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La Farmacognosia es una ciencia que tiene por objeto el estudio cientfico de las drogas naturales
de origen vegetal y animal, de sus constituyentes qumicos, principios activos y productos
relacionados. UNIVERSIDAD NORBERT WIENER
CURSO
Como objeto especfico se DE
tieneFARMACOBOTNICA
en primer lugar que elyestudiante
FARMACOGNOSIA
desarrolle habilidades y destrezas
en el conocimiento de las estructuras internas y externas de las plantas que contribuyan a la
GUAyDE
identificacin de las mismas y en el manejo PR
CTICAS
utilizacin de los diferentes Mtodos y Tcnicas
Analticas para la extraccin, aislamiento, identificacin y cuantificacin de los principios activos
responsables de las acciones farmacolgicas que se encuentran en las drogas; y en segundo
trmino motivar el inters del estudiante al estudio e investigacin de las especies vegetales.
Con esta gua se pretende contribuir a un mejor desarrollo de las prcticas.
Las autoras.
Smallanthus sonchifolius
PRCTICAS DE LABORATORIO
LIMA
, 2014
Tema
F-CV3-3B-2 Rev. Junio 2007
|
Semana Prctica
Elaboracin de diversos cortes y preparados microscpicos
1 1 para la caracterizacin de las drogas vegetales (Citologa).
MARCO TERICO:
El estudio de la estructura interna de las plantas requiere de adecuadas preparaciones
microscpicas de muestras que nos permitan la observacin detallada de los diferentes tejidos y
estructuras vegetales; stas se elaboran preparando lminas histolgicas de diferentes tipos de
cortes hechos en plantas.
La clula vegetal presenta entre sus principales caractersticas una estructura celulsica compleja
(pared celular)y diferentes componentes no protoplasmticos primarios (substancias que se
producen como consecuencia del metabolismo primario) y comprenden a los polisacridos
(almidones) as como a los lpidos y protenas de reserva (aleurona), mientras que los denominadas
inclusiones celulares (diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla cristalfera) constituyen las
formaciones cristalinas de oxalatos(diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla
cristalfera);todas estas sustancias tienen su importancia farmacognstica en la identidad de la
droga vegetal.
Preparacin de cortes:Los cortes se realizan a mano alzada, con una hoja de afeitar
a) Cortes que comnmente se hacen en hojas:
I. Corte superficial: Se secciona paralelamente a la
superficie de la hoja.
II. Corte transversal: Se secciona
perpendicularmente a la vena media.
Drusas Rafidios
TCNICA:
Teir los cortes safranina diluida al 15% durante 2-5 minutos segn el material, lavar con agua, y
montar en agua. Las paredes secundarias lignificadas se tien de color rojo intenso y tambin la
cutcula. El parnquima toma color rosado.
A. Realizar cortes transversales muy delgados de la parte carnosa del membrillo y del aj. Observe a
menor aumento las clulas ptreas. A mayor aumento, reconocer la pared secundaria
lignificada, el lumen y los canalculos porales.
B. Realizar un raspado del tubrculo de papa, semilla
de frejol y depositarlo en una lmina con una gota de agua, cubrir con la laminilla y
observar con el objetivo de mayor aumento. Identifique los diferentes tipos de granos de
almidn: simples y compuestos, con sus estratificaciones e hilio excntrico. A mayor
aumento dentro de las clulas algo redondeadas. Se identifican amiloplastos de formas
peculiarmente caractersticas luego aadir lugol y sealar lo ocurrido.
C. Realizar corte transversal de hoja de sbila y colocar en un portaobjeto, realizar el montaje con
una gota de agua. Observe: los rafidios.
D. Realice un corte transversal del tallo modificado de tuna o en corte transversal de peciolo de
begonia, realice el montaje con una gota de agua. Observe: clulas isodiamtricas conteniendo
un agregado cristalino de aspecto asteroideo: la drusa.
E. Realice el corte transversal de la raz de zanahoria y montar con una gota de agua. Observar
clulas de contorno redondeado en cuyo interior presenta pequeos corpsculos tubulares e
irregulares refringentes de color anaranjado (cromoplastos con predominio de carotenoides).
F. Corte superficial del envs de las hojas de oreja de gato y hacer el montaje respectivo. Observe
clulas de contorno poligonal, unos incoloros y otros de color morado prpura; dicho color se
debe a que el contenido vacuolar que est conformado por antocianinas. El conjunto de vacuolas
se llama vacuoma.
RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la HOJA DE OBSERVACIONES y elaborar el informe de su
prctica mediante un PROTOCOLO DE ANLISIS BOTNICO segn Formato.
ACTIVIDAD BIBLIOGRFICA:
1. En qu consiste la Herborizacin de muestras vegetales? Desarrolle un mapa conceptual con grficos o
dibujos.
2. Mencione mediante un cuadro 10 plantas medicinales endmicas o nativas del Per, con los siguientes
datos:
Nombre Comn Nombre Cientfico Familia Usos Medicinales Ttulo, Autor y ao de
publicacin.
1.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Libros
1. Prez, E. 1999. Introduccin a la Biologa Vegetal. Impresiones David, Lima
2. Strasburger. 1994. Botnica. Ediciones Omega S.A. Barcelona.
3. Gola G.; Negri G.; Cappelletti C. 1965.Tratado de Botnica Barcelona,
6. Mostacero, J. Taxonoma de las Fanergamas. 2002.tiles del Per. 1ra. Edicin. Lima.
7. Greulach V.; Adams A. 1990. Las plantas: introduccin a la botnica moderna. Mxico 9.
Reynaud, J.2002. La flora del farmacutico. Espaa.
Revistas
1. Fieldmuseum: http://fm1.fieldmuseum.org/vrrc/
2. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
3. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
4. Revista peruana de biologa: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
5. The Plant List: www.theplantlist.org
6. Trpicos, Missouri Botanical Garden: www.tropicos.org
HOJA DE OBSERVACIONESDE PRCTICA N 1
CARACTERIZACIN MICROSCPICA DE LAS DROGAS VEGETALES.
CITOLOGA: CLULA VEGETAL, PARED CELULAR, NCLEO Y COMPONENTES
PROTOPLASMTICOS.
Dibuje o esquematice sus observaciones FECHA:......./.........../........
TEMA:
Fecha: / /
FOTOGRAFAS DE CORTE ESQUEMA
FOTOGRAFAS PLANTA COMPLETA (DIBUJO A
MANO SIN
COLOREAR DE
LA
OBSERVACIN DEL CORTE)
Nombre cientfico:
Habitad: Aumento
Lugar de recoleccin:
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
PRCTICA N 2
MARCO TERICO:
Los tejidos vegetales encargados de la proteccin de la planta se caracterizan especialmente por carecer
de espacios intercelulares y conformar una capa uni o pluricelular en la parte externa del rgano vegetal,
se diferencian en su origen primario (Epidermis) o secundario (Peridermis). El tejido mecnico est
conformado por el colnquima, de clulas vivas y paredes primarias desigualmente engrosadas y el
esclernquima, conformado por clulas muertas y paredes secundarias lignificadas, uniformemente
engrosadas. El xilema es un tejido vascular conformado por clulas muertas y de paredes secundarias
lignificadas con una serie de engrosamientos
caractersticos. Los diferentes subproductos del metabolismo celular secundario que se
producen en las plantas generalmente se encuentran localizados en clulas y estructuras
secretoras en los distintos rganos vegetales, por ejemplo los laticferos y las cavidades
secretoras. Los diferentes rganos vegetales presentan una serie de tejidos vegetales que conforman
una estructura interna propia del desarrollo en las plantas, los cuales se describen como parte de la
caracterizacin botnica de las drogas vegetales.
TIPOS DE COLNQUIMA
A Colnquima angular
TEJIDO MERISTEMTICO B Colnquima laminar
CAMBIUM MODELO DE CRECIMIENTO SECUNDARIO C Colnquima anular
D Colnquima lagunar
HACES CONDUCTORES
A Bolsa olefera esquizgenaTEJIDO SECRETOR A Haz conductor colateral cerrado
B Haz conductor colateral abierto
B Bolsa olefera lisgena
C Canal secretor
D Tubo laticfero no articulado ramificado
E Tubo laticfero articulado no ramificado
TIPOS DE
TRICOMAS
A Pluricelular
B Cnico unicelular
C Glandular largo
D Glandular corto
E Glandular pluricelular
F Mixto
G Estrellado
H Urticante
MATERIALES:
Material Vegetal
- Pelargonium hortorum geranio (hoja)
- Cucurbita pepo zapallo (tallo)o C. maxima calabaza
- Citrus aurantium naranja (fruto) - Ficus elastica caucho (pecolo)
- Sambucus peruviana Saco (tallo)
- Tallo de Phoeniculum vulgare hinojo
- Hojas de Iris florentina lirio
PROCEDIMIENTO:
TEJIDO EPIDRMICO:
1. Realizar cortes superficiales o paradermal de la hoja de geranio y de lirio, hacer el montaje en una
gota de agua. Observar clulas de contorno sinuoso y la posicin desordenada de los estomas:
Adems diferenciar los pelos o Tricomas pluricelulares cnicos y los: glandulares en geranio y clulas
ordenadas en lirio, con estomas ordenados.
TEJIDO MECNICO
2. Realizar cortes transversales del tallo de zapallo o calabaza o hinojo o sauco, hacer el
montaje con una gota de safranina y observe: debajo de la epidermis, reconocer clulas de
forma polidrica, con engrosamiento en los ngulos y dbilmente teidas: Colnquima
angular. En las mismas muestras, por debajo del parnquima se presentan clulas con paredes
engrosadas y teidas intensamente, fibras de Esclernquima.
TEJIDO SECRETOR
4. Realizar cortes longitudinales del pecolo de la hoja de caucho, preparar el montaje con una gota de
agua y observar: a mayor aumento clulas alargadas conteniendo ltex: LATICFERO NO
ARTICULADO, reconocidos por su contenido de color gris. En corte sub-paradermal de cscara de
naranja se observar las cavidades lisgenas y en cortes transversales de hinojo reconocer los
canales secretores.
RESULTADOS:
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
OBSERVACIONES DE LA PRCTICA N 2
PRCTICA N 3
MARCO TERICO:
La morfologa estudia los rganos de la planta y las partes que los forman. Estos rganos son la raz, el
tallo y las hojas que llamamos rganos vegetativos y la flor y el fruto, que son los rganos reproductivos.
Las races se pueden clasificar de acuerdo a su origen, al medio en que viven por su forma, por su
duracin y por su consistencia.A diferencia de las races, el tallo presenta geotropismo negativo, tiene
nudos (lugares donde se originan las hojas) y entrenudos (regiones entre dos nudos consecutivos),
yemas (reas del tallo situadas justo por encima del punto de insercin de la hoja apical y axilares) y por
lo comn hojas bien desarrolladas.Sus funciones bsicas son de soporte, de conexin de hojas y yemas
entre s y con la raz y de conduccin de la savia.
Las funciones primordiales de las hojas son la fotosntesis (cloroplastos) y el intercambio gaseoso
(estomas), tambin asume las de proteccin, defensa, reserva y reproductora. Las hojas se clasifican por
el borde de la hoja, la forma del limbo, peciolo, vaina y nervadura.
La flor es un brote de crecimiento definido con hojas que producen rganos reproductores. De estas
hojas, las ms apicales o internas son esporfilos y las ms inferiores o externas son antfilos.Se llama
inflorescencia a una ramificacin terminada en flores. Cada una de las ramitas del eje primario o caquis,
que sostiene una flor, se llama pedicelo. Cuando solo existe una flor en el pice del tallo o en la axila de
una hoja, no hay inflorescencia y entonces se dice que la flor es solitaria, el tipo de inflorescencia tiene
importancia para la taxonoma botnica; es caracterstico de cada familia.
El fruto es el conjunto de las piezas florales que persisten despus de la fecundacin y acompaan a la
semilla generalmente se dice que es el ovario desarrollado y maduro ya que este se engruesa
acumulando materias nutritivas y se transforman en fruto y contiene la semilla.
La semilla es el medio principal para perpetuar de generacin en generacin la mayora de las plantas (ya
que algunas se regeneran vegetativamente) y gran parte de las especies leosas.
COMPETENCIAS: Reconocer y caracterizar los principales rganos de la planta (Raz, Tallo, Hojas,
Flor, Fruto y semilla)
MATERIALES:
Diferentes tipos de (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla)
Lupas
Hoja de afeitar
Reglas
Placas Petri
PROCEDIMIENTO:
Identificar segn las caractersticas morfolgicas los tipos de raz, tallo, hoja, flor, fruto y semilla.
SEMILLA
TALLO
RESULTADOS:
Hacer esquemas de sus observaciones en la Hoja de Observaciones y elaborar el informe de su prctica
mediante un Protocolo de anlisis botnico segn Formato PROTOCLO BOTNICO.
HOJAS
TIPOS DERAZ
ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA
RAZ
1. De 2 ejemplos de Races, Hojas, Tallos, Flores, Frutos y Semillas con usos medicinales mediante un
cuadro. INFLORESCENCIA
Nombre Comn Nombre Cientfico rgano de la planta Uso medicinal
Referencias Bibliogrficas
MARCO TERICO:
Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los pases en desarrollo. La
Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que ms del 80% de la poblacin mundial utiliza,
rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atencin primaria de salud y
que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios
activos (Akerele, 1993; Sheldon et al., 1997; Shrestha y Dhillion, 2003; Katewa et al., 2004). De acuerdo
a la OMS (1979) una planta medicinal es definida como cualquier especie vegetal que contiene
sustancias que pueden ser empleadas para propsitos teraputicos o cuyos principios activos pueden
servir de precursores para la sntesis de nuevos frmacos.
Estas plantas tambin tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre otras, son fuente
directa de agentes teraputicos, se emplean como materia prima para la fabricacin de medicamentos
semisintticos ms complejos, la estructura qumica de sus
principios activos puede servir de modelo para la elaboracin de drogas sintticas y tales
principios se pueden utilizar como marcadores taxonmicos en la bsqueda de nuevos
medicamentos (Akerele, 1993).
La investigacin sobre el uso de plantas medicinales forma parte de la etnobotnica, que ha sido definida
como el estudio de las interrelaciones entre los grupos humanos y las plantas (Ford, 1978; Martin, 2001;
Gmez-Veloz, 2002). Por su naturaleza interdisciplinaria abarca muchas reas, incluyendo: botnica,
qumica, medicina, farmacologa, toxicologa, nutricin, agronoma, ecologa, sociologa, antropologa,
lingstica, historia y arqueologa, entre otras; lo cual permite un amplio rango de enfoques y aplicaciones
(Alexiades, 1996a; Martin, 2001)
A pesar de todas estas innovaciones, Zent (1999) plantea que la filosofa de la etnobotnica no ha
cambiado mucho, pues en la mayora de las investigaciones sobre plantas medicinales se sigue
enfatizando la documentacin cientfica de las plantas y sus usos para beneficio casi exclusivo de
grandes transnacionales, con poco inters en la dinmica de los sistemas de conocimiento local y en la
compensacin a las comunidades nativas. Se requiere entonces de ms trabajo interdisciplinario, de una
mayor preocupacin por los aspectos ticos de la comercializacin de medicamentos desarrollados a
partir del conocimiento tradicional de ciertos grupos humanos (Prance, 1991) y por el retorno de los
resultados obtenidos, en ensayos biolgicos de plantas tropicales, a los pases y grupos humanos que
han colaborado en la coleccin de las plantas evaluadas (Ritcher y Carlson, 1998).
1. Realizar el Anlisis Macroscpico, organolptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes rganos
de la especie.
Tabla Nro. 1. Anlisis macroscpico, caractersticas organolpticas de Raz, Tallo, Hoja, Flor,
Fruto y Semilla
Tabla Nro. 2. Anlisis microscpico, Citologa e Histologa de Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y
Semilla
1. Desarrolle un Flujograma de las etapas para realizar un estudio Botnico en especies vegetales con
uso medicinal.
Referencias Bibliogrficas
PRCTICA N 5
MARCO TERICO:
Las plantas a nivel mundial ocupan un lugar importante en el comercio de medicamentos y en los
preparados fitoteraputicos y por ende es necesario garantizar su control de calidad con aplicaciones de
tcnicas modernas y el uso de patrones adecuados que den seguridad y eficacia al utilizarlas. Las
Farmacopeas describen mtodos de ensayos generales para evaluar o valorar las drogas oficiales.
Materia prima
( Frmula magistral
)
CONTROL
Seguridad y eficacia
Identidad Calidad
Ensayos Botnicos:
Control de identidad:
Determinacin de sus caractersticas macroscpicas y microscpicas. Determinacin
cualitativa de sus principios activos (histoqumico).
Control de calidad:
Determinacin cualitativa de sus principios activos.
Cuantificacin de sus principios activos.
Otras determinaciones cuantitativas
Determinacin de su actividad farmacolgica.
COMPETENCIAS:
-Realizar el anlisis botnico macroscpico de la especie vegetal a investigar, reconociendo
morfolgicamente los diferentes rganos de la especie.
-Reconocer y caracterizar los principales rganos de la planta a nivel microscpico mediante cortes
histolgicos (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y semilla) con ayuda de la histoqumica.
-Realizar el anlisis organolptico de los diferentes rganos de la especie vegetal.
-Preparar el extracto acuoso y etanlico de la especie a investigar para hacer los anlisis cualitativos
correspondientes.
MATERIALES:
PROCEDIMIENTO:
1. Realizar el Anlisis macroscpico, organolptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes rganos
de la especie.
Tabla Nro. 1. Anlisis macroscpico, caractersticas organolpticas de Raz, Tallo, Hoja, Flor,
Fruto y Semilla
Tabla Nro. 2. Anlisis microscpico, Citologa e Histologa de Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y
Semilla
C.T.
Flor C.P. Fresco, Safranina y Lugol
Preparacin del extracto acuoso y etanlico de la especie a investigar para hacer los anlisis cualitativos
correspondientes:
TAMIZAJE FITOQUMICO
EXTRACTO ACUOSO:
CARBOHIDRATOS:
- Reaccin de Molisch
Gotas de muestra problema + gotas de S. R. de Molisch A (alfa naftol 2% en alcohol), agitar + H2SO4
conc. por las paredes del tuboanillo color violeta.(+) para carbohidratos (azcares).
- Reaccin de Antrona
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Antrona (antrona en H2SO4 conc. al 2%) anillo verde.
(+) para carbohidratos (azcares).
-Reaccin de Fehling
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Fehling A + gotas S. R. Felhing B+ calor por 5-7 minutos en
bao marapp color rojo ladrillo.(+) para carbohidratos (azcares reductores).
-Reaccin de Benedict
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Benedict + calor por 5-7 minutos en bao marapp
color rojo ladrillo.(+) para carbohidratos (azcares reductores).
-Reaccin de Brown
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Hidrxido de sodio al 10% + calor hasta obtener coloracin
amarilla, luego agregar 1 gota de + cido pcrico 2%, se obtendr una coloracin parda por formacin de
cido picrmico.(+) para carbohidratos (azcares reductores).
Compuestos fenlicos:
Gotas de muestra problema + gotas de FeCl3 (Sol. al 1%
en agua o alcohol) color verde o azul. (+) presencia de compuestos fenlicos, taninos.
TANINOS:
-Reaccin de Gelatina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. gelatinapp blanco(+) Taninos
AMINOCIDOS Y PROTEINAS
-Reaccin de Ninhidrina
Gotas de muestra problema + S.R. de Ninhidrina (Ninhidrina al 1% en etanol) + calor BM 10 minutos
color violceo. (+) Para aminocidos libres y amino grupos (calentar en algunos casos).
FLAVONOIDES
-Reaccin de Shinoda
Gotas de muestra problema + S.R. Shinoda (Mg metlico + gotas de HClconc). color rojo. (+)
presencia de flavonoides, chalconas, auronas; catequina e isoflavona no dan color.
QUINONAS
-Reaccin de Borntrager
Gotas de muestra problema + S.R. Borntrager (gotas de hidrxido de sodio 5%)color rojo. (+)
quinonas
ALCALOIDES
-Reaccin de Dragendorff
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Dragendorff pp naranja o rojo naranja (+) alcaloides
(medio ligeramente cido).
ANTOCIANINAS
-Reaccin de Rosenheim Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Rosenheim (S.R. Yodo
Yodurada)rojo oscuro.(+) antocianinas y flavonoides catquicos.
GRUPO CARBONILO
-Reaccin de Hidroxilamina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. hidroxilaminapp coloreado(+) presencia de grupo
carbonilo.
SAPONINAS
-Reaccin para Saponinas
1 g de muestra problema + 10 mL de agua destilada.
Agitar fuertemente por 1 minutoproduccin de espuma por 15 minutos de 0.5 a 1 cm(+)
presencia de saponinas.
GLICSIDOS
.-Reaccin de Vainilln sulfrico
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Vainilln sulfricocolor rojizo violceo en anillo de
interfase. (+) Glicsidos.
**Los resultados de los tamizajes fitoqumicosnos dan una referencia de la composicin qumica de un
planta que se est investigando (no es determinante), lo cual nos ayudar a profundizar en la
investigacin al realizar el fraccionamiento y el aislamiento de los constituyentes qumicos.
1. Que anlisis segn las Farmacopeas se realizan para el Control de Calidad de Productos
Fitoterapeticos.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Libros:
1. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza,
Espaa 2001.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Reynaud, Jol. La flora del farmacutico. Espaa, 2002.
4. Lock de Ugaz O. Colorantes naturales. 1ra Edicin. Lima, 1997.
5. USP, Pharmacopeia, National Formulary (USP NF).XVII, XIX, XX, XXI, XXII, XXIII, XXIX, XXX.
Revistas
Journal of Natural Products USA
Lloydia Asoc. Americana de Farmacognosia de USA.
Pharmacognosy Titles Londres Inglaterra
Phytochemistry Londres - Inglaterra
Biblioteca virtual EBSCO HOST ResearchDatabases(http://search.ebscohost.com/)
Journal of Analytical Chemistry
ChemicalBiology&DrugDesig
RESULTADOS DE LA PRCTICA Nro. 5
MARCO TERICO:
La Extraccin obtiene porciones medicinalmente activas a partir de los tejidos de las plantas y animales,
de los componentes inertes de los mismos, mediante el uso de solventes selectivos, utilizando
procedimientos establecidos y correctamente estandarizados.
Para poder realizar el aislamiento de un principio natural en condiciones ptimas, se debe tener en
cuenta una serie de dificultades, inherentes a la propia planta o materia prima como al tipo de compuesto
a extraer.
Por esta razn la planta se somete a una serie de operaciones previas que facilitan y mejoran el
rendimiento de la extraccin.
Existen una serie de mtodos que han sido desarrollados y aplicados para una deteccin de los
diferentes constituyentes qumicos en las plantas, basadas en la extraccin de stos con solventes
apropiados y en la aplicacin de pruebas de coloracin o precipitacin llamado Tamizaje Fitoqumico.
COMPETENCIAS:
- Realizar el Tamizaje Fitoqumico en el extracto etanlico de la especie a investigar.
- Realizar el anlisis cualitativo mediante mtodo de separacin: Cromatografa en Capa Fina.
MATERIALES:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico)
Reactivos para el anlisis cualitativo (Cromatografa en Capa Fina)
PROCEDIMIENTO:
TAMIZAJE FITOQUMICO
NAFTAQUINONAS,
ANTRAQUINONAS Borntrager
X gotas de MP + III gotas de Borntrager Coloracinroja
(NaOH 5%)
Y ANTRANONAS
X gotas de MP + llevar a sequedad en B.M + X
TRITERPENOIDES gotas de cloroformo+ III gotas de anhdrido Esteroides: verde-azul
Lieberman-Burchard
Y ESTEROIDES actico+ H2SO4 cc en zona (por las paredes de Triterpenoides: rojo-naranja
tubo) sin agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada + agitar Formacin de 0.5 a 1 cm de
SAPONINAS Generacin de espuma
fuertemente por 1 min. espuma estable por 15 min.
X gotas de MP + V gotas de cido pcrico 1 %
GLICSIDOS Baljet Coloracin anaranjada
+ V gotas de NaOH al 5 %.
X gotas de MP + V gotas de denitroprusiato de
LACTONAS Legal Coloracin rojo oscuro
sodio 0.5% + V gotas de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido con
NH4OH cc
CUMARINAS NH4OH cc NaOH 10% en boca de tubo + Fluorescencia celeste
NaOH 10%
calentar por 5 min a
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa 1999.
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
3. Gattuso, Gattuso. Manual de Procedimientos para el Anlisis de Drogas en Polvo. 1ra ed. Argentina:
Editorial Universidad Nacional de Rosario Urquiza.1999.
4. Bruneton, J. Farmacognosia, Fitoqumica, Plantas medicinales 2 Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa.
2001.
5. Kuklinski, C. Farmacognosia, Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural.
Ed. Omega, Barcelona, Espaa 2003.
6. Sharapin N. Fundamentos de Tecnologa de Productos FitoteraputicosSanta fe Bogota Colombia
2000.
7. Miranda M. Mtodos de Anlisis de Drogas y Extractos, Habana Cuba 2002.
8. Lock de Ugaz. Investigacin Fitoqumica, Mtodos en el estudio de productos naturales [en lnea].
Per: Editorial Pontificia Universidad Catlica del Per; 1994. [Fecha de acceso 27 de junio de 2013].
URL disponible en:
http://books.google.com.pe/books?
id=N36g2QOccXkC&pg=PA287&dq=prueba+con+dragendorff&hl=
es&sa=X&ei=d7bNUazRHsjX4AS9oYBQ&ved=0CEAQ6AEwBA#v=onepage&q=prueba%20con%20d
ragendorff&f=false.
Prueba de solubilidad
Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Tamizaje
Diclorometano
fitoqumico
Cloroformo
Eter de petrleo
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (+++) Soluble (+++) Muy
soluble Huella
Cromatogrfica
Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de solvente (o
sembrar el filtrado del extracto).
Esquema de resultado
Calculo de Rf
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 7
MARCO TERICO:
Glcidos o azcares, son compuestos orgnicos constituidos por carbono, hidrgeno y oxgeno.
Constituyen la clase de compuestos que se encuentran en las plantas en mayor cantidad.Son
aldehdos o cetonas polihidroxilados; bajo peso molecular, tienen muchas propiedades en comn: son
alifticos, pticamente activos, de sabor dulce, muy solubles en agua.Difciles de cristalizar an
cuando estn puros. Son importantes en el metabolismo vegetal, son fuente de energa en forma de
almidones, sirven para el transporte de energa en forma de sacarosa, intervienen en la formacin de
paredes celulares (celulosa) y destacan en el aspecto ecolgico por medio de la relacin planta
animal.
Se pueden detectar en cantidades muy pequeas, por medio de reactivos cromgenos.Detectados
por cromatografa CCF, usando reactivos que contienen fenoles o aminas, como el resorcinol con
cido sulfrico o el ftalato de anilina.La CCF y CP, son sustituidos de preferencia por otras tcnicas de
separacin, la CC de baja presin, HPLC, cromatografa de gases o electroforesis.
Los azcares no reductores no funcionan con estos reactivos y generalmente se detectan por su
rpida oxidacin con per yodato o tetra acetato de plomo.
MONOSAC RIDOS
osas simples
OLIGOSACRIDOS
menos de 10 osas
HOLSIDOS
HOMOG NEOS
varias osas osas iguales
POLISACRIDOS
m s de 10 osas
HETEROG NEOS
osas diferentes
HETER SIDOS
osa + aglic
n
Clasificacin de Carbohidratos
MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico:Molish, Antrona, Fehling, Benedict,
Tollens, Selivanoff, NaOH, Fenilhidrazina, Yodo 2.5%, H2SO4 cc, KOH 5%, Etanol absoluto,
Ba(OH)2 10%, HCl diluido, Acetato de plomo neutro y bsico, lugol)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo, gradillas, embudo, cocinilla, beackers grande y
chicos, baguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y balanza)
Miel de abeja, Azcar, Papa, Algodn, Manzana, Linaza
PROCEDIMIENTO:
2.1 Especie a Investigar: Filtrar el extracto hidroalcohlico al 10 o 20% P/V macerado de 7 das de
hojas, tallos o semillas de la especie a investigar. Si es muy concentrado diluir 1:10 ml con el
solvente donde es soluble el extracto.
Papa (ALMIDON) Rallar el tubrculo en un beacker conteniendo agua, luego exprimir a travs de la
gasa, recogiendo el lquido en un beacker, dejar sedimentar y lavar por decantacin
varias veces. Utilizar la solucin de almidn de papa para las reacciones.
Manzana (PECTINAS) Pesar 2 g de manzana trozada o rallada, secar en estufa x 15 min a 150 C, luego lavar
la muestra con 10 mL alcohol 3 veces, Al residuo agregar 10 mL HCl al 10% x 15
minutos. Filtrar y trabajar con la solucin.
Linaza (MUCLAGOS) Pesar 10 gramos de semillas de linaza, agregar 50 mL de agua destilada y someter a
ebullicin x 15 minutos, decantar y trabajar con los muclagos de linaza.
TAMIZAJE FITOQUMICO
REACCIN DE AZUCARES
REDUCTORES
Fehling X gotas de MP + X gotas de solucin de Precipitado rojo ladrillo
(A: CuSO4; B: tartrato mixto de potasio Fehling+ calentar en B.M
y sodio (KNaC4H4O64H2O)
Benedict
Precipitado amarillo-
(Citrato de Na + CuSO4 + X gotas de MP + X gotas de Benedict+
verdoso
NaCO3) calentar en B.M
REACCIONES DE
ALDOSAS Y CETOSAS Precipitado rojo (CETOSA)
X gotas de MP + III gotas de Selivanoff
Selivanoff
+ calentar en B.M
(Resorcina + HCl)
REACCIONES DE
SACAROSA X gotas de MP + X gotas de solucin
Herail Herail Color violeta -azulada
(1 ml Nitrato cobaltoso + 1 ml
NaOH 50%)
X gotas de MP + X gotas de Reactivo+
Pozzi-scott
H2SO4 cc en zona Formacin anillo azul
(Molibdato de Amonio 15%)
X gotas de MP + X gotas NaOH 10% +
Pelouze
calentar Color amarillo
(NaOH 10%)
POLISACRIDOS
HOMOGNEOS X gotas de MP (ALMIDON DE PAPA)
Solucin de yodo 2.5% + V gotas de Yodo 2.5% Complejo azul desaparece por
calor y reaparece por
enfriamiento.
Fibras de ALGODN + V gotas lugol,
Yodo en cido sulfrico Observar color azul
secar + gotas de H2SO4 cc
Fibras de ALGODN + Vgotas de
Solubilidad en H2SO4 Soluble
H2SO4 cc
Fibras de ALGODN + V gotas de Insoluble
Solubilidad en KOH 5%
KOH 5%
POLISACRIDOS
HETEROGNEOS
Precipitado amarillo gelatinoso
NaOH 3N X gotas de MP (PECTINAS) + X gotas
NaOH 3N
X gotas de MP (MUCLAGOS) + V
Acetato de Plomo bsico gotas de reactivo Precipitado gelatinoso blanco
X gotas de MP (MUCLAGOS) + V
Presencia de almidones (azul) y
Lugol gotas de reactivo
dextrinas (rojo)
2. Mediante una Tabla mencione 8 especies medicinales endmicas o nativas del Per, que
contengan Carbohidratos
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 8
MARCO TERICO:
Salicina
Droga : hojas Arbutina
Droga : hoja
s
Compuestos antraquinnicos
Poseen una molcula de azcar unida a un derivado del antraceno. El constituyente qumico
representativo es la antraquinona o 9,10-dioxoantraceno. Se encuentra en especies como el ruibarbo,
sen, cscara sagrada, etc. Las antraquinonasse utilizan para la fabricacin de colorantes, plaguicidas y
aditivos para procesos qumicos de la industria del papel y pulpa. Los extractos de plantas que contienen
antraquinonas, son utilizados para cosmticos, alimentos y productos farmacuticos debido a sus
propiedades teraputicas y farmacolgicas.
Drogas con Compuestos antraquinnicos
Ruibarbo Sen Cscara Sagrada
(Rheumpalmatum) (Cassia angustifolia) (Rhamnuspurshiana)
Planta herbcea perenne con Arbusto rbol de 6-12 m, con ramas
hojas basales, palmeado- redondas y pubescentes.
partidas
Sensido A,B,C,D y
. Alonas A y B,
aloeemodina
Emodina Droga : hojas Droga: corteza
Droga: raiz
Sbila
( Aloe vera
)
Planta de forma arrosetada, hojas grandes, carnosas, anchas, ssiles, con una fuerte espina en el
y espinas ms pequeas a lo largo de los mrgenes Las hojas de color verde plido con manchas
blancas en la superficie, estriadas; a veces el verde plido cambia a rojizo, exhalan olor caracters
En el parnquima se forma un jugo viscoso y espeso de sabor amargo, denominado acbar o aloe,
principio activ o es la alona que posee propiedades teraputicas
Alonas
Aloe- emodina
Droga: hojas
MATERIALES y REACTIVOS:
Extracto etanlico de la Especie vegetal a investigar.
Reactivos para el anlisis cualitativo (Tamizaje Fitoqumico)
Otros materiales necesarios (Tubos de ensayo,
gradillas, embudo, morteros, cocinilla, beackers grande y chicos, Baguetas, goteros,
pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mechero y balanza)
PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo
Fenoles simples
Sauce (Salix alba)
OBTENCIN DE SALICINA
Extraccin: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 20 mL de agua y someter a decoccin por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIN
Reaccin Procedimiento Resultado
cido sulfrico 5 mg de salicina + V gotas de H2SO4 Coloracin roja
FeCl3 5 mLdeextracto + V gotas de FeCl3 Coloracin azul-verde
Rx. Fehling 5 mL de extracto + V gotas de Fehling A y B+ Precipitado rojo ladrillo
calor
OBTENCIN DE ARBUTINA
Extraccin: Pesar 1 g de corteza pulverizada, agregar 10 mL de agua y someter a decoccin por 30
min. Filtrar y concentrar.
IDENTIFICACIN
Reaccin Procedimiento Resultado
Microsublimacin Colocar en cpsula, 5 mg de droga en
polvo. Cubrir con luna de reloj y calentar
hasta desprendimiento gaseoso. Al residuo
enfriado agregar:
II gotas de NH4OH Coloracin pardo rojiza
Compuestos antraquinnicos
Identificacin
cscara
Procedimiento ruibarbo sen sbila
sagrada
Microsublimacin Coloracin Coloracin Coloracin -
Colocar en cpsula, 5 mg de droga roja intensa roja pardo naranja
en polvo. Cubrir con luna de reloj y
calentar hasta desprendimiento
gaseoso. Al residuo enfriado agregar
II gotas de NH4OH.
R. Borntrager Fase polar: Coloracin Fase polar Fase polar:
1g MP+ 10 mLagua+III gotas de Rojo rosada rojo naranja rojo cereza
NaOH. Filtrar + X gotas de HClconc. cereza rojiza Fase
Agregar 2 mL de cloroformo y Fase apolar:
separar la fase cloroformo y agregar apolar: amarillo
X gotas de NH4OH cc. Agitar amarillo
R. Klunge - - - Coloracin
0.5 g MP+ 5 mL de agua + BM a 40 rojo
C x 15 min.+ mg de talco. Filtrar.Al grosella
filtrado aadir II gotas de CuSO 4 + II
gotas de NaCl + 5 mL etanol.
Iridoides
Muestras Problemas:
*Filtrado del extracto de la especie a investigar 10-20% P/V
*Macerado alcohlico de PlantagomajorL. (llantn).- pesar 10 g de hojas de llantn. Colocar en un matraz y
agregar 50 mL de alcohol de 70. Macerar 48 h.
*Decoccin por 10 minutos (Extracto acuoso) de la droga vegetal con Iridoides.
CUESTIONARIO
2. Mediante una Tabla mencione 10 especies nativas del Per, que presenten compuestos fenlicos
y antraquinnicos.
PROTOCOLO N 8
FECHA.
RESULTADOS
PRCTICA N 9
MARCO TERICO:
FLAVONOIDES
Extraccin de flavonoides
Los flavonoides (en particular hetersidos) pueden ser degradados por la accin de enzimas, siendo
necesario utilizar muestras secas, liofilizadas o congeladas. Para la extraccin, el disolvente se elige en
funcin del tipo de flavonoide a extraer. La polaridad es un factor muy importante. Flavonoides de baja
polaridad (por ejemplo, las isoflavonas, flavanonas, flavonas metiladas, y flavonoles) se extraen con
cloroformo, diclorometano, ter dietlico, o acetato de etilo, mientras que los hetersidos flavonoides y
agliconas ms polares se extraen con alcoholes o mezclas de alcohol-agua. En el caso de los
hetersidos la presencia de la porcin de azcar incrementa la solubilidad en agua y alcohol, por lo que
soluciones hidroalcohlicas son las ms adecuadas.
La mayor parte de las extracciones de especies que contiene flavonoides se realizan por extraccin
directa con solventes y tambin pueden ser extrados en Soxhlet, primero con hexano, para eliminar
lpidos seguido de acetato de etilo o etanol para extraer compuestos fenlicos, sin embargo este mtodo
no es adecuado para compuestos sensibles al calor.
TANINOS
Los taninos son compuestos polifenlicos de peso
molecular alto que se encuentran enlas plantas superiores, incluyendo muchas plantas
utilizadas como alimentos, el peso molecular oscila entre 500 y 3 000, de estructura amorfa, sabor
astringente y dbilmente cidos. La mayora de ellos solubles en agua; pueden ser amarillos, rojos o
marrones, y se localizan en el citoplasma o en las vacuolas de las clulas; conformados principalmente
por restos de cido glico unidos a glucosa a travs de enlaces glucosdicos.
Los taninos ingeridos en la dieta pueden afectar la asimilacin de protenas y hierro, al formar complejos
insolubles. En las especies vegetales los taninos actan como defensas qumicas que reducen el dao
por insectos y mamferos. En medicina, especialmente en Asia (Japn y China), los extractos de especies
vegetales que contienen taninos se utilizan como astringentes, diurticos, antiinflamatorios y antispticos.
Por su capacidad de precipitar metales pesados y alcaloides (excepto morfina), los taninos se pueden
utilizar como antdotos de estas sustancias. Los taninos se utilizan en la industria de colorantes como
colorantes catinicos (tanino), y en la produccin de tintas (galato de hierro). En la industria alimentaria
los taninos se utilizan para clarificar el vino, la cerveza y jugos de frutas.
Actualmente, los taninos han atrado el inters cientfico, debido a la mayor incidencia de enfermedades
como el VIH y varios tipos de cncer. La bsqueda de nuevos compuestos prometedores para el
desarrollo de nuevos productos farmacuticos es cada vez ms importante, especialmente por la accin
biolgica que se les atribuye.
COMPETENCIAS
Conoce la importancia de flavonoides y Taninos en Farmacognosia
Identifica flavonoides y Taninos cualitativamente
Cuantificar taninos en muestras de tara (Caesalpiniaspinosa)
METODOLOGA
Cromatografa en capa fina
Mtodo volumtrico : Yodometra
Reacciones de precipitacin
Reacciones de coloracin
MATERIAL Y EQUIPOS
Material de vidrio
Reactivos de coloracin
Material de vidrio
Estufa
Mortero piln
PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo de FLAVONOIDES
Hetersidos flavonoides DROGA REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN
POSITIVA
Hesperidsido Naranja H2SO4 cc mg de hesperidina+ gotas Coloracin
Citrus de H2SO4 cc naranja
sinensis
HCl cc mg de hesperidina+ gotas Precipitado
Fam. de HCl cc blanco
Rutaceae
HNO3 mg de hesperidina+ gotas Coloracin
de HNO3 pardo rojizo
NaOH 30% mg de hesperidina+ gotas
de NaOH 30%
Coloracin
amarillo naranja
Pesar 5 g de droga vegetal, agregar 50 mL de agua destilada y llevar a decoccin x 10 minutos, filtrar.
Con el extracto de la droga vegetal que presenta Flavonoides segn bibliografa realizar el Anlisis
Cualitativo de Flavonoides y con el extracto de Tara realizar el anlisis cualitativo de Taninos.
a) Reaccin de diferenciacin
Reactivo Procedimiento Reaccin positiva
FeCl3 10% 0.5 ml MP + gotas T. hidrolizables: azul
deFeCl3 10%
T. condensados: verde
b) Reacciones de identificacin
REACTIVO PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
FeCl3 0.5 mL MP+ gotas de FeCl3 coloracin azul/verde
K2Cr2O7 5% 0.5 mLMP+ gotas de K2Cr2O7 5% pp. pardo
Pb(CH3COO)2 0.5 mL MP+ gotas de Pb(CH3COO)2 pp. blanco lechoso
Agua de cal 0.5 mL MP+ gotas de agua de cal pp. amarillo plido
KCN 5% 0.5 mL MP+ gotas de KCN 5% pp. amarillo
Hipoclorito de sodio 0.5 mLMP+ gotas de hipoclorito de sodio coloracin naranja
K4[Fe(CN)6] + NH4OH 0.5 mLMP+ gotas de K4[Fe(CN)6] + gotas de NH4OH coloracin rojiza
Gelatina 0.5 mL MP+ gotas de gelatina pp. blanco
KMnO4 0.5 mLMP+ gotas de KMnO4 pp. pardo
Alcaloide 0.5 mL MP+ gotas de alcaloide pp. lechoso blanco
III. Anlisis cuantitativo
Yodo 2.5%
10 mL solucin nuestra
problema+ 2mLed
NaHCO3 + c.s.p para 20 mL con
agua destilada
Nota: El punto final de la valoracin se determina con tiras de papel almidonado (indicador externo),
vira a violeta intenso en el punto de equivalencia.
a) Clculos
PATRN =GASTO: A
BLANCO =GASTO: B
MUESTRA =GASTO: C
A- B 0.1 g
C-B X
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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641649. Disponible en: http://siba.unipv.it/farmacia/art/Marrubini/Nat%20Prod%20Rep%202001.pdf
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Food Sci Nutr. 1998 Aug;38(6):421-64.
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http://www.journalofanimalscience.org/content/73/5/1516.full.pdf [citado 22 de marzo 2013].
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(Gallotannins and Ellagitannins) after Reaction with Potassium Iodate. J. Agric. FoodChem. 2002,
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8. Cabello LI. Monografa para el cultivo de la tara Caesalpiniaspinosa (Molina)
Kuntze.Perbiodiverso. Lima, Per.2009
9. U.S. Department of Agriculture. USDA Database for the Flavonoid Content of Selected
Foods.March 2003. Disponible en:http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/flav.pdf [citado 22
de marzo 2013]
PROTOCOLO N 09
LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 10
EXTRACCIN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES.
INTRODUCCIN
Aceites Esenciales
Los aceites esenciales son compuestos formados por sustancias orgnicas voltiles, como alcoholes,
cetonas, teres y aldehdos, se producen y almacenan en los canales secretores de las plantas y
normalmente son lquidos a temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extrados por destilacin en
corriente de vapor de agua.
Fuentes:Conferas (pino, abeto), Mirtceas (eucalipto),
Rutceas (Citrus spp), Asteraceae (manzanilla), Labiadas (menta, lavanda, tomillo, espliego,
romero) y umbelferas (ans, hinojo).Pueden estar en diferentes rganos: raz, rizoma (jengibre), leo
(alcanfor), hoja (eucalipto), fruto (ans) y sumidades floridas (clavo de olor).
Caractersticas fsicas
Los aceites esenciales son voltiles,lquidos a temperatura ambiente (a excepcin del alcanfor y el
mentol), recin destilados son incoloros o ligeramente amarillos, de densidad inferior a la del agua. Son
solubles en alcohol y disolventes orgnicos (ter, cloroformo), poco solubles en agua pero arrastrables
por el vapor de agua. Poseen poder rotatorio e ndice de refraccin caracterstico.
Caractersticas qumicas
Los aceites esenciales contienen compuestos:
-No terpenoides: sustancias alifticas de cadena corta, sustancias aromticas, sustancias con azufre y
sustancias nitrogenadas.
-Terpenoides: derivan delisopreno (C5) unidas en cadena, principalmente monoterpenos (C10),
sesquiterpenos (C15) y los diterpenos (C20) que pueden ser alifticos, cclicos o aromticos. 1,2
COMPETENCIAS
Conoce la extraccin de aceites esenciales
Evala las caractersticas fsico-qumicas de los aceites esenciales
METODOLOGA
Destilacin por arrastre de vapor
Reacciones de coloracin
MATERIAL Y EQUIPOS
Equipo de destilacin.
Picnmetro
Material de vidrio: matraz, beacker, tubos de ensayo, baguetas.
Reactivos: cloroformo, acido actico, cido sulfrico.
Lmpara ultravioleta
Cubas cromatogrficas
PARTE EXPERIMENTAL
-Expresin en fro: presenta la ventaja de no someter los aceites esenciales a temperaturas elevadas y se
toma directamente la muestra problema.
-Destilacin: colocar la muestra problema sobre la criba ubicada a cierta distancia del fondo del
alambique, el calentamiento se produce con vapor saturado proveniente de una fuente de calor que
componen el equipo, fluye y a presin baja, penetrando a travs del material vegetal, los componentes se
volatilizan, y condensan en un refrigerante, se acumulan y
se separan el agua del aceite por diferencia de densidad.
I. ANLISIS CUALITATIVO
Anlisis organolptico:
Color
Olor
Sabor
Textura
Peso especfico
a) Pesar el picnmetro vaco y seco(P)
b) Llenar el picnmetro con la MP a 20C por 15 min., ajustar el volumen si es necesario y pesar
cuidadosamente (P1)
c) Repetir la operacin con agua destilada a 20 C (P2)
P.E 20 = (P1-P)/(P2-P)
ndice de refraccin
a) Calibrar el refractmetro con I gota de agua destilada (inyectable) a 1.333
b) Secar el equipo con papel tissu
c) Colocar I gota de muestra problema sobre el prisma de medicin y realice la lectura.
Anlisis cromatogrfico
Fase estacionaria: Cromatofolios de silica gel 60 F254 de 6.5 cm por 2.5 cm
Fase mvil: Tolueno: acetato de etilo (9 :1)
Luz UV
Revelador: Vainillina Ac. Sulfrico
REACCIONES DE IDENTIFICACIN DE TERPENOS
REACCIN PROCEDIMIENTO RESULTADO
Lieberman -Buchard X gotas de MP + llevar a Esteroides: verde-
sequedad en B.M + X azul
gotas de cloroformo+ III Triterpenoides:
gotas de anhdrido rojonaranja
actico+ H2SO4 cc en
zona (por las paredes de
tubo) sin agitar.
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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2. Kuklinski, C., Farmacognosia., Ed. Omega SA, Barcelona, Espaa (2000)
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actividades antioxidante, antibacteriana y antifngica.Ciencia e Investigacin 2010; 13(2): 81-86.
11. UNIDO, FAO.Herbs, spices and essential oils. Austria, 2005.Disponible en
http://www.unido.org/fileadmin/user_media/Publications/Pub_free/Herbs_spices_and_essential_oils.pdf[cita
do 23 de marzo de 2013]
PROTOCOLO N 10
HORARIO.. FECHA.
MESA DE TRABAJO ..
I. ANLISIS CUALITATIVOACEITES ESENCIALES
Ensayo Resultado
Anlisis organolptico Olor
Color
Sabor
Textura
Peso especifico
ndice de refraccin
REACCIONES DE IDENTIFICACIN
REACCIN RESULTADO
Lieberman -Buchard
LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
Descripcin Rf
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 11
Los alcaloides son sustancias orgnicas nitrogenadas con carcter bsico y mayoritariamente de origen
vegetal.Son compuestos orgnicos. Se forman generalmente a partir de aminocidos. De origen vegetal.
Sustancias nitrogenadas. Contienen nitrgeno heterocclico. Tienen estructura compleja. Son txicos.
Con actividad fisiolgicas incluso a dosis muy bajas. Los
alcaloides son un grupo muy heterogneo de compuestos con estructuras muy variadas y
generalmente complejas, contienen C, H, N.
La mayora de los alcaloides tienen reacciones que se aprovechan para su deteccin. Hay reactivos
generales que detectan alcaloides en general y hay otros que detentan un grupo especfico.Estas
reacciones se pueden clasificar en reacciones de precipitacin, cristalizacin y de color.
CLASIFICACIN DE ALACALOIDES
Alcaloides derivados de ornitina
Alcaloides derivados de lisina
Alcaloides derivados del triptfano
Alcaloides derivados de fenilalanina y tirosina
Alcaloides de ncleo purnico o bases xnticas
COMPETENCIAS
Extrae los alcaloides a partir de un polvo seco pulverizado por medio cido y alcalino.
Identifica cuali-cuantitativamente los alcaloides. Reconoce el origen biolgico de los
alcaloides.
MATERIALES
Baln de 250 mL
Pera de separacin de 500 mL
Fiola de 500 mL
Tubos de ensayo de 10 mL
Pipetas de 1 mL, 5 mL
Reactivos
Agua destilada Acetona Etanol Etilacetona
Butanol Alcohol amlico Metanol Cloroformo ter
etlico ter de petrleo Bencenon-Hexano
PROCEDIMIENTO
1. Sensorial
Se verifica el aspecto, color y olor del polvo fino de acuerdo a las partes de la planta.
2. Fisicoqumico
2.1. Prueba de solubilidad
Se pesan 10 mg del extracto seco y se introduce en un tubo al cual se le adiciona 1 mL de solvente
en orden de polaridad decreciente ( aguadestilada,metanol,etanol,n-propanol,acetona,acetato de
etilo,cloroformo,tolueno,ter)
La finalidad del ensayo de solubilidad es determinar el comportamiento del extracto en soluciones de
diferente polaridad, permitiendo encontrar el sistema apropiado para el anlisis cromatogrfico.
3. Extraccin y Aislamiento
Muestra en estudio
Drogas vegetales que contienen alta cantidad de alcaloides
Proceso de Extraccin
Fundamento
La extraccin se realiza previamente en un medio cido formando sales de clorhidrato, y
posteriormente se alcaliniza con la finalidad de convertir los alcaloides en bases libres y poder
extraerlos con un solvente no polar.
Mtodo alcalino: la droga se humedece con agua y se mezcla con cal y amoniaco. Los
alcaloides se extraen con solventes orgnicos (ter de petrleo, cloroformo, benceno). La fase
orgnica se separa y evapora. El residuo de la droga tambin se puede agitar con agua
acidulada, se aade solvente orgnico, luego dejar reposar para su separacin en capas. Las
sales de alcaloides estn en la fase acuosa y en la fase orgnica las impurezas.
Mtodo cido, la droga se extrae con agua o alcohol, en medio cido. Se agrega un solvente
orgnico, otros productos indeseables se eliminan en la agitacin con cloroformo u otros
solventes orgnicos. Luego los alcaloides libres son precipitados por adicin en exceso de
bicarbonato de sdico o amoniaco, separndose por filtracin o extraccin con disolventes
orgnicos.
Procedimiento:
Pesar 5 g de la droga vegetal en un matraz y aadir 50 mL de HCl 10%, someter a BM por 30
agitar, enfriar y filtrar. Transvasar a pera de decantacin y alcalinizar con NH 4OH, extraer con
cloroformo 3 veces y separar las fases. Concentrar la fase clorofrmica a casi sequedad aadir
HCl 10% y reconocer con reacciones generales y especficas.
I. REACCIONES GENERALES
Realizar las reacciones generales y particulares
BASES XANTICAS
REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
cido Solucin saturada de cafena + V gotas de Formacin de precipitado, soluble
tnico cido tnico 5% en exceso de reactivo
Solucin saturada de cafena + V gotas de Precipitado caf rojizo que en
Yodo reactivo de yodo (no precipita), se aade III exceso de NaOH desaparece.
gotas de HCl 10%
mg de muestra + HNO3 fumante. Calentar a Cambio de amarillo a violeta y al
sequedad en bao mara y observar la agregar NaOH la coloracin violeta
Murexida formacin de un residuo amarillo. Someter el desaparece.
residuo a vapores de amoniaco.
mg de muestra + mg de KClO3 (clorato de Formacin de residuo amarillo.
potasio) + agregar HClconc, calentar hasta Someter el residuo a vapores de
Weidel
sequedad en bao mara amoniaco y observar el cambio de
amarillo a violeta.
mg de muestra + gotas de NaOH 10% + gotas Formacin de precipitado.
Gerard de amonaco conc. + gotas de AgNO3 10%
REACCIN DE DIFERENCIACIN
RESIDUO DE LA REACCIN DE Cafena: azul violeta
MUREXIDA O WEIDEL, someter a completa Teobromina: rojo violeta
Ekkert
evaporacin el amoniaco + mg de codena+ Teofilina: violeta
H2SO4conc.
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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5. Butt MS, Sultan MT. Coffee and its consumption: benefits and risks. Crit Rev Food Sci Nutr.
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6. Ferrazzano GF, Amato I, Ingenito A, De Natale A, Pollio A. Anti-cariogenic effects of
polyphenols from plant stimulant beverages (cocoa, coffee, tea). Fitoterapia. julio de
2009;80(5):255-62.
7. Hooper L, Kay C, Abdelhamid A, Kroon PA, Cohn JS, Rimm EB, et al. Effects of chocolate,
cocoa, and flavan-3-ols on cardiovascular health: a systematic review and meta-analysis of
randomized trials. Am J ClinNutr. marzo de 2012;95(3):740-51.
8. Kuklinski, C. Farmacognosia, 1era edicin, Barcelona, 2000
9. Obregn VilchezL.Ua de Gato "Cat'sClaw": gnero uncaria, estudios botnicos, qumicos y
farmacolgicos de Uncaria tomentosa y Uncariaguianensis. Ed. Inst. de Fitoterapia
Americano. Lima 1997
10. Selecciones del Reader'sDigest. Secretos y virtudes de las plantas medicinales. Madrid,
1982.
11. Varro, E., Tyler, L. Farmacognosia. Ed. El Ateneo, Bs. As, Argentina 1993.
12. Wink M, Meibner C, Witte L. Patterns of quinolizidina alkaloids in 56 species of the
genusLupinus. Phytochemistry 1995; 38:139-153.
HORARIO.. FECHA.
MESA DE TRABAJO ..
REACCIONES GENERALES
REACCIN RESULTADO
DRAGENDORFF
BERTRAND
BOUCHARDAT O WAGNER
MAYER
SONNENSCHEIN
POPOFF
TANINOS
REACCIONES PARTICULARES
ATROPINA
REACCIN RESULTADO
VITALI
WASICKY
ARNOLD
COCANA
REACCIN RESULTADO
CLORURO DE BARIO
REACCIN DE YOUNG
NITRATO DE PLATA 10%
KMnO4
REACCIN RESULTADO
VAN URK
BASES XNTICAS
Reaccin Cafena Teofilina Teobromina
R. Murexida
R. Weidel
R. Gerard
R. Yodo
R. cido
tnico
ANLISIS CROMATOGRFICO
Rf:
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRCTICA N 12
Recoleccin Certificacin
,estabilizacin taxonmica
Seleccin
Desecaci
Molienda
Preparacin del
extracto acuoso
Anlisis Anlisis
espectroscpico espectroscpico
Parmetros fsico-qumicos
Propiedad Extracto
Olor
Color Anlisis organolptico
Sabor
pH Papel Indicador
Densidad relativa Picnmetro
ndice de refraccin Refractmetro
Prueba de solubilidad
LEYENDA: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy soluble
Huella Cromatogrfica
1. Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de
solvente.
2. Fase estacionaria: Slica gel F 254 (cromatofolios)
3. Fase mvil: Solventes polares y apolares 4. Deteccin: Vapores de yodo / Luz
UV
Tamizaje fitoqumico
LEYENDA: (-) Nulo (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
METABOLITO REACCIN PROCEDIMIENTO REACCIN POSITIVA
Molish X gotas de MP+ III gotas de Molish
Anillo violeta
(alfa naftol 2% en alcohol) agitar+ III gotas de H2SO4 CC
Antrona
X gotas de MP + III gotas de Antrona Coloracin verde
CARBOHIDRATOS (antrona en H2SO4 cc al 2% )
Fehling
(A: CuSO4; B: tartrato mixto de
X gotas de MP + III gotas de Fehling
potasio y sodio
A+ III gotas de Fehling B + calentar Coloracin rojo ladrillo
en B.M
(KNaC4H4O64H2O))
COMPUESTOS X gotas de MP + III gotas de FeCl3 10
FENLICOS FeCl3 Coloracin verde o azul
%
TANINOS Gelatina X gotas de MP + III gotas de gelatina Precipitado denso
blanco
Chalconas, auronas, isoflavanonas:
No hay coloracin.
X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg Isoflavanonas: Amarillo rojizo.
FLAVONOIDES Shinoda
metlico + III gotas de HCl cc Flavanonoles: Rojo a magenta.
Flavonas y flavonoles: Amarillo a rojo
ANTOCIANINAS Y
Rosenheim X gotas de MP + III gotas de
FLAVONOIDES Coloracinrojo oscuro
CATQUICOS
(Sol. Yodo Yodurada) Rosenheim
AMINOCIDOS
X gotas de MP + III gotas de
LIBRES Y GRUPOS Ninhidrina(0.1% en etanol) Coloracin violcea
AMINO
ninhidrina + calentar en B.M 10 min.
X gotas de MP + evaporar el solvente
Dragendorff
B.M + V gotas de HCl 10%+ III gotas Precipitadonaranja
(yoduro potsico- bismtico )
de Dragendorff
X gotas de MP + evaporar el solvente
Mayer (yoduro potsico B.M + V gotas de HCl 10%+ + III Precipitado blanco
mercrico)
gotas de Mayer
ALCALOIDES
X gotas de MP + evaporar el solvente
Bertrand (cido Precipitado blanco
B.M + V gotas de HCl 10%+ + III
silcotngstico)
gotas de Bertrand
X gotas de MP + evaporar el solvente
Sonnenschein Precipitado amarillo-verdoso
B.M + V gotas de HCl 10%++ III
(cido fosfomolbdico)
gotas de Sonnenschein
NAFTAQUINONAS,
Borntrager X gotas de MP + III gotas de
ANTRAQUINONAS Coloracinroja
Y ANTRANONAS
(NaOH 5%) Borntrager
X gotas de MP + llevar a sequedad en
B.M + X gotas de cloroformo+ III
TRITERPENOIDES Y Esteroides: verde-azul
Lieberman-Bourchard gotas de anhdrido actico+ H2SO4 cc
ESTEROIDES Triterpenoides: rojo-naranja
en zona (por las paredes de tubo) sin
agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada
Formacin de 0.5 a 1 cm de espuma
SAPONINAS Generacin de espuma + agitar fuertemente por 1 min.
estable por 15 min.
X gotas de MP + V gotas de cido
GLICSIDOS Baljet pcrico 1 % + V gotas de NaOH al 5 Coloracin anaranjada
%.
X gotas de MP + V gotas de
LACTONAS Legal denitroprusiato de sodio 0.5% + V Coloracin rojo oscuro
gotas de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido
NH4OH cc
CUMARINAS con NH4OH cc NaOH 10% en Fluorescencia celeste
NaOH 10%
boca de tubo + calentar por 5 min a
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa (1999).
2. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed.
BailliereTindall, Londres 1994.
4. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa
2001.
(Diagrama de Flujo)
Parmetros
Propiedad Extracto etanlico
Olor
Color
pH
Densidad relativa
ndice de refraccin
Prueba de solubilidad
Solventes Extracto seco (mg)
Agua destilada
Etanol
Metanol
n-butanol
Acetato de etilo
Diclorometano
Cloroformo
Leyenda: (-) Insoluble (+) ligeramente soluble (++) soluble (+++) Muy
soluble
Tamizaje fitoqumico
Fehling
FeCl3
COMPUESTOS
FENLICOS
TANINOS Gelatina
FLAVONOIDES Shinoda
ANTOCIANINAS Rosenheim
Y FLAVONOIDES
CATQUICOS
Ninhidrina
AMINOCIDOS
LIBRES Y
GRUPOS AMINO
ALCALOIDES Dragendorff
Mayer
Bertrand
Sonnenschein
NAFTAQUINONA
S,
ANTRAQUINONA
SY
ANTRANONAS Borntrager
TRITERPENOIDE Lieberman-Burchard
S Y ESTEROIDES
GLICSIDOS Baljet
LACTONAS Legal
CUMARINAS NH4OH cc
NaOH 10%
LEYENDA:(-) Nulo(+) Leve (++) moderado (+++) abundante
Huella Cromatogrfica
Preparacin de muestra: Pesar 0.1 g de extracto seco y solubilizar en 5 mL de solvente. Fase
estacionaria: Slica gel
Calculo de Rf
Esquema de resultado
PRCTICA N 13 LPIDOS, IDENTIFICACIN Y CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES
El aceite vegetal es un compuesto orgnico obtenido a partir de semillas u otras partes de las plantas en
cuyos tejidos se acumulan como fuente de energa. Estn conformados por lpidos definidos como grupo
heterogneo de compuestos insolubles en agua, y solubles en solventes apolares como: ter, cloroformo,
benceno o acetona. Las grasas y aceites son steres formados por la condensacin de cidos grasos
con glicerol.1-5
Extraccin de aceites
Clasificacin de aceites
Segn el codexalimentarius2 los aceites vegetales se pueden clasificar como:
Los aceites vegetales comestibles: productos alimenticios constituidos principalmente por glicridos de
cidos grasos obtenidos nicamente de fuentes vegetales. Podrn contener pequeas cantidades de
otros lpidos, tales como fosftidos, de constituyentes insaponificables y de cidos grasos libres
naturalmente presentes en la grasa o el aceite.
Los aceites vrgenes: se obtienen, sin modificar el aceite, por procedimientos mecnicos y por aplicar
slo calor. Se puede purificar por lavado, sedimentacin, filtracin y centrifugacin nicamente.
Los aceites prensados en fro: se obtienen por procedimientos mecnicos nicamente, sin la aplicacin
de calor. Podrn haber sido purificados por lavado, sedimentacin, filtracin y centrifugacin nicamente.
COMPETENCIAS
Conoce los mtodos de extraccin de aceites
Identifica cualitativamente los aceites vegetales
Analiza la calidad de los aceites
METODOLOGA
Extraccin por prensado en frio
Extraccin por solventes orgnicos
Anlisis cualitativo
ndice de acidez
MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgnicos
Reactivos de precipitacin
PARTE EXPERIMENTAL
I. Reacciones generales de caracterizacin
PARTE EXPERIMENTAL
ACEITE PROCEDIMIENTO RESULTADO POSITIVO
MAN Reaccin de Blarez o araquidato de Formacin de precipitado
potasio: tomar 1.5 mL de aceite de man en
un matraz de 250 mL, adicionar 15 mL de
potasa alcohlica al 5%, adaptarle un
refrigerante de reflujo, colocar a bao mara
por 20 min, enfriar el matraz.
OLIVA Reaccin de Hauchercorne: tomar 1 mL de Luego someter a bao mara por
aceite y agregar 1mL de HNO3 y V gotas de 20 min. Observar la
agua, agitar por 2 minutos y despus de 15 coloracin: el aceite de oliva
minutos en reposo, observar el color. puro permanece inalterable
mientras que los dems aceites
varan del amarillo al pardo.
Reaccin de Fluorescencia: tomar V gotas Observar fluorescencia azulada
de aceite y diluir en 1mL de cloroformo
ALMENDRA Reaccin de Bieber: mezclar V gotas de Si el aceite de almendras es
H2SO4 concentrado, V gotas de HNO 3 puro, se forma una emulsin
concentrado y V gotas de agua con 1 mL de amarilla que al cabo de algn
aceite de almendras. tiempo pasa a color rojizo.
AJONJOL O Reaccin de Behrens: Coloracin verde.
SSAMO mezclar en un tubo de ensayo V gotas de
H2SO4 concentrado y V gotas de HNO3
concentrado, luego aadir V gotas de aceite.
Reaccin de Bellier: colocar V gotas de Coloracin verde que persiste
aceite en un tubo de ensayo, V gotas de algunos minutos.
HNO3 concentrado y V gotas de solucin
saturada de resorcina en benzol, agitar por
10 min y observar.
Reaccin Baudovin: Colocar V gotas de Coloracin rojiza.
aceite en un tubo de ensayo, miligramos de
sacarosa y V gotas de H2SO4 concentrado,
agitar y dejar en reposo por 5 a 10 minutos.
R. Villavecchia y Fabris (detecta hasta 0.25- Coloracin del rosado al rojo.
0.5% de aceite): colocar II a III gotas de una
solucin alcohlica de furfurol, V gotas de
aceite y V gotas de H2SO4 concentrado,
agitar y dejar en reposo.
LINAZA R. Heidenreich: colocar en una cpsula de Coloracin anaranjada y luego se
porcelana, V gotas de H2SO4 concentrado y forma una pelcula negra.
verter por las paredes gotas del aceite.
R. Hauchercorne: colocar 1 mLde aceite y Coloracin rojo castao.
aadir HNO3: agua (3:1), agitar y despus de 2
minutos observar el color, luego someter a
bao mara por 20 minutos.
RICINO R. Brulle: colocar 10mL de aceite de ricino, 3 Coloracin amarilla.
mL de HNO3 diluido ms 0.1 g de albmina en
polvo, someter a calentamiento, al llegar a
ebullicin agitar, calentar nuevamente y dejar
en reposo 30 min.
Solubilidad: colocar V gotasde aceite y Observar solubilidad de aceites
aadir alcohol 96 y agitar.
colocarV gotasde aceite y aadir cido actico
y agitar.
Fusin potsica: tomar 2 mL de aceite y Observar precipitado de cido
agregar 2 pastillas de KOH, calentar (se sebsico.
percibe olor caracterstico), hasta no percibir
olor, enfriar y disolver en agua, adicionar
MgCl210%, observar precipitado de cidos
grasos, filtrar y tratar el lquido filtrado con HCl
10%.
BACALAO Disolver III gotas del aceite en el cloroformo, Coloracin violeta que pasa a
aadir III gotas de H2SO4 cc pardo.
Reactivos
Solvente: cloroformo
Yoduro de potasio al 30%
Reactivo de Hanus: solucin reactivo de yodo bromuro
Titulante: tiosulfato de sodio Na2S2O3 0.1N
Indicador: S. R. engrudo de almidn
Tcnica operatoria
N n X 1.27
II =
Definicin: mg de hidrxido de potasio necesarios para neutralizar los cidos grasos libres contenidos en
1.0 gramos de aceite o grasa.
Dnde:
Reactivos
Titulante : KOH 0,1 N
Indicador: fenolftalena al 0,1% en etanol.
Mezcla disolvente: alcohol : cloroformo (1:1)
Tcnica Operatoria
1. Pesar de 2 3 g de aceite en un matraz Erlenmeyer, previamente tarado.
2. Tomar 30 mL mezcla disolvente (alcohol-cloroformo 2:1) y neutralizar con KOH 0,01 hasta
coloracin rosada persistente del indicador.
3. Cargar la bureta con la disolucin de KOH 0,1 N,
enrasar e iniciar la valoracin, agitando continuamente, hasta viraje del indicador. Anotar
los mL de KOH gastados.
P: peso de la muestra
V: volumen en mL de
hidrxido desodio gastado
CUESTIONARIO
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
HORARIO.. FECHA.
MESA DE TRABAJO ..
I. RESULTADOS
MUESTRAS:.
REACCIONES GENERALES
REACCIN RESULTADOS
R. Heidenreich
R. Hauchercorne
R. Bellier
R. Elaidnica
NDICE DE YODO
CLCULOS RESULTADOS
NDICE DE ACIDEZ
CLCULOS RESULTADOS
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
IDENTIFICACIN DE ACEITES
Reaccin Observacin
Reaccin de
Blarez
2. Aceite de oliva Observacin
Reaccin Observacin Reaccin
R. R. Heidenreich
Hauchercorne
6. Aceite de ricino
R. Hauchercorne
3. Aceite de almendras
Reaccin Observacin Reaccin Observacin
1. Aceite de ssamo
R. Bieber Solubilidad
R. Baudovin
R. Bellier
Reaccin
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
cloroformo
PRCTICA N 14
ANLISIS DE VITAMINAS
INTRODUCCIN
Las vitaminas son compuestos orgnicos que cumplen funciones vitales relacionadas con el metabolismo
y con la fabricacin de hormonas, neurotransmisores, clulas sanguneas o material gentico. Poseen
funcin enzimtica acelerando reacciones qumicas.
METODOLOGA
Reacciones de coloracin
MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales de vidrio
Solventes orgnicos
Reactivos de precipitacin
PARTE EXPERIMENTAL I.
Anlisis cualitativo
VITAMINA LIPOSOLUBLES
procedimiento Reaccin positiva
vitamina A R. de Carr-Price: evaporar 3 mLdel Coloracin azul fugaz.
extracto etreo, disolver en cloroformo y
adicionar gotas de S.R SbCl3.
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Vitamina C Tratar V gotas de filtrado con V gotas mLde S.R Precipitado rojo de xido
Fehling o Benedict, calentar. cuproso
Tratar V gotas del filtrado con S.R. Yodo. Decoloracin del reactivo
Vitamina B6 o Piridoxina Tratar 1 mL de solucin de vitamina B6 con S.R Coloracin rosada que
FeCl3. pasa al rojo
CUESTIONARIO
1. Mencione especies que presentan vitaminas
2. Describa otros mtodos de cuantificacin de vitamina C.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Alonso P, Salucci M, Lzaro R, Malani G, Ferro-Luzzi A. Capacidad antioxidante y potencial de
sinergismo entre los principales constituyentes antioxidantes de algunos alimentos. Rev Cubana
Alim Nutric. 1999;13(2):104-11.
2. Flrez J. Vitaminas liposolubles e hidrosolubles. Farmacologa humana (3rd ed), Editorial
Masson, SA, Barcelona. 1999;991-1005.
3. Bentez Zequeira DE. Vitaminas y oxidorreductasas antioxidantes: defensa ante el estrs
oxidativo. Revista cubana de investigaciones biomdicas. 2006;25(2):0-0.
PROTOCOLON 14
ANLISIS DE VITAMINAS
HORARIO.. FECHA.
MESA DE TRABAJO ..
I. RESULTADOS
ANLISIS CUALITATIVO
REACCIONES DE IDENTIFICACIN