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I S I
De esta forma, el centro activo de la enzima puede ser ocupado por el sustrato o por el
inhibidor, con la diferencia de que en el primer caso hay formacin de producto y en el
segundo no:
ks kp
E S ES E P
I
ki
EI
Vmx S
vo
I
KM 1 S
Ki
1 K
M 1
I 1
1
vo K mx ki S Vmx
I c
dems clulas). c
1/Vmx
v0 CON INHIBIDOR COMPETITIVO
Vmx
c
Figura2.- Ploteos de Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk en presencia y ausencia de un
inhibidor competitivo.
2. INHIBICIN NO COMPETITIVA
En este tipo de inhibicin el inhibidor se une a un lugar distinto al sitio de unin del
sustrato produciendo un complejo inactivo, independientemente de que la molcula de
sustrato se haya unido o no a la enzima. Tanto el complejo EI como el ESI son inactivos.
1/v0 ks kp
E S ES E P
I I
ki ks ki
1/Vmx
EI S ESI
Vmx
S
1
I
vo
ki
K M S
1/[S]
Como vemos, el intruso ahora est afectando al numerador, dividindolo, pero
especficamente es la Velocidad mxima la que es modificada (es disminuida), en tanto que
la KM no vara. La ecuacin doble recproca para la inhibicin no competitiva es:
1 K I 1 1 1 I
M 1
v o Vmx ki S Vmx ki
S
Vmx
KM [S]
Un ejemplo de este tipo de inhibicin es el efecto del cianuro sobre la enzima citocromo
oxidasa, la cual interacta con el oxgeno durante la respiracin celular; la presencia de
cianuro impide el ingreso del oxgeno al centro activo de la enzima.
Estos inhibidores generalmente actan sobre varias enzimas distintas, ya que como no se
unen al centro activo de la enzima, carecen de Sespecificidad de unin.
3. INHIBICIN ACOMPETITIVA
En esta tambin el inhibidor se une a un lugar distinto al centro activo, pero aqu
sucede que solo se unir el inhibidor si lo ha hecho previamente el sustrato, ya que
I I
la unin de este ltimo, produce un cambio conformado nal en la enzima, que recin
permite la unin del inhibidor.
ks kp
E S ES E P
-1/KM -1/KM
I
ki
1/v0
1/Vmx
ESI
Vmx
S
1/Vmx
1 I ki
vo
KM
S
1 I / ki
En este caso, tanto la Velocidad mxima como la KM son afectadas por el mismo factor de
1/[S]
los anteriores casos, disminuyendo ambos parmetros. La ecuacin doble recproca ser por
lo tanto:
1 K 1 1
M 1 I / ki
v o Vmx S
Vmx
Vmx
Vmx
REGULACIN ENZIMTICA
Como ya hemos dicho anteriormente, la presencia de la enzima resulta ser un regulador del
metabolismo pues de ella depende que se lleve a cabo la reaccin correspondiente; por esta
razn cuando hay necesidad de ella, hay un primer punto de control y es la sntesis de la
enzima misma, lo cual es controlado hormonalmente; la enzima cumple su rol y luego
desaparece. Existen enzimas que tienen una vida media prolongada (por ejemplo horas o
das), estas deben funcionar en determinados momentos del metabolismo y en otros no; por
esta razn, estas enzimas estn sujetas a mecanismos de regulacin.
3. Mltiples formas de las enzimas; las isoenzimas aportan una va para regular a misma
reaccin de modo diverso en diferentes localizaciones o tiempos. Las isoenzimas son
enzimas homologas dentro del mismo organismo, catalizan la misma reaccin pero
presentan ligeras diferencias en su estructura y de forma ms evidente en sus valores de
KM o Vmx, as como en sus propiedades reguladoras. Pueden distinguirse unas de otras
por su movilidad electrofortica.
REGULACIN COVALENTE:
La fosforilacin es un mecanismo muy eficaz para regular la actividad de las enzimas, por
esta razn es el mecanismo regulador covalente ms comn. Las protenas quinasas
constituyen una de las mayores familias conocidas, ms de 100 enzimas homlogas en
seres humanos. Esta multiplicidad de enzimas permite que la regulacin se ajuste
cuidadosamente segn el tejido, el tiempo o el sustrato especficos.
Una clase de protena quinasas transfiere el grupo fosforilo terminal del ATP a
determinados residuos de serina y treonina, mientras que otra clase lo transfiere a residuos
especficos de tirosina.
Este tipo de modulacin que es ms rpida que la anterior, ya que se lleva a cabo en
segundos o fracciones de segundo, ocurre por la unin no covalente (interacciones dbiles)
de moduladores positivos (cuando hay activacin de la enzima) y moduladores negativos
(cuando hay inhibicin) a un lugar especfico de la enzima regulatoria; este sitio de unin
es distinto al de unin del sustrato, de all el nombre de enzimas alostricas, que viene de
las palabras griegas: allos que significa otro y stereos, estructura
Lo caracterstico de este tipo de modulacin es que el propio sustrato acta regulando su
afinidad por la enzima: efecto cooperativo, por esta razn es que este tipo de enzimas no
cumplen con la cintica de Michaelis Menten sino ms bien, muestran un comportamiento
sigmoidal, como puede verse en la figura 5
Figura 5.- Grfica de [S] vs vo para una enzima alostrica. Se puede observar que a medida
que aumentamos la concentracin de sustrato, aumenta la pendiente de la tangente que
representa la velocidad en cada punto de la curva.
Esto se debe a que las enzimas alostricas son protenas oligomricas y cada cadena
peptdica que la conforma, tiene su propio centro activo; de tal manera que cada enzima
contiene varios sitios de unin para el sustrato correspondiente. A medida que las molculas
de sustrato van ingresando a la enzima, estas producen cambios conformacionales en el
catalizador, modificando otros sitios de unin cercanos a ellos y de esta forma se facilita
cada vez ms el ingreso de los siguientes sustratos.
vo = Vmx [S]n
KM + [S]n
Aqu aparece un nuevo trmino y es n el cual se conoce como coeficiente de Hill; este
representa la modificacin del comportamiento Michaeliano que tienen las enzimas
alostricas de tal suerte que, cuando vale 1, el comportamiento es de hiprbola
rectangular. Asimismo, no hay KM sino simplemente Ks Ver figuras 6 y 7
Figura 6.- Representacin grfica de diferentes valores de coeficiente de Hill.
Las enzimas alostricas son protenas oligomricas, es decir, estn conformadas por ms de
una cadena peptdica (protenas de alto peso molecular y por lo tanto muy lbiles a ligeros
cambios en el pH, temperatura y presin); en algunos casos en cada enzima existen
subunidades catalticas, cada una de las cuales presenta su propio centro activo, y sub
unidades regulatorias sin capacidad cataltica, pero all es donde se unen los moduladores
alostricos. En otros casos, las enzimas alostricas estn conformadas por subunidades que
a la vez son catalticas y regulatorias.
Otro detalle que es importante en las enzimas alostricas es que los moduladores alostricos
negativos, aumentan el carcter sigmoidal de la curva a medida que interactan con la
enzima, mientras que los moduladores positivos, transforman ese comportamiento
sigmoidal en Michaeliano a medida que se unen a la enzima (ver figura 8)