ANTIBIOGRAMA

INTRODUCCIN Y OBJETIVOS DE LA PRCTICA

Los antibiticos son compuestos orgnicos de origen microbiano que resultan txicos para
otros microorganismos y que inhiben, por tanto, su crecimiento de forma reversible
(bacteriostticos/fungistticos) o irreversible (bactericidas/fungicidas). El gran valor que tienen
en la terapia de enfermedades infecciosas depende en gran parte de su toxicidad selectiva,
dirigida contra el agente infeccioso y no contra el hospedador infectado.

En general, los antibiticos deben su toxicidad selectiva a las diferencias bioqumicas

fundamentales entre procariotas y eucariotas, siendo su efecto txico una consecuencia de su
habilidad para inhibir una reaccin bioqumica esencial especfica de la clula procaritica o
eucaritica.

La sntesis microbiana de antibiticos tiene lugar en la fase estacionaria, cuando el

microorganismo ha dejado de crecer. Se trata por tanto de metabolitos secundarios, ya que su
sntesis no est asociada al crecimiento del microorganismo productor.

Entre los productores de antibiticos destacan los microorganismos que habitan en el suelo.
Entre las bacterias cabe sealar los gneros Bacillus, productor de antibiticos como la
bacitracina y la polimixina y Streptomyces, productor, entre otros, del cloranfenicol, la
eritromicina, la estreptomicina y la tetraciclina. No en vano, Streptomyces es el mayor
productor de antibiticos de importancia mdica. No todos los antibiticos son de origen
bacteriano. Las especies fngicas del gnero Penicillium destacan tambin por la sntesis de
este tipo de metabolitos, tal es el caso de la penicilina y la griseofulvina.

Los antibiticos son efectivos frente a bacterias y hongos pero no frente a virus, por tanto su
uso queda restringido al tratamiento de infecciones bacterianas y micticas.

Segn su mecanismo de accin los antibiticos pueden: (1) inhibir la sntesis de la pared
celular, (2) alterar la permeabilidad y estructura de la membrana, (3) inhibir la sntesis de
protenas en la clula, (4) inhibir la sntesis de lpidos, etc.

Una de las pruebas utilizadas para medir el efecto de un antibitico sobre el crecimiento de un
microorganismo es el antibiograma. En esta prctica, sobre una placa inoculada de manera
uniforme con el microorganismo en cuestin (siembra en csped), se depositan de manera
equidistante una serie de discos, cada uno de ellos embebido en una concentracin conocida
de un antibitico a testar. La placa as tratada se incubar el tiempo requerido a la
temperatura ptima para el crecimiento del microorganismo. Transcurrido este tiempo se
observarn halos de inhibicin alrededor de algunos discos. El dimetro del halo nos indicar
el grado de sensibilidad o resistencia del microorganismo a los antibiticos testados.

Mediante esta prctica el alumno aprender a determinar la sensibilidad o resistencia de un

microorganismo a una serie de antibiticos y, en base a ello, cul es el antibitico ms
adecuado para inhibir su crecimiento.
MATERIAL A UTILIZAR

Cultivo en medio lquido del microorganismo cuya resistencia quiere ser analizada.
Discos con antibiticos a testar.
Pinzas metlicas.
Asa de vdrio y placa con etanol.
Una placa de Petri con medio NA slido.
Pipetas estriles o micropipetas.
Una regla.

PROCEDIMIENTO
1.- Con ayuda de una micropipeta depositar 50 l del cultivo lquido del microorganismo sobre
la placa de medio slido NA.
2.- Distribuir la suspensin celular sobre toda la superficie del medio slido hasta formar un
csped.
3.- Dejar en reposo cerca de la llama del mechero hasta que el medio slido absorba
completamente el lquido.
4.- Con las pinzas metlicas esterilizadas con alcohol colocar los discos de antibiticos de tal
forma que equidisten entre s y del borde de la placa (Fig.1).
5.- Esperar 10 minutos hasta que los discos se adsorban al medio slido.
6.- Incubar a 37C durante 24-48 horas.

K P

T S

RESULTADOS Y TRATAMIENTO DE DATOS

Transcurrido el periodo de incubacin, el alumno observar los halos de inhibicin generados
alrededor de los discos de antibiticos y medir su dimetro. Seguidamente, tomando como
referencia la tabla 1, determinar la efectividad de cada uno de los antibiticos en el control
del crecimiento del microorganismo analizado.
Tabla 1: Relacin entre el tamao del halo en el que est inhibido el crecimiento del microorganismo y el grado
de sensibilidad de ste al antibitico en cuestin.