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Quevedo, 23 Febrero de 2016

Sr.
Ing. Gerardo Segovia Freire Ms.C
COORDINADOR DE LA CARRERA DE INGENIERIA AGROPECUARIA
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
Presente.-

De mi consideracin:

Yo, Bastidas Ruiz Valeria Estefania, aspirante a graduacin de


la Carrera de Ingeniera Agropecuaria, solicito a usted, de la
manera ms respetuosa, se sirva disponer el trmite para la
aprobacin del Anteproyecto de trabajo de Titulacin, con el
nombre de CONTROL BIOLGICO DE LA MONILLA (Moniliophthora roreri)
EN CACAO NACIONAL (Theobroma cacao L.) CON MICROORGANISMOS
NATIVOS DE LA ZONA DE MOCACHE con el auspicio del Dr. Julio
Csar Vinueza Galrraga, quien conjuntamente firma esta
solicitud.

Atentamente,

F) F)

BASTIDAS RUIZ VALERIA Dr. JULIO CSAR VINUEZA


E. GALRRAGA.

C.I: 1205682246 C.I: 1709164980


UNIVERSIDAD TCNICA ESTATAL DE QUEVEDO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
INGENIERIA AGROPECUARIA

ANTEPROYECTO TRABAJO DE INVESTIGACION

Fecha de presentacin: 23 de Febrero del 2016

Datos del aspirante


Primer Apellido: Segundo Apellido:
Bastidas Ruz
Primer Nombre: Segundo Nombre:
Valeria Estefana
Nmero de Cdula: 1205682246
Facultad: Ciencias Pecuarias
Carrera: Ingeniera Agropecuaria
Direccin Domiciliaria: Ciudad: Telfono:
Parroquia Rural La Esperanza Quevedo 0994460013
Correo Electrnico:
valeriaerui.bastidas@uteq.edu.ec / www.vaes29_@hotmail.com

Docente Auspiciante:

Apellidos: Nombres:
Vinueza Galrraga Julio Csar
Ttulo acadmico de mayor nivel: Doctor en Alimentos y Nutricin
Telfono: 0968728544
Correo Electrnico: juliocesar.vinueza@gmail.com
UNIVERSIDAD TCNICA ESTATAL DE QUEVEDO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
CARRERA INGENIERA AGROPECUARIA

Anteproyecto de Investigacin
previo a la obtencin del ttulo
de Ingeniera Agropecuaria.

Ttulo del Anteproyecto de Investigacin:

CONTROL BIOLGICO DE LA MONILLA (Moniliophthora roreri) EN CACAO


NACIONAL (Theobroma cacao L.) CON MICROORGANISMOS NATIVOS DE LA
ZONA DE MOCACHE

Autora:

Valeria Estefana Bastidas Ruiz

Director:

Dr. Julio Csar Vinueza Galrraga

Quevedo Los Ros Ecuador

2016
Tabla de Contenido
Introduccin........................................................................................................... 1
CAPTULO I.......................................................................................................... 3
CONTEXTUALIZACIN DE LA INVESTIGACIN......................................................3
1.1. Problema de la investigacin...........................................................................4
1.1.1. Planteamiento del problema.........................................................................4
1.1.2. Formulacin del problema...........................................................................4
1.1.3. Sistematizacin del problema.......................................................................5
1.2. Objetivos..................................................................................................... 5
1.2.1. Objetivo General....................................................................................... 5
1.2.2. Objetivos Especficos..................................................................................5
1.3. Justificacin................................................................................................. 6
CAPTULO II........................................................................................................ 7
FUNDAMENTACIN TERICA DE LA INVESTIGACIN............................................7
2.1. Marco terico............................................................................................... 8
2.1.1. Moniliasis del cacao................................................................................... 8
2.1.2. Origen..................................................................................................... 8
2.1.3. Etiologa.................................................................................................. 9
2.1.4. Ciclo de vida del patgeno...........................................................................9
2.1.5. Sntomas ocasionados por Moniliasis en cacao...............................................10
2.1.6. Controles de la Moniliasis en pases Latinoamericanos....................................12
2.1.7. Control de Monilia en Ecuador..................................................................17
2.1.8. Tipos de Controles Biolgicos de la Moniliasis...............................................18
2.1.9. Mucilago del cacao................................................................................... 20
2.1.9.1. Mtodos de Extraccin del exudado o muclago de cacao..............................22
2.2. Marco referencial........................................................................................ 22
METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN...............................................................25
3.1. Localizacin............................................................................................... 26
3.2. Tipo de investigacin...................................................................................26
3.3. Mtodos de investigacin..............................................................................26
3.4. Fuentes de recopilacin de informacin...........................................................26
3.5. Diseo de la investigacin............................................................................. 27
Tabla 1.ADEVA.................................................................................................... 27
3.6. Instrumentos de investigacin........................................................................28
3.6.1. Variables Sanitarias.................................................................................28
3.6.2. Variable Productiva..................................................................................28
3.7. Procedimiento experimental..........................................................................29
3.8. Tratamientos de los datos............................................................................. 30
3.9. Recursos humanos y materiales.....................................................................30
CAPTULO IV..................................................................................................... 32
RESULTADOS ESPERADOS..................................................................................32
4.1. Resultados esperados................................................................................... 33
CAPTULO V...................................................................................................... 34
BIBLIOGRAFA................................................................................................... 34
5.1. Bibliografa................................................................................................ 35
CAPTULO VI..................................................................................................... 39
ANEXOS............................................................................................................ 39
Introduccin.

El cacao es el producto de exportacin ms antiguo del Ecuador, durante la poca colonial


y luego durante la Repblica, la economa de lo que hoy constituye el Ecuador ha estado
fuertemente ligada a la produccin del cacao. La produccin del cacao representa uno de
los principales rubros del Sector Agropecuario ecuatoriano, al menos hasta cuando se
inici el auge bananero (1969) y el petrolero (1972), generando recursos y empleo,
contribuyendo al desarrollo y progreso de la economa ecuatoriana, sobre todo en los
inicios del siglo XX y hasta el ao de 1917 donde se describi la moniliasis y en 1920 las
plantaciones de cacao fueron devastadas por la escoba de bruja (1).

La actividad cacaotera en el Ecuador involucra alrededor de 100 mil familias de pequeos


y medianos productores y una superficie estimada de 500 mil hectreas, en el pas se
cultiva cacao en 16 provincias de las 24 existentes (2). Los bajos rendimientos de algunas
unidades productivas se deben principalmente a un inadecuado manejo del cultivo, desde
la seleccin del material de siembra, labores culturales y prcticas de cosecha que
perjudican el rendimiento del cultivo particularmente con la incidencia de enfermedades.

En las huertas de cacao de Ecuador, la presencia de dos hongos patgenos Moniliophthora


perniciosa (escoba de bruja) y M. roreri (moniliasis) destruyen gran parte de la produccin
(3).

El uso excesivo de fungicidas qumicos genera cierto grado de resistencia y dependencia


de agro-txicos, que comprometen la salud de los agroecosistemas, subsistencia de los
productores y perjudican el ambiente. Existen varias opciones de manejo disponibles para
disminuir este impacto que incluye prcticas culturales, control qumico (responsable y
restringido) y resistencia. Adicionalmente, varios centros de investigacin estn evaluando
medidas de control biolgico con buenas expectativas para integrarlas a la estrategia de
Manejo Integrado del Cultivo (MIC) (3).

El uso de controladores biolgicos apuesta una lnea muy importante para el futuro y ms
an cuando se utilizan organismos nativos y la tecnologa se adapta a las condiciones de
cada zona. Microorganismos generados en la fermentacin anaerbica muestran varios

1
beneficios para el efecto del control biolgico de enfermedades fungosas, el uso de bio-
preparados con base de microorganismos nativos, muclago y cscara de cacao an no han
sido estudiados, por lo que se requiere evaluar los preparados propuestos para que puedan
ser aplicados por pequeos productores cacaoteros.

Es en este mbito que el presente trabajo de investigacin pretende evaluar las propiedades
antagnicas de bio-preparados con base en microorganismos nativos, muclago y cscara
de cacao para el control de la monilla, en cultivares de cacao nacional en el municipio de
Mocache.

2
CAPTULO I
CONTEXTUALIZACIN DE LA INVESTIGACIN

3
1.1. Problema de la investigacin.

1.1.1. Planteamiento del problema.

La moniliasis (Moniliophthora roreri) es una enfermedad considerada como devastadora


puede reducir la produccin de cacao de un 30 a un 100%, dependiendo del nivel de
diseminacin y condiciones ambientales (4). En Ecuador los daos pueden llegar a un
60%, su incidencia en mazorcas alcanz el 64.76 % en el ao 2008, Snchez-Mora et al.,
2011, citados por Snchez y Garcs (5).

Una medida de control habitualmente utilizada es la aplicacin frecuente de fungicidas


qumicos en altas dosis, generando deterioro ambiental, y dependencia del uso de insumos
que encarecen los costos de produccin.

De manera general se conoce que, prcticas agrcolas comnmente usadas en el manejo de


monocultivos (pesticidas, fertilizantes qumicos, etc.), tienden a alterar a las poblaciones de
enemigos naturales incrementando los ataques severos de plagas y enfermedades (6).

En el cultivo de cacao, practicas inadecuadas como cosecha no frecuente y no eliminacin


de fuentes de inoculo (monilla), han generado que la productividad se deteriore de manera
exponencial en el tiempo, adicionalmente, el desconocimiento de alternativas culturales y
biolgicas de control han deteriorado an ms la problemtica.

1.1.2. Formulacin del problema.

Se conoce la propiedad antagnica de bio-preparados a base de microorganismos nativos,


muclago y cscara de cacao (Theobroma cacao L.) sobre la monilla (Moniliophthora
roreri) en el cultivar de cacao nacional?

1.1.3. Sistematizacin del problema.


4
Qu efecto tienen los bio-preparados a base de microorganismos nativos, muclago
y cscara de cacao en el control biolgico de mazorcas enfermas de cacao
nacional?
Qu impacto tienen los bio-preparados antagnicos frente al efecto qumico en el
control de M. roreri?
Cul de los tratamientos en estudio muestra resultados significativos en el control
de la Monilla?
Cul es la relacin beneficio-costo de los tratamientos para el control de M. roreri
en la localidad?

1.2. Objetivos.

1.2.1. Objetivo General.

Evaluar las propiedades antagnicas de bio-preparados con base en microorganismos


nativos, muclago y cscara de cacao para el control biolgico de la monilla
(Moniliophthora roreri) en el cultivar de cacao nacional.

1.2.2. Objetivos Especficos.

Evaluar el efecto de los bio-preparados con base en microorganismos nativos,


muclago y cscara de cacao en el control biolgico de mazorcas enfermas de cacao
nacional.
Valorar el impacto de los caldos antagnicos microbiolgicos frente al efecto qumico
en el control de M. roreri.
Identificar el tratamiento en estudio que muestre resultados significativos frente al
control de M. roreri.
Analizar la relacin beneficio-costo de los tratamientos para el control de M. roreri en
la localidad.

1.3. Justificacin.

La formacin ambiental es la construccin de nuevos saberes y prcticas que permitan


comprender y resolver los complejos problemas socioambientales de nuestro tiempo, as
como construir una nueva racionalidad para transitar hacia el desarrollo sustentable. La
problemtica contempornea de la produccin ha evolucionado de una dimensin
meramente tcnica a una de dimensiones ms sociales, econmicas, polticas, culturales y

5
ambientales. En otras palabras, la preocupacin central hoy es la de la sustentabilidad de la
agricultura (6).

En los cultivos de cacao existen microorganismos nativos que muestran capacidad para
actuar como biocontroladores de M. roreri (7). Poblacin de agentes de biocontrol,
surgidos por coevolucin, por ser el centro de origen de M. roreri. Sin embargo, se debe
tener en cuenta que la eficiencia del control por parte de estos agentes est sujeta a la
cantidad de inculo establecido en el lugar (8). Por lo que potencializar la reproduccin de
dichos microrganismos nativos es de gran importancia.

Por lo tanto el estudio de bio-preparados a base de microorganismos nativos, muclago y


cscara de cacao, muestran una gran perspectiva hacia el control biolgico de esta severa
enfermedad, que afecta al cultivo de cacao.

CAPTULO II
FUNDAMENTACIN TERICA DE LA INVESTIGACIN

6
2.1. Marco terico

2.1.1. Moniliasis del cacao

La moniliasis es una enfermedad fngica que afecta el cultivo de cacao, causada por el
basidiomycete Moniliophthora roreri. Est presente en gran parte de los pases
latinoamericanos y se adapta a diversidad de ambientes (9). Conocida como Pudricin
acuosa, Helada, Mancha ceniza o Enfermedad de Quevedo (10) es una de las
enfermedades ms asoladoras que afecta al cultivo del cacao, afectando la produccin del
cultivo del 10% hasta el 100% en la poca lluviosa.

2.1.2. Origen

ltimos estudios sitan el pi de monte de la estribacin occidental de la cordillera de Los


Andes, en el norte del Ecuador y sur de Colombia, como el centro de desarrollo del hongo
Moniliopthora roreri, causante de la enfermedad Moniliasis del cacao. A principios, el
hongo era endmico y propio del cacao de la variedad Nacional nativa del Ecuador, fue con
la introduccin desde Venezuela del cacao de tipo Trinitario (ms susceptible a la
Moniliasis) que el inculo se acumul y la enfermedad reapareci con mucha ms fuerza
en 1917, preocupando a los productores por su rpido avance. Se data que en un corto
tiempo muchas huertas fueron abandonadas al dejar de ser rentables por el ataque de M.
roreri (11).

Fue descrita por primera vez en el ao 1914, por J.B. Rorer, siendo la regin de Quevedo
(Ecuador) considerada como centro de origen (12). Actualmente se encuentra en 12 pases
de Centro y Sur Amrica productores de cacao (Colombia, Ecuador, Per, Bolivia,
Venezuela, Panam, Costa Rica, Honduras, Nicaragua, Guatemala, Belice y Mxico)
Aime-Mora y Phillips, 2005 citados por Mora et al., (13) situacin que ha causado efectos
negativos en la comunidad de cacao cultores y en estos agro ecosistemas (14).

Figura 1. Mapa de dispersin de M. roreri.

7
Bolivia

FUFUENTE: FUNDESYRAM, 2014 (15).

2.1.3. Etiologa

El agente causal de la Moniliasis es un hongo que al principio se le denomin Monilia


roreri, luego paso a ser Moniliophthora roreri y su clasificacin taxonmica segn
Enriquez y Paredes, 1989; citados por Njar y Thomas (16) es:
Clase: Deuteromicete (imperfecto)
Orden: Moniliales
Familia: Moniliaceae
Gnero: Moniliphthora
Especie: roreri

An no se conoce su estado perfecto (sexual) por lo que se cree que su reproduccin se


realiza solo asexualmente.

2.1.4. Ciclo de vida del patgeno

El ciclo comienza en la poca seca, encontrndose la mayor cantidad de esporas


disponibles en el ambiente, no obstante para que inicie la infeccin es indispensable que
existan humedad en el ambiente, ya que las esporas solo germinan con el aporte de una
pelcula de agua, incrementando su germinacin cerca de los 24C, esto tiene lugar entre 6
y 8 horas (17).

8
Segn Melndez (1993) citado por Snchez y Garcs (5), en su investigacin sobre
microambiente, La mayor cantidad de esporas de moniliasis se encuentran a 1 metro de
altura en las plantas de cacao.

La hifa infectiva del hongo penetra la epidermis del fruto, desde la cual se propaga inter e
intracelularmente a los tejidos subepidermales y el exocarpo (17). Menciona Albuquerque
et al., 2005 citados por Snchez y Garcs (5) Su penetracin ocurre directamente a travs
de los estomas, creciendo entre las clulas del crtex, produciendo conidias dentro y en la
superficie de los frutos. La infeccin contina a los tejidos centrales, e inicia el desarrollo
de la necrosis, de adentro hacia afuera debido al largo periodo de incubacin del patgeno,
aproximadamente de 6010 das (18). Dependiendo de la susceptibilidad del cacao el
perodo de incubacin se acorta a tres semanas (17).

Figura 2. Ciclo de vida de Moniliophthora roreri

Fuente: FHIA, 2012 (19)

2.1.5. Sntomas ocasionados por Moniliasis en cacao

Los daos que causa M. roreri son muy variables de un pas a otro. Segn Phillips-Mora y
Wilkinson, 2007; Torres de la Cruz et al., 2011; citados por Quevedo (20) su presencia
depende de factores como el tiempo en que la enfermedad permanece en el sitio; edad de
la plantacin, fenologa reproductiva, manejo del cultivo y de la enfermedad; presencia de
plantaciones colindantes afectadas y condiciones ambientales.

Los sntomas de M. roreri varan con la edad del fruto y con la severidad del ataque del
patgeno como se describe a continuacin en el Cuadro 1.

9
Cuadro 1. Sntomas y severidad del ataque de M. roreri con relacin a la edad del fruto.
Mazorcas < Frutos > de 1 a 3 Frutos > de 3 a 4 Frutos > de 4 meses
de 1mes meses meses (adultos)
Sintomatologa
Maduracin Pequeos Pequeos puntos Mancha de color
prematura, abultamientos o aceitosos caf (sin la
marchitez y gibas en la superficie (translcidos), presencia aparente
secamiento de la mazorca. difciles de ver. En de los puntos
mazorcas de color aceitosos), que
Partes clorticas y con
verde, los puntos son puede extenderse
aspecto ms brillante
de color amarillo. En hasta cubrir todo
que el resto de la
los frutos de color el fruto.
superficie.
rojo, los puntos son de Esa mancha se
Despus de la giba,
color anaranjado. caracteriza, y a su
aparece una mancha
Luego de 3 a 6 das vez se diferencia,
caf y empieza a
aparece el micelio y por presentar el
aparecer una felpa
luego las esporas de borde de avance
blanca o micelio del
color crema. de la lesin en
hongo (filamentos
forma irregular y
vegetativos); luego
no bien definido.
de 3 a 7 das
emergen las esporas
de color crema.
Elaborado por: Autora
Fuente: Njar y Torres (16); Gonzles y Robles (17); Quevedo (20).

Estas esporas son tan abundantes que slo en un centmetro cuadrado se cuentan
desde 7 a 43 millones, bastando slo una para iniciar la enfermedad en otro fruto
sano siempre que las condiciones ambientales (humedad principalmente)
favorezcan el establecimiento y desarrollo del hongo (18).

El dao interno causado por la Moniliasis es ms grave que el dao externo, pues se
pierden casi todas las semillas, sin importar la edad del fruto (19).

Los sntomas externos pueden estar completamente ausentes hasta la formacin de


lesiones entre 45 y 90 das despus de la penetracin del hongo (21).

2.1.6. Controles de la Moniliasis en pases Latinoamericanos

10
2.1.6.1. Control de Monilia en Gucimo, Costa Rica

2.1.6.1.1. Combate Cultural

Dentro de las prcticas utilizadas, se encuentra las siguientes:

a) Segn Phillips 1986, citado por Njar y Thomas (16). La poda sanitaria, que
consiste en la remocin semanal de frutos, se realiza con el fin de evitar que el
hongo forme conidias que pueden infectar otras plantas; stos deben colocarse
sobre el suelo donde, aparentemente, el hongo se inactiva por un mecanismo
biolgico. Con ello se busca producir un cambio en el microclima de la plantacin
que desfavorezca al patgeno y beneficie la plantacin.

b) Drenaje, con el fin de reducir la humedad presente en la plantacin, para crear un


medio menos favorable para el desarrollo del hongo.

c) Deshierbas, frecuentes para mantener un ambiente ms seco y menos propenso a


crear un microclima hmedo, a causa del roco que cae durante la noche.

d) Podas para mantener a la planta libre de ramas no funcionales y regulacin de


sombra, Porras y Snchez 1991, citados por Njar y Thomas (16).

2.1.6.1.2. Combate por resistencia

Jimnez, 1986, citados por Njar y Thomas (16) afirman que el combate por resistencia
es una tcnica utilizada debido a la gran diversidad gentica del cacao. Los clones que se
han obtenido han sido mediante la inoculacin artificial ya que el inculo natural est
limitado en la edad del fruto y presin del inculo.

Se ha llevado a cabo inoculaciones artificiales de cultivares que operan en dependencia de


la estacin y localidad, tales como UF-296, UF-273, EET-75, EET-183, EET-67. Estos
cultivares resistentes a la Moniliasis, forman parte del combate integrado, incluyendo
prcticas culturales. Actualmente los cultivares estn siendo utilizados para la produccin
de hbridos, se espera mejorar el cultivo e incrementar los ingresos de los productores (16).

2.1.6.1.3. Combate Biolgico

11
Es la disminucin de la actividad del patgeno causante de la enfermedad, a travs de la
accin de uno o ms organismos diferentes al ser humano; que segn Jimnez, 1986,
citados por Njar y Thomas (16) consiste en:

a) Reduccin de inculo, clasificado como un combate biolgico del inculo. Este


combate consiste en controlar la poblacin del patgeno.

b) Reduccin de la infeccin en el fruto, clasificado como proteccin biolgica de la


epidermis del fruto. Este tipo de combate tiene el objetivo de colonizar el fruto con
el microorganismo a utilizar como control, para interferir con las actividades del
patgeno.

c) Reduccin de la severidad en el fruto por parte del patgeno, caracterizado como


combate por induccin de resistencia. La metodologa est relacionada con la
estrategia de control del hospedante (16).

2.1.6.1.4. Combate Qumico

Segn Snchez 1982, citado por Njar y Thomas (16): En experimentos anteriores se ha
demostrado que es antieconmico e ineficaz el combate qumicos de esta enfermedad, solo
logran disminuir la incidencia en ciclos cortos, y en algunos casos se ha presentado
disminucin en la produccin y aumento de la marchites fisiolgica.

Cuenta Phillips 1986, citados por Njar y Thomas (16) que En un experimento realizado
en la estacin experimental La Lola, Costa Rica, las aplicaciones qumicas han reducido en
forma moderada pero significativa la incidencia de la enfermedad, y aument de igual
manera los rendimientos, sin embargo, el testigo no compens el costo total de la
aplicacin.

Para lograr una mayor eficiencia en las aplicaciones de fungicidas en una plantacin de
cacao, Porras y Snchez, 1991 citados por Njar y Thomas (16) recomiendan lo siguiente:

a) Que las plantaciones tengan una cantidad de produccin e ingreso que atribuya su
aplicacin.

12
b) Presencia de alta cobertura de fungicidas en el producto, por lo que es preferible
que los frutos se encuentren localizados en troncos y en las ramas bajeras del rbol.

c) Ciclos de aplicacin reducidas, por lo que la plantacin debe presentar floraciones y


fructificacin bien definidos.

2.1.6.2. Control de Monilia en Talamanca, Costa Rica

Debido al estado orgnico certificado de la mayor parte de los sistemas agroforestales de


Talamanca, los productores no deben usar funguicidas sintticos para el control de la
moniliasis. Las nicas opciones son el control cultural y el control biolgico (8).

La eliminacin de frutos enfermos es la tcnica tradicional de control cultural de la


moniliasis, pero debe realizarse con frecuencias y niveles muy variables. Debido al ciclo
de vida de M. roreri, se recomienda la eliminacin semanal de mazorcas infectadas por
este patgeno en el Per, con el fin de aumentar los rendimientos e ingresos del productor
bajo las condiciones socioeconmicas de Talamanca. Esta asesora contradice la intuicin
del agricultor y, por lo tanto, no es adoptado ampliamente (8).

El control biolgico de la moniliasis an se encuentra en una fase experimental. En el Per


se han obtenido resultados prometedores con mico parsitos en varias mezclas y
formulaciones. Por su ndole, el control biolgico no elimina, sino que disminuye las
poblaciones de patgenos y, como consecuencia, reduce la incidencia de la enfermedad.
Por lo tanto, el control biolgico debe emplearse con otros mtodos de control (8).

2.1.6.3. Control de Monilia en Ccuta, Colombia

Menciona Fravel, 2005; citado por Surez y Rangel (22) que: tradicionalmente el manejo
de la enfermedad en Colombia consiste en la remocin de frutos enfermos, podas sanitarias
y remplazo de rboles susceptibles por medio de injertacin y clonacin. En la actualidad,
aunque con menor aplicacin a nivel de campo, el manejo biolgico surge como una
alternativa promisoria para el control del fitopatgeno, con resultados exitosos contra un
amplio rango de ellos.

13
ltimos estudios en el pas, han demostrado el gran potencial de hongos y bacterias
endfitos para el control de la moniliasis. Entre los ms importantes se encuentran las
bacterias de los gneros Pseudomonas y Bacillus y hongos de los gneros Gliocladium y
Trichoderma Surez y Cabrales, 2008; citados por Surez y Rangel (22).

2.1.6.4. Control de Monilia en San Salvador, El Salvador

2.1.6.4.1. Control cultural

Mencionan Gonzales y Robles, (17) que en El Salvador, realizan aquellas prcticas que
conducen a una alteracin del ambiente, tornndolo inapropiado para que prospere la
enfermedad, y destacan las siguientes:

a) Podas suaves y frecuentes, que ayuden a mantener los troncos y ramas principales
libres de brotes, chupones o hijos y de ramillas perjudiciales. Esto contribuye a una
buena cosecha y a conservar el ambiente seco y fresco.

b) Regulacin del sombro permanente, as se obtiene una apropiada entrada de luz en


la plantacin y una buena cantidad de aire en circulacin, favoreciendo un rpido
escape del vapor de agua. Adems, es indispensable regular el sombro para un
mejor aprovechamiento de los fertilizantes.

c) Adecuado sistema de drenaje, para evitar el encharcamiento del agua de las lluvias
y reducir la alta humedad relativa dentro del ambiente de la plantacin.

d) Deshierbas frecuentes y oportunas, para facilitar la libre circulacin del aire y hacer
que el ambiente se mantenga ms seco, evitando la condensacin del roco durante
las noches.

e) Remover dos veces por semana en los meses de lluvia los frutos afectados por la
moniliasis que se encuentren en la plantacin (17).

2.1.6.4.2. Control qumico

En caso de justificarse el uso de fungicidas en El Salvador, se puede hacer uso de uno a


base de cobre, un hidrxido como el Kocide- 77 o Kocide-2000, o un xido de cobre como
el Cobre Sandoz, mezclado a razn de 5 a 6 gramos de producto comercial por litro de
agua. Tambin pueden utilizarse fungicidas como el Bravo-500, Branadil o Daconil,

14
Phyton (orgnico), que en pruebas tanto en Costa Rica (Bravo) como en Honduras (Bravo
y Phyton) han dado resultados aceptables como complemento a las prcticas culturales
(17).

2.1.7. Control de Monilia en Ecuador

2.1.7.1. Control cultural o Prcticas fitosanitarias

Estas deben realizarse con la nica finalidad de disminuir las fuentes y potencial de inculo
y preparar al rbol para que cada ao genere una cosecha abundante y sana. Para el control
de la enfermedad Enrquez (2004); citado por Peralvo y Saavedra (10), recomienda lo
siguiente:

a) Regular la sombra permanente o definitiva del cacaotal.


b) Levantar el dosel de la sombra con relacin a la planta de cacao.
c) Podar el rbol en forma moderada.
d) Cosechar las mazorcas maduras.
e) No permitir que el agua se empoce o forme charcos
f) Recolectar mazorcas enfermas antes de que se produzcan esporas.

2.1.7.2. Control por Resistencia

Una revisin de Muoz, 2002 y Enrquez, 2004 citados por Peralvo y Saavedra (10), indica
que: Una de las formas prcticas y econmicas de combate de la enfermedad es mediante
la resistencia gentica, la cual sera muy ventajosa. En nuestro pas poco trabajo se ha
ejecutado en busca de resistencia a M. roreri. Se ha comprobado que ciertos clones
presentan alguna resistencia a la enfermedad luego de realizar pruebas de patogenicidad,
desafortunadamente existen pocos estudios para saber si su descendencia tambin presenta
la resistencia. En otros estudios se ha observado que algunos cultivares escapan a la
infeccin al producir su cosecha en periodos desfavorables para la enfermedad (10).

15
2.1.7.3. Control qumico

Mencionan Suarez 1993 y Arvalo et al., 2004 citados por Peralvo y Saavedra (10) que
Existen algunos fungicidas que han sido evaluados para proteger los frutos de los ataques
de M. roreri, entre los ms destacados estn los fungicidas protectores o de contacto a base
de cobre, pero su xito depende de las buenas prcticas de manejo y labores
complementarias que se realicen para que el cultivo produzca al mximo y la inversin en
productos qumicos sea rentable. Desde 1926 Rorer citado por Peralvo y Saavedra (10)
concluy que: Se necesitan muchas aplicaciones y muy frecuentes para combatir en cierta
forma la enfermedad.

2.1.8. Tipos de Controles Biolgicos de la Moniliasis

2.1.8.1. Antagonismo

Segn Andrews, 1983 citados por Prez, Gonzales y Muoz (23) El antagonismo
microbiano est dado por la inhibicin, deterioro o muerte de alguna especie de
microorganismos por la accin de otra; o una relacin entre dos poblaciones en la cual una
de ellas causa efectos negativos a la otra.

Para aprovechar cualquier tipo de microorganismo antagnico ya sea en condiciones in


situ o in vitro, se necesita que el microorganismo ejerza el control y sobreviva en el nicho
del patgeno (16).

2.1.8.1.1. Uso de microorganismos eficaces (EM)

Los microorganismos eficaces o EM fueron definidos y estudiados por el Prof. Teruo Higa.
Estos EM se desarrollan en la naturaleza y se utilizan como agentes inoculantes para
acrecentar la diversidad microbiolgica de suelos y plantas (24).

Los microorganismos eficientes EM contienen tipos seleccionados de microorganismos no


patognicos que se encuentran de manera natural en el medio, est cctel en su mayora
contiene poblaciones de bacterias de cido lctico y levaduras, un nmero inferior de
bacterias fotosintticas, actinomicetos y otros tipos de organismos. Los microorganismos
co-existen en un medio lquido natural y al momento que se introducen al ambiente, los
efectos sinergticos son beneficiosos.

16
Algunas de las sustancias secundarias que son producidas por los microorganismos del EM
son las inositol, ubiquinone, saponinas, polisacridos de bajo peso molecular, polifenoles y
quelatos. Estas sustancias pueden inhibir patgenos, pero permitir el crecimiento de las
especies benficas (25).

El EM no debe considerarse como un fungicida, pues es una medida biolgica para


suprimir o controlar patgenos, a travs del incremento de la competencia y antagonismo.
Dentro de los principales grupos de microorganismos se hallan:

Bacterias fototrpicas o fotosintticas: estas bacterias se automantienen a partir de


secreciones de races, materia orgnica y gases sulfhdricos. Los aminocidos, cidos
nucleicos, sustancias bioactivas y azcares producidos por ellas incrementan su desarrollo
y a la vez el desarrollo de otros organismos como las micorrizas, debido a que facilitan
compuestos nitrogenados (16).

Bacterias cido Lcticas: Es el grupo ms numeroso en el coctel del EM. Las bacterias
cido lcticas generan sustancias antagnicas como la reuterina, la cual es fungisttica e
inhibe el crecimiento de otras bacterias y protozoos.

Adems, el cido lctico proviene de azcares y otros carbohidratos secretados por las
bacterias fotosintticas y levaduras. El cido lctico es capaz de esterilizar e inhibir
microorganismos dainos. Estas bacterias aceleran el proceso de descomposicin de la
materia orgnica, ya que promueven el rompimiento y fermento de la lignina y celulosa
Edens et al. 1997 citados por Njar y Thomas (16) .

Levaduras: este tipo de hongos sintetizan sustancias antimicrobianas, hormonas y enzimas


a partir de aminocidos y azcares secretados por bacterias fotosintticas, materia orgnica
y races, las cuales sirven de sustratos para las bacterias cido lcticas y actinomycetes
(26).

Actinomycetes: estos hongos producen sustancias inhibidoras de hongos y bacterias


(como los antibiticos), a partir de los aminocidos secretados por bacterias fotosintticas
y materia orgnica (16).

17
Hongos fermentativos: Este tipo de hongos se encargan de descomponer la materia
orgnica en alcohol, steres y sustancias antimicrobianas, eliminando de sta manera el
desarrollo de moscas y malos olores (16).

2.1.8.1.2. Biopreparados

Bacillus subtilis.- Pertenece al grupo de las eubacterias y a la familia Bacilliaceae. Son


bacilos Gram positivos, aerobios, termfilos, productores de esporas y colonias rugosas.
Estn ampliamente distribuidos en el suelo, aire y tejidos vegetales. En el Ecuador se han
evaluado formulaciones lquidas, slidas y biopreparados a base de aislados nativos de
Bacillus subtilis y Pseudomonas cepacia para controlar la moniliasis del cacao,
demostrando que estas disminuyen la incidencia de la enfermedad entre un 60 y 80 %
Falcon et al., 2005; Falcon et al., 2003 y Ynez, 2004 citados por Carchi (27).

Pseudomonas cepacia.- (en la actualidad Burkholderia) pertenece al gnero Pseudomonas


con ms de 140 especies. Es un organismo Gran negativo de amplia versatilidad
nutricional. Es fcilmente aislable, crece sin dificultad en condiciones de laboratorio y es
mutacionalmente verstil, puede ser caracterizada taxonmicamente sin dificultad (Ynez,
2004; Garca, 2002 citados por Carchi (27)).

Investigaciones realizadas para controlar la moniliasis en cacao demostraron que


liberaciones frecuentes, cada 3 o 4 semanas con Pseudomonas cepacia y con Bacillus
subtilis en formulaciones lquidas, slidas y biopreparados, controlaron a nivel de campo la
infeccin causada por Moniliophthora roreri en el cultivar nacional y en el clon CCN - 51
Falcon et al., 2005; Falcon et al., 2003 y Ynez, 2004 citados por Carchi (27).

2.1.9. Mucilago del cacao

Menciona el Fondo Nacional de Investigaciones Agropecuarias, FONAIAP 2000, citado


por Barn (28) que El muclago es una sustancia viscosa, generalmente hialina, que
contiene el cacao. Es un producto orgnico de origen vegetal, de peso molecular elevado,
superior a 200.000 g/gmol, cuya estructura molecular completa es desconocida.
El muclago de cacao est compuesto por el 80% de agua, de 10 a 15% de glucosa y
fructuosa, hasta el 0.5% de cidos no voltiles, en su mayor parte ctricos y cantidades
pequeas de almidn, cidos voltiles y sales (Braudeau 2001, citado por Barn (28)).

18
La pulpa tiene un pH cido debido a la presencia de cido ctrico que constituye un medio
favorable para las levaduras, se contamina rpidamente por microorganismos una vez que
las habas han sido extradas de las mazorcas (Braudeau, 2001 citado por Goya (29)).

El bajo pH de la pulpa y la poca cantidad de oxgeno en la masa al inicio de la


fermentacin favorece el desarrollo de las levaduras al inicio de la fermentacin, donde
aparecen entre cinco y seis especies diferentes de levaduras en especial Hanseniaspora
guillermondii durante la fase inicial y Saccaromyces cerevisiae al final de la fermentacin
Wacher 2011, citado por Barn (28).

Bacterias cido Lcticas.

La poblacin de bacterias lcticas aumenta debido a la modificacin de ciertas condiciones


ocasionadas por las levaduras durante las primeras horas de fermentacin, como la
disminucin del pH y el aumento en aireacin en la masa debido a la degradacin de la
pulpa que se escurri como exudado.

Diferentes especies se han aislado en distintos pases pero de las principales especies
encontradas son Lactobacillus fermentum, Lb. plantarum, Leuconostoc mesenteroides y
Lactococcus (Streptococcus) lactis, quienes continan la fermentacin de los azucares
residuales y el consumo del cido ctrico Schwan y Wheals 2004 citados por Barn (28).

Bacterias cido Acticas.

Las bacterias acticas ms importantes que se han aislado son: Gluconobacter oxydans,
Acetobacter aceti y Acetobacter pasteurianus, las cuales causan un incremento en
acidificacin junto con rpidos incrementos de temperatura en la pulpa Wacher 2011
citados por Barn (28).

2.1.9.1. Mtodos de Extraccin del exudado o muclago de cacao

19
Luzuriaga (30) dice que para la obtencin y determinacin del mejor proceso de extraccin
del exudado o muclago de cacao, se deben seguir los siguientes mtodos:

Mtodo I: Obtencin del exudado Por gravedad

Una vez extradas las almendras y la placenta del cacao, se emplea un tamiz de acero
inoxidable de 35 cm de dimetro, cuya malla tiene orificios circulares de 2 mm de
dimetro, donde se colocan las almendras de cacao y sobre ellas sus respectivas placentas.
El tamiz es cubierto con una tapa de acero inoxidable y en la parte inferior del mismo, es
colocado un embudo de acero inoxidable el cual facilitar la recoleccin del exudado del
muclago de cacao (24).

Mtodo II: Obtencin del exudado Ejerciendo presin

Una vez extradas las almendras y la placenta del cacao, se utiliza un tamiz de acero
inoxidable de 35 cm de dimetro, cuya malla debe tener orificios circulares de 2 mm de
dimetro, donde se colocarn las almendras de cacao y sus respectivas placentas y se
sometern a una presin con el fin de acelerar el escurrido. La presin ejercida ser
determinada en relacin 1:1 en peso (kg almendras mucilaginosas: kg peso ejercido) (24).

Mtodo III: Obtencin del exudado Mediante despulpadora

Una vez extradas las almendras y la placenta del cacao, se colocarn las almendras y la
placenta en la despulpadora marca Proingal, con capacidad de produccin de 350 kg/h,
para obtener el exudado (24).

2.2. Marco referencial.

El control biolgico es un mtodo de control de plagas, enfermedades y malezas que


consiste en utilizar organismos vivos con objeto de controlar las poblaciones de otro
organismo. En general, se han realizado esfuerzos para el xito del desarrollo de Agentes
de Control Biolgico (ACB), para lo cual es necesario un entendimiento profundo de la
ecologa y biologa de los patgenos y de sus organismos antagonistas (Oyarzun, 2004).
En base a esta premisa se ha trabajado en varias investigaciones a nivel de Latinoamrica.

20
Las primeras investigaciones fueron realizadas por Bravo y Victoria (1979), ellos
evaluaron la eficiencia in vitro e in vivo de antibiticos, cepas de hongos de los gneros
Aspergillus, Penicillium y hongos y bacterias no identificados. Los nicos que mostraron
resultados halagadores fueron las cepas bacteriales, las cuales presentaron accin
inhibidora de 70.7 % y 57.9 %. Estos mismos autores en 1980 y 1981 confirman los
resultados, ya que cultivos bacteriales posiblemente del gnero Bacillus mostraron
capacidad para inhibir a M. roreri en un 76.6 % y 77.3 % tanto in vitro como in vivo (31) .

Jimnez et al., (32), demostraron la efectividad de Pseudomonas aeruginosa, en la


reduccin de la incidencia de moniliasis en un 60.5 % y 19.0%, en promedio para dos
pocas de un cultivar altamente susceptible a la enfermedad. A su vez Sandoval et al., (33),
estudiaron bacterias antagonistas del tipo Bacillus bajo condiciones de campo,
demostrando que su uso reduce el porcentaje de incidencia de la enfermedad en menos del
1 %.

En investigaciones realizadas por Krauss y Soberanis (34), se evaluaron mezclas de hongos


micoparsitos Clonostachys rosea y Trichoderma spp, sugiriendo que las mezclas de estos
hongos son altamente prometedoras para el control de moniliasis, escoba de bruja y
mazorca negra. Bajo condiciones de campo la mayora de tratamientos redujeron
significativamente la moniliasis de 14.6 % a 24.9 % comparados con un control cultural.

El Instituto Nacional Autnomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP) viene


trabajando en la bsqueda de materiales antagnicos. En el ao 2001 se pudo detectar
algunos organismos potenciales antagnicos correspondientes a Trichoderma koningui, se
han desarrollado metodologas de multiplicacin masiva de este antagonista teniendo como
resultado en el campo una reduccin casi total de la enfermedad, especialmente si se
retiran las mazorcas enfermas de la plantacin (35).

En el Centro de Investigaciones de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la ESPE se


han realizado varias investigaciones a nivel de campo para evaluar la eficiencia de
bacterias epifitas en el control de la moniliasis del cacao. Se realiz un muestreo en 21
localidades del Ecuador, obteniendo 256 bacterias, de estas se identificaron y clasificaron 3
bacterias que inhibieron la germinacin de esporas y formacin de micelio de M. roreri,
estas fueron: Bacillus subtilis, Pseudomonas cepacia y Pseudomonas putida (36).

21
En campo se determin el efecto de estas tres bacterias antagonistas cultivadas en medios
lquidos en el control de Moniliophthora roreri del cacao en el cultivar CCN - 51 y en el
cultivar nacional Tenguel - 25. Bajo estas condiciones B. subtilis y P. cepacia redujeron
significativamente la enfermedad, en un 66 y 34 %, respectivamente en CCN 51 y en un
46 y 47 % en cacao Nacional en relacin con el testigo absoluto (36).

Recientes investigaciones usando biopreparados formulados en turba, demostraron que P.


cepacia y B. subtilis, redujeron la incidencia de M. roreri en un 76 y 86 %, respectivamente
en comparacin con el control negativo (37). Los datos obtenidos en estos estudios
demuestran que estas bacterias epfitas usadas como biopesticidas y aplicados
preventivamente, controlan eficientemente a M. roreri en campo, lo cual permitir
introducir el uso de biopesticidas en el manejo integrado de cacao (36)

Segn los trabajos de Phillips et al., (38), en Colombia se encuentra la mayor poblacin de
agentes de biocontrol, surgidos por coevolucin, por ser el centro de origen de M. roreri.
Sin embargo, se debe tener en cuenta que la eficiencia del control por parte de estos
agentes est sujeta a la cantidad de inculo establecido en el lugar (8) y en el caso
especfico de las reas cacaoteras, la mayora tiene niveles de poblacin del patgeno
superiores en nmero a las del agente de biocontrol; por lo tanto, aunque los antagonistas
se encuentran ejerciendo su accin, sta se hace insignificante o imperceptible para el
agricultor.

La bsqueda de biocontroladores de M. roreri se ha enfocado hacia las especies de los


gneros Trichoderma y Clonostachys. Sin embargo, se resalta tambin la posibilidad de
encontrar bacterias como efectivos agentes de biocontrol en el cultivo de cacao. En los
cultivos de cacao existen microorganismos nativos que muestran capacidad para actuar
como biocontroladores de M. roreri. A diferencia de los frutos, el suelo representa una
fuente ms diversa de microorganismos nativos, entre los cuales segn las pruebas in vitro
se encuentran antagonistas que representan una alternativa muy promisoria para el control
biolgico de M. roreri (7).

22
CAPTULO III
METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN

23
3.1. Localizacin.

La presente investigacin se desarrollar en cultivares de cacao nacional de La Asociacin


de productores La Cruz, ubicada en la parte central de la cuenca Hidrogrfica del Ro
Guayas, especficamente en el municipio de Mocache, en el Km. 14 de la va Mocache
Jauneche, asentada sobre territorios topogrficamente irregulares a una altura promedio de
65 msnm.

3.2. Tipo de investigacin.

La investigacin es de tipo Exploratorio en el periodo de aislamiento y ultiplicacin de los


microorganismos nativos de la zona de Mocache sobre el control biolgico de la Monilla
(Moniliphthora roreri) con base en el muclago y mazorcas de cacao colonizadas por M.
roreri. El Proyecto tributa a la lnea de investigacin Agrcola 2: Desarrollo de
conocimiento y tecnologas de agricultura alternativa aplicable a las condiciones del
trpico hmedo y semihmedo del Litoral Ecuatoriano.

3.3. Mtodos de investigacin.

Se realizar con el mtodo de investigacin experimental en la fase de multiplicacin de


los microorganismos nativos sobre el control biolgico de la Monilla (Moniliphthora
roreri) y en la evaluacin los parmetros sanitarios y productivos.

3.4. Fuentes de recopilacin de informacin.

Los datos experimentales sern obtenidos directamente de las muestras en el sitio


experimental o fuente primaria de informacin. Igualmente se contrastaran los resultados
con valores de investigaciones similares disponibles en revistas indexadas, tesis y libros o
fuentes secundarias de informacin.

24
3.5. Diseo de la investigacin.

El diseo experimental empleado ser de bloques completos al azar (DBCA) con ocho
tratamientos y tres rplicas; cada repeticin contar con diecisis (16) unidades
experimentales de las cuales se har uso de cuatro (n=4) ya que los bordes no sern
evaluados.

3.5.1. Tratamientos bajo estudio.

Se evaluaran diferentes bio-preparados contra M. roreri con base en el muclago y


mazorcas de cacao con el fin de obtener los mejores parmetros productivos, se detallan en
el cuadro 2.

Cuadro 2. Tratamientos bajo estudio

Tratamiento Descripcin
T0 Control testigo
T1 Control qumico
T2 Sustrato rico en m.n. + melaza + agua
T3 Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + mazorca infectada con m.
T4 Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + muclago
T5 Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + mazorca infectada con m + muclago
T6 Muclago + melaza
T7 Muclago + melaza + mazorca infectada con m.
T: tratamiento; m.n.: mocroorganismos nativos; m: Moniliphthera roreri.
Elaboracin: Autora

3.5.2. Anlisis de la varianza.


Tabla 1.ADEVA
Fuente de Variacin Grados de Libertad
Tratamientos t-1 7
Bloques b-1 2
Error experimental (t-1)(b-1) 14
Total (t*b)-1 23
3.5.3. Modelo matemtico de la investigacin.

El modelo matemtico a seguir est determinado de la siguiente forma:

Yij = + Ti + Bj + ij

25
Dnde:

Yij = Observacin del efecto deseado en la unidad experimental


= Efecto de la media general
Ti = Efecto del Tratamiento
Bj = Efecto del Bloque
ij = Efecto aleatorio del error experimental

3.6. Instrumentos de investigacin.

Como instrumentos de investigacin se analizarn los parmetros o variables sanitarias y


productivas, estos sern registrados mediante observacin para generar informacin. Cada
una de estas se describe a continuacin:

3.6.1. Variables Sanitarias.

3.6.1.1. Nmero de mazorcas enfermas (NME).

El registro de esta variable se realizar mediante el conteo de todas las mazorcas atacadas
por monilla M. roreri.

3.6.2. Variable Productiva.

3.6.2.1. Nmero de mazorcas sanas (NMS).

El registro de esta variable, se efectuar realizando el conteo de cada una de las mazorcas
sanas por planta.

3.7. Procedimiento experimental.

Tratamiento 0. Control testigo

Este tratamiento control servir como referencia.

Tratamiento 1. Control Qumico

26
En el control qumico se utilizar CUPROFIX que es un fungicida ditiocarbamato e
inorgnico, eficaz para la proteccin contra una amplia gama de enfermedades fungosas y
bacteriales, que acta en forma preventiva y tiene accin inmediata y prolongada sobre
cultivos como: Caf, cacao, mango, tomate, papa, etc. (39)

3.7.1. Obtencin y fermentacin de biopreparados (tratamientos) microbiolgicos en


medio pastoso y lquido.

Tratamiento 2. Sustrato rico en m.n. + melaza + agua.

Para este tratamiento se seleccionar 1.5 Kg de sustrato o suelo rico en microorganismos,


es decir el suelo que ha sido saturado con muclago fermentado de cacao por un tiempo
considerable, despus lo colocaremos en los biodigestores anaerbicos, previamente
rotulados, junto a 20 ml de melaza (tipo comercial, como fuente de carbohidratos) y 1480
ml de agua destilada.

Tratamiento 3. Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + mazorca infectada con


monilla

Es de similar elaboracin al tratamiento 1, a diferencia que este lleva 0.5 Kg de partes de


mazorcas de cacao infectadas de M. roreri y trituradas en partculas pequeas para ser
agregadas en 1 Kg del sustrato (igual al anterior), ms 20 ml de melaza y 1480 ml de agua
destilada.

Tratamiento 4. Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + muclago

Para este necesitaremos 480 ml de muclago de cacao al 100%, el cual ser extrado
mediante el mtodo de obtencin del exudado Por gravedad y ser agregado en 1.5 Kg
de sustrato (igual al anterior), ms 20 ml de melaza y 1000 ml de agua destilada. Siguiendo
el procedimiento del tratamiento 1.

Tratamiento 5. Sustrato rico en m.n. + melaza + agua + mazorca infectada con


monilla + muclago.

Para este tratamiento necesitaremos 1 Kg de sustrato, ms 20 ml de melaza, ms 1000 ml


de agua destilada, ms 0.5 Kg de mazorcas contaminadas trituradas y 480 ml de muclago.
Siguiendo el procedimiento del tratamiento 1.

Tratamiento 6. Muclago + melaza

27
En este tratamiento utilizaremos 480 ml del muclago al 100% junto a 20 ml de melaza.

Tratamiento 7. Muclago + melaza + Mazorca infectada con monilla

En este se necesitar de 480 ml del muclago al 100% junto a 20 ml de melaza y 0.5 Kg de


mazorca contaminadas triturada.

Luego de tener nuestros biodigestores listos con los ingredientes agitaremos con el fin de
homogenizar la mezcla y almacenaremos en un lugar oscuro y fresco por un periodo de 15
das. Pasado dicho periodo de tiempo, este producto ser finamente filtrado y diluido en
relacin 1:20 (1 parte de producto y 20 partes de agua), para ser aplicado en la plantacin.

De cada tratamiento se preparar 3 repeticiones. Luego de extrados los bio-preparados, se


sometern a anlisis de pH, estos anlisis se los realizara en el laboratorio de Bromatologa
de la Facultad de Ciencias Pecuarias de la Universidad Tcnica Estatal de Quevedo.

3.8. Tratamientos de los datos.

Para organizar los datos obtenidos en campo se har uso del software Microsoft EXCEL.
Para el anlisis estadstico de los resultados se utilizar el programa estadstico
computarizado SAS, versin 9.0 (40). Los resultados experimentales se analizarn
empleando el procedimiento de los modelos lineales general (GLM por sus siglas en
ingls), y las diferencias de medias sern comparadas usando la prueba de Tukey (p<0.05).

3.9. Recursos humanos y materiales.

Talento humano que contribuir en la realizacin del presente proyecto de investigacin:

Director del Proyecto de Investigacin Dr. Julio Csar Vinueza Galrraga

Co-Director del Proyecto de Investigacin Ing. Germn Jcome Lpez

Estudiante Valeria Estefana Bastidas Ruz

Se utilizar los siguientes Materiales:

Materiales Biolgicos

28
Muclago

Sustrato rico en microorganismos

Mazorcas de cacao contaminadas con M. roreri

Agua destilada

Melaza comercial

Otros Materiales

Cuprofix (fungicida) Triturador casero

Bombas de mochila Tamiz de acero inoxidable

Mandil Embudo

Guantes Cuchillos

Mascarilla Fundas

Biodigestores anaerbicos Cuaderno de apuntes

Ligas de caucho Computadora

29
CAPTULO IV
RESULTADOS ESPERADOS
4.1. Resultados esperados

Se espera que al menos uno de los tratamientos en estudio muestren resultados


significativos en el control de la Monilla.

Desarrollar y validar metodologas de uso, preparacin y aplicacin de biopreparados


para el control de Monilla.
CAPTULO V
BIBLIOGRAFA
5.1. Bibliografa
1. Rosero J. La ventaja comparativa del cacao ecuatoriano. Apuntes de Economa
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el biocontrol de hongos patgenos de cacao. Universidad Estatal Amaznica ;
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4. IDIAF. Instituto Dominicano de Investigaciones Agropecuarias y Forestales.


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Salvador, Centroamerica: Universidad de El Salvador, Facultad de Qumica y
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40 STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM. Versin 9.0. Users guide. Cary, Estados


. Unidos; 2004.
CAPTULO VI
ANEXOS
6.1. Cronograma de actividades

Febrero Marzo Abril Mayo Junio

Actividades 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

Seleccin del tema X

Anlisis de la propuesta investigativa X

Revisin literaria X X

Elaboracin del anteproyecto X

Presentacin del anteproyecto X

Elaboracin del proyecto de tesis X

Aprobacin de proyecto de tesis X X

Investigacin del trabajo de campo X X X X X X X X

Tabulacin de registros de campo X X X X X X

Anlisis de datos y resultados X X

Redaccin de tesis de grado X X X

Correccin de tesis X X

Defensa de tesis X
Firma de responsabilidad del Firma de responsabilidad del Docente
Aspirante Auspiciante
Nombres: Valeria Bastidas Ruiz Nombre: Julio Csar Vinueza Galrraga
C.C.: 1205682246 C.I.: 1709164980

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