Muestra vegetal de espinaca y jitomate preciamente secada

2.84 g Hojas de espinaca etanol

2.05 g Zanahoria hexano
3 vasos de 250
.123 jitomate hexano
6.9 de slice
2 porta objetis
1. Pesar 20 g de la muestra vegetal.

2. Colocar las muestras en un horno a 40 C hasta que se hayan secado totalmente.

3. Triturar dentro de un mortero hasta obtener un triturado homogneo.

4. Realizar un extraccin continua a reflujo por aproximadamente media hora, utilizando la cantidad necesaria de
hexano para cubrir en su totalidad la muestra.

5. Filtrar la muestra hasta que est totalmente concentrada.

6. Colocar cada una de las muestras en cromatoplacas diferentes.

7. Desarrollar las placas hasta encontrar el mejor eluyente o sistema de elucin que muestre la mejor separacin de
los pigmentos.
La tcnica de cromatografa se emple para la obtencin de pureza y separacin
analtica de componentes, por lo que de manera visible se pudieron identificar los
pigmentos concentrados dentro de las muestras orgnicas de Zanahoria, Jitomate
y Espinaca. El proceso se llev acabo con una porcin inicial de 20 g. de cada
vegetal. Cada fraccin se deshidrato posteriormente en una horno a 40C que
despus se dejo reposar adentro de hojas mediana de peridico, las cuales se
cambiaron dos veces dentro del periodo de una semana. La deshidratacin previa
que se aplic fue con el objetivo de la eliminacin de solventes que se pudiera
encontrar (sales minerales y agua) dentro de las muestras. Cuando se realiz por
fin la sesin experimental de cromatografa se pes y utiliz la cantidad de 2.84 g
Hojas de espinaca, 2.05 g Zanahoria y .123 de jitomate. Por medio de un mortero
se trituro por separado cada compuesto, ya que, la granulacin de pequeos
fragmentos de la materia orgnica asimilaron un mayor grado de absorcin dentro
de sus tejidos, por tanto se verti el mejor Eluyente de acuerdo a cada compuesto.
Para la espinaca se utiliz etanol debido a que la clorofila tiene grupos OH
(Clorofila a CH3 Clorofila B- CHO) que le proporciono la capacidad de
solubilizarse en lquidos tipo polar, como lo es el etanol.
Mientras que a la Zanahoria como al Jitomate se le adiciono el Eluyente Hexano,
por el pigmento de inters (Licopenos y Beta carotenos)a dividir , siendo que
poseen estructura poco polares. Para forma 3 mezclas totales, donde la mezcla 1
fue espinaca etanol, la mezcla 2 Zanahoria-Hexano y Mezcla 3 Jitomate-Hexano,
cada se verti en un vaso de precipitados.
Una vez que se obtuvieron las mezclas finales se comenz el anlisis de las
muestras orgnicas donde se utiliz gel de slice como absorbente, el cual estuvo
dentro de dos portaobjetos de vidrio. Se aplic cada una de las muestras en una
diferente tira, posteriormente se presenci de la capilaridad por medio de la forma
en que se expandi cada uno de los componentes de la mezcla.
Finalmente se obtuvo una Rf de la Mezcla 1 en .89, de la Mezcla 2 .33 , mientras
que la mezcla 3 presento .50, lo cual nos indic que su polaridad est
relacionada con la forma en que se expandieron sobre la tira, es decir cuanto
mayor fue polaridad mayor fue su desplazamiento, as como el valor de su Rf.
Por lo que la diferencia de solubilidad y polaridad en los materiales orgnicos que
se emplearon, si fueron aprovechados de manera que se pudieron observar los
diferentes estratos inmersos en la tira de cada pigmento (Clorofila, Licopenos y
Carotenos)

La extraccin lquido-lquido se realiza con cloroformo; la cafena al ser mucho ms soluble en este
solvente se separa del agua y los compuestos disueltos en ella (sacridos, iones metlicos, etc.),
migrando hacia la fase orgnica. Por ltimo se evapora al cloroformo obtenindose la cafena en
forma cristalina