UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE CINCIAS DA SADE

DEPARTAMENTO DE FARMCIA
DISCIPLINA DE CONTROLE DE QUALIDADE DE MEDICAMENTOS

PRTICA 08:

ANLISE ESPECTROFOTOMTRICA NO
UV/VISVEL CLORPROPAMIDA

DISCENTES:
JOYCE SANTANA PADILHA
LETCIA GONDIM LAMBERT MOREIRA
SAMIR SOARES ROQUE

DOCENTE:
FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
RAQUEL DE MELO BARBOSA

ABRIL 2015
NATAL-RN
INTRODUO
As tcnicas espectrofotomtricas esto fundamentadas na absoro da energia
eletromagntica por molculas que depende tanto da concentrao quanto da estrutura
das mesmas. De acordo com o intervalo de frequncia da energia eletromagntica
aplicada, a espectrofotometria de absoro pode ser dividida em ultravioleta, visvel e
infravermelho, podendo ser utilizada como tcnica de identificao e quantificao de
substncias (BRASIL, 2010).
Os espectros podem ser obtidos utilizando-se diferentes modos de aquisio. No
caso da espectrofotometria UV/VIS o principal modo a transmisso que a medida da
diminuio da intensidade da radiao em determinados comprimentos de onda quando
a radiao passa atravs da amostra. A amostra disposta no feixe ptico entre a fonte e
o detector. No caso da espectrofotometria NIR e MIR os espectros podem ser
adquiridos utilizando o modo transmisso e reflexo. Esta ltima subdivide-se em
reflexo difusa e reflexo total atenuada. H ainda a possibilidade da combinao dos
modos de transmisso e reflexo, chamada de transreflexo (BRASIL, 2010).
Espectrofotmetros utilizados na regio do ultravioleta e visvel so dotados,
fundamentalmente, de fonte de radiao; seletor de comprimento de onda; celas de
absoro (cubetas), para insero de solues de amostras no feixe de luz
monocromtica; detector de radiao e uma unidade de leitura e de processamento de
sinal (BRASIL, 2010).
As lmpadas mais empregadas como fonte de radiao na espectrofotometria na
regio do ultravioleta e visvel so de deutrio e tungstnio, que fornecem radiao
compreendida entre 160 a 380 nm e 320 a 2500 nm, respectivamente (BRASIL, 2010).
Os instrumentos para as regies do UV/VIS so, geralmente, equipados com um
ou mais dispositivos para restringir a radiao que est sendo medida dentro de uma
banda estreita que absorvida ou emitida pelo analito. A maioria dos equipamentos
utiliza um monocromador ou filtro para isolar a banda de comprimento de onda
desejada de forma que somente a banda de interesse seja detectada e medida. Os
espectrofotmetros, por sua vez, utilizam monocromadores para seleo do
comprimento de onda e so utilizados nas regies do UV/VIS (BRASIL, 2010).
O compartimentos utilizados para receber a amostra so denominados de cubetas
que devem apresentar janelas que sejam transparentes na regio espectral de interesse.
Para a regio do UV so necessrias cubetas de quartzo enquanto que, para a regio do
VIS, pode-se empregar cubetas de vidro ou acrlico (BRASIL, 2010).
Os principais tipos de detectores so os fototubos, os arranjos de fotodiodos e os
dispositivos de transferncia de carga. Os fototubos so os detectores mais simples e sua
resposta est baseada no efeito fotoeltrico. O detector de arranjo de diodos permite que
todos os comprimentos de onda possam ser monitorados simultaneamente. Os
dispositivos de transferncia de carga tm sido empregados em nmero crescente em
instrumentos espectroscpicos (BRASIL, 2010).
Os espectrofotmetros podem ser encontrados na configurao de feixo nico,
feixe duplo e multicanal. Os instrumentos de feixe duplo apresentam a vantagem de
compensar qualquer flutuao na potncia radiante da fonte, quando comparados com
os instrumentos de feixe simples. J o instrumento multicanal mais recente, utilizam
detectores do tipo arranjo de diodo e dispositivos de transferncia de carga e permitem a
obteno do espectro total de uma amostra em menos de um segundo. Nestes
instrumentos o sistema dispersivo um espectrgrafo de rede colocado aps a clula da
amostra (BRASIL, 2010).
Espectrofotmetros podem dispor de registradores grficos que permitem a
obteno de espectros de absoro. Tal recurso importante para fins de caracterizao
da substncia a partir da obteno dos comprimentos de onda onde se obtm as maiores
absorbncias (mximo). Atualmente, a maior parte dos espectrofotmetros apresenta
conexo a um microcomputador e programa apropriado, que permitem a obteno dos
espectros de absoro das substncias em meio digital (BRASIL, 2010).
OBJETIVO

Quantificar o teor do frmaco de comprimidos de clorpropamida por

espectroscopia no UV-visvel utilizando um padro do mesmo frmaco de concentrao
conhecida e posteriormente, comparar com o preconizado na literatura.
METODOLOGIA

CURVA DE CALIBRAO

Preparou-se uma soluo-me de clorpropamida na concentrao de 250 ppm,

diluindo-se 25 mg de clorpropamida para um balo de 100 mL completando com NaOH
0,1 N. A partir da soluo me, preparou-se as solues com as seguintes
concentraes: 2,5; 5; 10; 15 e 25 ppm, diluindo-se com NaOH 0,1 N para um balo de
50 mL.

PRAPARO DA AMOSTRA PARA LEITURA NO ESPECTROFOTMETRO DE

UV-VSIVEL
Calculou-se o peso mdio de 3 unidades dos comprimidos de clorpropamida e
pulverizou-se com auxlio de um graal e pistilo.
Pesou-se quantidade suficiente da amostra com a finalidade de preparar uma
soluo estoque de 250 ppm em um balo de 100 mL, diluiu-se para NaOH 0,1 N,
transferiu-se para o ultrassom, filtrou-se a soluo com auxlio de um funil e papel
manteiga.
A partir desta soluo estoque filtrada, preparou-se uma soluo na concentrao
intermediria de 20 ppm da curva de calibrao e completou-se com NaOH 0,1 N para
um balo de 50 mL.
Efetuou-se a leitura da amostra e das solues preparadas a partir da soluo
me no espectrofotmetro em comprimento de onda de 232 nm.
Utilizou-se uma ferramenta computacional, o Microsoft Office Excell, com o
intuito de obter a equao da reta de 1 grau (Y= aX + b) por regresso linear com a
obteno a curva de calibrao e em seguida calculou-se a concentrao da soluo
presente na amostra de 20 ppm e, posterior quantificao da percentagem do ativo na
soluo.
RESULTADOS E DISCUSSES

CURVA DE CALIBRAO
O volume necessrio da soluo me de clorpropamida na concentrao de 250
ppm (100 mL) para o preparo das solues com concentraes 2,5; 5; 10; 15 e 25 ppm
foi calculado a partir da formula C1 xV1 = C2 xV2 como pode ser observado a seguir.
Vale lembrar que estas solues foram diludas com NaOH 0,1 N para um balo de 50
mL com a finalidade de evitar os desvios da lei de lambert-beer.

Balo 1: Balo 2:

C1 x V1 = C2 x V2 C1 x V1 = C2 x V2
250 ppm x V1 = 2,5 ppm x 50 mL 250 ppm x V1 = 5 ppm x 50 mL
V1 = 0,5 mL V1 = 1,0 mL

Balo 3: Balo 4:

C1 x V1 = C2 x V2 C1 x V1 = C2 x V2
250 ppm x V1 = 10 ppm x 50 mL 250 ppm x V1 = 15 ppm x 50 mL
V1 = 2,0 mL V1 = 3,0 mL

Balo 5:

C1 x V1 = C2 x V2
250 ppm x V1 = 25 ppm x 50 mL
V1 = 5,0 mL

Ento, foram necessrios 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 e 5,0 mL da soluo me de

clorpropamida na concentrao de 250 ppm (100 mL) para o preparo das solues com
concentraes 2,5; 5; 10; 15 e 25 ppm para um balo de 50 mL, respectivamente.
PRAPARO DA AMOSTRA PARA LEITURA NO ESPECTROFOTMETRO DE
UV-VSIVEL

A partir do peso das 3 unidades dos comprimidos de clorpropamida, calculou-se

o peso mdio (tabela 01) e, posteriormente foi possvel saber a quantidade suficiente da
amostra (39,19 mg) para preparar uma soluo estoque de 250 ppm em um balo de
100 mL como pode-se observar a baixo.

Tabela 01 Peso e peso mdio de comprimidos de clorpropamida

Comprimidos Peso (mg)
n 01 384,9
n 02 395,0
n 03 394,5
Peso mdio 391,4

391,4 mg de clorpropamida ---------- 250 mg

Y mg de clorpropamida ---------- 25 mg
Y = 39,14 mg de clorpropamida

O volume necessrio da soluo estoque (250 ppm) filtrada para o preparo da

soluo na concentrao intermediria de 20 ppm da curva de calibrao foi de 4 mL
como pode ser observado a seguir, a partir da formula C1 xV1 = C2 xV2. Vale lembrar que
esta soluo foi diluda com NaOH 0,1 N para um balo de 50 mL com a finalidade de
evitar os desvios da lei de lambert-beer e, consequentemente possibilitar a leitura da
amostra e das solues preparadas a partir da soluo me no espectrofotmetro em
comprimento de onda de 232 nm (tabela 02).

C1 x V1 = C2 x V2
250 ppm x V1 = 20 ppm x 50 mL
V1 = 4 mL
Tabela 02 Concentrao X Absorbncia

Concentrao (ppm) Absorbncia

2,5 0,1903
5 0,2442
10 0,4458
15 0,6721
25 1,1625
Amostra (20 ppm) 0,8879

Para a determinao da concentrao da soluo na amostra de 20 ppm foi

necessrio a preparao de uma curva de calibrao, a partir dos dados obtidos (tabela
02) considerando que a concentrao (ppm) se encontra no eixo das abscissas (x) e a
absorbncia das amostras em anlise no eixo das coordenadas (y) e com o auxlio do
excell, aps plotar o grfico obtivemos a curva de calibrao, a equao da reta e o fator
de correlao (R2) demonstrado a baixo no grfico 1.

Grfico 01 Curva de calibrao dos comprimidos de clorpropamida

Aps a obteno na equao da reta y = 0,044x + 0,0371, calcula-se a

concentrao (x) da amostra (20 ppm) substituindo nessa frmula o valor obtido 0,8879
da absorbncia (y) da mesma. Logo,
 y = 0,044x + 0,0371
0,8879 = 0,044 x + 0,0371
0,8879 - 0,0371 = x
0,044

x = 19,336 ppm

Como a amostra continha 19,336 ppm, ento:

20 ppm ---------- 100%

19,336 ppm ---------- X%
X = 96, 68%

De acordo com Brasil (2010) a clorpropamida comprimidos deve conter, no

mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0% da quantidade declarada de C 10H13ClN2O3S.
Baseando-se nesta informao constata-se que a amostra de concentrao 19,336 ppm
encontra-se normalizada j que foi encontrado uma percentagem de 96,68% estando
assim dentro do limite padronizado na literatura. Assim como, conclui-se que no
ocorreu nenhum erro de manipulao durante os procedimentos realizados em
laboratrio, sendo justificado pelo valor ideal obtido do fator de correlao da equao
da reta com R2 = 0,999.
CONCLUSO

A espectrofotometria na regio do ultravioleta mtodo preconizado por Brasil

(2010), para a anlise do frmaco em medicamentos. De acordo com Brasil (2010) para
comprimidos de clorpropamida, permitido no mnimo, 90,0% e, no mximo, 110,0%
da quantidade declarada do ativo. Portanto, o comprimido de clorpropamida que
analisamos encontra-se de acordo com o preconizado na literatura.
REFERNCIAS

BRASIL. Farmacopeia Brasileira. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. 5.ed.,

vol 1. Braslia: Anvisa, 2010.

BRASIL. Farmacopeia Brasileira. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. 5.ed.,

vol 2. Braslia: Anvisa, 2010.