BACILLUS ANTHRACIS

CARACTERISTICAS MICROBIOLGICAS

Bacilo grampositivo y capsulado in vivo, las endosporas centrales ovoides se

forman slo in vitro
Es un microorganismo grande 1 x 3 a 8m
Anaerobio facultativo
Inmvil
Catalasa +
Se dispone de forma aislada o en parejas de bacilos en las muestras clnicas o
bien como cadenas largas en forma de serpentina o en grupos en los cultivos.
El bacilo ha desarrollado gran capacidad para resistir condiciones ambientales
extremas, por lo cual puede sobrevivir por varias dcadas en el medio ambiente
Debido a su elevado potencial infectivo, sus esporas pueden utilizarse como
arma biolgica en forma de aerosol, estando incluido en la lista de agentes
potenciales de bioterrorismo

CONSTITUYENTES ANTIGNICOS-TOXINAS-ENZIMAS.

Los factores de virulencia principales del B. anthracis son codificados por dos
plsmidos pX01 y el pX02

pX01 induce la sntesis de la exotoxina bacteriana. Las exotoxinas inhiben y retardan la

respuesta inmunolgica. Tiene tres componentes: el antgeno protector (AP), el factor
letal (FL), y el factor causante del edema (FE), los tres se combinan para formar dos
toxinas binarias.

La TOXINA DE EDEMA est formada por la combinacin del antgeno

protector (responsable de la unin a las clulas del husped) y del factor de
edema que tiene actividad de adenilato ciclasa enzima responsable de la
acumulacin de lquidos que se ve en el carbunco.
La TOXINA LETAL se forma cuando el antgeno protector AP se combina con
el factor letal LT una zinc-metaloproteasa ,esta toxina induce en el macrfago la
 liberacin del factor de necrosis tumoral alfa (FNT-alfa) y de la interleucina I-
beta, as como otras citosinas proinflamatorias, estos productos son
parcialmente responsables de la muerte en el ntrax toxmico masivo.

Un segundo e importante factor de virulencia es una prominente cpsula polipptidica

(formada por cido poli D-glutmico). Los genes para la produccin de la cpsula reside
en el plsmido pX02 codifica tres genes cap A, cap B y cap C. La cpsula protege a la
bacteria contra la fagocitosis.

La expresin de los factores de virulencia bacteriana est regulada por la temperatura

del husped >37C, y la concentracin del bixido de carbono >5% y la presencia de
ciertos nutrientes y componentes del suero. El crecimiento del microorganismo en estas
condiciones provoca aumentos de cuatro a seis veces en la transcripcin de genes de
toxina y en la sntesis de toxinas. Al igual que la produccin de toxinas, la sntesis de
material capsular en B. anthracis aumenta por concentraciones elevadas de CO2,
bicarbonato atmosfrico tanto in vivo como in vitro.

Tanto la toxina del edema, como la toxina letal y la cpsula deben estar
presentes para que ocurra la enfermedad. Se han desarrollado cepas avirulentas
de B. anthracis al eliminar uno o los dos plsmidos de virulencia.

La cepa que desarroll Luis Pasteur en sus experimentos de vacunacin animal

en Francia lleva el pX02, tiene cpsula pero no se expresa la exotoxina, en el
laboratorio se conoce tambin la cepa-Sterne atenuada que slo lleva el pX01,
puede sintetizar la exotoxina, pero no forma cpsula

EPIDEMIOLOGA

HBITAT:
Sobrevive en el suelo (tierras de cultivo, pastizales) durante largos periodos de
tiempo como endosporas resistentes, a partir del cual es contrado por diversos
herbvoros. . La esporulacin requiere una temperatura entre 15-42C, ambiente
hmedo y presencia de oxgeno En estos animales produce enfermedad. No
forma parte de la flora normal de los seres humanos.
MODO DE TRANSMISIN:
Contacto con animales infectados o productos de origen animal.
Las infecciones se producen por tres vas: cutnea, por contacto directo con
productos contaminados, en especial si existen heridas de piel; inhalacin de
 esporas, principalmente en faenas de aseo de lana; y gastro-intestinal,
por ingestin de carne contaminada, situacin muy infrecuente.
El carbunco en el hombre se ha observado en general como enfermedad
profesional en veterinarios, agricultores y diversas personas que manipulan
animales y productos de animales.
El mayor riesgo asociado al carbunco en los pases industrializados corresponde
a la utilizacin de B. anthracis como agente del bioterrorismo.

CUADROS CLNICOS

En el hombre hay tres formas clnicas del ntrax o carbunco:

a).Cutneo: representa el 95% de los casos registrados

b).Pulmonar: adquirido por inhalacin de las esporas el 5%
c). Gastrointestinal: de presentacin rara, el contagio es consecuencia de ingerir carnes
de animales contaminados de ntrax.

CARBUNCO CUTNEO

Localizado habitualmente en zonas descubiertas (manos, cabeza y piernas). El

perodo de incubacin es de 1 a 12 das. Comienza con el desarrollo de una
ppula indolora que se transforma rpidamente en una lcera rodeada de
vesculas para convertirse posteriormente en una escara necrtica. rodeada de
edema de 1 a 3 cm con un halo violceo
Pueden aparecer signos sistmicos, linfadenopatas dolorosas y edema masivo.
La bacteriemia se ha registrado en menos del cinco por ciento de los casos,
pudiendo haber leucocitosis con neutrofilia, pero los pacientes con lesiones
graves suelen mostrar cuentas leucocitarias de 30,000 a 40,000/mm.
La tasa de mortalidad en los pacientes con carbunco cutneo no tratado es del
20%.
CARBUNCO PULMONAR
Se puede asociar a un perodo
prolongado de latencia durante el cual la
persona infectada permanece
asintomtica. Los macrgafos alveolares
ingieren las esporas inhaladas y las
transportan a los ganglios mediastnicos,
donde las bacterias permanecen latentes.
Los sntomas clnicos iniciales son:
fiebre, dificultad respiratoria, tos,
cefalea, vmitos, escalofros, dolor
abdominal y torcico.

La segunda fase cursa con un

empeoramiento de la fiebre, edema y un
aumento masivo del tamao de las
adenopatas mediastnicas, estado de
shock y, a menudo, meningitis. Esta
forma de ntrax requiere hospitalizacin
y tratamiento agresivo con antibiticos.
A menudo es mortal

CARBUNCO GASTROINTESTINAL

Si los microorganismos invaden el tracto gastrointestinal superior, se forma

lceras en la boca o en el esfago, lo que produce un aumento de las
linfadenopatas regionales, edema y sepsis.
Si el microorganismo invade el ciego o el leon terminal, el paciente presenta
nuseas, vmitos y malestar general, que rpidamente progresa a una
enfermedad sistmica.

DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

La muestra depende de la presentacin de la enfermedad:

Cutnea:
Vescula: es la mejor muestra para identificar los microorganismos.
Escara:
 Pulmonar:
Esputos: en la primera etapa de la enfermedad es la mejor muestra y se
debe obtener para examen directo y cultivo.
Hemocultivos: son las muestras ideales despus de 2-8 das despus de
la exposicin y especialmente s son tomadas antes de iniciar el
tratamiento antimicrobiano.
Gastrointestinal:
Coprocultivo: es la muestra ideal para la primera etapa de la enfermedad
utilizando para el aislamiento el medio selectivo Agar fenil etil alcohol
Hemocultivos: son tiles en las etapas siguientes de la enfermedad y
especialmente son tomadas antes de iniciar el tratamiento.

COLORACIN DE GRAM

Tincin de gram. Microscopa ptica. 1000

aumentos. Las tinciones procedentes de muestra
directa revelan bacilos gram positivos aislados o
en cadenas cortas, rectos con extremos
cuadrados, con un tamao de 1-1,2 m de
dimetro y 3-5 m de largo. En las tinciones
procedentes de cultivo se observan cadenas ms
largas, dando un aspecto de caas de bamb o
serpentina

TINCIN CON AZUL DE METILENO

Tincin de la cpsula con azul de metileno. B.

Anthracis produce una cpsula codificada por
plsmidos, antifagoctica, que rodea la forma
bacteriana vegetativa.

CULTIVOS

AGAR SANGRE
Cultivo de B. anthracis en agar sangre. Crece en
atmsfera aerbica en medios habituales a las 24 horas.
La temperatura ptima de crecimiento es entre 35-
37C, pero su crecimiento es posible en temperaturas
entre 1 y 45C. Las colonias tienen un tamao de 3-5
mm de dimetro, de bordes irregulares, con
proyecciones a lo largo de las estras de inoculacin,
pegajosas, aspecto en cabeza de medusa. No son
pigmentadas ni producen hemlisis. Consistencia
pegajosa de una colonia de B. anthracis.

B. anthracis no crece en agar MacConkey.

OTROS

Agar polimixina lizosima edta acetato de talio, Agar con alcohol feniletlico

Agar bicarbonatado para indicar la formacin de la cpsula de B. anthracis

PRUEBAS BIOQUMICAS

Su identificacin se basa en la fermentacin de hidratos

de carbono, reduccin de nitratos, hidrlisis del almidn

API 50CH

PRUEBAS INMUNOCROMATOGRFICAS

El RED LINE ALERT TEST es un test inmunocromatogrfico destinado a la rpida,

identificacin presuntiva de Bacillus anthracis en colonias de Bacillus no hemolticas
cultivadas en placas de agar sangre de oveja. La prueba est diseada para su uso en
clnica, salud pblica y laboratorios de los hospitales en conjunto con otros marcadores
y pruebas para la identificacin presuntiva de
Bacillus anthracis.

PRUEBAS SEROLGICAS E INMUNOLGICAS

Se dispone de mtodo de hemaglutinacin indirecta y de ensayos inmunosorbentes

ligados a enzimas (ELISA) para detectar anticuerpos. Los antgenos (Ag) bacterianos
ms confiables para titular los anticuerpos sricos contra el ntrax son el Ag capsular y
los componentes de la exotoxina.

TRATAMIENTO, PREVENCIN Y CONTROL

El CIPROFLOXACINO es el frmaco de eleccin; se pueden usar

PENICILINA, DOXICICLINA, ERITROMICINA O CLORANFENINCOL.
Son resistentes a las SULFAMINADAS y a las CEFOLASPORINAS de
espectro ampliado

El control de la enfermedad humana requiere del control de la enfermedad del animal.

La vacunacin del ganado y de las personas de las zonas endmicas puede controlar la
enfermedad pero las esporas son difciles de eliminar de la tierra contaminada.

La vacuna del ntrax absorbida (VAA), y precipitada con hidrxido de aluminio

contiene el antgeno protector (AP) obtenido del Bacillus anthracis cepa Sterne. En los
humanos se administra por va subcutnea, en dosis 0.5mL, repetida a las 2 y 4 semanas
y a los 6, 12 y 18 meses con refuerzo anual. Quienes reciben tratamiento profilctico
con antibiticos deben ser protegidos adems con la vacuna.

BIBLIOGRAFA.

MURRAY, P y Col. Microbiologa Mdica. 5ta Edicin. Editorial Elsevier.

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LIPPINCOTT-R. Diagnstico Microbiolgico. 5ta Edicin. Editorial Mdica
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 FORBES, B. Diagnstico Microbiolgico. 12 Edicin. Editorial Mdica
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Panamericana. Madrid-Espaa. Pgs. 738-741. 2009.
RED NACIONAL DE VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA. Protocolo de
actuacin frente a esporas de Bacillus anthracis. Disponible en:
http://www.isciii.es/ISCIII/es/contenidos/fd-servicios-cientifico-tecnicos/fd-
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GRUPO DE MICROBIOLOGA COLOMBIA. Protocolo bsico para el
laboratorio para la identificacin presuntiva de Bacillus Anthracis. Disponible
en: http://cidbimena.desastres.hn/docum/ops/libros/antrax.pdf. Fecha de acceso:
Julio 2014.

En 1979 se produjo la liberacin accidental de esporas de carbunco en una instalacin

militar sovitica de microbiologa localizada en Rusia, con aproximadamente 70 casos
de carbunco por inhalacin, en un principio fueron considerados formas
gastrointestinales de carbunco hasta que aos despus se publicaron finalmente los
detalles de los mismos. Este brote y las revelaciones de que Irak haba producido
esporas de carbunco en 1991 plantearon la posibilidad del uso del carbunco como arma.
Por desgracia, esta posibilidad se materializ con la diseminacin de esporas de
carbunco a partir de envos postales en USA 2001, con 22 casos de carbunco humano y
cinco fallecimientos de pacientes, lo que hizo que una enfermedad que ya casi haba
sido casi olvidada en Europa y en Amrica del Norte fuera objeto de una intensa
atencin pblica y de un renovado inters cientfico y mdico.
Pases como Japn, Inglaterra, Estados Unidos de Amrica, Irak y Rusia han dispuesto
o disponen en la actualidad de esta arma biolgica.
Los siderforos son molculas quelantes de Fe(III) que poseen una afnidad
extremadamente alta por ste. Son sintetizados comnmente por los patgenos
bacterianos para la adquisicin de hierro en respuesta a su escasez en el ambiente
normal de los mamferos, ya que el hierro necesario para establecer una infeccin
exitosa se encuentra unido a diversas molculas del hospedador y su disponibilidad est
altamente regulada por mecanismos homeostticos. El fuerte crecimiento de B.
anthracis observado durante una infeccin, desde la captura de las esporas por los
fagocitos hasta la liberacin de los bacilos vegetativos desde los ndulos linfticos con
la subsiguiente infeccin sangunea, ha llevado a sugerir que la biosntesis de
siderforos es un requerimiento adicional para la virulencia (16).
B. anthracis produce dos siderforos distintos, la bacilibactina y la petrobactina,
llamadas inicialmenteantrabactina y antraquelina respectivamente, que le suministran el
hierro necesario durante los estadios de rpido crecimiento