Professional Documents
Culture Documents
Jumlah Dan Kolesterol HDL TIMAH Dari Asan Farmasi co (Seoul, Korea). Vitamin
dan mineral
Campuran berasal Dari Teklad (Madison, WI, dsb). * Semua kimia Bahan
berbaring Yang reagen Kelas. Hewan Dan komposisi diet. Laki-laki Sprague
Dawley Tikus (SD) (6-minggu-lama) TIMAH Dari Korea eksperimental Pusat
Hewan (Umsung, Korea), menyesuaikan Diri selama 1 minggu pakan PADA
standar Dan kemudian dimasukkan diet eksperimental (Tabel 1). Hewan dibagi
Menjadi Tiga Kelompok: Kontrol, Dan 0,1% dan 0,5% diosgenin. SETIAP Kelompok
memiliki 6 Hewan Dan Disesuaikan untuk review tubuhnya Berat. Diet masing-
masing Berisi 1% Kolesterol Dan 30% Dari Jumlah KALORI Dari lemak. Hewan
ditempatkan di Bawah 12-jam SIKLUS terang Dan Gelap hearts Suhu Dan
kelembaban KAMAR dikendalikan (22 1 C), Dan diberikan AKSes gratis KE diet
Dan udara. Berat badan diukur Sekali seminggu. Hewan Tewas Penghasilan kena
pajak 6 minggu eksperimental
Diet MAKANAN. Studi Hewan disetujui Diposkan Komite Universitas untuk review
Hewan Sesuai Penelitian. Sampel Persiapan. Sampel Darah diambil Dari aorta
abdominalis selepas Korban Diposkan CO2 inhalasi Dan PADA disentrifugasi
3.000 rpm untuk review 20 Menit untuk review Pisahkan DENGAN plasma Dan
sel-sel Darah. DNA Untuk menyelidiki kerusakan uji Diposkan komet, dipisahkan
limfosit Dari heparinized Seluruh Darah DENGAN menggunakan Histopaque 1077
limfosit terpisah dicuci Dan disuspensi hearts PBS, Dan Segera digunakan untuk
review assay komet. Hati sitosol dan fraksi mikrosom disiapkan dengan
sentrifugasi dari homogenat hati. 14) konsentrasi protein diukur oleh Metode
Bradford, menggunakan bovine albumin serum (BSA) sebagai yang standard.15)
Darah dan hati lipid. Plasma trigliserida (TG), kolesterol total (TC), dan kolesterol
HDL (HDL) tingkat diukur dengan alat tes kit (Asan Pharm. Co, Korea). Indeks
aterogenik (AI) dihitung sebagai AI = (kolesterol HDL kolesterol total-) / kolesterol
HDL. LDL-kolesterol (LDL) dihitung dengan Friedewald formula.16) Total hati lipid
diekstraksi oleh metode Folch dan terukur. Hati TG dan TC
tingkat diukur dengan alat tes kit (Asan Pharm. Co, Korea). Aktivitas
transaminase darah. Kegiatan aspartat aminotransferase (AST) dan alanine
aminotransferase (ALT) dalam plasma diukur dengan alat tes kit (Asan Pharm.
Co, Korea). Peroksidasi lipid. Produk akhir dari polyunsaturated asam lemak
peroksidasi, thiobarbituric asam-bereaksi zat (TBARS), ditentukan dengan
metode Yagi.17) Secara singkat, 2,0 ml reagen (26mm thiobarbituric asam dan
0,92 M asam trikloroasetat di 0,25 M HCl)
Kerusakan DNA limfosit dengan uji komet. Itu assay komet dilakukan oleh
prosedur Singh.18) slide Sepenuhnya buram ditutupi dengan 0,65% dari agarosa
normal lapisan pertama, campuran sel
suspensi (sekitar 20.000 sel) dan 0,65% dari melting- rendah titik agarosa (LMA)
sebagai lapisan kedua, dan akhirnya dengan 0,65% dari LMA (tanpa sel) sebagai
ketiga lapisan. Slide diizinkan untuk memperkuat pada 4? C di gelap selama 5
menit, dan kemudian diinkubasi baik dalam segar penyangga fosfat (sel tanpa
tekanan) atau fosfat buffer yang mengandung 50 mM baru disiapkan H2O2
selama 5 menit (menekankan sel). Slide kemudian ditempatkan dalam dingin
penyangga lisis dan disimpan pada 4? C selama 1 jam untuk menghapus protein
seluler. Setelah lisis ini, slide ditempatkan dalam tangki elektroforesis horisontal,
dan yang tersisa di solusi elektroforesis selama 20 menit untuk memungkinkan
DNA unwinding dan ekspresi kerusakan labil basa sebelum elektroforesis.
Elektroforesis dilakukan pada 4? C selama 20 menit (25V dan 300mA), dan
kemudian slide direndam dalam buffer netralisasi, diwarnai dengan etidium
bromida, dan diperiksa di bawah fluoresensi sebuah mikroskop (200 ?, Leica).
Berat hati relatif dari tikus yang diberi makan dengan 0,5% diet diosgenin-
dilengkapi sekitar 24% lebih rendah dari bahwa dari kelompok kontrol. Hal ini
menunjukkan bahwa hewan makan di diosgenin yang mengandung diet 0,5%
memiliki sedikit lemak akumulasi dalam hati karena lipase pankreas Aktivitas
penghambatan diosgenin.6)
Ekspresi mRNA relatif antioksidan yang enzim dalam kelompok diosgenin-
dilengkapi adalah
meningkat. Ekspresi GSH-Px meningkat sebesar 2.99- lipat di 0,1% dan sebesar
13,0 kali lipat dalam 0,5% suplemen diosgenin kelompok dibandingkan dengan
kontrol kelompok. Ekspresi CAT meningkat sebesar 1,29 kali lipat dan 3,03 kali
lipat, dan Cu / Zn SOD meningkat 2,38 kali lipat dan 3.78 kali lipat dalam 0,1%
dan 0,5% diosgenin-dilengkapi kelompok dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Mn SOD adalah meningkat 1,93 kali lipat pada kelompok diosgenin 0,5%.
Itu pengaruh suplementasi diosgenin pada stres oksidatif juga terlihat untuk
GSH-Px, dengan peningkatan 13- lipat dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Hasil yang diperoleh dalam percobaan ini menunjukkan bahwa suplementasi diet
dengan diosgenin mungkin mengendalikan stres oksidatif oleh modulasi Ekspresi
GSH-Px. Mn SOD dikenal sebagai enzim mitokondria, dan yang Ekspresi mRNA
mudah diinduksi oleh paparan superoksida dan hidroksil radikal, sementara Cu /
Zn SOD adalah tidak mudah diubah oleh berbagai stimuli.44) Tingkat dan
keseimbangan enzim antioksidan memodulasi kerentanan dari sel cedera
oksidatif. Ditingkatkan Aktivitas SOD tanpa kenaikan bersamaan dalam kegiatan
katalase dan GSH-Px dapat mengakibatkan akumulasi yang berlebihan dari
hidrogen peroksida yang di gilirannya, bereaksi dengan logam untuk
menghasilkan radikal hidroksil melalui reaction.45 Fenton) Hasil kami untuk gen
ekspresi enzim antioksidan oleh diosgenin administrasi menunjukkan bahwa Cu /
Zn SOD dan katalase yang sedikit diinduksi, sementara GSH-Px adalah nyata
diinduksi. Keseimbangan antara antioksidan yang dimodifikasi enzim mungkin
bisa menghapus superoksida lebih efisien. Meskipun ada beberapa laporan yang
menunjukkan diosgenin yang menekan aktivasi dan gen ekspresi B NF?, yang
telah diidentifikasi dalam daerah peraturan dari semua enzim antioksidan gen,
kita tidak mengerti dengan jelas yang seluler mekanisme dapat menjelaskan
perubahan ini ke system.46-48 antioksidan) penyelidikan lebih lanjut pada
mekanisme gen enzim antioksidan diubah ekspresi dengan pengobatan
diosgenin karena itu akan menjadi
perlu.