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ECISALUD
LABORATORIO CLINICO INTEGRAL
MANUAL DE LABORATORIO
CICLO 2016-1
PROLOGO
El laboratorio clnico es un ambiente dinmico que esta continuamente cambiando
para satisfacer las necesidades de salud pblica. El presente manual ser recurso
informativo en la formacin de los alumnos de la carrera de medicina. El propsito
de la informacin contenida en este manual es que tiene un enfoque actual de los
procesos habituales de laboratorio como la tendencia tecnolgica de la
automatizacin, lo que permite enfrentar el reto de manejar pruebas sensibles,
especficas y efectivas en el monitoreo de la salud y la enfermedad, as como
auxiliar en el establecimiento del diagnostico clnico. Adems, de que conocer los
perfiles de laboratorio que se solicitan comnmente en las diferentes reas de la
clnica a fin de obtener resultados a tiempo y el costo-beneficio que representa.
Es recomendable la introduccin de la terminologa actual, completar la
informacin acerca de los organismos y guas de regulacin de las buenas
prcticas de laboratorio.
INTRODUCION
El laboratorio clnico es un campo multidisciplinario cuya finalidad es la aplicacin
de la Ciencia Qumica para contribuir a la resolucin de problemas de salud.
La funcin del LabCI es realizar anlisis, tanto cualitativos como cuantitativos, en
fluidos corporales como sangre, orina, lquido seminal, lquido cefalorraqudeo, etc.
Para que los resultados de dichos anlisis sean tiles a los mdicos en el
diagnstico, tratamiento y seguimiento de una enfermedad, stos debern
realizarse bajo un estricto control de calidad logrando niveles ptimos de precisin
y exactitud, caractersticas deseables en cualquier resultado de diagnstico.
Este manual fue elaborado con base en la Norma Oficial Mexicana NOM -007-
SSA3-2011 para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos,
misma que pretende lograr que los laboratorios clnicos establezcan programas de
aseguramiento de la calidad de sus servicios. As como por la norma de
Vancouver para la estructuracin de citas y referencias bibliogrficas.
El curso de la asignatura prctica de LABORATORIO CLINICO INTEGRAL hace
nfasis en el control de calidad. Las prcticas estn diseadas con el propsito
que los alumnos dispongan de un conjunto de habilidades que les permitan la
aplicacin flexible del conocimiento adquirido de las tcnicas que se aplican en
laboratorio y tener en cuenta los tiempos de ejecucin de las mismas.
INTRODUCCION
Los anlisis clnicos son una parte esencial para el diagnstico, tratamiento,
prevencin e investigacin de las enfermedades, son clave para el manejo clnico
y epidemiolgico de la salud de la poblacin. El laboratorio debe estar preparado
para enfrentar su responsabilidad, asumiendo el desafo tcnico y tico que
significa entregar resultados confiables, reproducibles y oportunos para la toma de
decisiones en salud.
El gran beneficiado con los programas de control de calidad es la poblacin del
pas, que recibir una mejor atencin en salud, con diagnsticos ms precisos que
llevaran a tratamientos adecuados, disminucin de das de hospitalizacin, menor
tiempo de incapacidad familiar o laboral, disminuyendo aun el riesgo de
enfermedad por el aporte epidemiolgico que representa el anlisis de buenos
datos de laboratorio. As tambin se beneficia el propio laboratorio y su personal,
al mejorar su imagen de eficiencia dentro del esfuerzo en salud y en su
satisfaccin por el trabajo desarrollado bajo su responsabilidad.
Fase pre analtica: Contempla el proceso desde que se solicita el examen hasta
que es procesado en el Laboratorio.
Fase analtica: Corresponde al proceso de realizacin del examen, esto involucra
directamente la tcnica empleada para realizar un examen.
Fase Post analtica: Corresponde al proceso que comprende desde que se
obtiene el resultado de una medicin hasta que se informa.
Para el Laboratorio Clnico es importante dar las directrices en cada una de estas
etapas, para as garantizar la calidad de los exmenes realizados.
OBJETIVO
Establecer requisitos para la Normalizacin del Procedimiento para la
determinacin de todos los estudios clnicos que se realizan en el laboratorio,
comenzando desde la fase preanaltica, analtica y postanaltica. As como
conocer las principales normas que rigen el laboratorio clnico.
El propsito principal es, brindar a nuestros pacientes resultados con Calidad y
Garanta, siendo estos los ms confiables y exactos posibles.
MATERIALES Y METODO
Normas:
La Norma Oficial Mexicana NOM-007-SSA3-2011, Para la organizacin y
funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Esta norma tiene por objeto establecer las especificaciones que se deben
satisfacer para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Y adems es de observancia obligatoria para los laboratorios clnicos, as como
para los profesionales y tcnicos del rea de la salud de los sectores pblico,
social y privado que intervengan en la organizacin y funcionamiento de dichos
establecimientos.
El control de calidad es un proceso y tcnicas diseadas para detectar, reducir y
corregir deficiencia en los exmenes de laboratorio clnico. Para alcanzar la
calidad en el laboratorio clnico requiere de varias herramientas como: Un manual
de calidad y procedimientos. Un programa de mantenimiento y calibracin de
equipos. Capacitacin del personal e Implementacin de controles de calidad.
Existen 3 fases del control de calidad, la primera es la fase pre-analtica, la
segunda es la fase analtica y posteriormente se pasa a la fase post-analtica.
El control de calidad es un sistema diseado para incrementar la probabilidad de
que cada resultado reportado por el laboratorio es vlido y pueda ser utilizado por
el mdico para hacer un diagnstico o para tomar una decisin en su terapia.
NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental -
Salud ambiental - Residuos peligrosos biolgico-infecciosos - Clasificacin y
especificaciones de manejo. Establece los requisitos para la separacin,
envasado, almacenamiento, recoleccin, transporte, tratamiento y disposicin final
de los residuos peligrosos biolgico-infecciosos que se generan en
establecimientos que presten servicios de atencin mdica.
Etandares:
ISO 9001
Es la base del sistema de gestin de la calidad, es una norma internacional y se
centra en todos los elementos de administracin de calidad con los que una
empresa debe contar para tener un sistema efectivo que le permita administrar y
mejorar la calidad de sus productos o servicios.
ISO 15189
Establece los requisitos generales que un laboratorio tiene que cumplir para que
se reconozca su competencia para realizar ensayos y / o calibraciones, incluyendo
el muestreo. Se divide en dos partes: la parte de gestin corresponde a los
requisitos para la certificacin del sistema de calidad mientras que la parte tcnica
describe los requisitos para el personal, instalaciones, equipos, procedimientos,
garanta de calidad e informes. Es en esta ltima parte donde ms se diferencia de
la Norma en la que se basa, la Norma ISO 9001 .
ISO 17025
Contiene los requisitos que tienen que cumplir los laboratorios de ensayo y de
calibracin se desean demostrar que:
Poseen un sistema de gestin
Son tcnicamente competentes
Son capaces de generar resultados tcnicamente vlidos.
CONTROL DE CALIDAD
Para poder cumplir con el control de calidad se empieza desde la fase pre-
analtica en la cual debemos de cuidar aspectos como solicitud del anlisis,
preparacin del paciente, recoleccin de la muestra y el transporte de la muestra.
Criterios de aceptacin o rechazo de muestras, para eso debemos tener mucho en cuenta lo
siguiente:
Identificarla correctamente.
El volumen sea el adecuado.
El No asignado por el laboratorio corresponda igualmente a las dems muestras.
El recipiente de recoleccin es el correcto.
Muestras con hemlisis y coaguladas cuando son recolectadas con
anticoagulantes.
Presencia de interferencias como frmacos.
Para poder obtener resultados ptimos se utilizan controles que son especmenes
utilizados para determinar la validez de la calibracin, es decir, la linealidad y
estabilidad de un ensayo cuantitativo o de una determinacin cuantitativa a lo
largo del tiempo. Hay controles positivos y negativos.
BIBLIOGRAFIA
Grupo ACMS. Demuestre la fiabilidad de su laboratorio. Disponible en:
http://www.iso15189.es/informacion-iso-15189-grupo-acms.html. Consultado el:
Citado 1/11/13.
ACTIVIDAD INTEGRADORA
-Reportar en su bitcora la practica correspondiente
-Defina sensibilidad.
-Defina especificidad.
-Defina linealidad.
-Defina reproductibilidad.
-Defina control de calidad.
-Defina que es un estndar en laboratorio clnico.
INTRODUCCIN
El objetivo del laboratorio clnico es la obtencin de informacin sobre el estado de
salud de una persona. Esta informacin puede utilizarse para establecer un
diagnstico, evaluar una evolucin y/o pronstico de una enfermedad, valorar la
efectividad de un tratamiento, realizar un cribado en una poblacin, etc. Para ello,
a partir de muestras biolgicas, se realizan pruebas en las que se miden una serie
de magnitudes de diferente ndole: bioqumicas, hematolgicas, inmunolgicas,
microbiolgicas, parasitolgicas, toxicolgicas, etc.
Para que el resultado final de una prueba de laboratorio sea correcto, no basta con
que la determinacin analtica se realice a la perfeccin, de acuerdo a
procedimientos validados adecuadamente y bajo la supervisin de profesionales
experimentados. La calidad de la prueba depende del cumplimiento en cadena de
una buena prctica que comienza desde el momento mismo de la formulacin de
la peticin y la preparacin del paciente para la extraccin u obtencin de la
muestra y termina cuando el resultado llega a manos del profesional que solicit la
prueba.
As pues, una prueba analtica no es un mero "anlisis de sangre", sino un
proceso complejo en el que participan diferentes profesionales: los que rellenan el
formulario de peticin, los que preparan al paciente, obtienen la muestra, la
transportan hasta el laboratorio, la reciben, la procesan, validan los resultados y
hacen que estos lleguen a su destinatario en tiempo y forma. Todos estos
profesionales, los que participan en la fase preanaltica, analtica y postanaltica
son corresponsables del proceso y del resultado.
De ah la importancia de disponer de un manual de extraccin, toma y transporte
de muestras biolgicas en el laboratorio clnico. Con este manual se pretende de
manera concisa y clara ayudar a todos los profesionales que participan en la fase
preanaltica de la prueba del laboratorio.
FLUIDOS CORPORALES:
Se entiende por fluido corporal, a todas las secreciones o lquidos biolgicos,
fisiolgicos o patolgicos, que se producen en el organismo: sangre, orina,
deposiciones, lagrimas, saliva, semen, secreciones bronquiales, secreciones de
heridas, secreciones pticas, nasales, farinosas, secreciones vaginales,
secreciones uretrales, LCR, lquido pleural, lquido asctico, lquido articular, lquido
amnitico, entre otras.
Se aplican siempre a la sangre y a todos los fluidos que contengan sangre visible.
Se incluyen, adems, semen, secreciones vaginales, leche materna y aquellos
lquidos provenientes de cavidades normalmente estriles como: lquido
cefalorraqudeo, lquido sinovial, lquido peritoneal, lquido pericrdico y lquido
amnitico. Se consideran de alto riesgo, por constituir fuente de Infeccin de virus
de hepatitis B, VIH y otros agentes que se transmiten por la va parenteral.
PRECAUCIONES
GUANTES:
Deben usarse en todo procedimiento en que exista riesgo de estar expuesto a
fluido corporal de alto riesgo u otras secreciones.
Deben usarse cuando el personal tiene lesiones en las manos, transformndose
en una puerta de entrada de microorganismos.
Deben cambiarse entre cada paciente y deben ser colocados con lavado de
manos previo.
Para realizar cualquier puncin arterial y/o venosa debe usarse guantes, debido a
que reduce el riesgo de contaminacin de la piel de las manos con sangre y
disminuye el inculo al producirse un accidente por cortopunzante contaminado
con fluido de alto riesgo.
TRANSPORTE DE MUESTRAS:
El personal del equipo de salud que transporte muestras biolgicas SIEMPRE
DEBE USAR GUANTES.
El llenado de los frascos debe ser realizado con precaucin para evitar el derrame
por sus costados.
Los frascos debern ser transportados en cajas de seguridad tapadas, en posicin
vertical y el personal que las transporta debe manipularlas con guantes.
Los gases arteriales deben ser tapados con tapn rojo combi u otro tapn de
goma sin aguja.
MANEJO DE DERRAMES:
Debe limpiar la superficie con detergente y luego aplicar Cloro 0,5%.
Todos los procedimientos de limpieza debern ser realizados con guantes.
1.SANGRE:
Esta muestra es la ms frecuente y la que constituye mayor riesgo.
Los frascos de sangre, para Hemograma, pruebas Bioqumicas, Inmunolgicas y
otras deben venir correctamente tapados con su tapn de goma, y dispuestas en
gradilla, de modo de mantenerse vertical. No deben envolverse los frascos con las
solicitudes de exmenes, stas deben venir en forma separada.
Toda muestra de sangre debe manipularse con guantes y transportarse en
contenedores con tapa, especialmente diseados y destinados slo para ese
propsito. Jams debe transportarse una muestra dentro de un bolsillo o en la
mano.
2.- ORINA:
Las muestras de orina para urocultivo deben venir en frasco con tapa rosca. No es
necesario que el frasco venga lleno de orina, suficiente hasta sus partes.
En caso de derrame, limpiar con elemento absorbente y desinfectar con cloro al
0,5 %
3.- DEPOSICIONES:
Coproparasitolgicos, Coprocultivos, Coproparacitoscopicos y Benedict, deben
venir en recipiente correspondiente, correctamente tapados y sin derrames en su
exterior.
En caso de derrame o accidente, se procede igual que en puntos anteriores.
Para manipular sangre u otro fluido biolgico de cualquier paciente debe usarse
guantes de procedimientos.
OBJETIVO
Conocer el manejo adecuado en la obtencin, llenado, manejo y transporte de
muestras biolgicas en laboratorio clnico.
MATERIAL Y MTODO
Toma de muestra sangunea
1.-Puncin venosa: Son obtenidas por puncin directa del rea antecubital.
Material:
Tubo dependiendo el tipo de muestra que se recoger
Torniquete
Aguja
Jeringa
Torunda con alcohol
Guantes
Mtodo:
Previo lavado de manos y utilizacin de guantes.
Seleccionar la vena y aplicar el torniquete a 4cm por encima del sitio de puncin.
Limpiar la piel con torniquete impregnado de alcohol, sobre el sitio donde se
realizar la puncin, en una sola direccin, preferencialmente hacia distal.
Tener lista la jeringa con la aguja para puncionar la vena, colocando bisel hacia
arriba y colocando el embolo en 45 dejando que la presin extraiga la sangre.
Soltar el torniquete.
Retirar la jeringa, colocando una torunda con alcohol en el sitio de la puncin.
Retirar aguja de la jeringa y depositar la sangre en el tubo especificado.
Desechar en su sitio especfico cada uno de los materiales utilizados.
Puncin arterial:
Los sitios ms comunes de puncin arterial son las arterias femoral, braquial o
radial.
En recin nacidos o en lactantes pueden utilizarse otros lugares, como la arteria
umbilical a las arterias del cuero cabelludo.
Material:
Jeringa especfica para obtencin de gases arteriales con aguja
Heparina
Torunda con alcohol
Guantes
Mtodo:
Seleccionar la arteria
Impregnar la jeringa con heparina
Inmovilizar el miembro donde se realizar la puncin con la mueca en
hiperextensin.
Limpiar el rea con torunda impregnada de alcohol.
Palpar la arteria, percibir el pulso y la direccin que lleva la arteria.
Insertar la aguja en un ngulo de 90
Aspirar suavemente y obtener 2ml de sangre.
Retirar la aguja.
Hacer presin no menos de 5 minutos para impedir sangrado.
Enviar jeringa al laboratorio bien tapada.
Desechar material utilizado que se haya contaminado
Material:
Tubo capilar
Lanceta
Guantes
Torunda con alcohol
Mtodo:
Seleccionar el sitio de puncin.
Limpiar el rea con la torunda con alcohol.
Puncionar el sitio con la lanceta, aplicando presin moderada para obtener la
muestra.
Usar el tubo capilar para recolectar muestra.
Limpiar el rea y hacer presin.
Desechar lanceta y material utilizado que se haya contaminado.
Material:
Lanceta
Torunda con alcohol
Guantes
Gasas
Papel filtro
Mtodo:
Limpiar el rea con una torunda impregnada de alcohol.
Secar con una gasa estril.
Hacer una puncin en el taln con la lanceta, se limpia la primera gota de sangre
con una gasa estril.
Se toma la gota grande de sangre sobre el papel filtro para que se llene el circulo.
Llenar los crculos restantes de la misma manera, con gotas suaves sucesivas.
Secar la sangre y limpiar.
Desechar lanceta y material utilizado que se haya contaminado.
ADULTOS:
Material:
Guantes (en caso necesario)
Toalla de papel
Frasco limpio con boca ancha rotulado
Mtodo:
Lavado de manos con agua y jabn.
Hombres: retraer completamente el prepucio, mantenindolo retrado hasta que se
haya recogido la muestra, lavar el meato urinario con agua y jabon, enjuagar y
secar. Mujeres: lavar el vestbulo vaginal y la entrada de la uretra con agua y
jabn, enjuagar y secar; deben separarse los labios y sujetar el frasco sin que ste
tome contacto con la vulva, la pierna o la ropa.
Se desecha el primer chorro y se empieza a recolectar la orina en el recipiente en
el chorro medio.
Recolectar 10mL de orina.
NIOS:
Material:
Agua y jabn
Bolsa de plstico o colector
Mtodo:
Lavado de los genitales y rea perineal con agua y jabn.
Vigilar la bolsa cada 30 minutos, y tan pronto como el nio haya orinado, se
retirar y enviar al laboratorio.
Material:
Contenedor de 2.000mL de boca ancha
Guantes
Mtodo:
Vaciar completamente la vejiga a una hora determinada, despus esta se
desecha.
Despus de desechar la orina, se recolecta en un recipiente limpio toda la que se
presente durante las 24 horas siguientes.
Mantener la orina a 4C, o dejarla en un lugar fresco.
Despus de 24 horas, se lleva la muestra al laboratorio.
Material:
Frasco estril rotulado
Guantes estriles
Gasas de algodn
Mtodo:
Lavado de manos.
Colocarse guantes.
Dejar caer la orina en el frasco estril.
Lquido cefalorraqudeo:
Generalmente la obtencin se tiene por medio de puncin lumbar, a travs de
catter de ventriculostoma intraoperatoriamente o a travs de cmara de vlvula
de derivacin ventrculo peritoneal.
Material:
Equipo de puncin lumbar desechable.
Equipo de preparacin de piel.
Tubos estriles secos con tapa de rosca o tapn de caucho.
Apsito para cubrir el sitio de puncin.
Mtodo:
Preparacin de la piel.
Obtener 1-2ml de muestra en 3 tubos estriles secos, para estudio citolgico,
citoqumico y microbilogico.
En caso necesario de requerir PCR para enterovirus, herpes simple o tuberculosis,
se recolecta en un tubo adicional de 1ml y se conserva a la menor temperatura.
Enviar al laboratorio en hielo seco.
Jugo gstrico:
Material:
Jeringa de 10 cc.
Guantes no estriles.
Recipiente de boca ancha estril de tapa de rosca con fosfato trisdico al 10% con
capacidad para 50ml.
Sonda nasogstrica.
Agua destilada.
Mtodo:
Colocar sonda nasogstrica al paciente una noche antes.
Al da siguiente por la maana y con el paciente en reposo, aspirar de 5-10 cc de
contenido gstrico con una jeringa estril.
Depositar la muestra en un recipiente estril con fosfato trisdico al 10%
Instilar de 25 a 50 cc de agua destilada y aspirar 20 cc de contenido gstrico.
Agregar al recipiente estril con la muestra inicial y tapar hermticamente.
Protegerse de la luz y enviarlo a laboratorio.
Mtodo:
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de practica correspondiente de acuerdo a rubrica
proporcionada por el profesor.
BIBLIOGRAFA
Rivera Sandra. Captulo V: Toma de muestras de laboratorio. Clnica Fundacin
Valle de Lili (sitio de internet). Guas para el manejo de urgencias. Disponible en:
http://www.aibarra.org/Apuntes/criticos/Guias/Enfermeria/Toma_de_muestras_de_l
llaborator.pdf. Acceso el 21 de noviembre del 2013.
INTRODUCCIN
La biometra hemtica (o hemograma) es
uno de los estudios de laboratorio ms
utilizados actualmente como auxiliar al
diagnostico. De la biometra hemtica se
obtienen algunos datos de los tres
elementos formes de la sangre:
eritrocitos, leucocitos y plaquetas. La
biometra hemtica es sin lugar a dudas
el primer paso para el diagnstico. Es un
estudio de laboratorio que mide las
cantidades y caractersticas de los tres
tipos de cuerpos que normalmente se
encuentran en la sangre, que en orden
decreciente de tamao son:
1. Leucocitos (glbulos blancos, serie blanca, frmula blanca).
2. Eritrocitos (glbulos rojos, serie roja, frmula roja).
3. Plaquetas (trombocitos).
Los valores normales de los elementos formes de la sangre pueden tener cambios
fisiolgicos debidos a la edad, al sexo y a la ubicacin geogrfica.
Eritrocitos
Los datos que habitualmente se reportan en una biometra hemtica sobre los
eritrocitos se pueden dividir en:
ndices eritrocitarios primarios:
Cuenta de eritrocitos.
Hematocrito.
Hemoglobina.
ndices eritrocitarios secundarios:
Volumen celular (globular) medio.
Concentracin media de hemoglobina globular (corpuscular).
Hemoglobina globular (corpuscular) media.
Amplitud de la distribucin eritrocitaria.
Desviacin estndar de la distribucin de concentracin globular de hemoglobina.
Reticulocitos
Eritrocitos anormales (alarmas morfolgicas, cambios individuales).
Cuenta de leucocitos.
Conteo plaquetario.
OBJETIVO
1.El alumno conocer el funcionamiento de un laboratorio de hematologa, as
como las medidas de precaucin para su proteccin personal en cuanto al manejo
de las muestras de sangre, al ser considerarlas potencialmente infecto-
contagiosas.
2. El alumno conocer y aprender a manejar el material y equipo ms comn que
se utiliza en la realizacin de la biometra hemtica.
3. El alumno aprender a analizar y correlacionar el resultado de la biometra
hemtica con las manifestaciones clnicas que presente el paciente.
4. El alumno conocer las alteraciones morfolgicas ms frecuentes que se
presentan en las anemias.
MATERIALES Y MTODO
Torundas alcoholadas
Sistema cerrado (Vacutainer)
Jeringas
Agujas
Tubo tapn lila con EDTA
Mtodo
Las determinaciones de la Biometra Hemtica, de preferencia se realizan con
sangre venosa, ya que la extraccin es ms fcil, se obtiene una cantidad
adecuada como para repetir cuantas veces sea necesario, la manipulacin y el
pipeteo es mucho ms fcil, sin embargo tambin se puede utilizar sangre capilar
o arterial.
La metodologa utilizada generalmente es por medio de sistema automatizado o
semiautomatizado de acuerdo a lo sealado por el profesor.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
BIBLIOGRAFA
Flora MariaGarciaGonzalez.( Et al); Utilidad de la biometra hemtica en la prctica
clnica.Eritrocito; RevSanidMilitMex 2011; 65(6) Nov.-Dic: 294-300 citado: 27/11/13
Disponible :http://www.medigraphic.com/pdfs/sanmil/sm-2011/sm116f.pdf
ANEXOS
Estudio de caso: anemia.
Estudio de caso: Leucemias
Estudio de caso: Infeccione
INTRODUCCIN
La qumica sangunea Bioqumica sangunea (QS/BS) es el examen bsico para
evaluar la funcin metablica renal, cardiaca, heptica y pancretica; por medio de
la medicin y reporte de aquellos componentes qumicos disueltos en sangre.
Parmetros bioqumicos
PARAMETROS BIOQUIMICOS VALORES DE REFERENCIA
(pueden variar segn el laboratorio)
Hombre Mujeres Nios
Glucosa 70-105 mg/dl 70-105 mg/dl 40-100 mg/dl
Ac. rico 4-8.5 mg/dl 2.5-7.5 mg/ dl 2.5-5 mg/dl
Urea 7-20 mg/dl 7-20 mg/dl 5-18 mg/dl
Creatinina 0.7-1.3 mg/dl 0.5-1.2 mg/dl 0.2-1 mg/dl
Bilirrubina Directa (BD) 0.1-0.3 mg/100ml
Bilirrubina total (BT) 0.3-1.0 mg/100 ml
Fosfatasa alcalina 30-120 U/L
Gamma GlutamilTranspeptidasa (GGT) 8-38 U/L 5-27 U/L -
Transaminasa glutmico oxalacetica 5-32 mU/ ml
(GOT/AST)
Transaminasa glutmico pirvica (GPT/ALT) 7-33 mU/ml
Colesterol 100-200 mg/100ml
HDL >45 mg/100ml >55 mg/100ml -
LDL 60-180 mg/100ml
Protenas totales 6.4-8.3 gr/dl
Albumina 3.5-5 gr/dl
Calcio 8.5-10.5 mg/100ml
Potasio 3.5-5 mmol/L
Sodio 135-145 mEq/L
Fosforo 2.9- 5.0 mg/ 100ml
Adems de estos existen diversos parmetros 12, 15, 24, 27 (SMAC) sin embargo
las anteriormente mencionadas son las de gabinete, que van desde el estudio
bsico al estudio completo: cabe resaltar que aumentando el estudio de
componentes qumicos se prolongara el tiempo de espera para el resultado.
OBJETIVO
MATERIALES Y MTODO
Muestra analizar: Suero.
Tubo vacutainer rojo o amarillo con gel separador.
Jeringa o punzocat
Torniquete
Torundas
Guantes
Recipiente rojo para RPBI
Centrifuga
Equipo espectrofotomtrico.
ACTIVIDAD
ANEXOS
Estudio de caso: diabetes
Estudio de caso: dislipidemias
Estudio de caso: hipertensin.
BIBLIOGRAFA
Laboratoriosvaldes.com [internet]. Coahuila: laboratoriosvaldes; 2013 [citado 20 de
noviembre de 2013]. Disponible en:
http://laboratoriosvaldes.com/servicios/analisis-clinicos/quimica-sanguinea.html
INTRODUCCIN
El perfil heptico (PH) consiste en el anlisis de sangre con el fin de medir ciertos
componentes como enzimas, protenas y bilirrubina y as poder determinar si
existe alguna alteracin funcional a nivel del hgado.
Recordemos que el hgado desempea importantes funciones como la de
eliminacin de medicamentos, drogas u otras sustancias qumicas, adems de
que interviene en la descomposicin y almacenamiento de ciertas sustancias
como carbohidratos, lpidos y vitaminas.
Parmetros bioqumicos:
PARMETROS BIOQUIMICOS VALORES DE
REFERENCIA
(pueden variar segn el
laboratorio)
Transaminasa glutmico pirvica 7-33 mU/ml Determinar dao heptico
(GPT/ALT) Responsable del metabolismo de la alanina, cuya mayor
concentracin de la enzima se ubica en el hgado. Puede
referir: cirrosis, hepatitis, hemocromatosis hereditaria, uso de
frmacos hepatotoxicos, etc
Transaminasa glutmico 5-32 mU/ ml No es especifico de enfermedad heptica, pero sirve como
oxalacetica (GOT/AST) marcador de control junto a GPT, bilirrubina. Puede referir:
hepatitis alcohlica, hepatitis, cncer heptico, necrosis
heptica, pancreatitis aguda, etc
Gamma GlutamilTranspeptidasa 8-38 U/L en varones y 5- Puede elevarse en casos de cirrosis o litiasis biliar
(GGT) 27 U/L en mujeres
LDH 100-220 UI/L LDH: Marcador de destruccin celular sensible pero poco
especifico. Especficamente LDH-5 ya que procede
directamente de hgado y piel3.
Fosfatasa alcalina 30-120 U/L Concentraciones elevadas en hgado, vas biliares y huesos. En
relacin a hgado puede referir: enfermedad heptica
alcohlica.
Bilirrubinas totales 0.3-1.0 mg/100 ml A nivel del hgado a bilirrubina es conjugada por ac.
BI 0.2-0.9 mg/dl Glucoronico originando bilirrubina directa.
BD
0.1-0.4 mg/dl
Protenas totales 6.4-8.3 gr/dl
albumina gr/dl Es producida casi exclusivamente por el hgado. [Disminucin]
cirrosis heptica, sndrome nefrtico, malabsorcin, etc
OBJETIVO
Realizar pruebas de funcionamiento heptico en suero y relacionar los resultados
con el diagnostico.
MATERIALES Y MTODO
MUESTRA REQUERIDA: de 5 a 10 mL de sangre venosa sin anticoagulante.
Materiales:
- Jeringa estril para extraer 5-10 mL con aguja 21 X 1 o sistema de extraccin
al vaco.
- Torundas de algodn.
- Alcohol etlico (70%).
- Marcador de vidrio.
- Torniquete.
- Tubos sin anticoagulante 13x100mm y tapn de hule o tubos del sistema de
extraccin al vaco.
- Gradilla para tubos.
- Guantes descartables.
Mtodo:
- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.
- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
- Sentar cmodamente al paciente para la extraccin tomando en cuenta que el
rea de sangra debe contar con suficiente iluminacin.
- Seleccionar la vena apropiada para la puncin.
- Realizar asepsia con torunda de algodn humedecida con alcohol etlico al 70%
de adentro hacia fuera.
- Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que
abra y cierre la mano varias veces para favorecer la dilatacin de las venas.
- Proceder a puncionar la vena seleccionada.
- Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.
- Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a
1.5 cm.
- Tirar hacia atrs el mbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre la
sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria. Si utiliza
sistema de sangrado al vaco introducir el tubo en el dispositivo (holder) de
manera que al ejercer presin se atraviese el extremo inferior de la aguja, para
que la sangre fluya hacia el tubo por efecto del vaco.
- Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodn
sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de la aguja.
- Extraer la aguja con un movimiento rpido por debajo de la pieza de algodn,
pedir al paciente que presione firmemente la torunda durante 3 minutos con el
brazo extendido.
FUENTES DE ERROR:
- Prolongada aplicacin del torniquete.
- Extraccin violenta de la sangre, que puede provocar hemlisis.
- Empleo de tubos mal lavados.
- Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.
- Dejar los tubos con muestras destapados.
- Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al anlisis qumico a
realizar.
- Separacin inadecuada del cogulo antes de centrifugar (no poner en bao de
Mara).
- Centrifugacin inadecuada de la muestra.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: ictericia
Estudio de caso: hepatitis
Estudio de caso: cirrosis
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
CIDO RICO
Mtodo enzimtico colorimtrico
El cido rico en los mamferos es el metabolito final del catabolismo de las bases
pricas y su elevacin est asociada a la gota, es decir, los reumatismos
hiperuricmicos. En los pacientes con tal disfuncin, aparecen cristales de cido
rico en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones
reumticas caractersticas.
Niveles altos de cido rico estn tambin asociados a patologa renal por
retencin de productos nitrogenados, asocindose en estos casos a valores
tambin altos de urea y de creatinina.
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de cido rico en
una muestra biolgica.
Establecer los valores de referencia de cido rico y comparar con el valor de
nuestra muestra problema a analizar.
Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores
altos o bajos de cido rico en una muestra biolgica.
MATERIALES Y MTODO
Muestra:
Suero, plasma u orina.
Orina: Diluir la orina al 1:10 con agua destilada, mezclar y seguir la tcnica.
Multiplicar el resultado por 10.
Material
1Micropipeta de 1 mL
1Micropipeta de 50 L.
1Piseta con agua desionizada o destilada
2Celdas de plstico de 3 ml
4 Tubos de vidrio de 13X100
Puntas para micropipeta.
Gradilla.
Equipo
Fotmetro con filtro de lectura de: 520 nm.
Centrfuga
Orina de 24 horas
mg/dL 250 - 750
mmol/L 14,872 - 44,616
CONSIDERACIONES IMPORTANTES:
-Si la muestra de orina es turbia, calentarla a 60C para disolver el cido rico.
-El cido rico en suero es estable de 3 a 5 das en T de 2-8C.
-Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro no afectan los
resultados de la prueba.
-Se sugiere procesar junto con las muestras algn suero control valorado con
niveles normal y anormal que le permitir tener un control de la exactitud y
precisin de los resultados.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y Patolgico. Sueros control valorados.
CREATININA
Mtodo colorimtrico-cintico
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de creatinina en
una muestra biolgica.
Establecer los valores de referencia de la creatinina y comparar con el valor de
nuestra muestra problema a analizar.
Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores
altos o bajos de creatinina en una muestra biolgica.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
Suero o plasma heparinizado.
La creatinina en suero y plasma tiene una estabilidad de al menos de 24 horas a
2-8C.
Orina.
Diluir previamente a con agua destilada, multiplicar el resultado por la dilucin.
Material necesario
1 Micropipeta de 1 mL
1 Micropipeta de 200 L.
1 Piseta con agua desionizada o destilada
2 Celdas de plstico de 3 ml
5 Tubos de vidrio de 13X100
Puntas para micropipeta
Gradilla.
Equipo
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 490-510 nm.
Centrfuga
PROCEDIMIENTO
De acuerdo al inserto
Clculos
Linealidad
Hasta valores de 15 mg/dL (1326 mol/L)
Para valores superiores se deber diluir a 1:2 con sol. salina, multiplicando el
resultado por 2.
DEPURACIN
Hombres: 97 - 137 mL/min
Mujeres: 88 - 128 mL/min
OBSERVACIONES
La hemlisis interfiere en el test.
No utilizar sueros lipmicos.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y patolgico.
UREA
MTODO CINTICO "UREASA-GLDH"
Urea y amonaco
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de urea en una
muestra biolgica. Establecer los valores de referencia de la urea y comparar con
el valor de nuestra muestra problema a analizar. Definir cuales son las principales
patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de urea en una
muestra biolgica.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
Suero o plasma heparinizado.
Reactivos
Proporcionados por el fabricante.
Material necesario
1 Micropipeta de 1 mL
1 Micropipeta de 200 L.
1 Piseta con agua desionizada o destilada
2 Celdas de plstico de 3 ml
5 Tubos de vidrio de 13X100
Puntas para micropipeta.
Gradilla.
EQUIPO
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 340 nm.
Centrfuga
Linealidad
El mtodo es lineal hasta valores de 500 mg/dL (83.25 mmol/L)
Para concentraciones superiores se deber diluir la muestra a 1:2 con solucin
salina, multiplicando el resultado por 2.
NOTAS:
Muestra: Suero, plasma o orina..
La orina diluirla a 1:50 con agua destilada.
No emplear suero o plasmas turbios o hemolizados.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y patolgico
OBJETIVO
Establecer el mtodo adecuado de recoleccin de especimenes de orina para un
anlisis especfico.
Discutir las propiedades fsicas ms importantes de la orina y sus relaciones con la
enfermedad.
Identificar los constituyentes qumicos ms importantes de la orina, como
cuantificarlos y como confirmar su presencia.
Describir mtodos adecuados para estandarizacin de los especimenes de orina y
de los hallazgos microscpicos ms comunes.
Fundamento
El anlisis de orina rutinario, se basa en un procedimiento que se compone de dos
partes: 1) un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas
fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes
qumicos por medio de la tira como protenas, glucosa, cetonas, pH), y 2) un
examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para
verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
El cuidado en la recoleccin de la orina y su entrega rpida en el laboratorio, son
cruciales para obtener una informacin ptima. La orina debe ser colectada en un
recipiente limpio, estril, que tenga un cierre seguro para prevenir posibles
derramamientos, evaporacin o contaminacin.
Estos recipientes deben rotularse con el nombre del paciente, fecha y hora de
recoleccin.
Para que los datos del uroanlisis sean precisos, es esencial que la orina sea
examinada dentro de las dos horas siguientes a su recoleccin o preservada de
alguna manera, usualmente por refrigeracin (2 a 8 C). Se pueden usar
Reactivos
Reactivo (Tincin de Sternheimer-Malbin) comercial
Para sedimento urinario. Facilita la identificacin de las clulas.
Mtodo
Se vuelve a suspender el sedimento en el tubo de centrifuga y se aade una gota
del colorante; se espera tres minutos. Luego se pone una gota sobre un
portaobjetos, se cubre y se examina al microscopio.
Resultados
Hemates: Color rosado
Leucocitos: Prpura oscuro con ncleo rojo oscuro.
Granulaciones: Citoplasmticas violetas.
Clulas brillantes: Son leucocitos neutrfilos incoloros o de color azul claro.
Son caractersticos de polinefritis.
EQUIPO
Microscopio ptico.
Centrfuga clnica.
Equipo de urianalisis
Nota:
El alumno debe consultar el manual del microscopio ptico y centrifuga para saber
cuales son las instrucciones de operacin, datos y caractersticas de
funcionamiento de los instrumentos.
MATERIAL
Envases desechables para orina.
1 probeta graduada de 50 ml.
4 tubos para centrifuga de 13 x 100mm.
2 tubos de ensayo de 13 x 100mm.
4 portaobjetos.
4 cubreobjetos.
2 pipetas serolgicas graduadas de 10 ml.
2 pipetas Pasteur.
2 bulbos de goma.
Tiras reactivas comerciales.
Colorante de Sternheimer-Malbin.
PROCEDIMIENTO
Olor.
Una orina normal fresca no tiene mal olor. Un olor desagradable, puede indicar
que el espcimen es demasiado viejo para obtener un anlisis preciso. Un olor
ftido en un espcimen recolectado desde hace ms de dos horas (y no
preservado o refrigerado) indica que el espcimen es inadecuado. El olor puede
tambin dar seales de ciertas anormalidades de la orina. Un olor parecido al
amoniaco, es sugestivo de presencia de bacterias degradadoras de la urea, un
olor a frutas indica la presencia de acetona (cetonas), un olor dulce es sugestivo
de la presencia de glucosa u otros azcares, un olor ftido es sugestivo de pus o
inflamacin. El olor es importante en la deteccin clnica de la enfermedad llamada
orina de miel de maple (un defecto metablico congnito).
Gravedad especfica.
La gravedad especfica de la orina es una medida parcial de la capacidad del rin
para concentrar orina. Su rango normal es de 1.003 a 1.035 g/mL. Los valores
iguales o superiores a 1.020 indican una buena funcin renal y la excrecin de una
cantidad aumentada de solutos disueltos excretados por los riones. Valores de
densidad especfica iguales o superiores a 1.035 indican la presencia de solutos
extraos, lo cual debe ser investigado. Una disminucin de la gravedad especfica
se observa en pacientes quienes usan diurticos.
Las sustancias de alto peso molecular afectan la gravedad especfica en un grado
mayor que la producida por simples cristaloides. Esto es importante cuando la
orina contiene molculas grandes como glucosa, protenas o medios de contraste
radiogrficos. Cuando se presentan niveles elevados de glucosuria o proteinuria,
es necesario aplicar factores de correccin para ajustar la gravedad especfica a
un valor ms representativo; se debe restar 0.004 por cada 10 g/l de glucosa y
0.003 por cada 10 g/l de protena. Valores de 1.040 o superiores estn asociados
con la presencia de medios de contraste radiogrficos o preservativos.
La gravedad especfica se puede medir empleando un hidrmetro y un recipiente
apropiado. El uso de los hidrmetros tiene varias limitaciones: 1) requieren un
volumen grande de orina (10 a 15 mL); 2) estn calibrados para ser usados a 20
C, si la orina no est a esta temperatura de referencia se deben aplicar factores
de correccin; 3) los hidrmetros no pueden ser recalibrados. Por estas razones,
los laboratorios ya no emplean estos elementos.
La mayora de los laboratorios poseen refractmetros que relacionan la densidad
de una solucin con la gravedad especfica. El uso de estos refractmetros tiene
algunas ventajas: 1) requieren solo una o dos gotas de orina; 2) tienen la
temperatura compensada; 3) las lecturas estn menos afectadas por la densidad
que las de los urinmetros; y 4) poseen un tornillo para calibrar a cero.
Osmolalidad.
El rin normal es capaz de producir orina con un rango de 50 a 1200 mOs/Kg.
Los rangos de la osmolalidad en orina oscilan desde 1/6 a cuatro veces la
osmolalidad del suero normal (280-290 mOs/Kg). La osmolalidad es medida por
un osmmetro.
La osmolaridad est determinada por el nmero de partculas por unidad de masa,
mientras la gravedad especfica es un reflejo de la densidad (tamao o peso) de
las partculas en suspensin.
Generalmente la gravedad especfica y la osmolaridad son directamente
proporcionales de un modo lineal, aunque hay excepciones importantes. Por
ejemplo, si a un paciente se le administran medios de contraste yodados por
pielografa intravenosa, la gravedad especfica puede elevarse hasta 1.070 o
1.080, mientras que la osmolalidad permanecer dentro de los lmites normales.
Las partculas de contraste tienen una masa lo suficientemente grande para elevar
la gravedad especfica, pero hay muy pocas molculas presentes que puedan
producir un notable incremento en la osmolalidad.
Los anlisis realizados por medio de tiras reactivas deben efectuarse en orinas
bien mezcladas y equilibradas a la temperatura ambiente. Cada parmetro
qumico debe ser evaluado en un intervalo de tiempo especfico, de acuerdo a lo
indicado en las instrucciones del fabricante. Deben tomarse del envase, solamente
el nmero de tiras requerido para los anlisis inmediatos y el envase debe taparse
nuevamente asegurando que la tapa quede bien ajustada. Las tiras reactivas
deben ser almacenadas en un lugar fresco (no refrigeradas). El medio ambiente
debe estar libre de humedad. Nunca se deben usar tiras para orina caducadas o
expuestas al aire.
Despus de sumergir la tira reactiva en la orina, se debe remover el exceso de
orina golpeando la tira suavemente en el borde del recipiente que contiene el
espcimen. Se debe comparar individualmente la reaccin de cada zona reactiva
con su correspondiente en la carta de colores, bajo una iluminacin adecuada. Los
resultados positivos de las tiras reactivas pueden requerir confirmaciones por
mtodos qumicos y microscpicos. La informacin proporcionada por los
fabricantes debe ser revisada para identificar fuentes de inhibidores y resultados
falsos positivos y negativos.
pH Urinario.
Aunque el mtodo estndar para la medicin del pH emplea electrodos de vidrio,
el pH urinario, usualmente, es medido con indicador de papel, debido al hecho de
que pequeos cambios en el pH son de poca importancia clnica. La mayora de
los laboratorios de uroanlisis emplean tiras reactivas multitest con dos
indicadores, rojo de metilo y azul de bromotimol. Estos indicadores proporcionan
un rango de pH de 5.0 a 9.0, el cual se manifiesta por un cambio de color de
naranja (cido) a verde y azul (alcalino). El rango de pH urinario es 4.7 a 7.8. Las
muestras de orina extremadamente cidas o alcalinas, usualmente indican
especmenes mal recolectados. El pH es importante para el manejo clnico de las
piedras o cristales.
Protenas (opcional)
Las personas sanas pueden tener una excrecin diaria de protenas de 100
mg/da, una fraccin muy pequea del contenido de protenas plasmticas. La
mayora de la protena en la orina es albmina que pasa la membrana glomerular,
pero tambin pueden estar presentes protenas de peso molecular pequeo como
las globulinas. Una vez filtradas las protenas son casi completamente
reabsorbidas en el tbulo proximal. La proteinuria, por lo tanto, puede ser el
resultado tanto de un incremento en la filtracin como de una disminucin en la
reabsorcin (funcin tubular). Las tiras reactivas son un procedimiento de tamizaje
para la proteinuria. Como la especificidad de las tiras reactivas est limitada a la
deteccin de albmina, es altamente recomendable que el laboratorio procese
simultneamente una prueba por tira reactiva y una prueba de precipitacin por
cido para la deteccin de todos los tipos de protenas. Las tiras reactivas son
sensibles al pH y dependen de la presencia de protenas para la generacin de
color. La presencia de la protena en la tira cambia el pH del medio de contraste
impregnado en la zona reactiva, producindose el cambio de color pH 3.
Un resultado positivo o dbilmente positivo debe ser confirmado por otros mtodos
ms especficos como el cido tricloroactico o el cido sulfosaliclico.
Un resultado dbilmente positivo y uno fuertemente positivo puede indicar la
presencia de frmacos o protenas de Bence Jones.
Azcares.
1.Ensayos enzimticos.
El ensayo de la tira reactiva es un excelente anlisis especfico para glucosa.
Detecta la oxidacin de la glucosa a cido glucnico:
Cetonas.
El trmino cuerpos cetnicos incluye tres componentes qumicos diferentes pero
muy relacionados: cido acetoactico, cido beta hidroxibutrico y acetona.
Los ensayos realizados por medio de tiras reactivas emplean la reaccin de
nitroprusiato de sodio que detecta acetona y cido acetoactico pero no beta
hidroxibutrico, el cuerpo cetnico primario. Es importante saber que el reactivo de
nitroprusiato de sodio reacciona principalmente con el cido acetoactico; la
acetona tiene solo un 20% de reactividad comparada con el cido acetoactico:
Sangre y mioglobina.
Una orina roja indica usualmente la presencia de eritrocitos, hemoglobina o
mioglobina. La hematuria, a menudo, representa una combinacin de eritrocitos
intactos (ms de 5 por campo de alto poder), eritrocitos fragmentados y
hemoglobina libre. La hematuria gruesa o macroscpica implica hemorragia o
sangrado fresco, lo que, en un medio de orina cida, da como resultado una
apariencia de roja a parda, turbia, o ahumada.
El mtodo empleado por la tira reactiva para determinar hemoglobina o mioglobina
se fundamenta en una actividad semejante a la de las peroxidasas:
Bilirrubina.
Orinas espumosas, de color amarillo a pardo, u oscuras son sugestivas de la
presencia de bilirrubina conjugada. La orina normal no contiene bilirrubina. Los
pacientes ictricos con enfermedad hepatocelular como hepatitis o enfermedad
obstructiva como cirrosis biliar pueden tener bilirrubina conjugada en la orina.
El mtodo empleado por las tiras reactivas para determinar bilirrubina se basa en
la reaccin de diazoacin.
Urobilingeno.
El urobilingeno es un compuesto coloreado, resultado de la reduccin de la
bilirrubina por accin de las bacterias en el intestino. Las orinas normales
contienen pequeas cantidades de urobilingeno. El urobilingeno se encuentra
disminuido en nios deficientes en bacterias intestinales; en pacientes despus de
la administracin de antibiticos que reducen la flora intestinal, y en pacientes con
enfermedades obstructivas hepticas. Se encuentra un aumento del urobilingeno
en pacientes con anemias hemolticas (aumento de formacin de bilirrubina) y
disfuncin heptica. El mtodo empleado por las tiras reactivas para la
determinacin del urobilingeno vara segn el fabricante. Algunos emplean la
reaccin de Erlich, usando p dimetilaminobenzaldehdo en una reaccin simple de
color con el profobilingeno. Esta reaccin no es especfica para urobilingeno,
pudindose encontrar resultados falsos positivos con otros compuestos que
tambin reaccionan con el reactivo de Ehrlich. Otros emplean una reaccin
especfica para el urobilingeno: el urobilingeno reacciona con un compuesto de
diazonio producindose un color rojo. Para la determinacin del urobilingeno es
necesario un espcimen fresco porque el compuesto es sensible a la luz. El
espcimen preferido par la determinacin cuantitativa del urobilingeno urinario es
una orina recolectada durante las dos primeras horas de la tarde. Este tiempo de
recoleccin se debe a los patrones de excrecin diurna del urobilingeno.
Nitritos.
El ensayo de nitritos es empleado en los laboratorios de uroanlisis para detectar
bacteriuria. El mtodo empleado en las tiras reactivas para determinar nitritos se
basa en la reduccin de nitratos a nitritos por la accin enzimtica de ciertas
bacterias presentes en la orina. En un pH cido los nitritos reaccionan con el cido
p-arsanlico formando un compuesto de diazonio, el cual a su vez reacciona con
N-(1- naftil) etilndiamina produciendo un color rojo. El ensayo de nitritos debe ser
realizado en especmenes recolectados en la primera orina de la maana o en una
muestra de orina que haya sido recolectada despus de 4 horas o ms, a partir de
la ltima evacuacin de la vejiga, con el fin de permitir que durante este tiempo los
microorganismos metabolicen el nitrato dentro de la vejiga. En orinas pasadas o
viejas, el ensayo de nitritos puede ser positivo como resultado de la contaminacin
con bacterias despus de la miccin. La prueba de nitritos es especfica para
organismos gram negativos, sin embargo, se pueden obtener resultados falsos
negativos si estn presentes microorganismos como enterococos, estreptococos o
estafilococos.
Esterasa leucocitaria.
La presencia de leucocitos (piuria) es un indicador de inflamacin clnicamente
importante. El mtodo empleado para la determinacin de leucocitos intactos y
lisados en las tiras de orina est basado en la presencia de esterasas
intracelulares. Estas enzimas catalizan la hidrlisis de los steres, liberando
componentes que son luego empleados en una reaccin de color. La intensidad de
la reaccin de color es directamente proporcional a la cantidad de leucocitos
presentes en el espcimen. La presencia de tricomonas y agentes oxidantes
pueden producir falsos positivos.
Melanina (opcional)
Las orinas normales no contienen melanina. La melanina se encuentra en orinas
de pacientes con melanoma maligno. Los pacientes con esta neoplasia maligna
excretan precursores incoloros de melanina (melangenos), los cuales al ser
expuestos al aire se polimerizan formando un pigmento oscuro de melanina. Los
anlisis para tamizaje emplean cloruro frrico que oxida los melangenos a
melanina, la cual vuelve la orina a un color pardo oscuro.
Procedimiento
La orina debe examinarse mientras est fresca, algunas clulas y cilindros pueden
desintegrarse en un lapso de una a tres horas. La refrigeracin de 2 a 8 C por 48
horas, usualmente previene la desintegracin de las clulas y entidades
patolgicas. Con propsitos de estandarizacin, cada espcimen de orina debe
concentrarse de diez a veinte veces. El examen se realiza de la siguiente manera:
Procedimiento
1. Aadir una o dos gotas de colorante violeta-safranina O a, aproximadamente, 1
mL de sedimento de orina precentrifugado y concentrado a ese volumen.
2. Mezclar con una pipeta y poner una gota de esta suspensin en una laminilla.
Muchos laboratorios de uroanlisis recomiendan el uso de la microscopa de
contraste de fases para una mejor deteccin de los elementos formados ms
translcidos del sedimento urinario. Los cilindros hialinos, moco, y bacterias
pueden escapar a la deteccin empleando la microscopa convencional, no teida,
bajo campo claro. La microscopa de contraste de fases tiene la ventaja de
endurecer los contornos inclusive de los elementos ms efmeros, haciendo ms
sencilla su deteccin. Siempre se logra un detalle morfolgico mejor de los
elementos formados (notablemente en cilindros y clulas) con el uso de un
microscopio de contraste de interferencias.
Cristales.
Los cristales urinarios son vistos comnmente. Usualmente los cristales no estn
presentes en orinas frescas recin obtenidas y en general, la formacin de los
cristales es considerada como un artefacto del sistema de recoleccin. Los
cristales se forman cuando varios constituyentes qumicos llegan a saturarse o
sufren un cambio en su solubilidad, cuando la orina es almacenada a
temperaturas ms bajas. Ciertas sustancias qumicas, como la albmina,
previenen la cristalizacin. Cuando la orina se calienta a 37 C, la mayora de los
cristales desaparecen. Aquellos cristales que todava permanecen, tienen
importancia diagnstica, cuando se correlacionan con sntomas clnicos.
Los tipos de cristales urinarios dependen del pH de la orina fresca. La cistina,
cido rico, leucina, y tirosina son los cristales de mayor importancia diagnstica y
por tanto deben ser identificados. Debido a la limitada relevancia clnica de los
cristales, algunos laboratoristas estn de acuerdo en que no debe desperdiciarse
tiempo en su identificacin especfica. La formacin de muchos cristales est
inducida por varios medicamentos y su importancia clnica no es clara an.
Organismos.
En un espcimen de orina bien recolectado y procesado, la presencia de
organismos es importante desde el punto de vista clnico. Se reportan,
frecuentemente, bacterias, hongos, parsitos, y clulas infectadas con virus. Los
organismos vistos en un espcimen de orina son microscpicamente reconocibles
como estructuras intra o extracelulares. Con la microscopa de campo claro se
detectan fcilmente bacterias, hongos y parsitos.
La deteccin de bacterias intracelulares fagocitadas y hongos, organismos de
Toxoplasma, y cuerpos de inclusin viral, usualmente requieren procedimientos
citolgicos. La identificacin exacta de los organismos ayuda en el diagnstico
clnico diferencial de infecciones del sistema urinario. Las preparaciones
coloreadas son importantes en la evaluacin de organismos, identificacin de
clulas inflamatorias asociadas, en la valoracin de la exfoliacin epitelial, y en la
formacin de cilindros renales con el fin de identificar su localizacin. Se deben
emplear tcnicas microbiolgicas para confirmar y clasificar completamente
algunos organismos urinarios.
Bacterias.
La orina de individuos normales es estril y no contiene bacterias. Algunas
bacterias pueden estar presentes por contaminacin durante la recoleccin o por
almacenamiento prolongado. Se puede determinar una concentracin de menos
de 103 bacterias/mL, cuando se han visto bacterias en un espcimen de orina
centrifugado, pero no en el espcimen sin centrifugar. La presencia de bacterias
en un espcimen sin centrifugar indica que hay una concentracin mayor de 103
bacterias/mL. La presencia de 105 bacterias/ml o ms sugiere una infeccin de
tracto urinario. Este nmero corresponde a 10 o ms bacterias por campo de alto
poder. La identificacin de bacterias, cocos o bacilos puede hacerse por
Hongos.
Las infecciones del tracto urinario (ITU) producidas por hongos son comunes en
pacientes diabticos, en aquellos que toman medicamentos desde el nacimiento, o
en aquellos que han recibido terapia intensiva con antibiticos o terapia
inmunosupresora. En la mayora de las ITUs de pacientes no
inmunocomprometidos, se ha observado un patrn inflamatorio asociado. Candida
albicans es el hongo ms comn, identificndose como levadura o micelio. En
general, la apariencia de gemacin de levadura indica que el hongo ha coexistido
con el husped, mientras que la forma micelar aparece durante la invasin al
tejido. Las levaduras de Candida albicans son altamente retractiles y miden de 3 a
5 m. Suelen ser confundidas con eritrocitos. A diferencia de los eritrocitos, las
levaduras no son lisadas por cidos.
Parsitos.
La presencia de parsitos en la orina indica contaminacin fecal o vaginal. La
Trichomona vaginalis, un flagelado, es el parsito que ms comnmente se
observa en la orina. La incidencia de este tipo de parsito en mujeres es muy alta
pudiendo producir vaginitis severa. En el hombre, el parsito causa una uretritis
asintomtica. Debido a la motilidad de este organismo oval, la microscopa de
campo claro es empleada como la forma ms sencilla y rpida de identificacin.
Los tricomnidos inmviles pueden ser confundidos con leucocitos o clulas
epiteliales. Se han encontrado huevos de helmintos (Enterovius vermicularis) en la
orina de nios por contaminacin fecal. Morfolgicamente un huevo de helminto
est rodeado por una cpsula con dos capas, transparente y delgada, pudindose
ver, enrollado dentro de ella, un embrin. En la orina, tambin pueden encontrarse
huevos de trematodos.
Eritrocitos.
Una orina normal, examinada con objetivo de alto aumento, no debe contener ms
de unos cuantos eritrocitos. Estas clulas aparecen en la orina despus de
lesiones vasculares o trastornos del rin o del tracto urinario inferior. La presencia
de eritrocitos acompaada de cilindros hemticos o eritrocitos dismrficos es
Leucocitos.
La velocidad de excrecin normal de eritrocitos en la orina es de 1 leucocito por
cada 3 campos con objetivo de alto aumento, 3000 clulas/mL, o ms de 200,000
clulas/hora. Un elevado nmero de leucocitos (piuria) est asociado a numerosos
procesos inflamatorios e infecciosos del tracto urinario. La mayora de los
leucocitos vistos por microscopa de campo claro son neutrfilos segmentados.
La identificacin de linfocitos, clulas plasmticas, y eosinfilos requiere de
coloraciones especiales. Se ha mostrado que una velocidad de excrecin en
exceso de 400,000 clulas/hora siempre indica una infeccin del tracto urinario.
Esta velocidad corresponde a ms de 10 neutrfilos por campo de alto poder. Los
pacientes con infecciones activas del tracto urinario superior tienen,
frecuentemente, ms de 50 neutrfilos por campo de alto poder o una velocidad
de excrecin de leucocitos que excede 2 o an 3 millones/hora.
Espermatozoides.
Los espermatozoides pueden ser fcilmente reconocidos en la orina de un hombre
despus de la eyaculacin o en la orina de una mujer por contaminacin vaginal
despus del coito. Su identificacin es de limitada importancia clnica y la
presencia de espermatozoides, generalmente, no es reportada.
Cilindros renales.
Los cilindros renales (urinarios) son estructuras cilndricas que se organizan en el
nefrn y su importancia proviene de su localizacin. Estn formados por
uromucoide (mucoprotena de Tamm-Horsfall), que est siempre presente en la
orina, usualmente en suspensin. Este uromucoide es producido por las clulas
del epitelio tubular renal de la seccin ascendente del asa de Henle. Los cilindros
se forman como consecuencia del estancamiento de la orina y de la precipitacin
del uromucoide. El incremento en la concentracin de protenas, sales, y un pH
urinario bajo son algunos de los factores que contribuyen a su formacin. Debido a
que la precipitacin de esta protena depende de la concentracin y composicin
de la orina, los cilindros se forman ms fcilmente en la porcin distal del nefrn y
en los ductos colectores del rin, donde la orina es ms concentrada. En
pacientes con protena de Bence Jones (mieloma mltiple), los cilindros pueden
formarse en los tbulos convolucionados proximales. Estas formaciones cilndricas
presentes en la orina reflejan las formas (largas o cortas) y dimetros (delgados y
gruesos) de los lmenes de los tbulos renales en donde se formaron. Su nmero
y propiedades cuantificables aportan valiosos indicios sobre la naturaleza de la
enfermedad del parnquima renal. Microscpicamente, los cilindros se
caracterizan por la apariencia de su matriz (hialina, granular, crea), por los
constituyentes celulares (eritrocitos, leucocitos, o clulas del epitelio tubular renal)
o por el tipo de material particulado embebido en la matriz (grnulos finos, gruesos
o fibrina). La identificacin exacta de los cilindros, especialmente de los tipos
celulares, es difcil cuando se hace en preparaciones hmedas no coloreadas
visualizadas en microscopios bajo la luz directa o campo claro. Se necesita un
microscopista hbil para evitar las interpretaciones errneas. La visualizacin de
los cilindros mejora con el empleo de microscopios con contraste de fases, de
filtros de contraste o coloraciones especiales.
Para propsitos diagnsticos de enfermedad renal, los cilindros se han clasificado
como fisiolgicos o patolgicos.
Grasas.
Las grasas se encuentran en la orina de pacientes quienes han presentado
embolismo graso despus de lesiones severas con aplastamiento seo,
degeneracin grasa del rin o sndrome nefrtico. La grasa aparecer en la
superficie de la orina recolectada en la ltima parte de la miccin. En el sedimento
urinario se pueden encontrar clulas epiteliales vacuoladas. La identificacin de
las gotas de grasa se facilita empleando coloraciones especiales para grasa como
Oil Red O o Sudn III.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente a cada parmetro que integra el
perfil renal y el examen general de orina de acuerdo a rbrica proporcionada por el
profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: infeccin de vas urinarias
Estudio de caso: proteinuria
Estudio de caso: clculos
Estudio de caso: insuficiencia renal
BIBLIOGRAFA:
1. Terrs Speziale Arturo M; Clnica y Laboratorio: Ciencia y Tecnologa; 2 ed; ed.
Graphimedic S.A. de C.V; Mxico 2002.
8. Examen de sangre
.Internet:http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/esp_imagepages/1002 .
htm
16. AYRES H. Gilbert; Anlisis Qumico Cuantitativo;2 ed;ed. Harla S.A de C.V.;
Mxico 1970.
17. FLASCHKA H.A.; Qumica Analtica Cuantitativa; 9.ed; trad. Antonio Eroles
Gmez; ed. Continental S.A. de C.V; Mxico 1984.
18. GRAW Allan, Cowan Robert A; Bioqumica Clnica; 2a. ed; ed.
A.Hamabata;Mxico D.F. 2003.
20. GRAFF Sister Laurine; Anlisis de Orina, Atlas a color; 1 ed; trad. Pablo
Rubn Koval; ed. Mdica Panamericana S.A; Mxico 1983.
21. ALTHOF Klinder Heintz; Sedimento Urinario; 6.ed; ed. Mdica Panamericana;
Mxico 2003.
INTRODUCCIN
El metabolismo altamente anaerbico del corazn le permite usar como
combustible muchos substratos normalmente presentes en el plasma, y la
absorcin cardaca de la mayora de estos substratos es proporcional a su
concentracin arterial una vez que ciertos niveles son excedidos. En trminos
generales, el corazn usa los cidos grasos libres como su combustible
predominante. Tambin consume importantes cantidades de glucosa y lactato, as
como cantidades ms pequeas de piruvato, cuerpos cetnicos y aminocidos.
La mayor parte de la energa para la funcin cardaca se obtiene de la
descomposicin de metabolitos a travs del ciclo del cido ctrico y la fosforilacin
oxidativa. Estas vas enzimticas se encuentran principalmente en las
mitocondrias, representando aproximadamente un 35% del volumen total del
msculo cardaco.
Creatina cinasa
La enzima responsable de la regeneracin del ATP es la creatina cinasa.Tiene un
peso molecular de 85,000 daltones y existe en diversas formas isoenzimticas. La
creatina cinasa (CC) es un dmero, compuesto de las dos subunidades M
(msculo) y B (cerebro). Las tres isoenzimas formadas a partir de estas
subunidades se encuentran en el citosol. Estas isoenzimas se abrevian como
MM, MB, y BB. Si comparamos la actividad de la enzima en varios tejidos, el
msculo esqueltico tiene por mucho la mayor actividad, poseyendo unas 50,000
veces la concentracin de la CC srica. La isoenzima esqueltica predominante es
la isoenzima MM, con slo trazas de las isoenzimas MB y BB en la mayora de las
fibras musculares. El componente MB, sin embargo, est incrementado en ciertos
trastornos musculares, particularmente en la distrofia muscular tipo Duchenne y en
la polimiositis. La actividad de CC del msculo esqueltico medida en unidades
internacionales es aproximadamente de 2000 U/g, comparada con la actividad del
msculo cardaco de 500 U/g. En suero normal, por lo menos el 95% de la CC
presente es del tipo MM que probablemente se deba principalmente a fugas del
msculo esqueltico, particularmente durante la actividad fsica. Debido a esto, la
actividad de la CC srica en personas activas saludables muestra una distribucin
asimtrica inclinada hacia valores ms altos. Adems, los valores son ms bajos
en las mujeres que en los hombres y son ms bajos en la maana que en la
noche. Los valores tienden a ser ms bajos en pacientes hospitalizados,
posiblemente debido a que el reposo en cama reduce la cantidad de enzimas
liberadas del msculo.
Isoformas de CC
Lactato deshidrogenasa
La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima tisular ubicua que cataliza la
reduccin de piruvato a lactato usando nicotinamida adenina dinucletido (NAD).
La LDH de un peso molecular de aproximadamente 140,000 daltones y es un
tetrmero compuesto de cuatro subunidades con peso molecular de 35,000
daltones cada una. Las subunidades, que son de dos tipos, H (corazn) y M
(msculo), se combinan para formar las cinco isoenzimas de LDH. La principal
isoenzima (HHHH) tiene una actividad mxima en presencia de bajas
concentraciones de piruvato, pero se inhibe por exceso de piruvato. Por contraste,
la principal isoenzima muscular (MMMM) exhibe actividad mxima en presencia de
una mayor concentracin de piruvato y se inhibe menos por exceso de piruvato.
El corazn metaboliza los cidos grasos y los carbohidratos a una velocidad
aproximadamente constante con oxidacin completa del piruvato a travs del ciclo
de Krebs del cido ctrico. Por lo tanto, el corazn tiene una baja concentracin
tisular de piruvato y lactato y rpidamente convierte el lactato del plasma en
piruvato. Por contraste, el msculo, con rpidas demandas de incrementos de
energa durante el ejercicio, tiene que contender con rpidos incrementos en
piruvato y lactato de tejido causados por el metabolismo anaerbico.
La LDH se encuentra en el citosol de todas las clulas humanas y por lo tanto
tendra poca especificidad para el diagnstico a no ser por el hecho de que las
isoenzimas estn presentes en diferentes proporciones en cada tejido. El corazn
y los eritrocitos contienen principalmente LDH1 y LDH2, mientras que el msculo
esqueltico y el hgado contienen LDH5 y en menor grado LDH4. El suero normal
contiene principalmente LDH2, con menores cantidades de LDH1 y de las otras
isoenzimas. Si las enzimas son liberadas del tejido cardaco al suero, a menudo
vemos un cambio en la proporcin de LDH1 a LDH2. La vida media de la LDH es
diferente para cada isoenzima; la isoenzima 1 (HHHH), tiene una vida media de
aproximadamente 100 horas, mientras que la isoenzima 5 (MMMM) tiene una vida
media de slo 10 horas. La importancia de esto es evidente en la discusin de la
liberacin de las enzimas durante el infarto al miocardio.
Creatin-kinasa
Creatincinasa
Mtodo cintico UV. NAC activado
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de la
Creatin cinasa
Establecer los valores de referencia de la enzima CK y comparar con el valor de
nuestra muestra problema a analizar.
Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores
altos o bajos de CK.
Fundamento
Se mide la actividad de la creatincinasa mediante un mtodo cintico enzimtico.
En la reaccin, la creatincinasa cataliza la transferencia de un grupo fosfato del
sustrato fosfato de creatina al difosfato de adenosina (ADP). La subsiguiente
formacin de trifosfato de adenosina (ATP) se mide mediante el uso de dos
reacciones asociadas, catalizadas por la hexocinasa (HK) y la glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa (G6PDH), lo que produce dinucletido de nicotinamida adenina
reducida (NADH) a partir del dinucletido de nicotinamida adenina (NAD).
MATERIALES Y METODOS
Muestra
Suero, plasma heparinizado con EDTA.
Material necesario
Pipetas de 2 mL y 200 L
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 340 nm.
Cronmetro
Reactivos
Proporcionados por el fabricante.
NOTAS
La hemlisis interfiere en la prueba a concentraciones superiores a 200 mg/dL de
hemoglobina.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: hipertensin
Estudio de caso: infarto
BIBLIOGRAFA
1. TERRS Speziale Arturo M; Clnica y Laboratorio: Ciencia y Tecnologa; 2 ed;
ed. Graphimedic S.A. de C.V; Mxico 2002.
2. PRESIDENCIA DE LA REPBLICA; CGEA, Gua tcnica para la elaboracin de
manuales de procedimientos; Coleccin guas tcnicas, serie organizacin y
mtodos nm. 9.
OBJETIVO
El alumno realizar algunos anlisis utilizando como herramienta la reaccin
antgeno-anticuerpo. El alumno leer ntegramente el inserto del fabricante de los
reactivos (uso, fundamentos, descripcin de los componentes, requerimientos de
muestra, almacenamiento, estabilidad, procedimiento, control de calidad,
interpretacin, etc.) Se realizarn las pruebas siguiendo estrictamente las
instrucciones del fabricante.
Fundamento
Muchas tcnicas en el laboratorio de anlisis clnicos utilizan la reaccin
antgeno-anticuerpo como herramienta para detectar y/o cuantificar constituyentes
de la sangre o de otros fluidos corporales.
En la mayora de los inmunoensayos, la muestra del paciente contiene el
antgeno (analito), y el anticuerpo se adiciona como reactivo para detectar o medir
el antgeno. Por otra parte, en los casos de enfermedad infecciosa,
determinaciones serolgicas, pruebas de alergias y pruebas para
anticuerpos autoinmunes, es la medicin del anticuerpo en la muestra del
paciente la que es clnicamente importante. En estos casos, se utiliza como
reactivo un antgeno de composicin conocida.
MATERIALES Y MTODO
Muestra: Suero
Reactivos
Conjunto de reactivos para determinacin de prueba de embarazo. -Conjunto de
reactivos para practicar prueba de VIH, VHB, VHC, VDRL (o RPR), PCR, AEL, FR.
Reacciones febriles, ELISA, western blot (opcionales sugeridos por el maestro).
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: prueba inmunolgica de embarazo.
Estudio de caso: VIH, sfilis, hepatitis B.
Estudio de caso: alergia e inflamacin.
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
La Microbiologa mdica estudia los microorganismos que son responsables de las
principales enfermedades infecciosas de los humanos. Podemos considerar como
agentes infecciosos a los priones, virus, bacterias, hongos y parsitos. Las
enfermedades infecciosas son muy frecuentes, pueden ser graves e incluso
causar la muerte. En general son fcilmente diagnosticables y curables, algunas
son prevenibles y muchas de ellas tienen importantes consecuencias sociales y
econmicas. Los diferentes agentes infecciosos presentan factores de virulencia
que les permiten colonizar al hospedero y causar enfermedad. La mayora son
transmitidos por alimentos o agua contaminados, por fmites, por contacto directo,
por la sangre o secreciones, y algunos de ellos, necesitan de vectores para poder
infectar al humano. Las bacterias, los virus y los parsitos transportados por el
agua, provocan cerca de cuatro millones de muertes por ao en el mundo.
Quienes ms riesgo corren son los 1,100 millones de personas que carecen de
acceso a agua potable y segura y los 2,400 millones sin instalaciones de servicios
de salud adecuadas.
OBJETIVO
Realizar las determinaciones micro y bacteriolgicas de los siguientes lquidos
corporales:
Sangre para hemocultivo
Orina para urocultivo
Lquido Asctico: realizado para estudio etiolgico de sndrome asctico
Lquido Cefalorraqudeo: realizado para estudios de afecciones
meningoenceflicas (inflamaciones, infecciones, traumatismos).
Lquido pleural: estudio etiolgico de derrame pleural.
Lquido sinovial: estudio etiolgico de derrame articular.
Parasitolgico (coproparasitolgico).
Lquido cefalorraqudeo
El diagnstico y tratamiento correcto de una enfermedad del SNC puede depender
de los resultados del examen del LCR en el laboratorio; debido a esto, este lquido
tiene que extraerse y manipularse correctamente.
El LCR es normalmente estril y puede obtenerse mediante puncin lumbar o, con
menos frecuencia, por puncin cisternal, cervical o ventricular; cada uno de estos
procedimientos debe ser realizado aspticamente por un mdico con experiencia
en el mismo y alertado el paciente sobre sus indicaciones y posibles
complicaciones.
La zona de puncin es generalmente la lumbar, pero tambin habra de nombrarse
la ventricular, suboccipital o por una derivacin.
Para los estudios de citologa se proceder igual, pero utilizando el tubo con EDTA
(1mg/ml) como anticoagulante, no debe usarse citrato sdico u oxalato. Las
clulas se conservan relativamente bien entre 24 y 48 horas si las muestras se
mantienen refrigeradas.
Microbiologa:
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera
la investigacin de Mycobacterium spp u hongos se enviar un volumen superior a
10 ml.
Esta es la mnima cantidad necesaria para el estudio bacteriolgico del lquido
empleado en la dilisis peritoneal.
Si es necesario evitar la coagulacin de algunos de estos lquidos se usar
heparina sin conservantes; otros anticoagulantes pueden tener accin bacteriana.
Los recipientes idneos son tubos estriles de tapn de rosca o de presin
negativa sin conservantes. Se llenarn hasta cerca del tapn, de esta forma
pueden ser tiles para el estudio de anaerobios, especialmente si la muestra es
purulenta.
Es aconsejable para este tipo de muestras inocular paralelamente, en el lugar de
la extraccin, dos frascos de hemocultivo, uno para aerobios y otro para
anaerobios.
Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio y hasta su
procesamiento se mantendrn a temperatura ambiente.
Cuando las muestras se destinen a la investigacin de micobacterias y hongos,
debern mantenerse en nevera.
Los hemocultivos se mantendrn entre 35C y 37C, o en su defecto a
temperatura ambiente.
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringuilla y aguja para
hacer la extraccin de la muestra, ya que los anestsicos pueden inhibir el
crecimiento bacteriano.
Lquido sinovial
Los trastornos de la membrana sinovial, la alteracin en los elementos de sostn
articular y la presencia de cuerpos extraos pueden producir la acumulacin de
grandes cantidades de lquido sinovial en las articulaciones. Su posterior anlisis
en el laboratorio puede ser decisivo para el diagnstico de la patologa
subyacente.
MATERIALES Y MTODO
Materiales: tubo estril con o sin medio de transporte.
Muestra:
Lquido asctico: 5 ml de lquido con heparina.
La obtencin del lquido debe realizarse con una jeringa sin anticoagulante. Una
vez recogida la muestra, en funcin del volumen obtenido, debe distribuirse en los
diferentes contenedores necesarios para realizar su estudio:
Consideraciones
Lquidos coagulados o hemorrgicos finalizarn en exmenes difciles de
interpretar.
Procedencia: tiempos de respuesta
Hospitalizacin bsica 2 horas
Hospitalizacin crtica/pabellones/neo 1 hora
Urgencias (infantil, obsttrica y adulto) 1 hora
Pacientes ambulatorios 4 horas
Procedimiento
Determinacin de parmetros bioqumicos (cuando aplique), se utilizar la tcnica
que el profesor recomiende.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
EXMEN COPROLGICO.
EXMEN MICROSCPICO O DESCRIPCIN FSICA DE LA MATERIA FECAL.
INTRODUCCIN.
Se entiende por coproparasitolgico (coprolgico), el estudio o anlisis de las
heces, y comprende la observacin macroscpica y el anlisis qumico,
bacteriolgico y parasitololgico de la deposicin.
En el manejo de los productos biolgicos va a radicar el xito o fracaso del
diagnstico de enfermedades parasitarias. Es necesario seguir ciertos
lineamientos preestablecidos para cada producto.
Las muestras mal colectadas, conservadas inadecuadamente o muy viejas, no
servirn para observaciones ulteriores e incluso puede conducir a resultados
errneos o falsos.
La colecta de este material biolgico se puede verificar de diferentes maneras,
pero la obtenida por expulsin natural es la indicada para realizar este tipo de
examen. Debiendo evitar que se mezcle con orina, agua o tierra.
CARACTERES MACROSCPICOS.
OLOR. - El olor fecal caracterstico, se hace ftido en todos los procesos que
cursan con putrefaccin de las protenas ingeridas o endgenas, dado por
productos aromticos originados por la accin de microorganismos de
fermentacin o de putrefaccin que actan sobre carbohidratos y protenas como
el indol y el escatol.
MATERIALES Y MTODO
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
Cuestionario:
Qu tecnicas se utilizan para realizar la toma de muestra fecal?
Que reactivo o colorantes se pueden utilizar para el analisis de las muestras?
Diga cuales mtodos de anlisis coprolgico existen
ANEXOS
Estudio de caso: septicemias.
Estudio de caso: parasitismo
BIBLIOGRAFA
Guder WG, et al. Muestras: del paciente al laboratorio. Darmstadt (Alemania). Edt
Git Verlag . 1996
M.L. Hortas Nieto, J.L. Marn Soria (Presidente), M. Muoz Prez y A. Noguera
Bennaser. Recomendaciones para el estudio del lquido sinovial.
Rowe Patrick J., Comhaire Frank H., Hargreave Timothy B. y. Mahmoud Ahmed
M.A. WHOmanual for the standardized investigation, diagnosis and management
of the infertile male. 2000 First edition.
Viroj Wiwanitkit. Published online 2001 October 16. Types and frequency of
preanalytical mistakes in the first Thai ISO 9002:1994 certified clinical laboratory, a
6 month monitoring. BMC Clin Pathol. 2001; 1: 5.
WHO Laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical
mucus interaction. Fourth edition. 1999.
Young DS, Conveying the importance of the preanalytical Phase. Clin Chem Lab
Med
2003: 41 (7): 884-7
PRACTICA # 10 ESPERMATOBIOSCOPIA
OBJETIVO
Efectuar una espermatobioscopa directa y conocer sus valores de referencia.
Fundamento
El examen del semen usualmente se practica como parte del protocolo del estudio
de la pareja con problemas de fertilidad. Por su relativa simplicidad, frecuente-
mente se solicita antes de someter a la mujer a estudios que son mas
complicados. Adems, el laboratorio clnico realiza estudios postvasectoma y
anlisis forenses.
MATERIALES Y MTODO
MUESTRA: Se recolecta la muestra despus de un perodo de abstinencia sexual
de 3 das, preferentemente por masturbacin.
Mtodo
VOLUMEN: Utilice una probeta graduada
muestra y medir la longitud del filamento (normal: 5-10 mm); Otro criterio es que
debe gotear libremente.
pH: Utilice un papel indicador de pH
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: enfermedades de transmisin sexual (ETS).
Estudio de caso: impotencia.
BIBLIOGRAFA
-SUSAN KING y MARJORIE SCHAUB: Urinalysis and Body Fluids, 4a. Edicin,
EUA, F.A.Davis Company, 2001
INTRODUCCIN
OBJETIVO
El alumno conocer algunas de las metodologas para la identificacin de
xenobiticos txicos, frmacos de abuso y/o sus metabolitos.
Se efectuar un rastreo urinario para deteccin de los frmacos de abuso, as
como la determinacin de una sustancia txica en una muestra de sangre u orina.
El anlisis a practicar depender de la disponibilidad de reactivos y equipo.
Fundamento:
El laboratorio de anlisis clnicos con capacidad para la realizacin de
anlisis toxicolgicos aporta informacin prctica al mdico ocupacional sobre
los riesgos de salud, evaluacin de la exposicin y para el seguimiento del
personal en tratamiento.
MATERIALES Y MTODOS
MUESTRA: Sangre total, suero u orina, segn el anlisis a practicar.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: intoxicacin por drogas de abuso.
Estudio de caso: intoxicacin por herbicidas y plaguicidas (organoclorados,
organofosforados, carbamatos, etc)
Estudio de caso: intoxicacin por plomo
Estudio de caso: intoxicacin por arsnico.
BIBLIOGRAFA
-www.osha.gov
-www.stps.gob.mx
OBJETIVO
Conocer la utilidad de marcadores hormonales en el diagnstico precoz del
embarazo, en su control, en la mola hidatiforme, coriocarcinoma, carcinoma
embrionario del testculo, embarazo ectpico, control de mola y coriocarcinoma
despus del tratamiento.
MATERIALES Y METODO
Condicin paciente: no requiere ayuno.
Materiales:
1. Materiales para puncin venosa.
2. Tubo tapa amarilla, roja (sin anticoagulante); tubo verde heparina de litio (con
anticoagulante).
Procedimiento:
Muestra: Vase prctica 2 obtencin de sangre venosa
Transporte:
En gradilla a temperatura ambiente. En un tiempo de traslado que no exceda la
hora luego de ser obtenida la muestra.
Consideraciones
Cantidad de sangre mnima a extraer:
2 cc: nios (tubo sin anticoagulante).
5 cc: adultos (tubo sin anticoagulante)
4 cc: tubo verde heparina de litio (con anticoagulante)
vaciado de la muestra sangunea al tubo: si no se est utilizando sistema tipo
vacutainer o venoject completo (es decir, con camisa), recordar importancia de
retirar la aguja antes de proceder a depositar la muestra en el tubo.
Sobre mantencin de tubos sin uso:
Mantener a temperatura ambiente 20-24 C
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
proporcionada por el profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: esterilidad.
Estudio de caso: cncer.
Estudio de caso: hipertiroidismo.
BIBLIOGRAFA:
(Anexar bibliografa)
INTRODUCCION
El descubrimiento de casi la totalidad del mapa gentico humano (genoma) nos ha
dado las armas para comenzar la lucha definitiva contra las enfermedades. Con
forme la ciencia avanza las pruebas de laboratorio tambin, equipos mas
sensibles, mas especficos y sistemas automatizados mas precisos ayudan a la
determinacin de analitos en pro del diagnostico clnico y la determinacin clnica
de muchas enfermedades. Pruebas inmunomoleculares, genticas y de
investigacin son de gran ayuda en el laboratorio clnico.
OBJETIVO
Conocer y relacionar las pruebas inmunomoleculares asi como sistemas
automatizados que pueden ser de gran ayuda en el diagnostico clnico.
Materiales y mtodo
Se utilizarn medios audiovisuales y documentales en el desarrollo de esta
prctica.
Mtodo
Analizar y relacionar con el diagnostico las siguientes pruebas:
Cariotipo de bandas G (tincin de bandas G con giemsa-tripsina).
Hibridacin in situ con fluorescencia (FISH)
Hibridacin genomita comparativa (CGH)
Cariotipo espectral (sky-FISH) y multi-FISH (M-FISH)
Reaccin en cadena de la polimerasa (analisis molecular mediante PCR).
Microarreglos de ADN.
Reaccin en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR)
Reaccin en cadena de la polimerasa multiple en tiempo real (RT-PCR
multiple).
PCR multiple en tiempo real en el anlisis de mutaciones en tumores
Solidos.
ACTIVIDAD
BIBLIOGRAFIA
(Anexar bibliografa analizada)
Anexos:
Estudio de caso: tumores
Estudio de: anlisis de inmunoglobulinas (Igs)
Estudio de caso: ADN (prueba de paternidad, polimorfismos, deleciones, etc).
Estudio de caso: enfermedades vs herencia y mapa gentico.
GLOSARIO
Acidosis. pH del fluido corporal anormalmente bajo. Respiratoria -causada por
una PCO2 anormalmente alta; Metablica-causada por una concentracin de
bicarbonato anormalmente baja.
Acidosis lctica. Acidosis (pH sanguneo bajo) causado por exceso de cido.
Adipsia. Ausencia de sed.
Aditivo. Sustancia qumica que al aadirse a una muestra causa uno o ms
cambios en sus propiedades fsicas o qumicas.
Adsorber. Acoplamiento de una sustancia qumica a una superficie slida.
Aerosol. Una fina niebla producida por la atomizacin de un lquido.
Agua corporal total (ACT). Toda el agua contenida en el cuerpo, tanto dentro
como fuera de las clulas, incluyendo aquellas contenidas en los sistemas
gastrointestinal y genito-urinario.
Agua extracelular (AEC). Agua externa a las membranas; anatmica: toda agua
externa a las membranas celulares; fisiolgica: plasma y agua corporal en la cual
pequeos solutos pueden difundirse; excluye la porcin transcelular del agua
anatmica extracelular; incluye el plasma y el fluido intersticial.
Agua intracelular (AIC). Agua contenida en las clulas del cuerpo; agua dentro
de las membranas celulares.
Agua libre. Agua que no contiene soluto.
Agua transcelular. La porcin de agua extracelular que est rodeada por una
membrana epitelial, cuyo volumen y composicin se determinan por la actividad
celular de esa membrana.
Alcalosis. pH del fluido corporal anormalmente alto; respiratoria: causada por una
PCO2 anormalmente baja; metablica: causada por una concentracin de
bicarbonato anormalmente alta.
Albuminuria. Incremento en la concentracin de albmina en la orina.
Aldosterona. Hormona mineralocorticoide secretada por la corteza adrenal que
influye en el metabolismo del sodio y el potasio.
Alcuota. Una pequea parte de una determinada muestra, la cual tiene la misma
composicin qumica.
Aminoaciduria. Exceso de uno o ms aminocidos en la orina.
Anlisis bicromtico. Monitoreo espectrofotomtrico de una reaccin a dos
longitudes de onda. Usado para corregir el color de fondo.
Anlisis cintico. Anlisis en el cual el cambio del parmetro que se est
controlando con respecto al tiempo est relacionado con la concentracin, como el
Anlisis de orina por tira hmeda. Examen qumico de la orina empleando tiras
reactivas de prueba para la determinacin de albmina, glucosa, cetonas,
bilirrubina, hemoglobina, bacterias, leucocitos, y otros constituyentes qumicos.
Anlisis de punto final. Monitoreo de una reaccin despus de que sta se ha
completado esencialmente.
Anlisis por tira reactiva. Uso de tiras de prueba conteniendo reactivos qumicos
para determinar si hay concentraciones patolgicas de diversas sustancias en la
orina.
Anastamsis. Conexin de dos vasos sanguneos.
Angiognesis. Una complicacin de la diabetes mellitus. Proliferacin anormal de
los vasos sanguneos en un tejido tal como las lentes del ojo.
Angiopata. Una complicacin de la diabetes mellitus que se manifiesta como un
dao en las membranas basales de los vasos sanguneos.
Angiotensina. Polipptido vasopresor producido por la accin enzimtica de la
renina sobre el angiotensingeno. Una enzima convertidora del pulmn extrae dos
aminocidos C-terminales del decapptido inactivo angiotensina I para formar el
octapptido biolgicamente activo angiotensina II.
ANSI (American Nacional Standard Institute). Miembro de la organizacin
internacional para la estandarizacin.
Anticoagulante. Una sustancia que puede suprimir, retrasar o evitar la
coagulacin de la sangre impidiendo la formacin de fibrina.
Anticuerpos de las clulas de los islotes (ACI). Anticuerpos frecuentemente
encontrados en la diabetes tipo I que sugieren un origen autoinmune.
Antisptico. Una sustancia qumica la cual reduce el nmero de bacterias.
Arterial. Relacionado con o derivado de las arterias, los vasos que conducen
sangre del corazn a los tejidos del cuerpo.
Bacteriuria. Presencia de bacterias en la orina.
Bilirrubinuria. Presencia de bilirrubina en la orina.
Blanco de muestra. Muestra ms diluyente; usada para corregir la absorbancia
de la mezcla completa de reaccin para el color endgeno de la muestra.
Blanco de reactivo. La mezcla de reaccin menos la muestra: usado para restar
el color del reactivo endgeno de la absorbancia de la reaccin completa (ms la
muestra).
Clculos. Concreciones anormales, usualmente compuestos de sales, presentes
en el sistema urinario u otros tejidos; una piedra renal.
Capilar. Relacionado con un vaso sanguneo muy delgado en los tejidos donde los
nutrientes son depositados y los productos de desecho son removidos por la
sangre.
Catter. Un tubo de hule o plstico que conecta una cavidad del cuerpo con la
superficie del cuerpo.
Cateterizacin. Insercin de un instrumento delgado, flexible y tubular en la vejiga
o urter para obtener o sacar orina.
Hiperosmtica. Que denota una presin osmtica efectiva mayor que la del
plasma.
Hiperpotasemia. Concentracin anormalmente alta de potasio plasmtico.
Hipertnica. Que denota una presin osmtica terica mayor que la del plasma.
Hiponatremia. Una concentracin anormalmente baja de sodio plasmtico; por
dilucin: hiponatremia causada por un exceso de agua (con respecto al sodio) en
el compartimento extracelular.
Hipopotasemia. Concentracin anormalmente baja de cloruro plasmtico.
Hiposmtico. Que denota una presin osmtica efectiva menor que la del
plasma.
Hipotnico. Que denota una presin osmtica terica menor que la del plasma.