Materiales y Mtodos

MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos de laboratorio
- Centrifuga
- Microscopio ptico compuesto
- Balanza de precisin
Materiales de campo
- Cilindro de volumen conocido
- Badelejo
- Pala pequea
- Balanza
- Cinta adhesiva
- Plumn indeleble
- Cuaderno de apuntes
- Cinta mtrica
- Guantes descartables
- Bolsas de polietileno 10 x 12 cm.
Materiales de laboratorio
- Calculadora
- Bajalenguas
- Cronometro
- Gasa
- Tamiz
- Guantes descartables
- Mortero
- Pistilo
Materiales de vidrio
- Tubos de ensayo
- Laminas cubreobjetos
- Vasos de precipitado
- Frascos cnicos
- Embudos
- Frasquitos de penicilina
Reactivos
- Leja diluida
- Solucin de lugol
- Gasolina
- Solucin saturada de azcar
- Solucin de formol salino
Metodologa
Las evaluaciones se realizaron en dos periodos del ao (seco y lluvioso) para el cual
fuenecesario tomar las muestras en las correspondientes zonas de estudio, durante 4 meses,
divididas en 2 periodos. Priorizando los meses de Agosto y septiembre para la poca seca y los
meses de octubre y noviembre para la poca lluviosa.
METODOS DE CAMPO :
1. Tecnicas del cilindro muestreador: el muestreo se realiza en sentido horizontal ,utilizando
cilindros de volumen conocido( dimetro de 8,5. Cm, una altura de 4,5 y un contenido
promedio de 250 g de sustrato).
2. toma de muestra : con ayuda de un badilejo se procedio a tomar muestras de suelo
superficial de (0- 4 cm de profundidad) y muestras a una profundidad de 25 30 cm estas fueron
ciolocados en bolsas de poletileno debidamente rotuladas( numeracin, zona, profundidad, hora,
fecha, condicin climtica, etc. ), paea su posterior traslado al laboratorio.
3. marcado y sealizacin del rea de estudio : el rea de estudio (50) fue delimitada
mediante estacas. Las reas de recoleccin fueron sealizadas para evitar duplicacin.
DUPLICACION DE ESPECIES PARASITAS EN MUESTRAS DE SUELO
Para la identificacin de las especies contenidas en las muestras de suelos, en dos periodos de
estudio (seco y lluvioso , se emplearon los mtodos de Willis y concentraciuon de Telleman.
Para la aplicacin del mtodo de Willis fue necesario desarrollar los procedimientos siguientes :
1 colocar una pequea porcin de suelos (equivalente a 1 g), en un mortero.
2 agregar 10 cc de solucin saturada de azcar y con el pistilo hacer una buena emulsion de la
muestra.
3 tamizar la muestra. El filtrado se traslada a un frasquito de penicilina limpio, hasta formar un
menisco en la boca del mismo.
4 colocar una lmina cubreobjetos en la boca del frasquito de penicilina, evitando la formacin
de burbujas, dejar por 20 minutos, para que los huevos y qistes se adhieren al cubreobjetos.
5 en la lamina portaobjetos colocar una gota de solucin de lugol y sobre ella adosar la lamina
cubreobjetos tomada del frasquito de penecilina.
6 observar al microscopio para su correspondiente reconocimiento e identificacin .
para la aplicacin del mtodo de concentracin de Telleman fue necesario desarrollar los
procedimientos siguientes:
1 tomar de 5 o 6 puntos de la muestra de suelo , unaporcion que corresponda a 1g de sustrato, e
introducirlo en tubos de ensayo.
2 agregar unos 5 ml de formol salino, homogenizar con una varilla y filtrar.
3 agregar al filtrado 1 ml de ter , agitar bien.
4 dejar en reposo por espacio de 5 minutos y luego centrifugar a 2500 rpm durante 10 minutos.
5 descartarlas 3 capas del liquido sobrenadante.
6 con una pipetas pasteur, retirar una pequea porcin del sedimento, extenderla sobre un
portaobjetos, agregar una gota de lugol y colocar el cubreobjetos.
7 observar al microscopios para su correspondientes reconocimiento e identificacin.
CUANTIFICACION DE PARASITOS EN MUESTRAS DE SUELO . P ara cuantificar los
parasitos en las muestras de suelo en dos periodos de estudio (seco y lluvioso), se empleo el
mtodo de sedimentacin rpida , para la aplicacin fue necesario desarrollar los siguientes
pasos:
1 tamizar la muestra sin fijador, a travs de una rejilla metalica y fina, usando agua potable y
en un vaso cnico de aproximadamente 250 cc de capacidad.
2 completrar la capacidad devaso conico con agua y esperar por cinco minutos.
3Descartar las dos terceras partes del contenido del vaso cnico y reemplazarlos con otro
volumen igual de agua y esperar por cinco minutos.
4 repetir el paso anterior dos veces ms.
5 retirar el sedimento y examinar al microscopio por agotamiento, utilizando laminas
portaobjetos, cubreobjetos y lugol.
DISEO EXPERIMENTAL
Con los datos del conteo delnumero de parasitos hallados por g de suelo, se realizo un ANVA.
Diseo completo al azar con un arreglo factorial de los tratamientos 2x2x4. Previamente los
datos fueron transformados a 0,5+ x , con la finalidad de normalizar su distribucin.

El factorial concistio en 2 epocas, 2 profundidades de muestras y 4 lugaresde la ribera de la

bhaia interior de Puno.
El modelo matemtico es:
Xi j k l = u + A1 + Bj + Ck + ABik + BCjk + ABCijk + Ei j k l
Donde:
Xi j k l = variable de respuestas (nmero de parsitos por g de suelo
U = promedio general
Ai = efecto de pocas
Bj = efecto de profundidad
Ck = efecto de zonas
ABik = interaccion entre factores ( pocas y profundidad),
Ei j k l = error experimental
Ademas se realizaron pruebas de Duncan para establecer las diferencias entre tratamientos y
factores.
En el trabajo de investigacin se establecieron las siguientes hiptesis:
Ho = En los suelos de la Baha interior de Puno se descarta la presencia de parasitos humanos (
huevos y quistes), debido a la influencia de los factores climticos y edficos.
Ha = en los suelos de la Baha interior de Puno existen parsitos ( huevos y quistes ), debido a
que es favorecida por factores climticos, edficos y ambientales.