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INTRODUCCIN

La farmacobotnica es la ciencia que estudia las plantas desde diversos enfoques,


ya sea de la botnica pura o aplicada. La botnica pura estudia las plantas desde un enfoque
terico, desde los aspectos de taxonoma y tambin de la fisiologa y la citogentica de los
vegetales. La botnica aplicada est basada en lo anterior y tambin considera los usos prcticos
que se le pueden dar a las plantas para lograr su adecuada utilizacin, que pueden ser disciplinas
como la forestal la agrcola, la farmacutica y la naturista.

La Farmacognosia es una ciencia que tiene por objeto el estudio cientfico de las drogas naturales
de origen vegetal y animal, de sus constituyentes qumicos, principios activos y productos
relacionados. UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

En la presente asignatura se considera como Objetivo General; proporcionar al estudiante los


FACULTAD
conocimientos bsicos, necesarios DE investigacin
para el estudio, FARMACIA Y BIOQUMICA
y manejo con calidad de las plantas
y de las drogas naturales utilizadas como recursos teraputicos.

CURSO
Como objeto especfico se DE
tieneFARMACOBOTNICA
en primer lugar que elyestudiante
FARMACOGNOSIA
desarrolle habilidades y destrezas
en el conocimiento de las estructuras internas y externas de las plantas que contribuyan a la
GUAyDE
identificacin de las mismas y en el manejo PR
CTICAS
utilizacin de los diferentes Mtodos y Tcnicas
Analticas para la extraccin, aislamiento, identificacin y cuantificacin de los principios activos
responsables de las acciones farmacolgicas que se encuentran en las drogas; y en segundo
trmino motivar el inters del estudiante al estudio e investigacin de las especies vegetales.
Con esta gua se pretende contribuir a un mejor desarrollo de las prcticas.

Las autoras.

Smallanthus sonchifolius

AUTORES: Q.F. Bertha Jurado Teixeira


Q.F. Eva Ramos LLica
Q.F. Elizabeth Consuelo Ortega Romero

PRCTICAS DE LABORATORIO

LIMA
, 2014
Tema
F-CV3-3B-2 Rev. Junio 2007
|
Semana Prctica
Elaboracin de diversos cortes y preparados microscpicos
1 1 para la caracterizacin de las drogas vegetales (Citologa).

2 2 Elaboracin de diversos cortes y preparados para la caracterizacin


microscpica de las drogas vegetales (Histologa).

Reconocimiento de los caracteres macroscpicos en las drogas vegetales


3 3 (Morfologa).

Control Botnico en una especie vegetal peruana. Procedimientos de


recoleccin, seleccin, secado, almacenamiento y conservacin de
4 4
drogas. Anlisis de drogas vegetales.

Control de calidad de drogas vegetales. Ensayos botnicos, Anlisis


cualitativo de constituyentes qumicos, tamizaje fitoqumico en extracto
5 5
acuoso. Preparacin del extracto etanlico.

Anlisis farmacognstico y tamizaje fitoqumico preliminar en extractos


estandarizados. Mtodo de separacin y purificacin de drogas vegetales.
6 6
Cromatografa en Capa Fina.

Extraccin e identificacin de carbohidratos simples, oligsidos y


7 polisacridos a partir de drogas naturales. Reacciones generales y
7
particulares de carbohidratos.

8 Primera evaluacin de prctica

Reconocimiento de Compuestos fenlicos simples y compuestos


8
9 antraquinnicos.
10
Reconocimiento de flavonoides, antocianinas y taninos. Valoracin de
9
taninos en drogas vegetales.
11 10 Extraccin y reconocimiento de aceites esenciales.

12 11 Drogas con alcaloides de ncleo tropnico, ncleo indlico, oxindlico y


ncleo fenantreno. Extraccin cida-alcalina, identificacin, obtencin y
valoracin.

Investigacin Farmacognstica de los extractos de la planta medicinal


12 estudiada (Anlisis Fitoqumico: Tamizaje fitoqumico, pH, ndice de
13
Refraccin, densidad y cromatografa en capa fina).

14 Lpidos, identificacin y control de calidad de aceites.


13

15 14 Vitaminas liposolubles e hidrosolubles, extraccin, identificacin y


cuantificacin.

16 Segunda evaluacin de prctica

F-CV3-3B-2 Rev. Junio 20072


PRCTICA N 1
CARACTERIZACIN
MICROSCPICA DE LAS
DROGAS VEGETALES.
CITOLOGA:CLULA VEGETAL, PARED CELULAR, NCLEO
Y COMPONENTES PROTOPLASMTICOS.

MARCO TERICO:
El estudio de la estructura interna de las plantas requiere de adecuadas preparaciones
microscpicas de muestras que nos permitan la observacin detallada de los diferentes tejidos y
estructuras vegetales; stas se elaboran preparando lminas histolgicas de diferentes tipos de
cortes hechos en plantas.
La clula vegetal presenta entre sus principales caractersticas una estructura celulsica compleja
(pared celular)y diferentes componentes no protoplasmticos primarios (substancias que se
producen como consecuencia del metabolismo primario) y comprenden a los polisacridos
(almidones) as como a los lpidos y protenas de reserva (aleurona), mientras que los denominadas
inclusiones celulares (diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla cristalfera) constituyen las
formaciones cristalinas de oxalatos(diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla
cristalfera);todas estas sustancias tienen su importancia farmacognstica en la identidad de la
droga vegetal.

COMPETENCIAS: Capacitar al estudiante para que adquiera habilidad en cortes histolgicos en


rganos vegetales.
Identificar la clula y paredes celulares, los componentes de reserva,
almidones y aleurona as como los cristales de oxalato presentes en la
clula vegetal.
Lminas y laminillas, Papel lente Papel
higinico, Franela limpia Placa petri,
MATERIAL VEGETAL: gotero, estiletes.
Hoja de afeitar nueva.
Solanum tuberosum papa (tubrculo) Reactivos: lugol, glicerina, safranina.
Allium cepa cebolla (bulbo)
Capsicum pendulum aj amarillo (fruto) Microscopios
Ficus elstica caucho (hoja) Cmara Fotogrfica
Daucus carotazanahoria (raz)
Muestra: races, tallos y hojas Tradescantia zebrina oreja de gato (hoja)
Phaseolus vulgarisfrejol(fruto y/o semilla)
OTROS MATERIALES: Opuntia ficus tuna (tallo)
PROCEDIMIENTO:

Preparacin de cortes:Los cortes se realizan a mano alzada, con una hoja de afeitar
a) Cortes que comnmente se hacen en hojas:
I. Corte superficial: Se secciona paralelamente a la
superficie de la hoja.
II. Corte transversal: Se secciona
perpendicularmente a la vena media.

b) Cortes que comnmente se hacen en tallos y races.


- Corte transversal: se hace
perpendicular al eje del cilindro del tallo o de la
raz.
- Corte longitudinal: se hace Fig. 1. Tipos de
corte a mano alzada paralelo al eje del cilindro.

Confeccin de una preparacin microscpica:


Sobre una lmina portaobjeto se deposita una gota de agua y luego se coloca mediante una pinza o
estilete el material a examinar, se recubre el material con una laminilla cubreobjeto.

Observacin de las preparaciones:


Colocar su lmina preparada en la platina del microscopio para su observacin, primero con el
objetivo de menor aumento (40x) luego en (100x) y despus a mayor aumento (400x).

Corte transversal de tallo Corte longitudinal Corte paradermal (superficial)

Fig. 2. Tipos de cortes usando colorantes


Clulas de epidermis en Clula ptrea en Cistolito en hoja
catfilo de cebolla fruto de membrillo de caucho

Inclusiones celulares Sustancias de reserva: granos de almidn

Drusas Rafidios

A. Papa Solanum tuberosum, B. Arroz Oryza sativa


C. Frijol Phaseolus vulgaris D. Maz Zea mays E.
Esferocristales de inulina. F. Granos de aleurona
Fig. 3 Citologa e inclusiones citoplasmticas

2. COLORACIN DE LOS CORTES SELECCIONADOS


Se usan los cortes ms delgados realizados a mano libre o con micrtomo
Una vez realizados los cortes, se recogen en una placa petri con agua destilada; se selecciona bajo
la lupa los mejores cortes.

COLORACIN DIRECTA: SAFRANINA

TCNICA:
Teir los cortes safranina diluida al 15% durante 2-5 minutos segn el material, lavar con agua, y
montar en agua. Las paredes secundarias lignificadas se tien de color rojo intenso y tambin la
cutcula. El parnquima toma color rosado.

3. CITOLOGA e INCLUSIONES CITOPLASMTICAS

A. Realizar cortes transversales muy delgados de la parte carnosa del membrillo y del aj. Observe a
menor aumento las clulas ptreas. A mayor aumento, reconocer la pared secundaria
lignificada, el lumen y los canalculos porales.
B. Realizar un raspado del tubrculo de papa, semilla
de frejol y depositarlo en una lmina con una gota de agua, cubrir con la laminilla y
observar con el objetivo de mayor aumento. Identifique los diferentes tipos de granos de
almidn: simples y compuestos, con sus estratificaciones e hilio excntrico. A mayor
aumento dentro de las clulas algo redondeadas. Se identifican amiloplastos de formas
peculiarmente caractersticas luego aadir lugol y sealar lo ocurrido.
C. Realizar corte transversal de hoja de sbila y colocar en un portaobjeto, realizar el montaje con
una gota de agua. Observe: los rafidios.
D. Realice un corte transversal del tallo modificado de tuna o en corte transversal de peciolo de
begonia, realice el montaje con una gota de agua. Observe: clulas isodiamtricas conteniendo
un agregado cristalino de aspecto asteroideo: la drusa.
E. Realice el corte transversal de la raz de zanahoria y montar con una gota de agua. Observar
clulas de contorno redondeado en cuyo interior presenta pequeos corpsculos tubulares e
irregulares refringentes de color anaranjado (cromoplastos con predominio de carotenoides).
F. Corte superficial del envs de las hojas de oreja de gato y hacer el montaje respectivo. Observe
clulas de contorno poligonal, unos incoloros y otros de color morado prpura; dicho color se
debe a que el contenido vacuolar que est conformado por antocianinas. El conjunto de vacuolas
se llama vacuoma.

RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la HOJA DE OBSERVACIONES y elaborar el informe de su
prctica mediante un PROTOCOLO DE ANLISIS BOTNICO segn Formato.

ACTIVIDAD BIBLIOGRFICA:
1. En qu consiste la Herborizacin de muestras vegetales? Desarrolle un mapa conceptual con grficos o
dibujos.
2. Mencione mediante un cuadro 10 plantas medicinales endmicas o nativas del Per, con los siguientes
datos:
Nombre Comn Nombre Cientfico Familia Usos Medicinales Ttulo, Autor y ao de
publicacin.
1.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Libros
1. Prez, E. 1999. Introduccin a la Biologa Vegetal. Impresiones David, Lima
2. Strasburger. 1994. Botnica. Ediciones Omega S.A. Barcelona.
3. Gola G.; Negri G.; Cappelletti C. 1965.Tratado de Botnica Barcelona,
6. Mostacero, J. Taxonoma de las Fanergamas. 2002.tiles del Per. 1ra. Edicin. Lima.
7. Greulach V.; Adams A. 1990. Las plantas: introduccin a la botnica moderna. Mxico 9.
Reynaud, J.2002. La flora del farmacutico. Espaa.

Revistas
1. Fieldmuseum: http://fm1.fieldmuseum.org/vrrc/
2. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
3. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
4. Revista peruana de biologa: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
5. The Plant List: www.theplantlist.org
6. Trpicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org
HOJA DE OBSERVACIONESDE PRCTICA N 1
CARACTERIZACIN MICROSCPICA DE LAS DROGAS VEGETALES.
CITOLOGA: CLULA VEGETAL, PARED CELULAR, NCLEO Y COMPONENTES
PROTOPLASMTICOS.
Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../........

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra Muestra Muestra Muestra
Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin

FORMATO: PROTOCOLO DE ANLISIS BOTNICO


Analistas:
Nombre comn:
Nombre cientfico:

TEMA:
Fecha: / /
FOTOGRAFAS DE CORTE ESQUEMA
FOTOGRAFAS PLANTA COMPLETA (DIBUJO A
MANO SIN
COLOREAR DE
LA
OBSERVACIN DEL CORTE)

Nombre cientfico:

Familia: Tipo de corte

Lugar de Origen: Coloracin

Habitad: Aumento

Lugar de recoleccin:

INTERPRETACIN DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

PRCTICA N 2

HISTOLOGA VEGETAL: Tejidos Parenquimticos, Mecnicos, Protectores, Conductores y


Secretores

MARCO TERICO:

Los tejidos vegetales encargados de la proteccin de la planta se caracterizan especialmente por carecer
de espacios intercelulares y conformar una capa uni o pluricelular en la parte externa del rgano vegetal,
se diferencian en su origen primario (Epidermis) o secundario (Peridermis). El tejido mecnico est
conformado por el colnquima, de clulas vivas y paredes primarias desigualmente engrosadas y el
esclernquima, conformado por clulas muertas y paredes secundarias lignificadas, uniformemente
engrosadas. El xilema es un tejido vascular conformado por clulas muertas y de paredes secundarias
lignificadas con una serie de engrosamientos
caractersticos. Los diferentes subproductos del metabolismo celular secundario que se
producen en las plantas generalmente se encuentran localizados en clulas y estructuras
secretoras en los distintos rganos vegetales, por ejemplo los laticferos y las cavidades
secretoras. Los diferentes rganos vegetales presentan una serie de tejidos vegetales que conforman
una estructura interna propia del desarrollo en las plantas, los cuales se describen como parte de la
caracterizacin botnica de las drogas vegetales.

TIPOS DE COLNQUIMA
A Colnquima angular
TEJIDO MERISTEMTICO B Colnquima laminar
CAMBIUM MODELO DE CRECIMIENTO SECUNDARIO C Colnquima anular
D Colnquima lagunar

HACES CONDUCTORES
A Bolsa olefera esquizgenaTEJIDO SECRETOR A Haz conductor colateral cerrado
B Haz conductor colateral abierto
B Bolsa olefera lisgena
C Canal secretor
D Tubo laticfero no articulado ramificado
E Tubo laticfero articulado no ramificado
TIPOS DE
TRICOMAS
A Pluricelular
B Cnico unicelular
C Glandular largo
D Glandular corto
E Glandular pluricelular
F Mixto
G Estrellado
H Urticante

COMPETENCIAS: Reconocer y caracterizar los principales Tejidos


Meristemticos, Parenquimticos, Mecnicos, Protectores, Conductores y
Secretores vegetales de valor diagnstico.

MATERIALES:

Material Vegetal
- Pelargonium hortorum geranio (hoja)
- Cucurbita pepo zapallo (tallo)o C. maxima calabaza
- Citrus aurantium naranja (fruto) - Ficus elastica caucho (pecolo)
- Sambucus peruviana Saco (tallo)
- Tallo de Phoeniculum vulgare hinojo
- Hojas de Iris florentina lirio

Otros Materiales y Reactivos:


Lminas y laminillas, gotero, estiletes
Hoja de afeitar nueva, papel lente.
Safranina.
Microscopio
Cmara fotogrfica

PROCEDIMIENTO:

TEJIDO EPIDRMICO:
1. Realizar cortes superficiales o paradermal de la hoja de geranio y de lirio, hacer el montaje en una
gota de agua. Observar clulas de contorno sinuoso y la posicin desordenada de los estomas:
Adems diferenciar los pelos o Tricomas pluricelulares cnicos y los: glandulares en geranio y clulas
ordenadas en lirio, con estomas ordenados.
TEJIDO MECNICO
2. Realizar cortes transversales del tallo de zapallo o calabaza o hinojo o sauco, hacer el
montaje con una gota de safranina y observe: debajo de la epidermis, reconocer clulas de
forma polidrica, con engrosamiento en los ngulos y dbilmente teidas: Colnquima
angular. En las mismas muestras, por debajo del parnquima se presentan clulas con paredes
engrosadas y teidas intensamente, fibras de Esclernquima.

TEJIDO CONDUCTOR O VASCULAR


3. Realizar cortes longitudinales y transversal del tallo de zapallo, el montaje en una gota de safranina y
observe: el xilema formado por las trqueas con engrosamientos que los tipifican en anillado,
espiralado, helicoidal y reticulado. Y los haces vasculares ordenados.

TEJIDO SECRETOR
4. Realizar cortes longitudinales del pecolo de la hoja de caucho, preparar el montaje con una gota de
agua y observar: a mayor aumento clulas alargadas conteniendo ltex: LATICFERO NO
ARTICULADO, reconocidos por su contenido de color gris. En corte sub-paradermal de cscara de
naranja se observar las cavidades lisgenas y en cortes transversales de hinojo reconocer los
canales secretores.

ESTRUCTURA INTERNA DE TALLO Y HOJA


5. Realizar cortes transversales en sauco, hacer el montaje en una gota de safranina.
A mayor aumento reconocer la estructura secundaria de tallo (dicotilednea) y los siguientes tejidos:
- Peridermis (con vestigios de epidermis) - Cambium vascular
- Parnquima cortical clorofiliano - Xilema primario y secundario.
- Lber primario (floema esclerosado) - Radios medulares, clulas de parnquima.
- Floema secundario -Mdula, clulas de parnquima incoloro

6.- Realzar cortes transversales en hoja de chirimoya, hacer el montaje en agua.


Observar la estructura bifacial de hoja, con las epidermis abaxial y adaxial y el mesfilo compuesto por el
parnquima clorofiliano en empalizada y el parnquima lagunar.

RESULTADOS:

Hacer esquemas de sus observaciones en la Hoja de Observaciones y elaborar el informe de su prctica


mediante un Protocolo de anlisis botnico segn Formato.

ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

1. En qu consiste la Taxonoma vegetal, de un ejemplo.


2. Qu funcin realizan los diferentes tipos de tejidos vegetales, grafique y seale el uso mediante un
cuadro.

Tipo de Tejido Funcin Presentes en especies vegetales.


Nombre comn, cientfico y Familia.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. ALDAVE, A., MOSTACERO, J. 1998. Botnica Farmacutica, Lima.


2. ANGULO, P., DIAZ, F. 1997. La medicina tradicional en el desarrollo de fitomedicamentos, el enfoque
etnofarmacolgico. Lima.
3. BRACK E., A. 1999. Diccionario enciclopdico de las
plantas tiles del Per. Edit. PNUD CBC, Cusco Per.
4. CASTILLO, E. 2007. Manual de Fitoterapia. Primera Edicin. Editorial Elsevier. Barcelona.
5. CULTURAL. 2005. Atlas de Botnica: El Mundo de las Plantas. USA.
6. DIAZ, T. 2004. Curso de Botnica.
7. ESAU, K. 2008. Anatoma vegetal. Tercera Edicin. Editorial Omega. Barcelona.
8. FAHN, A. 1994. Anatoma vegetal. Edit. Blume, Madrid.
9. FONT QUER, Po 1993. Diccionario Botnica, Edit. Labor, Barcelona.

OBSERVACIONES DE LA PRCTICA N 2

HISTOLOGA VEGETAL: Tejidos Parenquimticos, Mecnicos, Protectores, Conductores y


Secretores

Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../........

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra Muestra Muestra Muestra
Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte: Tipo de corte:
Observacin Observacin Observacin Observacin

PRCTICA N 3

MORGOLOGA VEGETAL (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y semilla)

MARCO TERICO:
La morfologa estudia los rganos de la planta y las partes que los forman. Estos rganos son la raz, el
tallo y las hojas que llamamos rganos vegetativos y la flor y el fruto, que son los rganos reproductivos.
Las races se pueden clasificar de acuerdo a su origen, al medio en que viven por su forma, por su
duracin y por su consistencia.A diferencia de las races, el tallo presenta geotropismo negativo, tiene
nudos (lugares donde se originan las hojas) y entrenudos (regiones entre dos nudos consecutivos),
yemas (reas del tallo situadas justo por encima del punto de insercin de la hoja apical y axilares) y por
lo comn hojas bien desarrolladas.Sus funciones bsicas son de soporte, de conexin de hojas y yemas
entre s y con la raz y de conduccin de la savia.

Las funciones primordiales de las hojas son la fotosntesis (cloroplastos) y el intercambio gaseoso
(estomas), tambin asume las de proteccin, defensa, reserva y reproductora. Las hojas se clasifican por
el borde de la hoja, la forma del limbo, peciolo, vaina y nervadura.
La flor es un brote de crecimiento definido con hojas que producen rganos reproductores. De estas
hojas, las ms apicales o internas son esporfilos y las ms inferiores o externas son antfilos.Se llama
inflorescencia a una ramificacin terminada en flores. Cada una de las ramitas del eje primario o caquis,
que sostiene una flor, se llama pedicelo. Cuando solo existe una flor en el pice del tallo o en la axila de
una hoja, no hay inflorescencia y entonces se dice que la flor es solitaria, el tipo de inflorescencia tiene
importancia para la taxonoma botnica; es caracterstico de cada familia.
El fruto es el conjunto de las piezas florales que persisten despus de la fecundacin y acompaan a la
semilla generalmente se dice que es el ovario desarrollado y maduro ya que este se engruesa
acumulando materias nutritivas y se transforman en fruto y contiene la semilla.
La semilla es el medio principal para perpetuar de generacin en generacin la mayora de las plantas (ya
que algunas se regeneran vegetativamente) y gran parte de las especies leosas.

COMPETENCIAS: Reconocer y caracterizar los principales rganos de la planta (Raz, Tallo, Hojas,
Flor, Fruto y semilla)

MATERIALES:
Diferentes tipos de (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla)
Lupas
Hoja de afeitar
Reglas
Placas Petri

PROCEDIMIENTO:
Identificar segn las caractersticas morfolgicas los tipos de raz, tallo, hoja, flor, fruto y semilla.
SEMILLA

TALLO

RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la Hoja de Observaciones y elaborar el informe de su prctica
mediante un Protocolo de anlisis botnico segn Formato PROTOCLO BOTNICO.

HOJAS
TIPOS DERAZ
ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA
RAZ
1. De 2 ejemplos de Races, Hojas, Tallos, Flores, Frutos y Semillas con usos medicinales mediante un
cuadro. INFLORESCENCIA
Nombre Comn Nombre Cientfico rgano de la planta Uso medicinal

Referencias Bibliogrficas

1. The Plant List: www.theplantlist.org


2. The Plants Database: http://plants.usda.gov/java/
3. Trpicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org
FLOR

4. Asociacin Latinoamericana de Botnica:


http://www.botanica-alb.org/links.php
5. Real Jardn Botnico: http://www.rjb.csic.es/jardinbotanico/jardin/index.php?
Cab=111&len=es FRUTO
OBSERVACIONES DE LA PRCTICA N 3
MORGOLOGA VEGETAL (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla)

Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../.......

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de Raz Tipo de Raz Tipo de Raz Tipo de Raz
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de Tallo Tipo de Tallo Tipo de Tallo Tipo de Tallo
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra Muestra Muestra Muestra
Tipo de hoja Tipo de hoja Tipo de hoja Tipo de
Observacin Observacin Observacin hoja
Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de Flor Tipo de Flor Tipo de Flor Tipo de Flor
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tipo de Fruto Tipo de Fruto Tipo de Fruto Tipo de Fruto
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra Muestra Muestra Muestra
Tipo de Semilla Tipo de Semilla Tipo de Semilla Tipo de Semilla
Observacin Observacin Observacin Observacin

PRCTICA N 4 CONTROL BOTNICO EN UNA ESPECIE VEGETAL PERUANA A INVESTIGAR

MARCO TERICO:
Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los pases en desarrollo. La
Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que ms del 80% de la poblacin mundial utiliza,
rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atencin primaria de salud y
que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios
activos (Akerele, 1993; Sheldon et al., 1997; Shrestha y Dhillion, 2003; Katewa et al., 2004). De acuerdo
a la OMS (1979) una planta medicinal es definida como cualquier especie vegetal que contiene
sustancias que pueden ser empleadas para propsitos teraputicos o cuyos principios activos pueden
servir de precursores para la sntesis de nuevos frmacos.

Estas plantas tambin tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre otras, son fuente
directa de agentes teraputicos, se emplean como materia prima para la fabricacin de medicamentos
semisintticos ms complejos, la estructura qumica de sus
principios activos puede servir de modelo para la elaboracin de drogas sintticas y tales
principios se pueden utilizar como marcadores taxonmicos en la bsqueda de nuevos
medicamentos (Akerele, 1993).

La investigacin sobre el uso de plantas medicinales forma parte de la etnobotnica, que ha sido definida
como el estudio de las interrelaciones entre los grupos humanos y las plantas (Ford, 1978; Martin, 2001;
Gmez-Veloz, 2002). Por su naturaleza interdisciplinaria abarca muchas reas, incluyendo: botnica,
qumica, medicina, farmacologa, toxicologa, nutricin, agronoma, ecologa, sociologa, antropologa,
lingstica, historia y arqueologa, entre otras; lo cual permite un amplio rango de enfoques y aplicaciones
(Alexiades, 1996a; Martin, 2001)

A pesar de todas estas innovaciones, Zent (1999) plantea que la filosofa de la etnobotnica no ha
cambiado mucho, pues en la mayora de las investigaciones sobre plantas medicinales se sigue
enfatizando la documentacin cientfica de las plantas y sus usos para beneficio casi exclusivo de
grandes transnacionales, con poco inters en la dinmica de los sistemas de conocimiento local y en la
compensacin a las comunidades nativas. Se requiere entonces de ms trabajo interdisciplinario, de una
mayor preocupacin por los aspectos ticos de la comercializacin de medicamentos desarrollados a
partir del conocimiento tradicional de ciertos grupos humanos (Prance, 1991) y por el retorno de los
resultados obtenidos, en ensayos biolgicos de plantas tropicales, a los pases y grupos humanos que
han colaborado en la coleccin de las plantas evaluadas (Ritcher y Carlson, 1998).

COMPETENCIAS: -Realizar el anlisis Botnico Macroscpico de la especie vegetal a investigar,


Reconociendo morfolgicamente los diferentes rganos de la especie.
-Reconocer y caracterizar los principales rganos de la planta a nivel
microscpico mediante cortes histolgicos (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y
semilla) con ayuda de la histoqumica.
- Realizar el anlisis organolptico de los diferentes rganos de la especie
vegetal. Placas Petri
Cmara Fotogrfica
MATERIALES:
Especie vegetal a investigar y sus rganos . Lminas y laminillas, gotero, estiletes Hoja
Lupas de afeitar nueva, papel lente.
Hoja de afeitar Safranina. Lugol, Etanol al 50% y agua
Reglas destilada. Microscopio
PROCEDIMIENTO:

1. Realizar el Anlisis Macroscpico, organolptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes rganos
de la especie.

Tabla Nro. 1. Anlisis macroscpico, caractersticas organolpticas de Raz, Tallo, Hoja, Flor,
Fruto y Semilla

2. Realizar el anlisis microscpico de la especie vegetal a estudiar con ayuda de la histoqumica y


identificar los diferentes tipos de tejido presentes en la especie.

Tabla Nro. 2. Anlisis microscpico, Citologa e Histologa de Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y
Semilla

rgano de la Tipo de Corte Histoqumica Observacin


Especie (Tcnica de Tincin)
vegetal
Raz C.T. Fresco, Safranina y Lugol

Tallo C.T. Fresco, Safranina y floroglucinol


C.L. Fresco, Safranina y floroglucinol

Hoja C.P. Fresco, Safranina y Lugol


C.T.
Fresco, Safranina
Flor C.L. Fresco, Safranina
C.P. Lugol

Fruto C.P. Fresco,


C.T. Safranina y Lugol

Semilla Raspado Fresco y Lugol


ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

1. Desarrolle un Flujograma de las etapas para realizar un estudio Botnico en especies vegetales con
uso medicinal.

Referencias Bibliogrficas

1. SORIA, R., CARHUAPOMA, M. 2005. Manual de prcticas de Botnica General y


Sistemtica. Lima
2. SOUKUP, J. 1971. Vocabulario de Nombres Vulgares de Plantas Peruanas, Ed.
Salesiana, Lima.
3. STRASBURGER, E. NOLL, F. 2004. Tratado de Botnica. 35 ed. Ediciones Omega.
Barcelona.
4. THOMAS-DOMNECH, J.M. 1997. Atlas Temtico de Botnica. Barcelona.
5. TOSCO U. 1993 Atlas de Botnica. Edit. Barcelona.
6. VALDIZAN H.; MALDONADO A. 1922. La Medicina Popular Peruana Imp. Torres
Aguirre, Lima.
7. VALLA, J. 2011. Botnica. Morfologa de las plantas superiores. Primera Edicin.
Editorial Hemisferio Sur.
8. VENTURA, O. 2010. Las Plantas Aromticas y Medicinales. Primera Edicin. Lima
9. VILLAR, U. 2004. Fitoterapia. Primera Edicin. Editorial Acribia. Zaragoza
10. WEBERBAUER A. 1945. El Mundo Vegetal de los Andes Peruanos. Ministerio de
Agricultura. Lima.
11. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
12. Journal of Natural Products: http://www.journalofnaturalproducts.com/
13. Nature Medicine: http://www.nature.com/nm/index.html
14. Phytochemistry: http://www.journals.elsevier.com/phytochemistry/
15. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
16. Revista peruana de biologa: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
17. Revistas de investigacin UNMSM: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/
OBSERVACIONES DE LA PRCTICA N 4 CONTROL BOTNICO DE LA ESPECIE
VEGETAL MEDICINAL
MORGOLOGA VEGETAL CITOLOGA e HISTOLOGA, (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla),

Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../........


Muestra Muestra Muestra Muestra
Raz Raz Raz Raz
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Tallo Tallo Tallo Tallo
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra hoja Muestra hoja Muestra hoja Muestra hoja
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Flor Flor Flor Flor
Observacin Observacin Observacin Observacin
Muestra Muestra Muestra Muestra
Fruto Fruto Fruto Fruto
Observacin Observacin Observacin Observacin

Muestra Muestra Muestra Muestra


Semilla Semilla Semilla Semilla
Observacin Observacin Observacin Observacin

PRCTICA N 5

CONTROL DE CALIDAD DE DROGAS VEGETALES.


ENSAYOS BOTNICOS, ANLISIS CUALITATIVO DE CONSTITUYENTES QUMICOS, TAMIZAJE
FITOQUMICO EN EXTRACTO ACUOSO. PREPARACIN DEL EXTRACTO ETANLICO.

MARCO TERICO:

Las plantas a nivel mundial ocupan un lugar importante en el comercio de medicamentos y en los
preparados fitoteraputicos y por ende es necesario garantizar su control de calidad con aplicaciones de
tcnicas modernas y el uso de patrones adecuados que den seguridad y eficacia al utilizarlas. Las
Farmacopeas describen mtodos de ensayos generales para evaluar o valorar las drogas oficiales.

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha recomendado la realizacin de monografas y la


implantacin de normas o especificaciones de calidad, basadas en la experiencia de cada pas, para
aquellas drogas no incluidas en las Farmacopeas y que son ampliamente utilizadas en Medicina
Tradicional.
Para evaluar o valorar las drogas es necesario
identificarlas y determinar su calidad y pureza, lo cual se traduce en su valor intrnseco, o lo que
es lo mismo, en la cantidad de principios activos presentes en ella.
Los ensayos botnicos son importantes y se deben realizar al inicio de la investigacin de la planta
medicinal para determinar su identificacin taxonmica y tener la certeza de la planta a investigar.

Plantas medicinales Medicamento

Materia prima
( Frmula magistral
)

CONTROL
Seguridad y eficacia

Identidad Calidad

El Control de Drogas Vegetales involucra:

Ensayos Botnicos:

Control de identidad:
Determinacin de sus caractersticas macroscpicas y microscpicas. Determinacin
cualitativa de sus principios activos (histoqumico).

Control de calidad:
Determinacin cualitativa de sus principios activos.
Cuantificacin de sus principios activos.
Otras determinaciones cuantitativas
Determinacin de su actividad farmacolgica.

Estos ensayos se realizan de acuerdo a las Farmacopeas.

COMPETENCIAS:
-Realizar el anlisis botnico macroscpico de la especie vegetal a investigar, reconociendo
morfolgicamente los diferentes rganos de la especie.
-Reconocer y caracterizar los principales rganos de la planta a nivel microscpico mediante cortes
histolgicos (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y semilla) con ayuda de la histoqumica.
-Realizar el anlisis organolptico de los diferentes rganos de la especie vegetal.
-Preparar el extracto acuoso y etanlico de la especie a investigar para hacer los anlisis cualitativos
correspondientes.

MATERIALES:

Especie vegetal a investigar con los rganos de la especie a investigar.


Lupas
Hoja de afeitar
Reglas
Placas Petri
Lminas y laminillas, gotero, estiletes Hoja de afeitar nueva, papel lente.
Safranina. Lugol, Fast Green, verde Janus, Rojo de metilo, azul de toluidina, hipoclorito de Sodio,
Etanol al 50% y agua destilada.
Microscopio
Reactivos para el anlisis cualitativo. (tamizaje fitoquimico)

PROCEDIMIENTO:

1. Realizar el Anlisis macroscpico, organolptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes rganos
de la especie.

Tabla Nro. 1. Anlisis macroscpico, caractersticas organolpticas de Raz, Tallo, Hoja, Flor,
Fruto y Semilla

2. Hacer el Anlisis microscpico de los diferentes rganos de la especie y de la droga vegetal.


3. Identificar los principios activos en los cortes histolgicos mediante reacciones histoqumicas.

Tabla Nro. 2. Anlisis microscpico, Citologa e Histologa de Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y
Semilla

rgano de la Tipo de Corte Histoqumica Reconocimiento de caracteres


Especie (Tcnica de Tincin) diagnsticos
vegetal
Raz C.T. Fresco, Safranina y Lugol

Tallo C.T. Fresco, Safranina y Lugol


Hoja C.P. Fresco, Safranina y Lugol

C.T.
Flor C.P. Fresco, Safranina y Lugol

Fruto C.P. Fresco, Safranina y Lugol


C.T.
Semilla Raspado Fresco, Safranina y Lugol

Preparacin del extracto acuoso y etanlico de la especie a investigar para hacer los anlisis cualitativos
correspondientes:

1. Preparar el extracto acuoso de 20 g de la especie medicinal en 100 mL de agua destilada y llevar


a decoccin en BM por 15 minutos y realizar el tamizaje fitoqumico.

2. Preparar con 20 g de la especie medicinal el extracto etanlico en 100 mL (etanol de 96) en


maceracin por 7 das para realizar el tamizaje fitoqumico.

TAMIZAJE FITOQUMICO

El tamizaje fitoqumico o Screening fitoqumico es una de las etapas iniciales de la investigacin


fitoqumica, que permite determinar cualitativamente los principales grupos de constituyentes qumicos de
la planta, a partir del cual se puede orientar las extracciones y/o el fraccionamiento de los extractos
eligiendo los grupos de mayor inters para el investigador.

EXTRACTO ACUOSO:

CARBOHIDRATOS:
- Reaccin de Molisch
Gotas de muestra problema + gotas de S. R. de Molisch A (alfa naftol 2% en alcohol), agitar + H2SO4
conc. por las paredes del tuboanillo color violeta.(+) para carbohidratos (azcares).

- Reaccin de Antrona
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Antrona (antrona en H2SO4 conc. al 2%) anillo verde.
(+) para carbohidratos (azcares).

-Reaccin de Fehling
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Fehling A + gotas S. R. Felhing B+ calor por 5-7 minutos en
bao marapp color rojo ladrillo.(+) para carbohidratos (azcares reductores).
-Reaccin de Benedict
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Benedict + calor por 5-7 minutos en bao marapp
color rojo ladrillo.(+) para carbohidratos (azcares reductores).

-Reaccin de Brown
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Hidrxido de sodio al 10% + calor hasta obtener coloracin
amarilla, luego agregar 1 gota de + cido pcrico 2%, se obtendr una coloracin parda por formacin de
cido picrmico.(+) para carbohidratos (azcares reductores).

Compuestos fenlicos:
Gotas de muestra problema + gotas de FeCl3 (Sol. al 1%
en agua o alcohol) color verde o azul. (+) presencia de compuestos fenlicos, taninos.

TANINOS:
-Reaccin de Gelatina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. gelatinapp blanco(+) Taninos

-Reaccin de Agua de Bromo


Gotas de muestra problema + gotas de agua de bromopp. taninos condensados y no pp taninos
hidrolizables.(+) Taninos

AMINOCIDOS Y PROTEINAS
-Reaccin de Ninhidrina
Gotas de muestra problema + S.R. de Ninhidrina (Ninhidrina al 1% en etanol) + calor BM 10 minutos
color violceo. (+) Para aminocidos libres y amino grupos (calentar en algunos casos).

FLAVONOIDES
-Reaccin de Shinoda
Gotas de muestra problema + S.R. Shinoda (Mg metlico + gotas de HClconc). color rojo. (+)
presencia de flavonoides, chalconas, auronas; catequina e isoflavona no dan color.

ESTEROIDES Y/O TRITERPENOIDES


-Reaccin de Lieberman-Burchard
Gotas de muestra problema + S.R. de Lieberman-Burchard(gotas de cloroformo + gotas de anhdrido
actico + gotas de H2SO4 conc).color verde, azul, naranja, rojo. (+) presencia de esteroides y
triterpenoides.

QUINONAS
-Reaccin de Borntrager
Gotas de muestra problema + S.R. Borntrager (gotas de hidrxido de sodio 5%)color rojo. (+)
quinonas

ALCALOIDES
-Reaccin de Dragendorff
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Dragendorff pp naranja o rojo naranja (+) alcaloides
(medio ligeramente cido).

-Reaccin de MayerGotas de muestra problema + gotas de R. Mayerpp. blanco.(+) alcaloides

-Reaccin de SonnenscheinGotas de muestra problema(+) alcaloides

-Reaccin de BertrandGotas de muestra problema + gotas de S.R. Bertrand pp blanco(+) alcaloides

ANTOCIANINAS
-Reaccin de Rosenheim Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Rosenheim (S.R. Yodo
Yodurada)rojo oscuro.(+) antocianinas y flavonoides catquicos.
GRUPO CARBONILO
-Reaccin de Hidroxilamina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. hidroxilaminapp coloreado(+) presencia de grupo
carbonilo.

SAPONINAS
-Reaccin para Saponinas
1 g de muestra problema + 10 mL de agua destilada.
Agitar fuertemente por 1 minutoproduccin de espuma por 15 minutos de 0.5 a 1 cm(+)
presencia de saponinas.

GLICSIDOS
.-Reaccin de Vainilln sulfrico
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Vainilln sulfricocolor rojizo violceo en anillo de
interfase. (+) Glicsidos.

**Los resultados de los tamizajes fitoqumicosnos dan una referencia de la composicin qumica de un
planta que se est investigando (no es determinante), lo cual nos ayudar a profundizar en la
investigacin al realizar el fraccionamiento y el aislamiento de los constituyentes qumicos.

ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

1. Que anlisis segn las Farmacopeas se realizan para el Control de Calidad de Productos
Fitoterapeticos.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Libros:
1. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
Espaa 2001.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Reynaud, Jol. La flora del farmacutico. Espaa, 2002.
4. Lock de Ugaz O. Colorantes naturales. 1ra Edicin. Lima, 1997.
5. USP, Pharmacopeia, National Formulary (USP NF).XVII, XIX, XX, XXI, XXII, XXIII, XXIX, XXX.

Revistas
Journal of Natural Products USA
Lloydia Asoc. Americana de Farmacognosia de USA.
Pharmacognosy Titles Londres Inglaterra
Phytochemistry Londres - Inglaterra
Biblioteca virtual EBSCO HOST ResearchDatabases(http://search.ebscohost.com/)
Journal of Analytical Chemistry
ChemicalBiology&DrugDesig
RESULTADOS DE LA PRCTICA Nro. 5

A. Realice el anlisis organolptico:


Color:
Olor:
Sabor:

B. Complete el Cuadro segn las Reacciones del Tamizaje fitoqumico

MUESTRA PROBLEMA REACCIN RESULTADOS TIPO DE AZUCAR


LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante PRCTICA N 6

ANLISIS FARMACOGNSTICO Y TAMIZAJE FITOQUMICO PRELIMINAR EN EXTRACTOS


ESTANDARIZADOS (EXTRACTO ETANLICO)
MTODO DE SEPARACIN Y PURIFICACIN DE DROGAS VEGETALES
(CROMATOGRAFA EN CAPA FINA)

MARCO TERICO:

EXTRACTO ESTANDARIZADO Y TAMIZAJE FITOQUMICO


Muchos principios activos presentan una estructura qumica perfectamente definida, mientras que otros,
al formar parte de mezclas complejas resulta difcil determinar cul es el compuesto activo.

La Extraccin obtiene porciones medicinalmente activas a partir de los tejidos de las plantas y animales,
de los componentes inertes de los mismos, mediante el uso de solventes selectivos, utilizando
procedimientos establecidos y correctamente estandarizados.

Para poder realizar el aislamiento de un principio natural en condiciones ptimas, se debe tener en
cuenta una serie de dificultades, inherentes a la propia planta o materia prima como al tipo de compuesto
a extraer.
Por esta razn la planta se somete a una serie de operaciones previas que facilitan y mejoran el
rendimiento de la extraccin.
Existen una serie de mtodos que han sido desarrollados y aplicados para una deteccin de los
diferentes constituyentes qumicos en las plantas, basadas en la extraccin de stos con solventes
apropiados y en la aplicacin de pruebas de coloracin o precipitacin llamado Tamizaje Fitoqumico.

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (CCF o TLC)


La cromatografa en capa fina (en ingls thin layer chromatography o TLC) es una tcnica analtica rpida
y sencilla que permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto.
Se puede determinar as, por ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacin.
Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas. Si, por el
contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen los reactivos y
cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cundo la reaccin ha
acabado.
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lmina de plstico o aluminio que
previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la
lmina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclado
(eluyente o fase mvil).A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a travs
del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre
el disolvente y el adsorbente.

Fig. 1. Preparacin de la Cromatografa en Capa Fina

COMPETENCIAS:
- Realizar el Tamizaje Fitoqumico en el extracto etanlico de la especie a investigar.
- Realizar el anlisis cualitativo mediante mtodo de separacin: Cromatografa en Capa Fina.

MATERIALES:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico)
Reactivos para el anlisis cualitativo (Cromatografa en Capa Fina)

PROCEDIMIENTO:

1. Prueba de solubilidad frente a diferentes solventes de menor a mayor polaridad.


Filtrar el extracto el extracto etanlico del mtodo de maceracin de 5 a 7 das y colocar 1 mL del
extracto fluido o filtrado en cada tubo de vidrio, luego llevarlo a Bao Mara hasta sequedad.
Agregar 1 mL del solvente de menor a mayor polaridad (agua destilada, etanol, metanol, acetato
de etilo, cloroformo, diclorometano y ter de petrleo) sobre cada tubo del extracto seco. Agitar
por 5 minutos hasta disolver el extracto y anotar los resultados.

2. Tamizaje Fitoqumico en el extracto etanlico.


Realizar el tamizaje fitoqumico haciendo uso de Reactivos de coloracin y precipitacin para
identificar la presencia de los principios bioactivos presentes en el extracto y anotar los resultados en
el Cuadro correspondiente.

3. Anlisis cualitativo mediante mtodo de separacin: Cromatografa en Capa Fina.


- Proceder a colocar el sistema de solvente (acetato de etilo: metanol: agua (100:13.5:10) o
Cloroformo: metanol (3:1), colocar una tira de papel filtro para crear el sistema, tapar la cuba.
- Sembrar el extracto etanlico con ayuda de capilares en los cromatofolios de silica gel F254 en
capa de aluminio, luego colocarla placa en la cuba cromatogrfica, observar en luz visible, luz
ultravioleta, anotar sus observaciones y luego
proceder a revelar la placa con solucin etanolica de Cloruro frrico, vainillin sulfrico o
vapores de Iodo.
- Calcular el Rf: La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la mancha Rf =
distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente (Y)

Fig. Clculo del Rf

TAMIZAJE FITOQUMICO

METABOLITO REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA


Molish X gotas de MP+ III gotas de Molish agitar+ III
Anillo violeta
(alfa naftol 2% en alcohol) gotas de H2SO4 CC
Antrona
X gotas de MP + III gotas de Antrona Coloracin verde
CARBOHIDRATOS (antrona en H2SO4 cc al 2% )
Fehling
(A: CuSO4; B: tartrato mixto X gotas de MP + III gotas de Fehling A+ III
de potasio y sodio
Coloracin rojo ladrillo
gotas de Fehling B + calentar en B.M
(KNaC4H4O64H2O))
COMPUESTOS
FENLICOS FeCl3 X gotas de MP + III gotas de FeCl3 10 % Coloracin verde o azul
TANINOS Gelatina X gotas de MP + III gotas de gelatina Precipitado denso blanco
Chalconas, auronas,
isoflavanonas: No hay
coloracin.
X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg metlico +
FLAVONOIDES Shinoda Isoflavanonas: Amarillo rojizo.
III gotas de HCl cc
Flavanonoles: Rojo a magenta.
Flavonas y flavonoles: Amarillo
a rojo
ANTOCIANINAS Y
FLAVONOIDES Rosenheim
X gotas de MP + III gotas de Rosenheim Coloracinrojo oscuro
(Sol. Yodo Yodurada)
CATQUICOS
AMINOCIDOS Ninhidrina(0.1% en etanol) Coloracin
X gotas de MP + III gotas de ninhidrina +
LIBRES Y GRUPOS violcea
calentar en B.M 10 min.
AMINO
Dragendorff X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V
Precipitadonaranja
(yoduro potsico- bismtico ) gotas de HCl 10%+ III gotas de Dragendorff
Mayer (yoduro potsico X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V
mercrico)
Precipitado blanco
gotas de HCl 10%+ + III gotas de Mayer
ALCALOIDES Bertrand (cido X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V Precipitado blanco
silcotngstico) gotas de HCl 10%+ + III gotas de Bertrand
Sonnenschein X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V Precipitado amarillo-
(cido fosfomolbdico) gotas de HCl 10%++ III gotas de Sonnenschein verdoso

NAFTAQUINONAS,
ANTRAQUINONAS Borntrager
X gotas de MP + III gotas de Borntrager Coloracinroja
(NaOH 5%)
Y ANTRANONAS
X gotas de MP + llevar a sequedad en B.M + X
TRITERPENOIDES gotas de cloroformo+ III gotas de anhdrido Esteroides: verde-azul
Lieberman-Burchard
Y ESTEROIDES actico+ H2SO4 cc en zona (por las paredes de Triterpenoides: rojo-naranja
tubo) sin agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada + agitar Formacin de 0.5 a 1 cm de
SAPONINAS Generacin de espuma
fuertemente por 1 min. espuma estable por 15 min.
X gotas de MP + V gotas de cido pcrico 1 %
GLICSIDOS Baljet Coloracin anaranjada
+ V gotas de NaOH al 5 %.
X gotas de MP + V gotas de denitroprusiato de
LACTONAS Legal Coloracin rojo oscuro
sodio 0.5% + V gotas de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido con
NH4OH cc
CUMARINAS NH4OH cc NaOH 10% en boca de tubo + Fluorescencia celeste
NaOH 10%
calentar por 5 min a

ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

1. Que reacciones qumicas se dan en el Tamizaje Fitoqumico.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa 1999.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Gattuso, Gattuso. Manual de Procedimientos para el Anlisis de Drogas en Polvo. 1ra ed. Argentina:
Editorial Universidad Nacional de Rosario Urquiza.1999.
4. Bruneton, J. Farmacognosia, Fitoqumica, Plantas medicinales 2 Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa.
2001.
5. Kuklinski, C. Farmacognosia, Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural.
Ed. Omega, Barcelona, Espaa 2003.
6. Sharapin N. Fundamentos de Tecnologa de Productos FitoteraputicosSanta fe Bogota Colombia
2000.
7. Miranda M. Mtodos de Anlisis de Drogas y Extractos, Habana Cuba 2002.
8. Lock de Ugaz. Investigacin Fitoqumica, Mtodos en el estudio de productos naturales [en lnea].
Per: Editorial Pontificia Universidad Catlica del Per; 1994. [Fecha de acceso 27 de junio de 2013].
URL disponible en:
http://books.google.com.pe/books?
id=N36g2QOccXkC&pg=PA287&dq=prueba+con+dragendorff&hl=
es&sa=X&ei=d7bNUazRHsjX4AS9oYBQ&ved=0CEAQ6AEwBA#v=onepage&q=prueba%20con%20d
ragendorff&f=false.

PROTOCOLO RESULTADOS DE LA PRCTICA Nro. 6

Prueba de solubilidad

Solventes Extracto seco (mg)

Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Tamizaje
Diclorometano
fitoqumico
Cloroformo
Eter de petrleo
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (+++) Soluble (+++) Muy
soluble Huella
Cromatogrfica
Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de solvente (o
sembrar el filtrado del extracto).

Fase estacionaria: Slica gel

Esquema de resultado
Calculo de Rf
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

PRCTICA N 7

EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS SIMPLES Y OLIGSIDOS A


PARTIR DE DROGAS NATURALES.
REACCIONES GENERALES Y PARTICULARES DE CARBOHIDRATOS

MARCO TERICO:

Glcidos o azcares, son compuestos orgnicos constituidos por carbono, hidrgeno y oxgeno.
Constituyen la clase de compuestos que se encuentran en las plantas en mayor cantidad.Son
aldehdos o cetonas polihidroxilados; bajo peso molecular, tienen muchas propiedades en comn: son
alifticos, pticamente activos, de sabor dulce, muy solubles en agua.Difciles de cristalizar an
cuando estn puros. Son importantes en el metabolismo vegetal, son fuente de energa en forma de
almidones, sirven para el transporte de energa en forma de sacarosa, intervienen en la formacin de
paredes celulares (celulosa) y destacan en el aspecto ecolgico por medio de la relacin planta
animal.
Se pueden detectar en cantidades muy pequeas, por medio de reactivos cromgenos.Detectados
por cromatografa CCF, usando reactivos que contienen fenoles o aminas, como el resorcinol con
cido sulfrico o el ftalato de anilina.La CCF y CP, son sustituidos de preferencia por otras tcnicas de
separacin, la CC de baja presin, HPLC, cromatografa de gases o electroforesis.

Los azcares no reductores no funcionan con estos reactivos y generalmente se detectan por su
rpida oxidacin con per yodato o tetra acetato de plomo.

MONOSAC RIDOS
osas simples
OLIGOSACRIDOS
menos de 10 osas

HOLSIDOS
HOMOG NEOS
varias osas osas iguales
POLISACRIDOS
m s de 10 osas

HETEROG NEOS
osas diferentes

HETER SIDOS
osa + aglic
n

Clasificacin de Carbohidratos

DROGAS QUE CONTIENEN CARBOHIDRATOS


-Disacridos: Sacarosa, lactosa.
-Polisacridos: Almidones, dextranos, celulosa, pectinas.
-Gomas: Goma arbica, goma tragacanto, goma guar.
-Muclagos: Agar, carragaen, alginatos, algas marinas de la costa patagnica.
-Monosacridos y derivados: Glucosa, fructosa, manitol, sorbitol, xilitol, lactulosa.

COMPETENCIAS:Capacitar al estudiante para que adquiera habilidad de realizar el anlisis cualitativo y


el Tamizaje Fitoqumico en el extracto etanlico de la especie a investigar y en drogas vegetales para
determinar la presencia de los Carbohidratos. Identificar y diferenciar los carbohidratos.

MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico:Molish, Antrona, Fehling, Benedict,
Tollens, Selivanoff, NaOH, Fenilhidrazina, Yodo 2.5%, H2SO4 cc, KOH 5%, Etanol absoluto,
Ba(OH)2 10%, HCl diluido, Acetato de plomo neutro y bsico, lugol)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo, gradillas, embudo, cocinilla, beackers grande y
chicos, baguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y balanza)
Miel de abeja, Azcar, Papa, Algodn, Manzana, Linaza

PROCEDIMIENTO:

4. Preparacin de las muestras Problema

2.1 Especie a Investigar: Filtrar el extracto hidroalcohlico al 10 o 20% P/V macerado de 7 das de
hojas, tallos o semillas de la especie a investigar. Si es muy concentrado diluir 1:10 ml con el
solvente donde es soluble el extracto.

2.2 Las Muestras Problemas conteniendo los diferentes tipos de Carbohidratos


PROCEDIMIENTO
Muestra Problema
Azcar Disolver 2 g en 20 mL de agua destilada

Miel de abeja Disolver 2 g en 20 mL de agua destilada

Papa (ALMIDON) Rallar el tubrculo en un beacker conteniendo agua, luego exprimir a travs de la
gasa, recogiendo el lquido en un beacker, dejar sedimentar y lavar por decantacin
varias veces. Utilizar la solucin de almidn de papa para las reacciones.

Algodn (CELULOSA) Sin tratamiento

Manzana (PECTINAS) Pesar 2 g de manzana trozada o rallada, secar en estufa x 15 min a 150 C, luego lavar
la muestra con 10 mL alcohol 3 veces, Al residuo agregar 10 mL HCl al 10% x 15
minutos. Filtrar y trabajar con la solucin.

Linaza (MUCLAGOS) Pesar 10 gramos de semillas de linaza, agregar 50 mL de agua destilada y someter a
ebullicin x 15 minutos, decantar y trabajar con los muclagos de linaza.

5. Tamizaje Fitoqumico en el extracto etanlico.


Realizar el tamizaje fitoqumico haciendo uso de
Reactivos de coloracin y precipitacin para identificar la presencia de
CARBOHIDRATOS presentes en el extracto y anotar los resultados en el Cuadro
correspondiente.
Realizar el tamizaje Fitoqumico con los extractos acuosos de las Muestras Problemas:
Miel de abeja, Azcar, Almidn de Papa, Algodn, Pectinas de Manzana y muclagos de Linaza.

TAMIZAJE FITOQUMICO

Realizar las siguientes reacciones segn el tipo de Muestra Problema

REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA


REACCIONES GENERALES
X gotas de MP+ III gotas de Molish Anillo violeta
Molish
agitar+ III gotas de H2SO4 CC
(alfa naftol 2% en alcohol)
Antrona
X gotas de MP + III gotas de Antrona Coloracin verde - azulada
(antrona en H2SO4 cc al 2% )

REACCIN DE AZUCARES
REDUCTORES
Fehling X gotas de MP + X gotas de solucin de Precipitado rojo ladrillo
(A: CuSO4; B: tartrato mixto de potasio Fehling+ calentar en B.M
y sodio (KNaC4H4O64H2O)

Benedict
Precipitado amarillo-
(Citrato de Na + CuSO4 + X gotas de MP + X gotas de Benedict+
verdoso
NaCO3) calentar en B.M

Tollens X gotas de MP + X gotas de Tollens+


Formacin de espejo de plata
(AgNO3 + NH4OH) calentar en B.M
REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA

REACCIONES DE
ALDOSAS Y CETOSAS Precipitado rojo (CETOSA)
X gotas de MP + III gotas de Selivanoff
Selivanoff
+ calentar en B.M
(Resorcina + HCl)
REACCIONES DE
SACAROSA X gotas de MP + X gotas de solucin
Herail Herail Color violeta -azulada
(1 ml Nitrato cobaltoso + 1 ml
NaOH 50%)
X gotas de MP + X gotas de Reactivo+
Pozzi-scott
H2SO4 cc en zona Formacin anillo azul
(Molibdato de Amonio 15%)
X gotas de MP + X gotas NaOH 10% +
Pelouze
calentar Color amarillo
(NaOH 10%)
POLISACRIDOS
HOMOGNEOS X gotas de MP (ALMIDON DE PAPA)
Solucin de yodo 2.5% + V gotas de Yodo 2.5% Complejo azul desaparece por
calor y reaparece por
enfriamiento.
Fibras de ALGODN + V gotas lugol,
Yodo en cido sulfrico Observar color azul
secar + gotas de H2SO4 cc
Fibras de ALGODN + Vgotas de
Solubilidad en H2SO4 Soluble
H2SO4 cc
Fibras de ALGODN + V gotas de Insoluble
Solubilidad en KOH 5%
KOH 5%
POLISACRIDOS
HETEROGNEOS
Precipitado amarillo gelatinoso
NaOH 3N X gotas de MP (PECTINAS) + X gotas
NaOH 3N

X gotas de MP (PECTINAS) + 2.5 mL


Formacin de gel de alcohol Formacin de gel incoloro

X gotas de MP (MUCLAGOS) + V
Acetato de Plomo bsico gotas de reactivo Precipitado gelatinoso blanco

X gotas de MP (MUCLAGOS) + V
Presencia de almidones (azul) y
Lugol gotas de reactivo
dextrinas (rojo)

ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

1. Explique la Reaccin qumica para la determinacin de Carbohidratos mediante el Tamizaje


Fitoqumico Mencione 4

2. Mediante una Tabla mencione 8 especies medicinales endmicas o nativas del Per, que
contengan Carbohidratos

Nombre Comn Nombre Familia Fotografa Usos y Tipo de


Cientfico Carbohidrato presentes.
1.
2

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Bruneton, J. Farmacognosia, Fitoqumica, Plantas medicinales 2 Ed. Acribia, Zaragoza,


Espaa. 2001
2. Gattuso, G. Manual de Procedimientos para el Anlisis de Drogas en Polvo. 1ra ed. Argentina:
Editorial Universidad Nacional de Rosario Urquiza.1999.
3. Kuklinski, C. Farmacognosia, Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen
natural. Ed. Omega, Barcelona, Espaa 2003
4. Miranda M. Mtodos de Anlisis de Drogas y Extractos, Habana Cuba 2002.
5. Obregn, L.Maca. Planta medicinal y nutritiva del Per. Lima 1988.
6. Sharapin N. Fundamentos de Tecnologa de
Productos Fitoteraputicos Santa fe Bogota Colombia 2000.
7. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
8. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa 1999.
9. Wallis, T. Manual de Farmacognosia. Ed. Ceosa, Mxico. 1991.
10. Libro rojo de plantas endmicas
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/biologia/v13n2/contenido.htm RESULTADOS DE LA
PRCTICA Nro. 7

A. Realice el anlisis organolptico:


Color:
Olor:
Sabor:

B. Complete el Cuadro segn las Reacciones del Tamizaje fitoqumico

MUESTRA PROBLEMA REACCIN RESULTADOS TIPO DE AZUCAR

LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 8

RECONOCIMIENTO DE COMPUESTOS FENLICOS SIMPLES Y COMPUESTOS


ANTRAQUINNICOS.

MARCO TERICO:

Compuestos fenlicos simples


Los fenoles simples consisten en un anillo fenlico sustituido porgruposhidroxilos,aldehdicos o
carboxlicos, son relativamente raros en plantas. El fenol, catecol (fenol divalente),resorcinol (fenol
divalente), floroglucinol (fenol trihidroxilado) y pirogalol han sido reportados raras veces. 1 En contraste, la
hidroquinona se distribuye en muchas familias y se halla como arbutina (hidroquinona-O-glucsido).
Drogas con Compuestos fenlicos
Sauce Uva ursi
(Salix alba) (Arctostaphylos uva ursi)
rbol caducifolio Arbusto de hojas perennes, produce bayas rojas.

Salicina
Droga : hojas Arbutina
Droga : hoja
s

Compuestos antraquinnicos
Poseen una molcula de azcar unida a un derivado del antraceno. El constituyente qumico
representativo es la antraquinona o 9,10-dioxoantraceno. Se encuentra en especies como el ruibarbo,
sen, cscara sagrada, etc. Las antraquinonasse utilizan para la fabricacin de colorantes, plaguicidas y
aditivos para procesos qumicos de la industria del papel y pulpa. Los extractos de plantas que contienen
antraquinonas, son utilizados para cosmticos, alimentos y productos farmacuticos debido a sus
propiedades teraputicas y farmacolgicas.
Drogas con Compuestos antraquinnicos
Ruibarbo Sen Cscara Sagrada
(Rheumpalmatum) (Cassia angustifolia) (Rhamnuspurshiana)
Planta herbcea perenne con Arbusto rbol de 6-12 m, con ramas
hojas basales, palmeado- redondas y pubescentes.
partidas

Sensido A,B,C,D y
. Alonas A y B,
aloeemodina
Emodina Droga : hojas Droga: corteza
Droga: raiz

Sbila
( Aloe vera
)
Planta de forma arrosetada, hojas grandes, carnosas, anchas, ssiles, con una fuerte espina en el
y espinas ms pequeas a lo largo de los mrgenes Las hojas de color verde plido con manchas
blancas en la superficie, estriadas; a veces el verde plido cambia a rojizo, exhalan olor caracters
En el parnquima se forma un jugo viscoso y espeso de sabor amargo, denominado acbar o aloe,
principio activ o es la alona que posee propiedades teraputicas

Alonas
Aloe- emodina
Droga: hojas

COMPETENCIAS:Capacitar al estudiante para que adquiera habilidad de realizar el anlisis cualitativo y


el Tamizaje Fitoqumico en drogas vegetales para determinar la presencia decompuestos fenlicos y
antraquinnicos

MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo,
gradillas, embudo, morteros, cocinilla, beackers grande y chicos, Baguetas, goteros,
pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y balanza)

PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo

Fenoles simples
Sauce (Salix alba)
OBTENCIN DE SALICINA
Extraccin: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 20 mL de agua y someter a decoccin por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIN
Reaccin Procedimiento Resultado
cido sulfrico 5 mg de salicina + V gotas de H2SO4 Coloracin roja
FeCl3 5 mLdeextracto + V gotas de FeCl3 Coloracin azul-verde
Rx. Fehling 5 mL de extracto + V gotas de Fehling A y B+ Precipitado rojo ladrillo
calor

Uva ursi(Arctostaphylos uva ursi)

OBTENCIN DE ARBUTINA
Extraccin: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 10 mL de agua y someter a decoccin por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIN
Reaccin Procedimiento Resultado
Microsublimacin Colocar en cpsula, 5 mg de droga en
polvo. Cubrir con luna de reloj y calentar
hasta desprendimiento gaseoso. Al residuo
enfriado agregar:
II gotas de NH4OH Coloracin pardo rojiza

FeCl3 0.5 mLdeextracto + V gotas de FeCl3 Coloracin azul-verde


NH4OH conc. 0.5 mLdeextracto + V gotas de NH4OH conc. Coloracin pardo rojiza
Vainilln clorhdrico 0.5 mLdeextracto + V gotas de Vainilln Coloracin azul
clorhdrico
Taninos 0.5 mLdeextracto + V gotas de gelatina Precipitado blanco

Compuestos antraquinnicos
Identificacin
cscara
Procedimiento ruibarbo sen sbila
sagrada
Microsublimacin Coloracin Coloracin Coloracin -
Colocar en cpsula, 5 mg de droga roja intensa roja pardo naranja
en polvo. Cubrir con luna de reloj y
calentar hasta desprendimiento
gaseoso. Al residuo enfriado agregar
II gotas de NH4OH.
R. Borntrager Fase polar: Coloracin Fase polar Fase polar:
1g MP+ 10 mLagua+III gotas de Rojo rosada rojo naranja rojo cereza
NaOH. Filtrar + X gotas de HClconc. cereza rojiza Fase
Agregar 2 mL de cloroformo y Fase apolar:
separar la fase cloroformo y agregar apolar: amarillo
X gotas de NH4OH cc. Agitar amarillo

Sol. alcohlica amoniacal - Coloracin - -


0.5 g de MP+ 5 mL de etanol+ roja pardo
decoccin por 5 min.+V gotas
NH4OH cc.

R. Schonteten mL del - - - Fluorescen


ensayo anterior (Sol. cia a luz
alcohlica amoniacal )+ borato de UV
sodio saturado.

R. Klunge - - - Coloracin
0.5 g MP+ 5 mL de agua + BM a 40 rojo
C x 15 min.+ mg de talco. Filtrar.Al grosella
filtrado aadir II gotas de CuSO 4 + II
gotas de NaCl + 5 mL etanol.

Iridoides

Muestras Problemas:
*Filtrado del extracto de la especie a investigar 10-20% P/V
*Macerado alcohlico de PlantagomajorL. (llantn).- pesar 10 g de hojas de llantn. Colocar en un matraz y
agregar 50 mL de alcohol de 70. Macerar 48 h.
*Decoccin por 10 minutos (Extracto acuoso) de la droga vegetal con Iridoides.

Identificacin de iridoides Procedimiento Resultado


Reaccin con vainillin Sembrar en papel filtro 40 veces, previo Coloracin grosella
clorhdrico secado entre cada siembra. Secar y
agregar IV gotas de reactivo
Vainillnclorhdrico (secar entre gota y
gota)

CUESTIONARIO

1. Describa el fundamento de las reacciones de coloracin para la identificacin de compuestos


fenlicos y antraquinnicos.

2. Mediante una Tabla mencione 10 especies nativas del Per, que presenten compuestos fenlicos
y antraquinnicos.

Nombre Comn Nombre Familia Fotografa Usos y Tipo de


Cientfico compuestos fenlicos y
antraquinnicos.
1.
2.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Kuklinski, C., Farmacognosia., Ed. Omega SA, Barcelona, Espaa (2000)


2. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
Espaa (2001)
3. Gibaja Oviedo S. Pigmentos naturales. Quinnicos. Lima (1998). 4. Villar Del Fresno, A.
Farmacognosia general. Madrid (2010)

PROTOCOLO N 8

COMPUESTOS FENLICOS SIMPLES Y ANTRAQUINNICOS

FECHA.

MESA DE TRABAJO .. MUESTRA:

RESULTADOS

I. ANLISIS CUALITATIVO COMPUESTOS FENLICOS SIMPLES Y ANTRAQUINNICOS


INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

PRCTICA N 9

RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES Y TANINOS

MARCO TERICO:

FLAVONOIDES

Los flavonoides son compuestos polifenlicos ubicuos


en la naturaleza, se clasifican, de acuerdo a su
estructura qumica, en: flavonoles,
flavonas, flavanonas, isoflavonas,
catequinas, antocianidinas y chalconas. Ms de 4 000
flavonoides han sido identificados muchos de ellosen
frutas y verduras. Los flavonoides han despertado un
considerable inters por sus potenciales efectos
beneficiosos sobre la salud. Se ha reportado actividad
antiviral, antialrgica, antiplaquetaria,
antitumoral antiinflamatoria, y antioxidantes.

Los flavonoides pertenecen a un grupo de compuestos naturales dispuestos en un sistema C6-C3-C6, en


el que dos anillos aromticos A y B estn unidos por una unidad de tres carbonos que pueden o no
formar un tercer anillo C. Los flavonoides pueden hallarse como aglicn o bajo la forma de glicsidos con
una o tres unidades de azcar, generalmente en el carbono 3 7, siendo los azcares ms comunes:
glucosa, galactosa, ramnosa, xilosa y arabinosa.
Estos compuestos poseen las siguientes caractersticas: solubilidad en agua y etanol, carcter fenlico e
intensa absorcin en la regin UV-Vis del espectro por la presencia de sistemas aromticos conjugados.

Extraccin de flavonoides
Los flavonoides (en particular hetersidos) pueden ser degradados por la accin de enzimas, siendo
necesario utilizar muestras secas, liofilizadas o congeladas. Para la extraccin, el disolvente se elige en
funcin del tipo de flavonoide a extraer. La polaridad es un factor muy importante. Flavonoides de baja
polaridad (por ejemplo, las isoflavonas, flavanonas, flavonas metiladas, y flavonoles) se extraen con
cloroformo, diclorometano, ter dietlico, o acetato de etilo, mientras que los hetersidos flavonoides y
agliconas ms polares se extraen con alcoholes o mezclas de alcohol-agua. En el caso de los
hetersidos la presencia de la porcin de azcar incrementa la solubilidad en agua y alcohol, por lo que
soluciones hidroalcohlicas son las ms adecuadas.

La mayor parte de las extracciones de especies que contiene flavonoides se realizan por extraccin
directa con solventes y tambin pueden ser extrados en Soxhlet, primero con hexano, para eliminar
lpidos seguido de acetato de etilo o etanol para extraer compuestos fenlicos, sin embargo este mtodo
no es adecuado para compuestos sensibles al calor.

TANINOS
Los taninos son compuestos polifenlicos de peso
molecular alto que se encuentran enlas plantas superiores, incluyendo muchas plantas
utilizadas como alimentos, el peso molecular oscila entre 500 y 3 000, de estructura amorfa, sabor
astringente y dbilmente cidos. La mayora de ellos solubles en agua; pueden ser amarillos, rojos o
marrones, y se localizan en el citoplasma o en las vacuolas de las clulas; conformados principalmente
por restos de cido glico unidos a glucosa a travs de enlaces glucosdicos.

Los taninos ingeridos en la dieta pueden afectar la asimilacin de protenas y hierro, al formar complejos
insolubles. En las especies vegetales los taninos actan como defensas qumicas que reducen el dao
por insectos y mamferos. En medicina, especialmente en Asia (Japn y China), los extractos de especies
vegetales que contienen taninos se utilizan como astringentes, diurticos, antiinflamatorios y antispticos.
Por su capacidad de precipitar metales pesados y alcaloides (excepto morfina), los taninos se pueden
utilizar como antdotos de estas sustancias. Los taninos se utilizan en la industria de colorantes como
colorantes catinicos (tanino), y en la produccin de tintas (galato de hierro). En la industria alimentaria
los taninos se utilizan para clarificar el vino, la cerveza y jugos de frutas.

Actualmente, los taninos han atrado el inters cientfico, debido a la mayor incidencia de enfermedades
como el VIH y varios tipos de cncer. La bsqueda de nuevos compuestos prometedores para el
desarrollo de nuevos productos farmacuticos es cada vez ms importante, especialmente por la accin
biolgica que se les atribuye.

COMPETENCIAS
Conoce la importancia de flavonoides y Taninos en Farmacognosia
Identifica flavonoides y Taninos cualitativamente
Cuantificar taninos en muestras de tara (Caesalpiniaspinosa)

METODOLOGA
Cromatografa en capa fina
Mtodo volumtrico : Yodometra
Reacciones de precipitacin
Reacciones de coloracin

MATERIAL Y EQUIPOS
Material de vidrio
Reactivos de coloracin
Material de vidrio
Estufa
Mortero piln

I. Anlisis cualitativo de FLANONOIDES

PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo de FLAVONOIDES
Hetersidos flavonoides DROGA REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN
POSITIVA
Hesperidsido Naranja H2SO4 cc mg de hesperidina+ gotas Coloracin
Citrus de H2SO4 cc naranja
sinensis
HCl cc mg de hesperidina+ gotas Precipitado
Fam. de HCl cc blanco
Rutaceae
HNO3 mg de hesperidina+ gotas Coloracin
de HNO3 pardo rojizo
NaOH 30% mg de hesperidina+ gotas
de NaOH 30%
Coloracin
amarillo naranja

Rutinsido Ruda Wilson 0.5mLWilson A + Coloracin


Ruta (c.borico+citrato 0.5mLWilson B+0.5mL de amarilla.
graveolens de sodio) extracto (30 min. en Observacin en
Fam. oscuridad) UV:
Rutaceae Fluorescencia
verde
Shinoda 0.5mL de extracto+ virutas Coloracin
de Mg +gotas HCl cc rosada
FeCl3 0.5mL de extracto +gotas Coloracin verde
FeCl3

Quercetinsido Cebolla Pb(CH3COO)2 0.5mL de extracto +gotas Precipitado color


Allium Pb(CH3COO)2 amarillo
cepa L.
FamiliaLiliac FeCl3 0.5mL de extracto +gotas Coloracin verde
eae FeCl3 en frio,
rojo oscuro en
caliente

Antociansido Maz morado H2SO4 cc 0.5mL de extracto + gotas Coloracin roja


Zea Mays L H2SO4 cc
Fam.
Poaceae
NaOH 30% 0.5mL de extracto + gotas Coloracin verde
NaOH 30%

Preparacin de extractos de Flavonoides y Taninos

Pesar 5 g de droga vegetal, agregar 50 mL de agua destilada y llevar a decoccin x 10 minutos, filtrar.
Con el extracto de la droga vegetal que presenta Flavonoides segn bibliografa realizar el Anlisis
Cualitativo de Flavonoides y con el extracto de Tara realizar el anlisis cualitativo de Taninos.

II. Anlisis Cualitativo de TANINOS

a) Reaccin de diferenciacin
Reactivo Procedimiento Reaccin positiva
FeCl3 10% 0.5 ml MP + gotas T. hidrolizables: azul
deFeCl3 10%
T. condensados: verde

b) Reacciones de identificacin
REACTIVO PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
FeCl3 0.5 mL MP+ gotas de FeCl3 coloracin azul/verde
K2Cr2O7 5% 0.5 mLMP+ gotas de K2Cr2O7 5% pp. pardo
Pb(CH3COO)2 0.5 mL MP+ gotas de Pb(CH3COO)2 pp. blanco lechoso
Agua de cal 0.5 mL MP+ gotas de agua de cal pp. amarillo plido
KCN 5% 0.5 mL MP+ gotas de KCN 5% pp. amarillo
Hipoclorito de sodio 0.5 mLMP+ gotas de hipoclorito de sodio coloracin naranja
K4[Fe(CN)6] + NH4OH 0.5 mLMP+ gotas de K4[Fe(CN)6] + gotas de NH4OH coloracin rojiza
Gelatina 0.5 mL MP+ gotas de gelatina pp. blanco
KMnO4 0.5 mLMP+ gotas de KMnO4 pp. pardo
Alcaloide 0.5 mL MP+ gotas de alcaloide pp. lechoso blanco
III. Anlisis cuantitativo

Pesar 1 g de tara, llevar a decoccin con 20 mL de agua destilada. Filtrar, y completar el


volumen de 100 mL en fiola y medir 10 mL para la titulacin.

Preparacin de patrn Preparacin del blanco


GASTO: A GASTO: B

Yodo 2.5% Yodo 2.5%

10 mL solucin de cido 2 mL de NaHCO 3


tnico 1% + 2mL de + c.s.p para 20
NaHCO3 + c.s.p para 20 mL mL con agua
con agua destilada

Preparacin de la muestra GASTO: C

Yodo 2.5%

10 mL solucin nuestra
problema+ 2mLed
NaHCO3 + c.s.p para 20 mL con
agua destilada

Nota: El punto final de la valoracin se determina con tiras de papel almidonado (indicador externo),
vira a violeta intenso en el punto de equivalencia.

a) Clculos
PATRN =GASTO: A
BLANCO =GASTO: B
MUESTRA =GASTO: C

A- B 0.1 g
C-B X

X= contenido de taninos (g) en 10 mL de muestra problema

Nota: expresar los resultados en porcentaje de taninos en la muestra.

CUESTIONARIO

1. Explique el fundamento de la valoracin de taninos realizada en prctica.


2. Mediante una Tabla mencione 10 especies nativas del Per, que presenten flavonoides y
Taninos

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Khanbabaee K, Van Ree T. Tannins: Classification and Definition. Nat. Prod. Rep., 2001; 18. p.
641649. Disponible en: http://siba.unipv.it/farmacia/art/Marrubini/Nat%20Prod%20Rep%202001.pdf
[citado 22 de marzo 2013]
2. Chung KT, Wong TY, Wei CI, Huang YW , Lin Y. Tannins and human health: a review.Crit Rev
Food Sci Nutr. 1998 Aug;38(6):421-64.
3. Reed JD. Nutritional Toxicology of Tannins and Related Polyphenols in Forage Legumes. J
AnimSci 1995, 73:1516-1528. Disponible en:
http://www.journalofanimalscience.org/content/73/5/1516.full.pdf [citado 22 de marzo 2013].
4. Hartzfeld PW, Forkner R, Hunter MD, Hagerman AE. Determination of Hydrolyzable Tannins
(Gallotannins and Ellagitannins) after Reaction with Potassium Iodate. J. Agric. FoodChem. 2002,
50, 17851790. Disponible en: http://mdhunter.myweb.uga.edu/publications/HAGERMAN.PDF [citado
22 de marzo 2013].
5. Clinton C. Plant tannins: A novel approach to the treatment of ulcerative colitis. NatMed J. 2009;
1:(3). p. 1-3. Disponible en: http://naturalmedicinejournal.net/pdf/nmj_nov09to_clinton.pdf [citado 22 de
marzo2013].
6. Tamilselvi N, Krishnamoorthy P, Dhamotharan R, Arumugam P, Sagadevan E. Analysis of total
phenols,total tannins and screening of phytocomponents in Indigoferaaspalathoides
(ShivanarVembu) Vahl EX DC. J. Chem. Pharm. Res., 2012, 4(6):3259-3262. Disponible en:
http://jocpr.com/vol4-iss6-2012/JCPR-2012-4-6-3259-3262.pdf [citado 22 de marzo 2013].
7. Garro G J et al. Analytical Studies on Tara Tannins. Holzforschung. 1997; 51(3). Disponible en:
http://www.fpl.fs.fed.us/documnts/pdf1997/galve97a.pdf [citado 22 de marzo 2013].
8. Cabello LI. Monografa para el cultivo de la tara Caesalpiniaspinosa (Molina)
Kuntze.Perbiodiverso. Lima, Per.2009
9. U.S. Department of Agriculture. USDA Database for the Flavonoid Content of Selected
Foods.March 2003. Disponible en:http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/flav.pdf [citado 22
de marzo 2013]

PROTOCOLO N 09

RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES Y TANINOS


HORARIO..
FECHA.
MESA DE TRABAJO ..
RESULTADOS

LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

PRCTICA N 10
EXTRACCIN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES.

INTRODUCCIN

Aceites Esenciales

Los aceites esenciales son compuestos formados por sustancias orgnicas voltiles, como alcoholes,
cetonas, teres y aldehdos, se producen y almacenan en los canales secretores de las plantas y
normalmente son lquidos a temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extrados por destilacin en
corriente de vapor de agua.
Fuentes:Conferas (pino, abeto), Mirtceas (eucalipto),
Rutceas (Citrus spp), Asteraceae (manzanilla), Labiadas (menta, lavanda, tomillo, espliego,
romero) y umbelferas (ans, hinojo).Pueden estar en diferentes rganos: raz, rizoma (jengibre), leo
(alcanfor), hoja (eucalipto), fruto (ans) y sumidades floridas (clavo de olor).

Propiedades teraputicas: antisptica (conservacin de alimentos), antiespasmdica, expectorante;


carminativa y eupptica. Sin embargo a dosis elevadasson txicos, principalmente a nivel del sistema
nervioso central y pueden ocasionar alergias e irritacin.

Caractersticas fsicas
Los aceites esenciales son voltiles,lquidos a temperatura ambiente (a excepcin del alcanfor y el
mentol), recin destilados son incoloros o ligeramente amarillos, de densidad inferior a la del agua. Son
solubles en alcohol y disolventes orgnicos (ter, cloroformo), poco solubles en agua pero arrastrables
por el vapor de agua. Poseen poder rotatorio e ndice de refraccin caracterstico.

Caractersticas qumicas
Los aceites esenciales contienen compuestos:
-No terpenoides: sustancias alifticas de cadena corta, sustancias aromticas, sustancias con azufre y
sustancias nitrogenadas.
-Terpenoides: derivan delisopreno (C5) unidas en cadena, principalmente monoterpenos (C10),
sesquiterpenos (C15) y los diterpenos (C20) que pueden ser alifticos, cclicos o aromticos. 1,2

COMPETENCIAS
Conoce la extraccin de aceites esenciales
Evala las caractersticas fsico-qumicas de los aceites esenciales

METODOLOGA
Destilacin por arrastre de vapor
Reacciones de coloracin

MATERIAL Y EQUIPOS
Equipo de destilacin.
Picnmetro
Material de vidrio: matraz, beacker, tubos de ensayo, baguetas.
Reactivos: cloroformo, acido actico, cido sulfrico.
Lmpara ultravioleta
Cubas cromatogrficas

PARTE EXPERIMENTAL

Extraccin de Aceites Esenciales

-Expresin en fro: presenta la ventaja de no someter los aceites esenciales a temperaturas elevadas y se
toma directamente la muestra problema.

-Destilacin: colocar la muestra problema sobre la criba ubicada a cierta distancia del fondo del
alambique, el calentamiento se produce con vapor saturado proveniente de una fuente de calor que
componen el equipo, fluye y a presin baja, penetrando a travs del material vegetal, los componentes se
volatilizan, y condensan en un refrigerante, se acumulan y
se separan el agua del aceite por diferencia de densidad.

I. ANLISIS CUALITATIVO

Anlisis organolptico:
Color
Olor
Sabor
Textura

Peso especfico
a) Pesar el picnmetro vaco y seco(P)
b) Llenar el picnmetro con la MP a 20C por 15 min., ajustar el volumen si es necesario y pesar
cuidadosamente (P1)
c) Repetir la operacin con agua destilada a 20 C (P2)

El peso especfico a 20 C se calcula de la siguiente manera:

P.E 20 = (P1-P)/(P2-P)

ndice de refraccin
a) Calibrar el refractmetro con I gota de agua destilada (inyectable) a 1.333
b) Secar el equipo con papel tissu
c) Colocar I gota de muestra problema sobre el prisma de medicin y realice la lectura.

Anlisis cromatogrfico
Fase estacionaria: Cromatofolios de silica gel 60 F254 de 6.5 cm por 2.5 cm
Fase mvil: Tolueno: acetato de etilo (9 :1)
Luz UV
Revelador: Vainillina Ac. Sulfrico
REACCIONES DE IDENTIFICACIN DE TERPENOS
REACCIN PROCEDIMIENTO RESULTADO
Lieberman -Buchard X gotas de MP + llevar a Esteroides: verde-
sequedad en B.M + X azul
gotas de cloroformo+ III Triterpenoides:
gotas de anhdrido rojonaranja
actico+ H2SO4 cc en
zona (por las paredes de
tubo) sin agitar.

CUESTIONARIO

1. Mediante un diagrama de Flujo esquematice y describa el proceso de control de calidad para


aceites esenciales y describa sus anlisis.

2. Qu otras tcnicas de extraccin de aceites esenciales conoce?.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Varro, E., Tyler, L. Farmacognosia. Ed. El Ateneo, Bs. As, Argentina (1993)
2. Kuklinski, C., Farmacognosia., Ed. Omega SA, Barcelona, Espaa (2000)
3. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
Espaa (2001)
4. Bravo Daz, L. Farmacognosia. Ed. Elsevier SA. Madrid, Espaa. (2003)
5. Marco,J. Alberto. Qumica de los productos naturales. Aspectos fundamentales del metabolismo
secundario. 1a ed. Madrid ( 2006)
6. Gibaja Oviedo S. Pigmentos naturales. Quinnicos. Lima (1998).
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8. Lpez MT. Los aceites esenciales: Aplicaciones farmacolgicas, cosmticas y alimentarias.
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9. Albaladejo QM. El Aceite Esencial de limn producido en Espaa. Contribucin a su evaluacin
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F0F07002.tdx2?sequence=1[citado 23 de marzo de 2013]
10. Segovia B. et al. Composicin qumica del aceite esencial de Tagetes elliptica Smith chincho y
actividades antioxidante, antibacteriana y antifngica.Ciencia e Investigacin 2010; 13(2): 81-86.
11. UNIDO, FAO.Herbs, spices and essential oils. Austria, 2005.Disponible en
http://www.unido.org/fileadmin/user_media/Publications/Pub_free/Herbs_spices_and_essential_oils.pdf[cita
do 23 de marzo de 2013]

PROTOCOLO N 10

EXTRACCIN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES.

HORARIO.. FECHA.

MESA DE TRABAJO ..
I. ANLISIS CUALITATIVOACEITES ESENCIALES

Ensayo Resultado
Anlisis organolptico Olor
Color
Sabor
Textura
Peso especifico

ndice de refraccin

REACCIONES DE IDENTIFICACIN

REACCIN RESULTADO

Lieberman -Buchard

LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Descripcin Rf

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

PRCTICA N 11

DROGAS CON ALCALOIDES DE NCLEO TROPNICO, INDLICO,


OXINDLICO, FENANTRENO.
EXTRACCIN CIDA-ALCALINA, IDENTIFICACIN, OBTENCIN Y VALORACIN.

Los alcaloides son sustancias orgnicas nitrogenadas con carcter bsico y mayoritariamente de origen
vegetal.Son compuestos orgnicos. Se forman generalmente a partir de aminocidos. De origen vegetal.
Sustancias nitrogenadas. Contienen nitrgeno heterocclico. Tienen estructura compleja. Son txicos.
Con actividad fisiolgicas incluso a dosis muy bajas. Los
alcaloides son un grupo muy heterogneo de compuestos con estructuras muy variadas y
generalmente complejas, contienen C, H, N.
La mayora de los alcaloides tienen reacciones que se aprovechan para su deteccin. Hay reactivos
generales que detectan alcaloides en general y hay otros que detentan un grupo especfico.Estas
reacciones se pueden clasificar en reacciones de precipitacin, cristalizacin y de color.

CLASIFICACIN DE ALACALOIDES
Alcaloides derivados de ornitina
Alcaloides derivados de lisina
Alcaloides derivados del triptfano
Alcaloides derivados de fenilalanina y tirosina
Alcaloides de ncleo purnico o bases xnticas

(Erythroxylum coca coca: cocana)

COMPETENCIAS
Extrae los alcaloides a partir de un polvo seco pulverizado por medio cido y alcalino.
Identifica cuali-cuantitativamente los alcaloides. Reconoce el origen biolgico de los
alcaloides.

MATERIALES

Materiales de vidrios y otros

Baln de 250 mL
Pera de separacin de 500 mL
Fiola de 500 mL
Tubos de ensayo de 10 mL
Pipetas de 1 mL, 5 mL

Reactivos
Agua destilada Acetona Etanol Etilacetona
Butanol Alcohol amlico Metanol Cloroformo ter
etlico ter de petrleo Bencenon-Hexano

cido clorhdrico Diclorometano Hidrxido de sdio Hidrxido de amnio


ReactivoDragendorff cido perclrico 0.02 N cido actico glacialCristal violeta
cido clorhdrico Agua destilada
Hidrxido de sodio Diclorometano
Metanol Cloroformo Hidrxido de
amonio.
Equipo

Molino manual Agitador con magneto Centrfuga Rotavapor


Pera de bromo Balanza analtica

PROCEDIMIENTO

1. Sensorial
Se verifica el aspecto, color y olor del polvo fino de acuerdo a las partes de la planta.

2. Fisicoqumico
2.1. Prueba de solubilidad
Se pesan 10 mg del extracto seco y se introduce en un tubo al cual se le adiciona 1 mL de solvente
en orden de polaridad decreciente ( aguadestilada,metanol,etanol,n-propanol,acetona,acetato de
etilo,cloroformo,tolueno,ter)
La finalidad del ensayo de solubilidad es determinar el comportamiento del extracto en soluciones de
diferente polaridad, permitiendo encontrar el sistema apropiado para el anlisis cromatogrfico.

3. Extraccin y Aislamiento

Muestra en estudio
Drogas vegetales que contienen alta cantidad de alcaloides

Proceso de Extraccin
Fundamento
La extraccin se realiza previamente en un medio cido formando sales de clorhidrato, y
posteriormente se alcaliniza con la finalidad de convertir los alcaloides en bases libres y poder
extraerlos con un solvente no polar.

Mtodo alcalino: la droga se humedece con agua y se mezcla con cal y amoniaco. Los
alcaloides se extraen con solventes orgnicos (ter de petrleo, cloroformo, benceno). La fase
orgnica se separa y evapora. El residuo de la droga tambin se puede agitar con agua
acidulada, se aade solvente orgnico, luego dejar reposar para su separacin en capas. Las
sales de alcaloides estn en la fase acuosa y en la fase orgnica las impurezas.

Mtodo cido, la droga se extrae con agua o alcohol, en medio cido. Se agrega un solvente
orgnico, otros productos indeseables se eliminan en la agitacin con cloroformo u otros
solventes orgnicos. Luego los alcaloides libres son precipitados por adicin en exceso de
bicarbonato de sdico o amoniaco, separndose por filtracin o extraccin con disolventes
orgnicos.

Procedimiento:
Pesar 5 g de la droga vegetal en un matraz y aadir 50 mL de HCl 10%, someter a BM por 30
agitar, enfriar y filtrar. Transvasar a pera de decantacin y alcalinizar con NH 4OH, extraer con
cloroformo 3 veces y separar las fases. Concentrar la fase clorofrmica a casi sequedad aadir
HCl 10% y reconocer con reacciones generales y especficas.

Cromatografa en capa fina

Sistema de solventes: A. Cloroformo: metanol: cido actico glacial (47.5:47.5:5)


Cloroformo: metanol: amoniaco (9:10:1)
Deteccin: Revelador Dragendorff modificado
A. 17 g de subnitrato de bismuto, 200 g de cido tartrico csp 800 mL agua.
B. 160 g de Yoduro de potasio csp 400 mL de agua.
Se mezclan solucin A + Sol B (1:1)

Cromatografa en capa fina de Bases Xnticas


Muestra Extracto clorofrmico
Estndar Sol. Cafena: 0.1% en cloroformo
Sol. Teofilina: 0.2 % en amoniaco
Sol. Teobromina: 0.2 % en hidrxido de sodio
Solventes tetracloruro de carbono: cloroformo: metanol (10:90:40)
Revelador vapores de yodo (antes de revelar, calentar la placa)

I. REACCIONES GENERALES
Realizar las reacciones generales y particulares

REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA


Yodados poliyodatos complejos
Dragendorff(yoduro potsico- bismtico ) 0.5 mL del extracto Precipitado naranja
Mayer (yoduro potsico mercrico) llevar a sequedad a Precipitado blanco
Bouchardat o Wagner (yodo en yoduro potsico) BM, luego agregar Precipitado pardo oscuro
Policidos minerales complejos 1mL de HCl 1%,
Bertrand (cido silco-tngstico) disolver +III gotas Precipitado blanco
Sonnenschein(cido fosfomolbdico) de reactivo. Precipitado amarillo-verdoso
Reactivo orgnicos
Popoff(cido pcrico ) Cristales caractersticos
Taninos Precipitado blanco

II. REACCIONES PARTICULARES

ATROPINA (Datura stramoniumL, Brugmansiaarborea L.)

REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA


Reaccin de Vitali mg de MP + HNO3 conc.+ calentar en coloracin violeta
B.M hasta residuo amarillo, enfriar y
agregar gotas de KOH alcohlico 10%

Reaccin de Wasicky mg de MP + gotas de Rvo. Wasicky + coloracin violeta


(p-dimetilaminobenzaldehido+ calentamiento suave rojiza brillante
H2SO4cc)

Reaccin de Arnold mg de MP+ gotas de H2SO4 + NaNO2 + violeta rojizo (fugaz).


KOH al 10%

COCANA(Erythroxylum coca L.)


REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
Cloruro de bario Disolver mg de muestra en agua destilada, medir Precipitado blanco
10% el pH y acidificar con gotas de HCl 10% Agregar I-
II gotas del reactivo BaCl2 10%
Reaccin de mg de extracto desecado+II gotas de tiocianato de Coloracin turquesa
Young cobalto. (tiocianato de cocana)

Nitrato de plata Disolver mg de muestra en agua destilada, medir Precipitado blanco


10% pH y acidificar (si es necesario) con gotas de cido
ntrico. Agregar I-II gotas de AgNO3
KMnO4 mg de extracto desecado+ II gotas de KMnO4 Cristales
caractersticos

NCLEO INDLICO Y OXINDLICO

Reaccin Procedimiento Reaccin positiva


Van Urk mg de MP+ III gotas de reactivo de coloracin azul
(dimetilaminobenzaldehido + cido sulfrico) Van Urk

BASES XANTICAS
REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
cido Solucin saturada de cafena + V gotas de Formacin de precipitado, soluble
tnico cido tnico 5% en exceso de reactivo
Solucin saturada de cafena + V gotas de Precipitado caf rojizo que en
Yodo reactivo de yodo (no precipita), se aade III exceso de NaOH desaparece.
gotas de HCl 10%
mg de muestra + HNO3 fumante. Calentar a Cambio de amarillo a violeta y al
sequedad en bao mara y observar la agregar NaOH la coloracin violeta
Murexida formacin de un residuo amarillo. Someter el desaparece.
residuo a vapores de amoniaco.
mg de muestra + mg de KClO3 (clorato de Formacin de residuo amarillo.
potasio) + agregar HClconc, calentar hasta Someter el residuo a vapores de
Weidel
sequedad en bao mara amoniaco y observar el cambio de
amarillo a violeta.
mg de muestra + gotas de NaOH 10% + gotas Formacin de precipitado.
Gerard de amonaco conc. + gotas de AgNO3 10%

REACCIN DE DIFERENCIACIN
RESIDUO DE LA REACCIN DE Cafena: azul violeta
MUREXIDA O WEIDEL, someter a completa Teobromina: rojo violeta
Ekkert
evaporacin el amoniaco + mg de codena+ Teofilina: violeta
H2SO4conc.
CUESTIONARIO

1. Mencione las especies en que se distribuyen los alcaloides

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Andjar I, Recio MC, Giner RM, Ros JL. Cocoa polyphenols and their potential benefits for
human health. OxidMedCellLongev. 2012;2012:906252.
2. Ashihara H, Kato M, Crozier A. Distribution, biosynthesis and catabolism of methylxanthines in
plants. HandbExpPharmacol. 2011;(200):11-31.
3. Ashihara H, Sano H, Crozier A. Caffeine and related purine alkaloids: biosynthesis,
catabolism, function and genetic engineering. Phytochemistry. febrero de 2008;69(4):841-56.
4. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia,
Zaragoza.2001.
5. Butt MS, Sultan MT. Coffee and its consumption: benefits and risks. Crit Rev Food Sci Nutr.
abril de 2011;51(4):363-73.
6. Ferrazzano GF, Amato I, Ingenito A, De Natale A, Pollio A. Anti-cariogenic effects of
polyphenols from plant stimulant beverages (cocoa, coffee, tea). Fitoterapia. julio de
2009;80(5):255-62.
7. Hooper L, Kay C, Abdelhamid A, Kroon PA, Cohn JS, Rimm EB, et al. Effects of chocolate,
cocoa, and flavan-3-ols on cardiovascular health: a systematic review and meta-analysis of
randomized trials. Am J ClinNutr. marzo de 2012;95(3):740-51.
8. Kuklinski, C. Farmacognosia, 1era edicin, Barcelona, 2000
9. Obregn VilchezL.Ua de Gato "Cat'sClaw": gnero uncaria, estudios botnicos, qumicos y
farmacolgicos de Uncaria tomentosa y Uncariaguianensis. Ed. Inst. de Fitoterapia
Americano. Lima 1997
10. Selecciones del Reader'sDigest. Secretos y virtudes de las plantas medicinales. Madrid,
1982.
11. Varro, E., Tyler, L. Farmacognosia. Ed. El Ateneo, Bs. As, Argentina 1993.
12. Wink M, Meibner C, Witte L. Patterns of quinolizidina alkaloids in 56 species of the
genusLupinus. Phytochemistry 1995; 38:139-153.

DROGAS CON ALCALOIDES

HORARIO.. FECHA.

MESA DE TRABAJO ..

I.- MTODO DE EXTRACCIN:

II. ANLISIS CUALITATIVO:

REACCIONES GENERALES
REACCIN RESULTADO
DRAGENDORFF
BERTRAND
BOUCHARDAT O WAGNER
MAYER
SONNENSCHEIN
POPOFF
TANINOS

REACCIONES PARTICULARES

ATROPINA

REACCIN RESULTADO
VITALI
WASICKY
ARNOLD
COCANA

REACCIN RESULTADO
CLORURO DE BARIO
REACCIN DE YOUNG
NITRATO DE PLATA 10%
KMnO4

NCLEO INDLICO Y OXINDLICO

REACCIN RESULTADO
VAN URK

BASES XNTICAS
Reaccin Cafena Teofilina Teobromina
R. Murexida
R. Weidel
R. Gerard
R. Yodo
R. cido
tnico

ANLISIS CROMATOGRFICO
Rf:

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 12

INVESTIGACIN FARMACOGNSTICA DE LOS EXTRACTOS DE LA PLANTA MEDICINAL


ESTUDIADA (ANLISIS FITOQUMICO: TAMIZAJE FITOQUMICO, PH, NDICE DE REFRACCIN,
DENSIDAD Y CROMATOGRAFA EN CAPA FINA).

La investigacin de plantas medicinales es muy importante porque se utilizan en la elaboracin de


medicamentos y tambin y como materia prima para formulaciones magistrales. Por esta razn se deben
trabajar con extractos estandarizados que tengan un control de calidad en cuanto al control de identidad
mediante una certificacin taxonmica y de calidad mediante ensayos microbiolgicos, fisicoqumicos y
farmacolgicas que aseguren su calidad, seguridad y eficacia.

FASE I: Recoleccin, conservacin de drogas y elaboracin de


extractos
EXTRACCIN

Recoleccin Certificacin
,estabilizacin taxonmica

Seleccin

Desecaci

Molienda

Preparacin del
extracto acuoso

Prueba de Screening Anlisis Ensayos en


solubilidad fitoqumico cromatogrfico laboratorio
Aislamiento y
Cromatografa Cromatografa Cristalizaci
n
purificaci
n
En capa fina columna

Anlisis Anlisis
espectroscpico espectroscpico

FASE II: Elaboracin de extractos estandarizados

Parmetros fsico-qumicos

Propiedad Extracto

Olor
Color Anlisis organolptico
Sabor
pH Papel Indicador
Densidad relativa Picnmetro
ndice de refraccin Refractmetro

Prueba de solubilidad
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy soluble

Solventes Extracto seco (mg)


Agua destilada Distribuir equitativamente mg de
Etanol extracto seco en cada tubo de
Metanol ensayo y agregar X gotas de
n-butanol cada solvente, agitar por 1 min y
Acetato de etilo evaluar solubilidad.
Diclorometano
Cloroformo

Huella Cromatogrfica
1. Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de
solvente.
2. Fase estacionaria: Slica gel F 254 (cromatofolios)
3. Fase mvil: Solventes polares y apolares 4. Deteccin: Vapores de yodo / Luz
UV

Muestra Extracto clorofrmico


Solventes Tolueno: acetato de etilo: dietilamina (7:2:1)
Revelador Dragendorff

Tamizaje fitoqumico
LEYENDA: (-) Nulo (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
METABOLITO REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
Molish X gotas de MP+ III gotas de Molish
Anillo violeta
(alfa naftol 2% en alcohol) agitar+ III gotas de H2SO4 CC
Antrona
X gotas de MP + III gotas de Antrona Coloracin verde
CARBOHIDRATOS (antrona en H2SO4 cc al 2% )
Fehling
(A: CuSO4; B: tartrato mixto de
X gotas de MP + III gotas de Fehling
potasio y sodio
A+ III gotas de Fehling B + calentar Coloracin rojo ladrillo
en B.M
(KNaC4H4O64H2O))
COMPUESTOS X gotas de MP + III gotas de FeCl3 10
FENLICOS FeCl3 Coloracin verde o azul
%
TANINOS Gelatina X gotas de MP + III gotas de gelatina Precipitado denso
blanco
Chalconas, auronas, isoflavanonas:
No hay coloracin.
X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg Isoflavanonas: Amarillo rojizo.
FLAVONOIDES Shinoda
metlico + III gotas de HCl cc Flavanonoles: Rojo a magenta.
Flavonas y flavonoles: Amarillo a rojo

ANTOCIANINAS Y
Rosenheim X gotas de MP + III gotas de
FLAVONOIDES Coloracinrojo oscuro
CATQUICOS
(Sol. Yodo Yodurada) Rosenheim
AMINOCIDOS
X gotas de MP + III gotas de
LIBRES Y GRUPOS Ninhidrina(0.1% en etanol) Coloracin violcea
AMINO
ninhidrina + calentar en B.M 10 min.
X gotas de MP + evaporar el solvente
Dragendorff
B.M + V gotas de HCl 10%+ III gotas Precipitadonaranja
(yoduro potsico- bismtico )
de Dragendorff
X gotas de MP + evaporar el solvente
Mayer (yoduro potsico B.M + V gotas de HCl 10%+ + III Precipitado blanco
mercrico)
gotas de Mayer
ALCALOIDES
X gotas de MP + evaporar el solvente
Bertrand (cido Precipitado blanco
B.M + V gotas de HCl 10%+ + III
silcotngstico)
gotas de Bertrand
X gotas de MP + evaporar el solvente
Sonnenschein Precipitado amarillo-verdoso
B.M + V gotas de HCl 10%++ III
(cido fosfomolbdico)
gotas de Sonnenschein
NAFTAQUINONAS,
Borntrager X gotas de MP + III gotas de
ANTRAQUINONAS Coloracinroja
Y ANTRANONAS
(NaOH 5%) Borntrager
X gotas de MP + llevar a sequedad en
B.M + X gotas de cloroformo+ III
TRITERPENOIDES Y Esteroides: verde-azul
Lieberman-Bourchard gotas de anhdrido actico+ H2SO4 cc
ESTEROIDES Triterpenoides: rojo-naranja
en zona (por las paredes de tubo) sin
agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada
Formacin de 0.5 a 1 cm de espuma
SAPONINAS Generacin de espuma + agitar fuertemente por 1 min.
estable por 15 min.
X gotas de MP + V gotas de cido
GLICSIDOS Baljet pcrico 1 % + V gotas de NaOH al 5 Coloracin anaranjada
%.
X gotas de MP + V gotas de
LACTONAS Legal denitroprusiato de sodio 0.5% + V Coloracin rojo oscuro
gotas de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido
NH4OH cc
CUMARINAS con NH4OH cc NaOH 10% en Fluorescencia celeste
NaOH 10%
boca de tubo + calentar por 5 min a

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa (1999).
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed.
BailliereTindall, Londres 1994.

3. Wallis, T. Manual de Farmacognosia. Ed. Ceosa, Mxico. 1991.

4. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa
2001.

5. Obregn, L.Maca. Planta medicinal y nutritiva del Per.Lima 1988.


PROTOCOLO
TRABAJO DE INVESTIGACIN
RESULTADOS
MESA DE TRABAJO: .. DIA DE LABORATORIO:
.

FASE I: Conservacin de drogas y elaboracin de


extractos
Obtencin y conservacin de la droga

(Diagrama de Flujo)

FASE II: Elaboracin de extractos estandarizados

Parmetros
Propiedad Extracto etanlico

Olor
Color
pH
Densidad relativa
ndice de refraccin

Prueba de solubilidad
Solventes Extracto seco (mg)

Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Diclorometano
Cloroformo
Leyenda: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy
soluble

Tamizaje fitoqumico

METABOLITO REACCIN CAMBIOS OBSERVADOS INTERPRETACIN RESULTADOS


CARBOHIDRATO Molish
S Antrona

Fehling

FeCl3
COMPUESTOS
FENLICOS

TANINOS Gelatina

FLAVONOIDES Shinoda

ANTOCIANINAS Rosenheim
Y FLAVONOIDES
CATQUICOS
Ninhidrina
AMINOCIDOS
LIBRES Y
GRUPOS AMINO

ALCALOIDES Dragendorff

Mayer

Bertrand

Sonnenschein

NAFTAQUINONA
S,
ANTRAQUINONA
SY
ANTRANONAS Borntrager
TRITERPENOIDE Lieberman-Burchard
S Y ESTEROIDES

SAPONINAS Generacin de espuma

GLICSIDOS Baljet

LACTONAS Legal

CUMARINAS NH4OH cc
NaOH 10%
LEYENDA:(-) Nulo(+) Leve (++) moderado (+++) abundante

Huella Cromatogrfica
Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de solvente. Fase
estacionaria: Slica gel

Calculo de Rf

Esquema de resultado
PRCTICA N 13 LPIDOS, IDENTIFICACIN Y CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES

El aceite vegetal es un compuesto orgnico obtenido a partir de semillas u otras partes de las plantas en
cuyos tejidos se acumulan como fuente de energa. Estn conformados por lpidos definidos como grupo
heterogneo de compuestos insolubles en agua, y solubles en solventes apolares como: ter, cloroformo,
benceno o acetona. Las grasas y aceites son steres formados por la condensacin de cidos grasos
con glicerol.1-5

Mtodos de extraccin de aceites


Usualmente en la extraccin de aceites se aplican procesos mixtos y se elige segn la naturaleza de la
materia prima.

Tabla 1. Procesos de extraccin de aceites.1


Proceso de Refinacin,
extraccin Ventajas Desventajas deodorizacin Ejemplos
y blanqueo
Prensado en Retiene Bajo rendimiento de aceite NO Aceite de oliva
frio o compuestos virgen, aceite
centrifugacin menores como de palta,
voltiles, aceite de
compuestos camo
fenlicos y clorofila.
Extraccin Proceso no txico y ms Los rendimientos pueden opcional Aceite de
mediante seguro que la extraccin ser menores a los avena
fluidos con hexano. No requiere obtenidos con hexano
supercrticos eliminar solventes de
(CO2) la miscela o harina
residual.
Extraccin con Solvente menos txico y Difcil de remover extractos SI Aceite de
Etanol ms seguro que el no lipdicos de la miscela y grano de maz
hexano la harina
Prensado Tecnolgicamente Menor rendimiento que la SI Aceites
estndar simple y extraccin con hexano, las comunes
econmico para altas temperaturas causan
produccin a algunos cambios qumicos en
gran escala industrial el aceite y la harina.

Extraccin con Bajo costo, altos Problemas para la salud y de SI Aceites


hexano rendimientos Seguridad. comunes
Pre-prensado Bueno para semillas con Requiere ms equipamiento SI Aceites
+ >20% aceite.
comunes
extraccin con
hexano
Extraccin Tcnica suave, Altos costos de las enzimas, Opcional En desarrollo
acuosa ambientalmente limpia rendimiento menor a la
enzimtica extraccin con hexano.

Extraccin de aceites

Extraccin por solventes orgnicos


La extraccin con solventes, principalmente hexano, es uno de los
procesos ms tradicionales empleados en la obtencin de aceites de
semillas oleaginosas. El principio de extraccin con solvente se basa
en el hecho que un componente (soluto) se distribuye entre dos fases
segn la relacin de equilibrio determinada por la naturaleza del
componente y las dos fases. A fin de facilitar el proceso de extraccin,
es necesario reducir el tamao de la semilla o grano mediante el
quebrado e inclusive el laminado. La aplicacin de un tratamiento
trmico antes o durante la extraccin produce la rotura de la emulsin
celular, reduce la viscosidad del aceite facilitando su fluidez y
desplazamiento as como disminuye la tensin superficial del aceite.
No obstante, dicho tratamiento puede afectar negativamente la calidad
qumica del mismo incrementando los parmetros de oxidacin. 1,3

Extraccin por prensado en frio 1-3


En el prensado en fro la materia prima no se somete a calentamiento previo o durante la extraccin, que
permite la retencin de una mayor cantidad de compuestos fitoqumicos de inters como algunos
antioxidantes naturales. La prensa utilizada comnmente es la de tornillo helicoidal, aplicando una
presin de molienda a las semillas. Otro tipo de tcnica es la de aplicar presin directamente sobre las
semillas ubicadas en un barril con orificios a los costados lo cual permite el escurrimiento del aceite. La
extraccin por prensado mecnico, no aplica calor y se recomienda como mtodo de extraccin de
aceites vrgenes y extra vrgenes ya que conservan las propiedades qumicas y constituyentes del aceite.

Clasificacin de aceites
Segn el codexalimentarius2 los aceites vegetales se pueden clasificar como:
Los aceites vegetales comestibles: productos alimenticios constituidos principalmente por glicridos de
cidos grasos obtenidos nicamente de fuentes vegetales. Podrn contener pequeas cantidades de
otros lpidos, tales como fosftidos, de constituyentes insaponificables y de cidos grasos libres
naturalmente presentes en la grasa o el aceite.
Los aceites vrgenes: se obtienen, sin modificar el aceite, por procedimientos mecnicos y por aplicar
slo calor. Se puede purificar por lavado, sedimentacin, filtracin y centrifugacin nicamente.
Los aceites prensados en fro: se obtienen por procedimientos mecnicos nicamente, sin la aplicacin
de calor. Podrn haber sido purificados por lavado, sedimentacin, filtracin y centrifugacin nicamente.

COMPETENCIAS
Conoce los mtodos de extraccin de aceites
Identifica cualitativamente los aceites vegetales
Analiza la calidad de los aceites

METODOLOGA
Extraccin por prensado en frio
Extraccin por solventes orgnicos
Anlisis cualitativo
ndice de acidez

MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgnicos
Reactivos de precipitacin

PARTE EXPERIMENTAL
I. Reacciones generales de caracterizacin

REACCIN PROCEDIMIENTO RESULTADOS


Heidenreich Tomar V gotas de H2SO4 concentrado en tubo Observar coloracin
de ensayo y verter por las paredes gotas del pardarojiza.
aceite.
Hauchercorne Colocar V gotas de aceite y aadir reactivo Observar color, luego someter
deHauchercorne, agitar por 2 min. a bao mara por 20 minutos.
Observarcoloracin
pardarojiza.
Bellier Colocar V gotas de aceite en un tubo de Los aceites vegetales dan
ensayo, V gotas de HNO3 concentrado y V coloraciones rojas, verdes o
gotas de solucin saturada de resorcina en violetas.
benzol, agitar por 10 segundos,
Elaidnica Colocar en un tubo de ensayo seco 1 mL de Observar.
aceite ms X gotas de HNO3 concentrado,
agitar por 2 minutos, aadir mg de mercurio
metlico, agitar y dejar en reposo.

PARTE EXPERIMENTAL
ACEITE PROCEDIMIENTO RESULTADO POSITIVO
MAN Reaccin de Blarez o araquidato de Formacin de precipitado
potasio: tomar 1.5 mL de aceite de man en
un matraz de 250 mL, adicionar 15 mL de
potasa alcohlica al 5%, adaptarle un
refrigerante de reflujo, colocar a bao mara
por 20 min, enfriar el matraz.
OLIVA Reaccin de Hauchercorne: tomar 1 mL de Luego someter a bao mara por
aceite y agregar 1mL de HNO3 y V gotas de 20 min. Observar la
agua, agitar por 2 minutos y despus de 15 coloracin: el aceite de oliva
minutos en reposo, observar el color. puro permanece inalterable
mientras que los dems aceites
varan del amarillo al pardo.
Reaccin de Fluorescencia: tomar V gotas Observar fluorescencia azulada
de aceite y diluir en 1mL de cloroformo
ALMENDRA Reaccin de Bieber: mezclar V gotas de Si el aceite de almendras es
H2SO4 concentrado, V gotas de HNO 3 puro, se forma una emulsin
concentrado y V gotas de agua con 1 mL de amarilla que al cabo de algn
aceite de almendras. tiempo pasa a color rojizo.
AJONJOL O Reaccin de Behrens: Coloracin verde.
SSAMO mezclar en un tubo de ensayo V gotas de
H2SO4 concentrado y V gotas de HNO3
concentrado, luego aadir V gotas de aceite.
Reaccin de Bellier: colocar V gotas de Coloracin verde que persiste
aceite en un tubo de ensayo, V gotas de algunos minutos.
HNO3 concentrado y V gotas de solucin
saturada de resorcina en benzol, agitar por
10 min y observar.
Reaccin Baudovin: Colocar V gotas de Coloracin rojiza.
aceite en un tubo de ensayo, miligramos de
sacarosa y V gotas de H2SO4 concentrado,
agitar y dejar en reposo por 5 a 10 minutos.
R. Villavecchia y Fabris (detecta hasta 0.25- Coloracin del rosado al rojo.
0.5% de aceite): colocar II a III gotas de una
solucin alcohlica de furfurol, V gotas de
aceite y V gotas de H2SO4 concentrado,
agitar y dejar en reposo.
LINAZA R. Heidenreich: colocar en una cpsula de Coloracin anaranjada y luego se
porcelana, V gotas de H2SO4 concentrado y forma una pelcula negra.
verter por las paredes gotas del aceite.
R. Hauchercorne: colocar 1 mLde aceite y Coloracin rojo castao.
aadir HNO3: agua (3:1), agitar y despus de 2
minutos observar el color, luego someter a
bao mara por 20 minutos.
RICINO R. Brulle: colocar 10mL de aceite de ricino, 3 Coloracin amarilla.
mL de HNO3 diluido ms 0.1 g de albmina en
polvo, someter a calentamiento, al llegar a
ebullicin agitar, calentar nuevamente y dejar
en reposo 30 min.
Solubilidad: colocar V gotasde aceite y Observar solubilidad de aceites
aadir alcohol 96 y agitar.
colocarV gotasde aceite y aadir cido actico
y agitar.
Fusin potsica: tomar 2 mL de aceite y Observar precipitado de cido
agregar 2 pastillas de KOH, calentar (se sebsico.
percibe olor caracterstico), hasta no percibir
olor, enfriar y disolver en agua, adicionar
MgCl210%, observar precipitado de cidos
grasos, filtrar y tratar el lquido filtrado con HCl
10%.
BACALAO Disolver III gotas del aceite en el cloroformo, Coloracin violeta que pasa a
aadir III gotas de H2SO4 cc pardo.

I. ndice de yodo - Mtodo de Hanus


Es el peso de yodo absorbido por la muestra, se expresa en gramos de yodo por 100 g de muestra. El
ndice de yodo indica la proporcin de dobles enlaces en los cidos grasosque constituyen la grasa o
aceite y se expresa como miligramos de yodo que se fijan por adicin en 100 g de aceite.

Reactivos
Solvente: cloroformo
Yoduro de potasio al 30%
Reactivo de Hanus: solucin reactivo de yodo bromuro
Titulante: tiosulfato de sodio Na2S2O3 0.1N
Indicador: S. R. engrudo de almidn

Tcnica operatoria

1. Pesar 0.2 0.3 g de la muestra problema en un matraz con tapa esmerilada.


2. Aadir 10 mL del solvente y agitar hasta completa disolucin y agregar exactamente 25 mL del
reactivo de Hanus; tapar, agitar y colocar el matraz al abrigo de la luz 30 min.
3. Agregar 10 mL de solucin de yoduro de potasio al 30% y 100 mL de agua.
4. Valorar con la disolucin de tiosulfato sdico 0.1 N hasta la decoloracin del color amarillo producido
por el yodo, aadir gotas de S.R engrudo de almidn y continuar la valoracin con agitacin intensa
hasta que desaparezca la coloracin azul.
5. Se efecta paralelamente el ensayo en blanco El ndice de yodo se expresa:

N n X 1.27
II =

II. Determinacin de la acidez

La acidez de un producto natural se considera como su contenido en sustancias cidas. Habitualmente


se determina mediante tcnicas de valoracin cido-base y se puede expresar como la cantidad
equivalente de un cido caracterstico de ese producto natural.
En el caso de aceites fijos y grasas el ndice de acidez puede expresar como el nmero de mL de lcali
0.1N requerido para neutralizar los cidos libres en 10 gramos de sustancia

R-COOH + KOH 3R-COOK + H2O

ndice de acidez (cidos grasos libres)

Definicin: mg de hidrxido de potasio necesarios para neutralizar los cidos grasos libres contenidos en
1.0 gramos de aceite o grasa.

Dnde:

Reactivos
Titulante : KOH 0,1 N
Indicador: fenolftalena al 0,1% en etanol.
Mezcla disolvente: alcohol : cloroformo (1:1)

Tcnica Operatoria
1. Pesar de 2 3 g de aceite en un matraz Erlenmeyer, previamente tarado.
2. Tomar 30 mL mezcla disolvente (alcohol-cloroformo 2:1) y neutralizar con KOH 0,01 hasta
coloracin rosada persistente del indicador.
3. Cargar la bureta con la disolucin de KOH 0,1 N,
enrasar e iniciar la valoracin, agitando continuamente, hasta viraje del indicador. Anotar
los mL de KOH gastados.

1.27 (V1 - V2)

P: peso de la muestra
V: volumen en mL de
hidrxido desodio gastado

CUESTIONARIO

1. Qu recursos naturales son fuente promisoria de aceites vegetales?

2. Describa otros mtodos para el anlisis en aceites.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Azcar L, Ciudad G, Heipieper HJ, Navia R. Biotechnological processes for biodiesel


production using alternative oils. ApplMicrobiolBiotechnol. octubre de 2010;88(3):621-36.
2. Codex alimentarius: Fats, oils and related products. Volume 8. Food & Agriculture Org.; 2001.
3. Espaol CA. Anlisis. Mtodos Oficiales de aceites, grasas, cereales y derivados, productos
lcteos y derivados de la uva. Boletn Oficial del Estado, BOE, del. 17.
4. FAO. Grasas y cidos grasos en nutricin humana Consulta de expertos [Internet]. FAO;
2012. Recuperado a partir de: http://www.fao.org/docrep/017/i1953s/i1953s.pdf
5. Hernndez N, Codony Salcedo R, RafecasMartnez M, Boatella Riera J. Contenidos de
isomerostrans de los acidos grasos en productos carnicos (I). Embutidos. Grasas y Aceites,
1991, vol 42, num 2, p 143-147 [Internet]. 1991 [citado 23 de agosto de 2013]; Recuperado a
partir de: http://diposit.ub.edu/dspace/handle/2445/32261
6. Ixtaina V. Caracterizacin de la semilla y el aceite de Cha (Salvia hispanica L.)obtenido
mediante distintos procesos. Aplicacin en tecnologa de alimentos. Universidad Nacional de
La Plata; 2010. p. 3950.
7. Lafont JJ, Portacio AA. Extraccin y Caracterizacin Fisicoqumica del Aceite de la Semilla
(Almendra) del Maran (Anacardiumoccidentale L). Informacin tecnolgica. 2011;22(1):51-
8.
8. Li Q, Du W, Liu D. Perspectives of microbial oils for biodiesel production.
ApplMicrobiolBiotechnol. octubre de 2008;80(5):749-56.
9. Lu C, Napier JA, Clemente TE, Cahoon EB. New frontiers in oilseed biotechnology: meeting
the global demand for vegetable oils for food, feed, biofuel, and industrial applications.
CurrOpinBiotechnol. abril de 2011;22(2):252-9.
10. Panreac Qumica SA. Mtodos Analticos en Alimentarias. Mtodos Oficiales de Anlisis
Aceites y Grasas. 1999;15.
PROTOCOLO N 13

LPIDOS, IDENTIFICACIN Y CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES

HORARIO.. FECHA.

MESA DE TRABAJO ..

DROGAS CON LIPIDOS

I. RESULTADOS

MUESTRAS:.

REACCIONES GENERALES

REACCIN RESULTADOS
R. Heidenreich
R. Hauchercorne
R. Bellier
R. Elaidnica

NDICE DE YODO
CLCULOS RESULTADOS

NDICE DE ACIDEZ

CLCULOS RESULTADOS

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
IDENTIFICACIN DE ACEITES

1.Aceite de man: 5. Aceite de linaza

Reaccin Observacin
Reaccin de
Blarez
2. Aceite de oliva Observacin
Reaccin Observacin Reaccin
R. R. Heidenreich
Hauchercorne
6. Aceite de ricino
R. Hauchercorne

3. Aceite de almendras
Reaccin Observacin Reaccin Observacin
1. Aceite de ssamo
R. Bieber Solubilidad

R. fusin 7. Aceite de bacalao


REACCIN
potsica OBSERVACIN
Observacin
R. Brulle
R. Villavecchia y
Fabris
R. Behrens

R. Baudovin
R. Bellier

Reaccin
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
cloroformo

PRCTICA N 14
ANLISIS DE VITAMINAS
INTRODUCCIN
Las vitaminas son compuestos orgnicos que cumplen funciones vitales relacionadas con el metabolismo
y con la fabricacin de hormonas, neurotransmisores, clulas sanguneas o material gentico. Poseen
funcin enzimtica acelerando reacciones qumicas.

Segn su solubilidad se clasifican en:

Vitaminas hidrosolubles. Vitaminas liposolubles.


Vitamina B1 Vitamina A Vitamina B2 Vitamina D
Vitamina B3 Vitamina E
Vitamina B6 Vitamina K
cido flico Vitamina B12. Vitamina C.
cido pantotnico
Biotina
COMPETENCIA
Analiza cualitativamente vitaminas liposolubles e hidrosolubles

METODOLOGA
Reacciones de coloracin

MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgnicos
Reactivos de precipitacin

PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo

VITAMINA LIPOSOLUBLES
procedimiento Reaccin positiva
vitamina A R. de Carr-Price: evaporar 3 mLdel Coloracin azul fugaz.
extracto etreo, disolver en cloroformo y
adicionar gotas de S.R SbCl3.

vitamina D R. de Liebermann: evaporar 0.5 mL del Coloracin roja que


extracto etreo, adicionar 1 mL de pasa al violeta, azul y
cloroformo, 1 mL de anhidro actico y gotas finalmente al verde.
de H2SO4 cc en zona.

VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Vitamina C Tratar V gotas de filtrado con V gotas mLde S.R Precipitado rojo de xido
Fehling o Benedict, calentar. cuproso

Diluir 1 mL de cido ascrbico al 2% con Decoloracin del reactivo


pocosmLde 2,6 diclorofenolindofenol.

Tratar V gotas del filtrado con S.R. Yodo. Decoloracin del reactivo

Complejo B R. del tiocromo: disolver mg de la muestra en Da fluorescencia azul que


VIII gotas de NaOH 0.5 N adicionar 1 mL de se observa en la luz
Vitamina B 1 o Tiamina Ferrocianuro de potasio al 10%, 1 mLde ultravioleta que
alcohol isobutlico y agitar por 2 min. desaparece al adicionar
gotas de cidos diluidos y
se regenera al adicionar
gotas de soluciones
alcalinas.
Precipitacin con el cido Precipitado
silicotngstico: Tratar mg de muestra con agua, caracterstico.
adicionar HCl diluido y calentar ligeramente,
adicionar gotas de S.R cido silicotngstico.
Tratando una solucin de vitamina B1 con Precipitado blanco.
HgCl2.
Tratando una solucin de vitamina B1.con S.R. Precipitado rojo pardo
Yodo.
Vitamina B2 o Riboflavina Disolver mg de muestra con agua, da una Fluorescencia verde.
coloracin amarilla.

Vitamina B6 o Piridoxina Tratar 1 mL de solucin de vitamina B6 con S.R Coloracin rosada que
FeCl3. pasa al rojo

CUESTIONARIO
1. Mencione especies que presentan vitaminas
2. Describa otros mtodos de cuantificacin de vitamina C.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Alonso P, Salucci M, Lzaro R, Malani G, Ferro-Luzzi A. Capacidad antioxidante y potencial de
sinergismo entre los principales constituyentes antioxidantes de algunos alimentos. Rev Cubana
Alim Nutric. 1999;13(2):104-11.
2. Flrez J. Vitaminas liposolubles e hidrosolubles. Farmacologa humana (3rd ed), Editorial
Masson, SA, Barcelona. 1999;991-1005.
3. Bentez Zequeira DE. Vitaminas y oxidorreductasas antioxidantes: defensa ante el estrs
oxidativo. Revista cubana de investigaciones biomdicas. 2006;25(2):0-0.

PROTOCOLON 14

ANLISIS DE VITAMINAS

HORARIO.. FECHA.

MESA DE TRABAJO ..

I. RESULTADOS

ANLISIS CUALITATIVO
REACCIONES DE IDENTIFICACIN

REACCIN vitamina A vitamina D vitamina C vitamina B MUESTRA


PROBLEMA

INTERPRETE SUS RESULTADOS

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