Morfologia de E. Coli y sus mecanismos de patogenicidad.

Las bacterias del gnero E. coli son Gram-negativas, tienen forma de

barra y pertenecen a la familia Enterobacteria. Esta bacteria es un
habitante comn de los intestinos de todos los animales, incluyendo el
de los humanos. Escherichia coli (E. coli) es quizs el organismo
procarionte ms estudiado por el ser humano, se trata de una bacteria
unicelular que se encuentra generalmente en los intestinos animales y
por ende en las aguas negras. sta y otras bacterias son necesarias para
el funcionamiento correcto del proceso digestivo. Adems produce
vitaminas B y K. Los serotipos se asocian con virulencia. Es un bacilo que
reacciona negativamente a la tincin de Gram (gramnegativo), es
anaerbico facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean su
cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa

E. coli enterohemorrgica (ECEH)

La ECEH (O 157:H7) pertenece a la categora de E. coli altas productoras

de verotoxinas (VT) o citotoxinas;

Desde el punto de vista fisiolgico, estas cepas se caracterizan por ser

en un 95 % sorbitol negativo, y se han descrito fenotipos atpicos no
productores de indol y que no utilizan el citrato como fuente de carbono.

Patogenia

Entre los factores de virulencia de estas cepas est la produccin de

hemolisinas. Estas pueden ser: la hemolisina alfa, la cual es posible
determinar por anticuerpos monoclonales o hibridacin del ADN, y la
hemolisina beta o enterohemolisina, que slo puede detectarse con el
uso de medios especiales elaborados con sangre lavada. Esta
enterohemolisina se relaciona con la produccin de VT y algunos autores
sealan hasta un 89 % de correlacin.

Otra caracterstica de estas cepas relacionadas con la produccin de VT

es la fluores- cencia por la 4-metil-lumbelil-feril-beta-D-glucornico
(MUG), la cual es negativa en las cepas productoras de VT.

Las citotoxinas, verotoxinas o Shiga-like toxins estn entre los factores

de virulencia de ECEH.

Las cepas pueden tener presentes la VT1 y la VT2, slo una de ellas o
ser VT- y aun as ser capaces de producir enfermedad por otros
mecanismos que ms adelante sern descritos.
La VT1 es antignicamente similar a la Shiga-toxina e idntica desde el
punto de vista biolgico. Su secuencia de aminocidos demuestra una
homologa mayor que 90 %.

Tanto la Shiga-toxina como la VT estn formadas por dos subunidades, la

A y la B, y su informacin marcha a la par; en el caso de la Shiga-toxina
est en relacin con un gen del cromosoma bacteriano, mientras que la
informacin de la VT1 est dada por un fago temperado.

La VT2 es antignicamente distinta a la Shiga-toxina y a la VT1, pero

biolgicamente idntica. Posee, igual a la anterior, dos subunidades, las
cuales tambin estn en relacin con un fago temperado.

La produccin de citotoxinas est en correspondencia con fagos que

segn una clasificacin llevada a cabo en Canad se relacionan del 1 al
14, perteneciendo la mayora de las cepas al fago 1 o los relacionados
con el 4; 8 y 14.

Tanto la VT1 como la VT2 interfieren con la sntesis de protenas,

insertando una unin N-glicsido en la posicin residual 4324 del 60
ribosoma del ARN de las clulas de los mamferos. As, la VT1 inhibe la
absorcin de agua y sales por los enterocitos, a lo que se debe la diarrea
acuosa primaria.

La presencia de fimbrias es otro factor a considerar (F-A, factor de

adherencia) en la virulencia de ECEH. Este factor est relacionado con
un plsmido de 55 a 75 MDa (CVD419). La presencia de este plsmido
da lugar a las fimbrias, lo cual permite que, al ocurrir la adhesin, sea
ms eficaz la liberacin de citotoxinas al interior de la clula del epitelio
intestinal.

El efecto A/E (adhesin y borramiento) en el borde en cepillo se

caracteriza por la destruccin localizada de las microvellosidades y una
intensa unin de la bacteria a la membrana apical del enterocito. Densas
concentraciones de filamentos de actina estn pre- sentes en el
citoplasma apical por debajo de las bacterias adheridas.

En ECEH cuando se usa la microscopia electrnica y la falotoxina

marcada con fluorescena, se han demostrado intensas manchas
fluorescentes que corresponden a los filamentos de actina (FAS).

Estas dos ltimas caractersticas, la A/E y FAS, son los mejores

indicadores de la patogenicidad de ECEH y no se relacionan ni con el
plsmido fimbrial ni con el fago de las citotoxinas.

E. coli enteroinvasiva (ECEI)

La primera descripcin de este agente se realiz a partir de aislamientos

realizados en Italia en 1945, los cuales fueron diagnosticados como
Paracolonbactrum; posteriormente se identific con E. coli O 124:H30.

Desde el punto de vista fisiolgico, esta clase de E. coli semeja a

Shigella, su imagen en el medio de agar hierro Kligler es idntica. No
fermentan la lactosa o la fermentan tardamente; son inmviles y no
decarboxilan la lisina.

Esta clase de E. coli es una de las ms difciles de diagnosticar, pues su

identificacin se basa, fundamentalmente, en sus mecanismos
patognicos.

Patogenia y patologa

La ECEI produce enfermedad por los mismos mecanismos que Shigella

comprende la penetracin en el epitelio celular, lisis de la vacuola
endoctica, multiplicacin intracelular, movimiento direccional a travs
del citoplasma y extensin dentro de las clulas del epitelio adyacentes.
Cuando la infeccin es severa, estos eventos dan lugar a una gran
reaccin inflamatoria, y se producen las ulceraciones. La lesin ocurre en
la mucosa colnica. Los genes necesarios estn en un plsmido de 140
MDa. El plsmido relacionado con la invasividad ha sido designado como
pInv. El aparato secretor tipo III codificado por los genes mxi y spa es el
responsable de la secrecin de mltiples protenas que son necesarias
para completar el poder patgeno de este microorganismo. La protena
IpaC se ha demostrado que es la responsable de la entrada del
microorganismo en la clula eucaritica, mientras que la IpaB se
relaciona con la lisis de la vacuola fagoctica y la induccin de la
apoptosis en los macrfagos. El movimiento dentro del citoplasma
parece estar mediado por la enucleacin de la actina celular en forma de
cola, la cual se extiende de uno de los polos de la bacteria y origina la
propulsin de esta a travs del citoplasma.

El gen designado como sen, portado por un plsmido, codifica una

protena de 63 kDa, que parece estar relacionada con una enterotoxina
portada por las cepas que lo poseen.
 E. coli enterotoxignica (ECET)

Este microorganismo fue reconocido por vez primera como agente

causal de diarreas en estudios realizados en la India y Bangladesh en
1968.

Las ECET, especialmente aquellas que poseen los factores CFA/I y CFA/II,
estn entre los patgenos que ms frecuentemente producen diarreas
en los nios de los pases en vas de desarrollo y son causa importante
de la diarrea del viajero.

Patogenia

La patogenia de la diarrea producida por ECET se relaciona con la

colonizacin del intestino delgado y la elaboracin de la enterotoxina
secretora.

Por definicin, las ECET son aquellas cepas de E. coli que producen
enterotoxinas termolbil (TL), termoestable (TS), o ambas.

Las que poseen ambas toxinas son claramente patgenas, as como las
que tienen la toxina termoestable (TS), la importancia de la TL+ no est
bien definida.

Las adhesinas o factores de colonizacin de ECET (CFAs) han sido

identificados y caracterizados. Dos plsmidos son los que codifican los
factores de colonizacin: el CFA/I y CFA/II; otros factores de adhesin han
sido reportados, como son el CFA/III y el CFA/IV.

Algunos serotipos poseen adhesina fimbrial llamada E 8775.

El genoma que codifica para CFA/I se encuentra en el mismo plsmido

que porta para la produccin de TS. Tpicamente, la ECET CFA/I porta,
adems, un segundo plsmido que codifica para TL. El genoma que
codifica para CFA/II se halla en un plsmido que usualmente lleva los
genes para TS y TL.

Este sistema de plsmidos ocurre en los diferentes serotipos de ECET, de

manera tal que algunos producen CFA/I y otros CFA/II, pero nunca
ambos. Otros elaboran la adhesina E8775ypuedenserTS+oTS+yTL+.

E. coli enteroagregativa (ECEA)

En el presente se engloba dentro de esta clase de E. coli a aquellas
cepas que desde el punto de vista fisiolgico muestran las mismas
caractersticas del gnero Escherichia, que no producen toxinas ni TL ni
TS y que se adhieren a las clulas HEp-2 con un patrn autoagregativo.

Patogenia

Los mecanismos patognicos de esta clase de E. coli no estn bien

definidos, no obstante, la lesin histopatolgica que ellos producen y sus
factores de virulencia son muy conocidos.

Estas cepas producen un aumento del moco, el cual atrapa a la bacteria

en un biofilm moco-bacteria. El papel del moco no ha sido bien definido,
sin embargo, la formacin de este espeso biofilm puede estar
relacionado con el poder de esta bacteria para ocasionar diarrea y con
su habilidad para producir colonizaciones persistentes y diarrea.

Adems, se han sealado efectos citotxicos en la mucosa intestinal, y

se ha demostra- do acortamiento en las microvellosidades, necrosis
hemorrgica y una respuesta inflamatoria moderada con edema e
infiltracin de la submucosa con mononucleares. Por microscopia
electrnica se ha demostrado que no existe alteracin de la arquitectura
de las microvellosidades sin invasin del enterocito; tampoco se detecta
el efecto de adhesin y borramiento (A/E).

Se ha observado en algunas cepas un efecto citotxico relacionado con

genes codifica- dos por un plsmido de 65 MDa.

La adherencia en esta clase de E. coli se relaciona con una estructura

fimbrial denomina- da fimbria I de adherencia agregativa (AAF/I) y otra
estructura fimbrial llamada fimbria II (AAF/II), aunque se plantea que
existen otros factores relacionados con esta caracterstica como es una
protena de la membrana externa. La responsabilidad de la actividad
citotxica en esta bacteria est relacionada con una protena que es
miembro de la familia de las protenas autotransportadas.

Los mecanismos patognicos pasan, entonces, por tres etapas:

1. Adherencia fimbrial.2. Aumento de la produccin de moco. 3.

Actividad citotxica.

El lugar de colonizacin del intestino an no ha sido claramente

demostrado, aunque en estudios experimentales se ha observado tanto
en el intestino delgado como en el grueso.

FISIOPATOLOGIA DE E. coli enteropatgena (ECEP)

Esta fue la primera clase de E. coli descrita como causa de diarreas, pero
debido a que se puede presentar en la flora intestinal de individuos
sanos, su papel como patgeno entrico ha sido relegado en muchas
ocasiones.

Adherencia inicial. Est en relacin con la caracterstica de ECEP de

formar densas microcolonias en la superficie de la clula, dando lugar al
patrn denominado adherencia localizada. Esta caracterstica est
asociada a un plsmido de gran tamao que es comn a estas cepas y
que est unido a la produccin de fimbrias tipo IV conocido como BFP
(pilis en forma de haz o mechn); recientemente se han reportado los 14
genes que caracterizan el cluster bfp del plsmido de ECEP, los cuales
determinan la biognesis del BFP.

Otro elemento que se requiere para la adherencia localizada es una

enzima periplas- mtica que es indispensable para la unin disulfuro de
protenas, la cual est codificada por el gen dsba.

En una segunda etapa, cuando se adhiere ECEP a las clulas epiteliales,

se producen los cambios conocidos como A/E. El borramiento se refiere a
la prdida de las microvellosidades del enterocito.

Los genes necesarios para que ocurra A/E estn localizados en la regin
35480 bp del cromosoma llamado locus para el borramiento del
enterocito (LEE), y todas las bacterias que producen borramiento poseen
este locus.

En el borramiento, la membrana epitelial que se encuentra por debajo

de la E. coli adherida se eleva localmente para formar pedestales, que
en ocasiones crean estructuras que semejan pseudpodos. Estos
pedestales se deben al reordenamiento de las clulas del citoesqueleto
de las clulas del hospedero, ya que algunos componentes como son: la
actina, la alfa-actina y las cadenas cortas de miosina, se acumulan en
las clulas epiteliales por debajo de donde se halla adherida E. coli
enteropatgena. Adems de estos elementos, se encuentran otros dos:
el talin y el ezrin, los cuales son las molculas que unen la actina a la
membrana de las clulas. En el tope de los pedestales est presente la
tirosina fosforilada. La depolimerizacin localizada de filamentos de
actina dentro de las microvellosidades, da como resultado la retraccin
de estas y el borramiento posterior a la depolimerizacin del pool de
monmeros de actina puede localizarse por debajo de los
microorganismos adheri- dos y repolimerizarse, para as formar los
pedestales.

Transduccin de seales. La ECEP posee un sistema excretor tipo III;

este sistema, llamado sep, est localizado en el gen eae en LEE. Las
protenas Esp A y Esp B secretadas por este sistema son las
responsables de activar las vas de transduccin de la seal, incluyendo
la fosforilizacin del inositol, la fosforilizacin de la tirosina, la
depolimerizacin celular, el reacondicionamiento de la actina y la unin
a la intimina.

ntima unin: Intimina. La intimina es una protena de la membrana

externa del microor- ganismo que se requiere para la ntima unin. El
receptor para la intimina tambin lo codifica LEE. Esta protena
codificada por LEE anteriormente se llam Hp 90, pero en la actualidad
se denomina TIR (receptor translocado de intimina), el cual es segregado
por ECEP y enviado a la clula del hospedero por el sistema secretor III.
Al llegar a la clula del hospedero se produce la fosforilizacin de TIR y
es en ese lugar donde ocurre la ntima unin de ECEP a la clula. Esta
unin induce a la transmigracin de neutrfilos, sugiriendo que los
mecanismos inflamatorios tambin pueden inducir a la diarrea.

Como consecuencia de la accin patgena de ECEP se produce: la

presencia de polimorfonucleares que pueden activar el receptor apical
de adenosina y activar la secrecin de Cl; aumento de la permeabilidad
por activacin de las cadenas ligeras de miosina que abre las ntimas
uniones y disminucin de la superficie de absorcin por borramiento de
las microvellosidades, lo que da lugar a que la diarrea producida por
ECEP pueda evolucionar hacia una diarrea persistente y, por
consecuencia, a todas las alteraciones que esto puede ocasionar en el
paciente, principalmente en nios en cuanto a su nutricin y desarrollo.

Bibliografa:

Alina Llop Hernndez , Ma. Margarita Valds-Dapena Vivanco,

Jorge Luis Zuazo Silva. Microbiologa y Parasitologa Mdicas, Tomo
l. Editorial Ciencias Medicas. 2001. La Habana.