PARTE I
Introducci6n 1
Fisiologia vegetal. Introduccién a las células
de las plantas: membranas y pared
GLoRIA REVILLA € Icnacto ZarRA
41, 2Qué es la Fisiologia Vegetal? 2. Las células de las plantas. 3. Las membranas son la base
de la compartimentacién celular. 4. La pared celular permite la supervivencia en ambientes
hipoténicos.
1, gQUE ES LA FISIOLOGIA VEGETAL?
La Fisiologia Vegetal es la ciencia que estudia cémo funcio-
nan las plantas, es decir, qué es lo que las mantiene vivas.
Explica, mediante leyes fisicas y quimicas, el modo en que
las plantas utilizan la energia de la luz para sintetizar, a
pattir de sustancias inorganicas, moléculas organicas con
las que construyen las complejas estructuras que forman
su cuerpo. Explica también cémo son capaces de reprodu-
citse siguiendo un programa de desarrollo endageno y cémo
adaptan dicho programa al ambiente del momento, Pero el
aspecto mas importante no es el ctimulo de procesos fisicos
Y quimicos que tienen lugar en cada punto de la planta y
en cada momento de su programa de desarrollo, sino cémo
se integran dichos procesos en el espacio y en el tiempo
Y cémo los modula el medio para llevar a buen término el
desarrollo de la planta,
1.1. La fisiologia de las plantas en el siglo XXI
Desde el inicio de los tiempos, et hombre fa utilizado las
plantas para su beneficio, en forma de alimento, vestido,
material de construccién, fuente de energia, ornamento,
© para la obtencién de productos terapéuticos, etc. Al irse
conociendo mejor la diversidad de las plantas y su fun-
cionamienta en los distintos niveles (motecular, celular,
‘organismo y poblacién) ha sido posible dise‘iar estrategias
mas perfeccionadas para aumentar su producci6n y mejorar
su calidad,
Por otra parte, la biologia de las plantas puede propor:
cionar soluciones, al menos parcales, a los problemas a los
anreeeeeee
que se enfrenta nuestra especie y nuestro planeta en el siglo
XXL, entre ellos la escasez de alimentos, el agotamiento de
las reservas de combustibles fésiles y la escasez de agua
2COmo pueden las plantas ayudamnos a afrontar dichos retos?
Uno de los pocos recursos naturales que experimenta un
aumento global es el diéxido de carbon, y como las plan-
tas convierten el diéxido de carbono en biomasa mediante
la fotosintesis, este aumento global podrfa traducirse en
luna mayor produccién de biomasa. Gracias a las tecnologias
actuales, esta biomasa puede convertirse en combustibles
renovables, limpios y perfectamente utilizables, como, por
ejemplo, el etanol. Sin embargo, debido a la demanda de al
mentos de una poblacién mundial en aumento, no es posible
desviar a producci6n agricola primaria hacia la de biomasa,
Por ello sera necesario, entre otras medidas, aumentar la
produccién por superficie cultivada, extender ta agricultura a
tetrenos marginales, aumentar la eficiencia de las plantas en
te utilizacién del agua y mejorar el aprovechamiento de los
residuos agricolas. Para cubrir la demanda de plantas para la
alimentacion y como biomasa es preciso avanzar en nuestros
conocimientos acerca del modo en que funcionan, de forma
que podamos predecir de manera exacta cémo responderén
ante cualquier manipulacién genética 0 perturbacién am-
biental (Gutiérrez, R.A. y cols., Plant Physiology 138:550-
554, 2005).
El desarrollo que han experimentado en los dltimos afios
los estudios sobre la biologia molecular de las plantas ha
permitido obtener numerosos datos sobre el genoma, el pro-
teoma e, incluso, el metaboloma de distintas especies, en
diferentes ambientes y estados de desarrollo. En este mo-
mento disponemos de la secuencia completa del genoma de
Arabidopsis, del arroz y del élamo, lo que permite utilizarias
3 BA ALLYL
como plantas modelo. Aunque a identificacién de este gran
nidmero de componentes no es suficiente para comprender la
complejidad de las plantas, ha permitido aplicar una nueva
metodotogfa basada en la teorfa de sistemas. Este nuevo
enfogue, que tiene en cuenta no sélo los componentes del
‘organismo sino, sobre todo, su interaccién, se ha dado en
llamar biologia de sistemas. La biologia de sistemas es el es-
tudio de un organismo contemplado como una red integrada
de genes, proteinas y reacciones bioquimicas que interaccio-
nan y que caracterizan al organismo vivo (Kitano, H. Science
295:1662-1664, 2002). De este modo sera posible establecer
modelos que permitan predecir el comportamiento de las
plantas durante su ciclo vital y frente a distintos Factores
externos. Sélo cuando poseamos estos conacimientos podre-
mos diseftar correctamente las manipulaciones necesarias
para conseguir que una determinada planta produzca una
sustancia dada o presente una respuesta especifica frente a
los factores externos (véase el Capitulo 30).
2. LAS CELULAS DE LAS PLANTAS
Como en todos los organismos vivos, la unidad funcional
basica de las plantas es la célula. Por ello, el estudio de la
fisiologia de las plantas es, en gran medida, el estudio de la fisio-
logia de sus células y de su integracién en el organismo. La
gran diversidad ecolégica de las plantas esta ditectamente
relacionada con ta enorme variedad de formas, estructuras
y funciones de las células individuales que las forman. Esta
diversidad hace dificil generalizar las caracteristicas de una
célula. Asi, las células del xilema son bioguimicamente in-
activas (muertas), pero cumplen una importante funcién en
el transporte del agua (véase el Capitulo 4). Las células del
floema, los elementos cribosos, son anucleadas y han per-
ddido gran parte de su sistema de membranas, a excepcion de
la membrana plasmatica; sin embargo, estén perfectamente
adaptadas para permitir el transporte de asimilados (véase
el Capitulo 5). En cuanto a las células del parénquima, que
odemos considerar funcionalmente completas, son el tipo
mas comin de células y constituyen aproximadamente el
80% del total de las c&lulas que forman la planta.
Pero a pesar de sus diferencias, la mayoria de las cé-
lulas tiene una organizacion estructural comdn. En gene-
ral, las células presentan una pared celular que rodea et
protoplasto, delimitado externamente por la membrana
plasmatica o plasmalema. El material vivo en el interior
del protoplasto recibe el nombre de protoplasma. El proto-
plasma no posee una estructura homogénea, ya que incluye
al citoplasma y a diversos organulos inmersos en el propio
citoplasma, los cuales estan delimitados por membranas
(sencillas 0 dobles) y cumplen funciones espectficas. A su
vez, el citoplasma todavia contiene en suspensién distin-
tas estructuras no rodeadas de membrana, como ribosomas,
microtabulos e inclusiones. La fase acuosa del citoplasma
recibe el nombre de citosol (Fig. 1-1, Cuadro 1-1).
En términos generales, podemos considerar que ta célula
5 una estructura compleja, constituida por distintos com-
Peroxisoma
Cloroplasto Mitocondtia
Nucléolo
‘Membrene nuclear
I} Nicieo
Reticulo endoplos:
matieo liso,
Reticulo endoplas:
matico rugoso
Aparato de Golgi
Membrana plasmstica
Figura 1-1, Representacién esqueméticn de una oéluta det
‘parénquima de wna planta,
CUADRO 1-1. Definiciones de algunos términos utilizados
para deseribir los componentes celulares.
Término Definicién
Protoplasto | Contenido de la célula,excluida la pared
celular
‘Apoplasto | Espacio externo a la membrana plasmstica
donde se encuentra la pared celular y que
puede presentar continuidad en el seno del
tejido
Protoplasma | Material viva en el interior del protoplasto
Organulos | Estructuras rodeadas por una o dos membranas
presentes en el interior del protoplasto
Gitoplasma | Protoplasma, excluidos los orgénulos
Simplasto | Espacio constituido por el citoplasma de las
distintas c6lulas que presenta continuidad a
través de los plasmodesmos
Tnelusiones | Estructuras presentes en el citoplasma que no
estén rodeadas por una membrana,
Citosot Fase acuosa del citoplasma, excluido el
material particulado (Inclusiones)
partimientos con funciones diferentes y separados entre sf
or membranas, La membrana plasmiatica establece la pri
mera divisién en compartimientos: por una parte el proto-
plasma, tradicionalmente identificado con el interior de las
células; por otra, el espacio extemno o espacio extracelular,
aunque no parece adecuado contemplar este espacio como
algo externo a la célula porque, aunque en principio pre-
senta continuidad en el seno del tefido y sirve como via de difusién de diversas sustancias, posee estructuras (como la
pared celular) y sistemas enzimaticos cuya sintesis depende
de las células, ademas de cumplir funciones esenciales para
Gstas (crecimiento, modificacién de ciertos nutrientes,
reacciones defensivas, etc) Por ello, el espacio extracelular
debe describitse como un compartimiento més de las célu-
las, con la peculiaridad de que se prolonga en el de las células
adyacentes, recibfendo el nombre de apoplasto.
Por otra parte, el espacio rodeado externamente por la
membrana plasmatica, el protoplasma, no aparece siempre
como un espacio individualizado e independiente de las cé-
lulas contiguas, sino que puede estar interconectado a tra-
vés de los plasmodesmos, lo que origina un compartimiento
continuo que recite el nombre de simplasto. A su vez, el
protoplasma esta subdividido en distintos compartimientos
separados del citoplasma por membranas dobles o sencillas,
que constituyen los orgénulos (nicleo, plastos, mitocon
drias,reticulo endoplasmatico, aparato de Golgi, vacuolas y
microsomas), cada uno de ellos con funciones especificas.
Los distintos orgénulos se estudiarén en capitulos pos
teriores; en éste nos centraremos en dos aspectos de las ck
lulas que son basicos para entender los numerosos procesos
fisiol6gicos que tienen lugar en las plantas: las membranas
y su papel en la compartimentacion celular (apartado 3) y
la pated celular, que confiere caractertsticas Gnicas a las
células de las plantas (apartado 4).
3. LAS MEMBRANAS SON LA BASE
DE LA COMPARTIMENTACION CELULAR
Las membranas son componentes esenciales de las células,
pues permiten su autonomia respecto al medio en que se
encuentran, asf como la existencia de distintos comparti-
mientos en su interior. El modelo de mosaico fluido pro-
puesto por Singer y Nicholson, y ampliamente aceptado en
nuestros dias, establece que las membranas estan constitui-
das por una bicapa lipidica en la que las proteinas pueden
estar tanto embebidas en dicha bicapa como asociadas a st
superficie (Fig. 1-2).
3.1. Los lipidos de membrana son anfipaticos
Los glicerotipidos polares son los principales constituyen-
tes de las membranas de las células vegetales. Estén forma-
dos por dos cadenas de dcidos grasos esterificados a dos de
los grupos hidroxito del glicerol. EL tercer hidroxito sirve de
Uunién a distintos grupos que confieren cierta polaridad a
la molécula: azicares (glicolipidos) y ésteres fosfato (fos-
folipidos) (Fig. 1-3). Los esteroides (como el sitosterol,
el estigmasterol, el colesterol, etc.), aunque minoritarios,
también son componentes de las membranas vegetales.
a bicapa lipidica esta constituida por lipidos polares
que presentan una cabeza polar y una cola hidrofoba, Esta
caracteristica les permite formar bicapas lipidicas en las
que las colas hidréfobas de los acidos grasos se mantienen
iicgroipido
¥
Figura 1-2. Representacién esquematica del modelo luido de
‘membrana. § eadena hidrdfoba de dcido graso: @: cabeza
polar de licerolipido; Ms region hdréfoba y ti region polar
de: a) proteina integral con dominias transmembrana; b)
proteina integral que forma un caral polar a través de la
‘membrana; ) proteina anclada parcialmente en la membrana:
A) proteina peiftien.
L J
Unidas, mientras que las cabezas polares se orientan hacia
la fase acuosa (Fig, 1-2).
3.2, Las protefnas originan dominios
especificos en las membranas
Las proteinas presentes en las membranas biol6gicas se pue-
den clasifcar, segin el tipo de asociacion que presenten,
en: a) proteinas integrales, atrapadas fisicamente en la
fase lipidica y que sélo podran solubilizarse mediante tra-
taiientos que disuelvan dicha fase lipidica; b) proteinas
periféricas, ligadas iGnicamente a los grupos polares de los
Uipidos, y que pueden tiberarse féciimente mediante trata-
mientos con soluciones de mayor 0 menor fuerza iénica, y
6) proteinas ancladas en la membrana a través de acidos
grasos o cadenas prenil. La estructura quimica y la distribu
cion espacial de las cadenas laterales de los distintos restos
aminoacil que constituyen la cadena peptidica determinan
no s6lo las propiedades fisicoquimicas de la proteina, sino
también la aparicidn en ella de regiones con caracteristicas
especificas. Asi, regiones enriquecidas en aminodcidos con
cadenas laterales no polares (alanina, leucina, tript6fano,
etc.) daran lugar a la aparicién de dominios hidréfabos que
permiten su anclaje en fa membrana. De la distribucién y
ta extensién de dichos dominios hidréfobos dependers la
localizacién de las proteinas en la membrana (Fig. 1-2). Asi
los dominios hidréfobos con 20-22 restos aminoacidicos a
menudo se extienden desde una superficie hasta ta otra,
constituyendo un dominio transmembrana. En cambio, las
proteinas sin dominios bidréfobos pero con dominios car
gados eléctricamente podran asociarse a los grupos polares
de los lipidos de membrana para constituir las protefnas
periféricas. 3.4, Las membranas son impermeables
a las sustancias polares
La fase hidrofoba constituida por las colas de los acidos
agrasos establece una bartera a la difusion de las sustancias
polares que separa la fase acuosa en dos, una a cada lado de
la membrana, En términos generales, la permeabilidad de las
‘membranas esté relacionada con el coeficiente de particién
de las distintas sustancias entre la fase lipidica y la fase
acuosa, La fase lipidica hidréfoba confiere a las membranas
Cierta impermeabilidad frente a las moléculas polares, lo
que hace necesario que existan mecanismos relativamente
especificas para su transporte que sean susceptibles de requ-
lacion (véase el Capitulo 7), Asi, los distintos compartimien-
tos separados por membranas podrin mantener ambientes
quimicos diferentes para poder llevar a cabo los distintos
procesos metabolicos. Ademds, este ambiente hidrofobo pro-
porciona el medio adecuado para que tengan lugar reacciones
en las que participan conjuntamente tipidos y moléculas no
hidrofobas (proteinas), como, por ejemplo, las cadenas de
transporte de electrones (véanse los Capftulos 9, 10 y 14).
EL trafico y la compartimentacin de solutos en las célu-
las necesita energia, la cual se acumula en las membranas
como resultado de la actividad de bombas iénicas primarias
que transforman la energia metabolica (ATP, NAD(P)H, piro-
fosfato) en gradientes «transmembrana» de potencial elec-
troquimico (véase el Capitulo 7). En las células animales,
esta funcién principalmente corresponde a la bomba Na’-K’
Las plantas, sin embargo, tienen como bomba primaria en
et plasmalema una bomba de protones, H'-ATP hidrolasa,
cuya distribucfén es tan universal y tan caracteristica de las
las de las plantas como lo es la bomba Na'-K" en las cé-
lulas animales. La energfa acumulada en el plasmalema por
la H-ATPasa es la principal responsable de la incorporacion
y retencién de fones y otras solutos dentro de las células,
Por tanto, esta bomba de protones participa en procesos tan
‘importantes como la absorcién de agua y nutrientes minera-
les, os movimientos estomaticos y foliares, el transporte de
asimilados y hormonas, y otros (véanse los Capitulos 3, 5,
7, 19 y 24). La pared celular (véase el epartado 4) impide el
agrandamiento de la célula, debido a la absorcién y reten-
i6n de agua mediante fuerzas osméticas, y es por ello im
rescindible en la generacién de turgencia (véase también
el Capitulo 2). Como puede observarse, las células vegetales
resuelven sus problemas osmoticos mediante procedimien-
tos mecénicos, a diferencia de las animales, que regulan su
Potencial osmotica intercambiando iones.
3.5, Las membranas presentan asimetria
a distribucion de las proteinas depende de las interaccio-
hes entre sus dominios especficos y las cadenas hidréfobas
de los acidos grasos, y también de los grupos polares de
{0s tipidos de las membranas. La extensién de los dominios
hidr6fobos de las proteinas les permite una mayor 0 menor
a
OOOO OOOO OOoOnn_O OO OO EE Eo
penetracion en la bicapa tipidica, o cual determina las dis
tintas localizaciones en el interior de la membrana de las di-
ferentes proteinas, Mediante diversas técnicas (criofractura,
utilizacion de sondas no petmeantes, etc.), se ha podido
demostrar asimetrfa en las membranas, esto es, la existen-
cia de diferencias entre sus dos mitades, externa e interna,
Esta asimetrfa no sélo se refiere a las proteinas, sino tam
bien a los lipids. Asf, en los tilacoides de cloroplastos de
la espinaca, el monogalactosildiacilglicerol esta localizado
mayoritariamente en la mitad externa, mientras que el diga
lactosildiacilglicerol to esta en la interna, Al igual que en las
membranas de las células animales, en tas membranes de las
plantas también se han identificado agregados resistentes
a los detergentes, que reciben el nombre de «rafts». Se ha
afirmado que presentan microdominios rigidos transitorios
formados por lipides (principatmente esfingolipidos y es-
oles) altamente empaquetados y proteinas. Su funcion
no est atin dilucidada, pero podrian estar implicados en
la asociacion transitoria de receptores y, por tanto, en la
sefializacion (Martin, S.W. y cols. Trends in Plant Science
10:263-265, 2005).
3.6. Las membranas difieren en su composicién
‘Aunque todas las membranas de las células tienen la misma
estructura basica, presentan distintas proporciones de pro-
teinas y lipidos, asf como diferentes tipos de lipidos y proteinas,
Si tenemos en cuenta que las diversas membranas de las cé-
lulas tienen funciones cataltticas y de transporte diferentes,
parece lagico que no s6lo presenten distinta relacién pro-
tefna/lipidos, sino también diversos tipos de polipéptidos
Segtin sus funciones especificas. Pero no son éstas las Gnicas
diferencias entre las membranas; también varia su composi-
cién lipfdica, tanto en el tipo de lipidos como en el grado de
insaturacién de los acidos grasos (Cuadro 1-2). Asi, mientras
que (as membranas mitocondriales estan enriquecidas en
fosfolipidos, las cloroplasticas lo estan en glicolfpidos (prin-
cipalmente galactotipidos) (véase el Capitulo 9). En general,
CUADRO 1-2, Composicién lipidica relativa (*t) de las
membranas vegetales.
oe] oer eas | St
esteroles ipldos | turactn
m. externa 56 29 94h
* Representa el nimero de dobles enlaces en 100 restas de Scidos grasa.
* Corasponde alas dos membranas dela cublerta del cloropast, ib. fo a
ook
og
RR,
‘Acido graso
i
, painitico 180
Dae
|
| 9
i Estearico 180
ees
| 6
i
AAW oicea 184
9 8
Linolice 182
| Lowes oO
Lnolénico 18:3
TI
t
°
;
b
Las proteinas de membrana participan en numerosas
funciones: transporte, seftalizacién, conexién entre el ci-
toesqueleto y la pared celular, reacciones bioquimicas, y
otras. La dotacién proteica de cada membrana determina
no s6lo la funcién de cada una de ellas, sino también la del
compartimiento que delimitan, Las proteinas involucradas
en el transporte a través de membranas, transportadores pri-
marios y secundarios, asi como los canales, serén estudiados
en los Capitulos 7 y 15).
3.3. La fluidez de las membranas depende
de la insaturaci6n de los acidos grasos
Las cadenas hidréfobas de los acidos grasos que constitu-
yen la fase hidréfoba de las membranas tienen propiedades
de gel o de liquido, dependiendo de la temperatura. A bajas
temperaturas estardn en fase gel, y a medida que la tempe-
ratura aumente se produciré ta transicion hacia la fase ti
quida, La temperatura a la que se produce la transicion gel
ifquido recibe et nombre de temperatura de cambio de fase
(To. La funcionatidad de las membranas biolégicas requiere
una clerta fluidez que permita el movimiento transversal y
tateral no s6lo de las moléculas lipidicas, sino también de
Estructura quimica de los glieroipidos mes frecuentemente hallados en las membranas de las células de las plantas.
UNDAMENTOS DE FISIOLOGIA VEGETAL
Fosfatci-colina | Mono-galactosi-
} fH RH oH Hoc,
) -0-p-0-¢-6 non H9,
| Oo HA CH oH |
static otanolaming |
on oH oe
Pk
Fosfatidi-sorina |
|
on HH oY
~0-P—0-6-6—N, oe
} I “Qo
oA boon |
} oH
| Fostavestinoset 1d) } }
| bu |
| Sulfo-S-desoxigucos
isutotpidor
Sa
una serie de sustancias: proteinas transportadoras, sustra-
tos y productos de las enzimas asociadas a las membranas,
transporte de electrones, etc. Por ello, es necesario que las
membranas biol6gicas se encuentren a una temperatura
superior a su T., Este requisito tiene gran importancia en
cuanto a la sensibitidad o resistencia de las plantas a las
bajas temperaturas (véase el Capftulo 29). La T. depende de
la estructura de las cadenas de los dcidos grasos, asf como
de su disposicién relativa en la unién a la molécula de gli-
cerol. La aparicién de dobles enlaces en cis en las cadenas
de los acidos grasos (véase a Fig. 1-3) provoca dobleces
en la cadena y disminuye su grado de empaquetamiento, lo
que hace que su T, sea menor y permite mantener ta fluidez
de tas membranas a temperaturas mas bajas. Si tenemos
en cuenta que las plantas son organismos poiquilotermos,
esto es, que no pueden regular su propia temperatura, el
aumento de la insaturacién de los acidos grasos de sus
membranas catalizado por las desaturasas les permiticd
mantener la funcionalidad (Fluidez) de sus membranas a
temperaturas ambiente relativamente bajas. Ast, mediante
técnicas de ingenierta genética se ha logrado aumentar
la tolerancia de plantas de tomate a bajas temperaturas
{ncrementando la proporci6n de acidos grasos insaturados
en sus membranas. ‘cuanto mayor sea la fluidez de las membranas, mayor sera la
actividad metabdtica en su fase hidr6foba.
3.7. Las membranas permiten que se
establezcan distintos compartimientos
en las células
Fl sistema de membranas de las células, al separar distintas
fases acuosas, establece diferentes compartimientos en tas
células: citoplasma, espacio interno de los organulos y apo
plasto. Por eso, y porque existen mecanismos espectficos de
transporte para cada sustancia segin el tipo de membrana,
las concentraciones de metabolitos en los distintos compar-
timientos son diferentes, estableciendo ambientes quimicos
especializados en los que tendrin lugar las diversas vias
metabéticas. Un caso destacable es la vacuola, que ocupa
tun volumen considerable de las células vegetales. Al igual
que el plasmalema, el tonoplasto acumula eneraia debido
a la actividad de dos bombas primarias de protones, una
ATPasa y una pirofosfatasa, lo que confiere al lumen vacuo-
lar su cardcter acido caractertstico. Dicha energfa se utiliza
en el transporte de solutos a través de distintos sistemas de
transporte (véase el Capitulo 7). La estructura y funciones
de cada uno de los compartimientos celulares serén objeto
de estudio en capitulos posteriores. fl Cuadro 1-3 resume
los compartimientos subcelulares de una célula tipica del
CUADRO 1-3, Volumen relativo de los principales compartimientos
de una cétula del mesifilo de hojas de espinaca.
Volumen | Algunas dels funciones
Comparinento | ait (x) | “miscancterstens |
Vacuola 57.2 | Manteniniento de la
turgencia celular
Cloroplasto 21.3 | Fotosintesis
Crosot 4.5 | Metabolismo de azdcares,
sintesis de sacarosa
Nitocondria 0.7 | Respiacién celular
Nacleo 0.4 | Material genstico,
replicacion y
twanscripci6n
Reticulo Pracesado y transporte
endoplasmstico de proteinas
Sintesis de polisacéridos
estructurales no
colulésicos
Destoxificacién
fotorrespiratoria del
alicolato
Broxidaci6n de dcidos
grasos, ciclo det
alioslato
Aparato de Golgi
Gtioxisomas
‘Apoplasto Reacciones que
modifican la pated
celular
(daptado de Winter y cos, Plonte 103:530-53, 199%.)
FUNDAMENTOS DE FISIOLOGIA Vi
mes6filofotosintético. La division deta célula en pequetios
compartimientos también puede servir para alcanzar altas
concentraciones de metabolitos sin necesidad de producir
grandes cantidades del metabolito en cuestién.
3.8. El sistema endomembranoso se extiende
por toda la célula
Aunque las membranas delimitan distintos compartimien-
tos celulares, éstos no pueden considerarse completamente
‘indepencientes. El sistema endomembranoso contiene or
ganulos membranosos que intercambian moléculas por di-
fusi6n lateral a través de la continuidad de tas membranas
‘o mediante el transporte de vesfculas. El reticulo endoplas:
matico es et componente mas extenso del sistema: forma
tuna red tridimensional que va desde la membrana nuclear
hasta la membrana plasmatica, estableciendo conexiones
con los distintos organulos y estructuras celulares, Ademas,
el aparato de Golgi y las vacuolas también forman parte del
sistema. El transporte de sustancias en el sistema endo-
rmembranoso es bidireccional: desde el reticulo endoplasma-
tico hacia el aparato de Goigi y las vacuolas o la membrana
plasmatica (ruta secretora), 0 bien en sentido opuesto, nor-
malmente reciclando las sustancias hacia sus lugares de ori-
gen. EL transporte de sustancias a través de vesiculas exige la
cooperacion de una serie de proteinas que sefializan et lugar
de formacién de las mismas (p.ej., proteinas COP, clatrina),
asi como su destino (p. ej, proteinas SNARE), y de proteinas
del lugar de destino, que participan en su reconocimiento
3.9. Las membranas no se forman de novo
Los componentes de las membranas se sintetizan en com-
partimientos concretos de la célula incorporandose poste-
rionnente a las membranas preexistentes, generalment
del reticulo endoplasmatico desde donde son dirigidas a su
destino final (Fig. 1-4). Los acidos grasos se sintetizan por
adici6n sucesiva de fragmentos de 2 carbonos procedentes
del acetil-CoA. Su sintesis requiere un nimero relativamente
alto de reacciones, 48 reacciones y al menos 12 proteinas
diferentes pueden ser necesarias para la sintesis de un acido
‘graso de 18 carbonos. En el caso de las células animales y de
las levaduras, esas reacciones las lleva a cabo un complejo
enzimético multifuncional. Sin embargo, en tos procariotas
yen las plantas cada reaccion esta catalizada por proteinas
aisladas que pueden destigarse facilmente de las otras acti
vidades. En las plantas, su sintesis esté localizada exclusi-
vamente en los plastos, y el acetil-CoA necesario se obtiene
a partir del piruvato 0 del acetato, que pueden proceder del
propio metabotismo plastidial 0 ser importados det citosol,
dependiendo de las condiciones funcionales. Los productos
de la sintesis en los plastos serén acidos grasos de 16 6 18
carbonos (16:0 y 18:0).
Una vez sintetizadas en los plastos, los acidos grasos
pueden suftir modificaciones, aumentando su insaturacion 0
| Ap. Golgi
3+3-5-5°
Acide graso
Insaturedo
‘Ac. fsfatiico
2
Figura 1-4, Esquema de ta locaizacin deta bios
lipides de la membrana, Ac-CoA, aceti-coonsima A,
eae
alargando su cadena para, finalmente, dar lugar a ta forma
cién de los glicerolipidos e incorporarse a las distintas mem-
branas. La insaturacién en las cadenas de los dcidos grasos
se produce por la accién de desaturasas espectficas. En las
plantas se han identificado dos tipos de desaturasas: las
estearil-ACP desaturasas plastidiales solubles y las asociadas
a membranas. Estas tiltimas estan presentes como proteinas
integrates de las membranas plastidiales y del reticulo en-
doplasmatico, EL control del grado de insaturacién en los
Acidos grasos a través de la regulacién de las desaturasas es
de gran importancia para la adaptacién de Las plantas a las
bajas temperaturas. En resumen, en las plantas los dcios
grasos son sintetizados en los plastos, y ta formacién de do-
bles enlaces en cis tiene lugar tanto en los plastos como en
elreticulo endoplasmatico. Esto implica, necesariamente, su
translocacion desde los plastos hasta el reticulo endoplas
matico. Como los acidos grasos son moléculas de naturaleza
hidréfoba, su paso desde los plastos hasta el reticulo endo-
plasmatico requerira estructuras especificas que lo hagan
posible. Aunque no se excluye la participacion de vesiculas
para la transferencia de lipides parece mas probable que
participen proteinas especificas. Desde la década de 1970,
en que se descubrié la existencia de proteinas que facilita-
ban in vitro la transfetencia de fosfolipidos en las plantas,
Se ha postulado que ese papel también lo ejercerian in vivo;
no obstante, esa hipétesis todavia no esti perfectamente
establecida, Se trata de proteinas de pequefio tamafo (9-10
0a), con una alta homologia, y que presentan una cavidad
hidrétoba en ta que puede alojarse la molécula que se va a
transportar, los fosfolipidos, los galactolipidos, los acidas
grasos o los ésteres de acil-CoA
En cuanto a la sintesis de los glicerolipidos, en las plan-
tas se han identificado dos rutas: la ruta procariota (plasti-
dial) y la ruta eucariota (retfculo endoplasmatico). En am
bos casos, los acidos grasos sintetizados en los plastos son
transferidos a una molécula de fosfoglicerato para dar lugar,
al Acido fosfatidico, que a su vez dara lugar a los distintos
glicerolipidos. El tipo de lipidos sintetizados en cada una de
tas rutas difiere segdin las especies. Mientras que los galac-
tolipidos s6lo se sintetizan en tos plastas, los esfingolipidos
Gnicamente se sintetizan, al parecer, en el retfculo endo-
plasmatico. De todas formas, una vez sintetizados pueden
ser transferidos del plasto al reticulo y del reticulo a tos
plastos o a otros compartimientos del sistema membranoso,
Esta transferencia desde el reticulo hacia el aparato de Golgi
© hacia otros compartimientos membranosos parece tener
lugar mediante la formacion de vestculas y la posterior fu-
sién de membranas utilizando el sistema de sefalizacion
antes citado.
4. LA PARED CELULAR PERMITE LA
SUPERVIVENCIA EN AMBIENTES HIPOTONICOS
A diferencia de las células desnudas de los organismos ani-
males, las células provistas de pared celular no necesitan
tun ambiente isoténico para sobrevivir. La pared celular les
permite acumular solutos en su protoplasto en concentra-
ciones mayores de las que existen en el medio externo (apo-
plasto). En estas condiciones, el agua tenderé a entrar en el
Protoplasto por Osmosis (véase el Capitulo 2), provocando
lun aumento de volumen por la elasticidad de la membrana
plasmatica, El aumento de volumen esta limitado por la pa
red celular, la cual, debido a su resistencia mecénica, ejerce
una presién sobre el protoplasto que equilibra los potencia-
les hidricos entre la célula y el medio externo
Aunque la pared celular es una estructura comin a todos
tos organismos del reino vegetal, su composicién varta entre
especies, entre tefidos de una misma especie y entre célu-
las. En la célula vegetal, la pared se va depositando como
una serie de capas. Asi, durante la division celular se depo-
sita la primera capa, originando la témina media, formada
fundamentalmente por potisacéridos pécticos, que mantiene
la union entre las células adyacentes. Entre la lamina media
yy la membrana plasmatica se sigue depositando et material
‘tuir la pared celular. Una vez que la placa
celular esté completa, se deposita en las células hijas el
material que constituye la pared celular primaria, de es-
caso grosor (0.1-1.0 jm). Las paredes primarias son de gran
importancia en el proceso de extensién o expansion celular,
pues controlan el crecimiento (véanse el apartato 4.6 y los
Capitulos 18 y 19). En algunos tipos de célutas especializa-
das, una vez que dejan de crecer se depositan nuevas capas
de material en la cara interna de la pared, constituyéndose
asi la pared secundaria, més gruesa que la primar,
a pated celular es una estructura sumamente organi-
ada, formada por una red tridimensional de microfibilas de
celulosa embebida en una matriz constituida por polisacari ow
CHOW
Ho \ ° i ° Ho: \ a,
Hoe on HON a on Ho A on
= or
a
eee
poe a
wl WoL mS og none /
on on
5 a Ae
ner? Jon oe] \psow/
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ie OH on bu on
a era
a
HO. \ oO Arey wes oO
Wola oe ot wom op
=
OH cooH
ats ks fea
pales mons
Figura 1-5, Estructura de los pri
dos (hemicelulosas y pectinas), protefnas y fenoles en una
solucién ligeramente acida, Pese a lo que su nombre sugiere,
no se trata de una estructura estatica, sino de un comparti-
miento metabélico dindmico, y mantiene continuidad mole-
cular con la membrana plasmatica y el citoesqueleto,
a pared tiene una gran resistencia mecdnica y define el
tamatio y la forma de la célula, al controlar en gran parte el
crecimiento celular (véase el Capitulo 18). Desempefia tam-
bién un papel importante en la defensa de las plantas frente
a organismos potencialmente patégenos, al actuar como
Figura 1
intramoieculares ¢ intermolecular (lineas de puntos).
tos que aparecen con mas frecuencia en las paredescelulares.
barrera fisica y como fuente de moléculas con actividad
biol6gica (oligosacarinas), implicadas en el control de los
mecanismos de defensa (véanse los Capitulos 22 y 29).
4.1. Los polisacéridos son los componentes
mayoritarios de las paredes
Muchas de las caracteristicas fisiolégicas y morfol6gicas de
los tefidos vegetales se deben a las propiedades de las pa:
5. Conformacidn de las cadenas de i(1->4)-0-glucano de las microfibilas de celulasa que muestra los puentes de hidrdgeno J redes de sus células; por eso, las células que realizan dife-
rentes funciones tienen paredes con distinta composicién y
estructura. Pero, en general, podemos considerar que una
pared celular mayoritariamente esta formada por polisacé-
ridos (cetulosa, hemicelulosas y pectinas), que constituyen
alrededor del 90% del peso seco de las paredes celulares
primarias y entre el 65 y el 85% de las secundarias. En la Fi-
ura 1-5 se detallan los azticares que constituyen dichos po-
lisacdridos y sus estructuras mds frecuentes. Las proteinas,
tanto estructurales como enzimaticas, constituyen hasta un
410% del peso seco de las paredes, mientras que las ligninas
pueden representar una proporcién importante (hasta un
35%) en algunos tipos de paredes secundarias.
4.1.1. La celulosa constituye la fase fibrilar
de las paredes celulares de todas
las plantas
La celulosa est constituida por una larga secuencia lineal
de restos de o-glucosa unidos por enlaces (1-4) (Fig.
1-6). Cada resto presenta ura rotacién de 180° respecto a
los restos contiguos, estabilizada por puentes de hidrégeno
intramaleculares. El grado de polimerizacién medio en las
paredes secundarias es alto, aproximadamente 10, mien-
tras que en las paredes primarias es mas bajo, entre 2.6
y 6 x 10°. Debido a su estructura, las cadenas de celulosa
(40-70) se unen por puentes de hidrégeno intermoleculares
formando agregados (microfibrillas), en su mayor parte
cristalinos, en los que las cadenas individuales de celulosa
se disponen de forma paralela. Las microfibrilas estan se-
paradas entre si unos 30 nm; ese espacio esté ocupado por
los polisacéridos matriciales y por lignina o suberina, lo que
confiere gran resistencia mecénica a la pared. Las microfibr
las de celulosa estan presentes en las paredes de todas las
plantas superiores, y constituyen el 30-40% del peso de las
paredes de los tejidos lefiosos, mientras que en las paredes
primarias se encuentran en menor proporcién,
4.1.2. Las hemicelulosas entrelazan
las microfibrillas de celulosa
Los polisacéridos hemicelulésicos estan constituidos por una
‘cadena lineal relativamente larga sobre la que pueden apa-
recer cadenas laterales cortas. En la mayorta de las plantas,
excepto en las gramineas, el xiloglucano es el polisacarido
no celulésico mas abundante, aunque presenta unidades es-
tructurales diferentes en las distintas especies y tejidos. Esté
constituido por un eje central de B(1->4)glucano idéntico
al de la celulosa, pero bastante mas corto. A diferencia de
ésta, gran parte de los restos de glucosa estan unidos a res-
tos de xilosa mediante un enlace a(1-»6) (Fig. 1-7), Estas
sustituciones suelen disponerse ordenadamente, de manera
que pueden clasifcarse como tipo «XXXG» 0 «XXGG», depen-
diendo del ndmero de testos de glucosa que tengan enlazado
a
tun resto de xilosa. A su vez, parte de los restos de xilosa pue-
den evar unidos al C-2 cadenas laterales de B-0-galactosa
6, en menor proporcién, de i-fucosa-c(1-+2)-0-galactosa.
Las variaciones especificas del xiloglucano en las distintas
especies son evidentes en las Asteridae, subclase de dico-
‘iledneas que engloba las familias Solanaceae y Oleacece,
las cuales producen xiloglucano con poco 0 nada de fucosa.
En las especies examinadas hasta la fecha, el xiloglucano de
las Oleacene tiene una estructura de tipo XXXG, mientras que
el de las Solanaceae es de tipo XXGG. En ambos casos, los
restos de xilosa se encuentran sustituidos de forma predomi-
nante por a-t-arabinosa-(1-»2)- 0 a-t-arabinosa-(1-r2)- y
rt-galactosa-(1—2)-. En todos los tipos de xiloglucano los
restos de galactosa pueden estar acetilados. El hecho de que
los sustituyentes estén distribuidos de una forma precisa a
lo largo de la molécula indica que su sintesis esta sometida
un control estricto. Las paredes celulares de las gramineas
(Poaceae) presentan cantidades menores de xiloglucano, con
tuna estructura menos regular, menor contenido en xilosa y
galactosa, y ausencia de fucosa.
Las cadenas de xiloglucano pueden unirse mediante puen-
tes de hidrégeno a la celulosa y cubrir las microfibrilas con
luna monocapa de hemicelulosa. Tenfendo en cuenta que,
fen la mayorfa de las plantas (excepto en las gramineas), la
celulosa y el xiloglucano estén presentes en la pared celular
‘en proporciones casi iguales, s6lo una parte del xiloglucano,
puede enlazarse directamente a la celulosa, mientras que el
resto estaria situado en los espacios entre las microfbrillas,
pudiendo una molécula de xiloglucano unir dos o mas micro-
fibrillas para formar la red xiloglucano-celulosa,
Los xilanos comprenden los arabinoxilanos, los glucuro-
noxilanos y los glucuronoarabinoxilanas. Estan constituidos
por una cadena lineal de {(1~>4)-n-xilosa con sustituciones
de arabinosa, acido glucurénico y acido metilglucurénico
mediante enlaces (1-2) 0 a(i—3) (Fig. 1-7). El tipo
y la distribucién de los sustituyentes son muy variables,
dependiendo de su origen. En las paredes primarias de las
gramineas, donde el glucuronoarabinoxilano es el polisacé-
rido no celulésico mas abundante, presentan la estructura
mas compleja, con un alto contenido de arabinosa, El xilano
puede unirse a las microfibrillas de celulosa y, en cierta
forma, ejercer en las gramineas el papel del xiloglucano en
las dicotitedéneas. Sin embargo, las ramificaciones timitan
esta unién, de modo que en las paredes primarias de las
células en crecimiento de las gramineas su cuantia es poco
‘importante; pero como las ramificaciones disminuyen a me-
dide que la edad de la célula aumenta, pueden cobrar més
importancia en células ya maduras. Ademas, parte de los
restos de arabinosa se encuentran unidos al Acido ferilico,
lo que posibilita la creacién de enlaces entre varias cade~
nas de xilanos mediante puentes diferulil, cuya formacién
aumenta al final del crecimiento. En las paredes primarias
de dicotiledéneas y monocotiledéneas no gramineas, los
xilanos aparecen en menor cantidad; sin embargo, son muy
abundantes en las paredes secundarias de todas las plantas
lefiosas, aunque en este caso se encuentra una mayor susti-
tucion por el acido glucurénico o metilglucurénico adel eel
‘AaGlt-3)(1-4}D-glueano
CArabinoxilano
Figura 1-7, Estructura de tos principales polisacdridos hemiceluldsios. A. (1->3)(1->4)-0-glucano. B, Xtoglucano. C.
Gluewonoarabinoxitano, En el caso del xiloglucano, para mayor claridad del esquema se ha separado mediante una linen discontinua
QO a
Acido Arabinoss ——_Anillo
aluoursnico fenslico
de mayor longitud el enlace glcesdico entre la galactosay ta xllosa de la cadena lateral. Las flechas indican los enlaces susceptibtes de
hides por endo-B(1-»3), (1->4)-oglucanase en A) y endo-B(1-r4)o-lucarasa en).
\
Un polisacérido caractertstico de las paredes celulares
de las gramineas es el B(1+3), B(1—=4)glucano o glu-
cano mixto (Fig. 1-7). Esta formado por una cadena lineal
de restos de f-s-glucosa unidos por enlaces (1-4) y
(13), en una relacién aproximada de 2:3. La distribu-
ién de los dos tipos de enlace presenta un cierto orden,
de manera que la molécula esta formada por bloques de en-
laces (14) (2 6 3) separados por un dinico enlace (1-3).
Sin embargo, cade 50-80 restos pueden aparecer irrequlari
dades en la Secuencia, consistentes en una serie del orden
de 10 restos contiguos unidos por entaces (1-4).
Otros polisacéridos hemicelulésicos presentes en las pa-
redes celulares son los mananos, que constituyen un grupo
muy heterogéneo cuyo componente mayoritario es la ma- i
Acido
alactursnico
(alu
Ramnosa
(Ra
‘rabinano
Arabino
galactano
Figura 1-8. Estructura de los principales polisacdridos pécticos, A. Regién de homogalacturonano formance puentes de calcio
B. Ramogalacturonano 1
Le
rosa. Su cadena central puede estar formada Gnicamente
por restos de n-manosa unidos por un enlace (1-4) 0
presenta’ restos de o-glucosa intercalados (glucomananos).
Ambos tipos pueden presentar sustituciones de o-galactosa
unidas por un enlace a(1-»6) 2 los restos de manosa (ga-
tactomananos y galactoglucomananos). Aunque su presencia
es muy escasa en las paredes celulares primarias, los (galacto)
mananos tienen importancia cuantitativa como componentes
de reserva de algunas semillas, y los (galacto)glucomananos
estén presentes en cantidades signficativas en las paredes
secundarias de las tejids tignificados de contfera (12-15%) v,
en menor cantidad, de las angiospermas (3-5%).
4.1.3. Las pectinas presentan una gran
complejidad estructural
Entre los polimeras conocidos de mayor complefidad figuran
los polisacaridos pécticos 0 pectinas, constituidos por una
imezcla de azticares acidos y neuttos. Se encuentran en las
paredes celutares de todas (as plantas, aunque su importan-
ia cuantitativa varia: representan desde alrededor del 35%
en las paredes primarias de las dicotiledéneas, hasta el 5%
en las de las gramfneas, Se caracterizan por su capacidad para
formar geles, y se considera que su presencia en las paredes
celulares determina su porosidad y proporciona superficies car
gadas que modulan el pl y el balance iSnico; ademas, actian
como moléculas de reconocimiento de seales como las de los
organistios simbidticos, los patégenos y los insectos.
Se han caracterizado tres tipos de polisacéridos péctico:
homogalacturonano, galacturonanos modificados y ramno-
galacturonano I. EL homogalacturonano esta constituido por
restos de Acido o-galacturénico unidos mediante un enlace
ce(1-4) (Fig. 1-8). Los grupos carboxilo de los restos ga-
lacturonosil pueden encontrarse esterificados con metanol o
libres. Los grupos carboxilo libres pueden estar disociados y
dar lugar a la formacién de puentes de Ca", que constituyen
la estructura conocida como caja de huevos (Fig. 1-8)
EL ramnogalacturonano I (RG I) esti constituido por
una cadena central formada por la secuencia repetida del di
sacarido -o-o-galacturénico-(1->2)-c-t-ramnosa-(1-»4):
los puntos de anclaje de las cadenas laterales son los res-
tos de ramnosa (Fig. 1-8). Asf, entre el 20 y el 80% (de
pendiendo del origen y del método de extraccion), puede
estar unido en posicién C-4 a cadenas lineales o ramifica
das constituidas por t-arabinosa y o-galactosa (arabinanos,
galactanos o arabinogalactanos). Dado que los restos de
ramnosa se presentan con una frecuencia variable, dentro
de las pectinas hay regiones mucho més ramificadas que
otras. Entre los galacturonanas modificados se han iden-
tificado el ramnogalacturonano II, et xilogalacturonano y
el apiogalacturonano. fl ramnogalacturonano II (RG II)
est muy conservado, a diferencia de la mayor parte de los
restantes polimeros pécticos, que son muy heterogéneos.
Fs un polisacérido relativamente pequeito (grado de poli-
merizacién aproximado de 60) y su estructura es extraor
dinariamente compleja, ya que es el que presenta mayor
niimero de azticares y enlaces diferentes: esta constituido
por Acido galacturénico, ramnosa, arabinosa y galactosa,
ademas de pequerias cantidades de azticares poco frecuen-
tes, como 2-0-metilfucosa, 2-0-metiilosa, apiosa, 3-C-carboxi-
S-desoxi--xilosa y acido 3-desoxi-mano-octulosénico (KDO). 14
A diferencia del RG I, los restos de ramnosa pueden presen-
tar enlaces en 3, 3,4 y 2,3,4, 0 ser terminales. También se
pueden formar enlaces con boro entre dos cadenas del RG
TL, a través de ta apiosa; la formacién de estos dimeros de
RG II es esencial para el crecimiento normal de la planta,
Los mutantes de Arabidopsis thaliana con alteraciones en la
estructura del RG II que provocan la disminucién de los di
eros, presentan un fenotipo enano y paredes celulares fré
giles. En las paredes de los tejidos reproductores (semillas
de soja y quisante, manzanas, callos de zanahoria y polen
de pina) se ha hallado xilogalacturonano, un potisacarido
constituida por una cadena central de a-o-galacturénico
con un enlace 14. Algunos restos de galacturénico estan
sustituidos en el C3 por Brxilosa. Se sabe poco acerca de
su funcién, aunque se ha demostrado que la presencia de
losa limita la capacidad de las endopoligalacturonasas de
hongos para fragmentar la cadena central. Las paredes de
algunas monocotiledéneas acuaticas, como Lemna y Zostera,
contienen apiogalacturonano, cuya cadena central presenta
sustituciones de f-o-apiosa y f1-apiosa-(1—»3)-f-v-apiosa,
Como en el xilogalacturonano, la presencia de sustituciones
aumenta la resistencia del polimero a la degradacién por
endopoligalacturonasas microbianas.
Las pectinas de naturaleza neutra estan constituidas por
L-arabinosa, o-galactosa o ambas. Los arabinanos estan for-
mados por restos de L-arabinosa unidos mayoritariamente
por un enlace a(1-5), algunos unidos en 2 y 3 a otros
restos de arabinosa, Los galactanos estan formados por una
cadena de (3(1->4)-1-galactano con algunas ramificaciones
de galactosa enlazadas en 6. Puede haber sustituciones de
(1-+5)arabinano en proporcién variable en el catbono 3
de los restos de galactosa, lo que recibe el nombre de ara-
binogalactano 1. El arabinogalactano II es mis abundante
y contiene restos de o-galactosa enlazados en 3, 6 y 3,6, y
de t-arabinosa enlazados en 3 y 5. Tanto la arabinosa como
la galactosa pueden asociarse al acido feritico mediante un
enlace éster, lo que posibilita la formacién de enlaces entre
distintas cadenas mediante puentes diferulil por la accién
de las peroxidasas presentes en las paredes celulares. Como
se ha indicado anteriormente, tanto los arabinanos como
los galactanos y los arabinagalactanos de tipo T aparecen
como cadenas laterales asociadas al ramnogalacturonano I,
La mayoria de los investigadores estan de acuerdo en cue
los polisacéridos pécticos estan organizados como un gran
complejo macromolecular, en el que los distintos potimeros
estén umnidos covalentemente entre sf, aunque no existen
pruebas concluyentes de (os enlaces exactos.
4.1.4, Las proteinas estructurales presentan
secuencias repetitivas
Las paredes celulares contienen también diferentes pro-
teinas, tanto estructurales como enzimaticas, que llegan
a constituir el 10% del peso en las paredes primarias, La
mayoria de ellas son alicoproteinas, aunaue el arado de
licositacion es muy variable; se caracterizan también por
la presencia de secuencias repetitivas que pueden ser com-
partidas entre varias. No estan restringidas Gnicamente a la
pared, sino que también forman elementos estructurales y
funcionales del continuum membrana plasmatica-pared ce-
lular, de importancia vital para la percepcién de sertales del
medio externo. Entre las protefnas estructurales, las mejor
caracterizadas son las protefnas ricas en hidroxiprotina
{extensinas). Estas glicoproteinas deben su nombre a la
presencia de hidroxiprotina (Hyp) como aminoacido predo-
minante (alrededor det 46 *), el cual, junto con otros cinco
aminoacidos (serina, histidina, valina, tirosina y lisina),
constituye mas del 90% de su contenido. Estén formadas por
rnumerosas secuencias repetidas de serina-(Hyp).y tirosina-
lisina-tirosina, responsables de su estructura secundaria y
terciaria. Los residuos de tirosina pueden formar puentes
‘ntramoleculares de isoditirosina, que aumentan la rigidez y
el carcter hidréfobo de la molécula. La glicositacion de la
proteina tiene lugar a través de la serina y la hidroxiprotina,
de manera que la serina se encuentra unida a un resto de
galactosa, mientras que la hidroxiprotina sirve de anclaje a
trio tetraarabinanos, que sirven para estabilizar la estruc:
tura de la protefna. Otras proteinas relacionadas son las
proteinas ricas en protina y las proteinas ricas en glicina
Estas tiltimas, a diferencia de las anteriores, no contienen
secuencias ricas en protina y no se ha observado que es-
tén glicosiladas. Por otra parte, las gramineas contienen
proteinas ricas en treonina y proteinas ricas en histidina,
similares a la extensina de las dicotiledéneas. Todas estas
proteinas se presentan en diferentes cantidades en las pa-
redes de los distintos tipos de células, por lo que se asume
que en cada uno de ellos tienen funciones especificas. Aunque
no hay pruebas diractas de la indole de estas funciones,
probablemente todas tengan importancia estructural, ast
como en la morfagénesis (véase el Capitulo 18). En cambio,
las protefnas-arabinogalactano son proteinas solubles con
un alto grado de glicosilacién, con un 1-10% de proteina,
ricas en hidroxiprotina/protina, alanina, serina y treonina,
Generalmente los restos de hidroxiprolina estan sustituidos
por arabinogalactanos de tipo II. La mayorfa de ellas es
tan ancladas, a veces de forma transitoria, a la membrana
plasmatica mediante un anclaje de glicositfosfatidilinositol
(GP!). Estan codificadas por una familia multigénica, y se
agrupan en distintas subclases segiin su composicién en
aminodcidos y su estructura. Su expresion esta regulada
espacial y temporalmente durante el crecimiento, y se les
atribuyen funciones espectficas durante la formacién de la
raiz, fa promocién de la embriogénesis somitica y la dife-
renciacién del xilema en Zinnia y Arabidopsis, entre otras.
4.1.5. La diversidad de las enzimas asociadas
@ las paredes es una muestra
de su dinamismo
Las paredes celulares contienen también diferentes tipos de
enzimas que les proporcionan una intensa actividad meta-
bélica. Practicamente todas ellas son glicoproteinas, aunque sustrato
EEE Eee
CUADRO 1-4. Principales tipos de enzimas asociadas a las paredes celulares.
Funcién
Oxidorreductasas
Peroxidasas
HO;
Monalignales/H,.0;
Walato deshidrogenasa Nalato/NAD*
NADH exidasa NADH/0,
Lacasas Monolignotes/0,
Hidrolasas
Exo-glicanasas, Hemicelulosas y pectinas
Endo-glicanasas
Pectina-metil esterasa
Hemicelulosas y pectinas
Transglicosilasas
Xiloglucano endo-
transglicosilasa | Xiloglucano
Tirosina (protefnas ricas en hidroxiprotina)/
Fenil ésteres (pectinas, arabinoxitano)/H,0.
Poligalacturonosil metilésteres
Formacion de puentes de isoditiosina
Formacion de puentes difen
Lignificacién
Formacion de NADH
Formacisn de H:0.
Lignificacién
Eliminacion de monosacaridos de los extremos
no reductores
Despotimerizacion
Desesterficacion de pectinas
Extension de la pared celular
Incorporacién de nuevas catenas de xiloglucano
su grado de asociacion, tipo de accién y funcion pueden ser
muy diferentes. Todas ellas son enzimas que utilizan sustra-
tos sencillos (0,, H.0, H.0) compatibles con las condiciones
existentes en el apoplasto, con pH éptimo entre 4.0 y 6.0,
La misma actividad enzimatica suele estar presente en las
paredes con diferente grado de asociacién; asi, las mismas
enzimas pueden estar solubles en el apoplasto y enlazadas a
las paredes de forma iénica y covalente. Esta diversidad en
el grado de asociacién es un hecho generalizable a la mayo-
via de las enzimas de la pared, pero su significado funcional
no se conoce,
El Cuadro 1-4 resume los principales grupos de enzimas
presentes en las paredes. En general, se han detectado acti-
vidades enzimaticas capaces de actuar sobre practicamente
todos los componentes estructurales de (as paredes celula-
res, incluidas las de los pat6genos, asi como sobre distin-
tas sustancias presentes en el apoplasto. Si consideramos
los polisacéridos estructurales, la dotacién de glicanasas
de las paredes seria suficiente para degradarlos casi com-
pletamente, Sin embargo, esto no ocurre in vivo, es deci,
la regulacién de su actividad es un imperativo biolégico.
Las pruebas experimentales sobre la regulacién de dichas
encimas, la accesibiidad del sustrato, la actividad in vivo
de las distintas formas presentes, etc., todavia son escasas
Mo permiten establecer un mecanismo generalizable de
Fegulacion de su actividad. En las paredes de todas las plan:
tas se han encontrado un grupo de enzimas con actividad
endotransglicosilasa (XET), hidrolasa (XEH), o ambas, frente
al xiloglucano. Pertenecen a una superfamitia multigénica;
en Arabidopsis presenta 33 genes y en el arroz se han de-
tectao 29. Reciben el nombre genérica de xiloglucano-en-
dotransglicosilasas-hidrolasas (KTHs). La XTH se une a una
cadena de xiloglucano que actia como donadora (Fig. 1-9),
‘ompiendo un enlace del interior de la cadena (modo endo),
entre dos restos de glucosa (coneretamente, el siguiente al
Festo de glucosa no sustituido), generando dos fragmen-
tos polimericos. €l de menor tamaio contiene el extremo
reductor de la molécula original; et otro fragmento unido
a la enzima sera transferido a una molécula aceptora. Si la
molécula aceptora es una molécula de agua, estaremos en
presencia de una actividad hidrolasa (XEH). Si la molécula
aceptora es otra cadena de xiloglucano, seré una actividad
transglicosilasa (XET).
También se han identificado quinasas asociadas a la pa-
red (WAKs: wall-associated kinases) que unen fisicamente
‘a membrana plasmética a la pared celular. Se pueden en-
contrar unidas covalentemente a pectinas (Decreux, A. y
Messiaen, J., Plant and Cell Physiology 46:268-278, 2005)
y, al menos una isoforma, asociada a una protefna rica en
Gticina (GRP). Su importancia reside en su capacidad para
dirigir las seiales de distintos acontecimientos celulares a
través de su dominio citoplasmatico. Estudios funcionales
sobre los distintos miembros de las WAKs han permitido
demostrar que estan implicadas en diversas funciones, entre
ellas la resistencia a los patogenos, la tolerancia a metales
pesados y el desarrollo de la planta.
En la pared celular se encuentran también las expansi-
nas, protefnas de pequefio tamaiio que inducen la extensién
de la pared in vitro. Actualmente se conocen dos clases de
expansinas, denominadas a y Prexpansinas (www.bio.s
edu/expansins/). Las «-expansinas estén constituidas por
un grupo altamente conservado y son muy activas, excepto
cen las gramineas. A partir de los datos obtenidos, se les ha
atribuido una funcién en el control de la extension celular,
¥y en otros procesos como la disgregacién de la pared y la
separaciOn celular. Las B-expansinas son abundantes en el
polen de las gramineas y, a diferencia de las c-expansinas,
son muy activas en la promocién de la extension de las
paredes de aquéllas. Se ha postulado que su funcién bio-
l6gica puede ser la de ablandar los tejidos del estilo y el
estigma, para facilitar asi el progreso del polen hacia el
6vulo, Sin embargo, como su presencia no esta restringida
a los granos de polen, no puede descartarse que actien en
otros tefidos. Las expansinas no tienen actividad enzimatica
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Hidralsis
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Figura 1-9. Es9
la igquerda represanta la actividad hidrolasa (XEH
conocida. Su mecanismo de acci6n sigue siendo un enigma,
aunque se cree que pueden actuar rompiendo los enlaces de
hidrdgeno entre los potisacéridos de la matriz y la celulosa,
permitiendo asi la relajacién de ta pared celular. El analisis
estructural de una Brexpansina de maiz cristalizada permite
suponer que esté unida a los polisacdridos (xilano en las
aramineas, 0 xiloglucano en el caso de las no gramineas),
provocando una relajacién localizada del complejo polisa-
CSrido-celulosa debida a la ruptura de un cierto némero de
puentes de hidrogeno (Yennawar, N.H. y cols., Proceedings
of the National Academy of Sciences USA (PNAS) 103:14664-
14671, 2006)
4.1.6. La presencia de lignina proporciona
mayor resistencia y rigidez a las paredes
celulares
La tignina es un potimero complejo constituido a partir de
tos alcoholes aromaticos p-cumartlico, coniferitica y sina~
Pilico, unidos entre sf por enlaces éster o carbono-carbono
(véase el Capitulo 47). La composicion monomérica, ast
como el tipo de enlaces entre ellos y su organizacién en ia
macromolécula, varian en las diferentes especies. La polime-
rizacién puede tener lugar mientras haya precursores activa-
dos y espacio en la pared, de manera que la molécula tiende
a llenar todo el espacio de la pared no ocupado por otras
macromoléculas, desplazando al agua. La estructura polimé
rica de ta lighina no s6io se entrelaza con las microfibillas
de celulosa, sino que también se une a las hemicelulosas
(arabinoxitano) y pectinas (arabinagalactano) mediante en-
laces éster a través de sus restos hidroxicinmicos.
EL resultado de todo ello es una red hidrofoba que rodea
a los demas componentes de la pared, a ta que confiere
mayor resistencia tanto fisica como quimica, ademas de una
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2a de a accn de las xiloglucano-endotransglcoslasa-hidrolasas (XTHs). E, enzima; cadenas de ctculos cerrado 0
abiertos, cadena de xilagluceno;cireulos con una estrella en su interior, extremas reductores de las cadenas de xiloglueane. La rence de
nientras que ta dela derecha representa la actividad transglcosidasa (XE).
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