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OBJETIVOS
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AGENTE QUMICO
Es una sustancia (slido, lquido o gas) que se caracteriza por una composicin
molecular definida y que causa una reaccin en los microorganismos, por ejemplo los
compuestos fenlicos, los alcoholes, el cloro, el yodo y el xido de etileno.
Dependiendo de la concentracin y del tiempo de exposicin, los daa o los mata. El
pH y la salinidad, son factores qumicos que afectan el crecimiento de los
microorganismos.
AGENTES QUMICOS
Alta concentracin de solutos
Desinfectantes y antispticos
Antibiticos
Necesidad de oxgeno
NaCl
Halfilos Moderados
Crecimiento ptimo 3% y
mximo hasta 15% de NaCl.
MICROORGANISMOS HALFILOS
Halfilos Extremo
Crecimiento ptimo 15 hasta
25% de NaCl.
Halotolerantes
Capaces de crecer
ptimamente en ausencia de
sal, pero son capaces de
tolerar hasta un 15 %
MICROORGANISMOS OSMFILOS
Osmfilos
Osmotolerantes
Los mtodos de difusin se basan en la distribucin homognea del antibitico sobre los
medios slidos de cultivo. En trminos generales los antibiticos se impregnan en discos
de papel que se colocan sobre placas de medio de cultivo en las que previamente se ha
extendido la bacteria a considerar. Tanto la cantidad de antibitico como el nmero de
bacterias (inculo) deben controlarse cuidadosamente. El antibitico se difunde por el
agar creando un gradiente de concentracin decreciente segn se aleja del disco. La
bacteria si resulta susceptible no crece en las inmediaciones del disco y forma un halo
de inhibicin. Dicho halo es ms grande cuanto mayor es el grado de sensibilidad de la
cepa al antibitico.
Microbiologa clnica prctica, (1994)
III.2 CEPAS:
Escherichia coli
Morfologa
Escherichia es el gnero tipo de la familia Enterobacteriaceae y E.
coli es la especie tipo del gnero. Es un cocobacilo corto catalasapositivo, oxidasa-negativo, fermentador de lactosa, glucosa y
sacarosa, tie de color rosado en la tincin Gram, por tanto es un
microorganismo no halfilo, Gram negativo, no esporgeno.
Requisitos nutricionales y de crecimiento
Fig. 4: Escherichia coli
Staphylococcus aureus
Morfologa microscpica
Es un coco que crece agrupado en racimos, gram positivo es
aerobio y anaerobio facultativo. Puede crecer en ausencia
de sal y es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal comn,
es halotolerante.
Morfologa macroscpica
IV.
PARTE EXPERIMENTAL
Reactivos
Cepas
Mechero Bunsen
Asa de Kolle
Tubos de Ensayo
Placas Petri
Estufas
Pipetas
Gradilla de madera
Tapones de Algodn
Cloruro de Sodio
Sacarosa
Fenol 0.5%
Alcohol 70%
Lugol
Cefoperazone 75 mcg
Salmonella typhi
Bacillus subtilis
Fig. 8: NaCl al 5%,
10% y 15%
Staphylococcus
aureus
Scherichia coli
DETERMINACIN DE LA OSMOFILIA
5. Se procedi a rotular 3 placas Petri con rtulos de 10%, 20% Y 30% de Sacarosa.
6. Se sembr el inculo de Staphylococcus aureus, en las placas Petri mediante el
Mtodo Francs.
7. Se incub los microorganismos a la temperatura de 37 oC por 24 horas y 48 horas.
Se procedi a rotular 4 tubos de ensayo con rtulos de 1 minuto, 2.5 minutos, 5 minutos y 10 minuto
Con una pipeta se dej caer 0.5 ml del inculo Streptococcus aureus en una solucin de 5 ml de alco
Se agit y dej actuar por 1 minuto.
Se tom una asada de la mezcla y se sembr en el tubo con el rotulo 1.
A los 2.5 minutos
se repiti el
anterior
en el tubo
con elagentes
rotulo 2.5.
Determinacin
depaso
la accin
germicida
de algunos
qumicos
A los 5 minutos repiti el paso anterior en el tubo con el rotulo 5.
A los 10 minutos repiti el paso anterior en el tubo con el rotulo 10.
Se incub a la temperatura de 37 C por 24 horas y 48 horas
Se realiz la lectura respectiva.
V. RESULTADOS
Efecto de las altas concentraciones de solutos
CONCENTRACIONES DE NaCl
BACTERIA
S. aureus
15%
10%
5%
Crecimiento
microbiano en 10
lneas
Crecimiento en 5
lnea
Crecimiento en 10 lneas
CONCENTRACIONES DE SACAROSA
BACTERIA
S. aureus
30%
20%
10%
Crecimiento en 20
lineas
Crecimiento en 10
lineas
Crecimiento en 15 lineas
Fig. N 13
Fig. N 13
1 min.
2.5 min.
5 min.
10 min.
S. aureus
OBSERVACIN: No hubo presencia de turbidez en ninguno de los tubos, por tanto
podemos concluir que la bacteria Staphylococcus aureus es sensible a este agente
qumico al no presentar desarrollo de microorganismos.
BACTERIA
S. aureus
OBSERVACIN: El dimetro del halo de inhibicin que circundaba al disco meda 27 mm.
Frente a las otras cepas, Scherichia coli (26 mm.) y la Salmonella Typhi (23 mm.) podemos
decir que el Staphylococcus aureus es ms sensible al antibitico Cefoperazona que las
otras sepas que presentan mayor resistencia frente a este antibitico, por ello su halo de
inhibicin es menor.
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VI. DISCUSIONES
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VII. CONCLUSIONES