Resumo 1 actividade prtica Microbiologia Mdica

Objectivos

1- Introduo a um laboratrio de Microbiologia

2- Segurana num laboratrio
3- Desinfeco e Esterilizao
4- Meios de Cultura
5- Microbiota humana

Um laboratrio no um local perigoso desde que as regras de segurana

sejam cumpridas. necessrio ter noo dos agentes contaminantes
qumicos e biolgicos que podem resultar do nosso trabalho e tomar as
devidas precaues.

Usar sempre bata, cabelo atado, no beber nem comer, manter o nosso
espao de trabalho limpo e arrumado, usar condies de assepsia sempre
que necessrio, identificar as placas e solues com a informao mais
importante de modo a que qualquer pessoa fique a saber o essencial.

A
Meios de cultura: um compsito de substncias usadas para permitir a
proliferao de determinados microrganismos no laboratrio. Deve-se ter
em ateno o tipo de meio a selecionar conforme o tipo de microrganismos
prentendidos.

Classificao quanto :

1. Consistncia Lquido (sem agr)

Semi-slido (at 0,5% de agr)
Slido (com 1,5% de agr)

2. Composio Sinttico ou quimicamente definido ( um meio

em que se conhece especificamente cada componente, uma vez que
uma mistura de substncias puras).
Complexo ou indefinido ( um meio em que se
desconhece a composio exacta).
Selectivo ( um meio enriquecido com uma(s)
substncia(s) que permitem a proliferao de um grupo particular de
microrganismos em detrimento de outros). Exemplo: Meio MacConkey
em que a presena de violeta de cristal e de sais biliares impede o
desenvolvimento de Gram +
Diferencial ( um meio que foi suplementado com
substncias que permitem evidenciar certos microrganismos de entre
todos os que esto presentes, com base numa propriedade em
particular, mas que em nada influenciam a proliferao dos restantes
microrganismos que colonizam a placa). Exemplo: Meio MacConkey
em que a presena de lactose permite detectar/ distinguir, atravs de
um indicador de pH, os microrganismos que so capazes de
fermentar este dissacrido dos que no so capazes de o fermentar.

Inoculao: Corresponde ao processo de introduo de

microrganismos ou uma suspenso de microrganismos num meio de
cultura ( necessrio ter em conta temperatura, atmosfera, pH,
presso, etc).

Streak-plate: mtodo qualitativo de isolamento para obteno de

colnias discretas de uma populao mista.

Spread-plate: mtodo
para obteno de colnias
individuais para contagem
(quantificao) ou para
obteno de crescimento
confluente (exemplo dos
testes susceptibilidade a
agentes antimicrobianos).

Pour-plate: Mtodo em
que h a incorporao das
bactrias em meio slido
(para estudar metabolismo
microaeroflico).
C

Desinfeo: Processo que conduz destruio, inibio ou remoo

dos microrganismos capazes de causar infeo. As clulas em
proliferao ou fase estacionria so eliminadas, mas os esporos
resistem. Por outras palavras, corresponde reduo do nmero de
microrganismos at a um valor que no cause infeo, ou seja,
microrganismos vo estar sempre presentes mas em concentrao
segura.
Exemplos: agentes qumicos (etanol a 70%; H2O2; iodo;)

Esterilizao: Mtodo que leva destruio total de todos os

microrganismos presentes numa determinada amostra, incluindo os
esporos, vrus, micobactrias e fungos. No laboratrio qualquer
material que vai contactar directamente com microrganismos deve
ser esterlizada.
Exemplos: agentes fsicos (calor seco; calor hmido; filtrao;
radiao)
Agentes qumicos (cido peractico; vapores gasosos;
formaldedo; H2O2 ).

Importncia da esterilizao / Desinfeo

Permite reduzir a proliferao de microrganismos e da transmisso de
doenas de um indivduo para o outro, consequentemente, h uma
diminuio drstica do nmero de microrganismos presentes
(reduo de possveis contaminaes).

Microbiota Humana: o conjunto de todos os microrganismos que

colonizam o Homem, incluindo os seus tecidos, cavidades e
biofludos, modulando o metabolismo e a homeostasia. Por outras
palavras, esta microbiota naturalmente presente na pele e mucosas
contribui para a manuteno das condies fisiolgicas o corpo
humano.
Fatores como idade, sexo, hbitos alimentares, stress, hbitos de
higiene determinam a composio da microbiota bacteriana em cada
indivduo. H certas alteraes nesta composio que causam
doenas. Por exemplo, excesso de consumo de antibiticos pode levar
perda dos microrganismos comensais e fazer prosperar os
patogenes; quebras nas barreiras fsicas tambm podem promover o
acesso de bactrias a locais normalmente estreis.

Patogenes estritos: organismos causadores de doena em

indivduos saudveis e no saudveis.
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Patogenes oportunsticos: Organismos que apenas causam
doena em indivduos com o sistema imunitrio comprometido.

Colorao de Gram: um mtodo de colorao diferencial que

permite separar as bactrias em duas classes (Gram + e Gram -) com
base nas suas diferenas estruturais ao nvel da parede celular. Aps
a aplicao sucessiva de diferentes solues, Gram + coram de roxo
e Gram coram de rosa.