Mitosis en Clulas Vegetal

CURSO

:
Gentica General

DOCENTE

:
MSc. Jhon Garca Lpez.

ALUMNO

:
ILATOMA FUSTAMANTE, Gilber S.

CODIGO

:
100397 - K

CICLO

:
2011 II

LAMBAYEQUE MAYO DEL 2012

OBSERVACIN DE CLULAS VEGETALES EN DIVISIN

OBJETIVOS:
Observacin de fases de la mitosis en clulas reales.
Adiestrarse en el uso de tcnicas de observacin microscpica.
MATERIAL NECESARIO:

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Estiletes
Viales
Mascarillas
Cubeta de tincin
Pinzas
Frasco lavador
Mechero de alcohol
Tijeras
Papel de filtro
Vaso de precipitados
Vidrio de reloj
Orcena
palillos

FUNDAMENTO TERICO:
La mitosis es el proceso clave de la divisin celular. En ella, el material gentico
previamente duplicado se organiza en cromosomas y se reparte equitativamente a las
dos clulas hijas en formacin. La raz de la cebolla es un buen material para observar
este proceso, puesto que en el meristemo apical las clulas se dividen a gran velocidad,
lo que aumenta la probabilidad de detectar clulas en mitosis.
Los cromosomas, como la mayora de los componentes celulares, son invisibles
al microscopio si no les aplicamos una tincin especfica. La Orcena, colorante morado
que usaremos en este caso, est compuesta en realidad de dos componentes, que se
aaden en momentos diferentes. La Orcena A reblandece las membranas celulares y la
Orcena B completa el proceso de tincin del material cromosmico al adherirse a estas
estructuras.
MTODO:

1. Tres o cuatro das antes de la sesin de laboratorio debes hacer crecer las
races de la cebolla. Para ello, pon una cebolla sobre un vaso de precipitados con agua,
sujeta con dos o tres palillos. Slo la parte inferior debe quedar en contacto con el agua.
2. Una vez crecidas las races, corta con las tijeras unos 3-5 mm del extremo de
las mismas (ah se encuentran las clulas en divisin) y se deposita en un viable con
carnoe (compuesto por: Etanol, cido actico, cido sulfrico o cido clorhdrico) por 4
horas
3. una vez pasadas las 4 horas se sacan las races y se colocan en un vidrio de
reloj en el que previamente has vertido 2-3 ml de Orcena.
4. Calienta el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos segundos,
dando suaves pasadas y evitando la ebullicin. Retira de la llama el vidrio si observas
vapores tenues. Evita que la Orcena se acerque al borde del vidrio, puesto que podra
arder al contacto con la llama. Si la Orcena se evapora, aade unas gotas ms. Es muy
importante evitar que la muestra se queme.
5. Coloca la muestra sobre un portaobjetos con unas pinzas, y aade una gota de
Orcena. Espera 1 minuto.
6. Pon el cubreobjetos sobre la raz. Ahora presionaremos sobre la muestra para
extender las clulas del meristemo y as disponerlas en una sola capa. Para ello, da unos
golpes secos con el mango de la aguja enmangada sobre el cubre, con cuidado de no
romperlo. Despus coloca unas tiras de papel de filtro sobre la preparacin, y aprieta
con el pulgar aumentando progresivamente la presin o con un lpiz.
7. La preparacin est ahora lista para la observacin al microscopio. Recuerda
que debes empezar por el objetivo de menos aumentos, y que puedes cambiar a otros
objetivos conforme consigas enfocar y comprender lo que ests viendo, seleccionando
las regiones que deseas ver con ms detalle.
FASES MITOSES
Aunque la mitosis es un proceso continuo se acostumbra a dividirlo, para su estudio y
reconocimiento, en cuatro fases distintas llamadas: profase, metafase, anafase y telofase.

Es de destacar, que, aunque el estudio lo haremos en una clula animal, este proceso se
produce de una manera similar en las clulas vegetales. Las diferencias se irn
indicando a lo largo de la explicacin
PROFASE
Es la fase ms larga (1 a 2 horas en el pice de raz) y en ella se suceden una serie de
fenmenos tanto en el ncleo como en el citoplasma. La envoltura nuclear empieza a
fragmentarse y los nuclolos van desapareciendo progresivamente.
Debido al superenrollamineto de la cromatina se produce una condensacin del material
gentico y los cromosomas se van haciendo cada vez ms visibles. Puesto que el ADN
se replic en el periodo S de la interfase, cada cromosoma est formado por dos
cromticas unidas por el centrmero. En las clulas animales el par de centriolos se ha
dividido en interfase y ha dado lugar a dos pares de centriolos que constituirn los focos
de unas ordenaciones radiales de microtbulos: las steres. Las dos steres que al
principio estn juntos se separan a polos opuestos de la clula y los haces de
microtbulos que surgen de ellos se alargan y forman un huso mittico o huso
acromtico bipolar. Las clulas vegetales no tienen centriolos y el huso acromtico se
forma a partir del centrosoma. Estos husos sin centriolo se llaman husos anastrales y
estn menos centrados en los polos. Los tbulos del huso se forman a partir de las
molculas del citoesqueleto. ste se desorganiza y la clula adquiere una forma ms
redondeada.

Profase temprana
MICROSCOPIO: 40X

Profase tarda
MICROSCOPIO: 40X

ZOOM CAMARA: 5X

ZOOM CAMARA: 12X

METAFASE
Es una fase corta (5 a 15 minutos en el pice de la raz del ajo). El huso mittico ya est
perfectamente desarrollado. Los cinetocoros de los cromosomas interaccionan promedio
de unos microtbulos con los filamentos del huso y los cromosomas son alineados en la
placa ecuatorial de la clula o placa metafsica. En esta fase los cromosomas se
encuentran todos en la zona ecuatorial, orientados perpendicularmente a los
microtbulos que forman el huso acromtico constituyendo la denominada placa
ecuatorial.
Esta es la fase ms adecuada para la observacin de los cromosomas. Para ello se rompe
la clula, por ejemplo: mediante choque osmtico, si ello es posible, y los cromosomas
se tien, se aplasta para que se extiendan y a continuacin se fotografan.

MICROSCOPIO: 40X

MICROSCOPIO: 40X

ZOOM CAMARA: 6x

ZOOM CAMARA: normal

MICROSCOPIO: 100X

ZOOM CAMARA: 3X
ANAFASE
Es la fase ms corta (2 a 10 minutos en el pice de raz). Los cinetocoros se separan y
cada cromtida es arrastrada hacia un polo de la clula. El movimiento parece ser que se
produce por un desensamblaje de los microtbulos. Al desplazarse cada cromtida, sus
brazos se retrasan formando estructuras en V con los vrtices dirigidos hacia los polos.

MICROSCOPIO: 100X

MICROSCOPIO: 100X

ZOOM CAMARA: 3X

ZOOM CAMARA: 3X
TELOFASE

Su duracin en el pice de raz de ajo es de 10 a 30 minutos. Los cromosomas son

revestidos por fragmentos del retculo endoplasmtico que terminarn soldndose para
constituir la envoltura nuclear. Poco a poco los cromosomas van descondensndose y se
desfiguran adquiriendo el ncleo un aspecto cada vez ms interfsico, los nuclolos
comienzan a reaparecer. Los microtbulos del huso se agrupan en haces por la aparicin
en la regin media de cilindros de una sustancia densa y pierden sus conexiones con los
polos. Finalmente los cilindros se fusionan en un solo haz y la clula se divide en dos.

MICROSCOPIO: 100X

MICROSCOPIO: 40X

ZOOM CAMARA: normal

ZOOM CAMARA: normal

La pared celular le imprime rigidez a las clulas de plantas. La clula vegetal no sufre
cambios dramticos de forma durante los procesos de mitosis y citocinesis. En la
interfase existen arreglos de los microtbulos y los microfilamentos que participan en la
orientacin y expansin celular que se encuentran rodeando a la clula en la regin
cortical (adyacente a la membrana plasmtica). Tambin existen arreglos de
microtbulos que radian del ncleo hacia el citoplasma y que participan junto con los
microfilamentos en distintos fenmenos de motilidad celular intracitoplsmica.
El huso mittico de plantas y animales se organiza diferente. Las plantas no tienen
centrosomas y tampoco centriolos. En plantas la estructura del huso mittico consiste de
cientos de microtbulos y de protenas que se asocian a stos. En la profase los
cromosomas se condensan, los husos mitticos de la profase se organizan y pasan
alrededor del ncleo, siendo sta otra caracterstica de la mitosis de plantas. Por otra
parte, los microtbulos y los microfilamentos se juntan hasta formar la banda de la
preprofase. Esta banda marca el sitio donde ocurrir la prxima divisin celular. La
cabeza de flecha seala la banda de la preprofase.
En la prometafase desaparece la banda de la preprofase, la envoltura nuclear se rompe,
maduran los cinetocoros de los cromosomas, los husos mitticos capturan los
cromosomas que se van hacia el huso del ecuador. Se empiezan a organizar husos
mitticos polares, que difieren en la organizacin de los husos mitticos de los
centrosomas en animales.
En la metafase, se forma completamente el uso mittico y el huso o placa ecuatorial.
Aparentemente se forman varios polos mitticos que corresponden con el nmero de
cromosomas. Esto por el momento es una especulacin, basada en las tinciones por
inmunofluorescencia con antitubulina.
Posteriormente en anafase, los cromosomas se dirigen a los polos, donde stos se
separan. En la telofase, la envoltura nuclear se reforma, se descondensan los
cromosomas, el huso mittico se rompe y se forma el fragmoplasto.