U. N. A.

Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza

Titulacin y Cromatografa de aminocidos.

EQUIPO 9
Bravo Ruiz Sharon
Vernica 1452
Galicia Galindo Miriam
Gonzlez Hernndez
Adriana
Santiago Martnez Luis

Fernando

Lab. De Bioqumica Celular y de Tejidos

Semestre 2017-1
11 de Octubre de 2016
 Objetivos.-

Determinar el PKa del a problema por medio de una curva de titulacin.

Analizar y determinar a en la muestra problema por medio de una
cromatografa en capa fina.

Resultados.-

Titulacin de Aminocido Neutro: Glicina.

NaOH
Volume 1
PH (0.097N) pH
n Derivada
(mL)
6.98 0
1.78 2 0 0 0
2 4 2 0.22 0.11
Punto de
semi-
2.24 6 2 0.24 0.12 equivalencia.
2.54 8 2 0.3 0.15
3.02 10 2 0.48 0.24
8.15 12 2 5.13 2.565
9.21 14 2 1.06 0.53
Punto de
Valor interpolado en la grfica 1. semi-
9.23 14.5 equivalencia.
9.6 16 2 0.39 0.195
10.06 17 1 0.46 0.46
10.25 18 1 0.19 0.19
10.45 19 1 0.2 0.2
10.61 20 1 0.16 0.16
10.86 21 1 0.25 0.25
11.13 22 1 0.27 0.27
11.51 23 1 0.38 0.38
11.95 24 1 0.44 0.44
12.24 25 1 0.29 0.29
12.4 26 1 0.16 0.16
Tabla 1.- PH registrado durante la valoracin de Glicina con NaOH (0.0947N). Calculo de la
primera derivada y puntos de semi-equivalencia.
Cuva de Ph para un aminocido Neutro: Glicina.
14
13
12
11
10 10.06
9 8.15
8
7
PH
6
5
4
3 2.24
2
1
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28

Volumen aadido de NAOH 0.097N (mL)

Grafico 1.- Curva de pH para la valoracin de Glicina. Puntos de equivalencia y

semi-equivalencia marcados.
 grafico 1 derivada para UN Aminocido Neutro: Glicina.
12
10
8

pH/Volumen 6
4
2
0
0 5 10 15 20 25 30

Volumen aadido de NAOH 0.097N (mL)

Grafico 2.- Grafico de 1 derivada v.s volumen para la valoracin de la glicina para la
determinacin de puntos de equivalencia.

Aminocid Distancia
o recorrida por el Distancia recorrida RF Cromatogr
(estandar) eluyente (cm) por la muestra (cm) afa en
0.123966 capa fina.
Histidina 1.5 94
0.330578
Serina 4 51
0.371900
Treonina 4.5 83
0.371900
Glicina 4.5 83
0.661157
Fenilalanina 8 02
12.1
0.537190
Metionina 6.5 08
0.123966
Lisina 1.5 94
0.454545
Valina 5.5 45
0.247933
Asparagina 3 88
0.537190
Isoleucina 6.5 08
 Tabla 2.- Calculo de Rf para los aminocidos estndar.

Distancia
Titulacin recorrida por el Distancia recorrida RF
eluyente (cm) por la muestra (cm)
0.123966
1 1.5 94
0.305785
1
2 3.7 12
0.553719
3 6.7 01
12.1
0.082644
1 1 63
3.471074
2
2 42 38
0.520661
3 6.3 16
Tabla 3.- Calculo de Rf para los muestras problemas.

Anlisis de resultados.-
Titulacin de aminocidos.

La solucin de Glicina se llev inicialmente a un pH cido para de esa forma se encuentren

protonados tanto el cido Carboxlico como la amina, es decir, a pH cido, el 100% de las
molculas de aminocido se encuentran en forma de catin. La titulacin con NaOH comprende
dos reacciones de equilibrio:
1) Al ir aadiendo equivalentes de base, el grupo carboxilo (-COOH) se disocia, cediendo
protones al medio y transformndose en un grupo carboxilato (COO -); en este equilibrio el
pH = pK1.
2) Al seguir agregando equivalentes de base se disociar el grupo amino (NH 3) cediendo,
tambin, protones al medio obtenindose la forma totalmente desprotonada de la glicina
(-NH2); En este equilibrio el pH=pK2

Se realiz la grfica de la primera derivada para determinar los volmenes

correspondientes a los 2 puntos de equivalencia. Obtenidos estos volmenes se calcul el
punto de semi-equivalencia; en este punto el PH= pk
Se obtuvo as un pk1= 2.24 para el grupo carboxilo
en la glicina y el pK2=9.23 para el grupo amino.
Tericamente el pK del carboxilo se encuentra entre 2
y 3 mientras que el pka del amino se encuentra
alrededor de 9 encontrndose los valores obtenidos
dentro del rango.

Conclusiones.-
Titulacin de aminocidos: Al valorar una
muestra de glicina se pudo determinar sus pks
experimentales obteniendo un pka=2.24 para
el grupo carboxilo y un pka=9.23 para el grupo
amino encontrndose estos muy cerca de los
tericos lo que nos permite comprobar la desprotonacin de un aminocido neutro
como lo es la glicina en un medio bsico. Las variaciones que pudieron existir en los
resultados pueden deberse a diversos factores tales como las condiciones en que se
encuentra el potencimetro as como la preparacin del reactivo titulante. De esta
manera se cumpli el objetivo para esta parte de la prctica.