SISTEMA DE LA GESTION DE Fecha 22/07/2009

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDAR

LA CALIDAD Edicin 1
AREA: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
N LMA 02
TITULO: Procedimiento Operativo estndar de Recuento de Mesfilos.
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1. Objetivo
Detectar el nmero de Unidades Formadoras de Colonias de bacterias mesfilas
en Alimentos.

2. Alcance
Laboratorio de microbiologa de alimentos de la Planta de Procesamientos de
Alimentos de Gaira.

3. Responsabilidad
Ser responsabilidad de los aprendices e instructor encargados del Laboratorio
de Microbiologa de Alimentos.

4. Frecuencia
El recuento de mesfilos se realizar cada vez que la legislacin requiera dicho
anlisis, segn el tipo de alimento.

5. Contenido

5.1 Fundamento
Es el medio comnmente utilizado para determinar el nmero de clulas viables
o de unidades formadoras de colonias (UFC) en un alimento. Es un indicador
amplio en alimentos, ya que incluye todos lo gneros aerobios y facultativos
que crecen en medios simples a una temperatura entre 20 y 45C. Este
recuento se considera como indicador del grado de contaminacin de los
alimentos en cualquier etapa del proceso de produccin, permite tambin
obtener informacin sobre la alteracin incipiente de los alimentos y su
probable vida til.

5.2 Requisitos generales

El laboratorio de microbiologa deber contar con todos los equipos,
utensilios y reactivos necesarios para el anlisis de recuento de mesfilos.
El anlisis recuento de mesfilos debe hacerse con todas las precauciones
necesarias evitando su contaminacin y se deben tomar todos los cuidados
de asepsia conservando en todo momento las condiciones adecuadas de
temperatura y humedad.
Antes de incubar los mesfilos, debemos asegurarnos que las cajas de petri
estn bien rotulada y debe contener la mxima informacin posible.

5.3 Procedimiento para el anlisis de recuento de mesfilos

1. Colocarse la indumentaria correspondiente (bata, gorro, tapa boca y
polainas) antes de iniciar el anlisis.
2. Esterilizar la cabina de flujo laminar una hora antes de iniciar con el anlisis.
3. Alistar los materiales
4. Preparar la muestra y las diluciones del homogenizado tal y como se ha
recomendado en el POE de Preparacin y dilucin de los homogenizados de
las muestras de alimentos.
5. Teniendo en cuenta que el Recuento de Mesofilos se siembra en profundidad
debemos hacer lo siguiente:

Adicionar 1 ml de la dilucin seleccionada en una de las cajas de petri

Adicionar 15ml de Agar Plate Count

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

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Lilia Maria Corrales Lopesierra

 SISTEMA DE LA GESTION DE Fecha 22/07/2009
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDAR
LA CALIDAD Edicin 1
AREA: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
N LMA 02
TITULO: Procedimiento Operativo estndar de Recuento de Mesfilos.
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Homogenizar 5 veces en el sentido contrario de las manecillas del reloj, 5 veces

en el sentido de las manecillas del reloj, 5 veces hacia arriba y 5 hacia abajo
Repetir este proceso con cada una de las cajas de petri inoculadas
Hacer control de esterilidad del medio de cultivo incubando una caja de petri
que contenga 15 ml de Agar Plate Count
Hacer control de esterilidad del agua peptonada al 0.1% incubando 1 ml de
agua peptonada y Agar Plate Count
Esperar que el agar solidifique
Rotular con el nombre de la tcnica, No. De la muestra, responsable, fecha de
anlisis, fecha de lectura y dilucin sembrada.
Invertir las placas
Incubarlas a 35C +/- 2 C durante 24 48 horas
Informar los resultados en el informe.

6. Seguridad del operario:

Bata, gorro, tapabocas, polainas y guantes estriles

7. Materiales:
4 Cajas de Petri con A. Plate Count
1 Pipeta de 10 mL
1 Pipeteador
Cabina de flujo laminar
Balanza
Incubadora
Gradillas
Tenedores, pinzas, cuchillos, cuchara estriles
Cinta de rotular
Marcador

8. Anexo:
Composicin Agar Plate Count:

Triptona 5.0 g
Extracto de levadura 2.5 g
Glucosa 1.0 g
Agar-agar 10.5 g
PH final: 7.0 +/-0.2

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

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Lilia Maria Corrales Lopesierra