco destes microrganismos por este mtodo mais fcil que a anlise de
colnias tpicas, e no h necessidade de se realizar testes confirmatrios ou
complementares nem isolar culturas puras, necessitando apenas de uma estufa a 35C
e uma luz ultravioleta (365nm) (ASHBOLT; GRABOW; SNOZZI, 2001; EDBERG;
ALLEN; SMITH, 1988). Uma outra vantagem desse mtodo o tempo de anlise, que
relativamente rpido e possibilita a correo de problemas possivelmente existentes
antes que o produto chegue ao consumidor (IDEXX, 2009).
O substrato cromognico ONPG usado na deteco da enzima tpica do grupo
coliformes totais, a -galactosidase, que hidroliza o ONPG a orto-nitrofenol resultando
na alterao da cor do meio para amarelo (GREGHI, 2005; HUNT; RICE, 2005; SILVA
et al., 2005), conforme mostra a Figura 5.

51

Figura 5 Mecanismo de deteco de coliformes totais

Fonte: IDEXX (2009).

Para a deteco de E. coli, o substrato MUG sofre a ao da enzima glucoronidase, que caracterstica desta bactria. Ao ser degradado, o MUG libera a 4metilumbeliferona que, quando submetida luz ultravioleta, apresenta fluorescncia
(COVERT et al., 1989; SILVA et al., 2005), conforme a Figura 6.

52

Figura 6 Mecanismo de deteco de E. coli

Fonte: IDEXX, (2009).

A enzima -glucoronidase est presente em 94-96% das cepas de E. coli e

tambm em algumas de Salmonella, Shigella e Yersinia spp. (HARTMAN, 1989).
Porm, a E. coli O157:H7, um patgeno importante para os seres humanos, apesar de
ser da espcie E. coli, no fermenta D-sorbitol em 24 horas, no apresenta a enzima glucoronidase, nem capaz de crescer a 45,5C (MANAFI, 2000).
Como resultado pode-se concluir que, se o meio permanecer incolor, indica a
ausncia de bactrias do grupo coliforme e de E. coli na amostra. Se o meio tiver sua
cor alterada para amarelo e no apresentar fluorescncia sob luz UV, indica presena
de bactrias do grupo coliforme e ausncia de E. coli na amostra. Caso a cor do meio
seja alterada para amarela e este apresentar fluorescncia sob luz UV, significa que
bactrias do grupo coliforme e E. coli esto presentes na amostra analisada. A Figura 7
mostra os possveis resultados deste teste.

53

Figura 7 - Resultados da anlise pelo Colilert

Fonte: IDEXX (2009).

Segundo Alves, Odorizzi, Goulart (2002), o mtodo Colilert de anlise de

coliformes em gua apresenta alta sensibilidade e especificidade.

3.8.2.2 Colitag (HEXIS)

A deteco de coliformes e E. coli por esse mtodo demora tambm apenas 24
horas, e especfico para E. coli, e no para coliformes termotolerantes (HSIEH, 2008).
Outras vantagens observadas nesse mtodo a necessidade de apenas um meio
enquanto outros mtodos necessitam de mais (HUNT; RICE, 2005) e seu custo
menor que o da tcnica da fermentao em tubos mltiplos (HSIEH, 2008).
O Colitag um meio seletivo e diferencial de determinao de presena e
ausncia de coliformes e E. coli em gua. O meio j pronto para ser utilizado e no h
necessidade de realizar testes confirmativos.
O mecanismo de ao desse mtodo segue o mesmo princpio do Colilert, ou
seja, ele usa o substrato orto-nitrofenil--D-galactopiranosdeo (ONPG) e o 4metilumbeliferil--D-glucorondeo (MUG) para a deteco simultnea de coliformes
totais e E. coli. A enzima -galactosidase, presente nos coliformes totais, decompe o
ONPG, que incolor, alternando a cor do meio para amarelo, que pode ser claramente
visto a olho nu. A enzima -glucoronidase, presente na E. coli, decompe o MUG, que
torna o meio fluorescente (observado sob luz UV 365-366nn) (OLSTADT et al., 2007).
Um diferencial do Colitag a presena em sua composio do tampo TMAO
(xido de N-trimetilamina), que transformado em trimetilamina. Este composto bsico
neutraliza o pH baixo, ajudando na recuperao de clulas injuriadas pelo cloro
(OLSTADT et al., 2007).
A United States Environmental Protection Agency (USEPA) aprovou o uso do
Colitag para a reativao e posterior deteco de E. coli danificadas pelo cloro. O

54

resultado pode ser expresso como presena/ausncia ou por quantificao do Nmero

mais Provvel (NMP) de coliformes totais e E. coli na gua. Por recuperar a clula
danificada e reativar o seu crescimento, possibilitando a deteco de E. coli danificada
pelo cloro, o Colitag se destaca dos outros mtodos que no as detectam.
Esta tcnica capaz de detectar diferentes cepas de E. coli em 24 horas
(HSIEH, 2008).

2.3 Material e mtodos

2.3.1 Amostragem
As amostras de gua foram obtidas na cidade de Piracicaba, localizada no
Estado de So Paulo. As coletas foram realizadas entre os dias 09 de fevereiro de 2009
(teste preliminar) e 15 de junho de 2009.
Foram coletadas amostras de guas provenientes de 3 diferentes pontos, a fim
de analisar a equivalncia dos mtodos em diferentes nveis de contaminao. Os
pontos escolhidos foram:
1.

Sistema de abastecimento pblico (tratada):

Abastecimento Pblico Municipal (SEMAE);

2.

gua de superfcie:
Rio Piracicamirim;

3.

gua subterrnea:
Bica localizada na Rua Silva Jardim.

Foram feitas 3 coletas em cada ponto, e em cada coleta foram analisadas 10

amostras, totalizando em 30 amostras de cada ponto e 90 amostras no total.

2.3.2 Coleta das amostras

Para a coleta das guas de abastecimento e bica foram utilizados frascos
erlenmeyers de 4L esterilizados em estufa de esterilizao (170C/2h).
As coletas das amostras de gua foram realizadas de acordo com Silva et al.
(2005). Para as amostras da bica (nascente), foram previamente esterilizadas as reas
externas da sada da gua com lcool 70% e flambadas. A gua fluiu por 2 a 3 minutos,

55

com a finalidade de eliminar toda a coluna de lquido na canalizao. Aps esses

procedimentos, procedeu-se a coleta da amostra.
Para a coleta de gua tratada, a torneira foi desinfetada com lcool 70% e
flambada. Logo aps, a gua escoou por 2 a 3 minutos, e foi reduzida a meio fio e
ento, a amostra foi coletada. Para as amostras de gua tratada foi adicionado antes da
coleta 0,1mL de uma soluo 1,8% de tiossulfato de sdio (Na2S2O3) para cada 100mL
de amostra, com a finalidade de neutralizar o cloro residual presente na amostra, e
impedir a continuao do seu efeito bactericida.
Para a coleta das amostras de gua de superfcie (rio), foi utilizado um caldeiro
metlico de 5L amarrado em um cordo de nylon. O caldeiro foi previamente
esterilizado em autoclave a 121C/30min, sendo aberto apenas na hora da coleta. O
caldeiro foi arremessado de uma ponte no leito do rio e foi posicionado contra a
corrente e por volta de 30 cm da superfcie, para evitar a captao de contaminantes
superficiais. A gua colhida no caldeiro foi transferida para o erlenmeyer de 4L,
tambm previamente esterilizado, e este foi fechado, sendo aberto somente na hora da
anlise (CETESB, 1988).
Em todos os casos os frascos no foram completamente enchidos; foi deixado
um espao de para facilitar a mistura da amostra e posterior retirada das unidades
analticas (SILVA et al., 2005).
Aps a coleta, os frascos foram lacrados e identificados.
As amostras foram ento acondicionadas em caixas isotrmicas (HUNT; RICE,
2005) e transportadas para o laboratrio de Microbiologia de Alimentos, no
Departamento de Agroindstria, Alimentos e Nutrio, na ESALQ-USP em Piracicaba,
onde foram realizadas as anlises, logo aps a chegada.

2.3.3 Preparao das amostras para anlise

Os frascos contendo as amostras foram agitados, invertendo-os 25 vezes num
arco de 30cm para homogeneizao (SILVA et al., 2005).
Preparao das diluies:
O diluente utilizado foi a gua peptonada 0,1% (gua de diluio). Para a
primeira diluio foram transferidos 10mL da amostras em frascos contendo 90mL da

56

gua peptonada 0,1%. Dessa primeira diluio foram retirados 10mL e transferidos para
um outro frasco contendo 90mL e assim sucessivamente at o preparo de todas as
diluies.
O nmero de diluies para cada amostra de gua foi definido aps os testes
preliminares. Para as amostras de gua da bica foram preparadas as diluies 10-1; 10-2
e 10-3. Para as anlises de gua do rio foram preparadas as diluies 10-1; 10-2; 10-3 e
10-4. Para as anlises de gua de abastecimento foi preparada apenas a diluio 10-1.

2.3.4 Anlise de coliformes

2.3.4.1 Tcnica da fermentao em tubos mltiplos (FTM)
A determinao do Nmero Mais Provvel de coliformes por este mtodo foi
realizada segundo Hunt; Rice (2005) (Figura 8).

Figura 8 - Esquema da determinao do NMP de coliformes totais, coliformes termotolerantes e E. coli

pela fermentao em tubos mltiplos

57

Para o teste presuntivo de coliformes foi utilizado como meio o Caldo Lauril
Sulfato Triptose (LST) em tubos de ensaio contendo em seu interior tubos de Durhan
(Figura 9). Para cada srie foram utilizados 5 tubos.

Figura 9 Tubo contendo o caldo LST e o tubo de Durhan

Na 1a srie foram transferidos 10mL da amostra bruta em cada tubo contendo o

meio Caldo Lauril Sulfato Triptose em dupla concentrao, totalizando 5 tubos.
Na 2a srie foi transferido 1mL da amostra de gua para os tubos contendo meio
LST em concentrao simples.
Nas prximas sries foram utilizadas alquotas de 1mL para cada tubo das
demais diluies, ou seja, para a 3a srie foi transferido 1mL da diluio 10-1 para cada
tubo; para a 4a srie, 1mL da diluio 10-2, e assim sucessivamente at a ltima
diluio.
Os tubos foram incubados a 35C/24-48horas. Nos tubos que apresentaram
turvao e gs nos tubos de Durhan, o que indica que o resultado foi positivo, foi
realizado o teste confirmativo para coliformes totais, termotolerantes e E. coli.
Para o teste confirmativo para coliformes totais foi utilizado o meio CVBLB (Caldo
Verde Brilhante Lactose Bile) e tubos de ensaio contendo tubos de Durhan. Uma alada
dos tubos que apresentaram resultados positivos no teste presuntivo (LST) foi
transferida para os tubos com o meio CVBLB, anotando sempre o cdigo da amostra e
a srie. Os tubos foram ento incubados a 35C/24-48 horas.
Assim como no teste presuntivo, a presena de gs nos tubos de Durhan
significa que o resultado foi positivo para coliformes totais (Figura 10).

58

Figura 10 Tubo com o Caldo CVBLB positivo

Para o teste confirmativo para coliformes termotolerantes e E. coli, uma alada

dos tubos positivos do teste presuntivo (LST) foi transferida para os tubos contendo o
caldo E. coli (EC) + MUG. Esses tubos, depois de identificados, foram incubados a 45C
em banho-maria (Figura 11).

Figura 11 Tubos com o caldo EC em banho-maria

A positividade para coliformes termotolerantes foi determinada pela turvao do

meio e produo de gs nos tubos de Durhan (Figura 12) e a positividade para E. coli
foi determinada pela fluorescncia do meio sob luz UV 365 nm (Figura 13).

Figura 12 Tubos com o Caldo EC positivo e negativo respectivamente

59

Figura 13 Tubos com o Caldo EC sob luz UV

A determinao do Nmero Mais Provvel de coliformes totais, coliformes

termotolerantes e E. coli /100 mL de gua foi feita com o auxlio de uma tabela de NMP
apropriada s diluies inoculadas (HUNT; RICE, 2005).
Para as amostras de gua de abastecimento pblico, devido baixa
contaminao, foram usados apenas 10 tubos grandes contendo LST dupla
concentrao, onde foram inoculados 10mL da amostra bruta em cada tubo, de acordo
com Silva et al. (2005).

2.3.4.2 Colilert
O teste de presena/ausncia usando este mtodo foi realizado conforme Hunt;
Rice (2005) (Figura 14):

Figura 14 - Esquema da determinao da presena/ausncia de coliformes totais e E. coli pelo Colilert

60

1.

O contedo de uma ampola foi adicionado a um frasco contendo 100mL

da amostra de gua;
2.

Agitou-se o frasco para a diluio do contedo da ampola;

3.

O frasco foi incubado a 35C/24 horas;

4.

Aps a incubao, foi realizada a leitura, onde:

incolor significa ausncia de coliformes;

amarelo (olho nu) e azul fluorescente em luz UV 365nm, presena de

coliformes totais e E. coli;

amarelo (olho nu) e no fluorescente na luz UV 365nm, presena de

coliformes totais e ausncia de E. coli.

A determinao do NMP de coliformes por esse mtodo foi realizada segundo
Hunt; Rice (2005) (Figura 15):

Figura 15 - Determinao do NMP de coliformes totais e E. coli pelo Colilert

61

1.

Foi adicionada 1 ampola de Colilert a cada 100mL de gua destilada e

esterilizada necessria para cada tipo de gua, que foi o meio de cultivo. A quantidade
de meio de cultivo variou de acordo com a origem da amostra de gua, sendo o clculo
feito com base nas diluies necessrias para cada tipo;
2.

Os erlemeyers foram agitados para a total dissoluo do contedo das

ampolas;
3.

10ml desse meio foram transferidos para os tubos de ensaio, com o auxlio

de uma pipeta;
4.

Para a primeira srie, foram adicionados 10mL da amostra em 5 tubos

grandes contendo o meio;

5.

Para a segunda srie, foi adicionado 1mL da amostra em cada um dos 5

tubos mdios contendo o meio;

6.

Para a terceira srie, foi adicionado 1mL da diluio 10-1 em 5 tubos

mdios contendo o meio;

7.

Para a quarta srie, foi adicionado 1mL da diluio 10-2 em 5 tubos mdios

contendo o meio; e assim sucessivamente at a srie desejada.

8.

Os tubos foram ento incubados a 35C/24 horas;

9.

Aps a incubao, foi observada a cor (olho nu) e a fluorescncia (UV 365

nm) dos tubos. Atravs do nmero de tubos amarelos de cada diluio, e com o auxlio
da tabela apropriada, disponvel em Hunt; Rice (2005), foi determinado o NMP de
coliformes totais. Para a determinao do NMP de E. coli foi realizado o mesmo
procedimento usado para a determinao de coliformes totais, porm foram usados os
tubos que apresentaram fluorescncia sob a luz UV (365nm).
A Figura 16 mostra os tubos positivos e negativos para coliformes totais, e a
Figura 17 para E. coli.

62

Figura 16 Tubos positivos e negativos para coliformes totais pelo mtodo Colilert

Figura 17 Tubo negativo e positivo respectivamente para E. coli pelo mtodo Colilert

2.3.4.3 Colitag
Os testes usando o Colitag foram realizados da mesma forma que os realizados
com o Colilert (item 2.3.4.2) segundo Hunt; Rice (2005).

2.3.5 Anlise estatstica

Para a anlise estatstica foi feita a anlise de varincia e aplicou-se o teste de
Tukey usando o sistema computacional SAS (1997).

2.4 Resultados e discusso

2.4.1 Comparao das metodologias para anlise de coliformes totais e E. coli
Todas as amostras de gua de abastecimento analisadas no apresentaram
contaminao por coliformes (nem totais e nem E. coli), tanto nos testes de

63

presena/ausncia (Colilert e Colitag), como nos testes de quantificao do NMP pelos

mtodos Colilert, Colitag e FTM. Isto mostra a equivalncia entre os mtodos e, face a
similaridade dos resultados obtidos, qualquer um poderia ser escolhido para anlise de
coliformes para este tipo de gua.
Todas as amostras de gua da bica e do rio apresentaram contaminao por
coliformes totais e E. coli. Mais uma vez, houve coerncia quando comparados os
testes de presena/ausncia (Colilert e Colitag), que mostraram presena de coliformes
totais e de E. coli em todas as amostras, com os mtodos de quantificao do NMP
(Colilert, Colitag e FTM).
A Tabela 4 apresenta os resultados das anlises de coliformes totais pelos
mtodos Colilert, Colitag e fermentao em tubos mltiplos (FTM) em amostras de gua
da bica (NMP/100mL).

64

Tabela 4 Resultados das anlises de coliformes totais pelos mtodos Colilert, Colitag e FTM em
amostras de gua da bica e as mdias das contagens encontradas em cada dia de coleta
(NMP/100mL)
DATA
AMOSTRA
COLIFORMES TOTAIS
COLILERT COLITAG
FTM
16/02/09
1
2,4 x 104
9,4 x 104
7,9 x 103
2
1,6 x 104
5,4 x 103
7,0 x 103
3
3
3
9,2 x 10
9,2 x 10
7,9 x 103
3
3
4
5,4 x 10
3,5 x 10
3,1 x 103
3
3
5,4 x 10
1,3 x 104
5
9,2 x 10
3
3
9,2 x 10
1,4 x 104
6
5,4 x 10
4
3
7
1,6 x 10
9,2 x 10
1,7 x 104
3
3
5,4 x 10
3,1 x 103
8
9,2 x 10
3
3
9
3,5 x 10
3,5 x 10
3,3 x 103
3
3
10
9,2 x 10
3,5 x 10
4,9 x 103
4
4
MDIAS
1,1 X 10
1,5 X 10
8,1 X 103
3
3
09/03/09
1
1,1 x 10
2,4 x 10
1,7 x 103
3
3
2
1,3 x 10
2,2 x 10
4,9 x 103
3
3
3
3,5 x 10
5,4 x 10
1,3 x 103
3
2
4
3,5 x 10
7,9 x 10
4,9 x 103
3
3
5
1,1 x 10
1,1 x 10
1,4 x 103
3
3
6
2,2 x 10
3,5 x 10
2,3 x 103
3
3
7
5,4 x 10
1,4 x 10
1,7 x 103
3
3
8
3,5 x 10
2,4 x 10
7,9 x 102
3
3
9
1,3 x 10
1,7 x 10
7,9 x 102
3
3
10
1,3 x 10
1,1 x 10
1,1 x 103
3
3
MDIAS
2,4 X 10
2,2 X 10
2,1 X 103
3
3
23/03/09
1
3,5 x 10
1,7 x 10
7,0 x 103
3
3
2
2,8 x 10
1,3 x 10
3,3 x 103
3
3
3
1,1 x 10
2,2 x 10
3,3 x 103
3
3
4
3,5 x 10
2,8 x 10
3,3 x 103
3
3
5
3,5 x 10
3,5 x 10
1,7 x 103
3
3
6
1,3 x 10
1,3 x 10
1,7 x 103
3
2
7
1,7 x 10
7,9 x 10
1,7 x 103
3
3
8
1,4 x 10
1,1 x 10
2,3 x 103
3
2
9
3,5 x 10
4,9 x 10
1,1 x 103
3
2
10
1,7 x 10
7,0 x 10
1,4 x 103
3
3
MDIAS
2,4 X 10
1,6 X 10
2,7 X 103

Como pode ser observado pelos dados apresentados, houve muita variao nas
contagens obtidas, independentemente da metodologia utilizada, o que era de certa
forma esperado pela natureza do substrato. Tal fato, normalmente se deve a pobreza
nutritiva da gua, onde as bactrias normalmente no se multiplicam, apenas
sobrevivem e so veiculadas, e se apresentam heterogeneamente dispersas, com as
alquotas pipetadas ora contendo ora no as bactrias alvo. Por isso, para anlise
microbiolgica de gua em tubos, a quantidade da amostra que levada aos mesmos
muito maior do que para outros alimentos, o que de certa forma visa corrigir as
imperfeies, trabalhando com alquotas mais representativas.

65

Mesmo assim, notam-se grandes variaes nas estimativas do NMP de

coliformes totais, com contagens bem diferentes nas 10 amostras em cada dia de
coleta.
Para as amostras coletadas no dia 16/02/09, o NMP de coliformes totais/100mL
de gua variou de 3,5 x 103 a 2,4 x 104 para a metodologia Colilert; de 3,5 x 103 a 9,4 x
104 para a metodologia Colitag e de 3,1 x 103 a 1,7 x 104 para a tcnica FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 1,1 x 104 NMP/100mL
para a metodologia Colilert; 1,5 x 104 NMP/100mL para a metodologia Colitag e 8,1 x
103 NMP/100mL para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 09/03/09, o NMP de coliformes totais /100mL
de gua variou de 1,1 x 103 a 5,4 x 103 para a metodologia Colilert; de 7,9 x 102 a 5,4 x
103 para a metodologia Colitag e de 7,9 x 102 a 4,9 x 103 para a tcnica FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 2,4 x 103 para Colilert,
2,2 x 103 para Colitag e 2,1 x 103 para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 23/03/09 o NMP de coliformes totais/100mL
de gua variou de 1,1 x 103 a 3,5 x 103 para Colilert; de 4,9 x 102 a 3,5 x 103 para
Colitag e de 1,1 x 103 a 7,0 x 103 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 2,4 x 103 para Colilert,
1,6 x 103 para Colitag e 2,7 x 103 para FTM.
Tambm calculou-se as mdias gerais das estimativas do NMP de coliformes
totais/100mL de gua para as 30 amostras analisadas para cada metodologia (10
amostras em cada um dos 3 dias de coleta), obtendo-se: 5,3 x 103 para Colilert, 6,3 x
103 para Colitag e 4,3 x 103 para FTM.
A Tabela 5 exibe os resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert,
Colitag e FTM, em amostras de gua da bica (NMP/100mL).

66

Tabela 5 - Resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert, Colitag e FTM em amostras de gua
da bica e as mdias das contagens encontradas em cada dia de coleta (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRA
E. coli
COLILERT COLITAG
FTM
1
7,9 x 102
3,3 x 103
9,4 x 102
16/02/09
2
1,1 x 103
4,9 x 102
4,6 x 103
2
3
3
7,9 x 10
1,7 x 10
7,9 x 103
3
3
4
2,4 x 10
1,3 x 10
7,9 x 102
2
3
5
7,9 x 10
1,3 x 10
7,0 x 103
3
2
6
2,4 x 10
7,9 x 10
1,4 x 103
2
3
7
7,0 x 10
1,7 x 10
3,1 x 103
3
3
8
3,5 x 10
1,3 x 10
7,9 x 102
3
2
9
1,3 x 10
4,9 x 10
2,3 x 103
3
2
10
1,1 x 10
3,3 x 10
3,3 x 103
3
3
MDIAS
1,5 X 10
1,3 X 10
3,2 X 103
2
2
09/03/09
1
2,3 x 10
3,3 x 10
9,3 x 10
2
2,3 x 102
3,3 x 102
6,8 x 102
3
1,7 x 102
7,0 x 102
9,3 x 10
2
4
3,3 x 10
2,2 x 102
3,3 x 102
5
2,3 x 102
2,3 x 102
4,5 x 10
2
6
7,9 x 10
1,7 x 102
2,7 x 102
7
1,7 x 102
1,3 x 102
1,1 x 102
2
2
8
2,2 x 10
4,9 x 10
7,8 x 10
9
1,3 x 102
4,9 x 102
6,8 x 10
10
1,7 x 102
4,9 x 102
1,3 x 102
MDIAS
2,7 X 102
3,6 X 102
1,9 X 102
2
3
23/03/09
1
4,6 x 10
1,3 x 10
7,0 x 103
2
2
2
8,4 x 10
7,9 x 10
4,9 x 102
2
2
3
7,0 x 10
7,0 x 10
1,1 x 103
3
2
4
1,3 x 10
7,0 x 10
1,3 x 103
3
3
5
1,7 x 10
1,1 x 10
6,8 x 102
2
2
6
7,9 x 10
4,9 x 10
1,4 x 103
3
2
7
1,7 x 10
4,9 x 10
6,8 x 102
3
3
8
1,4 x 10
1,1 x 10
7,9 x 102
2
2
9
7,0 x 10
2,3 x 10
3,3 x 102
2
2
10
7,0 x 10
4,9 x 10
6,8 x 102
3
2
MDIAS
1,0 X 10
7,4 X 10
1,5 X 103

Aqui tambm, como ocorrido com os dados anteriormente apresentados para

coliformes totais e pelos mesmos motivos levantados, houve muita variao nas
contagens obtidas, independentemente da metodologia utilizada.
Considerando-se os resultados por coleta (10 amostras), no dia 16/02/09 o NMP
de E. coli/100mL de gua variou de 7,0 x 102 a 3,5 x 103 para Colilert, de 3,3 x 102 a 3,3
x 103 para Colitag e de 7,9 x 102 a 7,9 x 103 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 1,5 x 103 para Colilert,
1,3 x 103 para Colitag e 3,2 x 103 para FTM.

67

Para as amostras coletadas no dia 09/03/09, o NMP de E. coli/100mL de gua

variou de 1,3 x 102 a 7,9 x 102 para Colilert, de 1,3 x 102 a 7,0 x 102 para Colitag e 4,5 x
10 a 6,8 x 102 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 2,7 x 102 para Colilert,
3,6 x 102 para Colitag e 1,9 x 102 para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 23/03/09 o NMP de E. coli/100mL de gua
variou de 4,6 x 102 a 1,7 x 103 para Colilert, de 2,3 x 102 a 1,3 x 103 para Colitag e de
3,3 x 102 a 7,0 x 103 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 1,0 x 103 para Colilert,
7,4 x 102 para Colitag e 1,5 x 103 para FTM.
Tambm foram calculadas as mdias gerais das estimativas do NMP de E.
coli/100mL de gua para as 30 amostras analisadas para cada metodologia, obtendose: 9,2 x 102 para Colilert, 8,0 x 102 para Colitag e 1,6 x 103 para FTM.
A Tabela 6 mostra os resultados das anlises de coliformes totais e E. coli pelos
mtodos Colilert, Colitag e FTM em amostras de gua de abastecimento.

68

Tabela 6 - Resultados das anlises de coliformes totais e E. coli pelos mtodos Colilert, Colitag e FTM em
amostras de gua de abastecimento (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRA
COLIFORMES TOTAIS
E. coli
COLILERT COLITAG FTM COLILERT COLITAG FTM
13/04/09
1
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
2
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
3
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
4
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
5
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
6
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
7
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
8
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
9
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
10
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
27/04/09
1
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
2
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
3
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
4
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
5
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
6
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
7
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
8
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
9
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
10
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
04/05/09
1
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
2
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
3
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
4
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
5
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
6
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
7
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
8
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
9
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1
10
<1,8
<1,8
<1,1
<1,8
<1,8
<1,1

Nota-se pelos dados desta tabela que nenhuma das amostras de gua de
abastecimento pblico da cidade de Piracicaba apresentou contaminao por
coliformes, nem totais e nem E. coli. Portanto, todas as 30 amostras analisadas
apresentaram-se como adequadas potabilidade humana de acordo com a Portaria
518 de 25 de maro de 2004 e sem nenhuma diferena nos resultados obtidos pelas 3
metodologias utilizadas.
A Tabela 7 exibe os resultados das anlises de coliformes totais pelos mtodos
Colilert, Colitag e FTM em amostras de gua do rio (NMP/100mL).

69

Tabela 7 - Resultados das anlises de coliformes totais pelos mtodos Colilert, Colitag e FTM em
amostras de gua do rio (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRA
COLIFORMES TOTAIS
COLILERT COLITAG
FTM
18/05/2009
1
7,9 x 104
9,4 x 104
1,1 x 105
2
9,4 x 104
4,9 x 104
4,9 x 104
4
5
3
4,9 x 10
1,7 x 10
4,9 x 104
4
4
4
7,9 x 10
7,9 x 10
7,0 x 104
5
4
5
1,3 x 10
7,9 x 10
1,1 x 105
5
4
6
1,3 x 10
7,9 x 10
7,9 x 104
5
4
7
1,1 x 10
4,9 x 10
4,9 x 104
4
4
8
7,9 x 10
4,9 x 10
4,9 x 104
5
4
9
1,1 x 10
7,9 x 10
7,9 x 104
4
4
10
7,9 x 10
7,0 x 10
7,9 x 104
4
4
MDIAS
9,4 X 10
8,0 X 10
7,2 X 104
4
5
02/06/2009
1
3,3 x 10
1,3 x 10
1,3 x 104
4
4
2
4,9 x 10
7,9 x 10
1,1 x 104
4
4
3
4,9 x 10
1,7 x 10
2,3 x 104
4
5
4
3,3 x 10
1,1 x 10
3,3 x 104
4
5
5
4,9 x 10
1,3 x 10
1,7 x 104
4
4
6
3,3 x 10
4,6 x 10
1,3 x 104
4
4
7
3,1 x 10
3,1 x 10
1,2 x 103
4
4
8
7,9 x 10
2,3 x 10
1,4 x 103
4
5
9
2,3 x 10
1,3 x 10
3,3 x 104
5
4
10
1,3 x 10
7,9 x 10
7,9 x 103
4
4
MDIAS
5,1 X 10
7,8 X 10
1,5 X 104
5
5
15/06/2009
1
1,3 x 10
5,4 x 10
2,2 x 105
5
5
2
3,5 x 10
9,2 x 10
3,5 x 105
5
5
3
5,4 x 10
1,7 x 10
3,5 x 105
5
5
4
5,4 x 10
5,4 x 10
3,5 x 105
5
5
5
2,4 x 10
5,4 x 10
5,4 x 105
5
5
6
5,4 x 10
3,5 x 10
5,4 x 105
5
5
7
3,5 x 10
3,5 x 10
3,9 x 104
4
5
8
3,1 x 10
3,5 x 10
2,3 x 104
6
5
9
1,6 x 10
9,2 x 10
1,4 x 105
5
5
10
3,5 x 10
3,5 x 10
2,8 x 105
5
5
MDIAS
4,7 X 10
5,0 X 10
2,8 X 105

Da mesma forma que ocorreu com os resultados das anlises para amostras de
gua da bica, aqui tambm houve uma grande variao nas contagens obtidas,
independentemente da metodologia utilizada.
Para as amostras coletadas no dia 18/05/09, o NMP de coliformes totais/100mL
de gua variou de 4,9 x 104 a 1,3 x 105 para Colilert, de 4,9 x 104 a 1,7 x 105 para
Colitag e de 4,9 x 104 a 1,1 x 105 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 9,4 x 104 para Colilert,
8,0 x 104 para Colitag e 7,2 x 104 para FTM.

70

Para as amostras coletadas no dia 02/06/09, o NMP de coliformes totais/100mL

de gua variou de 2,3 x 104 a 1,3 x 105 para Colilert, de 1,7 x 104 a 1,3 x 105 para
Colitag e de 1,2 x 103 a 3,3 x 104 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 5,1 x 104 para Colilert,
7,8 x 104 para Colitag e 1,5 x 104 para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 15/06/09, o NMP de coliformes totais/100mL
de gua variou de 3,1 x 104 a 1,6 x 106 para Colilert, de 1,7 x 105 a 9,2 x 105 para
Colitag e de 2,3 x 104 a 5,4 x 105 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 4,7 x 105 para Colilert,
5,0 x 105 para Colitag e 2,8 x 105 para FTM.
Tambm foram calculadas as mdias gerais das estimativas do NMP de
coliformes totais/100mL de gua para as 30 amostras analisadas para cada
metodologia, obtendo-se: 2,1 x 105 para Colilert, 2,2 x 105 pra Colitag e 1,2 x 105 para
FTM.
A Tabela 8 mostra os resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert,
Colitag e fermentao em tubos mltiplos em amostras de gua do rio (NMP/100mL).

71

Tabela 8 - Resultados das anlises de E. coli pelos mtodos Colilert, Colitag e FTM em amostras de gua
do rio (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRA
E. coli
COLILERT COLITAG
FTM
18/05/2009
1
1,1 x 104
3,3 x 104
1,7 x 104
2
1,7 x 104
1,3 x 104
1,7 x 104
4
4
3
1,3 x 10
1,7 x 10
4,9 x 104
4
4
4
3,3 x 10
2,3 x 10
4,6 x 104
4
4
5
3,3 x 10
3,3 x 10
1,7 x 104
4
4
1,3 x 10
2,2 x 104
6
7,9 x 10
4
4
4,9 x 10
2,2 x 104
7
1,1 x 10
4
4
8
3,3 x 10
4,9 x 10
2,2 x 104
4
4
1,4 x 10
4,9 x 104
9
3,3 x 10
4
4
10
1,1 x 10
3,3 x 10
6,8 x 103
4
4
MDIAS
2,7 x 10
2,8 x 10
2,7 x 104
3
3
02/06/2009
1
1,7 x 10
1,3 x 10
2,3 x 103
3
3
2
1,3 x 10
4,9 x 10
6,8 x 103
3
3
3
4,9 x 10
3,3 x 10
1,7 x 103
3
2
6,8 x 10
1,4 x 103
4
1,7 x 10
2
3
5
7,8 x 10
4,9 x 10
6,8 x 103
3
3
6
2,2 x 10
4,9 x 10
4,9 x 103
3
3
7
7,0 x 10
2,2 x 10
9,3 x 102
3
3
8
4,9 x 10
3,3 x 10
9,3 x 102
3
3
1,7 x 10
2,3 x 103
9
2,2 x 10
3
3
10
4,9 x 10
1,7 x 10
4,9 x 103
3
3
MDIAS
3,2 x 10
2,9 x 10
3,3 x 103
4
4
15/06/2009
1
1,7 x 10
1,7 x 10
6,8 x 103
4
3
2
1,1 x 10
7,9 x 10
4,9 x 103
3
3
3
2,3 x 10
4,0 x 10
4,9 x 103
3
3
4
3,3 x 10
9,3 x 10
1,1 x 104
3
4
5
4,0 x 10
4,9 x 10
1,7 x 103
3
3
6
6,8 x 10
4,0 x 10
3,3 x 103
3
3
7
2,3 x 10
4,9 x 10
3,1 x 103
3
4
8
4,9 x 10
1,3 x 10
6,8 x 102
3
3
9
1,3 x 10
1,7 x 10
3,3 x 103
3
3
2,3 x 10
6,8 x 103
10
2,3 x 10
3
4
MDIAS
5,5 x 10
1,1 x 10
4,7 x 103

Aqui tambm os resultados variaram bastante nas 10 amostras pelos mesmos

motivos expostos anteriormente, quando apresentados os dados da Tabela 4.
Para as amostras coletadas no dia 18/05/09, o NMP de E. coli/100mL de gua
variou de 1,1 x 104 a 7,9 x 104 para Colilert, de 1,3 x 104 a 4,9 x 104 para Colitag e de
6,8 x 103 a 4,9 x 104 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 2,7 x 104 para Colilert,
2,8 x 104 para Colitag e 2,7 x 104 para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 02/06/09, o NMP de E. coli/100mL de gua
variou de 7,8 x 102 a 7,0 x 103 para Colilert, de 6,8 x 102 a 4,9 x 103 para Colitag e de
9,3 x 102 a 6,8 x 103 para FTM.

72

As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 3,2 x 103 para Colilert,
2,9 x 103 para Colitag e 3,3 x 103 para FTM.
Para as amostras coletadas no dia 15/06/09, o NMP de E. coli/100mL de gua
variou de 1,3 x 103 a 1,7 x 104 para Colilert, de 1,7 x 103 a 4,9 x 104 para Colitag e de
6,8 x 102 a 1,1 x 104 para FTM.
As mdias obtidas para as 10 amostras neste dia foram: 5,5 x 103 para Colilert,
1,1 x 104 para Colitag e 4,7 x 103 para FTM.
Tambm foram calculadas as mdias gerais das estimativas do NMP de E.
coli/100mL de gua para as 30 amostras analisadas para cada metodologia, obtendose: 1,2 x 104 para Colilert, 1,4 x 104 para Colitag e 1,2 x 104 para FTM.
Para a anlise dos dados obtidos foi feita a transformao logartmica na base
10. A Figura 18 ilustra as mdias transformadas das contagens para coliformes totais
em todas as amostras analisadas, pelas diferentes metodologias utilizadas.

4,9514

6
5
3,4793

Mdias

4
3
2
1
-0,301
0
Abastecimento

Bica

Rio

-1
Pontos

Figura 18 - Mdias das contagens de coliformes totais nos diferentes pontos analisados, incluindo os
diferentes mtodos utilizados
Mdias obtidas pela escala transformada

Nas anlises de coliformes totais incluindo todos os pontos e todos os mtodos a

menor contagem encontrada foi -0,3010, o que corresponde <1,1 NMP/100mL de

73

gua na escala original em amostras de gua de abastecimento pelo mtodo FTM e

<1,8 NMP/100mL de gua na escala original em amostras de gua de abastecimento
pelos mtodos Colilert e Colitag. A maior contagem foi de 6,2041 (correspondente 1,6
x 106 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra de gua do rio pelo
mtodo Colilert.
A Figura 19 mostra as mdias das contagens transformadas para E. coli em
todas as amostras analisadas pelas diferentes metodologias utilizadas.

3,8125

4
2,8057

Mdias

3
2
1
-0,301
0
Abastecimento

Bica

Rio

-1
Pontos

Figura 19 - Mdias das contagens de E. coli nos diferentes pontos analisados, incluindo os diferentes
mtodos utilizados
Mdias obtidas pela escala transformada

Nas contagens de E. coli, a menor encontrada foi -0,3010, que corresponde

<1,1 NMP/100mL de gua na escala original em todas as amostras de gua de
abastecimento pelo mtodo FTM e <1,8 NMP/100mL de gua na escala original em
todas as amostras de gua de abastecimento pelos mtodos Colilert e Colitag. A maior
contagem foi de 4,8976 (correspondente 7,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala
original) em uma amostra de gua do rio, pelo mtodo Colilert.
A Figura 20 exibe as mdias das contagens transformadas de coliformes totais
pelas 3 metodologias utilizadas, incluindo todos os pontos de amostragem.

74

6
5

Mdias

4
2,7579

2,7426

2,6291

3
2
1
0
Colilert

Colitag

FTM

Mtodos

Figura 20 - Mdias das contagens de coliformes totais pelos mtodos utilizados na escala transformada
(incluindo todos os pontos)

A menor contagem de coliformes totais encontrada pelos mtodos Colilert,

Colitag e FTM foi -0,3010, o que corresponde <1,8 NMP/100mL de gua na escala
original encontrada pelos mtodos rpidos e <1,1 NMP/100mL de gua na escala
original encontrada pelo mtodo FTM em todas as amostras de gua de abastecimento.
A maior contagem encontrada pelo mtodo Colilert foi 6,2041 (correspondente a
1,6 x 106 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra de gua do rio, pelo
mtodo Colitag, 5,9638 (correspondente 9,2 x 105 NMP/100mL de gua na escala
original) em duas amostras de gua do rio e pelo mtodo FTM, 5,7324 (correspondente
5,4 x 105 NMP/100mL de gua na escala original) em duas amostras tambm de gua
do rio.
A Figura 21 mostra as mdias das contagens transformadas encontradas para E.
coli nas 3 metodologias utilizadas, incluindo todos os pontos de amostragem.

75

4,5
4
3,5

Mdias

3
2,5

2,1004

2,1163

2,1005

2
1,5
1
0,5
0
Colilert

Colitag

FTM

Mtodos

Figura 21 - Mdias das contagens de E. coli pelos mtodos utilizados na escala transformada (incluindo
todos os pontos)

Em relao s contagens de E. coli encontradas pelos mtodos utilizados, o

Colilert e o Colitag apresentaram como menor contagem -0,3010 (correspondente
<1,8 NMP/100mL de gua na escala original) para amostras de gua de abastecimento.
O mtodo FTM tambm mostrou como menor contagem -0,3010 (correspondente
<1,1 NMP/100mL de gua na escala original) tambm para todas as amostras de gua
de abastecimento.
A maior contagem de E. coli pelo mtodo Colilert foi de 4,8976 (correspondente
7,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra de gua do rio; pelo
mtodo Colitag foi de 4,6902 (correspondente 4,9 x 104 NMP/100mL de gua na
escala original) em trs amostras de gua do rio, e pelo mtodo FTM foi de 4,6902
(correspondente 4,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em duas amostras
de gua do rio.

2.4.1.1 Comparao de metodologia em cada ponto analisado

Em todas as amostras de gua de abastecimento analisadas (30) no foram
encontradas bactrias do grupo coliforme, ou seja, nem coliformes totais e nem E. coli.

76

A Figura 22 exibe as mdias das contagens transformadas encontradas para

coliformes totais e E. coli em amostras de gua da bica.

4,5
4
3,5

3,54

3,47

3,42
2,81

2,78

Mdias

2,82

2,5

Coliformes totais
E. coli

2
1,5
1
0,5
0
Colilert

Colitag

FTM

Mtodos

Figura 22 - Mdias das contagens para coliformes totais e E. coli em amostras de gua proveniente da
bica na escala transformada

Nas amostras de gua da bica, as contagens de coliformes totais encontradas

em todos os mtodos utilizados variaram de 2,6902 (correspondente 4,9 x 102
NMP/100mL de gua

na escala original) em uma amostra pelo mtodo Colitag a

4,9731 (correspondente 9,4 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em uma

amostra tambm pelo mtodo Colitag.
Dentro das contagens obtidas para coliformes totais pelo mtodo Colilert, a
variao foi de 3,0414 (correspondente 1,1 x 103 NMP/100mL de gua na escala
original) em trs amostras, a 4,3802 (correspondente 2,4 x 104 NMP/100mL de gua
na escala original) em uma amostra.
No mtodo Colitag, a variao foi de 2,6902 (correspondente 4,9 x 102
NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, a 4,9731 (correspondente
9,4 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) tambm em uma amostra.
Para o mtodo FTM, a menor contagem encontrada foi de 2,8976
(correspondente 7,9 x 102 NMP/100mL de gua na escala original) em duas

77

amostras, e a maior contagem foi 4,2304 (correspondente 1,7 x 104 NMP/100mL de

gua na escala original) em uma amostra.
Em relao s contagens de E. coli encontradas em todos os mtodos utilizados,
a menor foi 1,6532 (correspondente 4,5 x 10 NMP/100mL de gua na escala original)
em uma amostra pelo mtodo FTM, e a maior foi 3,8976 (correspondente 7,9 x 103
NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra tambm pelo mtodo FTM.
Para o mtodo Colilert, a menor contagem foi de 2,1139 (correspondente 1,3 x
102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, e a maior de 3,5440
(correspondente 3,5 x 103 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra.
A variao encontrada no mtodo Colitag foi de 2,1139 (correspondente 1,3 x
102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, a 3,5185
(correspondente 3,3 x 103 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra.
No mtodo FTM, a menor contagem foi de 1,6532 (correspondente 4,5 x 10
NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra e a maior foi de 3,8976
(correspondente 7,9 x 103 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra.
A Figura 23 mostra as mdias das contagens transformadas para coliformes
totais e E. coli em amostras de gua do rio.

78

6,00
5,04

5,11

4,71

5,00

Mdias

3,87

3,79

4,00

3,78
Coliformes totais

3,00

E. coli

2,00
1,00
0,00
Colilert

Colitag

FTM

Mtodos

Figura 23 - Mdias das contagens para coliformes totais e E. coli em amostras de gua proveniente do rio
na escala transformada

Nas amostras de gua do rio as contagens de coliformes totais encontradas

incluindo todos os mtodos utilizados, variaram de 3,0792 (correspondente 1,2 x 103
NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra pelo mtodo FTM, a 6,2041
(correspondente 1,6 x 106 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra
pelo mtodo Colilert.
Pelo mtodo Colilert, a menor contagem encontrada foi 4,3617 (correspondente
2,3 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, e a maior foi
6,2041 (correspondente 1,6 x 106 NMP/100mL de gua na escala original) tambm
em uma amostra.
Pelo mtodo Colitag a menor contagem foi de 4,2304 (correspondente 1,7 x
4

10 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, e a maior de 5,9638

(correspondente 9,2 x 105 NMP/100mL de gua na escala original) em duas
amostras.
As contagens de coliformes totais pelo mtodo FTM variaram de 3,0792
(correspondente 1,2 x 103 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra,
a 5,7324 (correspondente 5,4 x 105 NMP/100mL de gua na escala original) em duas
amostras.

79

Nas anlises de E. coli em amostras de gua do rio, a variao encontrada foi de

2,8325 (correspondente 6,8 x 102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma
amostra pelos mtodos Colitag e FTM, a 4,8976 (correspondente 7,9 x 104
NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra pelo mtodo Colilert.
Pelo mtodo Colilert, a menor contagem encontrada foi 2,8921 (correspondente
7,8 x 102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, e a maior foi
4,8976 (correspondente 7,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em uma
amostra.
No mtodo Colitag, a menor contagem encontrada de E. coli foi de 2,8325
(correspondente 6,8 x 102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra,
e a maior foi de 4,6902 (correspondente 4,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala
original) em trs amostras.
Pelo mtodo FTM, a menor contagem encontrada foi de 2,8325 (correspondente
6,8 x 102 NMP/100mL de gua na escala original) em uma amostra, e a maior foi de
4,6902 (correspondente 4,9 x 104 NMP/100mL de gua na escala original) em duas
amostras.

2.4.2 Anlise estatstica dos mtodos

Pela anlise estatstica exploratria foram encontrados alguns problemas, tais
como escala, outliers (pontos discrepantes) e heterogeneidade de varincias. Para
resolver estes problemas foi utilizado o mtodo de transformao potncia tima de
Box; Cox (1964) o qual sugeriu a transformao logartmica na base 10 dos dados
obtidos.
A alta variabilidade encontrada nos dados se deve ao fato de os trs pontos
escolhidos para as anlises apresentarem contaminaes diferentes, sendo um de
contaminao muito baixa (abastecimento), um de contaminao intermediria (bica) e
um de contaminao alta (rio). Assim, houve uma grande diferena na escala dos
dados encontrados, sendo que para coliformes totais as contagens variaram de <1,1
NMP de coliformes totais/100mL de gua (abastecimento) at 1,6 x 106 NMP de

80

coliformes totais/100mL de gua (rio). Para E. coli a variao foi de <1,1 NMP de E.
coli/100mL de gua (abastecimento) a 7,9 x 104 NMP de E. coli/100mL de gua (rio).
A variabilidade dos dados obtidos em amostras oriundas de um mesmo ponto
tambm se deve ao fato das amostragens terem sido realizadas em trs dias diferentes.
Desta forma, pode ter ocorrido variaes de temperatura, regime de chuva, pH da gua
coletada e nutrientes disponveis, o que pode ter acarretado uma variabilidade na
contagem dos microrganismos analisados. No entanto o efeito de dias foi modelado
para a anlise desses dados.
Os resultados da anlise estatstica obtidos para coliformes totais na escala
transformada mostraram uma interao entre pontos e mtodos; desta forma as mdias
de cada mtodo foram estudadas dentro de cada ponto e vice-versa a partir do
desdobramento da interao.
A Tabela 9 e a Figura 24 mostram as mdias obtidas a partir da transformao
logartmica das contagens encontradas para coliformes totais em todos os pontos e por
todos os mtodos.

Tabela 9 - Contagens de coliformes totais em cada mtodo dentro de cada ponto

Mtodos
Pontos

Abastecimento
Bica
Rio

Colilert

Colitag

FTM

-0,3010

-0,3010

-0,3010

( 0,0) Ac

( 0,0) Ac

( 0,0) Ac

3,5391

3,4233

3,4755

( 0,3843) Ab

( 0,4531) Ab

(0,3676) Ab

5,0358

5,1055

4,7130

( 0,4611) Aa

( 0,4628) Aa

( 0,6731) Ba

Notas: Mdias e comparaes obtidas a partir da transformao logartmica dos dados.

Mdias seguidas de mesma letra minscula na vertical e mdias seguidas da mesma letra
maiscula na horizontal no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de significncia.

81

5,04
A

6,00
3,54
A

5,00

3,42
A

5,11 4,71
A
B

3,48
A

Mdias

4,00
Colilert

3,00

Colitag
2,00
1,00
0,00

FTM
-0,3 -0,3
A
A

0,3
A

Abastecimento

Bica

Rio

-1,00
Pontos

Figura 24 - Contagens de coliformes totais em cada mtodo dentro de cada ponto

Mdias e comparaes obtidas a partir da transformao logartmica dos dados.
Mdias seguidas de mesma letra maiscula em um mesmo ponto no diferem entre si pelo
teste de Tukey ao nvel de 5% de significncia.

Nas amostras de gua de abastecimento e de bica no foi encontrada diferena

significativa entre os trs mtodos utilizados. J nas amostras de gua do rio o mtodo
FTM diferiu significativamente dos mtodos Colilert e Colitag. Os dois mtodos rpidos
estudados no diferiram significativamente entre si.
Nas amostras de gua do rio, as contagens obtidas pelo mtodo FTM foram
menores que as encontradas pelos mtodos rpidos, o que pode indicar uma maior
capacidade dos meios de cultivos dos mtodos rpidos de recuperar melhor as clulas
de coliformes totais injuriadas, conforme citaes e discusses mencionadas na reviso
de literatura colocadas no presente trabalho, utilizando tais metodologias.
Em todos os mtodos utilizados foi observada diferena significativa entre as
mdias das contagens de coliformes totais entre as amostras de abastecimento, bica e
rio. Este fato se deve a grande diferena entre as contaminaes por bactrias
coliformes totais encontradas nos diferentes pontos, como era esperado por contemplar
amostras pouco contaminada (abastecimento), medianamente contaminada (bica) e
altamente contaminada (rio). Tal fato foi pensado na escolha dos pontos de coleta, para

82

que pudesse ser analisada a correlao entre metodologias (diferena significativa ou

no) utilizando amostras com diferentes contaminaes bacterianas.
Na anlise estatstica dos dados obtidos nas contagens de E. coli na escala
transformada foi observada diferena significativa entre os diferentes pontos de coleta e
no foi observado o efeito de interao entre ponto e mtodo. Portanto, a comparao
de metodologia foi feita dentro de cada ponto.
Nas anlises das amostras de gua de abastecimento a mdia encontrada na
escala transformada para todos os mtodos foi -0,3010, j que em nenhuma amostra foi
detectada a presena desta bactria. As mdias negativas se devem ao fato de terem
sido feitas a partir da transformao logartmica dos dados. Assim, na anlise estatstica
no foi encontrada diferena significativa entre os mtodos ao nvel de 5% de
significncia, conforme mostra a Figura 25.

0
Colilert

Colitag

FTM

-0,05

Mdias

-0,1
-0,15
Srie1
-0,2
-0,25
-0,3
-0,35

-0,3010
A

-0,3010
A

-0,3010
A

Mtodos

Figura 25 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua de abastecimento

Mdias encontradas a partir da transformao logartmica dos dados.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.

Para as amostras de gua da bica as mdias obtidas a partir dos dados

transformados foram de 2,8148 para o Colilert, 2,7783 para o Colitag e 2,8240 para o
FTM. A anlise estatstica destes dados no mostrou uma diferena significativa entre

83

os mtodos ao nvel de 5% de significncia (Tabela 10 e Figura 26), o que indica que

eles so equivalentes.
Tabela 10 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua da bica

Mtodo

Mdia (NMP/100mL de gua)

Colilert

2,8148 ( 0,3901) a

Colitag

2,7783 ( 0,3282) a

FTM

2,8240 ( 0,6341)a

Notas: Mdias encontradas a partir da transformao logartmica dos dados.

Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de
5% de significncia.

4,00
3,50

2,81
A

2,78
A

Colilert

Colitag

2,82
A

3,00
Mdias

2,50
2,00
1,50
1,00
0,50
0,00
FTM

Mtodos

Figura 26 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua da bica

Mdias encontradas a partir da transformao logartmica dos dados.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.

Nos dados encontrados para E. coli em amostras de gua da bica pode-se

observar que o mtodo Colitag foi o que apresentou a menor mdia, o que indica
provavelmente que ele foi o que recuperou menos clulas injuriadas desta bactria. J
o mtodo FTM foi o que teve a maior capacidade de recuperar estas clulas. Apesar

84

desta diferena na recuperao das clulas microbianas, no foi observada diferena

significativa entre estes mtodos ao nvel de 5% de significncia (Figura 26).
Na anlise estatstica das contagens de E. coli da gua do rio aps a
transformao logartmica, foram encontradas as seguintes mdias para cada mtodo:
Colilert, 3,7875; Colitag, 3,8716; e FTM, 3,7786. Pelo teste de Tukey, no houve
diferena significativa entre estas mdias ao nvel de 5% de significncia (Tabela 11 e
Figura 27).
Tabela 11 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua do rio

Mtodo

Mdia (NMP/100mL de gua)

Colilert

3,7875 ( 0,5101) a

Colitag

3,8716 ( 0,5245) a

FTM

3,7786 ( 0,5218) a

Notas: Mdias encontradas a partir da transformao logartmica dos dados.

Mdias seguidas de mesma letra minscula no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de
5% de significncia.

5,00
4,50

3,79
A

3,87
A

3,78
A

Colitag

FTM

4,00

Mtodos

3,50
3,00
2,50
2,00
1,50
1,00
0,50
0,00
Colilert

Mdias

Figura 27 - Mdias das contagens para E. coli em amostras de gua do rio

Mdias encontradas a partir da transformao logartmica dos dados.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.

85

Dentre os mtodos utilizados, o Colitag foi o que apresentou uma contagem

maior de E. coli em amostras de gua do rio, o que significa que provavelmente ele foi
capaz de recuperar mais clulas injuriadas desta bactria. O mtodo FTM, ao contrrio
do observado nas amostras de gua da bica, foi o que apresentou uma menor
contagem e conseqentemente uma menor recuperao das clulas injuriadas, ficando
o mtodo Colilert com contagens intermedirias. Apesar disto, no foi observada
diferena significativa entre os 3 mtodos ao nvel de 5% de significncia.

2.4.1.3 Discusso dos resultados da comparao das metodologias

Cantusio Neto (2001) avaliou as condies higinico-sanitrias de gua tratada,
entre 1997 a 1998. Foram analisadas 549 amostras de gua pelos mtodos Colilert e
fermentao em tubos mltiplos. Tanto na quantificao quanto na qualificao de
coliformes totais e E. coli esses mtodos se mostraram equivalentes, destacando a
rapidez do mtodo Colilert.
Olson et al. (1991) compararam os mtodos Colilert e Coliquick com o mtodo
padro de membrana filtrante. Foram analisadas 750 amostras de gua de origens
diferentes (abastecimento, reservatrios de armazenamento cobertos e descobertos,
poos e afluentes para estao de tratamento de gua). A concordncia entre o Colilert
e a membrana filtrante e entre o Coliquick e a membrana filtrante foi maior que 94,8%, o
que indica que estes mtodos so aceitveis. Por se mostrarem semelhantes, tanto o
Colilert quanto o Coliquick podem ser usados como alternativa ao mtodo padro.
Consoli et al. (2006) realizaram um estudo onde 56 amostras de gua oriundas
de diversas etapas da ETA foram analisadas pelas tcnicas da membrana filtrante
associada ao meio de cultura Petrifilm EC e Colilert Quanti-Tray (IDEXX) para a
deteco de coliformes totais e termotolerantes. Esses mtodos apresentaram boa
concordncia (94,6%), sendo que todos os casos de discordncia envolveram
problemas na deteco de E. coli no Petrifilm.
Em outro estudo realizado comparando dois mtodos para deteco de
coliformes e E. coli, o Colilert e a tcnica da membrana filtrante, foram analisadas 125
amostras de gua doce de 24 pontos (rio, nascente e subterrnea). Em algumas
amostras o Colilert detectou uma contagem maior de coliformes totais e de E. coli que a

86

membrana filtrante, o que sugere que o Colilert promove uma recuperao melhor das
clulas microbianas. Apesar disto os mtodos foram considerados equivalentes, o que
mostra que o mtodo Colilert pode ser usado como substituto do mtodo da membrana
filtrante, com a vantagem de ser mais rpido (CHAO; CHAO; CHAO, 2003).
Outro estudo realizado comparando as metodologias membrana filtrante e
Colilert concluiu que o mtodo rpido pode ser considerado equivalente ao mtodo
convencional. Foram analisadas 1695 amostras de gua oriundas de diferentes fontes.
Em algumas amostras o Colilert mostrou resultados falso-positivos devido alta
contagem de Aeromonas encontrada nestas amostras. A Aeromonas capaz de
crescer no meio e provocar reaes que indicam a positividade deste mtodo
(COWBURN et al., 1994).
Outro estudo realizado por Eckner (1998) analisou 338 amostras de gua, sendo
261 amostras de gua potvel e 77 amostras de gua para recreao pelos mtodos da
membrana filtrante, fermentao em tubos mltiplos e Colilert. Concluiu-se que o
mtodo rpido Colilert foi mais sensvel deteco de coliformes totais que os mtodos
padres membrana filtrante e fermentao em tubos mltiplos e em relao deteco
de E. coli, estes trs mtodos apresentaram sensibilidades iguais. Apesar disto, os
mtodos foram considerados equivalentes, destacando as vantagens do Colilert, tais
como a rapidez e a no necessidade de realizar testes presuntivos.
Hsieh (2008) comparou a tcnica Colitag com a da fermentao em tubos
mltiplos. O mtodo Colitag foi to sensvel quanto tcnica da fermentao em tubos
mltiplos na deteco de coliformes fecais em gua de recreao. As anlises
estatsticas mostraram uma forte correlao entres esses mtodos (0,87), tanto em
contagens altas como em contagens baixas de coliformes fecais. Como o mtodo
Colitag demora apenas 24horas, quando comparado com a tcnica da fermentao em
tubos mltiplos, que demora 96 horas, o primeiro se torna mais vantajoso.
Greghi (2005) analisou trs diferentes mtodos de deteco de coliformes e E.
coli: tcnica da fermentao em tubos mltiplos (FTM) e os mtodos rpidos Colilert e
Readcult, em amostras de gua subterrnea, de superfcie e tratada. O autor observou
que as

tcnicas de substratos definidos apresentaram alta sensibilidade e

especificidade para coliformes totais, o que indica uma boa concordncia com a tcnica

87

FTM. Para a determinao de coliformes termotolerantes a especificidade foi mxima

(100%) em ambos os mtodos rpidos, e a sensibilidade foi maior para o Readcult
(87%) que para o Colilert (>76%). Para esta anlise a concordncia com o mtodo FTM
foi tima para o Readcult (coeficiente kappa 0,85) e boa para o Colilert (0,74). A maior
deteco de coliformes totais e E. coli pelos mtodos rpidos se deve ao fato de os
primeiros apresentarem uma maior capacidade de recuperao e crescimento das
clulas de coliformes que a tcnica de fermentao em tubos mltiplos, e uma maior
especificidade desses meios para E. coli. Apesar dessas diferenas, estatisticamente
estes mtodos apresentaram uma boa concordncia.
Chang; Hsieh (2002) analisaram 22 amostras oriundas de riachos urbanos na
Califrnia pelos mtodo Colitag e pelo mtodo convencional. O Colitag se mostrou to
sensvel quanto o mtodo padro e as anlises estatsticas mostraram uma boa
correlao (0,87) entre estes mtodos tanto em altas como em baixas contagens de
coliformes.
Olstadt et al. (2007) compararam dez mtodos que usam as enzimas presentes
nos coliformes totais e na E. coli como forma de detect-los em amostras de gua.
Todos os mtodos so aprovados pela USEPA, e so eles: Colilert, Colilert-18,
Colisure, m-Coli Blue 24, Readycult Coliforms 100, Chromocult, Coliscan, E*Colite,
Colitag e MI gar. Foi analisada a capacidade de cada mtodo em detectar a presena
e ausncia de coliformes totais e E. coli, de enumerar estes microrganismos (quando o
mtodo era capaz) e de inibir Aeromonas, que podem levar a resultados falso-positivos.
Foi observada uma grande variedade dos resultados e uma diferena significativa entre
eles, indicando a necessidade de se realizar novos estudos neste sentido.
Fricker; Illingworth; Fricker (1997) analisaram amostras de gua contaminadas
com culturas puras de E. coli pelos mtodos da membrana filtrante e Colilert. Apesar de
o Colilert ser capaz de detectar um nmero maior de E. coli, estatisticamente no foram
encontradas diferenas significativas entre estes mtodos. Neste mesmo trabalho foi
feita a comparao entre estes dois mtodos na anlise de coliformes e de E. coli em
amostras de gua potvel. Foi encontrado um nmero maior de coliformes pelo Colilert
que pela membrana filtrante, possivelmente devido ao fato de a maioria das amostras

88

conterem bactrias do grupo coliforme que no possui a enzima lactose permease.

Apesar disso, no foi encontrada diferena significativa entre estes mtodos.
Este mesmo trabalho comparou os mtodos Colilert 24 e Colilert 18 (que fornece
resultado em 18 horas). Foram analisadas amostras de gua tratada, aps a filtrao e
antes da clorao. No foram encontradas diferenas significativas entre os mtodos
(FRICKER; ILLINGWORTH; FRICKER, 1997).
Edberg et al. (1990) comparam os mtodos Colilert e fermentao em tubos
mltiplos para as contagens de coliformes totais e E. coli em amostras de gua de
superfcie. O mtodo Colilert apresentou sensibilidade semelhante ao da fermentao
em tubos mltiplos, e estes mtodos foram considerados equivalentes.
Os resultados encontrados neste trabalho para as anlises de coliformes totais
em amostras de gua de abastecimento e bica, e para as anlises de E. coli em todos
os pontos analisados (abastecimento, bica e rio) no apresentaram diferena
significativa entre os mtodos, concordando com o encontrado na literatura.
J os resultados das anlises de coliformes totais em amostras de gua do rio
apresentaram diferena significativa entre FTM e Colilert e entre FTM e Colitag. Esta
diferena pode ter ocorrido devido presena de microrganismos no coliformes que
geram resultados falso-positivos nos mtodos Colilert e Colitag, como a Aeromonas,
nas amostras de gua do rio. A presena de resultados falso-positivos pelos mtodos
rpidos foi destacada por Cowburn et al. (1994) e Olstadt et al. (2007).
A Aeromonas pode apresentar uma pequena produo da enzima galactosidase. Assim, em amostras de gua com alta contagem deste microrganismo,
quando analisada pelos mtodos que utilizam esta enzima como indicadora da
presena de coliformes totais, pode haver resultados falso-positivos (OLSTADT et al.,
2007). Ou seja, a Aeromonas pode reagir com o substrato ONPG, tornando o meio
amarelo, o que considerado positivo para coliformes totais, e na verdade no haver
bactrias coliformes na amostra.
Estes meios apresentam mecanismos para inibir a Aeromonas, mas em alguns
casos esta inibio insuficiente (OLSTADT et al., 2007).
Uma outra explicao para esta diferena significativa pode ser pela capacidade
dos mtodos Colilert e Colitag em recuperar clulas bacterianas injuriadas e permitir

89

seu crescimento. Desta forma, pode ser que nas amostras analisadas havia uma
grande quantidade de clulas bacterianas injuriadas, que no foram recuperadas pelo
mtodo FTM, no sendo assim detectadas por este mtodo, mas foram recuperadas e
detectadas pelos outros mtodos utilizados.
De acordo com Fricker et al. (1994) cerca de 10% dos coliformes isolados de
fontes de gua potvel nas reas do Thames no eram capazes de fermentar a lactose,
possivelmente devido ausncia da enzima lactose permease. Segundo Fricker;
Illingworth; Fricker (1997) a incapacidade destes microrganismos em fermentar a
lactose os excluem do grupo coliforme.
Estudos mostraram que o Colilert capaz de recuperar e detectar um nmero
maior de bactrias do grupo coliforme total que os mtodos convencionais, enquanto
que para a recuperao e deteco de E. coli, a capacidade dos mtodos similar
(ECKNER, 1998; FRICKER; ILLINGWORTH; FRICKER, 1997).
Na presente pesquisa, em amostras de gua do rio o mtodo FTM apresentou
uma contagem menor de coliformes totais que os mtodos rpidos Colilert e Colitag,
concordando com o encontrado na literatura. Para contagem de E. coli, em amostras de
gua da bica, o mtodo

FTM apresentou uma contagem maior que os mtodos

rpidos, enquanto que em amostras de gua do rio as contagens desta bactria foram
menores que nos outros mtodos estudados, concordando com a literatura.
A maior capacidade de deteco de bactrias do grupo coliforme e de E. coli
pelos mtodos rpidos foi destacada em diversos trabalhos (CHAO; CHAO; CHAO,
2003; ECKNER, 1998; FRICKER; ILLINGWORTH; FRICKER, 1997; GREGHI 2005).
Neste estudo, apenas a mdia da contagem de E. coli em amostras de gua da
bica foi maior para o mtodo FTM que para o Colilert e Colitag. As contagens de
coliformes totais em amostras de gua da bica e do rio e as contagens de E. coli em
amostras de gua do rio foram maiores em pelo menos um dos mtodos rpidos
analisados do que para o mtodo FTM.
Como ora um mtodo mostra contagens de coliformes totais e/ou E. coli maiores
e ora menores, algumas hipteses podem ser levantadas para justificar tal fato:
1. Devido pobreza nutritiva da gua, que normalmente no permite multiplicao
bacteriana e sim apenas sobrevivncia, h uma heterogeneidade muito grande

90

na distribuio das bactrias na amostra, o que leva a grandes diferenas

contidas nas pipetagens de alquotas para a anlise;
2. Dependendo do estado fisiolgico das clulas bacterianas e de que tipo(s) de
stress/injrias as mesmas foram submetidas, pode ser que alguns dos
meios/mtodos ofeream naquele momento, melhores condies para a
recuperao das injrias metablicas e produo das enzimas necessrias ao
metabolismo responsvel por um resultado positivo: -galactosidase para
coliformes totais no Colilert e no Colitag; -glucoronidase para E. coli no Colilert,
no Colitag e no FTM, e lactose permease para coliformes totais e termotolerantes
no FTM.

2.4.2 Comparao entre coliformes termotolerantes e E. coli pelo mtodo de

fermentao em tubos mltiplos (FTM)
A Tabela 12 ilustra os resultados obtidos nas contagens de coliformes
termotolerantes e de E. coli em amostras de gua de abastecimento, mostrando que
nenhuma das amostras analisadas se mostrou contaminada por estas bactrias.

91

Tabela 12 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli pelo mtodo FTM em
amostras de gua de abastecimento (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRAS
E. coli
COLIFORMES
TERMOTOLERANTES
13/04/09
1
<1,1
<1,1
2
<1,1
<1,1
3
<1,1
<1,1
4
<1,1
<1,1
5
<1,1
<1,1
6
<1,1
<1,1
7
<1,1
<1,1
8
<1,1
<1,1
9
<1,1
<1,1
10
<1,1
<1,1
27/04/09
1
<1,1
<1,1
2
<1,1
<1,1
3
<1,1
<1,1
4
<1,1
<1,1
5
<1,1
<1,1
6
<1,1
<1,1
7
<1,1
<1,1
8
<1,1
<1,1
9
<1,1
<1,1
10
<1,1
<1,1
04/05/09
1
<1,1
<1,1
2
<1,1
<1,1
3
<1,1
<1,1
4
<1,1
<1,1
5
<1,1
<1,1
6
<1,1
<1,1
7
<1,1
<1,1
8
<1,1
<1,1
9
<1,1
<1,1
10
<1,1
<1,1

A Tabela 13 exibe as contagens de coliformes termotolerantes e E. coli em

amostras de gua da bica.

92

Tabela 13 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli pelo mtodo FTM em
amostras de gua da bica (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRAS
E. coli
COLIFORMES
TERMOTOLERANTES
16/02/09
1
9,4 x 102
2,0 x 103
3
2
4,6 x 10
7,0 x 103
3
3
7,9 x 10
7,9 x 103
2
1,3 x 103
4
7,9 x 10
3
1,1 x 104
5
7,0 x 10
3
6
1,4 x 10
1,7 x 103
3
7
3,1 x 10
3,1 x 103
2
8
7,9 x 10
7,9 x 102
3
9
2,3 x 10
2,3 x 103
3
10
3,3 x 10
4,9 x 103
3
MDIAS
3,2 X 10
4,2 X 103
09/03/09
1
9,3 x 10
2,2 x 102
2
2
6,8 x 10
1,1 x 103
3
9,3 x 10
9,3 x 10
3,3 x 102
4
3,3 x 102
5
4,5 x 10
7,8 x 10
6
2,7 x 102
2,7 x 102
7
1,1 x 102
1,1 x 102
8
7,8 x 10
7,8 x 10
9
6,8 x 10
4,5 x 10
10
1,3 x 102
1,7 x 102
MDIAS
1,9 X 102
2,5 X 102
3
23/03/09
1
7,0 x 10
7,0 x 103
2
2
4,9 x 10
1,3 x 103
3
1,1 x 103
3
1,1 x 10
3
1,7 x 103
4
1,3 x 10
2
5
6,8 x 10
1,1 x 103
3
1,7 x 103
6
1,4 x 10
2
7
6,8 x 10
6,8 x 102
2
7,9 x 102
8
7,9 x 10
2
3,3 x 102
9
3,3 x 10
2
10
6,8 x 10
6,8 x 102
3
1,6 X 103
MDIAS
1,5 X 10

Aqui tambm houve muita variao nas contagens obtidas, tanto nas realizadas
nos trs diferentes dias de coleta, bem como nas repeties analticas do mesmo dia de
amostragem.
Em relao estimativa do NMP de coliformes termotolerantes/100mL de gua,
nas amostras coletadas no dia 16/02/09, as contagens variaram de 7,9 x 102 a 1,1 x 104
com mdia de 4,2 x 103. Para as amostras coletadas no dia 09/03, as contagens
variaram de 4,5 x 10 a 1,1 x 103, com mdia de 2,5 x 102. J para as amostras
coletadas no dia 23/03, as contagens variaram de 3,3 x 102 a 7,0 x 103 com mdia de
1,6 x 103. Como mdia geral referente as 30 amostras analisadas, obteve-se 2,0 x 103
NMP de coliformes termotolerantes/100mL de gua da bica.

93

Para as contagens de E. coli, o NMP/100mL variou de 7,9 x 102 a 7,9 x 103, com
mdia de 3,2 x 103, para as amostras coletadas no dia 16/02/09. Para as amostras
coletadas em 09/03, as contagens variaram de 4,5 x 10 a 6,8 x 102, com mdia de 1,9 x
102. Para as amostras do dia 23/03, houve variao de 3,3 x 102 a 7,0 x 103, com mdia
de 1,5 x 103. Como mdia geral referente as 30 amostras analisadas, encontrou-se 1,6
x 103 NMP de E. coli/100mL de gua da bica.
A Tabela 14 mostra as contagens de coliformes termotolerantes e E. coli em
amostras de gua do rio.

94

Tabela 14 - Resultados das anlises de coliformes termotolerantes e E. coli pelo mtodo FTM em
amostras de gua do rio (NMP/100mL)
DATA
AMOSTRAS
E. coli
COLIFORMES
TERMOTOLERANTES
18/05/2009
1
1,7 x 104
2,6 x 104
4
2
1,7 x 10
3,3 x 104
4
3
4,9 x 10
4,9 x 104
4
4,6 x 104
4
4,6 x 10
4
1,7 x 104
5
1,7 x 10
4
6
2,2 x 10
3,3 x 104
4
7
2,2 x 10
2,2 x 104
4
8
2,2 x 10
2,2 x 104
4
9
4,9 x 10
4,9 x 104
3
10
6,8 x 10
1,7 x 104
4
3,1 X 104
MDIAS
2,7 X 10
3
02/06/2009
1
2,3 x 10
2,3 x 103
3
2
6,8 x 10
6,8 x 103
3
1,7 x 103
3
1,7 x 10
3
1,1, x 104
4
1,4 x 10
3
5
6,8 x 10
6,8 x 103
3
7,9 x 103
6
4,9 x 10
2
7
9,3 x 10
1,2 x 103
2
9,3 x 102
8
9,3 x 10
3
3,3 x 103
9
2,3 x 10
3
10
4,9 x 10
7,9 x 103
3
MDIAS
3,3 X 10
5,0 X 103
3
15/06/2009
1
6,8 x 10
1,4 x 104
3
2
4,9 x 10
7,9 x 103
3
3
4,9 x 10
4,9 x 104
4
4
1,1 x 10
2,1 x 104
3
5
1,7 x 10
2,6 x 104
3
6
3,3 x 10
4,6 x 104
3
3,1 x 103
7
3,1 x 10
2
1,2 x 103
8
6,8 x 10
3
2,4 x 104
9
3,3 x 10
3
10
6,8 x 10
3,3 x 104
3
MDIAS
4,7 X 10
2,3 X 104

Mais uma vez nota-se grande variao nas contagens obtidas, tanto nas anlises
realizadas em dias diferentes da coleta, bem como nas 10 amostras do mesmo dia de
coleta.
Para as amostras coletadas no dia 18/05/09, a estimativa do NMP de coliformes
termotolerantes/100mL de gua, variou de 1,7 x 104 a 4,9 x 104 com mdia de 3,1 x 104.
Para as amostras coletadas no dia 02/06, as contagens variaram de 9,3 x 102 a 1,1 x
104, com mdia de 5,0 x 103. Em relao s amostras coletadas no dia 15/06, houve
variao de 1,2 x 103 a 4,9 x 104, com mdia de 2,3 x 104.

95

Como mdia geral para as 30 amostras analisadas, obteve-se 2,0 x 104 NMP de
coliformes termotolerantes/100mL de gua do rio.
Para as contagens de E. coli, o NMP/100mL variou de 6,8 x 103 a 4,9 x 104 para
as amostras coletadas em 18/05, com mdia de 2,7 x 104. Para as amostras coletadas
no dia 02/06, as contagens variaram de 9,3 x 102 a 6,8 x 103, com mdia de 3,3 x 103.
Em relao s amostras coletadas no dia 15/06, houve variao de 6,8 x 102 a 1,1 x
104, com mdia de 4,7 x 104.
Como mdia geral para as 30 amostras analisadas, encontrou-se 1,2 x 104 NMP
de E. coli/100mL de gua do rio.
A Tabela 15 e a Figura 28 mostram as mdias das contagens encontradas para
coliformes termotolerantes e E. coli nos trs pontos de coleta de amostras de gua
utilizados na presente pesquisa.
Tabela 15 - Mdias encontradas para as anlises de coliformes termotolerantes e E. coli

Ponto

Coliformes termotolerantes

E. coli (NMP/100mL de

(NMP/100mL de gua)

gua)

Abastecimento

<1,1 ( 0,0) Ab

<1,1 ( 0,0) Ab

Bica

2,0 x 103 ( 2,7 x 103) Bb

1,6 x 103 ( 2,2 x 103) Ab

Rio

1,9 x 104 ( 1,6 x 104) Ba

1,1 x 104 ( 1,4 x 104) Aa

Notas: Mdias e comparaes obtidas a partir dos dados originais.

Mdias seguidas de mesma letra minscula na vertical e mdias seguidas da mesma letra
maiscula na horizontal no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de significncia.

96

40000
35000
30000

Mdias

25000
B

20000

Coliformes termotolerantes

15000

E. coli

10000

0
-5000

5000
A

Abastecimento

Bica

Rio

Pontos

Figura 28 - Mdias encontradas para as anlises de coliformes termotolerantes e E. coli

Mdias e comparaes obtidas a partir dos dados originais.
Mdias seguidas de mesma letra no mesmo ponto no diferem entre si pelo teste de Tukey ao
nvel de 5% de significncia.

Foi encontrada diferena significativa ao nvel de 5% de significncia entre as

contagens de coliformes termotolerantes e de E. coli tanto para as amostras de gua da
bica, como para as amostras de gua do rio.
Para as amostras de gua de abastecimento analisadas, como no houve
deteco nem de coliformes termotolerantes e nem de E. coli em nenhuma das
amostras, obviamente no houve diferena significativa ao nvel de 5% de significncia.
Devido ao fato de altas contaminaes por coliformes termotolerantes e por E.
coli terem sido encontradas nas amostras de gua de rio, houve diferena significativa
ao nvel de 5% de significncia entre as contagens destas bactrias quando
comparadas com as amostras de gua de abastecimento, que no apresentaram nem
coliformes termotolerantes nem E. coli. J comparando as amostras de gua de bica
com as de abastecimento pblico, no houve diferena significativa ao nvel de 5% de
significncia pelo fato das contagens de coliformes termotolerantes e de E. coli em gua
de bica terem sido menores do que as encontradas na gua de rio (Tabela 15).
Porm, de acordo com a Portaria n 518 de 25 de maro de 2004 do Ministrio
da Sade (BRASIL, 2004), a gua destinada ao consumo humano deve apresentar
ausncia de coliformes termotolerantes ou E. coli em 100mL de gua. Assim, a gua

97

oriunda da bica no considerada potvel, e desta forma no deve ser destinada para
o consumo humano, enquanto que a gua de abastecimento pode ser considerada
potvel e destinada ao consumo humano, apesar de no terem apresentado diferena
significativa.
A Tabela 16 e a Figura 29 exibem as mdias das contagens de coliformes
termotolerantes e E. coli em amostras de gua da bica.
Tabela 16 - Mdias encontradas nas anlises da gua da bica

Microrganismo

Mdia (NMP/100mL)

Coliformes termotolerantes

2,0 x 103 ( 2,7 x 103) a

(NMP/100mL de gua)
E. coli (NMP/100mL de

1,6 x 103 ( 2,2 x 103) b

gua)
Notas: Mdias e comparaes obtidas a partir dos dados originais.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.
5000

4000

Mdias

3000

2000

B
A

1000
0
Coliformes termotolerantes

E. coli

-1000

Figura 29 - Mdias encontradas nas anlises da gua da bica

Mdias e comparaes obtidas a partir dos dados originais.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel
de 5% de significncia.

Srie1

98

Nas anlises feitas com a gua oriunda da bica foi encontrada diferena
significativa ao nvel de 5% de significncia entre as contagens de coliformes
termotolerantes e de E. coli (valor p = 0,0145). As contagens encontradas para
coliformes termotolerantes nestas amostras variaram de 4,5 x 10 NMP/100mL de gua
em uma amostra, a 1,1 x 104 NMP/100mL de gua tambm em uma amostra. Em
relao s contagens encontradas para E. coli, a menor foi de 4,5 x 10 NMP/100mL de
gua em uma amostra e a maior foi de 7,9 x 103 NMP/100mL de gua em uma amostra.
A Tabela 17 e a Figura 30 mostram as mdias das contagens de coliformes
termotolerantes e E. coli em amostras de gua do rio.
Tabela 17 - Mdias encontradas nas anlises da gua do rio

Microrganismo

Mdia (NMP/100mL)

Coliformes termotolerantes

1,9 x 104 ( 1,6 x 104) a

(NMP/100mL de gua)
E. coli (NMP/100mL de

1,1 x 104 ( 1,4 x 104) b

gua)
Notas: Mdias e comparao obtidas a partir dos dados originais
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.

99

40000
35000
30000

Mdias

25000
B

20000

Srie1
15000

10000
5000
0
-5000

Coliformes termotolerantes

E. coli

Figura 30 - Mdias encontradas nas anlises da gua do rio

Mdias e comparaes obtidas a partir dos dados originais.
Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de
significncia.

Em relao gua do rio, tambm foi encontrada diferena significativa ao nvel

de 5% de significncia entre os valores das contagens de coliformes termotolerantes e
de E. coli (valor p = 0,0012). Para coliformes termotolerantes a menor contagem
encontrada foi 9,3 x 102 NMP/100mL de gua em uma amostra, e a maior de 4,9 x 104
NMP/100mL de gua em trs amostras. Para E. coli, a menor contagem encontrada foi
6,8 x 102 NMP/100mL de gua em uma amostra, e a maior foi 4,9 x 104 NMP/100mL de
gua em duas amostras.
Bonilha; Falco (1993) estudaram amostras de gua de irrigao, alface no
lavada e alface lavada quanto a contaminao por coliformes totais, termotolerantes e
E. coli. As mdias encontradas para a contaminao de coliformes termotolerantes da
gua e das alfaces analisadas foram maiores que as encontradas para E. coli.
Feresu; Van Stckle (1990) analisaram amostras de gua do rio quanto
contaminao com coliformes totais, termotolerantes e E. coli. Na maioria dos casos a
contagem encontrada de E. coli foi igual contagem de coliformes termotolerantes,
porm foram encontradas contagens de coliformes termotolerantes maiores que de E.
coli.

100

Assim como os autores citados, neste trabalho tambm foi encontrada uma
diferena entre as contagens de coliformes termotolerantes e E. coli. Esta diferena foi
significativa pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de significncia e se deve ao fato de o
grupo coliforme termotolerante ser formado por bactrias do gnero Escherichia,
Enterobacter e Klebsiella. Apesar de a bactria predominante em material fecal ser a E.
coli, os resultados encontrados indicam que outras bactrias pertencentes ao grupo
coliformes termotolerantes estavam presentes nas amostras, o que elevou a contagem
de bactrias deste grupo, resultando em uma diferena significativa entre estas
contagens.
Como os gneros Enterobacter e Klebsiella possuem bactrias de origem no
necessariamente

fecal,

contagem

de

coliformes

termotolerantes

representativa que a contagem de E. coli como indicador de contaminao fecal.

menos

101

3 CONCLUSO
Os mtodos rpidos avaliados (Colilert e Colitag) se mostraram equivalentes ao
mtodo convencional (fermentao em tubos mltiplos) nas contagens de coliformes
totais em amostras de gua de abastecimento e de gua de bica, e nas contagens de
E. coli nas amostras de todos os pontos analisados (abastecimento, bica e rio).
Na anlise de coliformes totais em amostras de gua do rio o mtodo
convencional FTM diferiu significativamente dos mtodos rpidos Colilert e Colitag. Na
comparao entre os mtodos rpidos para esta mesma anlise no foi observada
diferena significativa entre eles.
Por terem sido equivalentes ao mtodo convencional em amostras de gua de
abastecimento e de bica para as contagens de coliformes totais e equivalentes ao
mtodo convencional para a contagem de E. coli em todos os pontos utilizados
(abastecimento, bica e rio), os mtodos rpidos Colilert e Colitag so recomendados
para a anlise da qualidade bacteriolgica da gua, pois com estes possvel obter o
resultado em 24 horas. Alm disso, as anlises utilizando o Colilert e o Colitag so
menos trabalhosas e no necessitam de testes confirmatrios.
Na comparao das contagens de coliformes termotolerantes e E. coli em
amostras de gua foi encontrada diferena significativa, o que indica que uma
contagem no equivalente a outra.
Pelo fato de nem todos os microrganismos encontrados no grupo coliforme
termotolerante serem de origem exclusivamente fecal, e por esta contagem se
apresentar sempre maior que a contagem de E. coli, o uso da contagem de coliformes
termotolerantes para indicar a contaminao fecal de uma amostra pode superestimar
esta contaminao. Sendo assim, para esta anlise em amostras de gua a contagem
de E. coli passa a ser mais representativa.

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