Manual de Practcas Fitomejoramiento

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Manual de Prcticas de Fitomejoramiento General UNALM - Facultad de Agronoma
UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA
FACULTAD DE AGRONOMIA
DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA
ELAS HUGO HUANUQUEO COCA

La Molina, Agosto 2015
PRCTICA N 01
Organizacin de un Programa de Mejoramiento Gentico de Plantas

I Introduccin
Las instituciones que realizan actividades de mejoramiento gentico en el mundo son: i) los Centros
Internacionales, que en alianza estratgica con el Grupo Consultivo para la Investigacin Agrcola
Internacional (CGIAR) se dedican a reducir la pobreza rural, el aumento de la seguridad alimentaria,
mejorar la salud y la nutricin humanas, y garantizar una gestin ms sostenible de los recursos
naturales se, entre los centros internacionales se tiene: El Centro Internacional de la Papa (CIP)en el
Per, el Centro Internacional de Mejoramiento de Maz y Trigo (CIMMYT ) en Mxico, el
Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT)en Cali Colombia, el Instituto Internacional de
Agricultura Tropical (IITA) en Ibadan, Nigeria, el Instituto de Investigaciones en Arroz (IRRI) en
Filipinas y Bioversity Internacional encargada de los recursos genticos en Roma, Italia, entre otros;
ii) las entidades estatales (universidades e INIA) y iii) las entidades privadas (universidades, los
consorcios internacionales como Monsanto, Pionner International, etc.). En el Per destacan el
Instituto Nacional de Innovacin Agraria (INIA) en sus estaciones experimentales que se encuentran
en la costa, sierra y selva. Tambin las universidades nacionales a travs de los programas de
investigacin y proyeccin social e instituciones privadas.
En la actualidad el trabajo del mejorador se realiza en equipo. El fitogenetista o mejorador se
encuentra apoyado por agrnomos, fisilogos, fitopatlogos, entomlogos, bilogos moleculares,
estadsticos, nutricionistas, meteorlogos, etc. El mejorador es elemento clave en tal equipo puesto
que debe ser l quien trace las lneas fundamentales de accin, esto es, los objetivos del programa y
los problemas a resolver. El mejorador es el elemento crucial y central en las operaciones que
conducen a la obtencin de una nueva variedad.
Un plan de mejora puede ser muy simple y sin embargo el punto crtico a resolver puede caer lejos del
conocimiento profesional del mejorador, por ejemplo, un problema de fisiologa vegetal, de diseo
estadstico etc. Es evidente que el mejorador debe estar familiarizado con las diversas tcnicas que
estn implicadas en el trabajo. Su responsabilidad consiste en detectar problemas y decidir el sistema
de mejora idnea, pero con el convencimiento que eso no es condicin suficiente para lograr el xito.
Fases para la elaboracin de un plan de mejora gentica:
1. Estudio detallado del problema a resolver.
2. Fijar el tipo de planta que se precisa.
3. Inventario del material existente.
4. Decisin sobre el plan de mejora a seguir.
5. Ejecucin del plan.
6. Obtencin de un nuevo cultivar.
7. Produccin de semilla.
Ejemplo de un programa de mejora gentica por hibridacin:

El mejoramiento gentico realizado por hibridacin se utiliza cuando se desea introducir genes (que
condicionan caracteres como resistencia, calidad, alto contenido proteico, etc.) en la variedad criolla o
variedad que utiliza en agricultor, el proceso se puede realizar en cuatro fases:
Estado I: Planeamiento e hibridizacin (Mejora)
Estado II:Evaluacin de generaciones segregantes (Seleccin)
Estado III: Evaluacin de lneas (Evaluacin)
Estado IV: Lanzamiento de la variedad (Liberacin)
Los problemas difciles y mayormente no resueltos del mejoramiento de plantas caen en los primeros
dos estados.
En el estado I son como sigue:
1. El alineamiento y la sincronizacin de los objetivos y los procedimientos.
2. La escogencia de los parentales.
3. El apropiado uso de los recursos del germoplasma.
4. La escogencia de los mtodos de mejoramiento.
5. La evaluacin de la prediccin de la informacin disponible de la habilidad del parental y del
valor de la poblacin de hbridos diferentes.
6. La eficiencia de la hibridacin y el nmero de cruzas a realizar.
En el estado II se evala las generaciones F2, F3 y F4, seleccionando las familias con caracteres
recombinados.
En el estado III se evalan las familias promisorias en diferentes ambientes usando diseos
experimentales.
En el estado IV se instala grandes reas con el genotipo superior que resulto del estado III en parcelas
de agricultores para la validacin con variedad comercial, se hacen das de campo y con semilla
comercial y los trpticos o manuales, se lanza la variedad o cultivar.
Objetivos
1. Familiarizar al estudiante con las actividades que realizan los Programas de Investigacin
en la UNALM.
2. Describir la organizacin de un programa de investigacin que realiza mejoramiento
gentico en una especie cultivada.
3. Realizar un listado de la estructura gentica de los cultivares que se siembran
comercialmente.
II Materiales
. Diapositivas en power point.
. Organigramas de los Programas de Investigacin de la UNALM.
. Exposicin del tema de prctica.
. Boletn informativo de un PIPS de la UNALM.
III Procedimiento
1. Visita guiada a un programa de investigacin de la UNALM.
2. Exposicin de la organizacin de un programa de investigacin de la UNALM impartida
por un personal responsable del PIPS.
IV Cuestionario
1. Visite la pgina web de un centro internacional, en ella investigue los cultivos con la que
trabaja y cul es la contribucin al desarrollo agrcola mundial.
www.africaricenter.org
www.bioversityinternational.org
www.ciat.cgiar.org
www.cimmyt.org
www.cipotato.org
www.icarda.org
www.icrisat.org
www.iita.org
www.irri.org
2. Liste las variedades mejoradas por el programa de mejoramiento gentico de la UNALM.
Cul es la naturaleza genotpica de esta y mencione los caracteres modificados
genticamente.
PRCTICA N 02
Sistemas de Reproduccin de las Plantas: Reproduccin Sexual

I Introduccin
La reproduccin en plantas implica la formacin de clulas germinales y unin de gametos. El
conocimiento de las formas de reproduccin de las plantas cultivadas es fundamental para la
aplicacin de las tcnicas y mtodos de mejoramiento. Si se conoce la forma de reproduccin de una
especie, se puede conocer la composicin de la poblacin en las especies cultivadas, o sea si estn
formadas por individuos homocigotos o heterocigotos; el grado de variabilidad gentica de la
poblacin; el tipo de variancia gentica; el efecto de la endocra o heterosis.
Las poblaciones autgamas se caracterizan porque los individuos son homocigotos, las poblaciones
pueden ser homogneas o heterogneas, pero si han estado sujetas a seleccin, generalmente son
homogneas. Mientas que en las poblaciones algamas los individuos son heterocigotas y la
poblacin es generalmente muy heterognea. La variabilidad gentica es generalmente muy alta, la
endocra produce generalmente prdida de vigor.
Perpetuacin de las especies por reproduccin sexual

Clasificacin de las plantas segn su sistema de reproduccin
Algamas Autgamas
Abetos (Abies spp.) Ajonjol (Sesamun oficinale L.)
Alfala (Medicago sativa L.) Arroz (Oryza sativa L.)
Algodn (Gossypium barbadense L., G. spp.) Avena (Avena sativa L.)
Calabaza (Cucurbita spp.) Caf (Coffeaarabiga L.)
Cebolla (Allium cepa L.) Man (Arachis hipogea L.)
Coco (Coccus nucifera L.) Cebada (Hordeum vulgare L.)
Frijol ayocote (Phaseolus coccineus L.) Frijol comn, juda (Phaseolus vulgaris L.)
Girasol (Helianthus annuunL.) Ctricos (Citrus spp.)
Higuerilla (Ricinuscomunis L.) Durazno (Prunus persica L.)
Maz (Zea mays L.) Arveja (Pisum sativumL.)
Manzano (Malus spp.) Garbanzo (Cicer arietinum L.)
Meln (Cucumis meloL.) Lino (Linumusitatissimun L.)
Peral (Pyrus spp.) Soya (Glycine max L.)
Sanda (Citrullus vulgaris L.) Tabaco (Nicotiana tabacum L.)
Zanahoria (Daucuscarota L.) Tomate (Lycopersicum esculentum L.)
Papayo (Carica papaya L.) Lenteja (Lens culinaris L.)
Cacao (Theobroma cacaoL.) Trbol (Trifolium spp.)
Remolacha (Beta vulgaris L.) Aj (Capsicum spp.)
Lpulo (Humulus lupulus L.) Pimiento (Capsicum annuun L.)
Esprrago (Asparagus officinale L.) Pallar (Phaseolus lunatus L.)

Objetivos
1. Describir la morfologa floral de las especies cultivadas.
2. Clasificar el sistema de reproduccin de las especies examinadas.
3. Revisar el nmero cromosmico de las especies examinadas y los mecanismos reguladores
de la fertilidad que poseen.
II Materiales
. Material vegetal (botn floral, flor, fruto y semillas de diferentes especies cultivadas)
. Lupas (10X)
. Pinza, Tijeras, Bistur
. Lpiz, colores
III Procedimiento
1. El estudiante debe realizar un examen minucioso de las muestras de flores de plantas
alimenticias asignadas.
2. El alumno describir las partes dela flor y dibujar sus estructuras.
IV Cuestionario
1. Mencione las ventajas y desventajas de la reproduccin sexual.
2. Cual es la importancia de la reproduccin sexual en el mejoramiento gentico de plantas.
3. Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.
PRCTICA N03
Sistemas de Reproduccin de las Plantas: Reproduccin Asexual
I Introduccin
Reproduccin asexual: proceso de multiplicacinen el que no hay unin de gametos y toda la
progenie de una planta reproducida asexualmente constituye un clon.
La principal consecuencia de la reproduccin asexual es que no hay segregacin, o sea todos los
individuos progenie de una planta que se reproduce asexualmente son genticamente iguales y el
conjunto se denomina clon. Todas las plantas que forman un clon son idnticas en herencia y tienen
las caractersticas de la planta original.
Objetivos
1. Conocer y describir los rganos vegetativos especializados: de las especies evaluadas.
2. Describir las semillas apomcticas.
3. Analizar las ventajas y desventajas de la reproduccin asexual.
II Materiales
. Material vegetal (rizoma, tubrculo, bulbo, esquejes, etc. de diferentesespecies cultivadas)
. Lupas (10X)
. Pinza
. Tijeras
. Lpiz, colores
. Bistur
. Ambiente de propagacin
. Plantas madre productor de patrones y de yemas
. Ambiente de micropropagacin
III Procedimiento
1. Realice un examen minucioso de las muestras.
2. Describa y dibuje las partes internas y externas de los rganos vegetativos.
3. Investigar sobre el ndice reproductivo de la especie cultivada con la que trabajo en la
prctica.
IV Cuestionario
1. Mencione las ventajas y desventajas de la reproduccin asexual.
2. Cual es la importancia de la reproduccin asexual en el mejoramiento gentico de plantas.
3. Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.
PRCTICA N04
Estimacin de la Viabilidad Polnica

I Introduccin
Las hibridaciones constituyen una va para la generacin de la variabilidad. El xito de las
hibridaciones est determinado por la funcionalidad de los rganos reproductivos tanto masculino
(grano de polen) como femenino (vulo).
Los mejoradores utilizan las hibridaciones artificiales para controlar y generar caracteres deseables en
un genotipo seleccionado. Por tanto es importante asegurar que el grano de polen sea viable y cuando
el estigma est receptivo se logre xito en las hibridaciones.
Existen distintos mtodos para determinar la viabilidad del polen y, entre stos, el mtodo de tincin,
ser el mtodo desarrollado en la prctica.
Objetivos
1. Familiarizar con la tcnica de determinacin de la viabilidad del polen.
2. Reconocer las partes del grano de polen.
3. Diferenciar morfolgicamente los granos de polen de las especies utilizadas en la prctica.
4. Determinar la viabilidad del polen por el mtodo de tincin.
II Materiales
. Material vegetal: Botones florales flores de cuatro o ms especies cultivadas.
. Aceto carmn al 4%, Lacto- propinico- orcena o Aceto orcena.
. Porta y cubre objetos.
. Placas petri.
. Microscopio electrnico.
III Procedimiento
1. Tincin de los granos de polen
a. Colectar flores abiertas en placas petri.
b. Colocar el grano de polen en un porta objeto, agregar una gota de aceto carmn y
poner un cubre objeto y dejar a T ambiente.
c. Realizar la evaluacin contando el nmero de polen teido y no teido en unos 5
campos pticos por cada flor, en un microscopio a un aumento de 100X a 400X.
d. Se considera que los granos bien formados y teidos son frtiles o por lo menos son
viables, y los granos deformes y no teidos son estriles. Se expresa en %.
N de granos bien formados y teidos

% Viabilidad= ------------------------------------------------ X 100
N total de granos
A
IV Cuestionario
1. Determinar el porcentaje de granos de polen viable.
2. Explicar las causas y consecuencias de su resultado.
3. Qu importancia tiene conocer la viabilidad del polen en el mejoramiento de plantas.
4. Dibujar los granos de polen de las especies utilizadas
PRCTICA N05
Bases Genticas para el Mejoramiento de Plantas

I Introduccin
La variabilidad gentica es la fuente importante para obtener ganancias en el programa de
mejoramiento gentico de los cultivos y sta se origina por las recombinaciones genticas producto de
la hibridacin, por las mutaciones naturales e inducidas y por la poliploidizacin natural y dirigida.
La variabilidad es un hecho esencial en los seres vivientes y las plantas que se reproducen
sexualmente pueden generar nuevas estirpes. Por ello se dice que no existe en la naturaleza dos
organismos que sean exactamente iguales. Las diferencias pueden tener causas genticas o
ambientales.
Los individuos pertenecientes a una misma familia o a una misma poblacin pueden ser
genticamente iguales, como los gemelos idnticos, individuos de un mismo clon o una misma lnea
pura; sin embargo, a pesar de ser genticamente iguales no son exactamente similares en apariencia,
debido a causas ambientales.
la variacin fenotpica total para un carcter se descompone en tres componentes, los cuales se
muestran a continuacin:
Vf = Vg + Va + Vga
Donde:
Vf = Variancia fenotpica
Vg = Variancia genotpica
Va = Variancia ambiental
Vga = Variancia de la interaccin genotipo por ambiente.
El fenotipo es la expresin de un determinado carcter en un medio dado debido a los efectos de Vg,
Va y Vgxa.
El genotipo es la expresin o carga gentica del individuo (es intrnseco).
El ambiente influye con efectos diversos en los caracteres de las plantas.
La semilla conserva las caractersticas de la especie y stas se heredan a travs de las generaciones.
La heredabilidad de un carcter se calcula mediante la relacin entre la variancia gentica sobre la
variancia fenotpica de ese carcter y multiplicada por 100.
Objetivos
1. Describir el fenotipo de las poblaciones de especies cultivadas visitadas en el campus de
la UNALM.
2. Definir los componentes de la variacin fenotpica de stas.
3. Evaluar la variacin gentica o hereditaria y la variacin ambiental de las especies
vegetales consideradas.
4. Conocer la importancia de la variacin gentica en el mejoramiento gentico de plantas.
II Materiales
. Gua de la prctica
. Muestra de semilla o de frutos de variedades diferentes de una especie
. Campo de cultivo
. Parcelas experimentales con varios genotipos
. Campo comercial de especies cultivadas
III Procedimiento
1. Visitar las parcelas de experimentacin, parcelas de cultivos diversos en la que se observe
la variacin fenotpica (Vf), variacin gentica (Vg), variacin ambiental(Va) y variacin
de la interaccin genotipo ambiente (Vga) de los caracteres de las plantas en campos de la
UNALM.
2. Analizar los resultados de esta prctica.
IV Cuestionario
1. De la variacin fenotpica total Vf = Vg + Va + Vgxa, Qu componente cree usted sea de
mayor utilidad para el mejorador de plantas?
2. Qu importancia tiene la variabilidad gentica en el mejoramiento de plantas?
3. Cmo saber si la variacin fenotpica observada se debe a la variacin ambiental o a la
variacin gentica?
PRACTICA N06
Determinacin de la Variabilidad en una Poblacin

I Introduccin
La diversidad gentica de una especie est constituida por todas las variaciones genticas, producto de
la diferencia de las especies. No debemos confundir la diversidad gentica con la variabilidad
gentica, que es caracterstica de poblaciones dentro de una especie. La variacin entre poblaciones
de una especie, ms la variacin dentro de poblaciones es la diversidad gentica total de una especie.
Todas las variaciones (caractersticas) se pueden cuantificar. Si no hay variacin gentica para una
caracterstica dentro de una poblacin, el carcter no puede ser modificado por seleccin.
Curvas de
distribucin
Curva de distribucin
Clase
Nmero
Clase
Carcter cualitativo de frijol: color de grano
Objetivo
1. Determinar la variabilidad de una poblacin de plantas de maz, en base a sus caracteres
cualitativos y cuantitativos.
II Materiales
. Poblacin de una variedad de maz.
. Muestreo de 1000 mazorcas de maz tomadas al azar
. Regla de 20 centmetros.
. Libreta de apuntes
. Caracteres cualitativos y cuantitativos.
III Procedimiento
1. Tomar datos de una poblacin de 100 mazorcas de maz.
Caractersticas a evaluar:
1.1 Longitud de mazorca
1.2 Dimetro de mazorca
1.3 Nmero de hileras por mazorcas
1.4 Nmero de granos por hileras
1.4 Color de granos
1.5 Color de tuza
2. Para cada caracterstica cuantitativa evaluada se obtendr:

2.1 Tabla de frecuencias.
2.1 Histogramas de las frecuencias.
2.3 Polgono de frecuencias.
IV Cuestionario
1. Calcule la media, rango, desviacin estndar y coeficiente de variabilidad para los
caracteres evaluados.
2. Cul ser el nmero de plantas inferiores y superiores a: (la media + 1 desviacin
estndar), (la media - 1 desviacin estndar), (la media + 2 desviacin estndar), (la media
- 2 desviacin estndar), para los caracteres evaluados.
3. Establecer el nmero de clases para los caracteres cualitativos (color del tallo y el color de
la panoja).
4. Qu importancia tiene la variabilidad gentica en el mejoramiento gentico de las
plantas?
PRCTICA N07
Poblaciones en Equilibrio Hardy-Weinberg y Frecuencia de Genes

I Introduccin
Tambin es conocida como ley del equilibrio gentico, y mediante un conjunto de frmulas
matemticas describen cmo una proporcin de genes permanecen sin cambios a lo largo del tiempo
en una poblacin numerosa de individuos. Sus autores son: el matemtico britnico Godfrey Harold
Hardy y el mdico Wilhelm Weinberg.
Esta ley establece la frecuencia con la que determinados alelos y genotipos deberan aparecer en una
poblacin. Mediante un estudio de estos cambios allicos y genotpicos se pueden saber si una
poblacin est cambiando genticamente o evolucionando e incluso predecir la presencia de
anomalas en las poblaciones.
De acuerdo a esta ley, para lograr el equilibrio, una poblacin debe cumplir cuatro requisitos, los
cuales son:
1. Los individuos deben seleccionar parejas al azar con independencia de los fenotipos
(apareamiento al azar).
2. Ningn genotipo puede verse favorecido en una poblacin(seleccin).
3. No pueden introducirse alelos nuevos en la poblacin, sean procedentes de individuos externos
(migracin) o por consecuencia de una mutacin.
4. El nmero de individuos y genotipos en la poblacin debe permanecer elevado(deriva
gentica).
Sin embargo, la mayora de las poblaciones no mantiene un equilibrio gentico, esto puede deberse a
la mutacin genticas, deriva gnica (perdida de un alelo en una poblacin al azar), a la migracin o a
la disminucin en el tamao de la poblacin. Todos estos factores pueden darse de una manera
natural, con excepcin de las mutaciones, que tambin se producen por exposicin a sustancias
qumicas y a materiales radioactivos.
La frecuencia gnica se refiere a las proporciones que tienen los diferentes alelos en el pool gentico
de una poblacin que se reproduce. La frecuencia genotpica se refiere a las proporciones de los
diferentes genotipos en la poblacin. En los cultivos de polinizacin cruzada, el pool gentico es
compartido por las plantas de la poblacin. La frecuencia relativa que tiene un gen en particular es
determinada a partir del nmero de individuos que existen en la poblacin y los genotipos de estos.
Una poblacin de plantas est compuesta por genotipos y de acuerdo a la planta si es autgama o
algama los individuos que la conforman expresan genotipos definidos.
Segn Mendel cuando el carcter es monognico los genotipos pueden ser: homocigoto dominante,
heterocigoto y homocigota recesivo.
Las poblaciones de plantas autgamas pueden tener los genotipos AA aa mientras que las
poblaciones algamas los genotipos son Aa.
Cuando se realiza la seleccin la frecuenciadel gen se modifica y se incrementa el valor del gen del
carcter involucrado.
Frecuencia de p
Frecuencia Genotpica
Frecuencia de q
Objetivo
1. Lograr la comprensin de los principios que determinan la frecuencia de genes y genotipos
en una poblacin.
2. Calcular los cambios de las frecuencias gnicas y genotpicas en las poblaciones de plantas
evaluadas.
II Materiales
. Gua de prcticas.
. Ejercicios de frecuencia de genes.
. Tiza y pizarra.
. Campo de cultivo con sintomatologas de enfermedades y/o en diferentes periodos
vegetativos de tal manera se pueda diferenciar fenotipos precoces, semitardo o tardos.
III Procedimiento
1. Desarrollo de ejercicios de gentica de poblaciones.
2. Visita a una parcela de cultivo, en ella registrar el nmero de genotipos susceptibles a la
enfermedad. Analizar si el carcter susceptibilidad estagobernado por un par de genes y si
el gen recesivo expresa reaccin de susceptiblidad.
3. Calcular la frecuencia gnica y genotpica del caso anterior.
IV Cuestionario
Desarrolle los ejercicios siguientes ejercicios:
1. El carcter color de las flores en Boca de Dragn est gobernado por un gen con dos
formas allicas en las que hay dominancia intermedia. De un total de 300 plantas: 60
tenan flores rojas (A1A1), 180 flores rosadas (A1A2) y 60 flores blancas (A2A2). En esta
poblacin:
(a) Calcule las frecuencias de los alelos A1 y A2.
(b) Calcule las frecuencias de los genotipos A1A1, A1A2 y A2A2.
(c) Compruebe si la poblacin est en equilibrio Hardy Weinberg.
2. Una poblacin de plantas de arveja tiene flores moradas y flores blancas. El carcter est
controlado por un gen con dos alelos con dominancia completa. Si el 84% de plantas
tienen flores moradas y asumiendo que la poblacin est en equilibrio, determinar:
a) Frecuencias allica, b) Frecuencias genotpicas.
3. En una poblacin de plantas existe un locus autosmico diploide con tres alelos con las
siguientes reacciones a la presencia del virus: YI = Inmune, YH = Hipersensible y YS =
Susceptible. YI > (YH, YS), YH> YS. Asumir una muestra aleatoria de 2000 individuos que
luego de ser tamizados segregaron de la siguiente manera: 424 inmunes, 588
hipersensibles y 988 susceptibles.
(a) Calcule las frecuencias gnicas.
(b) Calcule las frecuencias genotpicas y fenotpicas despus del apareamiento aleatorio.
PRCTICA N08
Tcnicas Biotecnolgicas para el Fitomejoramiento

I Introduccin
Las tcnicas biotecnolgicas aplicadas al mejoramiento gentico son el cultivo de anteras para la
obtencin de dobles haploide y el rescate de embriones cuando se realizan hibridaciones
interespecficas entre acervos genticos ms distantes como los acervos secundarios y terciarios.
Tambin es muy utilizado el cultivo de tejidos (mayormente el cultivo de meristemas) para la
obtencin de plantas libres de virus y por la multiplicacin rpida se puede generar mayor semilla
para la instalacin de los cultivos comerciales con un alto potencial de rendimiento.
Los marcadores que los mejoradores utilizan en su labor son los marcadores morfolgicos, los
marcadores bioqumicos y los marcadores moleculares. Los marcadores moleculares que se utilizan
son:RFLPs (Polimorfismo longitudinal de los fragmentos de restriccin),RAPDs (ADN polimrfico
amplificado al azar),AFLPs (Polimorfismos longitudinales de fragmentos amplificados), SSRs
(secuencias simples repetidas - microsatlites) entre otros, que se utiliza para conocer el nivel de
polimorfismo en las accesiones de germoplasma, estudios de diversidad gentica. El marcador
tambin se utiliza en la seleccin asistida en el proceso del mejoramiento gentico.
Los cultivares actuales han alcanzado altos niveles de rendimiento por medio de sistemas refinados de
mejoramiento gentico por hibridacin y seleccin que ponen juntas combinaciones multignicas para
el rendimiento de toda la planta. Estos mtodos de mejoramiento continuarn siendo la fuente bsica
de los cultivares de alto rendimiento, si bien este carcter puede ser enriquecido aun ms por
transformacin mediante los nuevos procedimientos biotecnolgicos, en esta direccin, la gentica
molecular proponellevar al fitomejoramiento a un nivel de refinamiento an mayor.
La biotecnologa agrcola se refiere a la manipulacin gentica de organismos para propsitos
especficos al nivel molecular, directamente involucrando el ADN. La tecnologa revolucionaria de
ADN recombinante (rDNA) con el cual los investigadores son capaces de transferir genes de
cualquier organismo a otro ofrece una oportunidad para solucionar problemas del desarrollo agrcola.
Clasificacin de las biotecnias
Biotecnia celular
- Transformacin gentica
- Cultivo de tejidos
- Micropropagacin
- Cultivo de meristemas y saneamiento de virosis
- Cultivos de protoplastos, anteras, embriones y ovarios
- Crioconservacin y crecimiento retardado
Rescate de embriones de la cruza

Phaseolusacutifolius por Phaseolusvulgaris.
Diciembre 1999 AHJ
Biotecnia molecular
- Marcadores moleculares
- Genmica y protemica
Los marcadores pueden ser:Marcadores morfolgicos, Marcadores bioqumicos y Marcadores

moleculares
Marcadores moleculares
Son fragmentos de ADN cuya funcin codificadora generalmente se desconoce. Las fuentes de ADN
pueden ser de origen cromosmico genmico y de origen extracromosmico (mitocondrial,
cloroplastos.
Diferentes tcnicas de biologa molecular han sido empleadas para revelar distintas clases de
marcadores moleculares. Los caracteres moleculares poseen caracteres especficos.
Aplicacin de los marcadores moleculares

Se aplican para la identificacin de origen parental. La certificacin de pureza gentica. El estudio de
diversidad y distancia gentica, la constitucin de mapas genticos y la para la seleccin asistida por
marcadores
Separacin de fragmentos de ADN en un gel de

poliacrilamida con tincin de plata del marcador
AFLP
Revelado de un gel de acrilamida de

diferentes accesiones de Palma aceitera
E. olefera y E. guineensis mediante
RAPDs
Variedades transgnicas (Eventos de transformacin)
Cultivo Evento de Tecnologa Aprobacin

transformacin
Soya GTS40-3-2 RR 1996
Algodn MON1445 RR 2001
Algodn MON531 Bt 1998
Maz MON810 Bt 1998
Maz NK603 RR2 2004
Caracteres modificados en las variedades transgnicas

Resistencia a enfermedades y plagas
Resistencia a sequa, alta o baja temperatura
Fijacin de nitrgeno
Resistencia a suelos cidos o salinos
Resistencia herbicidas
Mejoramiento de calidad nutricional
Alteracin para madurez temprana
Manejo postcosecha
Comparacin entre mtodos de Transformacin del genoma nuclear

Agrobacterium Mtodo Biolstico
Especie a transformar Dicotiledneas y algunas monocotiledneas Sin limitaciones
Eficiencia de transformacin Alta Baja
Tipo de integracin en el genoma Aleatoria en regiones con transcripcin Aleatoria

vegetal Bajo nmero de copias independientes Multicopia en tandem
Precisa Imprecisa
Construccin de vectores Compleja Simple
Dependencia del genotipo vegetal Mayor Menor
Especies con variedades obtenidas por la estrategia de variacin somaclonal
Especie Carcter Origen

Geranio Arquitectura floral Purdue Univ. USA
Batata Calidad de races y arquitectura del canopeo North carolina Research Service, USA
Caa de Resistencia a estrs abitico y a
azcar enfermedades SugarcaneResearch Centre, Fiji
Maz Contenido de triptfano Molecular Genetic, USA
DNA Plant technology of New Jersey,
Tomate Contenido de materia seca USA
DNA Plant technology of New Jersey,
Apio Contenido de materia seca USA
PlantechResearchInstitute, Japan
Arroz Resistencia a enfermedades
Univ. AgriculturalSciences, Hungary
Mostaza Rendimiento ICAR, India
Objetivos
1. Familiarizar al estudiante con las tcnicas biotecnolgicas que permiten obtener un mayor
rendimiento de los cultivos.
2. Enumerar las tcnicas biotecnolgicas en el mejoramiento gentico de los cultivos.
3. Conocer la aplicacin de los marcadores moleculares en el fitomejoramiento.
III Materiales
. Laboratorio del Instituto de Biotecnologa - UNALM.
. Equipos del laboratorio.
. Reactivos y muestras de tejido vegetal.
. Fotografas de geles.
III Procedimiento
1. Visitar las instalaciones del Instituto de Biotecnologa de la UNALM.
2. Identificar las actividades que se desarrollar cuando se utiliza el marcador AFLP para
evaluar el germoplasma de una especie cultivada:
- Extraccin DNA
- Calidad de DNA
- PCR
- Pre amplificacin
- Amplificacin
- Electroforesis
- Anlisis de Polimorfismo
IV Cuestionario
1. Cules son las aplicaciones de la biotecnologa en la mejora gentica?
2. Seale las ventajas y desventajas del mejoramiento gentico convencional y el
mejoramiento gentico moderno que usa como herramienta la biotecnologa?
PRCTICA N09
Mutaciones
I Introduccin
Desde los aos 1960 se han liberado en todo el mundo ms de 2250 variedades derivadas
directamente como mutantes o a partir de cruzas con mutantes. En muchas variedades derivadas por
mutacin, las caractersticas modificadas han resultado en un efecto sinrgico, mejorando la calidad y
el valor agronmico. Muchos mutantes han tenido un impacto a nivel internacional por el incremento
del rendimiento y la calidad en cultivos propagados por semilla.
Las mutaciones naturales se presentan en bajas tasas y el incremento de mutantes se puede realizar
mediante el uso de mutgenos tanto fsicos como qumicos. Entre los agentes fsicos destacan los
rayos gamma, cobalto radiactivo, radioistopos, las radiaciones csmicas,
radiaciones ultravioleta, neutrones, partculas alfa y beta, etc. y, entre los agentes qumicos est el gas
mostaza, la colchicina, el etilmetilsulfonato y la azida de sodio.
La agencia internacional de energa atmica (IAEA) ubicada en Roma,reporta numerosas variedades
mejorados en cultivos anuales, frutales, nuevas variaciones en especies ornamentales entre otros y, en
el pas el Instituto peruano de energa nuclear (IPEN)tienelos equipos para la induccin de
mutaciones con agentes fsicos.
Aplicacin de tcnicas nucleares en la fitotecnia
El mejoramiento de los cultivos se basa en dos principios fundamentales: la variacin gentica y la
seleccin. La irradiacin mutagnica y las tcnicas de trazadores isotpicos que se emplean en
diferentes mtodos de reproduccin son instrumentos muy valiosos
Objetivos
1. Hallar la frecuencia de mutaciones de cambio de pigmentacin en las hojas (mutaciones
cloroflicas) en plntulas.
2. Diferenciar los diferentes tipos de mutaciones cloroflicas usando la clasificacin de
Gustafson (1941).
III Materiales
. Poblacin de mutantes de cebada derivadas de irradiacin.
. Lpiz.
. Libreta de apuntes.
. Calculadora.
III Procedimiento
1. Analizar una investigacin realizada: Caso Arroz.
2. Establecer los tipos de mutantes en cereales (Cebada).
3. Evaluar el campo contando el numero de mutantes cloroflicos del total de plantas de la
poblacin.
4. Estimar la frecuencia de mutaciones cloroflicas.
5. Comparar la frecuencia de mutantes inducidas versus los mutantes naturales.
Surez C., E. (2006) expresa que para someter a induccin de mutaciones el material gentico debe
presentar caracteres favorables y uno dos desfavorables y stos se consideran los objetivos del
estudio, es decir, variedades con un comportamiento general satisfactorio y donde slo sea necesario
mejorar uno o dos caracteres.
Variedad Tipo Potencial de Maduracin Objetivo

rendimiento
J 104 Indica semienana Alto Media Calidad de grano

Maduracin temprana
ECIA 91 (6104) Indica semienana Alto Media Calidad de grano

Maduracin temprana
Basmati 370 Indica alta Bajo Media Reduccin de la altura
Gloria Indica alta Bajo Media Reduccin de la altura
Caribe 7 Indica alta Alto Sensible al Insensibilidad al fotoperiodo

fotoperiodo
IA Cuba 19 Indica semienana Alto Media Calidad de grano
LC 88 66 Indica intermedia Alto Media Calidad de grano
http://agr.unne.edu.ar/fao/Cuba-ppt/5MEJORAMIENTO%20%20MUTACIONES%20-Crestelo.pdf
Fuentes y dosis de irradiacin

Se usaron dos fuentes de radiacin diferentes: Rayos gammna de Co 60 y neutrones rpidos de 14
Mev.
La radiosensibilidad de las variedades fue determinada midiendo la altura en plntulas procedentes de
semillas irradiadas y no irradiadas (control) y se calcul la reduccin del crecimiento.
Las dosis de irradiacin determinadas se encuentran entre 200 350 Gy para rayos gamma y de 20
30 Gy para neutrones rpidos. Estas dosis se corresponden con una reduccin del crecimiento de 10
30%.
Segn Surez (2006) al inducir siete variedades de arroz se encontr en la variedad J 104 mutantes con
buena calidad de grano y con maduracin ms temprana y adems los resultados mostraron una mayor
variabilidad que la esperada.
En la generacin M2 se seleccionaron 449 plantas, de ellas 439 presentaban granos estrechos y
cristalinos, as como maduracin ms temprana que la variedad parental, mientras que las 10 restantes
posean tipo de planta compacto.
Mutantes inducidos de la Variedad J104
No. de Tipo de seleccin
Tratamiento plantas Grano Grano largo Grano largo Planta
seleccionadas Precoces estrecho y estrecho y grueso compacta
Neutrones 20 Gy 79 42 69 0 0 7
Neutrones 20 Gy 77 44 71 0 2 0
Gamma 200 Gy 133 24 109 0 4 2
Gamma 300 Gy 160 31 114 16 0 1
Total 449 141 363 16 6 10
http://agr.unne.edu.ar/fao/Cuba-ppt/5MEJORAMIENTO%20%20MUTACIONES%20-Crestelo.pdf
Tipos de mutaciones en cebada
Tipo de mutacin Caracterstica
I. Albina No se forma clorofila ni carotenos
II. Xantha Prevalencia de carotenos o ausencia de clorofila
III. Alboviridis Diferentes colores en la base y unta de las hojas
3.1 Alboxantha Base amarilla, punta blanca muy comn
Base blanca o ligeramente coloreada. Punta amarilla o amarillo verdoso.

3.2 Xanthalba
Puede alcanzar madurez
3.3 Alboviridis Base verde, punta blanca
IV. Viridis Grupo heterogneo, caracterstico amarillo verdoso o verde claro
Verde claro uniforme que gradualmente cambia a verde oscuro.

4.1 Virescens
Generalmente el color adquiere el tono norma. Mutacin a menudo viable
Generalmente color amarillo verdoso que puede permanecer durante el

4.2 Chlorina
ciclo de la planta u oscurecerse. Viable
Los pigmentos verdes originales se destruyen, las hojas se marchitan y se

4.3 Lutescens
tornan amarillas
Igual que lutescens pero mas pronunciado. Los colores originales cambian a
4.4 Albescens
blanco o blanco amarillo
Destruccin transversal de los pigmentos. Lneas transversales son

V. Tigrina generalmente marrones o amarillas, delgadas y comprimidas. Muy
caractersticas en cebadas
VI. Striata Lneas longitudinales de color blanco o amarillo
Destruccin de clorofila y /o caroteno en forma de manchas distribuidas

VII. Maculata
sobre las hojas
VIII. Mutaciones indefinidas Informe descriptivo de las observaciones efectuadas
IX. Mutaciones en el plasma
Fuente: Gustafson, 1941.
IV Cuestionario
1. Investigue referente al nmero de variedades mejoradas logradas mediante la aplicacin de
mutaciones, en cinco especies vegetales.
PRCTICAN10
Recursos Genticos Vegetales

I Introduccin
Los recursos genticos o germoplasma vegetal es el material gentico fuente que los fitomejoradores
utilizan para producir nuevas variedades cautivadas o cultivares.
Se entiende por recursos genticos como la variabilidad gentica (genes) almacenada en los
cromosomas y en otras estructuras que contiene ADN. Estas caractersticas pueden ser: resistencia a
factores estresantes biticos o abiticos, precocidad, la presencia o ausencia de una sustancia qumica,
o cualquier otro factor de rendimiento o calidad, es decir que sea de utilidad actual o potencial y que
sea trasmisible genticamente.
El germoplasma se conserva en los bancos de genes o en el mismo ambiente donde prosperan. Las
actividades que se llevan a cabo para disponer y manejar los recursos genticos son: Prospeccin,
coleccin, evaluacin (caracterizacin segn los descriptores que se dispone para la especie),
conservacin, documentacin y utilizacin de los recursos genticos que son fuente de caracteres
importantes para los programas de mejoramiento gentico del cultivo. Con los datos de
caracterizacin fenotpica se pueden formar grupos semejante mediante el anlisis de cluster.
Dendogramade 60 poblaciones nativas de maz correspondientes a la raza Cristalino Colorado,

Argentina.
Objetivos
1. Describir la organizacin del Banco de germoplasma visitado.
2. Investigar el origen, conservacin y utilizacin de los recursos genticos de una especie.
3. Relacionar reas agroecolgicas de la diversidad gentica de una especie con la
produccin comercial ms elevada.
II Materiales
. Diapositivas
. Afiches de diversidad gentica de una especie
. Descriptores
. Banco de genes
. Campo de regeneracin de germoplasma
. Muestras de tubrculos de papas
III Procedimiento
1. Visitar los bancos de germoplasma de la UNALM para conocer las caractersticas, la
importancia, las accesiones que conservan y las actividades que vienen realizando.
2. Revisar un descriptor de planta algama.
3. Listar las caractersticas que se evalan en la caracterizacin avanzada del germoplasma
(los descriptores).
IV Cuestionario
1. Indicar el origen y/o diversificacin de las especies abajo listadas. Las evidencias para
asignar a una especie como su centro de origen pueden ser: taxonmicas, botnico-
citolgicas, culturales, histricas, arqueolgicas, lingsticas, presencia de especies
relacionadas, y presencia de gran diversidad intraespecfica. Indique segn sea el caso.
Solanumtuberosum subespecie tuberosum
Triticumdurum L.
Zea maysL.
CoffeaarabicaL.
PhaseolusvulgarisL.
PisumsativumL.
Oryza sativaL.
ArracaciaxantorrizaL.
Carica papaya L.
Gossypium barbadense L.
HordeumvulgareL.
BixaorellanaL.
SaccharumofficinarumL.
2. Completar el cuadro siguiente con las caractersticas del banco de genes.
PRCTICAN11
Tcnicas de Polinizacin Controlada en Autgamas

I Introduccin
Las especies autgamas estn formadas por plantas que en forma natural se autopolinizan. Cuando se
hace mejoramiento gentico en esta especie es necesario efectuar cruzamiento artificial controlado
con el fin de obtener progenie que combinen caractersticas deseables de los progenitores.
Objetivo
1. Familiarizar al estudiante con la tcnica de hibridaciones.
2. Describir las tcnicas de emasculacin.
3. Evaluar la eficiencia de hibridacin.
II Materiales
. Plantas de frijol, pallar, arvejas, etc. de dos variedades diferentes que se encuentren en
prefloracin
. Pinzas de diseccin de punta aguda.
. Recortes de papel servilleta de 6 X 15 mm.
. Un frasco con alcohol.
. Plumn marcador indeleble.
. Etiquetas.
. Lpiz.
Libro de campo
III Procedimiento
Es importante los conceptos previos acerca de la morfologa de la flor, el botn floral, la
autofecundacin, la emasculacin y la hibridacin o cruzamiento.
Las leguminosas de grano tienen una flor completa y perfecta y presentan flores solitarias o en racimo
de racimos, normalmente son Autgamas con 10 estambres y un pistilo. La diferenciacin de las
flores se denomina botones florales.
Autofecundacin
El grano de frijol es el resultado de la fertilizacin de un vulo, por polen procedente de las anteras de
la misma flor. Esta forma de reproduccin de la planta se denomina autofecundacin
Emasculacin
Es el proceso mediante el cual se eliminan las anteras de un botn floral antes de la madurez del
polen, con el objeto de impedir la fertilizacin del vulo con polen proveniente de la misma flor, o sea
de evitar la autofecundacin.
Equipos e Insumos
Pinzas (emasculacin y polinizacin)

Etiquetas o marbetes para identificar los botones polinizados
Alcohol
Tutores, Estacas marcadoras para identificar las plantas de los progenitores
Lentes de aumento, Macetas, Mesas y Suelo esterilizado.
Tcnica de hibridacin
Segn el Centro Internacional de Agricultura Tropica, CIAT (1982) se tienen tres tcnicas de
hibridacin en el programa de mejoramiento del frijol y son las siguientes:
1.- Tcnica de hibridacin por emasculacin con el estigma cubierto
Emasculacin del botn floral madre
Se realiza la emasculacin del botn floral madre. Se selecciona de la planta madre un botn floral en
estado ptimo para la polinizacin. El botn seleccionado se sostiene con los dedos pulgar e ndice de
la mano izquierda, luego se abre el ptalo externo por la sutura del estandarte y se procede a
acomodar una parte del estandarte aprisionndolo con el dedo pulgar en un lado y la otra parte
aprisionarlo con el dedo ndice con la ayuda de la pinza. Con la pinza se toma cada una de las alas por
su base y se doblan hacia ambos lados. Se observa las quillas que envuelve a los rganos
reproductores en forma de espiral. Con la punta de la pinza se separan los dos pequeos ptalosy se
elimina aquel que est situado en la parte superior. Al terminar este proceso deben quedar visibles
los 10 estambres y el pistilo. Se efecta entonces la emasculacin mediante la eliminacin de cada
una de las anteras de los 10 estambres.
Polinizacin
Se procede a remover una flor recientemente abierta de la planta seleccionada como planta padre. Se
toma la flor padre y con los dedos de ambas manos las alas y el estandarte se halan en sentido
opuestos, logrando que emerja completamente el estigma impregnado con granos de polen. Con la
pinza se arranca la parte superior del pistilo (estigma y el estilo) y se traslada cuidadosamente hacia el
botn floral madre emasculado.
Frotar ligeramente varias veces el pistilo impregnado de polen sobre el estigma del botn floral
madre. Para mayor xito, se deja dentro del botn floral madre la seccin del pistilo.
Finalmente, se procede a cerrar el botn ya polinizado desdoblando los ptalos (alas y estandarte)
quedando as cerrado el botn. Se coloca la etiqueta sobre el pedicelo del botn polinizado escrito con
lpiz la identificacin de los progenitores en un lado y la fecha y las iniciales del ejecutor en el lado
opuesto. La fecundacin ocurrir entre las 18 a 23 horas despus de la polinizacin.
Antes de realizar nuevas polinizaciones deben lavar las pinzas con alcohol para impedir la
contaminacin con polen extrao. Esta tcnica es muy utilizada en el programa de mejoramiento de
frijol en el CIAT. La eficiencia de esta tcnica (hibridacin por emasculacin con estigma cubierto) es
de un 50%.
2.- Tcnica de hibridacin por emasculacin con el estigma desnudo
Se elimina cuidadosamente los cuatro ptalos internos del botn floral, dejando solamente el
estandarte para la proteccin del estigma. Posteriormente emascular el botn floral madre y luego
polinizar.
Con la pinza se toma cada una de las alas por su base y se rompen y queda al descubierto las quillas.
Con la punta de la pinza se rompe las quillas y quedando visibles los estambres y el pistilo.
3.- Tcnica de hibridacin sin emasculacin
Se inicia con el mismo procedimiento, las alas pueden doblarse o removerse; seguidamente, se
presiona el botn floral para hacer emerger el estigma. Despus se realiza la polinizacin y luego la
identificacin de la hibridacin realizada.
Eficiencia de la hibridacin
La eficiencia de la hibridacin en el frijol es una medida que establece una relacin entre el nmero
de cruces efectivos y el nmero de cruces efectuados, expresada en trminos de porcentaje.
Esta eficiencia es afectado por factores externos e internos y de naturaleza prctica.
IV Cuestionario
1. Esquematice el procedimiento que ha realizado en la prctica.
2. Describa la metodologa de hibridacin de dos especies autgamas cultivadas.
PRCTICA N12
Tcnicas de Polinizacin Controlada en Algamas

I. Introduccin
El maz es un cultivo de polinizacin cruzada natural y debido a su polinizacin no controlada, suele
decirse que es de polinizacin libre. La planta de maz posee estructuras florales monoicas: las flores
estaminadas se forman en la panoja y las pistiladas en un brote axilar aproximadamente a la mitad del
tallo. La polinizacin se lleva a cabo al transferir polen viable o frtil de las flores estaminadas de la
panoja a los largusimos estigmas, los rganos receptores de polen de las flores pistiladas.
Objetivo
1. Familiarizar al estudiante con la tcnica de polinizacin.
2. Describir la formacin de lneas endocriadas.
3. Clasificar los tipos de hbridos existentes.
II Materiales
. Campo de cultivo de maz: Estado de floracin
. Bolsa de glacine
. Bolsa de papel kraft
. Engrapador
. Grapas
. Clips
. Lpiz
. Cuchilla
. Libro de campo
III Procedimiento
El proceso de polinizacin controlada en maz consta de tres etapas:
1 Jiloteo: consiste en cubrir la mazorca inmadura con una bolsa de glacine antes de que los
estigmas emerjan, para evitar la fecundacin con polen desconocido. Para ello, la planta elegida
como progenitor femenino, debe cumplir las condiciones siguientes:
Tener las caractersticas del ideotipo de planta establecido.
Mazorcas inmaduras con estigmas no emergidas.
2 Coleccin de polen: consiste en colectar polen solo de la planta elegida como progenitor
masculino. Se debe encerrar y proteger la panoja con el papel kraft, 24 horas despus se realiza la
colecta de polen y polinizacin inmediata. Para ello, la planta elegida como progenitor masculino,
debe cumplir las condiciones siguientes:
Tener las caractersticas del ideotipo de planta establecido.
La panoja debe haber iniciado la dehiscencia de polen por lo menos en la borla o en 1/3 de
la panoja.
3 Polinizacin: consiste en la transferencia de polen de la panoja de la planta a los estigmas de
la planta .
Una vez polinizado los estigmas, se debe cubrir la mazorca con el papel glacine y sobre ella con el
papel kraft, adems colocar en la identificacin de la polinizacin: nombre de los progenitores, fecha
de polinizacin, nombre del especialista y tipo de cruzamiento o polinizacin.
IV Cuestionario
1. Esquematice el procedimiento que usted utilizo en la prctica.
2. Describa la metodologa de hibridacin de por lo menos dos especies algamas cultivadas.
PRCTICA N13
Mtodos de mejoramiento gentico: Seleccin

I Introduccin
Mejoramiento gentico del frijol comn (PhaseolusvulgarisL.).
En el pas la principal leguminosa cultivada es el frijol comn, siendo en la costa donde los
rendimientos de grano seco son superiores (ms de 1,600 kg/ha), seguido de la sierra y finalmente la
selva; siendo el rendimiento de grano seco promedio nacional 900kg/ha.
Los sistemas de cultivo varan desde el monocultivo, asociado y en policultivo.Los granos secos,
considerados como menestras se comercializan como frijoles canarios o amarillos, bayos, blancos o
alubias, rojos, guindas blanco pequeo o panamito y frijoles moteados como la ua pavita o el
caballero de la sierra con manchas rojizas alrededor del hilio. Tambin se tienen frijoles color mostaza,
o con estras o jaspes alrededor de la testa o cscara.Los granos de frijol de mayor precio en el
mercado nacional es el frijol canario sobre el cual se realizar un mtodo de mejora en la presente
prctica y continuar en las campaas siguientes.
Los limitantes de la produccin de frijol en el pas son:
o Bajo rendimiento de grano seco
o Falta de variedades mejoradas
o Escasa produccin de semilla de calidad
o Susceptibilidad a plagas
o Susceptibilidad a enfermedades
o Largo perodo vegetativo
o Siembra en suelos marginales
o Cultivo generalmente bajo secano
o Manejo agronmico deficiente
Por otro lado, las plantas de frijol son de hbito de crecimiento determinado o indeterminado y, por
ello se pueden observar hasta cuatro tipos de planta que se lista a continuacin:
TipoI: Planta de crecimiento determinado
Tipo II: Planta de crecimiento indeterminado arbustivo
II A: Con tallo muy sobresaliente o elevado
II B: Con tallo ramas basales muy desarrolladas
Tipo III: Planta de crecimiento indeterminado rastrero
Tipo IV: Planta de crecimiento indeterminado trepador
Los mtodos de mejora usados en el frijol son: Introduccin, hibridacin, seleccin genealgica,
seleccin masal, seleccin individual, retrocruza o backcrosses, mutaciones,as mismo se aplica la
seleccin asistida con marcadores moleculares para resistencia al virus del mosaico dorado.
El Programa de Investigacin y Proyeccin Social de Leguminosas de Grano y Oleaginosas de la
Universidad Nacional Agraria La Molina ha evaluado numerosas lneas de frijol canario bajo las
denominaciones CIFAC y entre stas destacan CIFAC 92017, CIFAC 92018 para condiciones de
otoo/invierno. Actualmente, el PLGO realizar seleccin en la poblacin CIFAC 92017.
Objetivo
1. Adiestrar al estudiante con el proceso de seleccin de genotipos superiores en una
poblacin de frijol canario CIFAC 92017.
2. Reconocer y evaluar los criterios de seleccin en la poblacin comercial de frijol.
II Materiales
. Campo de cultivo con una variedad CIFAC 92017 de frijol canario.
. Etiquetas
. Estaca
. Lpiz
. Cuaderno de apuntes
. Rafia de colores
III Procedimiento
1. En la presente prctica, cada estudiante deber seleccionar 5 plantas de la poblacin de
frijol que renan los criterios de seleccin que se detalla en el siguiente Cuadro.
2. A cada planta seleccionada deber colocar la etiqueta que incluye los siguientes datos:
Nombre de la Variedad:
N de Seleccin: .
Apellido del seleccionador: .
Campaa y lugar donde se ejecuta la Seleccin: ..
Variedad de frijol Canario CIFAC 92017
Planta H. de Tipo de N Sanidad de Tamao Forma de Color de Vigor de

Precocidad
seleccionada crecimiento planta vainas/planta la planta de vaina vaina vaina la planta
Criterios de seleccin (para un campo de frijol en estado de llenado de grano)
a. Hbito de crecimiento: (determinado)

b. Tipo de planta: (I), el tallo termina en una inflorescencia o vaina.
c. Precocidad: estado de desarrollo ms avanzado (fin de formacin de vainas e inicio del
llenado de grano).
d. Nmero de vainas/planta o vainas en formacin: mayor de 25 vainas/planta.
e. Sanidad de la planta: libre de dao de insectos y patgenos.
f. Tamao de vaina: mediana a grande.
g. Forma de vaina: recta o ligeramente curvada.
h. Color de vaina: pajizo
i. Vigor de la planta: 1=muy bueno, 2=bueno, 3=regular y 4=pobre.
j. Color de grano: amarillo (solo si hay vainas secas)
IV Cuestionario
1. Desarrolle dos mtodos de seleccin practicadas en especies autgamas.
PRCTICA N14
Planeamiento de Experimentos
I Introduccin
La estadstica es indispensable en la mejora gentica vegetal. El mejorador conduce el material
gentico en el campo bajo condiciones medioambientales variables que tienden a enmascarar efectos
reales. Luego, con las evaluaciones que realiza el mejorador a menudo maneja grandes cantidades de
datos que necesita sean resumidos para facilitar una correcta decisin. El software de los equipos de
cmputo de toda clase est disponible para uso en el mejoramiento gentico de las plantas. El primer
paso crtico es conocer que procedimiento estadstico usar para resolver un problema especfico.
Asimismo, el mejorador trabaja con muestras y debe inferir acerca del comportamiento a la
poblacin.
Al instalar, manejar y cosechar un experimento, se obtiene registros de evaluaciones y esta
informacin debe ser ordenada con el fin de efectuar los anlisis. Una forma de analizar la
informacin es mediante el uso de los diseos experimentales adecuados para llegar a la aceptacin o
al rechazo de la hiptesis. El anlisis de los diseos experimentales se realiza mediante el anlisis de
varianza y permite la comparacin de ms de dos medias mediante una prueba de F en nuestro caso
comparamos los tratamientos mediante la prueba de F.
Objetivos
1. Conocer los procedimientos de la experimentacin agrcola
2. Elegir el diseo experimental adecuado.
3. Preparar el ensayo experimental con el material gentico a utilizar.
4. Identificar y randomizar los tratamientos.
5. Establecer el experimento en el campo.
6. Evaluar un carcter cuantitativo y realizar el anlisis de variancia e interpretar el resultado.
II Materiales
Para la preparacin e instalacin del experimento se requiere:
. Semillas de 6 genotipos de arvejas.
. Cordel marcador
. Cal
. Sobres de papel N 3
. Bolsas de papel kraft
. Engrapador
. Grapas, lpiz
. Tabla de nmeros aleatorios
. Lampas
III Procedimiento
1. El ensayo ser conducido bajo el diseo de bloques completos al azar con 6 tratamientos y
4 repeticiones o bloques. La parcela experimental consistir de 4 surcos de 4.5 metros de
largo espaciados a 80 cm., con una distancia de siembra entre golpes de 30 cm.,
depositando 4 semillas por golpe.
2. La aleatorizacin de los tratamientos ser como se muestra en el cuadro siguiente:
Experimento: Arvejas
Localidad: La Molina - 2011
BLOQUES
Genotipo
Entrada I II III IV
(Tratamiento)
1 QUANTUM 103 201 304 405
2 USUI 106 204 302 406
3 TARMA 102 203 301 401
4 AFILA 104 205 305 402
5 UTRILLO 101 202 303 404
6 MARROWFAT 105 206 306 403
3. Caractersticas evaluadas en el experimento:

. Das a floracin
. Vainas por planta
. Granos por vaina
. Peso de 100 granos
. Rendimiento de grano
4. Anlisis estadstico:
El anlisis de varianza para cada carcter en estudio estar basado en el siguiente modelo
aditivo lineal:
Yjk = + Bk+ Gj+ jk

Donde:
Yjk = es la observacion correspondiente al j-simo genotipo en el k-simo bloque
= media general
Bk = efecto del k-simo bloque
Gj = efecto del j-simo genotipo
jk = efecto aleatorio del error asociado a la observacion Yjk
Esquema del anlisis de variancia
F. de variacin G. L. [C.M.] E
Bloques (B) r-1 2e + g 2B
Genotipos (G) g-1 2e + rG2/glG
Error experimental (e) (r-1)(g-1) 2e

IV Cuestionario
1. Qu es una parcela?
2. Cmo define el tamao de la parcela?
3. Por qu se randomizan los tratamientos?
4. Qu diseos experimentales conoce y cuntos tratamientos se puede evaluar en cada
diseo?
5. Haga el esquema de la instalacin de un experimento?
PRCTICA N15
Instalacin y evaluacin de un campo semillero: Caso Maz

I Introduccin
El producto final de un programa de mejoramiento gentico es la obtencin del cultivar de
rendimiento superior.
La semillas de estos cultivares deben de multiplicarse en un volumen grande para ser distribuidos a
los agricultores.
En el maz amarillo duro la produccin de semillas hbridas sigue tcnicas especiales, que pueden
agruparse en cinco fases principales:
1 Produccin de semilla bsica de fundacin, lneas y simples
2 Produccin de hbridos triples y dobles en campo
3 Procesamiento de la semilla, limpia, clasificacin, tratamiento y envasado
4 Certificacin y,
5 Comercializacin
Produccin de semillas bsicas o de fundacin
Esta fase est a cargo de personal altamente especializados y conocedor de la semilla bsica;
comprende el mantenimiento de las lneas endocriadas y la formacin de los simples bsicos para la
produccin comercial de los hbridos dobles.
Mantenimiento y aumento de lneas endocriadas
Las lneas bsicas endocriadas constituyen el material bsico o de fundacin en la produccin

comercial de semillas hbridas, el mantenimiento y aumento debe realizarse en lotes completamente
aislados de otros maces, debe eliminarse toda planta fuera de tipo; resultado de mutaciones, mezclas
o cruzamientos por contaminaciones de polen extrao. Al desgrane, tambin debe eliminarse las
mazorcas fuera de tipo y color.
Formacin de simples bsicos
Esta fase comprende el cruzamiento entre dos lneas endocriadas, en lotes aislados por lo menos con
400 metros de distanciamiento o por diferencia de tiempo de siembra. Se siembra en una proporcin
de 2:1(2 surcos de hembras x 1 surco de macho). Siendo las lneas endocriadas generalmente de poco
vigor y baja produccin de polen, se recomienda adecuada fertilizacin, control de malezas y buen
manejo de agua, as como, la eliminacin de toda planta fuera de tipo dentro de cada lnea
progenitora. Al momento de la floracin de las plantas hembras antes de la salida de la panoja y antes
de haber comenzado la dehiscencia, se eliminarn las panojas por medio de un tirn hacia arriba
abriendo las hojas terminales de la planta y teniendo cuidado de no arrancarlas. La cosecha se
efectuar solamente sobre los surcos de las plantas despanojadas, previo corte y eliminacin de las
plantas de los surcos machos. Al momento del desgrane, toda mazorca fuera de tipo ser eliminada.
Produccin de hbridos dobles
Est a cargo de agricultores, entidades oficiales o privadas dedicadas a la produccin de semillas

registradas, certificadas o autorizadas de acuerdo con la Ley Nacional de Semillas y por el
Reglamento de Semillas de Maz. Se obtiene las semillas de hbridos dobles mediante el cruzamiento
entre los dos hbridos simples. Se deben elegir los mejores suelos de buena extensin y se siembran
con un aislamiento de por lo menos 400 m. Si no se pudiera aislar por distancia se puede aislar por
tiempo efectuando la siembra 30 das despus de haberse sembrado el campo ms prximo.
Siembra
Los progenitores hembra y macho son hbridos simples y se siembran en pocas que coincidan en la
floracin. La proporcin es de 3:1 (tres surcos de hembra y un surco de macho, tambin se pueden
sembrar en la proporcin 6:2 seis de hembras pordos surcos de macho. Eliminar o descartar toda
planta fuera de tipo tanto en los surcos de progenitor hembra como del macho.
Despanojamiento
Esta etapa es la de mayor importancia en el cruzamiento de los progenitores y se debe poner especial
cuidado en su control. La eliminacin de las panojas en los seis surcos hembras debe iniciarse antes
de la salida de la panoja y antes de la dehiscencia por medio de un tirn hacia arriba, abriendo las
hojas terminales y cuidando de no romper o eliminar hojas, debido a que su prdida ocasiona bajas en
el rendimiento de semilla. El semillero es descartado si se constata que ms del 1 % de plantas estn
emitiendo polen en una inspeccin o ms del 2 % en tres inspecciones. Este proceso puede eliminarse
mediante la utilizacin de hembras bsicas con esterilidad masculina. Puesto que al dejar hembras
produciendo polen trae consigo la descalificacin del semillero por inspectores de control,segn el
Reglamento de Produccin de Semillas de Maz.
Antes de iniciar la cosecha se proceder a cortar con hoz las plantas de los surcos machos para sacarla
fuera del campo, dejando en pie solamente las plantas hembras. La cosecha de mazorcas de los surcos
hembras puede efectuarse a mano o mediante cosechadoras con 25% a 35% de humedad en el grano y
completando su secado en la colca hasta 14% 13% de humedad, donde se eliminarn las mazorcas
fuera de tipo y las que presentan malas conformaciones debido a enfermedades. El secado puede
efectuarse por aire caliente, tambin utilizando instalaciones fijas o porttiles especialmente
constituidas para este fin. Desgrane, esta operacin se realiza despus del secado; antes de iniciar el
desgrane se debe eliminar todo grano de maz de la desgranadora para evitar la posibilidad de
mezclas, as como la regulacin de la velocidad de la desgranadora para evitar daos en el embrin
del grano que pueden ocasionar bajas en la germinacin de la semilla. La semilla es remitida a la
planta de procesamiento de semillas.
Campo semillero de maz PM-213 Campo Vivero-UNALM PCIM-2011

Objetivos
1. Reconocer los lotes de semilleros instalados de semilla bsica y comercial en el campus de la
UNALM.
2. Conocer las proporciones para la siembra de hbridos simples e hbridos dobles.
3. Identificar plantas fuera de tipo, conocer el momento oportuno del despanoje.
4. Estimar los rendimientos de la semilla hbrida.
II Materiales
. Campos de semilla bsica.
. Campos de semilleros de hbridos simples y dobles.
. Libro de campo
. Etiquetas
. Lpiz
. Cuchillas
. Reglamento de Produccin de semilla de maz
III Procedimiento
1. Visitar los campos de los semilleros de hbridos simples, hbridos dobles.

2. Describir la disposicin y el manejo del campo semillero que se visita.
3. Describir la planta de procesamiento de granos.
IV Cuestionario
1. Cmo se maneja un campo semillero?
2. Qu consideraciones se tiene para elegir un campo semillero?
3. Cundo se realiza el despanoje de un campo semillero de maz?
4. Comente el uso de la esterilidad masculina en la formacin de hbridos simples y dobles.
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Manual de Prcticas de Fitomejoramiento General UNALM - Facultad de Agronoma

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

ELAS HUGO HUANUQUEO COCA

Organizacin de un Programa de Mejoramiento Gentico de Plantas

Ejemplo de un programa de mejora gentica por hibridacin:

Sistemas de Reproduccin de las Plantas: Reproduccin Sexual

Perpetuacin de las especies por reproduccin sexual

Clasificacin de las plantas segn su sistema de reproduccin

Abetos (Abies spp.) Ajonjol (Sesamun oficinale L.)

Alfala (Medicago sativa L.) Arroz (Oryza sativa L.)

Algodn (Gossypium barbadense L., G. spp.) Avena (Avena sativa L.)

Calabaza (Cucurbita spp.) Caf (Coffeaarabiga L.)

Cebolla (Allium cepa L.) Man (Arachis hipogea L.)

Coco (Coccus nucifera L.) Cebada (Hordeum vulgare L.)

Girasol (Helianthus annuunL.) Ctricos (Citrus spp.)

Higuerilla (Ricinuscomunis L.) Durazno (Prunus persica L.)

Maz (Zea mays L.) Arveja (Pisum sativumL.)

Manzano (Malus spp.) Garbanzo (Cicer arietinum L.)

Meln (Cucumis meloL.) Lino (Linumusitatissimun L.)

Peral (Pyrus spp.) Soya (Glycine max L.)

Sanda (Citrullus vulgaris L.) Tabaco (Nicotiana tabacum L.)

Zanahoria (Daucuscarota L.) Tomate (Lycopersicum esculentum L.)

Papayo (Carica papaya L.) Lenteja (Lens culinaris L.)

Cacao (Theobroma cacaoL.) Trbol (Trifolium spp.)

Remolacha (Beta vulgaris L.) Aj (Capsicum spp.)

Lpulo (Humulus lupulus L.) Pimiento (Capsicum annuun L.)

Esprrago (Asparagus officinale L.) Pallar (Phaseolus lunatus L.)

Estimacin de la Viabilidad Polnica

N de granos bien formados y teidos

Bases Genticas para el Mejoramiento de Plantas

Determinacin de la Variabilidad en una Poblacin

Carcter cualitativo de frijol: color de grano

2. Para cada caracterstica cuantitativa evaluada se obtendr:

Poblaciones en Equilibrio Hardy-Weinberg y Frecuencia de Genes

Tcnicas Biotecnolgicas para el Fitomejoramiento

Rescate de embriones de la cruza

Los marcadores pueden ser:Marcadores morfolgicos, Marcadores bioqumicos y Marcadores

Aplicacin de los marcadores moleculares

Separacin de fragmentos de ADN en un gel de

Revelado de un gel de acrilamida de

Variedades transgnicas (Eventos de transformacin)

Cultivo Evento de Tecnologa Aprobacin

Soya GTS40-3-2 RR 1996

Algodn MON1445 RR 2001

Algodn MON531 Bt 1998

Maz MON810 Bt 1998

Maz NK603 RR2 2004

Caracteres modificados en las variedades transgnicas

Comparacin entre mtodos de Transformacin del genoma nuclear

Tipo de integracin en el genoma Aleatoria en regiones con transcripcin Aleatoria

Especies con variedades obtenidas por la estrategia de variacin somaclonal

Especie Carcter Origen

Mostaza Rendimiento ICAR, India

Variedad Tipo Potencial de Maduracin Objetivo

J 104 Indica semienana Alto Media Calidad de grano

ECIA 91 (6104) Indica semienana Alto Media Calidad de grano

Basmati 370 Indica alta Bajo Media Reduccin de la altura

Gloria Indica alta Bajo Media Reduccin de la altura

Caribe 7 Indica alta Alto Sensible al Insensibilidad al fotoperiodo

IA Cuba 19 Indica semienana Alto Media Calidad de grano

LC 88 66 Indica intermedia Alto Media Calidad de grano

Fuentes y dosis de irradiacin

Tipos de mutaciones en cebada