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Bacteriologa
Unidad Temtica I
PLAN 2010
Segundo ao
2015-2016
1
FACULTAD DE MEDICINA
2
ACTUALIZACIN Y REVISIN DE LOS GUIONES
Visin
3
DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA
Ubicacin 2 ao
Duracin Anual
Carcter Obligatorio
Clave 1231
4
I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
VACACIONES
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD
TEMTICA (Bacteriologa)
8
I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
PRESENTACIN
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
NDICE
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
2. INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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3.6.3 Epidemiologa
3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infeccin emergente (husped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisin
3.6.4 Patognesis
3.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
3.6.4.2 Formas clnicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infeccin
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
3.6.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la infeccin
3.6.6 Diagnstico diferencial
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M. avium. Destacar la
importancia de estas
micobacterias no tuberculosas
en pacientes
inmunodeprimidos por SIDA o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cncer pulmonar
3.6.7 Diagnstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopa
3.6.7.2 Cultivo
3.6.7.3 Mtodos moleculares
3.6.7.4 Valoracin del PPD
3.6.7.5 Radiografa de trax
3.6.7.6 Otras tcnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema de tratamiento
antifmico (Norma Oficial
Mexicana)
3.6.9 Control y prevencin
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevencin
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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6.2 Brucella
6.2.1 Caractersticas generales 6.3.4 Patognesis
6.2.1.1 Morfologa 6.3.4.1 Iniciacin del proceso
6.2.1.2 Antgenos A y M. infeccioso y desarrollo de
6.2.1.3 Diferentes especies de signos y sntomas
Brucella y especificidad de 6.3.4.2 Ciclo de vida
husped. 6.3.4.3 Tifo epidmico y Enfermedad
6.2.2 Factores de virulencia. de Brill-Zinsser
6.2.3 Epidemiologa de la brucelosis 6.3.4.4 Complicaciones
6.2.3.1 Mecanismos de transmisin. 6.3.5 Participacin de la respuesta inmune
6.2.3.2 Reservorios animales en el control de la enfermedad.
6.2.3.3 Distribucin mundial y estado 6.3.6 Diagnstico diferencial
actual en Mxico. 6.3.6.1 Brucelosis
6.2.4 Patognesis 6.3.6.2 Fiebre tifoidea
6.2.4.1 Iniciacin del proceso 6.3.7 Diagnstico de laboratorio
infeccioso y desarrollo de 6.3.7.1 Cultivo
signos y sntomas. 6.3.7.2 Pruebas serolgicas
6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones 6.3.7.3 Pruebas moleculares
clnicas agudas, subagudas y 6.3.8 Estrategias de tratamiento
crnicas. 6.3.9 Prevencin y control
6.2.4.3 Complicaciones: artritis,
osteomielitis, meningitis, 6.4 Leptospira interrogans
cistitis, nefritis, 6.4.1 Caractersticas del microorganismo
orquiepididimitis, endocarditis 6.4.1.1 Estructura
e hiperesplenismo. 6.4.1.2 Antgenos
6.2.5 Participacin de la respuesta inmune 6.4.1.3 Serovares de Leptospira
en el control de la infeccin interrogans.
6.2.6 Diagnstico diferencial 6.4.2 Factores de virulencia
6.2.6.1 Fiebre Tifoidea 6.4.3 Epidemiologa
6.2.6.2 Tifo 6.4.4 Participacin de la respuesta inmune
6.2.7 Diagnstico de laboratorio en el control de la enfermedad.
6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula 6.4.5 Patognesis
sea o tejidos infectados. 6.4.5.1 Iniciacin del proceso
6.2.7.2 Serologa: Prueba de infeccioso y desarrollo de
aglutinacin con rosa de signos y sntomas
Bengala, Prueba de 6.4.5.2 Leptospirosis anictrica e
Huddleson, ELISA (deteccin icterica.
de anticuerpos IgM e IgG). 6.4.6 Diagnstico diferencial.
6.2.8 Estrategias de Tratamiento 6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y
6.2.9 Prevencin y control dengue
6.4.7 Diagnstico de laboratorio
6.3 Rickettsia prowasekii 6.4.7.1 Microscopa. Tincin con
6.3.1 Caractersticas del microorganismo Giemsa o Wright
6.3.1.1 Estructura 6.4.7.2 Cultivo
6.3.1.2 Parsito intracelular 6.4.7.3 Serologa.
6.3.2 Factores de virulencia 6.4.7.4 Prueba de ELISA (deteccin
6.3.3 Epidemiologa de antgeno) y Western blot
6.3.3.1 Enfermedad re-emergente. (prueba confirmatoria).
6.3.3.2 Distribucin geogrfica a nivel 6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro
mundial y en Mxico 6.4.8 Estrategias de Tratamiento
6.3.3.3 Estacin del ao 6.4.9 Prevencin y control
6.3.3.4 Condiciones favorables para
su transmisin
6.3.3.5 Reservorio y vector
6.3.3.6 Poblacin susceptible
6.3.3.7 Vas de transmisin
6.3.3.8 Vas de entrada
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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8.6.3 Epidemiologa
8.6.3.1 Prevalencia y distribucin.
8.6.3.2 Poblacin en riesgo
8.6.3.3 Factores predisponentes para
adquirir la infeccin
8.6.4 Patognesis
8.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.6.4.2 Vaginosis bacteriana
8.6.4.3 Infeccin de vas urinarias
8.6.5 Participacin de la respuesta inmune en
el control de las infecciones
8.6.6 Diagnstico de laboratorio
8.6.6.1 Cultivo e identificacin bioqumica
8.6.6.2 Citologa; clulas clave
8.6.6.3 Criterios de Amsel
8.6.7 Diagnstico diferencial
8.6.7.1 Candidiasis
8.6.7.2 Tricomoniasis
8.6.7.3 Vaginitis atrfica
8.6.8 Estrategias de tratamiento
8.6.9 Prevencin y control
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
La respuesta inmune es muy importante para veces, nos protegen de infecciones con el mismo
evitar, controlar y erradicar las infecciones serotipo. La respuesta inmune tambin es usada
bacterianas. Las barreras fsicas, qumicas y para realizar el diagnstico inmunolgico que
biolgicas (microbiota normal); la fagocitosis y el consiste en detectar anticuerpos especficos o bien
complemento forman parte de la inmunidad innata, la presencia de antgenos bacterianos. La utilidad
al igual que las clulas NK o asesinas naturales. de la respuesta inmune en el diagnstico ha sido
Las diferentes funciones de estos componentes, tratada en los temas anteriores.
evitan que se produzcan infecciones aparentes Finalmente, la respuesta inmune puede ser
controlando a los microorganismos desde el responsable de parte de la patologa observada en
momento en que entran en contacto con el algunas infecciones bacterianas como la
organismo. Sin embargo, si los microorganismos tuberculosis, donde los granulomas son resultado
logran colonizar, establecerse y causar de la respuesta celular hacia Mycobacterium
enfermedad, nuestro cuerpo establece la respuesta tuberculosis.
inmune adquirida que puede ser de tipo humoral
(anticuerpos) y celular (linfocitos T) y que ayuda,
junto con el tratamiento antimicrobiano, a resolver 11.1 Respuesta inmune innata contra:
la infeccin. La inmunidad innata est ntimamente 11.1.1 Bacterias intracelulares
relacionada con la inmunidad adquirida, de hecho el 11.1.2 Bacterias extracelulares
establecimiento de la segunda depende de la
primera. As, las clulas presentadoras de antgeno 11.2 Respuesta inmune adquirida contra:
de la inmunidad innata (clulas dendrticas y 11.2.1 Bacterias intracelulares
macrfagos) pueden activar a los linfocitos para 11.2.2 Bacterias extracelulares
que respondan con sus mecanismos efectores y 11.2.3 Toxinas bacterianas
resuelvan la infeccin y formen, adems, clulas de
memoria. 11.3 Evasin de la respuesta inmune por las
Las vacunas tienen como objetivo inducir bacterias
respuestas inmunes y, sobre todo, clulas de
memoria que respondan rpidamente cuando el 11.4 Inmunopatologa: Tuberculosis, fiebre
organismo se expone a la bacteria patgena. En el reumtica y glomerulonefritis.
caso de bacterias, cuyos factores principales de
virulencia son toxinas, se inmuniza con toxoides
para inducir anticuerpos que neutralicen las toxinas
y eviten que se produzca su efecto (toxoide
tetnico). Las infecciones tambin inducen la
formacin de clulas de memoria que, muchas
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GUIONES PRCTICOS
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
PRCTICA No. 1
BIOSEGURIDAD
5. Evite el contacto de la boca con las manos, 6. Inunde con solucin desinfectante cualquier
comer o humedecer las etiquetas con la lengua. rea donde haya ocurrido un derrame de
6. Informe inmediatamente al instructor de sangre o suero. Utilice guantes, toallas de
cualquier accidente tal como cortaduras, papel o gasa para absorber el lquido, y luego
quemaduras o derrame de cultivos. realice un lavado minucioso con agua. Guarde
7. Tome todas las precauciones posibles para en una bolsa todo el material empleado
evitar estos accidentes. contaminado, para eliminarlo como material
infeccioso.
Precauciones sistemticas de seguridad
Manipulacin de desperdicios
Agujas y material de vidrio
1. Reserve algunas de las piletas del laboratorio
1. Desechar todo material de vidrio que est para eliminar muestras de sangre y orina. No
quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes permitir el lavado de manos en estas piletas.
adecuados. 2. Eliminar en recipientes adecuados y rotulados:
2. Recoger los vidrios rotos con escobilln y pala; tubos con sangre, pipetas, puntas y agujas.
no hacerlo con la mano. 3. El material de vidrio o cortante debe ser
3. Los artculos de vidrio no deben ser arrojados a eliminado en recipientes adecuados de
la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de paredes slidas.
desperdicios en el que se arrojan artculos de 4. Llevar estos recipientes al rea de desecho
papel. con la frecuencia necesaria para evitar su
4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse acumulacin.
en recipientes para agujas usadas para ser 5. Sumerja el material de vidrio contaminado en
eliminados de manera adecuada. solucin desinfectante. Enjuague
5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o minuciosamente con agua y esterilcelo antes
intercambiar las agujas de las jeringas. La de usarlo otra vez.
prctica de cambiar las agujas antes de
descartar la sangre extrada de la vena dentro
de la botella de cultivo ha sido abandonada por Desarrollo de la prctica
la mayora de los hospitales. Sesin I
1. El profesor definir el concepto de
Manejo de muestras y derrames bioseguridad.
2. Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn
1. Las muestras se deben de recolectar en las normas a seguir en el laboratorio.
recipientes slidos, con cierres adecuados para 3. El profesor dirigir la discusin sobre:
evitar derrames y prdidas. Todas las a) Manipulacin de agujas y material de
muestras deben ser consideradas vidrio.
potencialmente peligrosas. b) Manejo de muestras y derrames
2. Las cortaduras en las manos debern ser c) Manipulacin de material infecto-
adecuadamente protegidas con tela adhesiva. contagioso.
Si la actividad laboral implica el manejo de
sangre, suero, plasma u otras muestras, se NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
debe de usar guantes desechables. estn dirigidas al manejo adecuado de
3. Si una muestra presenta evidencia de rotura, productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
derrame o suciedad dentro del recipiente, Txico, Inflamables, Biolgicos-infecciosos
ponerse guantes. (CRETIB) y Radioactivos con el fin de
4. Las muestras contaminadas con sangre deben evitar riesgos.
ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes.
Notificar este hecho como peligroso para la
salud.
5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y
jabn varias veces al da, en particular despus
de manipular las muestras y antes de retirarse.
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
Resumen de la prctica
El profesor, junto con los alumnos, elaborar las
conclusiones sobre las medidas de seguridad que
se deben seguir en el laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa.
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
PRCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
Objetivos generales
Mencionar las partes fundamentales del 7. Si los objetivos de poco aumento se
microscopio y sus funciones. manchan con aceite, limpiarlos
inmediatamente con papel seda.
Sealar el manejo y los cuidados que se deben 8. Si el aceite se ha secado o endurecido en
tener con el microscopio compuesto. las lentes, se puede limpiar con papel
humedecido con xilol. Tener precaucin, ya
Observacin de preparaciones. que al emplear un exceso de xilol podra
disolver el cemento que une las lentes.
Antecedentes 9. Las lentes de los objetivos, el condensador
El microscopio es un instrumento de gran utilidad y los oculares han sido cuidadosamente
en el estudio de la Microbiologa y Parasitologa; ajustados en la fbrica de origen, por lo
puede ser simple, cuando su sistema se basa en tanto, no deben ser desarmados por el
una lente biconvexa o compuesto cuando utiliza observador. Recuerde que el poder de
dos sistemas de lentes que se encuentran resolucin del microscopio depende de que
separados, consiguiendo con ello un mayor todas las lentes estn centradas y a la
aumento. Entre los microscopios compuestos el distancia correcta unas de otras.
ms usado es el de luz, el cual emplea fotones de 10. Los objetivos, el condensador y los
luz visible para formar imgenes. Sin embargo, el oculares pueden limpiarse con agua
tipo de luz empleada y cmo se manipula puede destilada; la lente de inmersin y la parte
variar. Los tipos de microscopios de luz ms superior del condensador con xilol, pero
comunes son: campo brillante, campo oscuro, con poca cantidad, humedeciendo
contraste de fase y de fluorescencia. ligeramente un lienzo y pasndolo
El microscopio de luz brillante se encuentra suavemente por la superficie del lente. No
constituido por tres sistemas: usar este solvente en exceso, porque las
1. ptico. lentes vienen montadas con blsamo de
2. Mecnico Canad, el cual puede disolverse.
3. Iluminacin 11. Mantener seca y limpia la platina del
microscopio. Si se derrama sobre ella algn
Cuidados que hay que tener con el microscopio lquido, secarla con un pao. Si se mancha
con aceite, limpiarla con un pao
1. El microscopio debe guardarse protegido de la humedecido con xilol.
humedad y el polvo. 12. La superficie del microscopio se puede
2. Al trasladarlo, debe sujetarse de su brazo y del limpiar con un lienzo humedecido con agua.
soporte o base. La cremallera del tornillo macromtrico
3. Antes de usarlo, debe cerciorarse de que las debe limpiarse ocasionalmente con una
lentes accesibles (objetivos, oculares y pequea cantidad de aceite o grasa
condensador) estn limpias, de no ser as, hay delgada. El tornillo micromtrico no
que limpiarlas con papel seda especial para necesita aceite.
evitar su deterioro. 13. No inclinar el microscopio cuando se est
4. No tocar nunca las lentes. trabajando con aceite de inmersin. Este
5. No dejar el portaobjeto puesto cuando no se puede caer al sistema mecnico de la
est usando el microscopio. platina donde es difcil limpiarlo, o puede
6. Al terminar la observacin con el objetivo de gotear al condensador y ah solidificarse.
inmersin debe retirarse el aceite utilizando 14. Cuando no se usa el microcopio, guardarlo
papel seda o un lienzo suave, limpio y seco, cubierto y en su caja.
porque de no hacerlo se reseca, dificultando su
limpieza y causando deterioro del lente.
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
Desarrollo de la prctica
Material
1. Microscopios compuestos.
2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos,
hongos y artrpodos de importancia
mdica.
3. Tubo con cultivo de paja
4. Portaobjetos
5. Cubreobjetos
6. Aceite de inmersin
7. Papel seda
8. Disco
9. Pipetas Pasteur, bulbo
Mtodo
1. El profesor explicar la diferencia entre una
preparacin en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
PRCTICA No. 3
INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
forma, elevacin, margen, color, superficie, 4. Tubos de agar hierro triple azcar (TSI),
densidad, consistencia, produccin de agar hierro lisina (LIA), agar movilidad,
pigmento y hemlisis en caso de haberse indol, lisina (MIO), tubos de citrato de
empleado agar sangre) se efecta con el Simmons.
examen visual del desarrollo en la superficie 5. Asa bacteriana
de las placas de agar. 6. Mechero
7. Equipo de tincin de Gram
C). Identificacin bacteriolgica. 8. Portaobjeto
Procedimiento que se efectuar con base en la 9. Aceite de inmersin
fisiologa bacteriana para reconocer los 10. Microscopio
productos del metabolismo de sta; 11. Papel seda
produccin de cido y gas a partir del empleo 12. Placas y tubos sembrados
de carbohidratos; glucosa, lactosa o sacarosa. (demostrativos)
Presencia de productos liberados por la
presencia de enzimas que desdoblan Mtodo
aminocidos (triptfano, cistina, metionina, Los alumnos:
ornitina, arginina y lisina) como sera la 1. Observarn, macroscopicamente, los
produccin de indol, H2S, etc. de protenas cultivos (morfologa colonial)
(gelatina, caseina). As como hemolisinas que 2. Realizarn tincin de Gram a partir de
lisan glbulos rojos (produciendo hemlisis y frotes fijados
) o ausencia de hemlisis (). 3. Realizarn observacin microscpica.
Material:
1. Tubo problema
2. Medio de transporte demostrativo.
3. Placas de Eosina azul de metileno (EMB) y
tubos con caldo nutritivo
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
PRCTICA No. 4
CULTIVO DE FLORA BACTERIANA DE PIEL
Objetivos generales
Mencionar la microbiota normal de la piel y Material
mucosas. 1. Hisopo estril
Identificar los principales agentes causantes de 2. Placa de agar nutritivo
infecciones oportunistas. 3. Tubo con agua destilada o solucin salina
Revisar los recursos de laboratorio para el isotnica (SSI)
diagnstico de las infecciones por microorganismos 4. Asa para siembra
oportunistas. 5. Mechero
6. Equipo para tincin de Gram
Antecedentes 7. Portaobjetos
Vivimos inmersos en un mundo de bacterias, las 8. Aceite de inmersin
que se encuentran por todos lados y nosotros no 9. Microscopio
somos la excepcin. 10. Papel seda
Desde las pocas horas despus del nacimiento
somos colonizados por bacterias que vivirn con Mtodo
nosotros durante toda la vida, las cuales colonizan Sesin I
la piel, tracto digestivo, vas respiratorias altas,
odos y algunos otros tejidos constituyndose en la Manos sin lavar
llamada flora normal o habitual. Su permanencia en 1. Humedecer el hisopo estril con el agua o
estos sitios, hacen que el husped se vea SSI estril.
beneficiado por los nutrientes que algunas de ellas 2. Con el hisopo humedecido, tomar la
fabrican, por la inhibicin del desarrollo de muestra bacteriolgica de los pliegues
microorganismos patgenos, porque estimulan el interdigitales, dorso y palmas.
desarrollo del sistema inmune y por otras funciones 3. Sembrar con el hisopo en un extremo de la
benficas que realizan. Sin embargo, sabemos que placa con agar nutritivo
algunas de estas bacterias pueden representar un 4. Realizar el sembrado para obtener colonias
riesgo para nuestra salud, principalmente en las aisladas.
siguientes situaciones; al multiplicarse de forma 5. Rotular la caja de Petri
anormalmente alta, al encontrarse en un sitio 6. Incubar a 35-36 C, durante 24-48 horas.
diferente al que les corresponde y cuando existen
bacterias en un sitio normalmente estril. Manos lavadas
Como es de suponer, el cuerpo es un delicado 1. Realizar el aseo de manos con agua y
ecosistema en donde viven simbiticamente un jabn de manera tradicional
gran nmero de bacterias y el husped humano 2. Frotar las manos enjabonadas durante 30
mantienen una relacin en donde estas bacterias segundos
representan un riesgo potencial cuando el equilibrio 3. Humedecer el hisopo estril con el agua o
se rompe. El nmero y el tipo de bacteria pueden SSI estril.
ser modificados por diferentes factores como son 4. Con el hisopo humedecido, tomar la
la temperatura, la humedad, el pH y la presencia de muestra bacteriolgica de los pliegues
determinados nutrientes o de sustancias interdigitales, dorso y palmas.
inhibitorias. Algunos ejemplos de cuando se rompe 5. Sembrar en la placa con agar nutritivo para
este equilibrio pueden ser la presencia de diversos aislamiento de colonias.
tipos de infecciones; caries, acn, etc. 6. Rotular la caja de petri
7. Incubar a 35-37 C, durante 48 horas.
Desarrollo de la prctica
Sesin I:
El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisar el tema.
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
PRACTICA No.5
INFECCIONES DE VAS RESPIRATORIAS
Objetivos generales diagnstico de laboratorio.
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones bacterianas de vas respiratorias. Material
Identificar los principales agentes etiolgicos que 1. Placa de gelosa sangre
producen infecciones de vas respiratorias. 2. Placa de gelosa sal manitol
Revisar los recursos de laboratorio para el 3. Placa Biggy
diagnstico de las infecciones bacterianas de vas 4. Hisopos estriles
respiratorias. 5. Abatelenguas estriles
6. Asas bacteriolgicas
Antecedentes 7. Mecheros
Entre los microorganismos involucrados en 8. Equipo de Tincin de Gram
procesos infecciosos de vas respiratorias, se 9. Papel seda
encuentra; Streptococcus pyogenes tambin 10. Caso clnico
llamado Estreptococo beta hemoltico del grupo A
de Lancefield. As como estreptococos del grupo C, Mtodo
D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium 1. Para realizar el aislamiento de las bacterias del
haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria exudado farngeo, se marcan las zonas de
gonorrhoeae, Corynebacterium diphtheriae, inoculacin en cada medio de cultivo.
Haemophilus influenzae tipo b, Bordetella pertussis, 2. Toma de muestra: se le pide al paciente que abra
Borrelia vincenti, Fusobacterium sp y bien la boca, se hace descender suavemente la
Mycobacterium tuberculosis. Es importante lengua con el abatelenguas y se introduce un
mencionar que en caso de pacientes hisopo estril hacia la faringe posterior. Pasar
inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella suave y rpidamente el hisopo con movimientos
pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. hacia arriba y abajo por detrs de la vula y entre
Entre los virus tenemos una alta participacin de los pilares tonsilares.
Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes 3. Rotar el hisopo en la zona nmero uno de la
simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B, placa de gelosa sangre y agar sal manitol.
Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus. Adems frotarlo en la superficie del medio de
Las muestras que se emplean en infecciones de Biggy y finalmente hacer un frote en una
vas respiratorias incluyen, exudado farngeo, laminilla.
exudado nasal, exudado nasofarngeo, lavado 4. Continuar con la distribucin de la muestra
nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras. empleando el asa bacteriolgica previamente
esterilizada con el fin de lograr el aislamiento
En el caso del exudado farngeo, su indicacin se deseado.
encuentra dada con el fin de realizar la deteccin 5. Incubar los cultivos a 37 C. durante 24 a 48
del microorganismo involucrado en el proceso horas
infeccioso de la regin. Sin embargo, debemos 6. Fijar y teir el frote con el mtodo de Gram
considerar que siendo una regin altamente 7. Observar al microscopio
colonizada por microorganismos que forman parte
de la flora habitual, la realizacin de la toma de
muestras debe ser la adecuada para la Sesin II:
recuperacin y cultivo de los microorganismos (Identificacin macroscpica y microscpica)
involucrados en el proceso infeccioso. 1. Cultivos demostrativos
2. Cultivos de la prctica anterior
3. Equipo de tincin de Gram
Desarrollo de la prctica 4. Laminillas
Sesin I: 5. Cubreobjetos
El profesor de laboratorio conjuntamente con los 6. Asas bacteriolgicas
alumnos revisar un caso clnico de infeccin de 7. Mecheros
vas respiratorias e identificarn: 8. Microscopio
a) Datos relevantes del caso. 9. Aceite de inmersin
b) Posibles diagnsticos clnicos. 10. Papel para la limpieza del microscopio
c) Productos biolgicos empleados para el
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2015-2016
Interpretacin
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
PRCTICA No.6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
Desarrollo de la prctica
Sesin I 2. Realizarn tinciones de Gram a partir de
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con colonias previamente identificadas y anotarn
los alumnos revisarn un caso clnico de sus caractersticas tintoriales.
gastroenteritis bacteriana e identificarn:
a) Datos relevantes del caso. 3. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto
b) Posibles diagnsticos clnicos. con los dems datos para llegar al diagnstico
c) Productos biolgicos a utilizar para el etiolgico.
diagnstico de laboratorio.
d) Exmenes de laboratorio tiles para Interpretacin de bioqumicas
confirmar el diagnstico clnico.
2. Realizarn un coprocultivo. Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para
diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato
Material como nica fuente de carbono y energa.
1. Placas Eosina Azul de Metileno (EMB), Tiene como indicador, al colorante azul de
Salmonella-Shigella (SS). bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales
2. Tubos de citrato de Simmons, Agar hierro de amonio, que hace que el medio vire a un color
azul, cuando es positivo.
triple azcar (TSI), Agar hierro lisina (LIA),
Agar Movilidad Indol Ornitina (MIO) TSI (Agar triple azcar-hierro).Prueba que
3. Asas bacteriolgicas permite observar la fermentacin de glucosa,
4. Problema lactosa y sacarosa as como la produccin de gas y
cido sulfhdrico.
Mtodo La fermentacin acidifica el medio, haciendo que el
1. Obtener una muestra de materia fecal en un indicador (rojo de fenol) vire a amarillo. En tanto
frasco estril y de aqu tomar una pequea que el tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de
porcin con un hisopo estril, de preferencia hidrgeno que reacciona con sales de hierro,
de los sitios con moco y sangre. proporcionando sulfuro de hierro de color negro.
2. Con el hisopo, inocular las siguientes medios:
EMB y SS, seguir el procedimiento por estras LIA (Agar hierro lisina). Prueba basada en la
en placa para el aislamiento de colonias descarboxilacin y desaminacin de lisina, as
3. Incubar a 37 C durante 24 horas como en la produccin de cido sulfhdrico.
4. Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y Descarboxilacin de la lisina positiva; Pico
MIO, la bacteria problema, como lo indique el violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/
profesor, incubar a 37 C durante 24 horas. fondo amarillo.
5. Identificar al o los microorganismos con las Desaminacin de la lisina; Pico rojizo/fondo
pruebas bioqumicas. amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y
Morganella sp
Produccin de cido sulfhdrico: Ennegrecimiento
Sesin II
del medio (especialmente en el lmite entre el pico y
Material
el fondo.
1. Cultivos demostrativos y de la prctica
anterior.
2. Pruebas bioqumicas demostrativas y de la
prctica anterior.
3. Reactivo de Kovac
4. Equipo para Gram
5. Portaobjetos
6. Papel seda
Metodologa
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn colonias
lactosa positivas de las negativas.
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Resumen de la prctica:
El profesor junto con los alumnos correlacionar el
caso clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2014-2015
PRCTICA No. 7
INFECCIONES DE VAS URINARIAS
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Transporte de muestras
Mtodos de cultivo
1. Transportar la muestra al laboratorio tan pronto
1. Mtodo de estriado en superficie con asa
como sea posible despus de la coleccin.
2. Cultivar las muestras dentro de las dos horas calibrada.
posteriores a la coleccin, o refrigerarlas y Las asas calibradas presentan caractersticas
sembrarlas en un lapso no mayor de 8 horas. especficas que las habilitan para recoger, si
3. Se requiere tomar una nueva muestra de orina solo se introduce a la muestra la parte circular,
cuando no hay evidencia de refrigeracin, el un volumen conocido de orina. La siembra se
mtodo de coleccin no han sido el adecuado. realiza descargando su contenido en toda la
4. Si se trata de una muestra colectada, superficie del medio seleccionado.
transportada y manejada de manera Cabe sealar que la eleccin de los medios es
inadecuada y no puede ser reemplazada, se importante. No debe faltar una gelosa sangre u
documenta en el reporte final que la calidad de otro medio en el que pueda desarrollar el
la muestra no es la adecuada y se debern agente etiolgico, aunque este sea exigente en
tomar con reserva los resultados. cuanto a sus requerimientos nutricionales, y
5. La refrigeracin no es necesaria si la muestra algunos otros medios con caractersticas
de orina es colectada en tubos de transporte diferenciales y/o selectivas, que permitan el
con preservativos. Colocar cuando menos 3 ml desarrollo de los patgenos, inhibiendo a los
de orina en el tubo para evitar un efecto contaminantes.
inhibitorio o diluyente en los microorganismos. Las placas sembradas se incuban a 35 C en
aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido
Anlisis de las muestras. el tiempo, se analizan las caractersticas
Los mtodos para el anlisis de las muestras son macroscpicas obtenidas, poniendo especial
cuantitativos, debido a la elevada frecuencia con la cuidado en detectar si estn presentes uno o
que estas se contaminan durante su obtencin o ms microorganismos diferentes y en realizar el
cualitativos en los casos de recoleccin recuento correspondiente.
suprapbica. Como las asas comerciales ms utilizadas son
las que recogen un volumen de 0.001 ml de
Deteccin de Bacteriuria orina, el nmero de colonias de cada caja
deber multiplicarse por 1000 para conocer la
1. Tincin de Gram cantidad de microorganismos o de UFC que la
El mtodo de tincin de Gram puede detectar la muestra contiene por mililitro.
presencia tanto de bacterias como leucocitos Adicionalmente, deben someterse a pruebas de
en muestras de orina identificacin, tomando en cuenta que las
infecciones urinarias son causadas, en el 85 a
Tcnica 90 % de los casos, por una sola especie
1. Colocar 10 microlitros de orina no centrifugada bacteriana.
y bien mezclada sobre un portaobjetos de vidrio
y dejar secar al aire sin extender
2. Fijar, teir e identificar al microorganismo.
3. Determinar el nmero de microorganismos por
campo utilizando el objetivo de inmersin
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2014-2015
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Sesin II
Material
1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior
2. Equipo para tincin de Gram
3. Portaobjetos
4. Papel seda
5. Asas bacteriolgicas
6. Reactivo de Kovac
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn las
colonias.
2. Contarn el nmero de colonias que se
desarrollaron en las cajas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el nmero de bacterias es 100 000 UFC/ml,
se proceder a identificar l o los
microorganismos por los mtodos usuales.
4. Realizarn tincin de Gram a partir de colonias
previamente identificadas y anotarn sus
caractersticas.
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2014-2015
PRCTICA No.8
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
ANEXO
DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
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I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2014-2015
Material
1. Cajas con gelosa Meller-Hinton con 4 mm de
grosor.
2. Tubo MacFarland de 0.5.
3. Tubos con solucin salina estril cada uno con 3
ml
4. Cultivos de 18 a 24 h en caldo nutritivo.
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PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA
Primer da
Incubar a 37 C x 24 horas
Segundo da
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