236 VOJENSK ZDRAVOTNICK LISTY RONK LXXII, 2003, .

MONOSTI PPRAVY 1-(4-HYDROXYIMINOMETHYLPYRIDINIUM)-

-3-(4-KARBAMOYLPYRIDINIUM)-PROPAN DIBROMIDU

Ji BIELAVSK, Kamil KUA, Ji CABAL, Marcela BIELAVSK

Katedra toxikologie Vojensk lkask akademie J. E. Purkyn, Hradec Krlov

Souhrn
Byla provedena syntza a in vitro testovn novho potencilnho reaktivtoru acetylcholinesterzy
(AChE) 1-(4-hydroxyiminomethylpyridinium)-3-(4-karbamoylpyridinium)-propan dibromidu. Reaktivan
innost u AChE inhibovan sarinem a VX je srovnateln se standardnm reaktivtorem HI-6, u tabunu je
reaktivan innost lep a u cyklosarinu je nedostaten.

Klov slova: Acetylcholinesterza; In vitro; Organofosft; Oxim; Reaktivace; HI-6.

Possibilities of 1-(4-Hydroxyiminomethylpyridinium)-3(4-Carbamoylpyridinium)-
-Propane Dibromide

Summary
Synthesis and in vitro testing of a new potential acetylcholinesterase (AChE) reactivator 1-(4-hydroxyimi-
nomethylpyridinium)-3-(4-carbamoylpyridinium)-propane dibromide have been carried out. Its reactivation
efficacy to sarin-inhibited AChE and VX is comparable to that of the standard reactivator HI-6. Its reactivation
efficacy to sarin is better than its efficacy to oxime HI-6 and its reactivation efficacy to cyclosarin is insufficient.

Key words: Acetylcholinesterase; In vitro; Organophosphate; Oxime; Reactivation; HI-6.

vod Dky irokmu spektru uvanch inhibitor

AChE dn z dosud studovanch reaktivtor
Organofosforov bojov chemick ltky (sarin, AChE nereaktivoval enzym inhibovan vemi orga-
soman, tabun, VX) inaktivuj enzym acetylcholine- nofosfty optimln. Proto se na vech pracovitch
sterzu (AChE) fosforylac i fosfonylac aktivn ve svt, kter se zabvaj touto problematikou,
sti tohoto enzymu (1, 2). Proces inhibice AChE je syntetizuj stle nov a nov reaktivtory, kter by
vtinou zvisl na chemick struktue inhibitoru, mohly reaktivovat ir spektrum organofosforo-
zatmco reaktivan proces zvis jak na pouitm vch inhibitor.
inhibitoru, tak na struktue reaktivtoru AChE. Do
souasnosti nejuvanjmi reaktivtory AChE
byly 2-PAM (pralidoxim) (3, 4, 5, 6), TMB-4
(trimedoxim) (7) toxogonin (obidoxim) (8) a ltka Cl prce
HI-6 (9, 10, 11, 12).
Pi terapii otrav bojovmi organofosfty se v
NOH NOH
posledn dob nejvce uplatuje reaktivtor acetyl-
cholinesterzy HI-6 [1-(2-hydroxyiminomethyl-
+ NOH
pyridinium)-3-4-karbamoylpyridinium)-2-oxapro-
N
X
-
CH3 + + - pan dichlorid] (9, 10, 11, 12). Jeho nevhodou je
N N 2X ni stabilita pitan oxapropanovmu mstku.
CH2 CH2 CH2
Star reaktivtor TMB-4 [1,3-bis(4-hydroxyimino-
2-PAM TMB-4 methyl-pyridinium) propan dibromid] (7) tmto
NOH NOH O NH2 neduhem netrp. Proto jsme se rozhodli syntetizovat
dosud nepopsanou sloueninu sluujc aktivn 4-
-pyridinaldoximovou st reaktivtoru, kter je sou-
-
N
+
N 2X
+
HON + + - st molekuly TMB-4, s kvarternizovanm isoni-
N N 2X
CH2 O CH2 kotinamidem, jen je obsaen v ltce HI-6, a ovit
CH2 O CH2
jej reaktivan innost.
Toxogonin HI-6
RONK LXXII, 2003, . 5 VOJENSK ZDRAVOTNICK LISTY 237

H2N O NOH NOH Tabulka 1

Reakce Podmnky Vtek % Bod tn C

+ + NOH + +
N N N N
- 2X
- CH3CN,
CH2 O CH2 2X CH2 CH2 CH2 1 73 179182
70 C, 40 h
EtOH,
2 72 214217
reflux, 36 h
H2N O NOH
CHCl3,
3 55 178181,5
reflux, 144 h
N
+ +
N DMFA
4 34 205210
80 C, 72 h
-
CH2 CH2 CH2 2X

ve vech experimentech uito 10% homogentu z

Experimentln st krysch mozk.
Aktivita AChE byla mena potenciostatickou
Syntetick st titrac kyseliny octov uvolnn pi reakci acetyl-
Jak plyne ze struktury ltky, existuj dv zkladn cholinjodidu. Men byla provdna pi pH 8, tep-
cesty jej syntzy. Prvn vychz z isonikotinamidu [1], lot 25 C a koncentraci reaktivtoru 10-3 M. Jako in-
kter reakc s ptinsobnm nadbytkem 1,3-di- hibitor bylo uito nervov paralytickch ltek sarin
brompropanu poskytuje 1-(3-brompropyl)-4-karba- (O-isopropylmethylfluorofosfont), tabun (O-ethyl-
moyl-pyridinium bromid [2] (reakce 1), jeho reakc dimethylamidokyanofosft), cyklosarin (cyklohe-
s 4-pyridinaldoximem [3] (reakce 2) vznik kone- xylmethylfluorofosfont) a ltky VX (O-ethyl-S-/2-
n produkt [4]. Druh reakn cesta zahrnuje reakci -diisopropylaminoethyl/-methylthiofosfont).
1,3-dibrompropanu s 4-pyridin-aldoximem [3] Schopnost studovanho oximu in vitro reaktivo-
(reakce 3) a nsledn je vzniklm produktem [5] vat sarinem, tabunem, cyklosarinem a VX inhibova-
kvarternizovn isonikotinamid [1] (reakce 4). nou AChE je vyjdena v procentech sarin 33 %,
tabun 10 %, cyklosarin 0 % a ltka VX 70 %.

O NH2 O NH2
Zvr
BrC H2CH2CH 2 Br

+
Pi porovnn obou reaknch cest se jev jako
N - N
Br idelnj postup vychzejc z isonikotinamidu,
CH2CH2CH2Br
3 jeho celkov vtek in 52 %, zatmco vtek
1 2 druh reakn cesty vychzejc z 4-pyridinaldoximu
O NH2 NOH je pouhch 19 %. Akoli body tn finlnho produk-
tu 4 vzniklho odlinm syntetickm postupem nejsou
toton, identita produktu byla ovena pomoc
+ + - UV-VIS spektroskopie, I spektroskopie a HPLC.
N N 2Br
NOH NOH CH2 CH2 CH2
Syntetizovanou ltku je mono hodnotit dky
biochemickm vsledkm jako stedn inn reak-
4
BrCH2CH2CH 2 Br
1
tivtor.
+
N - N Podkovn
Br
CH2CH2CH2Br Autoi dkuj pan Martin Hrabinov a Ivan Jekov za
3 5 odbornou spoluprci.

Literatura
Srovnn obou cest je uvedeno v tabulce 1.
1. ELLIN, RI. WILLS, JH. J. Pharm. Sci., 1964, vol. 53, 995.
2. KRUPKA, RM. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1965,
Biochemick st vol. 19, 531.
Reaktivan schopnost nov syntetizovan ltky 3. WILSON, IB. GINSBURG, S. Biochim. Biophys. Acta.,
4 byla ovena standardnm testem s elektrometric- 1955, vol. 18, 168.
kou instrumentac (13, 14). Jako zdroje AChE bylo 4. WILSON, IB. GINSBURG, S. MEILISCH, EK.
238 VOJENSK ZDRAVOTNICK LISTY RONK LXXII, 2003, . 5

J. Am. Chem. Soc., 1955, vol. 77, 4286. 13. PATOKA, J. BIELAVSK, J. Collect. Czech. Chem.
5. GINSBURG, S. WILSON, IB. J. Am. Chem. Soc., 1957, Commun., 1975, vol. 40, 1794.
vol. 79, 481. 14. KASSA, J. CABAL, J. Hum. Exp. Tox., 1999, vol. 18, 560.
6. CHILDS, AF. DAVIES, DR. GREEN, AL.
RUTLAND, JP. Brit. J. Pharmacol., 1955, vol. 10, 462.
7. POZIOMEK, EJ. HACKLEY, BE. STEINBERG, Korespondence: Ing. Ji Bielavsk
GM. J. Org. Chem., 1958, vol. 23, 714. Katedra toxikologie
8. LTTRINGHAUS, A. HAGENDORN, I. Arzneimittl. Vojensk lkask akademie J. E. Purkyn
Forsch., 1964, vol. 14, 1. Tebesk 1575
500 01 Hradec Krlov
9. LTTRINGHAUS, A. HAGENDORN, I. Patent BRD
e-mail: bielavsky@pmfhk.cz
1190941, 1960.
10. HAGEDORN, I. Patent 3852294, 1974.
11. HAGEDORN, I. Patent 3773775, 1973.
12. CHRISTOVA, N., et al. Patent Bul. 74036, 1985. Do redakce dolo 18. 10. 2002