TEMA 40: CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXÍLICOS. REGULACIÓN.

BALANCE
ENERGÉTICO DE LA RESPIRACIÓN. LANZADERAS DEL NADH CITOPLASMÁTICO.
EFECTO PASTEUR.

El ciclo de los ácidos tricarboxílicos es la vía final común para la oxidación de las moléculas
energéticas: aminoácidos, ácidos grasos, H de C.

CICLO DE KREBS:
En condiciones aerobias, el piruvato generado a partir de la glucosa sufre una descarboxilación oxidativa
para dar acetil-CoA. En las eucariotas, las reacciones suceden en el interior de la mitocrondria, mientras
que la glucólisis es en el citoplasma.
El acetil-CoA es el combustible del ciclo del ácido cítrico.
El ciclo se compone de 8 reacciones cuyo fin es la descarboxilación de la molécula inicial de dos
carbonos transportada por el CoA.

- Reacción 1: condensación con n intermediario del ciclo.

El ciclo comienza con la condensación de una unidad de cuatro carbonos (oxalacetato), con una
unidad de dos carbonos (grupo acetilo) de la acetil-CoA.

Reacción catalizada por la citrato sintasa.

El aporte para que se produzca la reacción es dado por la hidrólisis del enlace tioéster de la CoA, por
eso la reacción es irreversible.
Pasamos de un de un dicarboxílico a un tricarboxílico.
- Reacción 2: isomerización del citrato.
L grupo hiroxilo triario no se encuentra bien situado para sufrir la descarboxilación oxidativa siguiente.
Por tanto, el citrato se isomeriza a isocitrato para permitir que la unidadde seis carbonos sefra una
descarboxilación oxidativa.
La isomerización se consigue mediante una etapa de deshidratación seguida por una de hidratación.
Intermediario de la reacción es el cis-aconitato, no se separa del enzima.
Catalizada por la aconitasa.

La aconitasa es una ferro-sulfoproteína, capaz de orientar el sustrato y el producto.

El núcleo de hierro de la aconitasa facilita las reacciones de deshidratación e hidratación.
- Reacción 3: el isocitrato se oxida y descarboxila hasta α-cetoglutarato.
Es la primera de las cuatro reacciones de oxido-reducción del ciclo.
El intermediario de esta reacción es el oxalsuccinato, un ß-cetoglutarato inesstable. Mientras está
ligado ala enzima pierde CO2 para dar α-cetoglutarato.
Reacción catalizada por la isocitrato deshidrogenasa.

Se genera el primer portador de electrones de alta energía NADH del ciclo.

Se desprende la primera molécula de CO2 proveniente del aldehído.
- Reacción 4: descarboxilación oxidativa del α-cetoglutarato.
La descarboxilación oxidativa del α-cetoglutarato se parece mucho a la del piruvato.
Catalizada por el complejo α-cetoglutarato deshidrogensa.
En la reacción se produce la segunda molécula de CO2 y energía en forma de poder reductor NADH.

Complejo α-cetoglutarato deshidrogenasa tiene tres actividades diferentes, se asemeja al complejo

piruvato deshidrogenasa.
E1: α-cetoglutarato deshidrogensa. (TPP)
E2: trans-succinilasa (lipoico)
E3: dihidrolipoilo deshidrogensa (FAD), es común para todos los complejos α-cetodeshidrogenasa.

- Reacción 5: se genera un compuesto con alto potencial de transferencia de grupos fosfato

La rotura del enlace tioéster del succinil-CoA se acopla a la fosforilación de un nucleósido bifosfato de
purina (GDP).
Catalizada por la succinil-CoA sintetasa.
El enzima es un heterodímero α2ß2; la unida funcional es la pareja αß.
El enzima evita la ruptura pirofosforílica del GTP.

- Reacción 6: deshidrogenación dependiente de FAD

Catalizada por la succinato deshidrogensa, es dependiente de FAD.
La enzima es muy específica ya que reconoce la cara de la que tiene que quitar los H.

- Reacción 7: hidratación d un doble enlace carbono-carbono

Catalizada por la fumarasa.
La enzima cataliza una adición estereoespecífica en trans de un átomo de hidrógeno y un hidroxilo. El
grupo hidroxilo se añade solamente a un lado del doble enlace del fumarato; por lo tanto, SÓLO se
puede dar el isómero L-malato.

- Reacción 8: deshidrogenación que regenera oxalacetato.

Catalizada por la malato deshidrogensa, dependiente de NAD+.
ESTEQUIOMETRÍA Y RENDIMIENTO ENERGÉTICO:
El ciclo siempre va en dirección horaria porque es muy exergónico.

Cada NADH produce 2,5 ATP (C.actuales)/ 3ATP (C.originales) y cada FADH2 produce 1,5 ATP
(C.actuales) y 2 ATP (C.originales), en el transporte de electrones de la fosforilación oxidativa.

CICLO COMPLETO

En cada ciclo el CO2 que se desprende NUNCA proviene de los dos carbonso del grupo acetilo de
acetil-CoA.

CONTROL DEL CICLO DE KREBS:

Los puntos de control son los enzimas alostéricos citrato sintasa, isocitrato deshidrogensa y el
complejo α-cetoglutarato deshidrogenasa.

Citrato sintasa ADP (+)

NADH, succinil-CoA, citrato, ATP (-)
Es importante su regulación porque una vez iniciado el ciclo no se puede parar.

Isocitrato deshidrogenasa ATP (-)

Ca2+, ADP (+)

Α-cetoglutarato deshidrogenasa Succinil-CoA, ATP, NADH (-)

Ca2+ (+)
Se regula covalentemente igual que la piruvato deshidrogenasa.
LANZADERAS DE NADH:
El NADH producido en la glucolisis (esta en el citoplasma) se debe regenerar y para ellodebe entrar en
la mitocondria.
El NADH no puede entrar tal cual en la mitocondria porque la membrana interna mitocondrial es
impermeable al NADH y al NAD+. La solución consiste en que sean los electrones del NADH quines
atraviese la membrana mitocondrial.
Existen dos maneras para que lo haga:
- Lanzadera malato/aspartato.
- Lanzadera glicerol 3-fosfato.
La operación de de estas lanzaderas de sustrato requiere qe los enzimas adecuados estén localizados en
el lado correcto de al membrana y que estén presentes los transportadores apropiados dentro de la
membrana mitocondrial interna y sobre ella.
- Lanzadera de glicerol 3-fosfato.
Intervienen dos glicerol fosfato deshidrogenasa diferentes, una localizada en el citosol y otra en la cara
externa de la membrana interna mitocondrial.
Al primera etapa de la lanzadera consiste en la transferencia de un para de electrones desde el NADH a
la dihidroxiacetona fosfato, un intermediario de la glucólisis, para dar glicerol 3-fosfato.
Esta reacción esta catalizada por la glicerol 3-fosfato deshidrogenasa citosólica.
El glicerol 3-fosfato se reoxida a dihidroxiacetona fosfato en la cara externa de la membrana
mitocondrial interna mediante la glicerol 3-fosfato deshidrogenasa mitocondrial.
Un par de electrones del glicerol 3-fosfato se transfieren al FAD para formar FADH2.
El FADH2 transfiere sus electrones al transportador de electrones Q, que posteriormente se incorpora en
la cadena respiratoria en forma de QH2.

Cuando la cadena respiratoria oxida el

NADH citosólico que transporta la
lanzader de glicerol 3-fosfato se forma
SÓLO 1,5 ATPs.

- Lanzadera aspartato/malato:
El NADH citosólico reduce al oxalacetato a malato que entra en la mitocondria mediante el
transportador de ácidos dicarboxílicos. Este malato es oxidado rápidamente por la malato
deshidrogenasa mitocondrial para formar oxalacetato y NADH, que es oxidado por la cadena de
transporte electrónico. El oxalacetato producido se convierte seguidamente en aspartato por la
aspartato aminotransferasa mitocondrial ya que la membrana interna no contiene un transportador
específico de oxalacetato. El aspartato puede cruzar la membrana mediante el transportador de
aspartato-glutamato hacia el citosol, en donde la aspartato aminotransferasa citosólica lo convierte en
oxalacetato.
La lanzadera malato/aspartato es reversible y sirve como mecanismo para transportar equivalentes
de reducción fuera de la matriz mitocondrial.

EFECTO PASTEUR
Es la diferencia de consumo de glucosa de una célula facultativa cuando pasa a crecer en presencia de
oxígeno.