Anlise espectrofotomtrica

Introduo a espectroscopia
Absoro atmica
Anlise por UV-vis
Anlise por infra-vermelho
 A onda eletromagntica resulta da associao
de um campo eltrico alternado com um
campo magntico.

300 Visvel 800

Raios
Raios csmicos gama Raios X UV IR Microondas Ondas de rdio

10-6 10-5 10-4 10-3 10-2 10-1 1 10 102 103 104 105 106 107 108 109 1010 1011 1012

Energia Comprimento de onda

 PARMETROS
ONDULATRIOS

PERODO (p, 1/) tempo requerido, em segundos, para a

passagem de mximos ou mnimos sucessivos por um ponto fixo
no espao.

FREQNCIA () nmero de oscilaes do campo que

ocorrem por segundo 1/p depende da fonte Hz ou
ciclos/s ou s-1

VELOCIDADE (vi) velocidade com que a onda se move no

meio depende da freqncia e do meio vi =

no vcuo e no ar c=3,00x108 m/s

 PARMETROS
ONDULATRIOS

COMPRIMENTO DE ONDA ()

distncia linear entre dois mximos ou mnimos

sucessivos de uma onda cm, m, nm

NMERO DE ONDA (, )

nmero de ondas por centmetro de percurso no vcuo

cm-1
 PARMETROS CORPUSCULARES

A radiao eletromagntica um conjunto de

partculas (ftons) de determinada freqncia

A energia deste fton dada pela equao

E=h
E = energia (unidade = erg)
h = 6,624x10-24 erg.s
= freqncia
Interao da Radiao Eletromagntica com
a Matria
Quantizada

ABSORO DE RADIAO
processo no qual energia eletromagntica transferida para
tomos, ons ou molculas que compem a amostra
Interao da Radiao Eletromagntica com
a Matria

No Quantizada

Reflexo
Refrao
Disperso
Espalhamento
 A espectroscopia o estudo da interao da
radiao eletromagntica com a matria.
Espectro a representao bidimensional da
fora de interao vs. Energia.
Espectroscopia vs. Espectrometria: informao
geral vs. Informao quantitativa.
 EMISSO versus ABSORO
Einstein, na dcada de 20, identificou trs processos
atravs dos quais um tomo pode passar de um estado
para o outro. Se o tomo estiver no estado
fundamental necessrio fornecer a ele a energia
certa para que ele passe ao estado excitado. Essa
energia deve ser exatamente a diferena entre as
energias dos dois estados.
Uma forma de fornecer essa energia fazer incidir um
feixe de luz sobre o tomo. Se a energia de um fton
constituinte da luz for exatamente igual diferena de
energia entre os dois estados do tomo, ele pode
absorver esse fton e passar do estado fundamental
para o estado excitado.
 Mtodos Espectromtricos

Absoro de radiao na regio UV, visvel e

infravermelho;
Colorimetria;
Turbidimetria;
Fluorimetria;
Absoro atmica e emisso de chama;
Espectrometria de massa;
Ressonncia nuclear e magntica.
ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO
MOLECULAR NO
ULTRAVIOLETA-VISVEL

Mtodo baseado na medida da energia

eletromagntica absorvida por solues inicas ou
moleculares

Incidncia da radiao monocromtica sobre meio

homogneo

Refletida
Absorvida
Transmitida
Io = Feixe incidente
I = Feixe transmitido
PORQUE OCORRE O FENMENO DA ABSORO?

Molculas que apresentam eltrons que podem ser

promovidos a nveis de energia mais elevados mediante a
absoro de energiaTRANSIES ELETRNICAS

TRANSIES ELETRNICAS

TRANSIES ELETRNICAS:
Eltrons: p, e n (compostos orgnicos)
Eltrons: d and f electrons (compostos inorgnicos)
APLICAES DA ESPECTROFOTOMETRIA
ULTRA-VIOLETA

Anlise de conservantes (cidos benzico e srbico)

Caracterizao de leos e gorduras

Grau de oxidao de leos e gorduras

Anlise de micotoxinas (Aflatoxinas)

Analise de clorofila e pigmentos naturais e artificiais
 Absorbtividade molar

Absorbtividade molar (absorvidade molar ou absortividade

molar), tambm conhecida como coeficiente de extino molar
a capacidade que um mol de substncia em absorver luz a um
dado comprimento de onda, ou em outras palavras, o quo
fortemente uma substncia absorve radiao a uma
determinada frequncia desta.
 uma propriedade intrnseca das substncias; a absorbncia
real, A, de uma amostra dependente do comprimento l e a
concentrao c da espcie via a lei de Beer-Lambert:

uma propriedade intrnseca das substncias; a absorbncia real, A, de uma amostra

dependente do comprimento l e a concentrao c da espcie via a lei de Beer-
Lambert:

As unidades de so usualmente em M1cm1 ou L mol1cm1.

A absortividade molar depende da substncia, do comprimento de onda utilizado

(pois substncias podem ter diferentes absores para diferentes comprimentos de
onda), da temperatura e do solvente no qual esto dissolvidas
 Diversas substancias e mixturas absorvem luz ultravioleta (UV) ou visvel (Vis.). O
diagrama embaixo mostra um feixe de radiao monocromtica de potencia
rdiante P0, atravessando uma amostra de soluo. Ao atravessar a amostra, parte
da intensidade absorvida e o feixe de radiao que deixa a amostra ter ento
potencia P.

A quantidade de radiao absorvida pode ser medida de diversas formas:

Transmitncia, T = P / P0
Transmitncia % , %T = 100 T
Absorbncia,
A = log10 P0 / P
A = log10 1 / T
A = log10 100 / %T
A = 2 - log10 %T
 Cromforos
Um grupo cromforo a parte ou
conjunto de tomos de uma molcula
responsvel por sua cor, ou
substncia que tem muitos eltrons
capazes de absorver energia ou luz
visvel, e excitar-se para assim emitir
diversas cores, dependendo dos
comprimentos de onda da energia
emitida pelo cmbio de nvel
energtico dos eltrons, de estado
excitado a estado basal.

Os cromforos se apresentam quase sempre em uma

de duas formas: sistemas conjugados pi ou complexos
metlicos.
 A relao entre absorvncia e transmitncia ilustrada no
diagrama seguinte, onde colocamos as escalas de cada uma:

Ento, se a luz passa atravs de uma soluo sem absoro

nenhuma, a absorbncia zero, e a transmitncia percentual
100%. No caso em que toda a luz absorvida, a transmitncia
percentual zero e a absorbncia infinita.
 A lei de Beer-Lambert

Absorbncia diretamente proporcional aos parmetros, desde que sejam dadas

as condies experimentais para que a lei seja vlida.
A equao A = .l.c mostra que a absorbncia depende da quantidade total de
substncia absorvedora que h no caminho tico atravs da cuba com a soluo.
Se plotamos a absorbncia versus concentrao, teremos uma reta que passa pela
origem do grfico, o ponto (0,0).
 Curva padro
A curva-padro corresponde relao grfica entre os valores de
absorbncia (A) e os de concentrao. Com base na anlise grfica
possvel verificar a linearidade da reao e calcular um fator de
converso de valores de absorbncia em concentrao.

Pode-se determinar a concentrao de uma soluo

pela seguinte relao:
====================
Cd = Ad X FC
====================
Onde: Cd - concentrao do desconhecido
Ad - absorbncia do desconhecido
FC (fator de calibrao) mdia dos valores de
Cp/Ap
Ap - absorbncia do padro
Cp - concentrao do padro
 A temperatura determina o grau com que uma
amostra se decompe em tomos e a
probabilidade de um determinado tomo
estar no estado fundamental, excitado, ou
ionizado.
Na espectroscopia de emisso a estabilidade
da chama um fator crtico para bons
resultados.
Na espectroscopia de absoro um fator
importante, porm no crtico.
Diferentes formas de espectroscopia atmica.
Um fton de uma certa energia Eincide sobre um tomo que
est no estado fundamental. Se a energia Edo fton for
exatamente igual diferena entre a energia do estado
excitado, E2, e a energia do estado fundamental, E1, isto , E =
E2- E1, o tomo pode absorver o fton e passar do estado de
menor para o estado de maior energia.
Um tomo excitado, normalmente, no fica muito tempo nesse estado. A no
ser que algum fator externo o impea, depois de um tempo muito curto ele
volta ao estado fundamental. Alguns estados excitados, porm, podem ter vida
mais longa e so chamados de meta-estveis.
 Na espectrometria de fluorescncia, os tomos
ou molculas que so excitados a altos nveis de
energia podem cair a nveis mais baixos, emitindo
radiao (emisso ou luminescncia).
 Na absoro , os tomos absorvem parte da luz
proveniente da fonte e a luz no absorvida chega ao
detector.
Os tomos responsveis pela emisso so aqueles
que esto em um estado excitado devido a alta
energia trmica da chama.
Na fluorescncia, os tomos so excitados por uma
lmpada externa ou por um laser e um tomo
excitado pode decair para um estado de menor
energia emitindo radiao.
 Os espectros de absoro ptica de lquidos e
slidos tm larguras de banda de cerca de
100nm.
 Um espectro proveniente de tomos no
estado gasoso constitudo por linhas finas
com larguras de banda de cerca de 0,001 nm,
resultando na inexistncia de superposies
entre os espectros de elementos diferentes.
 Espectroscopia atmica
- O analito decomposto em tomos por meio
de uma chama, forno ou plasma.
- A quantidade presente determinada pela
absoro ou emisso de radiao visvel ou
ultravioleta, pelos tomos no estado gasoso.
Intensidade
 As amostras so vaporizadas: 2000 8000 K
decompondo-se em tomos.
Anlise de traos: ppm, ppb e ppt.
Amostras diluidas.
Preciso de 1 a 2%.
 Lmpadas de ctodo oco

O ctodo feito do elemento cujas linhas de

emisso so desejadas.
Uma lmpada diferente normalmente necessria
para cada elemento a ser determinado.
 Na AAS a chama substitui a cubeta na
espectrofotometria tradicional.

A sensibilidade e a
interferncia dependem
dos detalhes da
atomizao.

Queimador por mistura

prvia.
 Temperaturas mximas de chama
Combustvel Oxidante Temperatura (K)
Acetileno Ar 2 400 2 700
Acetilento xido nitroso, N2O 2 900 3 100
Acetilento Oxignio 3 300 3 400
Hidrognio Ar 2 300 2 400
Hidrognio Oxignio 2 800 3 000
Cianognio NC-CN Oxignio 4 800
 O forno de grafita oferece uma maior
sensibilidade pela introduo de menos
amostra.

Na chama o tempo de residncia

do analito no caminho ptico < 1s
quando ele ascende a chama.
No forno de grafita a amostra
confinada no caminho ptico por
vrios segundos.
Na chama o volume mnimo de
amostra de 1 a 2 mL, enquanto no
forno 1 L suficiente.
 Plasma acoplado indutivamente
O plasma duas vezes mais quente que a
chama de combusto ( 6 000 10 000 K).
A temperatura mais elevada, a estabilidade e
o ambiente quimicamente inerte da atmosfera
de Ar eliminam a maioria das interferncias.
O tempo de residncia do analito na chama
maior.
Queimador de plasma

Nebulizador Ultra-snico diminui

o limite de deteco de analtos.
 ICP MS
O plasma direcionado para um espectrmetro
de massas, que separa e mede os ons pela
razo massa carga (m/z).
 WILHELM ROENTGEN DESCOBRE OS
RAIOS-X
Laboratrio de Roentgen no Instituto
de Fsica de Wrzburg.

O primeiro Nobel de Fsica foi concedido em 1901, muito merecidamente, a Wilhelm

Conrad Roentgen, ento com 56 anos.