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Drosophila melanogaster
Jana Peremart
Departamento de Gentica y de Microbiologa
Curso 2012-13
Objetivos
Genotoxicidad
Capacidad de un agente fsico o qumico para daar el DNA.
Dao en el DNA
Lesiones en la molcula de DNA como roturas o modificaciones qumicas.
Ejemplos:
- Roturas de cadena simple o de doble cadena.
- Modificaciones qumicas en las bases nitrogenadas por mecanismos como
oxidacin, alquilacin, etc.
Existen muchos agentes genotxicos, unos ms potentes que otros, por ejemplo, la
luz ultravioleta puede causar hasta 1x10 lesiones por da (Hoeijmakers, 2009).
Tambin, se ha estimado que el humo del cigarrillo causa 1000 lesiones en el DNA
por clula (Phillips et al., 1988)
Ejemplo 1:
Sin embargo, despus de la divisin celular las clulas hijas presentan una
modificacin en dicha secuencia: ATGGCTGAA...
Ejemplo 2:
Se han descrito dos sistemas de ensayo diferentes, uno que emplea marcadores de las
alas (Graf et al.,1984) y el otro que emplea marcadores que afectan a la pigmentacin de
los ojos (Vogel y Zijlstra, 1987).
Estas pruebas se basan en la prdida de heterocigosidad de los genes normales en las
clulas de los discos imaginales de las larvas, lo que causa la formacin de clones o
sectores de clulas mutantes, expresndose fenotpicamente en clones mutantes en las
alas o en los ojos de las moscas adultas.
Este ensayo fue desarrollado por Graf et al, (1984) y constituye el nico ensayo descrito
que utiliza marcadores de alas para el estudio de mutacin y recombinacin somtica.
Este ensayo se lleva a cabo sometiendo a larvas de Drosophila melanogaster a una
exposicin con el agente a evaluar (por ejemplo, diferentes concentraciones de un
compuesto qumico).
En el interior de la larva existen poblaciones celulares llamadas discos imaginales
que durante la metamorfosis darn lugar a las diferentes estructuras de la mosca
adulta, como ojos, antenas, patas, etc. (Figura 3).
Figura 3. Los discos imaginales se encuentran dispuestos en el interior de
la larva. Se indican las estructuras que darn lugar en el individuo adulto
(Morgan, D. (2007). The Cell cycle: principles of control)
Teniendo en cuenta la lnea vertical en la figura, la parte del ala que se encuentra
a la izquierda, presenta pelos pequeos que no permiten observar la presencia
de los fenotipos flr o mwh.
Bibliografa
Graf U., Wurgler F.E., Katz A.J., Frei H., Juon H., Hall C.B., Kale P.G. (1984)
Somatic mutation and recombination test in Drosophila melanogaster. Environ.
Mutagen., 6: 153-188.
Hoeijmakers JH. DNA damage, aging, and cancer. N Engl J Med. 2009 Oct
8;361(15):1475-85.
Phillips DH, Hewer A, Martin CN, Garner RC, King MM. Correlation of DNA adduct
levels in human lung with cigarette smoking. Nature. 1988 Dec 22-
29;336(6201):790-2.
Lord CJ, Ashworth A. The DNA damage response and cancer therapy. Nature. 2012
Jan 18;481(7381):287-94.
Observacin de cromosomas humanos
Objetivos
INTRODUCCIN
Los cromosomas (del griego, chroma, color y soma, cuerpo) son las estructuras en
que se organiza la cromatina nuclear y que tienen una expresin dinmica en
las distintas fases del ciclo celular.
En la mitosis estas estructuras comienzan un proceso de compactacin que
alcanza su mximo nivel en la metafase. Los cromosomas se tien fcilmente
cuando estn condensados y pueden ser individualizados con el microscopio
ptico.
Cada cromosoma contiene una molcula de ADN lineal asociado a distintas
protenas y el contenido de genes es variable aunque est en relacin con su
tamao. Por eso, cualquier alteracin en el nmero o la estructura de los
cromosomas puede ser causa de enfermedades. Para la deteccin de estas
alteraciones se desarrollaron numerosas tcnicas y todas ellas requieren de un
observador entrenado que las interprete.
La citogentica es la rama de la biologa que se encarga del estudio de la
estructura, organizacin y funcin de los cromosomas, as como de sus
anomalas.
Los avances en las tcnicas de biologa molecular han permitido establecer el
desarrollo de la citogentica molecular, sin embargo la citogentica convencional
acompaa siempre de forma paralela los nuevos estudios.
Cariotipo
Los humanos tenemos un nmero total de 46 cromosomas y este nmero vara
segn las especies. Los 46 cromosomas estn constituidos por 23 pares de
homlogos y cada miembro del par proviene de un progenitor. El cariotipo es
el conjunto cromosmico de un individuo que se puede conocer por medio de la
frmula cromosmica o de una imagen que muestra los cromosomas, conocida
como cariograma.
Los cariotipos se pueden informar presentando todos los pares cromosmicos
ordenados de acuerdo a su tamao, que en un principio eran recortados de la
fotografa de una metafase, y ahora se pueden hacer con analizadores
automticos. De los 23 pares, el par de cromosomas sexuales se seala por
separado para indicar el sexo del individuo. Para citar el cariotipo de un
individuo se indica primero el nmero total de cromosomas y seguidamente los
componentes del par sexual precedido de una coma. As, el cariotipo normal de
un varn se escribe 46,XY y el de una mujer 46,XX. Las anomalas
cromosmicas son una causa ms importante de abortos espontneos, retardo
mental y malformaciones.
Ejemplos:
1. El cariotipo de un varn con un cromosoma 21 adicional se describe con la
siguiente frmula: 47,XY,+21 (Trisoma 21)
2. Una clula que presenta 45 cromosomas, siendo un cromosoma 4 el que
ha perdido, se describe: 45,XY, -4 (Monosoma del cromosoma 4).
El bandeo cromosmico
Mueva el revlver del microscopio para el uso del objetivo de 40X. Observe a travs
de los oculares y desplace la platina cuidadosamente como se indica a
continuacin con la finalidad de encontrar placas metafsicas.
Una vez encontrada una placa metafsica, desplace el revlver del microscopio de
tal manera que lo que desea observar en la lmina portaobjetos se encuentre
entre los objetivos de 40X y 100X. Coloque una gota mnima de aceite de inmersin
en la zona que se desee visualizar. Mueva el objetivo de 100X hacia la gota y
enfoque moviendo suavemente el tornillo micromtrico.
p
s
- Lewis (2003) Human Genetic: Concepts and Applications, 5th Edition. The
McGrawHill.
- Guerra, MS. Reviewing the chromosome nomenclature of Levan et al. Rev. Bras.
Genet. 1986, 9: 741-743.
- ISCN 2009: International System for Human Cytogenetic Nomenclature:
Recommendations of the International Standing Committee on Human Cytogenetics
Nomenclature. Lisa G. Shaffer (Author, Editor), Marilyn L. Slovak (Editor), Lynda J.
Campbell (Editor)
- Harper, Peter S. First years of human chromosomes: the beginnings of human
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