DETERMINACIN AZCARES REDUCTORES CON DNS (cido 3,5 dinitro

saliclico).

Preparacin DNS:

Disolver 1.6 g de NaOH en H2O destilada.

Adicionar 30 g de tartrato de Na y K
Adicionar 1 g de DNS
Aforar a 100 mL con H2O destilada
Almacenar en frascos ambar a 4 C

Preparacin del stock de glucosa de 4 g/L: tomar 0.400 gr de glucosa anhidra

grado reactivo y disolver con un poco de agua destilada y luego aforar a 100 ml en
matraz volumtrico.

Preparacin de la curva:

N Dilucin Blanco 1 2 3 4 5 6
Glucosa mil stock 0.0 0.025 0.050 0.075 0.100 0.125 0.150
H2O destilada mil 0.500 0.475 0.450 0425 0.400 0.375 0.350
Volumen total mil 0.500 0.500 0.500 0.500 0.500 0.500 0.500
Gr./l de glucosa 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2

Preparar en cada tubo ( soluciones de curva patrn, las muestras problema

diluida si es necesario y agua como blanco) 0.5 ml de solucin en total
Adicionar 0.5 ml del reactivo del DNS a cada tubo
Agitar todos los tubos en Vortex
Llevar a ebullicin por 5 min en bao mara
Enfriar en un bao fro
Adicionar a cada tubo 5 ml de agua destilada
 Agitar en Vortex y dejar en reposo 15 min.
Leer a 540 nm.
Realizar la curva Absorbancia versus concentracin.

Diagrama de flujo

Determinacin de azucares reductores con el reactivo DNS

Soluciones de curva patrn, las muestras problema diluida si es

necesario y agua como blanco

Adicionar 0.5 ml del DNS

Agitar todos los tubos en Vortex

Llevar a ebullicin en bao mara por 5 min

Enfriar en un bao fro con hielo

Adicionar a cada tubo 5 mil de agua destilada

Agitar en Vortex y dejar en reposo 15 min

Leer a 540 nm.

Realizar la curva Absorbancia versus concentracin.