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BIOQUMICA
Bucaramanga
1 Contenido
2 INTRODUCCIN ............................................................................................. 6
3 PRE INFORME DE LABORATORIO................................................................ 8
3.1 Portada....................................................................................................... 8
3.2 El ndice General........................................................................................ 8
3.3 Introduccin................................................................................................ 8
3.4 Revisin bibliogrfica ................................................................................. 8
3.5 Materiales y Mtodos ................................................................................. 9
3.6 Plan de Trabajo .......................................................................................... 9
3.7 Nomenclatura............................................................................................. 9
3.8 Referencias ................................................................................................ 9
3.9 Anexo ......................................................................................................... 9
4 INFORME DE LABORATORIO...................................................................... 10
4.1 Portada..................................................................................................... 10
4.2 Resumen.................................................................................................. 10
4.3 El ndice General...................................................................................... 10
4.4 Introduccin.............................................................................................. 10
4.5 Revisin bibliogrfica ............................................................................... 10
4.6 Materiales y Mtodos ............................................................................... 11
4.7 Resultados ............................................................................................... 11
4.8 Discusin.................................................................................................. 11
4.9 Conclusiones............................................................................................ 11
4.10 Recomendaciones ................................................................................ 11
4.11 Revisin bibliogrfica ............................................................................ 11
4.12 Referencias........................................................................................... 12
4.13 Anexo.................................................................................................... 12
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO ........................... 13
5.1 NORMAS PERSONALES ........................................................................ 13
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIN DE PRODUCTOS QUMICOS ......... 14
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIN DE INSTRUMENTACIN ................ 15
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA .................................................................. 15
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS...................................................... 15
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUMICAS DE LOS AMINOCIDOS. ......... 17
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO ........................................................ 20
6.2 REACCIN CON LA NINHIDRINA .......................................................... 21
6.3 REACCIN DE BIURET .......................................................................... 22
6.4 REACCION XANTOPROTEICA............................................................... 23
6.5 REACCION DE MILLON .......................................................................... 24
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI .................................................................. 25
6.7 PREGUNTAS:.......................................................................................... 27
7 Practica 3. BIOQUMICAS DE LAS PROTENAS .......................................... 29
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES ........................................................ 31
7.2 REACCIN DE BIURET .......................................................................... 32
7.3 REACCIN DE AMINOCIDOS AZUFRADOS ....................................... 34
7.4 DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE PROTENAS: MTODO
DE BRADFORD................................................................................................. 35
7.5 PREGUNTAS:.......................................................................................... 38
8 Prctica 4: IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS .................................. 40
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ....................................................... 44
8.2 PRUEBA DE BENEDICT ......................................................................... 45
8.3 REACCIN DE FEHLING........................................................................ 46
8.4 REACCIN DE MOLISCH ....................................................................... 47
8.5 PRUEBA DE TOLLENS ........................................................................... 48
8.6 REACCIN DE LUGOL (YODO) ............................................................. 50
8.7 PREGUNTAS........................................................................................... 50
9 Practica 5. CARACTERSTICAS DE LOS CIDOS GRASOS....................... 52
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ....................................................... 53
9.2 SOLUBILIDAD EN LPIDOS .................................................................... 53
SAPONIFICACIN ........................................................................................ 54
9.3 REACCIN CON EL SUDN III .............................................................. 55
9.4 PREGUNTAS:.......................................................................................... 56
10 BIBLIOGRAFA............................................................................................ 57
Tablas
El desarrollo del trabajo prctico se apoya en una serie de pasos que van
describiendo el progreso de una tcnica a travs de mediciones, clculos,
observaciones cualitativas y cuantitativas de los procedimientos
planteados en la gua. La prctica de laboratorio integra, en el estudiante
la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las tcnicas ms
habituales de un laboratorio bioqumico y aprendiendo a interpretar los
resultados experimentales.
3 PRE INFORME DE LABORATORIO
3.1 Portada
La pgina de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos
escritos, en el entorno de gestin encuentra un manual de normas APA.
La portada contiene el nombre la universidad, la escuela a que pertenece
el nombre de los integrantes del grupo con los datos necesarios para su
identificacin.
3.2 El ndice General
Presenta toda la informacin del contenido, incluyendo el ndice general,
el ndice de tablas, el ndice de figuras y el ndice de anexos
-ndice General
-ndice de Tablas
-ndice de Figuras
-ndice de Anexos
3.3 Introduccin
Describir las prcticas a desarrollar explicado las principales
caractersticas de las tcnicas, as como, descripcin de objetivos
generales y especficos que da lugar al trabajo experimental. Esta es una
seccin realizada, redactando las ideas de los autores o sea ustedes.
3.4 Revisin bibliogrfica
Consiste en presentar y describir un tema de acuerdo con las temticas
propuestas por la gua del componente prctico. Se toman los principales
aspectos tericos de acuerdo a la metodologa que se platea para
desarrollar en la gua. Tenga presenta que hay que dar los crditos
respectivos a los autores consultados y las ideas resultantes son
redactadas por el estudiante.
3.5 Materiales y Mtodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las
precauciones a tener, as como describir la informacin relvate que
permita el buen desarrollo de la prctica.
3.6 Plan de Trabajo
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y salir
de forma ordenada siguiendo en todo momento las instrucciones que haya
impartido el Profesor. Localizar al iniciar la sesin de prcticas los
diferentes equipos de emergencia en el correspondiente laboratorio:
Duchas y lavaojos, Botiqun, Absorbente para derrames, Alarma de
emergencia, Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
Tabla 2 Aminocidos proteicos con nomenclatura clsica sistema de tres letras y sistema de
una sola letra, impuesto en gentica molecular.
Nomenclatura
A Ala Alanina
G Gly Glicina
I Ile Isoleucina Ae
Apolares alifticos
L Leu Leucina Ae
V Val Valina
F Phe Fenilalanina Ae
Apolares aromticos
W Trp Triptfano Ae
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae
T Thr Treonina Ae
R Arg Arginina
Polar con carga
H His Histidina Ae
positiva
K Lys Lisina
NaOH Gradilla 2
albmina Estufa 1
Naftol
Hipoclorito de sodio
Reactivo de
Hopkins- Cole
cido sulfrico
(H2SO)
Reactivo de Milln
Aminocidos:
Glicina, tirosina,
triptfano,
fenilalanina y
arginina
Fenol
Albumina de huevo
Procedimiento
observe el cambio
de color
Hidrxido de Sodio
con 1.5 mL de
(NaOH
3 protena de Agregue 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
trigo 1%. 10% a cada tubo.
+
alfa-naftol
hipoclorito de Sodio
Hidrxido de Sodio
(NaOH
+
con 1.5 mL de
4 5 ml de solucin respectiva
Leucina alfa-naftol
hipoclorito de Sodio
NINHIDRINA
BIURET
XANTOPROTICA
COAGULACIN
ADAMKIEWICK o
HOPKINS COLE SULFATO DE AMONIO
MILLN
SAKAGUCHI
(+) Negro o
(-) Incolora gris
(+) Rojo
Otros Cistena,
Arginina
aminocidos cistina,
metionina
Tomada:
6.7 PREGUNTAS:
NaOH Gradilla 2
albmina Estufa 1
hidrxido
sdico Observar y tomar apuntes con 3 mL de
de los cambios. solucin
con 3 mL de +
3 respectiva
Leche 1% acetato de
plomo +
hidrxido
sdico
con 3 mL de +
5
Glucosa acetato de
plomo
1- Reactivo de Bradford
Azul de coomasie G-250 5 mg
Etanol 2.5 ml
cido fosfrico 5 ml
Agua Hasta 50 ml
Mezclar en el orden indicado, disolver con agitacin y a continuacin filtrar
METODO
l (alb) 0 10 20 30 40 50 60
V. leche (l) 20 25 30
RESULTADOS
1- Elaboracin de la recta patrn. Para ello representar en el papel
milimetrado adjunto la absorbancia de cada uno de los tubos que
contenan albmina bovina frente a la cantidad de protenas
correspondiente. Si se dispone de una calculadora con capacidad para
hacer rectas de regresin, compruebe el coeficiente de correlacin de la
recta obtenida. En cualquier caso determine la pendiente de la recta.
7.5 PREGUNTAS:
Referente terico.
NaOH +Calor
+R
Reaccin
-Sulfato cprico.
-Citrato de sodio.
Acetato cprico
Rotacin ptica
almidn Estufa 1
Probeta 100 ml
Baln aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analtica
con 3 ml de
reactivo de
1 Glucosa al
Benedict Preparar los tubos de Agregue a cada tubo
1%
ensayo. de ensayo 2
con 3 mL de
reactivo de ml de reactivo de
2 sacarosa al
Benedict Benedict
1% Agregue a cada tubo de
ensayo 2 +
con 3 mL
reactivo de
3 de almidn
Benedict
al 1%
con 3 mL ml de reactivo de Bao de agua
de jugo de reactivo de Benedict. hirviente por
4
cebolla al Benedict
10 minutos.
1%
Tubos de ensayo en un
con 3 mL de
reactivo de bao de agua hirviente
5 Fructosa al
Benedict por unos 10 minutos.
1%
con 3 mL reactivo de
6
de agua Benedict Observar y tomar apuntes
de los cambios. Positiva 3 ml de solucin
aparece un precipitado respectiva
rojizo, verde o amarillo.
10 minutos.
con 3 mL de Reactivo Fehling A
6 Observar y tomar apuntes de los
Lactosa al 1% Reactivo Fehling B cambios.
3 ml de solucin respectiva
reactivo de Molisch
con 3 mLde de
1 + Preparar los tubos de ensayo. reactivo de Molisch
Glucosa al 1%
H2SO4 +
+
reactivo de Molisch
con 3 mL de coloque el tubo en posicin
6 + vertical y observe la
maltosa al 1%
H2SO4 formacin del anillo rojo
violeta
NaOH al 5%
con 3 mL de solucin
1 + Preparar los tubos de ensayo. dos gotas de solucin de
Glucosa al 1%
AgNO3 al 5% -naftol
con 3 ml de solucin
1 lugol
Glucosa al 1%
Preparar los tubos de Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de solucin ensayo.
2 lugol
sacarosa al 1%
con 3 mL de solucin
3 lugol Agregar 5 gotas de lugol
almidn al 1%
con 3 mL de solucin
4 lugol
jugo de cebolla al 1% Observar y tomar apuntes
de los cambios.
con 3 mL de solucin
5 de almidn de papa al lugol
1%
3 ml de solucin respectiva
8.8 PREGUNTAS
Explique por qu el monosacrido gliceraldehido da negativa la prueba
Molish.
Los lpidos (del griego lypos, grasa) son biomolculas orgnicas formadas
bsicamente por
C, H y O, aunque este ltimo elemento se encuentra en proporciones
mucho ms bajas que los dos primeros. Adems, pueden contener P, N y
S. Constituyen un grupo de sustancias muy heterogneas con
caractersticas qumicas diversas, pero con algunas propiedades fsicas
comunes, que podran resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgnicos, tales como ter, cloroformo,
alcanos (ej: hexano), benceno, acetona y alcoholes.
Cridos
Complejos Fosfolpidos
Glucolpidos
Esteroides
Prostaglandinas
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantidad
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Estufa 1
Probeta 100 ml
Baln aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analtica
+
Observar y tomar apuntes de los Agite los tubos
cambios.
+
Dejar en reposo.
SAPONIFICACIN
Muchos lpidos, como por ejemplo: los cidos grasos, reaccionan con
bases fuertes, NaOH o KOH, dando sales sdicas o potsicas que reciben
el nombre de jabones. Esta reaccin se denomina de saponificacin. Son
saponificables los cidos grasos o los lpidos que poseen cidos grasos
en su estructura.
Agitar.
10 minutos.
con 3 mL de
2 Aceite Tinta roja Agregar 3mL de aceite vegetal.
vegetal
TORRES, G. (2013). 6. DESCRIPCIN DE PRCTICAS PRCTICA no. 1: METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION
DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS. UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA YA DISTANCIA.
Universidad de Bogot, & Jorge Tadeo Lozano. (2014). GUA no 9: ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS.
Retrieved from
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_7_carbohidratos.pdf
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-benedict.
http://www.academia.edu/6410068/BIOQUIMICA_INF_4
Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de Gestin de Residuos Peligroso. Recuperado el
15 de Enero de 2012, de http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf
http://veterinaria.uaemex.mx/_docs/603_958_MP%20Bioqu%C3%ADmica.pdf
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA
NOMBRE DEL CURSO: BIOQUMICA
RBRICA DE EVALUACIN PRCTICAS DE LABORATORIO.
Aspectos
Valoracin alta Valoracin media Valoracin baja Puntaje
evaluados
El estudiante viste ropa
adecuada y lleva el No viste
pelo recogido. Cumple adecuadamente y
PRESENTACIN estrictamente las no cumplen con
EN EL normas de ninguna de las 25
LABORATORIO laboratorio. Bata blanca normas bsicas de
y zapatos cerrados laboratorio.
(25) (0) (0)
El estudiante, asiste
puntualmente, trae al
El estudiante trae al El Estudiante no
laboratorio el gua de la
laboratorio el gua, trae gua, ni
prctica, los clculos
ms no hace una elementos
PREPARACIN necesarios ya
lectura previa de la necesarios para la
PREVIA DE LA planteados y la 25
misma y le faltan los realizacin de la
PRCTICA informacin necesaria
elementos exigidos prctica de
buscada y los
para la prctica. laboratorio.
elementos que
docentes exigi.
(25) (12) (0)
No lleva el pre
informe al
Desarrolla de forma
Desarrolla parte del laboratorio o lo
correcta todas las
pre informe pero lleva pero no
Pre informe exigencias del pre 20
alguna no es correcta. cumple con lo
informe
solicitado en la
gua.
(20) (12) (0)