Professional Documents
Culture Documents
ABSTRACT
Lunasia amara Blanco is a popular medicinal plant which is known as aphrodisiac in South Sulawesi
Province. Biological activity as antibacterial, anticancer dan antituberculosis were also scientifically
reported. This study is to ascertain the safety and quality of the plant extract by standardization
procedures mentioned in literature, including specific and non-specific parameters. The result showed that
ethyl acetate wood extract of L. amara Blanco, which is brown viscous extract, astringent to the taste and
characteristic odor, contain water-soluble extractive matters of 23,95 2,192 %, ethanol-soluble
extractive matters of 67,05 3,61 %, water content of 5,33 0,407 %, total ash content of 0,65 0,199
%, acid-insoluble ash content of 0,58 0,225 %, density of 0,7734 0,0016 (5%) and 0,7957 0,0021
(10%), total contaminant number of bacteria and fungus of each < 1 x 104 colony/g, and Pb concentration
of 10,59 0,239 mg/kg. Ethyl acetate wood extract of L. amara Blanco has been qualified as
standardized extract. Therefore, this study can be a reference for identification and control quality of the
extract as a herb-medicine material
Key words : Sanrego, Lunasia amara, Standardization, Specific Parameter, Non Spesific Parameter
ABSTRAK
Kayu sanrego (Lunasia amara Blanco) telah dikenal penggunaannya sebagai jamu obat kuat lelaki di
daerah Sulawesi Selatan. Selain itu, tanaman ini juga dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri,
antikanker dan antituberculosis. Untuk dapat digunakan sebagai bahan aktif sediaan obat, perlu dilakukan
standarisasi ekstrak untuk menjamin mutu dan keamanannya. Standarisasi ekstrak etil asetat kayu
Sanrego (L. amara Blanco) telah dilakukan sesuai dengan metode standarisasi dari literatur, yang meliputi
penentuan parameter spesifik dan non spesifik. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat
dengan karakteristik berupa ekstrak kental berwarna coklat tua, rasa sepat dan berbau khas, mengandung
kadar senyawa yang larut dalam air sebesar 23,95 2,192 %, kadar senyawa yang larut dalam etanol
sebesar 67,05 3,61 %, kadar air sebesar 5,33 0,407 %, kadar abu sebesar 0,65 0,199 %, kadar abu
tidak larut asam sebesar 0,58 0,225 %, berat jenis ekstrak sebesar 0,7734 0,0016 (5%) dan 0,7957
0,0021 (10%), total cemaran bakteri dan kapang masing-masing < 1 x 104 koloni/g dan kadar logam
timbal (Pb) sebesar 10,59 0,239 mg/kg. Ekstrak etil asetat kayu sanrego telah memenuhi syarat sebagai
ekstrak terstandar sehingga diharapkan dapat menjadi acuan dalam identifikasi dan kontrol kualitas
ekstrak dalam penggunaanya sebagai bahan obat.
Kata kunci : Sanrego, Lunasia amara, Standarisasi, Parameter Spesifik, Parameter Non Spesifik
1
Online Jurnal of Natural Science, Vol. 2(3) : 01-08 ISSN: 2338-0950
Desember 2013
II. BAHAN DAN METODE freeze drier untuk memastikan seluruh pelarut
2.1 Bahan Tanaman telah menguap maksimal. Ekstrak siap sebagai
Bahan tanaman (kayu sanrego) diambil sampel untuk distandarisasi
dari desa Siawung, kabupaten Barru, Sulawesi 2.5 Standarisasi Ekstrak (Departemen
Selatan pada bulan Juli 2013. Tanaman telah Kesehatan RI, 2000)
dideterminasi oleh Yayasan Keragaman Hayati Penentuan parameter non spesifik
Sulawesi (KHAS), Makassar, Indonesia 1. Penentuan kadar air
2.2 Bahan Kimia Sejumlah 0,1 g ekstrak ditimbang
Metanol (Merck), n-heksana (Merck), dalam krus porselen bertutup yang
etil asetat (Merck), kloroform (Merck), Nutrien sebelumnya telah dipanaskan pada suhu
Agar (Merck), Potato Dextrose agar (PDA),
1050C selama 30 menit dan telah ditera.
H2SO4 pekat, HCl, HNO3, dan HClO4 (Merck),
Diratakan dengan menggoyangkan hingga
Etanol (Merck), dan Aquadest
merupakan lapisan setebal 10 15 mm dan
2.3 Alat
dikeringkan pada suhu penetapan hingga
Seperangkat alat ekstraksi refluks, rotary
evaporator, neraca analitik, oven, tanur, krus
bobot tetap, tutupnya dibuka, dibiarkan krus
silikat, cawan petri, cawan penguap, autoklaf, dalam keadaan tertutup dan mendingin
penangas air, desikator, inkubator, coloni dalam desikator hingga suhu kamar,
counter, dan Spektrofotometer serapan atom kemudian dicatat bobot tetap yang diperoleh
(SSA) untuk menghitung persentase susut
2.4 Pembuatan ekstrak etil asetat pengeringannya
Kayu sanrego dibersihkan dan
Berat sebelum pengeringan Berat akhir
Kadar Air = 100%
dikeringkan di bawah sinar matahari tidak Berat sebelum pengeringan
kemudian diekstraksi kembali dengan etil asetat suhu dinaikkan secara bertahap hingga 600
selama 4 jam. Proses ini diulangi sebanyak 2 250C sampai bebas karbon, selanjutnya
kali. Filtrat dikumpulkan lalu diuapkan dengan didinginkan dalam desikator, serta
evaporator hingga diperoleh ekstrak etil asetat ditimbang berat abu. Kadar abu dihitung
kental. Penguapan selanjutnya dilakukan dalam dalam persen berat sampel awal. Abu
yang diperoleh dari penetapan kadar abu, ekstrak dengan asam nitrat dan hydrogen
kemudian dididihkan dengan 25 ml asam peroksida, kadar Pb ditentukan dengan
klorida encer P selama 5 menit, bagian spektrofotometri serapan atom. Ditimbang
yang tidak larut asam dikumpulkan, teliti 0,799 g timbal nitrat Pb(NO3)2
disaring melalui kertas saring bebas abu, kemudian dilarutkan ke dalam labu ukur
dicuci dengan air panas, disaring dan 500 ml dengan air suling, dicukupkan
ditimbang, ditentukan kadar abu yang tidak volumenya. Dibuat beberapa konsentrasi 1,
larut asam dalam persen terhadap berat 2, 4, 8, dan 10 ppm. Ditimbang teliti 45 mg
sampel awal. sampel ekstrak kemudian dimasukkan ke
Berat awal Berat akhir dalam labu kjeldahl, ditambahkan 5 ml
Kadar Abu = 100%
Berat awal
HNO3 p.a. dan 1 ml HClO4 p.a. lalu
3. Penentuan total bakteri dan total kapang didestruksi pada suhu 2000C sampai
a. Penentuan total bakteri diperoleh larutan jernih, dimasukkan ke
Sejumlah 1 ml ekstrak dari pengenceran dalam labu ukur 10 ml, dicukupkan
-4
10 dipipet dengan pipet steril, kemudian volumenya. Kadar logam Pb diukur
ditanamkan dalam medium NA, lalu diinkubasi menggunakan AAS pada 217 nm.
pada suhu 37C selama 24 jam. Kemudian
diamati dan dihitung jumlah koloni yang tumbuh
5. Penentuan bobot jenis
dan dikalikan dengan faktor pengenceran.
Bobot jenis ekstrak ditentukan
Dilakukan replikasi sebanyak tiga kali.
terhadap hasil pengenceran ekstrak 5% dan
b. Penentuan total kapang
10% dalam pelarut etanol dengan alat
Sejumlah 1 ml ekstrak dari pengenceran
10-4 dipipet dengan pipet steril, kemudian piknometer. Digunakan piknometer bersih,
ditanam dalam medium PDA, lalu diinkubasi kering dan telah dikalibrasi dengan
pada suhu 25C selama tiga hari. Kemudian menetapkan bobot piknometer dan bobot air
diamati dan dihitung jumlah koloni yang tumbuh yang baru dididihkan pada suhu 25oC. Suhu
dan dikalikan dengan faktor pengenceran. diatur hingga ekstrak cair lebih kurang 20oC,
Dilakukan replikasi sebanyak tiga kali. lalu dimasukkan ke dalam piknometer.
Diatur suhu piknometer yang telah diisi
4. Penentuan batas logam berat
hingga suhu 25oC, kelebihan ekstrak cair
Penentuan batas logam Pb di dalam
dibuang dan ditimbang. Kurangkan bobot
ekstrak dilakukan secara destruksi basah
piknometer kosong dari bobot piknometer
yang telah diisi. Bobot jenis ekstrak cair berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama
adalah hasil yang diperoleh dengan dan kemudian dibiarkan selama 18 jam.
membagi bobot ekstrak dengan bobot air, Disaring cepat dengan menghindari
dalam piknometer pada suhu 25oC penguapan etanol, kemudian diuapkan 2ml
Bobot pikno sampel bobot pikno kosong
Bobot jenis = filtrat hingga kering dalam cawan penguap
Bobot pikno air bobot pikno kosong
yang telah ditera, residu dipanaskan pada
Penentuan parameter spesifik suhu 1050C hingga bobot tetap. Dihitung
1. Pemeriksaan organoleptik, meliputi
kadar dalam persen senyawa yang larut
bentuk, warna, rasa dan bau. Pegujian
dalam etanol terhadap berat ekstrak awal.
ini dilakukan dengan menggunakan
panca indera langsung.
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
2. Penetapan kadar senyawa terlarut
Pada penelitian ini, digunakan sampel
dalam pelarut tertentu.
kayu Sanrego (L. amara Blanco). Setelah kayu
a. Kadar senyawa yang larut dalam air.
dibersihkan dan kulit kayunya dipisahkan, maka
Sejumlah 0,5 g ekstrak disari selama
kayu dikeringkan-anginkan untuk mengurangi
24 jam dengan10 ml air-kloroform LP,
kadar air. Setelah itu, kayu dipotong kecil-kecil
menggunakan labu bersumbat sambil
dengan tujuan untuk menambah luas permukaan
berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama sampel sehingga ketika diekstraksi, maka pelarut
dan kemudian dibiarkan selama 18 jam, dapat terabsorpsi maksimal ke dalam kayu,
kemudian disaring. Diuapkan 2 ml filtrat sehingga hasil ekstraksi dapat optimal. Pada
hingga kering dalam cawan penguap, residu proses ekstraksi dilakukan dengan metode
dipanaskan pada suhu 105C hingga bobot refluks karena tekstur kayu yang keras. Pelarut
tetap. Dihitung kadar dalam persen senyawa ekstraksi digunakan pelarut n-heksana dan etil
asetat secara berturut-turut. Pelarut n-heksana
yang larut dalam air terhadap berat ekstrak
digunakan pertama kali karena bersifat kurang
awal.
polar dibandingkan etil asetat, sehingga dangan
ektraksi n-heksana terlebih dahulu maka akan
b. Kadar senyawa yang larut dalam
menarik komponen kimia yang bersifat kurang
etanol
polar, seperti lipid, lilin, dll. Setelah itu, residu
Sejumlah 0,5 g ekstrak dimaserasi kayu hasil ekstraksi n heksana dikeringkan
selama 24 jam dengan 10 ml etanol 95% beberapa menit lalu dilanjutkan dengan ekstraksi
menggunakan labu bersumbat sambil menggunakan etil asetat untuk menarik
komponen kimia yang bersifat lebih polar. Dari Kadar senyawa yang larut dalam air dan
hasil ekstraksi kayu sanrego sebanyak 2,6 kg, dalam etanol adalah masing-masing sebesar
diperoleh ekstrak n-heksana sebesar 2,04 g dan 23,95% 2,192 dan 67,05% 3,61. Hal ini
ekstrak etil asetat sebesar 4,06 g (0,15% dihitung berarti ekstrak lebih banyak terlarut didalam
terhadap berat awal). etanol daripada di dalam air. Kadar zat
Ekstrak etil asetat diperoleh setelah
terlarut ini merupakan uji kemurnian ekstrak
dilakukan penguapan pelarut dengan
untuk mengetahui jumlah terendah
menggunakan rotary evaporator. Untuk
kandungan kimia ekstrak yang terlarut
memastikan seluruh pelarut telah menguap,
dalam pelarut tertentu.
maka ekstrak dikering-bekukan dalam freeze
drier. Selanjutnya dilakuan pengujian
Kadar air dalam ekstrak sebesar 5,33%
standarisasi ekstrak etil asetat. Hasil pengujian 0,407. Hasil ini telah sesuai dengan
standarisasi ekstrak etil asetat Kayu Sanrego persyaratan dimana kadar air untuk ekstrak
(Lunasia amara Blanco) dapat dilihat pada tabel kental adalah antara 5 30%. Hal ini
1. bertujuan untuk menghindari cepatnya
hingga tersisa unsur mineral dan unsur masing-masing < 1 x 104 koloni/gram. Hasil
anorganik saja. Diperoleh kadar abu dalam ini memenuhi persyaratan batasan
ekstrak sebesar 0,65 0,199 %, sedangkan maksimum mikroba dalam makanan
kadar abu tidak larut asam diperoleh sebesar menurut SK Dirjen POM No.
0,58 0,225 %. Hal ini menunjukkan bahwa 03726/B/SK/VII/89 yaitu batas maksimum
sisa unsur mineral dan anorganik dalam sebesar 106 koloni/gram. Tidak ditemukan
ekstrak sebesar 0,65 0,199 %, dan unsur pula pada biakan dalam medium PDA ciri
tersebut tidak larut dalam asam sebesar 0,58 mikroskopis biakan Aspergillus flavus,
0,225 % (Helmi dkk, 2006). koloni yang tumbuh dengan karakteristik
Penentuan bobot jenis ditentukan berwarna kuning muda dan hifa tidak
dengan menggunakan piknometer. Ekstrak bersekat, sehingga penentuan angka
yang digunakan adalah ekstrak yang telah aflatoksin tidak dilanjutkan. Aflatoksin
diencerkan dengan etanol 96% hingga merupakan metabolit sekunder yang
menjadi konsentrasi 5% dan 10%. Ekstrak dihasilkan jamur yang dapat menyebabakan
5% memiliki bobot jenis sebesar 0,7734 toksigenik, mutagenik, teratogenik dan
0,0016, sedangkan ekstrak 10% memiliki karsinogenik (Helmi dkk, 2006).
bobot jenis sebesar 0,7957 0,0021. Hal ini Pemeriksaan kadar logam berat (Pb)
menggambarkan besarnya massa per satuan pada ekstrak bertujuan untuk menjamin
volume untuk memberikan batasan antara bahwa ekstrak tidak mengandung logam
ekstrak kental dan ekstrak cair. Bobot jenis berbahaya timbal melebihi batas yang
juga berkaitan dengan kontaminasi dan ditetapkan karena dapat bersifat toksik pada
kemurnian ekstrak (Departemen Kesehatan tubuh manusia. Pada pengujian ini dilakukan
RI, 2000) dengan menggunakan metode
Pengujian cemaran bakteri dan kapang spektrofotometri serapan atom (SSA) karena
merupakan saah satu uji untuk kemurnian memiliki batas seleksi rendah dan lebih
ekstrak. Uji ini mencakup penentuan jumlah selektif dalam menentukan kadar logam
mikroorganisme yang diperbolehkan dan dalam suatu sampel. Hasil penelitian
untuk menunjukkan tidak adanya adanya menunjukkan kandungan logam Pb dalam
bakteri atau kapang tertentu di dalam ekstrak etil asetat kayu sanrego sebesar
ekstrak. Hasil penelitian menunjukkan 10,59 0,239 mg/kg. Hasil ini telah
cemaran bakteri dan kapang dalam ekstrak memenuhi persyaratan batas maksimum