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Rosa de bengala

Fundamento
La prueba del Rosa Bengala o prueba del antgeno tamponado de Brucela, es una tcnica rpida de
aglutinacin en porta para la deteccin de anticuerpos anti-Brucela en sueros animales y humanos1-3. La
suspensin bacteriana es reactiva tanto con anticuerpos IgG como IgM, siendo los primeros detectados
ms precozmente (infecciones sub-clnicas) y por un perodo ms largo de tiempo (fase crnica) que con el
procedimiento convencional de tubo. La determinacin se efecta ensayando la suspensin tamponada
(pH 3,6) de Brucella coloreada con Rosa Bengala frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de
aglutinacin visible es indicativa de la presencia o ausencia de anticuerpos en las muestras ensayadas.
Prueba de tarjeta o rosa de bengala. Consiste en confrontar el suero problema con el antgeno de B.
abortus cepa 1119-3 a una concentracin de 8% para el diagnstico en bovinos y de 3% en caprinos. Con
esta prueba se detecta la presencia de anticuerpos circulantes de IgG e IgM de origen vacunal o debidos a
infecciones naturales. Esta prueba es de rutina y tiene una sensibilidad cercana al 100%, lo que significa
que dar resultados con pocos o ningn animal falso negativo; adems es sencilla, econmica y prctica,
por lo que se puede realizar en todo el hato. Sin embargo, existe el riesgo de dar resultados falsos
positivos por reacciones cruzadas con bacterias como Salmonella, E. coli, yersinias y pseudomonas.
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS R Rosa Bengala. Suspensin bacteriana de B. abortus, tamponada a pH
3,6 y coloreada con Rosa Bengala. T+, Xi, C R: 24/25-34-35 CONTROL + Brucella. Suero animal anti-
Brucella con una actividad aglutinante superior a 100 UI/mL. CONTROL - Suero animal con una actividad
aglutinante inferior a 10 UI/mL
Lectura Reaccin negativa: Suspensin uniforme sin cambio visible alguno, tal como se presenta en el
control negativo. Reaccin positiva: Aglutinacin dbil o intensa, fcilmente visible macroscpicamente.
Efectuar pruebas adicionales para confirmar la situacin.
Prueba de anillo de la leche
Los anticuerpos brucelares contenidos en la muestra, reaccionan con el antgeno coloreado de Brucella
formando con l un complejo antgeno-anticuerpo que se adhiere a los glbulos de grasa de la leche que,
por su menor densidad ascienden a la superficie del tubo formando una capa de crema a manera de un
anillo que se colorea de morado (hematoxilina del antgeno) que por su intensidad varan en matices;
desde un morado intenso (positivo) a un blanco cremoso (negativo), el cual es indicativo de que la
muestra no contiene aglutininas especficas por lo tanto el antgeno no aglutina permaneciendo la
columna de leche uniformemente coloreada de lila.
si en una muestra de leche se encuentra un anticuerpo especfico, y se le agrega un antgeno particulado
coloreado, ambos se unirn, formando un complejo Ag-Ac que se adhiere a los glbulos de grasa y
asciende con la nata.

Prueba de Rivanol
Esta prueba diagnstica tiene el mismo principio de la prueba de tarjeta, slo que se le adiciona una
sustancia (lactato) rivanol para que precipite los anticuerpos IgM y el sobrenadante de esto contendr los
anticuerpos IgG que sern aglutinados con los antgenos en la prueba, reaccionando slo aquellos sueros
con anticuerpos de infeccin. Pero como la vacunacin en un animal utilizando cepa 19 genera al principio
anticuerpos de los dos tipos y los IgG perduran aproximadamente 12 a 18 meses, este animal estar
dando reacciones positivas por este periodo en la prueba de tarjeta y a rivanol, pero segn el ttulo de
anticuerpos y la fecha de muestreo con fecha de vacunacin se dar el dictamen. Es aqu donde la prueba
de rivanol es importante para detectar animales con anticuerpos de vacunacin y no de infeccin. Cabe
mencionar que esto ocurre slo si el animal fue vacunado con la cepa 19, pero si un animal fue vacunado
con RB51 la prueba de rivanol no diferenciar estos anticuerpos por no tener especificidad contra esta
cepa y slo detectar animales con infeccin al igual que tarjeta.
Prueba de rivanol. La prueba de rivanol es de tipo cuantitativa y cualitativa; consiste en confrontar el suero
problema con un colorante de acridina que precipita las inmunoglobulinas de la muestra, principalmente
las IgM, quedando en solucin solo las IgG, que son las directamente involucradas con la respuesta inmune
ante una cepa de campo. Enseguida se realiza de manera similar a la prueba de aglutinacin en placa
utilizando un antgeno especfico. Se consideran positivos todos aquellos sueros que presenten reaccin de
aglutinacin completa en cualquiera de sus diluciones. En bovinos la prueba de rivanol ayuda a confirmar
el diagnstico, lo que permite la diferenciacin entre los animales vacunados y los infectados. Para realizar
la prueba en animales vacunados con la cepa S19 se requiere que haya trascurrido de 10-12 meses
despus de la aplicacin del biolgico, mientras que en animales vacunados con la cepa RB51 esta
diferenciacin se puede realizar en cualquier momento.

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