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Fundamentos de
Engenharia Bioqumica

lcool e cido Ctrico

Centro Universitrio Padre Anchieta

Curso de Engenharia Qumica
Professor Dr. Osmar Patrcio de Almeida
Esse material uma compilao de informaes disponveis em livros, em artigos e na
rede mundial de computadores. Sua aplicabilidade exclusiva para fins acadmicos.
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Etanol
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Etanol

Introduo
O Brasil o pas mais avanado, do ponto de vista tecnolgico,
na produo e no uso do etanol como combustvel, seguido
pelos EUA e, em menor escala, pela Argentina, Qunia, Malawi
e outros.
A produo mundial de lcool aproxima-se dos 40 bilhes de
litros, dos quais presume-se que at 25 bilhes de litros sejam
utilizados para fins energticos.
O Brasil responde por 15 bilhes de litros deste total. O lcool
utilizado em mistura com gasolina no Brasil, EUA, UE, Mxico,
ndia, Argentina, Colmbia e, mais recentemente, no Japo.
O uso exclusivo de lcool como combustvel est concentrado
no Brasil. A Figura 1 compara a produo de etanol em
diferentes pases e a Figura 2 demonstra como o ganho de
escala, a prtica empresarial e as inovaes tecnolgicas
tornaram o lcool competitivo com a gasolina.
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Etanol

Figura 1. Produo Mundial de Etanol.

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Etanol

Figura 2. Produo e custo do etanol no Brasil.

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Etanol
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Etanol
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Etanol
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Etanol
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Etanol
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Etanol
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Etanol

Para pensar...
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Etanol

Para pensar...
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Etanol

Para pensar...
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Etanol

O etanol pode ser obtido de mais de

uma forma. Por exemplo:
Hidratao direta do etileno,
Hidratao indireta do etileno,
Fermentao (Bioetanol)
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Etanol
Hidratao Direta do Etileno

Vias de Obteno do Etanol

HIDRATAO DIRETA DO ETILENO

simplicidade reacional desta via contrasta vivamente com o nvel de

complexidade do processo. De fato, a reao no podia ser mais
simples:

Hidratao Direta CH2=CH2 + H2O C2H5OH

Trata-se de uma reao bastante exotrmica (H2980= -45kJ/mol). Esta

caracterstica, aliada ao fato de se dar um aumento do nmero de moles,
indicaria que as condies timas de operao correspondem a baixas
temperaturas e elevadas presses (em termos de equilbrio
termodinmico).
Sucede, no entanto, que boas velocidades de reao se obtm nas
proximidades dos 300C e 70bar (tempos de residncia baixos).
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Etanol
Hidratao Direta do Etileno

Vias de Obteno do Etanol

HIDRATAO DIRETA DO ETILENO

A temperatura ter ento de ser elevada, o que limita a taxa de converso a

valores to baixos como 4%.

Assim sendo, surge a necessidade de reciclar grandes quantidades de etileno.

E como a reciclagem intensiva, torna-se crtica a pureza da alimentao de
etileno, caso contrrio acumular-se-iam gases inertes.

Neste ponto, uma preocupao a ter a inexistncia, na alimentao, de

acetileno (C2H2), que poderia hidratar-se em acetaldedo.

No que respeita a presso, esta no pode subir muito acima do valor indicado,
sob o risco de se assistir a uma polimerizao do etileno.

Esta reao acelera-se com o auxlio cataltico (geralmente cido fosfrico,

H3PO4, num suporte de slica). A operao conduz-se com um razo de gua
para etileno volta de 0,6. As matrias-primas podem ser o petrleo, carvo,
ou gs natural.
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Etanol
Hidratao Direta do Etileno
HIDRATAO DIRETA DO ETILENO
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Etanol
Hidratao Indireta do Etileno
HIDRATAO INDIRETA DO ETILENO

A hidratao indireta , dos trs processos, aquele que tem

sido abandonado em termos industriais. Baseia-se numa
sequncia de dois passos: esterificao e hidrlise. No
entanto, a hidrlise dos steres sulfricos origina, alm do
etanol, um subproduto: o ter dietlico, sendo esta uma
grande desvantagem.
Esterificao
CH2=CH2 + H2SO4 C2H5O-SO3H ou
2 CH2=CH2 + H2SO4 (C2H5O)2SO2
Hidrlise dos steres sulfricos
C2H5O-SO3H C2H5OH + H2SO4 ou
(C2H5O)2SO2 (C2H5)2O + H2SO4

Neste processo, o etileno diludo posto em contacto com

cido sulfrico 98% (p/p), em contracorrente numa coluna de
absoro a 80C e a 1,3-1,5bar. A principal impureza do
etileno etano.
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Etanol
Hidratao Indireta do Etileno
HIDRATAO INDIRETA DO ETILENO

A exotermicidade da reao requer controle de temperatura, que

feito com um sistema exterior de arrefecimento, e
acompanhado por uma medio rigorosa dos volumes de
reagentes em jogo.

Os gases no absorvidos saem no topo como gases para

combusto. Os steres sulfricos e ter dietlico absorvidos so
ento hidrolisados, e esta quantidade de gua que entra em jogo
baixa a concentrao do cido para 50%(p/p).

Os produtos da hidrlise entram depois numa coluna de

stripping, que na sua base direciona o cido sulfrico para um
ciclo de recuperao (concentrao feita em evaporadores sob
vcuo).

Os componentes volteis saem do topo da coluna e sofrem um

processo de scrubbing com gua ou soda custica diluda.

O etanol separado do ter dietlico por fracionamento.

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Etanol
Hidratao Indireta do Etileno
HIDRATAO INDIRETA DO ETILENO
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Bioetanol
Composio das Matrias-Primas

Melaos
Cana-de-acar
Milho
Milho Sacarino
Sorgo sacarino
Mandioca
Resduos celulsicos
Outras matrias-primas (arroz, centeio, cevada, trigo,
batata, batata doce e tupinambo).
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Bioetanol
Composio das Matrias-Primas
Componentes Variao (%)
Caldo de cana-de-acar gua 65 75

Acares 12 18

Melao: Sacarose 11 18

Fibra 8 16
62% de acares (32% de Pento-Hexosanas 5,00 0,75
sacarose, 14% de glicose, 16 %
Pentosana 1,75 2,25
frutose)
Lignina 1,50 2,50
20% de gua Glicose 0,20 1,00
8% de cinzas Matrias Minerais: Si, K, 0,10 0,80
Ca, Mg, Na, etc.
7% de outros componentes
Celulose 0,20 0,60
(gomas e cidos)
Frutose 0,00 0,60
3% de matrias nitrogenadas
Gorduras e Ceras 0,15 0,25
cidos Combinados 0,10 0,15

Matrias nitrogenadas: 0,10 0,15

aminocidos, amidas,
albuminas, nitratos
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Bioetanol
Composio das Matrias-Primas
Milho
59 - 70% de extrativos no nitrogenados
9 - 15% de gua
1,5 - 8,5% de material celulsico
1,3 - 4% de cinzas

Resduos Celulsicos (ex.: palha de Cana-de-

Acar):
45,1% de celulose
25,6% de hemicelulose
12,7% de lignina
9,7% de umidade
8,0% de cinzas
4,3% de outras matrias orgnicas
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Bioetanol
Composio das Matrias-Primas
Composio qumica parcial de alguns resduos
lignocelulsicos
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas

Sacardeas (ex. cana-de-acar)

Matria-Prima Lavagem Moagem Bagao

Caldo

4,5-5,0
NH4+/PO4-3 ou Ureia
Sanitizao
Fortificao Filtrao
Correo de pH

Melao Diluio
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas

Amilceas via cida (ex. milho, mandioca, etc.)

Gelatinizao
Matria-Prima Lavagem Cominuio Cozimento

Hidrolisado Liquefao
Filtrao Sacarificao

Sanitizao
Fortificao
Correo de pH
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas
Amilceas hidrlise cida.
Produo de lcool a partir da mandioca por hidrlise cida.
O processo consiste na manipulao das razes de mandioca "in
natura". Este se constitui em: lavagem, fragmentao e pesagem
da massa de mandioca. Posteriormente, se fez um pr-
encharcamento do material com a soluo de hidrlise cuja
composio foi de 1% em cido (v/v).
O prximo passo consiste na hidrlise propriamente dita em autoclave
comercial com temperatura e presso fixas em 127C/1,5 atm,
respectivamente, visando a produo de glicose.
A glicose produzida serve como base para a produo de etanol por
fermentao. A produo de glicose depende da variedade de
mandioca (ou aipim) estudado, bem como do catalisador utilizado na
reao de hidrlise. O catalisador usado neste processo o cido
sulfrico diludo em gua.
Aps a hidrlise o teor de glicose produzido foi determinado a
partir da anlise da calda pelo mtodo descrito na literatura (Dubois
et al, 1956).
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas

Amilceas hidrlise cida.

Dados relativos ao teor de glicose de 17 acessos e variedades de
mandioca obtidos a partir da hidrlise cida.
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas

Amilceas via enzimtica (ex. milho)

Gelatinizao
Matria-Prima Lavagem Cominuio Cozimento

Hidrolisado Enzima Resfriamento

Filtrao Amiloglucosidase Controlado

Sanitizao
Fortificao
Correo de pH
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Bioetanol
Tratamento das Matrias-Primas

Resduos celulsicos.
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
Recepo de Cana
Pesagem Descarga
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
Moagem
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
Tratamento do Caldo
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
Tanque de Caldo
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Produo de Etanol por Fermentao

Bioetanol (via cana-de-acar)
Dornas
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Bioetanol
Produo a partir do milho

Milho
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Bioetanol
Produo a partir de Resduos Celulsicos
Resduos celulsicos.
SHF separate hydrolysis and fermentation: a hidrlise da
celulose e a subsequente fermentao da glicose so realizadas
em reatores diferentes; a fermentao das pentoses ocorre em
outro reator;
SSF simultaneous saccharification and fermentation: como o
nome indica, a fermentao da glicose e a hidrlise da celulose
so realizadas no mesmo reator; a fermentao das pentoses, no
entanto, continua se processando em reator separado;
SSCF simultaneous saccharification and cofermentation:
representa um aumento da integrao em relao ao SSF, j que
a fermentao das pentoses e da glicose ocorre no mesmo reator;
e
CBP consolidated bio processing: o mximo de integrao
atingido com essa rota, na qual todas as operaes de carter
biolgico inclusive a produo de enzimas so realizadas em
um nico reator.
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Bioetanol
Produo a partir de Resduos Celulsicos

Resduos celulsicos
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Bioetanol
Fermentao

Este dos trs processos apresentados o mais antigo. To

antigo que, apesar da sua aplicao em escala
verdadeiramente industrial data de 1930, sendo um dos
processos qumicos que o Homem mais cedo descobriu.

E se h 30 sculos os chineses destilavam o etanol a partir de

licor fermentado de arroz, hoje em dia a fermentao o
processo industrial dominante (90% da produo mundial), e
faz-se a partir de uma srie de matrias-primas possveis
acares (melao, cana de acar, beterraba), amidos (milho,
trigo, aveia, arroz, mandioca, batata doce, ervilha, feijo),
celuloses (madeira, resduos industriais ou agrcolas).
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Bioetanol
Fermentao

Alguns dos microorganismos usados so

bactrias:
Zymomonas mobilis
Erwinia amylovora
Spirocaheta litoralis
Thermanaerobacter ethanolis

leveduras:
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces ellipsoideus
Schizosaccharomyces pombe
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Bioetanol
Fermentao

As reaes em jogo so:

Acares
C12H22O11 + H2O 2 C6H12O6
C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2

Amido
[C6H10O5]x + x H2O x C6H12O6
C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2

Celuloses
C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2
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Bioetanol
Fermentao
Consumo de Acares - Viso Simplificada
Glicose e Frutose entram na clula por difuso facilitada para
dentro da clula, isto , canais de protenas que permitem a
passagem de molculas hidroflicas de pequeno e mdio peso
molecular, pois o interior da membrana hidrofbico. O controle da
taxa de difuso feito pelo nmero de protenas existentes nos
canais e pelo gradiente de concentrao. O mecanismo ainda est em
estudo.
Sacarose sacarase (invertase) quebra em glicose e frutose no
exterior, e depois difuso facilitada de glicose e frutose para dentro
da clula.
Maltose - transporte ativo para dentro da clula, protena maltose
permease, e no interior quebrada pela maltase.
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Bioetanol
Fermentao
Caldo de Cana Resduo Celulsico

CELULOSE / RESDUO AO DA
SACAROSE CELULASE

GLICOSE FRUTOSE
GLICOSE
SACARASE
GLICOSE FRUTOSE

PORTA
PORTA PERMITINDO
PERMITINDO PORTA A PASSAGEM
A PASSAGEM PERMITINDO DA GLICOSE
DA GLICOSE A PASSAGEM
DA FRUTOSE

GLICOSE
FRUTOSE
GLICOSE INTERIOR
DA CLULA
MEMBRANA INTERIOR MEMBRANA DA LEVEDURA
CELULAR DA CLULA CELULAR
DA LEVEDURA
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Bioetanol
Fermentao
Amido Amido
(Via cida) (Via Enzimtica)
AMILOSE/AMILOPECTINA AO DO CIDO AMILOSE/AMILOPECTINA AO DA
AMILOGLUCOSIDASE

GLICOSE GLICOSE

MALTOSE

PORTA
PORTA PASSAGEM PERMITINDO
PERMITINDO PELA A PASSAGEM
A PASSAGEM MALTOSEPERMEASE DA GLICOSE
DA GLICOSE

GLICOSE MALTASE GLICOSE

INTERIOR INTERIOR
DA CLULA DA CLULA
MEMBRANA DA LEVEDURA MEMBRANA DA LEVEDURA
CELULAR CELULAR
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Bioetanol
Fermentao
Consumo dos Acares
dentro da Clula

Gliclise

MEMBRANA
CELULAR
INTERIOR
DA CLULA
DA LEVEDURA
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Bioetanol
Fermentao

Produo Industrial
Sacardeas/Amilceas.
FASES:
a) lag adaptao celular
b) tumultuosa grande liberao CO2
c) final pequena quantidade de
acar (0,5%p/v); baixa produo CO2
FORMAS DE CONDUO:
Batelada
Semi-contnuo
Contnuo (mltiplo estgio / reciclo clulas)
CONDIES
Processo exotrmico
pH = 4,5 a 5,0
tempo de processo 24h
CONTROLES
Substrato consumido (inicial e final)
Etanol produzido
Pureza da fermentao
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Bioetanol
Produtos de Fermentao
Proporo dos diversos produtos da fermentao alcolica, em g/100g de
glicose metabolizada de acordo com vrias fontes e para diferentes
eficincias fermentativas

Produto da Pasteur Jackmann (1987) Basso et. al. (1996)

Fermentao 95% 90-95% 95-92%
Etanol 48,5 45,0-49,0 43,0-47,0
Gs Carbnico 46,4 43,0-47,0 41,0-45,0
Glicerol 3,3 2,0-5,0 3,0-6,0
cido Succnico 0,6 0,5-1,5 0,3-1,2
cido Actico --- 0,0-1,4 0,1-0,7
leo Fsel --- 0,2-0,6 ---
Butilenoglicol --- 0,2-0,6 ---
Biomassa (massa seca) 1,2 0,7-1,7 1,0-2,0
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Bioetanol
Produtos de Fermentao

1.000 kg
Cana-de-Acar
Triturao

Bagao Garapa

Vinhoto Mosto Fermentado

910 kg Recuperao

leo Fsel Etanol

e 70 L
Resduos
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Bioetanol
Produtos de Fermentao

1.000 kg
Cana-de-Acar
Triturao

Bagao Garapa
Concentrao/Cristalizao

Melao Acar Escuro

Refino
Acar Comercial 90 kg
Vinhoto Mosto Fermentado
156 kg Recuperao

leo Fsel Etanol

e 12 L
Resduos
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Bioetanol
Subprodutos de Fermentao

Subprodutos
CO2
Gelo Seco
Acondicionado em depsitos especiais
Gaseificao artificial de bebidas
Aparelhos de combate aos incndios
Vinhoto
Adubo (rico em compostos nitrogenados)
Produo de metano
Protena alimentar
Bagao
Gerao de energia
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Bioetanol
Recuperao
Destilao
Destilao Simples:
Azetropo
Cabea gua,
etanol, bases

Alimentao
volteis, aldedos e
cidos

Alimentao
Corao gua e Vapor Vapor
Diludo Conc.
etanol com
menores
impurezas volteis

Cauda gua,
etanol, impurezas
menos volteis
(lcoois
superiores)
Sifo Sifo

Quanto mais pratos,

mais concentrado o vapor.
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Bioetanol
Recuperao
Retificao: Retificao
Aldedos, steres,
bases volteis
A retificao (C) e cidos
a operao pela
qual separa-se o
lcool das Impurezas

impurezas que o
acompanham no 90-92%v/v
lcool
destilado
Retificao
(flegma).
Repasse
Decantador
Destilao
40-50%v/v
lcool

Destilao
lcoois amlco e
butlico principalmente.
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Bioetanol
Recuperao
Desidratao por Desidratao por Arraste
Arraste: Condensador

Adicionando-se Decantador
50%p/p de benzol,
mistura etanol-gua
com 95%v/v de Desidratao
lcool durante a
destilao, Retificao

consegue-se o
arraste da mistura
ternria benzol-
etanol-gua (74,1-
Coluna
18,5-7,4) a 64,85C,
formao de mistura Destilao
azeotrpica binria
de benzol-etanol
(67,74-32,26) a
68,24C e a
destilao do lcool
anidro a 78,35C .
99,9%v/v
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Bioetanol
Recuperao
Desidratao por Desidratao por Peneiramento Molecular
Peneiramento
Molecular:

a passagem
dos vapores de
lcool entre
camada de
resinas (zelitos)
Retificao
capazes de reter
as molculas de
gua.
mais rpida do Aquecimento
175C
que o arraste.
No h resduo de Destilao

benzol.
Lcool REtificado
Destilao Lcool ANidro
99,9%v/v
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Etanol

Vias de Obteno do Etanol

Fermentao
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Problema PF03-01

A obteno de etanol, a partir de sacarose (acar)

por fermentao, pode ser representada pela
seguinte equao:
C12H22O11+ H2O 4 C2H5OH + 4 CO2
Admitindo-se que o processo tenha rendimento de
80% e que o etanol seja anidro (puro), calcule a massa
(em Kg) de acar necessria para produzir um volume
de 50 litros de etanol, suficiente para encher um
tanque de um automvel.
Dados: Densidade do etanol = 0,789 g/cm3
Massa molar da sacarose = 342,24 g/mol;
Massa molar do etanol = 46,06 g/mol
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Problema PF03-02

40 litros de meio de cultura contendo 8 litros de

melao foram inoculados com Saccharomyces
cerevisiae, e aps 24 horas de processo o mosto
apresentou 4%p/v de etanol e 0,5%p/v de substrato,
expresso em sacarose. Sabendo-se que o melao
contm 50%p/v de substrato, calcular:
Eficincia de fermentao:
Eficincia de processo:
Rendimento

Dados: Densidade do etanol = 0,789 g/cm3

Massa molar da sacarose = 342,24 g/mol;
Massa molar do etanol = 46,06 g/mol
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Problema PF03-03

Deseja-se produzir 2.000 L de etanol

utilizando-se uma tecnologia que
apresenta 98% de eficincia de
fermentao. Sabendo-se que a matria-
prima um caldo-de-cana contendo 14%
de substrato p/v e que o consumo de
95,5%, calcular a quantidade de caldo
necessria para produzir o volume
desejado no problema.
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Problema PF03-04

Deseja-se produzir 500 kg de lcool (etanol) a partir de uma

farinha contendo 75% de amido. Considerando-se uma
eficincia fermentativa de 80%, pergunta-se:
a) Espcie de microrganismo mais adequado ao processo.
b) Descrio do metabolismo do processo utilizado na fermentao.
c) Tratamento prvio da matria-prima (citar e descrever como
realizado). Justificar.
d) Quanto kg de matria-prima sero necessrios, sabendo-se que a
eficincia de sacarificao de 80%.

Dados: Massa molar da glicose = 180,16 g/mol;

Massa molar de (C6H10O11) = 258,129 g/mol
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cido Ctrico
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cido Ctrico

Nome IUPAC: cido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico

Identificadores Nmero CAS 77-92-9

Propriedades:
Frmula molecular C6H8O7
Massa molar: 192.123 g/mol
Aparncia: slido branco e cristalino
Densidade: 1,665 g/cm
Ponto de fuso: 153 C (152-159C)
Ponto de ebulio: Decompe-se a 175 C
Solubilidade em gua 133 g/100 ml (20C)
Acidez (pKa) pKa1=3,15; pKa2=4,76; pKa3=6,40

Riscos associados
Principais riscos associados: irritante aos olhos, pele e ao trato
respiratrio.
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cido Ctrico

SCHEELE (1789) fez o primeiro relato de

isolamento e cristalizao do cido ctrico.

GRIMAUX e ADAMS (1880) sintetizaram o

cido ctrico a partir de glicerol.

A primeira fbrica, para produo em larga

escala de uma substncia qumica por
fermentao, comeou a operar em 1881 em
Massachusetts (EUA) para a produo de
lactato de clcio, empregando bactrias.
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cido Ctrico

Em 1893, Wehmer relatou que certos fungos do

gnero Citromyces (hoje includos no gnero
Penicillium) eram capazes de elaborar e
excretar o cido ctrico em culturas lquidas;

Fbrica de produo de cido ctrico utilizando

essas tcnicas, foi construda na Alscia,
Frana, e esteve em operao por 10 anos,
sendo ela o ponto de partida do qual muito da
moderna tecnologia de fermentao foi
desenvolvida.
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cido Ctrico

MOLLIARD (1922) descobriu que culturas de A. niger

produziam cido ctrico sob condio de deficincia de
fosfato no meio de cultura. Embora a quantidade
produzida fosse insuficiente para a comercializao, o
conceito de nutrio deficiente contribuiu para o
desenvolvimento do processo de fermentao
submersa, j que os meios de cultura adequados para
permirir o crescimento do miclio ou esporulao
produziam pouco cido ctrico.

O cido ctrico que at 1923 era obtido a partir de citrato

de clcio, cujo comrcio era monopolizado por um cartel
controlado pelo governo italiano, que mantinha seu
preo em nveis altos, quando ento passou a ser
produzido atravs de um novo processo de
fermentao. O que quebrou o cartel.
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cido Ctrico

Hoje quase todo cido ctrico comercializado no

mundo produzido por fermentao, embora
uma pequena quantidade seja extrada de
frutas, no Mxico e na Amrica do Sul.
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cido Ctrico

Usos
Alimentos e bebidas (64%) como acidulante, conservante,
regulador de pH, agente quelante e estabilizante.
Detergentes e produtos de limpeza (22 %)
Produtos farmacuticos e nutricionais (10 %): em produtos
efervescentes; anticoagulante
Indstria cosmtica (2 %) para ajuste de pH
Outras aplicaes (2 %): estanhagem, preparo de corantes e
resinas

Produo Mundial de cido Ctrico

1,4 milhes ton/ano (US$ 2/kg a US$ 0,70 0,80/kg)
Crescimento anual da demanda: 3,5 4,0%
Empresas produtoras: ADM, Cargill, Tate & Lyle, DSM,
Junbunzlauer, Israels Gadot Biochemical Industries,
Chinas Anhui BBCA Biochemical
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cido Ctrico

Trs processos so usados para a fabricao

de acido ctrico:
Processo Koji: no qual o substrato slido,
sendo utilizada uma linhagem especfica de
Aspergillus niger.
Processo de fermentao em superfcie: o miclio
do bolor, A. niger, cresce sobre a superfcie do
meio de cultura esttico, sendo o produto da
fermentao recolhido do meio.
Processo de fermentao por cultura submersa: o
bolor se desenvolve inteiramente submerso no
meio de cultura lquido sob agitao.
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cido Ctrico

O cido ctrico pode

ser produzido por
bolores, leveduras e
bactrias.
Os mais comumente
utilizados so
Aspergillus niger e
Aspergillus wentii.
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cido Ctrico

A converso de glicose em cido ctrico

altamente eficiente:
A. niger
100 kg glicose 70-90kg cido ctrico

Bioqumica da fermentao do cido ctrico:

O cido ctrico produzido pelo ciclo de Krebs ou

ciclo do cido Ctrico. O agente de fermentao
precisa ser aerbio.
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cido Ctrico
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cido Ctrico

Bioqumica da fermentao do cido ctrico:

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cido Ctrico

Bioqumica da fermentao do cido ctrico:

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cido Ctrico

Regulao do Metabolismo: A ao de
inibidores de
enzimas
importante porque
o principal
mecanismo de
controle da ao
enzimtica

O cido ctrico da
via metablica do
catabolismo de
glicose inibe uma
das reaes
irreversveis
iniciais.
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cido Ctrico

Regulao do Metabolismo:
Bolores Leveduras

Deficincia de Mangans (reduz a on mangans no interfere

atividade da pentose fosfato e
aumenta o fluvo da via glicoltica)
pH menor que 2,0 (acima de 4,0 pH na faixa de 4,5 6,5
gera cidos oxlico e glucnico)
Baixa concentrao de fosfato Baixa concentrao de fosfato

Baixa concentrao de nitrognio Baixa concentrao de nitrognio

no tem efeito no acmulo de cido desencadeia o acmulo de cido
ctrico
No requer tiamina Requer tiamina para acmulo de
cido ctrico
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cido Ctrico

Regulao do Metabolismo:
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cido Ctrico

Matrias-primas utilizadas:

milho hidrolisado
caldo de cana
melao decationizado (ferrocianeto
e cido fosfrico ou EDTA em resinas
permutadoras de ons para diminuir os
teores de Fe+2 ou Zn+2)
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cido Ctrico

Processo Koji de Fermentao:

Usou-se a princpio, farelo de trigo, depois substitudo por amido
de batata doce.
Antes da esterilizao o pH do farelo ajustado entre 4 e 5.
Aps esterilizao a umidade no farelo deve estar entre 70 e 80%.
A adio de -amilase ao farelo resfriado positiva. Hoje se utiliza
o amido sacarificado.
Inoculao se d quando o farelo estiver entre 30-36C. Usa- se
cepa de A. niger pouco susceptvel a presena de ons ferro. No
permitir que a temperatura da fermentao ultrapasse 28C.
O farelo inoculado distribudo em bandejas com profundidade de
3 a 5 cm.
Depois de 5 a 8 dias recolhido para se realizar a extrao do
cido ctrico em gua.
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cido Ctrico

Processo de Fermentao em Superfcie:

O mosto inoculado e distribudo em bandejas rasas, feitas de
alumnio de alta pureza ou de inox.
Ar mido soprado sobre a superfcie do mosto durante 5 ou 6
dias, passando-se depois a utilizar ar seco.
Os esporos germinam em 24 horas.
Aps 8-10 dias as concentrao de acar reduzida de 20-
25%p/v para 1-3%p/v no final.
Quando a fermentao terminar, o mosto pode ser drenado e
substitudo por um novo. Assim, ganham-se 3 dias, pois o miclio
no precisa ser desenvolvido.
A produo nesse processo de aproximadamente 80 a 85% da
massa de carboidratos inicialmente fornecida.
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cido Ctrico

Processo de Fermentao em Superfcie:

Relao volume / rea da bandeja de fermentao:

bandeja funda
altura de lquido: grande
pouca superfcie para o miclio, que afunda, assim s uma parte
dele ir efetivamente fermentar
Comparativo

utilizao lenta dos nutrientes

bandeja rasa
altura de lquido: baixa relao volume / rea ideal = 1,22
miclio se estende
utilizao rpida dos nutrientes

Esporos
Clulas Vegetativas
Miclio

15 dias
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cido Ctrico

Processo de
Fermentao em
Superfcie:
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cido Ctrico

Processo de Fermentao Submersa:

As vantagens do processo de fermentao submersa sobre
o de superfcie, em termos de custos de investimento e
operao, induziram pesquisadores a procurar desenvolv-
lo para a obteno de cido ctrico.

No h esporulao, assim utiliza-se melhor o substrato.

Esse processo corresponde a 80% da produo mundial.

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cido Ctrico

Processo de Fermentao Submersa:

O meio de cultura esterilizado por meio rpido ou
ultrarrpido, seguido de resfriamento rpido a 30C.
O inculo habitualmente usado so esporos de uma cepa
de A. niger crescida em meio nutriente slido.
A composio do meio de cultura a 15-20%p/v de soluo
de carboidratos (melao, sacarose, glicose ou frutose).
(NH4)2SO4 ou NH4NO3 como fonte de nitrognio.

ons cobre A concentrao desses ons adicionados aos meio para

neutralizar os ons ferro varia de 0,1 a 50,0mg/l,
dependendo da quantidade de ferro presente no meio.
KH2SO4 De 0,01 a 0,03%p/v, podendo chegar a 2%p/v
MgSO4.7H2O 0,25%p/v
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cido Ctrico

Processo de Fermentao Submersa:

Caso o meio contenha uma quantidade de ferro muito
baixa, deve-se suprir essa deficincia, at que se atinja
uma faixa de 0,1 a 0,2 mg/l.
pH inicial ajustado em 4,0 com on amnio. Durante a
fermentao o pH cara para 1,5-2,0.
A aerao da cultura submersa deve ser contnua na taxa
de 0,5 a 1,15 v/v de soluo/min.
O processo de fermentao empregado descontnuo,
uma vez que tcnicas de fermentao contnua no so
adequadas para a produo de cido ctrico, por serem
muito dispendiosas e, provavelmente, economicamente
inviveis.
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cido Ctrico
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cido Ctrico
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Problema PF03-05

10 L de meio de cultura contendo 2 L de

melao decationizado foi inoculado com
Aspergillus niger. Aps 72 horas de
fermentao ocorreu a formao de 8 g de
cido ctrico para cada 100 mL do meio.
Sabendo-se que a quantidade de substrato
final 1%p/v e que o melao com 50%p/p de
sacarose, pede-se para calcular: eficincia
de fermentao e o rendimento.
Dados: Massa molar da sacarose = 342,24 g/mol
Massa molar do cido ctrico = 192,123 g/mol
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Problema PF03-06

Uma dorna de fermentao para obteno de cido ctrico por

processo submerso, agitado e aerado, 2.500 L de melao, cuja anlise
d 55 g de ART por 100 mL (acares redutores totais), so diludos
at um teor de ART de 25 g por 100 mL.
A dorna s contm mosto at 88 % de sua capacidade total.
Ao final da fermentao, a dosagem de acar residual d 2 g de
ART/100ml, e a separao do cido ctrico do mosto fermentado feita
por precipitao com gua de cal. O citrato de clcio formado pesa
1,15 toneladas.
Pede-se:
a) Dimenses da dorna, suposta cilndrica e levando-se em considerao que a altura deve ser
1,72 vezes maior que a dimetro.
b) O rendimento do processo fermentativo, expresso em peso de cido ctrico produzido por
peso de ART fermentado.

Dados: Massa molar da sacarose = 342,24 g/mol

Massa molar do cido ctrico = 192,123 g/mol
Massa molar do citrato de clcio = 498,46 g/mol
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Bibliografia
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Obrigado!