3.

MTODOS ANLITICOS

ANLISIS DE LA COMPOSICIN DE LOS ACEITES

Los aceites esenciales son mezclas que pueden llegar a ser muy
complejas, por lo que la identificacin de sus componentes no es una tarea
simple; Anteriormente, esta identificacin se converta en una larga y tediosa
operacin, que consuma muchsimo tiempo, ya que requera el aislamiento y
purificacin de cada componente (utilizando, por ejemplo, cromatografa en capa
fina, cromatografa en columna, destilacin fraccionada, etc) y su posterior
determinacin estructural por mtodos tradicionales (obtencin de derivados,
reacciones de coloracin, pruebas de grupos funcionales, etc).

En las ltimas dcadas, el desarrollo de tcnicas instrumentales de anlisis y

su acoplamiento a sistemas informticos y bases de datos, ha cambiado
sustancialmente el panorama, agilizando de forma notable la identificacin de los
componentes de las esencias, han contribuido especialmente a este cambio, el
desarrollo de tcnicas como:

Tcnicas cromatogrficas de alta resolucin, principalmente la

cromatografa de gases con columnas capilares.
Tcnicas espectroscpicas, particularmente la espectrometra de
masas (EM), la espectroscopia infrarroja (IR) y la espectroscopia de
resonancia magntica nuclear (RMN).
Sistemas cromatogrficos acoplados a tcnicas espectroscpicas,
especialmente la cromatografa de gases acoplada a la espectrometra de
masas (CG-MS) y la cromatografa de gases acoplada a la espectroscopia
infrarroja (CG-FTIR)[5].

3.1. Cromatografa en fase gaseosa

La cromatografa de gases es una tcnica de separacin basada principalmente

en fenmenos de particin entre una fase mvil gaseosa (helio, argn,
hidrgeno, nitrgeno) y una fase estacionaria constituida por un lquido muy
viscoso retenido en el interior de una columna cromatogrfica. La columna se
coloca en un horno con temperatura regulable y programable, lo que nos permite
influir de forma decisiva en la separacin de los componentes de la mezcla.
El cromatgrafo se completa con un sistema de inyeccin, que nos
permite introducir la muestra en la columna y un detector que muestra las
diferentes sustancias a medida que van saliendo de la columna, una vez
separadas. Las columnas cromatogrficas utilizadas actualmente son de tipo
capilar: estn constituidas por un tubo de cuarzo flexible de dimetro muy
pequeo (normalmente 0.25 mm) y muy largo (25 a 60 m, hasta 200 m);
proporcionan alta resolucin y permiten separar las mezclas multicomponentes
de sustancias de diversa polaridad y/o peso molecular (monoterpernos,
sesquiterpenos, etc)

3.2. Cromatografa en fase gaseosa acoplada a espectrometra de

masas

Es un mtodo muy adecuado para la identificacin debido a que los

componentes del aceite son compuestos voltiles y de bajo peso molecular. La
esencia se inyecta directamente en el cromatgrafo, sin ningn tratamiento
previo, lo cual elimina posibles modificaciones en la composicin de la muestra
o en la estructura de sus constituyentes debidas a pretratamiento.
No se eliminan las alteraciones debidas a la temperatura de anlisis, que
puede afectar componentes termosensibles. En el cromatgrafo, los
componentes de la esencia se separan, tras lo cual penetran en el espectrmetro
de masas, que permite registrar el correspondiente espectro de cada una de las
sustancias separadas. Los constituyentes del aceite esencial se identifican
gracias a los diferentes patrones de fragmentacin que se observan en sus
espectros de masas.
La CG-EM permite realizar en una sola operacin, para una muestra del
orden de 1 L, un anlisis cualitativo junto con una indicacin de las proporciones
en las que se encuentran componentes. Cuando se dispone de sustancia patrn,
la calibracin del equipo permite un anlisis cuantitativo exacto de la muestra.
Es posible determinar ndices de retencin en el CG-EM, pero estos pueden no
ser comparables con los bibliogrficos, que generalmente se han obtenido con
cromatgrafos no acoplados a un espectmetro
 3.3. Espectrometra de masas
La identificacin de los componentes de los aceites esenciales se realiza
con base en sus espectros de masas (EM), obtenidos por impacto electrnico
y/o por ionizacin qumica. Varios analizadores msicos (magntico,
cuadrupolar, de trampa inica) se utilizan en espectrmetros de masas
acoplados a cromatgrafos de gases.
En los ltimos aos los detectores de trampa inica se emplean cada vez
con ms frecuencia en los estudios de mezclas complejas, incluyendo los aceites
esenciales, sobre todo cuando se requiere alta sensibilidad en los anlisis. En
un espectro de masas, se observa, en abscisas, la relacin masa/carga (m/z) de
los iones formados al fragmentarse la molcula y en las ordenadas, la intensidad
(abundancia) de cada uno de los iones formados. Dado que la carga suele ser
unitaria, m/z corresponde generalmente a la masa de los fragmentos inicos[5].
Las masas de los iones formados a partir de los terpenos, principales
constituyentes de los aceites esenciales, son bastante parecidas. Sin embargo
difieren en su abundancia lo cual permite su identificacin

Extraccin del aceite:

En el baln de tres bocas
contiene el solvente, que por el calor se
evapora y llegan al refrigerante que los
condensa y el lquido cae en gotas
sobre la materia prima contenida en el
papel filtro. Cuando el condensado
alcanza la altura del sifn refluye al
matraz arrastrando consigo las
sustancias de aceite de la materia
prima. La temperatura es de 96C.
 Proceso de purificacin:
3.4. DESTILACIN:
Es la operacin de separar,
mediante calor, los diferentes
componentes lquidos de una mezcla,
aprovechando las diferencias de
volatilidades de los compuestos por
separar

3.5. LA EXTRACCIN POR ARRASTRE DE VAPOR DE AGUA

Consta de elementos y equipos tales como: generador de vapor, extractor,

condensador y separador.

Esta tcnica es muy utilizada a nivel industrial por varias razones: los aceites
esenciales estn constituidos qumicamente por terpenoides y fenilpropanoides
compuestos que son voltiles y por lo tanto arrastrables por vapor de agua, tiene
un alto rendimiento, se obtiene un aceite muy puro, se puede procesar grandes
cantidades del material vegetal y no se requiere utilizar tecnologa muy
sofisticada.
 PROCEDIMIENTO
La muestra vegetal generalmente fresca y cortada en trozos pequeos,
es encerrada en una cmara inerte y
sometida a una corriente de vapor de
agua sobrecalentado, la esencia as
arrastrada es posteriormente
condensada, recolectada y separada de la
fraccin acuosa.
Por efecto de la temperatura del
vapor (100 C) en un cierto tiempo, el
tejido vegetal se rompe liberando el aceite
esencial. Adicionalmente el aceite
esencial debe de ser insoluble en agua, ya que despus del condensador, en el
separador debe de formarse dos fases: una de aceite esencial y otra de agua. Si
el aceite esencial presenta componentes solubles en agua estos quedarn en la
fase acuosa que puede comercializarse como tal: agua de rosas, agua de jazmn.