E-225D

Espectrofotmetro
Manual de Operao
Marca de Fabricao: CELM

Produto Brasileiro

CELM - Companhia Equipadora de Laboratrios Modernos

Alameda Amazonas, 764 - CEP: 06454-070 - Alphaville - Barueri - S.P.
Tel.: (11) 4133-5200 - Fax: (11) 4133-5237
CNPJ: 61.086.823/0001-76
Responsvel Tcnico: Luciana Veiga Vieira
CRBM-SP: 8046

Registro ANVISA N 10125310093

DTC 70.006-02 JUL/09

ndice
1.

INTRODUO........................................................................................................................................ 3

1.1

GENERALIDADES.............................................................................................................................................. 3

1.2

PRINCIPIO ........................................................................................................................................................... 3

2.

DESCRIO GERAL............................................................................................................................. 3

2.1

Especificaes Tcnicas ........................................................................................................................................ 3

2.2

Descrio dos controles e Indicadores................................................................................................................. 4

3.

INSTALAO ........................................................................................................................................ 5

4.

INSTRUES DE OPERAO ............................................................................................................ 6

4.1

Operaes e verificaes preliminares ................................................................................................................ 6

4.2

Leituras em Transmitncia.................................................................................................................................. 6

4.3

Leituras em Absorbncia ..................................................................................................................................... 6

4.4

Leituras em concentrao .................................................................................................................................... 7

4.5

Significados dos valores e smbolos do mostrador digital ................................................................................. 7

5.

MANUTENO ...................................................................................................................................... 8

5.1

Substituio da Lmpada excitadora.................................................................................................................. 8

5.2
Calibrao Interna................................................................................................................................................ 9
5.2.1
Calibrao de converso Transmitncia / Absorbncia .................................................................................. 9
5.3 DEFEITOS E SOLUES ..................................................................................................................... 10
6.

ACESSRIOS QUE ACOMPANHAM O APARELHO:....................................................................... 11

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1. Introduo
1.1

GENERALIDADES

O Espectrofotmetro E-225D um aparelho de leitura direta, com mono-feixe, grade de difrao,

combinando alta preciso, flexibilidade na aplicao e simplicidade operacional.
O seu sistema ptico com feixe simples, foi projetado para proporcionar, alcance espectral amplo
e contnuo de 320 nm at 1000 nm, banda estreita de 10 nm, luz espria baixa (menor que 0,3 % T)
exatido do comprimento de onda melhor que 2 nm, e excelente sensibilidade.
Indicado como instrumento de apoio em "laboratrios de analises clinicas", j que permite
quantificar analises colorimtricas e cinticas.

1.2

PRINCIPIO

Quando um raio de energia radiante atravessa uma soluo, a energia incidente ser sempre mais
intensa que a energia emergente. Esta alterao de energia pode ser atribuda a reflexo, disperso ou
absoro de energia pela soluo. Em aplicaes de fotometria, a absoro de energia o fator primrio na
reduo de energia incidente. Se utilizarmos energia monocromtica, a frao de radiao absorvida pela
soluo, ignoradas as perdas por reflexo e disperso, ser funo da concentrao da soluo e da
espessura da soluo. A quantidade de energia transmitida diminui exponencialmente com aumento da
espessura atravessada e aumento da concentrao ou intensidade da cor da soluo (Lei de Lambert e
Beer).
Ao utilizar a fotometria como tcnica de medida, estamos aproveitando as propriedades dos
tomos e molculas de absorverem energia eletromagntica em uma das muitas reas do espectro
electromagntico.

2. DESCRIO GERAL
2.1

Especificaes Tcnicas

Faixa de comprimento de onda:

Preciso do comprimento de onda:
Legibilidade do comprimento de onda:
Banda de passagem:
Energia radiante difusa:
Leitura fotomtrica:
Faixa fotomtrica:
Rudo fotomtrico:
Linearidade fotomtrica:
Preciso fotomtrica:
Desvio a longo prazo:
Faixa de ajuste da concentrao:
Elemento de disperso:
Alimentao:
Consumo:
Dimenses:
Peso com embalagem:
Limite Operacional do ambiente:

320 a 1000 nm
Melhor que 2 nm
Melhor que 1,0 nm
10 nm
0,1% T tpico a 340 nm
Transmitncia (T), Absorbncia Linear (A), Concentrao
Linear (C), e fator colorimtrico
0,00 100,0 % em (T)
000 1,999 em (A)
000 1999 em (C)
0,1 % T (0,001 A em 0,000 A) mximo
0,002 A em 1,000 A mximo
Melhor que 0,2 % T (0,002 A em 0,400 A)
Melhor que 0,3 % T (0,003 A em 0,004 A)
Menor que 0,002 A por hora
de 0,15 A at 5,5 A mnimo
Grade de difrao de 1200 linhas / mm
110 Vac (de 100 at 132 Vac) 50 / 60 Hz
220 Vac (de 190 at 240 Vac), 50 / 60 Hz
45 VA
Largura: 385 mm
Profundidade: 285 mm
Altura: 215 mm
8 kg
18 a 28C, 30 a 60% de umidade relativa sem
condensao

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2.2

Descrio dos controles e Indicadores

As figuras e descries a seguir tm a finalidade de familiarizar o operador com os controles e

indicadores do E-225D e suas respectivas funes.

9
10

Figura 1: Vista Frontal do aparelho

1. TRAVA / PONTO DECIMAL: Boto utilizado para congelar a leitura no momento desejado, nas reaes
cinticas manuais. Usado tambm para selecionar o ponto decimal nas leituras de concentrao.
2. MOSTRADOR DIGITAL Leitura digital de 3 dgitos que permite leituras em Transmitncia em (T),
Absorbncia (A), Concentrao (C) e fator colorimtrico.
3. AUMENTO A/T: Boto de ajuste fino de sensibilidade.
4. CONTROLES DE CALIBRAO SIMPLES: Permite a verificao e calibrao do espectrofotmetro
com facilidade e preciso.
5. STANDBY / SENSIBILIDADE: Chave de 4 posies. A primeira Standby mantm o aparelho ligado
pronto para operar, com desprezvel desgaste da lmpada. Ajuste grosso de sensibilidade nas demais
posies.
6. FUNO: Chave de 4 posies. As posies (T), (A) e (C) selecionam respectivamente: Transmitncia,
Absorbncia e Concentrao. A posio f/p mostra o fator colorimtrico de referncia e permite mudar
o ponto decimal na escala de concentrao.
7. CONCENTRAO: Boto para o ajuste do valor do padro.
8. DIAL DO COMPRIMENTO DE ONDA: Seleciona o comprimento de onda desejado.
9. COMPARTIMENTO DE AMOSTRA: Permite a utilizao de adaptador universal para tubos de ensaio
de at 25 mm de dimetro, cubetas retangulares de 10 mm, cubeta de fluxo contnuo e cubeta
termostatizada de 10 mm.
10. ESCALA DO COMPRIMENTO DE ONDA: Mostra o comprimento de onda de trabalho selecionada

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11

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13

15

14

16

Figura 2: Vista traseira do aparelho

11.
12.
13.
14.
15.
16.

CHAVE DE FORA: Liga e desliga

TOMADA DO CABO DE FORA: Rede (110 / 220 Vac)
SELETOR DE TENSO: Seleciona a tenso para 110 ou 220 Vac.
FUSVEL: Para proteo geral do aparelho 1 AT (110 Vac) / 0,5 AT (220 Vac)
SADA BCD: Sada digital de dados. (Opcional)
TERRA: Borne para ligao do fio terra.

3. Instalao
importante instalar corretamente o aparelho seguindo estas indicaes para obter o melhor
desempenho e longa vida das peas pticas, eletrnicas e mecnicas e consequentemente reduo na
freqncia de manuteno.
As condies ambientais ideais para uma boa conservao do aparelho esto descritas abaixo:
Coloque o aparelho em uma mesa firme, limpa e sem vibrao, em um ambiente quimicamente
neutro sem vapores cidos, vapores de gua ou outras substncias agressivas, no deve ter poeira. No
deve ter correntes de ar ou rpidas variaes de temperatura. As condies climticas ideais so:
temperatura constante entre 18 e 28 C com umidade relativa entre 30 e 60%.
O E 225 D necessita de um espao de 30 cm na parte superior, 15 cm na parte traseira e nas
laterais para uma perfeita dissipao do calor gerado internamente. No exponha o aparelho luz solar
direta ou fontes de calor.
Coloque o seletor de tenso (13) na posio 110 para tomada de 110 ou 127 VAC (faixa mxima
de 100 at 132 VAC, 50/60 Hz) ou na posio 220 para tomada de 220 VAC (faixa mxima de 190 at 240
VAC 50/60 Hz). A ligao de um fio terra no borne (16), aconselhada quando o aparelho ligado em
tomada de 110/127 VAC, e obrigatrio quando em tomada de 220 VAC. A ligao do fio terra garante
segurana ao operador e aumenta a estabilidade do aparelho, drenando os rudos eletromagnticos e os da
rede eltrica.
O aparelho ligado em tomada de 110/127 VAC sem ligao de terra, pode apresentar
instabilidade, normalmente suficiente virar o plug na tomada para que o problema desaparea.

A ligao do terra deve ser feita com um cabo isolado flexvel AWG 18 - 20 soldado no fio
terra de tomada e um pino banana na outra extremidade. Conectar este pino no borne (16) do
aparelho.
Se a rede eltrica apresentar freqente variao de tenso excedente faixa mxima do
aparelho, ou rudos excessivos, necessrio o uso de um estabilizador de rede eltrica de
100 VA para o funcionamento estvel do espectrofotmetro.

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4. Instrues de operao
4.1

Operaes e verificaes preliminares

Ligue o espectrofotmetro E-225 D pressionando a CHAVE DE FORA liga / desliga (11) e

aguarde 15 minutos (aquecimento) para o melhor funcionamento do aparelho.
Ao sair da posio Standby espere 3 minutos para operar normalmente.
Deixe sempre bem fechado o COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) para evitar entrada de poeira
e luzes estranhas durante as leituras.
Verifique a relao Transmitncia / Absorbncia.
- Com a chave de funo (6), selecione "T.
- Selecione ganho 1 ou 2, com a chave de sensibilidade (5), e AUMENTO A/T (3) no mximo de T.
- Com o dial de comprimento de onda (8), selecione um comprimento de onda qualquer, de
modo que o display indique um valor acima de 100%T (+/- 105%T).
- Ajuste com boto de AUMENTO A/T (3),100.0 %T no MOSTRADOR DIGITAL (2).
- Selecione "A" com a chave de FUNO (6). Verifique o valor indicado no MOSTRADOR
DIGITAL (2), compare com a TABELA 1,
- Com a chave de FUNO (6), selecione "T".
- Fazendo uso do dial de comprimento de onda (8) e AUMENTO A/T (3) , ajuste o prximo valor
da TABELA 1 (39,9% T) e verifique o valor da Absorbncia; repita a seqncia at verificar
todos os valores da TABELA 1.
Se alguma leitura de Absorbncia exceder a faixa mxima aceitvel, calibre o Espectrofotmetro
E-225 D. (vide seo 5.2 CALIBRAO INTERNA).
TABELA 1
TRANSMITNCIA
(%T)
100,0
39,9
10,0
04,0
01,5

ABSORBNCIA
TERICA
,000
,399
1,000
1,398
1,824

FAIXA DE ABSORBNCIA
MXIMA ACEITVEL
de -,998 at ,002
de ,397 at ,401
de ,994 at 1,006
de 1,385 at 1,411
de 1,779 at 1,869

Obs.: Periodicamente faa a verificao do aparelho atravs da tabela acima.

4.2

Leituras em Transmitncia

O procedimento de ajuste usado em leituras de Transmitncia o seguinte:

1. Selecione o comprimento de onda com o DIAL (8), observando a ESCALA (10) do comprimento de
onda.
2. Coloque o tubo (ou cubeta) contendo o blank no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) e cubra-o com
a tampa.
3. Selecione a funo T com a chave FUNO (6).
4. Ajuste o boto AUMENTO A / T (3) e se necessrio a chave SENSIBILIDADE (5) para ler no
MOSTRADOR DIGITAL (2) 100,0% T.
5. Coloque o tubo (ou cubeta) com a amostra desconhecida no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9).
Leia a Transmitncia no MOSTRADOR DIGITAL(2).

4.3

Leituras em Absorbncia

O procedimento de ajuste usado em leituras de Absorbncia o seguinte:

1. Selecione o comprimento de onda com o DIAL (8) observando a ESCALA (10) do comprimento de
onda.
2. Coloque o tubo (ou cubeta) contendo o blank no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) e cubra-o com
a tampa.
3. Selecione a funo A com a chave de FUNO (6).
4. Ajuste o boto AUMENTO A / T (3), e se necessrio a chave SENSIBILIDADE (5) para ler no
MOSTRADOR DIGITAL (2) ,000 A.
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5. Coloque o tubo (ou cubeta) com a amostra desconhecida no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9).
Leia as Absorbncias no MOSTRADOR DIGITAL (2).
4.4

Leituras em concentrao

O procedimento de ajuste usado em leituras de Concentrao o seguinte:

1. Selecione o comprimento de onda com o DIAL (8), observando a ESCALA (10) do comprimento de
onda.
2. Coloque o tubo (ou cubeta) contendo o blank no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) e tampe-o
3. Selecione a funo C com a chave FUNO (6) e ajuste o boto CONCENTRAO (7) para a
mxima sensibilidade, todo a direita.
4. Ajuste a chave SENSIBILIDADE (5) e o boto AUMENTO A/T (3) para ler no MOSTRADOR DIGITAL
(2) 000 C.
5. Coloque o tubo com o padro no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) e ajuste o seu valor no
MOSTRADOR DIGITAL (2) com o boto CONCENTRAO (7).Mude a chave FUNO (6) para a
posio f / p e aparecer no MOSTRADOR DIGITAL (2) o fator colorimtrico de referncia. Coloque a
virgula com o boto TRAVA / PONTO DECIMAL (1) e retorne a chave FUNO (6) para a posio C.
6. Coloque o tubo (ou cubeta) com a amostra desconhecida no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) e
leia a Concentrao no MOSTRADOR DIGITAL(2).
4.5

Significados dos valores e smbolos do mostrador digital

A faixa de valores normais do mostrador digital de 000 a 1999. Valores que excedem esta faixa
mostram no dgito mais significativo smbolos especiais.
O smbolo
indica nmeros menores que 000.
A faixa negativa facilita o ajuste de zero e vai at:
-1,0 % T
-0,010 A
- 10 C

99.0
.990
990

Exemplos de valores negativos no mostrador digital:

MOSTRADOR
DIGITAL
SIGNIFICADO

99.8
.990
.991

0,2 negativo na funo Transmitncia.

1,0 negativo ou mais funo Absorbncia.
0,9 negativo na funo Absorbncia.

O smbolo
indica nmeros que excedem a faixa de trabalho, nmeros maiores que 199,9% T, 1,999 A
e 1999 C; O smbolo intermitente e somente congela quando se aperta o boto TRAVA (1). Os valores
mximos no MOSTRADOR DIGITAL so 220,0 % T, 2,2 % A e 2200 C; Chegando a um destes valores o
MOSTRADOR DIGITAL trava a leitura automaticamente.
Exemplos de valores excedentes no mostrador digital:
MOSTRADOR
DIGITAL
SIGNIFICADO

12.5
.013
220

212,5 na funo Transmitncia.

2.013 na funo Absorbncia.
2200 ou mais na funo Concentrao.

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5. Manuteno
5.1

Substituio da Lmpada excitadora

A lmpada excitadora no E-225 D pr - calibrada de fbrica, tornando simples sua reposio.

Utilize sempre lmpadas originais CELM.
Desligue a chave de fora LIGA / DESLIGA (11), desconecte o plug da tomada REDE (12) e a ligao
de terra no borne TERRA (16).
Vire o aparelho com a base para cima, o compartimento da lmpada est localizado no canto superior
direito.
Retire cuidadosamente a TRAVA (A) se necessrio com o auxilio de uma chave de fenda e retire a
TAMPA (B). (figura 3).
Pegue a PLACA DA LMPADA (A) e movimente-a alinhando suas bordas com as ABERTURAS
LATERAIS DA BASE (B) e retire-a puxando (figura 4).
No toque o bulbo da lmpada ou os contatos dourados, as marcas de dedos ou outras sujeiras so
prejudiciais ao bom funcionamento do aparelho. Se necessrio limpe-a com uma flanela.
Passe a nova lmpada nas ABERTURAS LATERAIS DA BASE (B), encaixando os contatos dourados
at o fundo do CONECTOR (C), desloque para frente a placa at os BATENTES (D) abaixo da
ABERTURA LATERAL DA BASE (B) e puxe para fora a placa. Observe com ateno a posio da
PLACA DA LMPADA (A) (figura 4).
Encaixe a TAMPA (8) no compartimento da lmpada e desloque a TRAVA (A) sobre a TAMPA (B) at
se ajustar, travando a lmpada sobre a tampa. (figura 3).
Volte o aparelho na posio normal e conecte a ligao do TERRA (16) e o plug da tomada REDE (12)
localizadas atrs do aparelho.
Ligue a chave de fora LIGA/DESLIGA (11) e verifique que em 340 nm na escala de Transmitncia a
leitura seja estvel e o aparelho tenha um bom ganho.
Se a aparelho apresentar instabilidade ou baixo ganho, provavelmente a lmpada no foi
corretamente posicionada. Repita o procedimento de reposio da lmpada.
Persistindo os problemas entre em contato com a Assistncia Tcnica Autorizada CELM.

Figura 3: Exterior do compartimento da lmpada.

Figura 4: Interior do compartimento da lmpada.

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5.2

Calibrao Interna

Por utilizar circuitos eletrnicos de estado slido o Espectrofotmetro E-225 D no requer

manuteno e calibrao constantes.
A longo prazo, conveniente uma calibrao para ter sempre a melhor curva de conservao
Transmitncia / Absorbncia. Com uma chave de fenda (2/3 ou 1/8 mm) execute rigorosamente na
seqncia 5.2.1
5.2.1

Calibrao de converso Transmitncia / Absorbncia

1. Conforme figura 5, com o auxlio da chave de fenda levante a TAMPA DE CALIBRAO (4) .Selecione
a chave FUNO (6) em T (Transmitncia), Selecione ganho 2 ou 3, com a chave de sensibilidade
(5), e AUMENTO A/T (3) no mximo de T. Com o dial de comprimento de onda (8), selecione um
comprimento de onda qualquer, de modo que o display indique um valor acima de 100%T (+/- 105%T).
Ajuste com boto de sensibilidade (3) ,100.0 %T no MOSTRADOR DIGITAL (2).
2. Coloque no COMPARTIMENTO DE AMOSTRA (9) o oclusor ptico CELM (vide seo 6.0
ACESSRIOS) barrando totalmente o feixe de luz e tampe o compartimento de amostra (9). Verifique
se o MOSTRADOR DIGITAL (2) indica 00,0% T(+/-00,3), se estiver acima dessa faixa consulte o
Departamento de Assistncia Tcnica CELM. Caso contrrio execute a calibrao ajustando lentamente
o controle de calibrao (figura 6, item D) para ler no MOSTRADOR DIGITAL (2) 00,0% T.
3. Retire o oclusor ptico e ajuste a chave SENSIBILIDADE (5) e o boto AUMENTO A/T (3) para ler no
MOSTRADOR DIGITAL (2) 39,9% T.
4. Selecione a chave FUNO (6) em A (Absorbncia), anote o valor do MOSTRADOR DIGITAL (2) e
ajuste o controle interno T/A (figura 6, item A) para o valor mdio entre os valores de Absorbncia e
Transmitncia.
o
a
Exemplo: 1 leitura % T = 39,9 (399), 2 = leitura ABS. = ,403 (403), ajuste o controle interno T/A
para ler no MOSTRADOR DIGITAL (2) ABS. = (399 + 403) /2 = 401 = ,401 A.
5. Selecione a chave FUNO (6) em A (Absorbncia) e ajuste o boto AUMENTO A/T (3) e a chave
SENSIBILIDADE (5) para ler no MOSTRADOR DIGITAL (2) 100,0% T.
6. Selecione a chave FUNO (6) em A (Absorbncia) e ajuste o controle interno 0 A (figura 6, item B)
para ler no MOSTRADOR DIGITAL (2) ,000 A.
7. Repita os itens 4 at 7 at obter no MOSTRADOR DIGITAL os valores de converso 39,9 % T = ,399 A
e 100,0 % T = .000 A.
8. Selecione a chave FUNO (6) em A Absorbncia e ajuste o boto AUMENTO A/T (3) e a chave
SENSIBILIDADE (5) para ler no MOSTRADOR DIGITAL 2.000 A (u.000)
9. Selecione a chave FUNO (6) em T (Transmitncia) e ajuste o controle interno 0 T (figura 6, item C)
para ler no MOSTRADOR DIGITAL 01,0 % T.

NO AJUSTAR

C B A

Figura 6: Controles internos de calibrao

Figura 5: Abertura da tampa de calibrao

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10. Verifique a converso com a tabela 2, ajustando o boto AUMENTO A/T (3) e a chave SENSIBILIDADE
(5) o valor da primeira coluna e verificando a converso na segunda coluna.
11. Recolocar a tampa de calibrao.
TABELA 2
AJUSTAR
VERIFICAR
100,0 % T
.000 A +/- .001 A
39,9 % T
.399 +/- .001 A
10,0 %
1.000 A +/- .002A
1.398 A
04,0 % T +/- 0,1% T
1.821 A
01,5 % T +/- 0,1% T
2.000 A
01,0 % T +/- 0,1% T

5.3 Defeitos e Solues

PROBLEMA
Aparelho apagado

Compartimento de amostra

vazio no chega a 100,0 % T

(,000 A)

Aparelho com rudo ou drift

excessivo

Relao Transmitncia /
Absorbncia incorreta

Leituras no corretas

CAUSA PROVVEL
Tomada de fora com defeito
Fusvel queimado
Cabo de rede desligado ou quebrado
Pea defeituosa

PROCEDIMENTO DE CORREO
- Verifique a tomada
- Troque por um novo, vide fig. 2,
item 14 e sees 3.0 e 6.0
- Verifique e ligue o cabo, vide
seo 6.0
- Consulte a Assistncia Tcnica
CELM
- Verifique o compartimento de
Feixe de luz obstrudo
amostra
Lmpada excitadora velha ou mau
- Verifique ou troque a lmpada,
posicionada
vide sees 5.1 e 6.0
Pea defeituosa
- Consulte a Assistncia Tcnica
CELM
Verifique a linha eltrica e o terra,
Excessiva variao de tenso na rede
vide seo 3.0
Seletor de tenso de rede na posio
- Vide seo 3.0
errada
- Vire o plug na tomada, vide seo
Fase do plug trocada na tomada
3.0
Lmpada excitadora velha ou mau
- Verifique ou troque a lmpada,
posicionada
vide sees 5.1 e 6.0
Bolhas na amostra
Verifique
a amostra analisada
Local no adequado, instalao
- Vide seo 3.0
incorreta
- Consulte a Assistncia Tcnica
Pea defeituosa
CELM
- Vide seo 5.2
Descalibrao
- Consulte a Assistncia Tcnica
Pea defeituosa
CELM
- Consulte a Assistncia Tcnica
Volume de amostra insuficiente
CELM
Bolhas na amostra
- Verifique a amostra
Comprimento de onda ou tcnica
- Verifique a tcnica usada e o
errada
comprimento de onda
selecionado

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6. Acessrios que acompanham o aparelho:

1 cabo de fora
1 caixa com 12 tubos calibrados (10 mm de dimetro)
1 fusvel 1 A (20 AGF)
1 fusvel 0,5 A (20 AGF)
1 oclusor ptico

ITEM
1
2
3
4
5
7.

CDIGO
13001841
83700138
13003941
13002142
15000010

DESCRIO
CABO FORA P/TA 1115
CONJ. TUBOS DE ENSAIO
FUSIVEL 1 A 20 AGF
FUSIVEL 0.5 A 20 AGF
OCLUSOR

Partes, peas e subconjuntos.

ITEM
1
2
3
4
5
6

DESCRIO
CONJ. PLACA E-225D
TRANSFORMADOR E-205D/225D
SUB. CONJ.CAME
SUB. CONJ. LMPADA
BASE SUP. LMPADA
TRAVA SUP. LMPADA

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