MICROBIOLOGIA

AGROINDUSTRIAL
Alejandro Coloma P.

PARTE 1

i
 TABLA DE CONTENIDOS

CAPITULO 1. GENERALIDADES Y DESARROLLO

HISTTICO DE LA MICROBIOLOGIA 1

1.1. Generalidades 1

1.2. Desarrollo histrico de la microbiologa 2

1.2.1. Primeras observaciones de los microorganismos (Leeuwenhoek y sus
microscopios) 2
1.2.2. Origen de los microorganismos (Teora de la generacin espontnea) 2
1.2.3. La fermentacin como proceso biolgico (Pasteur y el vino francs). 4
1.2.4. Descubrimiento de la funcin de los microorganismos como causantes
de enfermedades (Koch y la bacteria del carbunco) 5
1.2.5. Desarrollo en la prevencin de enfermedades (Lister y el fenol; Pasteur
y las gallinas; Fleming y el hongo contaminante) 6
1.2.6. Microbiologa y gentica (Neumococos, doble hlice e ingeniera
gentica) 9

CAPITULO 2. OBSERVACION DE LOS

MICROORGANISMOS: EL MICROSCOPIO,
PREPARACION Y EXAMEN DE MUESTRAS 12

2.1. El microscopio 12
2.1.1. Microscopio ptico 12
2.1.2. Microscopio electrnico 13

2.2. Microscopia ptica 14

2.3. Observacin de los microorganismos 15

2.3.1. Tcnicas de tincin 15

2.4. Tincin de Gram 16

CAPITULO 3. LA CELULA PROCARIOTICA:

ESTRUCTURA Y FUNCION 19

3.1. Bacterias 19

3.2. Morfologia de las bacterias 19

3.3. Ultraestructura de las bacterias 20

3.3.1. Glicocalix 21
3.3.2. Pared celular 21
3.3.3. Membrana citoplasmtica 23
3.3.4. Area citoplsmica 24
3.3.5. Area nuclear 24

ii
3.3.6. Flagelos 25
3.3.7. Fimbrias o pili 25
3.3.8. Endoesporas bacterianas 26

3.4. Reproduccin de las bacterias 26

3.5. Clasificacin de las bacterias 27

3.5.1. Reaccin Gram 27
3.5.2. Clasificacin de Bacterias por Familia 27

CAPITULO 4. LA CELULA EUCARIOTICA:

ESTRUCTURA Y FUNCION 45

4.1. Cilios y flagelos 45

4.2. Pared celular 45

4.3. Membrana citoplsmica 45

4.4. Orgnulos celulares 46

CAPITULO 5. MOHOS Y LEVADURAS 50

5.1. Hongos 50
5.1.1. Mohos 50
5.1.2. Clasificacin de mohos 51

5.2. Levaduras 55
5.2.1. Estructura 55
5.2.2. Reproduccin de las levaduras 55
5.2.3. Clasificacin 56

CAPITULO 6. NUTRICION MICROBIANA 60

6.1. Nutricin de los microorganismos 60

6.2. Nutrientes 60
6.2.1. Macronutrientes 60
6.2.2. Micronutrientes (c.a. 0,2 g / l) 61
6.2.3. Vitaminas y hormonas 61
6.2.4. Elementos traza (c.a. 25 mg / l) 62

6.3. Permeabilidad y transporte 62

CAPITULO 7. CULTIVO DE LOS MICROORGANISMOS:

MEDIOS DE CULTIVO 65

7.1. Diseo de los medios de cultivo 65

iii
7.2. Tipos de medios de cultivo 67
7.2.1. Estado: 67
7.2.2. Composicin: 67

7.3. Aislamiento de microorganismos en cultivo puro 68

CAPITULO 8. CRECIMIENTO MICROBIANO 72

8.1. Tiempo de generacin 72

8.2. Clculo del tiempo de generacin 72

8.3. Curva de crecimiento 74

8.4. Crecimiento sincrnico 74

8.5. Cultivo contnuo 75

8.6. Determinacin del crecimiento microbiano 75

8.7. Efecto de los factores ambientales sobre el crecimiento 76

8.7.1. Temperatura 76
8.7.2. pH 76
8.7.3. Agua 76
8.7.4. Oxgeno 77

CAPITULO 9. CONTROL DE LAS POBLACIONES

MICROBIANAS: ESTERILIZACION Y DESINFECCIN 82

9.1. Definiciones y conceptos 82

9.2. Muerte de las poblaciones microbianas y curvas de supervivencia 83

9.3. Condiciones que influyen en la accion antimicrobiana 83

9.4. Agentes esterilizantes fsicos 84

9.4.1. Altas temperaturas 84
9.4.2. Bajas temperaturas 85
9.4.3. Radiaciones 85
9.4.4. Filtracin 86
9.4.5. Desecacin 86

9.5. Agentes esterilizantes qumicos 87

9.5.1. Desinfectantes y antispticos 87
9.5.2. Inorgnicos 87
9.5.3. Orgnicos 89

9.6. Evaluacin de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y

antispticos 89

iv
CAPITULO 10. METABOLISMO MICROBIANO 93

10.1. Concepto de metabolismo 93

10.2. Clasificacin de los organismos segn su fuente de carbono y

energa 93

10.3. La energa y el poder reductor en el metabolismo microbiano: papel

del ATP y de los piridin nucletidos. 94

10.4. Mecansmos de obtencin de ATP 95

CAPITULO 11. MICROORGANISMOS HETEROTROFOS 100

11.1. Mecanismos de obtencin de energa por microorganismos

quimioheterotrofos 100
11.1.1. Fermentacin 100
11.1.2. Respiracin aerbica (Rutas de utilizacin del piruvato por aerobios) 101

CAPITULO 12. MICROORGANISMOS AUTOTROFOS 106

12.1. Mecanismos de obtencin de energa por microorganismos

autotrofos 106
12.1.1. Sntesis de metabolitos precursores: Ciclo de Calvin-Benson 106
12.1.2. Sntesis de ATP y piridn nucletidos reducidos 106

CAPITULO 13. BIOSNTESIS 111

13.1. Biosntesis 111

13.1.1. Sustancias nitrogenadas 111
13.1.2. Carbohidratos 113
13.1.3. Lpidos 114

CAPITULO 14. ECOLOGIA MICROBIANA 116

14.1. Microbiologia del suelo 116

14.2. Microbiologa del aire 116

14.3. Microbiologa del agua 117

14.4. Agua de consumo humano 117

14.5. Microbiologa de los alimentos 118

CAPITULO 15. CARACTERISTICAS GENERALES DE LOS

VIRUS (I) 120

v
15.1. Estructura 120

15.2. Clasificacin y nomenclatura de los virus 120

15.3. Caractersticas generales de los virus (ii) 121

15.3.1. Replicacin de los virus animales 121
15.3.2. Replicacin de virus DNA (Herpes simplex virus) 122
15.3.3. Replicacin de virus RNA 122

15.4. Estudio de los virus adn 124

15.4.1. Viruela 124
15.4.2. Varicela 124
15.4.3. Hepatitis B 125

15.5. Estudio de los virus ARN 125

15.5.1. SIDA 125

15.6. Agentes infecciosos no convencionales 127

15.6.1. Viroides 127
15.6.2. Priones 127

15.7. Virus oncogenicos: mecanismos moleculares de oncogenesis viral 128

CAPITULO 16. TOXIINFECCIONES ALIMENTARIAS Y

OTRAS AFECCIONES TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS 136

16.1. Introduccin 136

16.2. Generalidades sobre la etiologa y epidemiologa de las

enfermedades transmitidas por alimentos 136

16.3. Los microorganismos como agentes patgenos transmitidos por

alimentos 137

16.4. Origen de los microorganismos patogenos presentes en los

alimentos: 138

vi
 INDICE DE TABLAS

Tabla 3.1. Principales gneros bacterianos de los alimentos ......................... 28

Tabla 5.1. Principales gneros de mohos de los alimentos .............................. 52
Tabla 5.2. Principales gneros de levaduras en los alimentos ......................... 56

vii
 Capitulo 1. GENERALIDADES Y DESARROLLO HISTTICO DE
LA MICROBIOLOGIA

1.1. Generalidades

Microbiologa, el estudio de los organismos microscpicos, deriva de 3

palabras griegas: mikros (pequeo), bios (vida) y logos (ciencia) que
conjuntamente significan el estudio de la vida microscpica.

Para mucha gente la palabra microorganismo le trae a la mente un grupo de

pequeas criaturas que no se encuadran en ninguna de las categoras de la
pregunta clsica: es animal, vegetal o mineral ? Los microorganismos son
diminutos seres vivos que individualmente son demasiado pequeos como para
verlos a simple vista. En este grupo se incluyen las bacterias, hongos
(levaduras y hongos filamentosos), virus, protozoos y algas microscpicas.

Normalmente tendemos a asociar estos pequeos organismos con infecciones,

enfermedades como el SIDA, o deterioro de alimentos. Sin embargo, la
mayora de los microorganismos contribuyen de una forma crucial en el
bienestar de la Tierra ayudando a mantener el equilibrio de los organismos
vivos y productos qumicos en nuestro medio ambiente: Los microorganismos
de agua dulce y salada son la base de la cadena alimentaria en ocanos, lagos y
ros; los microorganismos del suelo destruyen los productos de desecho e
incorporan el gas nitrgeno del aire en compuestos orgnicos, as como
reciclan los productos qumicos en el suelo, agua y aire; ciertas bacterias y
algas juegan un papel importante en la fotosntesis, que es unproceso que
genera nutrientes y oxgeno a partir de luz solar y CO2 siendo un proceso
crtico para el mantenimiento de la vida sobre la Tierra; los hombres y algunos
animales dependen de las bacterias que habitan en sus intestinos para realizar la
digestin y sntesis de algunas vitaminas como son la K y algunas del complejo
B. Los microorganismos tambin tienen aplicaciones industriales ya que se
utilizan en la sntesis de productos qumicos como son acetona, cidos
orgnicos, enzimas, alcohol y muchos medicamentos. El proceso de
produccin de acetona y butanol por bacterias fue descubierto en 1914 por
Chaim Weizmann, un polaco que trabajaba en Inglaterra para Winston
Churchill. Cuando estall la primera guerra mundial en agosto de ese ao, la
produccin de acetona era esencial en el proceso de fabricacin de las
municiones, por lo que el descubrimiento de Weizmann jug un papel
determinante en el desarrollo de la guerra. Despus de la guerra, rehus todos
los honores que le propuso el gobierno britnico. Sin embargo, utiliz su
influencia para que el gobierno britnico ayudara a establecer el estado judo en

1
Palestina. En 1949, Weizmann fue elegido el primer presidente de Israel. La
industria alimentaria tambin usa microorganismos en la produccin de
vinagre, bebidas alcohlicas, aceitunas, mantequilla, queso, yogurt y pan.
Adems, las bacterias y otros microorganismos ahora pueden ser manipulados
para producir sustancias que ellos normalmente no sintetizan. A travs de esta
tcnica, llamada ingeniera gentica, las bacterias pueden producir importantes
sustancias teraputicas como insulina, hormona de crecimiento humana e
interfern.

Actualmente sabemos que los microorganismos se encuentran en todas partes;

pero hace poco, antes de la invencin del microscopio, los microorganismos
eran desconocidos para los cientficos. Miles de personas moran en las
epidemias cuyas causas no se conocan. El deterioro de los alimentos no se
poda controlar siempre y muchas familias enteras moran debido a que no
existan vacunas y antibiticos disponibles para combatir las infecciones.
Nosotros podemos hacernos una idea de como se han desarrollado nuestros
actuales conceptos de microbiologa repasando los acontecimientos histricos
que han cambiado nuestras vidas.

1.2. Desarrollo histrico de la microbiologa

Aunque los microorganismos se originaron hace aproximadamente 4.000

millones de aos, la microbiologa es relativamente una ciencia joven. Los
primeros microorganismos se observaron hace 300 aos y sin embargo pasaron
unos 200 aos hasta que se reconoci su importancia

1.2.1. Primeras observaciones de los microorganismos (Leeuwenhoek y

sus microscopios)

La existencia de los microorganismos no se conoci hasta la invencin del

microscopio. La primera persona en describir los microorganismos en detalle
fue el holands Antony van Leeuwenhoek en 1684, a los cuales denomin
animculos. Leeuwenhoek examin el agua de lluvia, de mar, de ro, saliva y
otras materias. Sin embargo, estas observaciones no condujeron a ninguna
investigacin acerca de las posibles actividades de los microorganismos, ni
como agentes de fermentaciones ni de enfermedades infecciosas ya que el
desarrollo de la qumica y de la medicina era demasiado primitivo.

1.2.2. Origen de los microorganismos (Teora de la generacin

espontnea)

Una vez descubiertos los microorganismos por Leeuwenhoek se empez a

especular sobre el origen de estos animculos. Se formaron dos escuelas. Una
de ellas admita la existencia de estas estructuras pero apoyaban la teora que

2
provenan de la descomposicin de los tejidos de las plantas o animales (eran el
resultados de la descomposicin y no la causa). Los que apoyaban esta teora
crean que la vida se generaba a partir de matera no viva, proceso que se
denomin abiognesis. Bsicamente era el concepto de la generacin
espontnea. Del otro lado estaba la teora de la biognesis. Los animculos se
originaban, como ocurre en formas de vida superiores, a partir de animculos
padres. Hasta que se rechaz la idea de la generacin espontnea se tuvieron
que realizar muchos experimentos que parecen simples hoy en da, pero que en
aquellos momentos llev ms de 100 aos resolver dicha controversia.

La idea de la generacin espontnea se remonta a la cultura griega, los cuales

crean que las ranas y gusanos crecan espontneamente a partir del lodo.
Incluso existan recetas: llenando una tinaja con trapos y colocndola en un
sitio apartado durante semanas al final crecan ratones a partir de los trapos. En
el siglo XVII el italiano Francesco Redi demostr en 1668 que los gusanos
encontrados en la carne podrida eran las larvas que provenan de los huevos
que previamente haban depositado en la carne las moscas y no el producto de
la generacin espontnea. Sin embargo una cosa eran los huevos de moscas y
otra los microorganismos que slo se podan ver con la ayuda del microscopio.

En 1745 John Needham hirvi trozos de carne para destruir los organismos
preexistentes y los coloc en un recipiente abierto. Al cabo de un tiempo
observ colonias de microorganismos sobre la superficie y concluy que se
generaban espontneamente a partir de la carne. En 1769, Lazzaro Spallanzani
repiti el experimento pero tapando los recipientes, no apareciendo las
colonias, lo que contradeca la teora de la generacin espontnea. Pero
Needham argument que el aire era esencial para la vida includa la generacin
espontnea de microorganismos y este aire haba sido excluido en los
experimentos de Spallanzani.

Unos 100 aos despus, en 1836 Franz Schulze pas el aire a travs de unas
soluciones cidas fuertes hacia el interior de un recipiente con carne hervida.
Al ao siguiente Theodor Schwann pas el aire a travs de tubos calientes. Los
microorganismos no aparecan en ningn caso ya que los microorganismos
presentes en el aire haban sido aniquilados. Sin embargo, los que apoyaban la
generacin espontnea comentaban que el cido y el calor alteraban el aire de
tal manera que impeda la generacin espontnea de los microorganismos. Sin
embargo fue Louis Pasteur el que zanj definitivamente la controversia en
1864 al utilizar matraces con un tubo largo y curvado llamados "cuello de
cisne". El aire pasaba libremente a travs del cuello, pero los microorganismos
no aparecan en la solucin ya que las partculas de polvo y microorganismos
sedimentaban en el recodo del cuello. Estos experimentos de Pasteur
promovieron el reconocimiento de la biognesis. Posteriormente Pasteur
empez a estudiar el papel de los microorganismos en la produccin de vino y
como causa de enfermedades.

3
1.2.3. La fermentacin como proceso biolgico (Pasteur y el vino
francs).

Sin duda desde la Prehistoria los hombres utilizan con provecho las
fermentaciones. El pan fermentado se conoce desde hace varios miles de aos.
Los jeroglficos egipcios, as como representaciones grficas en todo el
Prximo Oriente atestiguan que el hombre recurra a la fermentacin para
fabricar bebidas alcohlicas ya varios milenios antes de Jesucristo. Al preparar
el pan, vino, cerveza o sake, los egipcios, sumerios y todas las personas hasta
mediados del Siglo XIX, empleaban sin saberlo, y de una manera emprica, una
familia de agentes biolgicos muy originales: las levaduras. Son ellas las que
realizan la fermentacin alcohlica.

El papel de las levaduras como agentes fermentadores no fue reconocido hasta

1856 por Luis Pasteur. Las teoras cientficas de esa poca reconocan la
presencia de levaduras en la fermentacin alcohlica, pero estas levaduras eran
consideradas como compuestos qumicos complejos, sin vida. Esta era la teora
mecanstica liderada por los qumicos alemanes von Liebig y Whler. Luis
Pasteur, qumico francs, propuso la teora vitalstica y demostr que las
clulas viables de levaduras causan fermentacin en condiciones anaerbicas;
durante dicha fermentacin el azcar presente en el mosto es convertido
principalmente en etanol y CO2. Sus ilustraciones claramente muestran
autnticas levaduras vnicas y en sus escritos l las diferenciaba claramente de
otros componentes.

En el verano de 1856 M. Bigo, un fabricante de alcohol en la ciudad de Lille,

en el norte de Francia, sufra repetidos fracasos en las fermentaciones de sus
productos. En este proceso intervena la fermentacin de la caa de azcar para
producir alcohol etlico, pero una y otra vez el contenido de las tinajas se
agriaba y al final en lugar de alcohol, se obtena una sustancia que despeda un
olor parecido a la leche agria. Sucedi que el hijo de M. Bigo estudiaba en la
Facultad de Ciencias cuyo decano era Pasteur. M. Bigo, a travs de su hijo,
pregunt a Pasteur si estara dispuesto a investigar los fracasos que estaban
ocurriendo con sus fermentaciones, a lo que Pasteur accedi iniciando el
estudio en los laboratorios de la Facultad. En primer lugar someti a anlisis
qumico el contenido estropeado de las tinas llegando a la conclusin de que
contenan una considerable cantidad de cido lctico en lugar de etanol. El
siguiente paso fue el examen de los sedimentos de las tinas en las que la
fermentacin haba sido satisfactoria y el de aquellas que haban fallado. La
comparacin de los dos sedimentos revel una clara diferencia: en los
sedimentos procedentes de las tinas que haban producido alcohol haba
levaduras; en los procedentes de las tinas productoras de cido lctico se vean
"glbulos mucho ms pequeos que los de la levadura" con lo que ya dispona
de pruebas de que los productos de estas dos fermentaciones estaban
especficamente asociados con el crecimiento de dos microorganismos
morfolgicamente distinguibles. Tom muestras de los sedimentos de los dos

4
tipos de fermentaciones y los inocul en tubos que contenan azcar como
fuente de carbono; en el caso de los "glbulos mucho ms pequeos que los de
la levadura" pudo reproducir la fermentacin lctica y observar los diminutos
glbulos en el sedimento que apareca en los tubos. La adicin del sedimento
de las tinas en las que se haba producido alcohol, di una tpica fermentacin
alcohlica apareciendo en el fondo de los tubos glbulos de levaduras.

En 1866, Pasteur public la obra titulada "Estudios sobre el vino, sus

enfermedades, causas que las provocan. Nuevos procedimientos para la
conservacin y envejecimiento". Entre las mejoras aconsejadas haba un
mtodo para aumentar la calidad de la conservacin de los vinos consistente en
calentarlos a una temperatura de 68 C durante 10 minutos y despus enfriarlos
rpidamente. Esta tcnica ha venido a ser conocida como pasteurizacin y es
ahora ampliamente utilizada en el tratamiento de la leche.

1.2.4. Descubrimiento de la funcin de los microorganismos como

causantes de enfermedades (Koch y la bacteria del carbunco)

Ya en 1546 Girolano Fracastoro haba sugerido que las enfermedades podan

deberse a organismos tan pequeos que no podan verse y que eran
transmitidos de una persona a otra. Sin embargo, el descubrimiento de que las
bacterias pueden actuar como agentes especficos de las enfermedades
infecciosas en los animales fue realizado a travs del estudio del carbunco,
infeccin grave de los animales domsticos que es transmisible al hombre. La
demostracin concluyente de la causa bacteriana o etiologa del carbunco la
proporcion en 1876 Robert Koch, un mdico rural alemn. Kosch empez a
estudiar el mundo microbiano despus de que su mujer le regalara por su 28
cumpleaos un microscopio. Seis aos despus Koch anunci al mundo que
haba encontrado la bacteria del carbunco (Bacillus anthracis). Posteriormente
l y sus colaboradores descubrieron las bacterias que causan la tuberculosis y el
clera.

Esta serie de experimentos se ajustaban a los criterios necesarios para poder

establecer la relacin causal entre un organismo especfico y una enfermedad
especfica. Estos criterios se conocen como los postulados de Koch:

a. El microorganismo debe estar presente en todos los casos de la

enfermedad.
b. El microorganismo debe ser aislado del hospedador enfermo y
obtenerse en cultivo puro en el laboratorio.
c. La enfermedad especfica debe reproducirse cuando un cultivo puro del
microorganismo se inocula a un hospedador susceptible sano.
d. El microorganismo debe ser recuperable de nuevo a partir del
hospedador inyectado experimentalmente.

El descubrimiento posterior de los virus (Dimitri Ivanovski en 1892; el virus

5
del mosaico del tabaco pasaba los filtros que retenan a las bacterias), agentes
que no crecen en medios artificiales en el laboratorio como lo hacen las
bacterias, han permitido realizar algunas modificaciones en los postulados de
Koch.

Este trabajo sobre el carbunco condujo rpidamente a la edad de oro de la

bacteriologa. En 25 aos la mayora de los agentes bacterianos de las
principales enfermedades humanas haban sido descubiertos y descritos.

1.2.5. Desarrollo en la prevencin de enfermedades (Lister y el fenol;

Pasteur y las gallinas; Fleming y el hongo contaminante)

Actualmente es difcil comprender la magnitud de la miseria y devastacin

causada por los microorganismos antes de 1950. En Europa, durante el perodo
de 1347-1350 ocurri una epidemia de peste bubnica, conocida como la
"muerte negra" y causada por una bacteria (Yersinia pestis). A causa de esta
enfermedad en Francia murieron de un tercio a la mitad de la poblacin y se
estim que en toda Europa murieron 25 millones de personas. Con el
conocimiento de que los microorganismos causaban enfermedades, los
cientficos se dedicaron a investigar la prevencin y el tratamiento. Los
hospitales adoptaron la antisepsia, la cual previene la diseminacin de las
enfermedades infecciosas mediante la inhibicin o destruccin de los agentes
causantes. Tambin se descubri la inmunizacin, un proceso que estimula las
defensas del cuerpo frente a la infeccin. Se empez a aplicar la quimioterapia,
tratamiento de las enfermedades con una sustancia qumica, a medida que los
investigadores encontrabanmedicamentos ms efectivos. Tambin influy la
sanidad pblica, sobre todo la higiene relacionada con los alimentos y aguas.

Antisepsia: Hacia 1860 un cirujano ingls llamado Joseph Lister investigaba la

forma de eliminar los microorganismos de las incisiones realizadas en las
operaciones quirrgicas. Por esa poca, las muertes por infeccin despus de
una operacin quirrgica eran muy frecuentes. El propio Lister tena anotado
en su cuaderno de notas que el 45% de sus pacientes moran a causa de las
infecciones quirrgicas. Para evitarlo utiliz una solucin diluda de fenol (que
ya se saba que mataba a las bacterias) para lavar las ropas de los cirujanos y
todo el marterial quirrgico, as como en spray en el quirfano durante la
operacin. Estos experimentos fueron el origen de la tcnica asptica.

Inmunizacin: En 1880 Pasteur utiliz las tcnicas de Koch para aislar y

cultivar la bacteria que causa el clera en gallinas. Para probar su
descubrimiento convoc una demostracin pblica del experimento que haba
sido un xito repetidas veces en el laboratorio. Inyect un cultivo puro de la
bacteria del clera en gallinas sanas y esper a que desarrollaran los sntomas y
murieran. Per para su desgracia, las gallinas siguieron vivas. Revisando el

6
experimento fallido descubri que haba utilizado cultivos viejos en lugar de
cultivos frescos preparados especialmente para la demostracin. Algunas
semanas ms tarde repiti el experimento usando dos grupos de gallinas: uno
con gallinas inoculadas en el experimento anterior con el cultivo viejo y otro
con gallinas nunca inoculadas. Ahora inyect en ambos grupos cultivos
frescos. En este experimento las gallinas del segundo grupo murieron, pero las
del primero permanecan vivas. Estos resultados intrigantes pronto encontraron
una explicacin para Pasteur. El haba descubierto que la bacteria, si se dejaba
crecer durante largo tiempo, poda volverse avirulenta. Pero esta bacteria
avirulenta estimulaba algo en el hospedador, en este caso las gallinas, que
resistan infecciones posteriores hacindoles inmunes a esa enfermedad.
Pasteur aplic este principio de inmunizacin en la prevencin del carbunco en
animales y funcion. A estos cultivos avirulentos los llam vacunas (del latn
vacca). Usando este trmino Pasteur reconoci el trabajo de Edward Jenner que
en 1798 vacun con xito a un nio (James Phipps) de viruela, vacuna que
obtuvo de las pstulas de una vaca con viruela.

El reconocimiento internacional de Pasteur le supuso un nuevo reto ya que le

encargaron que encontrara una vacuna contra la rabia. En aquel momento no se
conoca el agente causante de la rabia pero Pasteur crea que era un
microorganismo. Hoy sabemos que es un virus. Finalmente obtuvo una vacuna
frente a la rabia que funcionaba en perros, lo cual es diferente a humanos. En
Julio de 1885, un nio llamado Joseph Meister fu mordido por un lobo
rabioso, la familia del nio persuadi a Pasteur para que utilizara la vacuna en
el nio (la enfermedad era mortal) que result un xito. Posteriormente esta
vacuna salv a un grupo de campesinos rusos que haban sido mordidos por
otro lobo rabioso. Como agradecimiento, el zar de Rusia envi a Pasteur
100.000 francos que utiliz para construir el Instituto Pasteur de Pars.

Quimioterapia: El tratamiento de las enfermedades mediante compuestos

qumicos no es nuevo. En 1495 ya se utilizaban sales de mercurio para tratar la
sfilis, aunque este tratamiento hizo bueno el axioma: Graviora quaedum sunt
remedia periculus, es decir "Es peor el remedio que la enfermedad" ya que
determinados tratamientos, como es el caso del mercurio, son txicos para las
clulas animales y humanas. Para que un agente quimioterpico sea efectivo en
el tratamiento de una enfermedad infecciosa no slo debe de matar o inhibir al
microorganismo causante de la infeccin sino que adems debe ser
relativamente inocuo para las clulas humanas al exhibir toxicidad selectiva. El
primer gran descubrimiento en este sentido fue hecho por Paul Ehrlich a
principios del siglo XX. Este mdico alemn crea que era posible obtener un
compuesto qumico que pudiera curar especficamente la sfilis sin daar al
paciente. El conoca que el arsnico inhiba al microorganismo causante de la
sfilis (Treponema pallidum) pero que tambin era txico para las clulas

7
humanas. Ehrlich trabaj en la idea de que el arsnico poda incorporarse
dentro de compuestos orgnicos de tal manera que perdiera su toxicidad para
las clulas humanas manteniendo sus propiedades antimicrobianas. Despus de
ensayar 605 sustancias con estas caractersticas encontr un compuesto, el 606,
que cumpla estos requisitos. A esta sustancia la llam Salvarsan y fue el
primer compuesto qumico sintetizado en laboratorio que poda curar una
enfermedad sin ser txico para el paciente. Gracias a este descubrimiento le
concedieron el premio Nobel en 1908. Hoy en da ya no se utiliza salvarsan
para tratar la sfilis ya que ha sido reemplazado por un producto mucho ms
efectivo, el antibitico penicilina.

Hasta 1935 no se realiz ningn nuevo avance en quimioterapia. En ese ao

Gerhard Domagk trabajando en la Bayer realiz un descubrimiento importante.
Despus de llevar a cabo experimentos con ms de 1000 colorantes sintticos
para comprobar si alguno de ellos poda curar las infecciones causadas por
estreptococos en ratones sin daar a los animales, descubri que un colorante
rojo llamado Prontosil era efectivo. Este descubrimiento le vali el premio
Nobel en 1939. Curiosamente, este colorante no era capaz de inhibir el
crecimiento de las bacterias crecidas en laboratorio; slamente era efectivo
cuando las bacterias crecan dentro del cuerpo del animal. Esta aparente
contradiccin fue resuelta en el mismo ao por un qumico francs Jacques
Trfoul al observar que el prontosil era transformado en el cuerpo en un
compuesto incoloro diferente que s tena actividad especfica frente a
bacterias. Esta nueva sustancia era la sulfonamida. En un corto perodo de
tiempo se determin su estructura siendo posible sintetizarla en gran escala y
desarrollar nuevos compuestos que se denominaron sulfamidas que an hoy en
da se siguen utilizando.

El salvarsan y las sulfamidas son ejemplos de agentes quimioteraputicos

sintticos obtenidos mediante sntesis qumica en un laboratorio. Sin embargo,
existe una segunda categora: agentes quimioteraputicos naturales, llamados
antibiticos. Un antibitico es una sustancia producida por un microorganismo
que es inhibitoria para otros microorganismos en muy pequea cantidad.

En 1928 el microbilogo ingls Alexander Fleming observ que en una placa

de agar inoculada con Staphylococcus aureus que estaba contaminada con el
hongo Penicillium notatum, las colonias de Staphylococcus eran destrudas por
alguna actividad de las colonias del hongo. A partir de este hongo realiz la
extraccin de un compuesto que era el responsable del efecto inhibitorio al que
llam Penicilina. Si bien Fleming reconoci el enorme potencial teraputico de
la penicilina, encontr serios problemas para aislarla y purificarla. El primer
ensayo clnico con una preparacin cruda de penicilina se llev a cabo el 12 de
Febrero de 1941. El paciente era un polica de Oxford que se estaba muriendo
por una infeccin con Staphylococcus (septicemia). Al administrarle penicilina
se observ un mejoramiento espectacular, pero 5 das despus, cuando se les

8
acab la penicilina, la infeccin volvi a emerger y el paciente muri. Este
ensayo clnico fall debido a que no se poda obtener una produccin a gran
escala de penicilina. En este punto (1940-1941) los britnicos estaban inmersos
en la II guerra mundial. Los americanos se interesaron por la penicilina y la
fundacin Rockefeller invit al ingls Florey para que investigara la
produccin a gran escala de la penicilina junto con universidades e industrias
farmacuticas americanas. Esta cooperacin hizo posible que un ao despus
estuvieran disponibles grandes cantidades de penicilina. Muy pocos
descubrimientos cientficos han tenido tanto efecto en el campo de la medicina
como el descubrimiento de los antibiticos.

1.2.6. Microbiologa y gentica (Neumococos, doble hlice e ingeniera

gentica)

Antes de 1940 el conocimiento del fenmeno gentico provena de las

investigaciones sobre plantas y animales, pero no se saba si estos resultados se
podan aplicar a los microorganismos. En 1944 Oswald Avery, Colin MacLeod
y MacLyn McCarty descubrieron el papel del DNA en la gentica bacteriana.
Encontraron que el material de DNA de un tipo de neumococos puede
transferir una caracterstica hereditaria a otro tipo de neumococos.
Posteriormente, en 1953 Watson, Crick y Wilkins descubrieron la estructura
molecular del DNA. Estos descubrimientos, junto con otros, establecieron que
la informacin gentica de todos los organismos est codificada en el DNA.
Esto hizo de los microorganismos un modelo muy atractivo para la
investigacin gentica. Actualmente y utilizando la tecnologa del DNA
recombinante o ingeniera gentica se pueden transferir fragmentos de DNA de
un organismo a otro.

9
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

a) Cul de los siguientes hechos no form parte de la controversia sobre

la generacin espontnea o abiognesis?
a) Los hallazgos de Spallanzani (1769) sobre el calentamiento de
infusiones en envases cerrados impeda la generacin
espontnea
b) La teora microbiana de las enfermedades expuesta por Koch en
1876
c) Los experimentos de Pasteur en 1861 sobre infecciones
estriles, microorganismos del aire y frascos con cuello de cisne
d) Las observaciones de Redi (1665) sobre el crecimiento de
gusanos en la carne en putrefaccin.
e) La esterilizacin del aire llevada a cabo por Schwann en 1837
como comprobacin de ser la causa de contaminacin de las
infusiones estriles
b) Tuvieron un papel destacado en el desarrollo de la teora microbiana de
las enfermedades: 1=Pasteur con la demostracin de que un protozoo
era la causa de una enfermedad en los gusanos de seda; 2= Walter Reed
con la demostracin de transmisin por vectores de la fiebre amarilla;
4=Koch demostrandoque la causa del carbunco era una bacteria.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

c) Seale cuales de los siguientes son postulados de Koch sobre las

enfermedades infecciosas bacterianas: 1 = El microorganismo
productor tiene que estar en todos los enfermos y no en los sanos; 2= El
microorganismo tiene que cultivarse en el laboratorio en cultivo puro; 4
= El microorganismo tiene que poderse ver al microscopio en fresco o
teido; 8 = Mediante la inoculacin de los microorganismos tiene que
producirse experimentalmente la enfermedaden los animales de
laboratorio; 16 = En los animales con la enfermedad experimental hay
que aislar el microorganismo causal
a)23 b)27 c)29 d)30 e)31

d) Pueden ser considerados como microorganismos acelulares: 1= Los

virusfiltrables (Ivanowsky 1892); 2 = Los viroides (1967); 4= Los
priones(1981).
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

e) La clasificacin de organismos conta de tres Imperios : Archea,

Bacteria y Eucaria. Qu agrupaciones o reinos se incluyen dentro del
imperio Archea?:
a)Metangenas, Halfilas extremas y Termfilas

b) Bacteria y Cianobacterias
c) Fungi
d) Archezoa
e)Cromista

10
f) En la prctica y desarrollo de la antisepsis fueron hitos histricos: 1=
Semmelweis (1843) introduciendo el Cloro en el lavado de manos; 2=
Lister (1864) utilizando fenol para desinfectar habitaciones; 4= Paster
(1885) introduciendo la vacuna de la rabia. Solucin:
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

g) Seale cuales de los siguientes son postulados de Koch sobre las

enfermedades infecciosas bacterianas: 1 = El microorganismo
productor tiene que estar en todos los enfermos y no en los sanos; 2=El
microorganismo tiene que cultivarse en el laboratorio en cultivo puro; 4
= El microorganismo tiene que poderse ver al microscopio en fresco o
teido; 8=Mediante la inoculacin de los microorganismos tiene que
producirse experimentalmente la enfermedad en los animales de
laboratorio 16. En los animales con la enfermedad experimental hay
que aislar el microorganismo causal Sol.
a)23 b)27 e)29 d)30 e)31

h) Cul de los siguientes microorganismos posee naturaleza celular?

a) Viroides b) Arqueobacterias c)Priones

d) Virus e) Ninguno de los anteriores

i) Cul de las siguientes secuencias es la correcta?

a) Reino, Variedad, Orden, Gnero, Especie
b) Especie, Familia, Clase, Tribu, Reino
c) Familia, Orden, Clase, Divisin, Reino
d) Reino, Clase, Familia, Especie, Divisin
e) Subfamilia, Gnero, Subespecie, Subdivisin, Biovar
j) Cul de los siguientes acontecimientos relacionados con la
Microbiologa ha tenido lugar en poca ms reciente?
a) La teora de la generacin espontnea
b) El descubrimiento de los virus
c) El descubrimiento del microscopio electrnico
d) La aplicacin de la taxonoma numrica
e) La erradicacin de la viruela

11
Capitulo 2. OBSERVACION DE LOS MICROORGANISMOS: EL
MICROSCOPIO, PREPARACION Y EXAMEN DE
MUESTRAS

2.1. El microscopio

El microscopio es un instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto

pequeo. Es el instrumento que ms se usa en los laboratorios que estudian los
microorganismos. Mediante un sistema de lentes y fuentes de iluminacin se
puede hacer visible un objeto microscpico. Los microscopios pueden
aumentar de 100 a cientos de miles de veces el tamao original.

Actualmente existen dos tipos de microscopios: el ptico y el electrnico. En el

microscopio ptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de
lentes que manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. El
microscopio electrnico utiliza un rayo de electrones controlado por un campo
magntico.

2.1.1. Microscopio ptico

Los microscopios de este tipo generalmente producen un aumento de 1000

veces el tamao original. El lmite lo tienen en unas 2000 veces.

Las lentes de un microscopio ptico son el condensador, el objetivo y el ocular.

La luz que entra en el sistema debe enfocarse sobre la preparacin y para esto
se utiliza el condensador. Elevando o bajando el condensador puede alterarse el
plano del foco de luz y elegirse una posicin que consiga el foco preciso. El
objetivo es la lente situada cerca del objeto que se observa. El aumento
primario del objeto es producido por la lente objetivo y la imagen se transmite
al ocular, donde se realiza el aumento final.

Los microscopios que se usan normalmente en microbiologa estn equipados

con tres objetivos: bajo poder, alto poder y objetivo de inmersin. Estos
objetivos estn montados sobre una pieza que se llama revolver que puede
rotarse para alinear el objetivo deseado con el condensador.

La imagen formada por el objetivo es finalmente aumentada por el ocular. El

aumento total de un microscopio compuesto es el producto del aumento de su
objetivo y de su ocular. El microscopio compuesto es capaz de conseguir
aumentos considerablemente mayores que el microscopio construido con una
sola lente. Este ltimo, llamado microscopio simple, se usa principalmente
como lupas y cristales de aumento.

12
Adems del aumento, una propiedad importante de un microscopio es su poder
resolutivo; esto es la capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos
muy cercanos. Cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor ser la definicin
de un objeto. Los microscopios de gran poder resolutivo son especialmente
buenos para ver pequeas estructuras. El poder resolutivo de un microscopio
compuesto depende de la longitud de onda utilizada y de una propiedad ptica
de la lente conocida como apertura numrica. Como los microscopios pticos
utilizan luz visible, la longitud de onda est fijada y es por lo que la resolucin
de un objeto es funcin de la apertura numrica; cuanto mayor sea la apertura,
el objeto resuelto ser ms pequeo.

d: poder resolutivo; l: longitud de onda; a: mitad del ngulo de la lente

objetivo; N: ndice de refraccin del medio; N sen a: apertura numrica.

Un factor que afecta a la apertura numrica, adems de la construccin de la

lente, es el medio a travs del cual pasa la luz. Mientras que el objetivo est
separado del objeto por el aire, su apertura numrica nunca ser mayor de 1,0;
para conseguir aperturas numricas mayores que sta, el objetivo debe estar
inmerso en un lquido de mayor ndice de refraccin que el aire. A estos
lquidos se les denomina aceites de inmersin que se utilizan con los objetivos
de inmersin obteniendo una apertura numrica entre 1,2 y 1,4. An as, al
utilizarse la luz visible (longitud de onda) estos microscopios llegan a tener un
poder de resolucin de aproximadamente 0,25 m, lo que significa que las
partculas con un tamao ms pequeo de 0,25 m no pueden distinguirse unas
de otras.

2.1.2. Microscopio electrnico

Los microscopios electrnicos utilizan rayos de electrones en lugar de la luz, lo

que les permite tener un poder de resolucin muy elevado. La longitud de onda
de los rayos de electrones es de 0,005 - 0,0003 nm, muy corta comparada con
la de la luz visible (426 - 750 nm; violeta - rojo). Es posible con el microscopio
electrnico resolver objetos separados por una distancia de 0,003 m,
comparado con los 0,25 m de uno ptico. Los aumentos pueden llegar a ser
de un milln de veces.

A causa de la naturaleza de este instrumento slo pueden examinarse objetos

muy delgados; incluso una sola bacteria es demasiado gruesa para ser

13
observada directamente. Por lo que, para preparar muestras para el microscopio
electrnico se necesitan tcnicas especiales de cortes ultrafinos. Para seccionar
las clulas primero deben ser fijadas y deshidratadas (etanol o acetona).
Despus de la deshidratacin, la muestra se incluye en una resina y es aqu
donde se realizan cortes finos con un ultramicrotomo, por lo general equipado
con una cuchilla de diamante. Una sola clula bacteriana puede cortarse en
cinco o seis secciones muy finas. Si slo tiene que observarse el contorno de un
organismo, no son necesarias secciones finas por lo que se montan clulas
enteras que se recubren de una capa fina de un metal pesado (oro). El rayo de
electrones es dirigido sobre la preparacin y los electrones dispersados por el
metal pesado activan una pantalla de observacin produciendo una imagen. A
la primera tcnica se la denomina Microscopa Electrnica de Transmisin
(MET) y a la segunda Microscopa Electrnica de Barrido (MEB).

2.2. Microscopia ptica

Adems del microscopio de campo claro existen otros microscopios pticos

como son el de campo oscuro, fluorescencia y contraste de fases.

Microscopio de campo claro: usa como fuente de luz directa bien una
bombilla bien la luz solar. Ya que los microorganismos son transparentes es
difcil distinguirlos con este tipo de microscopa y es por lo que se suelen teir.

Microscopio de campo oscuro: usa un microscopio ptico equipado con un

condensador y objetivo especial que iluminan los microorganismos en la
muestra frente a un fondo oscuro. Este mtodo se utiliza para visualizar
microorganismos vivos sin teir.

Microscopio de fluorescencia: la muestra se tie con una sustancia

fluorescente que absorbe la energa de las ondas cortas de la luz (azul) y emite
la luz de longitudes de ondas ms largas (verde). Se utiliza en
inmunofluorescencia, tcnica en la cual una sustancia fluorescente se une a un
anticuerpo especfico de ciertos microorganismos. Si el anticuerpo fluorescente
se une al microorganismo, este microorganismo emite fluorescencia y se puede
identificar. Esta tcnica se usa en clnica.

Microscopio de contraste de fases: es un microscopio ptico modificado que

permite contrastar sustancias de diferente grosor o densidad. Mediante un
condensador y un objetivo especial se controla la iluminacin de tal manera
que vaya en diferentes rutas a travs de las distintas partes de una clula. El
resultado es una imagen con diferentes grados de brillo y oscuridad. Con este
mtodo, el material denso aparece brillante, mientras que las partes de la clula
que tienen una densidad cercana al H2O (citoplasma) aparecen oscuras. Se
utiliza para visualizar estructuras celulares sin necesidad de usar colorantes o
matar microorganismos.

14
2.3. Observacin de los microorganismos

Todos los microorganismos, excepto los virus, pueden ser observados mediante
microscopios pticos, por lo que nos vamos a limitar a describir las tcnicas
ms comunmente usadas para realizar preparaciones para microscopios
pticos.

Preparacin en fresco: para poder observar la movilidad de un

microorganismo es preciso que no est fijado. Consiste en suspender una gota,
tomada directamente de la muestra, sobre un portaobjetos y cubrindola, sin
formar burbujas de aire, con un portaobjetos se observa al microscopio de
contraste de fases.

2.3.1. Tcnicas de tincin

En general, el proceso seguido en todas las tinciones con lleva las siguientes
etapas: extensin, fijacin, tratamiento con colorantes y observacin.

1.- Extensin: se realiza sobre un portaobjetos que ha de estar totalmente

limpio. Si la muestra es lquida se hace directamente y, si es slida, hay que
resuspenderla previamente en una gota de H2O.

2.- Fijacin: tiene por objeto adherir la muestra al portaobjetos y

desnaturalizar las protenas para facilitar la accin del colorante. Normalmente
se realiza con calor, pasando la muestra repetidamente a 10 cm de la llama del
mechero.

3.- Tincin: se realiza aadiendo los colorantes sobre los microorganismos

sometidos a los procesos anteriores. Puede ser de varios tipos:

Negativa: Los colorantes no tien el microorganismo, sino el entorno,

aumentando de este modo su contraste. La muestra se extiende sobre una gota
del colorante (nigrosina).

Simple: Se utiliza un solo colorante que puede ser de cualquier tipo. Al igual
que la tincin negativa, slo nos permite observar la forma, el tamao y el tipo
de agrupacin de las clulas.

Diferencial: Intervienen dos o ms colorantes y cada uno diferencia una

estructura. El colorante que se usa en segundo lugar es de color diferente al del
primero, denominndose colorante de contraste.

15
2.4. Tincin de Gram

Es la tcnica de tincin diferencial ms importante que se utiliza en bacterias.

El primero en describirla fue el dans Christian Gram. Consiste bsicamente en
aadir lo siguiente:

Cristal violeta (colorante azul)

Lugol (mordiente, sustancia no colorante que refuerza la accin de un
colorante)
Etanol 96 (decolorante que remueve el colorante de ciertas bacterias)
Safranina (colorante de contraste, rojo)

Esta tincin distingue entre dos amplios grupos de bacterias segn la

composicin de la pared celular; las Gram (-) que no retienen el complejo
cristal violeta-lugol despus de la decoloracin con alcohol y aparecen teidas
de rojo, y las Gram (+) que s lo retienen y aparecen teidas de azul oscuro.

16
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. El lmite de resolucin de un microscopio: 1= Disminuye al aumentar

la longitud de onda de la fuente de iluminacin; 2= Aumenta al
disminuir la apertura numrica del objetivo; 4= Aumenta al
aumentar el ndice de refraccin del medio; 8= Aumenta al aumentar
el ngulo de la luz que entra en el objetivo
a)2 b)5 c)9 d)13 e)14

2. El lmite de resolucin de un microscopio: 1=Es inversamente

proporcional al poder de resolucin; 2=Es inversamente proporcional
a la apertura numrica del objetivo; 4=Es directamente proporcional al
ndice de refraccin del medio.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

3. Las tcnicas de tincin en microscopa:

a) aumentan el lmite de resolucin
b) aumentan el contraste
c) aumentan la apertura numrica
d) evitan las aberraciones esfricas
e) evitan las aberraciones cromosmicas
4. Que tincin realizara para comprobar la existencia de bacilos
tuberculosos en el esputo de un paciente?:
a) Tincin de esporas
b) Tincin de Gram.
c) Tincin de Ziehl-Nielsen
d) Tincin de corpsculos metacromticos
5. Qu tipo de microscopio posee mayor poder de resolucin?
a) Contraste de fases b) Fluorescencia
c) Barrido d) De luz ultravioleta e)
ptico

6. Las bacterias Gram (-): 1= se decoloran por alcohol-acetona; 2=la

coloracin final de Gram es rojo; 4= el espesor del peptidoglicano es
menor (2nm) que en las Gram + (10-20nm): 8= presentan una
membrana externa con lpidos; 16= presentan cidos teicoicos.
a) 3 b) 7 c) 15 d) 27 e)31

7. Cual es el principal motivo por el que usaras un microscopio de

fluorescencia?:
a) Para observar clulas en movimiento
b) Para observar virus
c) Para observar estructuras bacterianas
d) Para apreciar la forma de un microorganismo "in vivo"
e) Para realizar diagnstico en clnica
8. Despus de aadir el alcohol (como decolorante) en la tincin de
Gram, las clulas se veran:

17
 a) Rojas las Gram negativas y azules las Gram positivas
b) Azules las Gram negativas y rojas las Gram positivas
c) Azules las Gram negativas y positivas
d) Incoloras las Gram negativas y azules las Gram positivas
e) Azules las Gram negativas e incoloras las Gram positivas
9. En el microscopio electrnico de barrido: 1=Los virus no pueden
verse debido a su pequeo tamao; 2=Se pueden observar
microorganismos vivos; 4=Los microorganismos se observan en tres
dimensiones.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

10. En el microscopio ptico de campo oscuro: 1= Los virus no pueden

verse debido a su pequeo tamao; 2 = Se pueden observar
microorganismos vivos; 4 = Los microorganismos se observan en tres
dimensiones.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

11. En el microscopio electrnico de transmisin: 1=Los virus s pueden

verse a pesar de su pequeo tamao; 2=No se pueden observar
microorganismos vivos; 4=Los microorganismos se observan en tres
dimensiones.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

12. En un microscopio ptico, cuanto menor sea la longitud de onda de la

fuente de iluminacin:
a) Mayor es el lmite de resolucin
b) Mator es el poder de resolucin
c) Mayor es el contraste
d) Mayor es el poder de ampliacin
e) Menor es el contraste.
13. Qu lentes del microscopio de fluorescencia son de cuarzo?:
a) Condesador y Objetivo b) Objetivo y Ocular
c) Condensadro y Ocular d) Slo el condensador
e) Slo el ocular
14. La tincin de Gram: 1=Permite visualizar cpsulas; 2=Se basa en la
resistencia a la decoloracin por alcohol de determinadas bacterias;
4=Diferencia a las bacterias en dos grandes grupos.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

15. Mediante el empleo del aceite de inmersin en un microscopio ptico,

conseguimos:
a) Disminuir la apertura numrica del objetivo
b)Aumentar el lmite de resolucin del microscopio
c) Aumentar el poder de resolucin del microscopio
d) Aumentar el contraste
e) Ninguna de las anteriores

18
Capitulo 3. LA CELULA PROCARIOTICA: ESTRUCTURA Y
FUNCION

3.1. Bacterias
Las bacterias son seres microscpicos, unicelulares, son de diversas formas y
que se reproducen por simple divisin celular. Se necesita la ayuda del
microscopio, con unos 1000 aumentos o ms para poderlas contemplar, adems
de proceder previamente a su coloracin.

3.2. Morfologia de las bacterias

A.- Tamao: Invisibles al ojo humano, las bacterias tpicas miden de 1 a 3 m

de largo por 0.4 a 1 m de ancho, hay otras mayores o menores. El tamao de
las bacterias vara dependiendo de las especies. Una caracterstica de las
clulas bacterianas es la alta proporcin que existe entre el rea de la superficie
y el volumen de la clula. Esto significa que poseen una gran superficie a
travs de la cual pueden entrar nutrientes para alimentar a un pequeo
volumen; con lo cual pueden realizar muchas reacciones metablicas y crecer
rpidamente. As, por ejemplo Escherichia coli tarda 20 minutos en dividirse
mientras que una clula de mamfero en laboratorio tarda de 13 a 24 horas.

B.- Forma: La forma de una bacteria viene determinada por la rigidez de su

pared celular. Las bacterias poseen una de las tres formas fundamentales:

Cocos: bacterias con forma esfrica, pueden ser ovoides o elpticas

Bacilos: bacterias con forma cilindrica.

Espirales: bacterias con forma espiral o helicoidal

Existen modificaciones a estas tres formas fundamentales y aunque la mayor

parte de las bacterias mantienen constante su forma, algunas especies pueden
variar la forma por lo que se les llama pleomrficas. Arthrobacter es un
ejemplo de pleomorfismo debido a que su forma cambia en funcin de la edad
del cultivo. Tambin exhiben pleomorfismo aquellas bacterias que no poseen
pared celular como es el caso de los micoplasmas. Otro ejemplo son las formas
L que son bacterias que carecen de pared celular debido a una situacin de
estrs (choque trmico u osmtico, antibiticos, etc.), pero cuando cesa el
estrs sintetizan de nuevo la pared celular. Debido a que la forma es un carcter
taxonmico, el pleomorfismo puede inducirnos a confusin ya que podemos
pensar que un cultivo est contaminado con otro tipo de bacterias. Sin
embargo, el pleomorfismo no suele ser lo ms frecuente.

C.- Disposicin: Muchas veces al mirar al microscopio se observan las clulas

unidas unas a otras. Mientras que las bacterias de forma espiral (espirilos)

19
suelen ser clulas separadas, otras especies suelen crecer en una disposicin
caracterstica, disposicin que va a depender del plano en el que se realice la
divisin celular y si la clula hija permanece junto a la clula madre una vez
realizada la divisin celular. Cada una de estas disposiciones es tpica de una
especie particular y puede usarse en identificacin. Hay que tener en cuenta
que raramente todas las clulas de una especie se disponen exactamente de la
misma manera; por lo que hay que tener en cuenta la disposicin predominante
cuando se estudian las bacterias.

Cuando un coco se divide en un plano forma un diplococo o dos clulas juntas

(Neisseria). Cuando un coco se divide en un plano y permanece unido despus
de varias divisiones formando una cadena se denomina estreptococo
(Streptococcus). Si las clulas se dividen en ms de un plano o dimensin la
disposicin es ms complicada. Cuando un coco se divide en ngulo recto al
primer plano de divisin forma ttradas o tetracocos (Pediococcus). Una
posterior divisin en el tercer plano puede resultar en un paquete cbico de
ocho clulas conocido como sarcinas (Sarcina). Si la divisin en los tres
planos es de forma irregular se forman racimos de uva (Staphylococcus).

Los bacilos generalmente no se agrupan en disposiciones caractersticas,

aunque hay excepciones. Por ejemplo, el bacilo de la difteria tiende a agruparse
en empalizada. Las clulas del gnero Caulobacter (bacilo acutico) crece en
roseta sobre rocas y superficies similares. Dentro del gnero Bacillus algunas
especies forman cadenas y se llaman estreptobacilos.

Tambin existen bacterias ramificadas como son los actinomicetos y ya hemos

descrito las formas pleomrficas.

3.3. Ultraestructura de las bacterias

Las tcnicas de microscopa revelan que una clula bacteriana est formada por
diversas estructuras que funcionan conjuntamente. Algunas de estas estructuras
se encuentran unidas a la superficie de la pared celular, mientras que otras se
encuentran dentro de la clula. Algunas son comunes a todas las clulas como
son el citoplasma y la membrana citoplasmtica; mientras que otras estructuras
estn presentes slo en ciertas especies o aparecen en determinadas
condiciones ambientales.

Una tpica clula bacteriana contiene las siguientes estructuras:

1.- Glicocalix: est compuesta de polmeros

20
2.- Pared celular: separa a la bacteria del medio que la rodea. Suele ser rgida
y es de naturaleza glcido-lpido-proteica.

3.- Periplasma: espacio entre la pared celular y membrana citoplasmtica.

4.- Membrana citoplasmtica: separa el citoplasma de la pared celular. Est

compuesta de protenas y lpidos.

5.- Citoplasma: es una solucin coloidal que contiene elementos nucleares,

inclusiones citoplasmticas (vacuolas, vesculas, etc.) y ribosomas.

6.- Flagelos: nacen en el citoplasma y son estructuras de locomocin. Estn

compuestos de protena (flagelina).

7.- Fimbrias o pili: formaciones piliformes que nacen en el citoplasma. Estn

compuestos de protena (pilina).

3.3.1. Glicocalix

Algunas clulas bacterianas estn rodeadas por una capa de material viscoso
llamada glicocalix. Este glicocalix est compuesto por polmeros de azcares
(polisacridos). Si el glicocalix est organizado en una estructura definida y
est unido firmemente a la pared celular se denomina cpsula. Si por el
contrario est desorganizado, sin una forma definida y no est firmemente
unido a la pared celular se denomina capa mucilaginosa.

Composicin: polisacridos y en menor proporcin polipptidos.

Funcin: Existen diferentes funciones dependiendo de la especie bacteriana:

Adherencia: es la principal. Streptococcus mutans se adhiere a travs

de la cpsula a la superficie de los dientes originando caries. Sin la
cpsula el microorganismo se elimina fcilmente con la saliva.
Resistencia a la desecacin: las cpsulas poseen muchos grupos
polares que al retener molculas de H2O protegen a la clula frente a la
desecacin.
Material de reserva.
Patogenicidad y virulencia: los neumococos sin cpsula son
avirulentos.

3.3.2. Pared celular

La pared celular de los organismos procariotas es una estructura rgida que

mantiene la forma caracterstica de cada clula bacteriana. Dependiendo de las

21
especies y de las condiciones de cultivo, la pared celular puede suponer desde
el 10% al 40% del peso seco de la clula.

Composicin qumica y propiedades de la pared celular bacteriana: las

paredes celulares no son estructuras homogneas sino que poseen distintas
capas que varan segn el tipo de bacteria, existiendo diferencias tanto en su
grosor como composicin. Estas diferencias se utilizan para identificar y
clasificar las bacterias, as como diferenciarlas mediante la tincin de Gram.

La pared celular de las bacterias Gram (-) es ms delgada (10 - 15 nm) que la
de las Gram (+) (20 - 25 nm). Tanto las bacterias Gram (+) como las Gram (-)
poseen un heteropolmero conocido como peptidoglucano o murena,
responsable de la rigidez y fuerza mecnica de la pared celular, de la forma
bacteriana y de la resistencia a la lisis osmtica. Es una red bidimensional que
rodea a la clula a modo de saco. Existe prcticamente en todas las bacterias y
es exclusivo de procariotas. Si bien existen ms de 100 peptidoglucanos
distintos, su estructura bsica est compuesta por tres componentes:

1.- N-acetilglucosamina (NAG)

2.- Acido N-acetilmurmico (NAM)

3.- Pptido de 4 aminocidos o tetrapptido, algunos de los cuales son

D-aminocidos.

Para formar una estructura rgida alrededor de la clula, el tetrapptido de una

cadena se une al de otra a travs de un enlace peptdico entre la D-alanina y el
cido meso-diaminopimlico. Algunas zonas del peptidoglucano son abiertas
por enzimas bacterianos llamados autolisinas para que as se puedan aadir
ms polmeros y la clula pueda crecer y dividirse.

A parte de dar forma a la clula bacteriana, la pared celular sirve como barrera
para algunas sustancias impidiendo que penetren dentro de la clula y
permitiendo el paso a otras. La importancia de la pared celular se comprende
en parte gracias a experimentos usando enzimas que la degradan. La pared
celular de una bacteria Gram (+) se destruye completamente con el uso de estos
enzimas obtenindose unas clulas esfricas llamadas protoplastos. La pared
celular de las Gram (-) es ms resistente a este tratamiento, manteniendo restos
de su pared celular originando esferoplastos. Tanto los protoplastos como los
esferoplastos se lisan si los colocamos en un medio hipotnico.

Pared celular de las bacterias Gram (+): Contiene una sola capa compuesta de
peptidoglucano y cidos teicoicos que son polmeros de glicerol o ribitol
fosfatos que se unen al peptidoglucano o a la membrana citoplasmtica. Al
estar cargados (-) pueden ayudar en el transporte de iones (+).

22
Pared celular de las bacterias Gram (-): Contiene dos capas, una membrana
externa y una capa de peptidoglucano. El espacio que existe entre la membrana
citoplasmtica y la membrana externa se denomina espacio periplsmico. La
capa caracterstica de las Gram (-) es la membrana externa que acta como
barrera selectiva al paso de algunas sustancias. Su estructura bsica es una
bicapa lipdica que contiene fosfolpidos (capa interna), lipopolisacridos y
protenas (capa externa). Esta bicapa est unida al peptidoglucano a travs de
lipoprotenas. De todos estos componentes, los lipopolisacridos (LPS) son
caractersticos de las bacterias Gram (-) y slo se encuentran en la membrana
externa. Los LPS estn compuestos de tres partes unidas covalentemente:

a. Lpido A, localizado en la parte interna; compuesto por un disacrido

de glucosamina fosforilado con cidos grasos de cadena larga.
b. Ncleo polisacardico, localizado en la superficie de la membrana;
compuesto por azcares y KDO (ketodeoxioctnico).
c. Antgeno O, localizado fuera de la membrana; compuesto por
polisacridos que contienen azcares comunes como galactosa y otros
exclusivos de bacterias como la abecuosa.

3.3.3. Membrana citoplasmtica

Aproximadamente de 7,5 nm, est compuesta fundamentalmente de

fosfolpidos (20% - 30%) y protenas (50% - 70%). Los fosfolpidos forman
una bicapa donde se intercalan las protenas. En la bicapa lipdica, la parte
polar soluble en H2O est alineada hacia afuera de la bicapa y la parte no polar
hacia adentro. Estos fosfolpidos de la membrana la hacen fluda, permitiendo
que las protenas se muevan alrededor. La mayor parte de las membranas
citoplasmticas de procariotas no contienen como ocurre en los eucariotas
esteroles tales como el colesterol por lo que son menos rgidas que las de los
eucariotas.

Funcin de la membrana citoplasmtica:

Acta como barrera para la mayor parte de las molculas solubles en

H2O, siendo mucho ms selectiva que la pared celular.
Contiene enzimas biosintticos que actan en la produccin de energa
y sntesis de la pared celular.
Las clulas bacterianas no contienen orgnulos como las mitocondrias y
cloroplastos de las clulas eucariotas; sin embargo, la membrana
citoplasmtica de muchas bacterias se extiende dentro del citoplasma
formando unos tbulos que se llaman mesosomas. Estos mesosomas
pueden localizarse cerca de la membrana citoplasmtica o ms adentro
en el citoplasma. A estos ltimos, los mesosomas centrales, se une el
material nuclear de la clula y se piensa que intervienen en la
replicacin del DNA y divisin celular. Los mesosomas perifricos
parecen estar implicados en la secrecin de ciertos enzimas como son
las penicilinasas que destruyen la penicilina. Tambin actan como

23
 centros con actividad respiratoria o fotosinttica ya que este sistema de
membranas aumenta la superficie disponible para estas actividades.

3.3.4. Area citoplsmica

El citoplasma es un fluido que contiene sustancias disueltas y partculas en

suspensin como los ribosomas. El 80% del citoplasma corresponde a H2O y el
resto lo componen cidos nucleicos, protenas, carbohidratos, lpidos, iones
orgnicos, compuestos de bajo peso molecular y partculas. En este fluido
espeso ocurren muchas reacciones qumicas tales como la sntesis del material
celular a partir de los nutrientes (anabolismo).

Ribosomas: son unas partculas donde tiene lugar la sntesis de protenas. Se

encuentran tanto en procariotas como eucariotas. Sin embargo en las clulas
bacterianas al no existir sistemas internos de membranas, los ribosomas se
encuentran libres en el citoplasma o bien asociados a la parte interna de la
membrana citoplasmtica. Los ribosomas estn compuestos de un 60% de
RNA y un 40% de protenas. Los ribosomas bacterianos estn formados por
dos subunidades de diferente tamao: 50 S y 30 S que conjuntamente forman el
ribosoma bacteriano 70 S (S = Svedberg units, unidades de sedimentacin
donde influyen el tamao y la forma):

- 50 S: RNA 23 S + RNA 5 S + 35 protenas

- 30 S: RNA 16 S + 21 protenas

Inclusiones: diferentes tipos de sustancias qumicas pueden acumularse y

formar depsitos insolubles en el citoplasma:

Glbulos de sulfuro que sirven de reserva de energa para bacterias que oxidan
el H2S.

Grnulos de volutina o grnulos metacromticos que son de polifosfato.

Acumulan fosfato cuando la sntesis de cidos nucleicos est impedida. Se
tien de color prpura con azul de metileno y se usan para identificar ciertas
bacterias.

Poly--hidroxibutirato (PHB) es un material lipdico que acta como reserva de

fuente de carbono y energa. Con sudam III se tien de negro.

Glucgeno es un polmero de glucosa que se tie rojo con lugol.

3.3.5. Area nuclear

24
Al contrario que los eucariotas, los procariotas no poseen una membrana que
englobe al ncleo. El material nuclear en una bacteria ocupa la zona central de
la clula y parece estar unido a los mesosomas. Este material nuclear llamado
nucleoide est formado por un nico cromosoma circular. Tambin pueden
existir plsmidos que son elementos extracromosmicos compuestos de DNA.

3.3.6. Flagelos

Son filamentos helicoidales que se extienden desde el citoplasma a travs de la

pared celular. Los flagelos son los responsables de la movilidad de las bacterias
en los lquidos, llegando a velocidades de 100 m / segundo, lo que equivale a
3000 veces la longitud de su cuerpo por minuto. El guepardo, uno de los
animales ms veloces, alcanza una velocidad mxima de 1500 veces la
longitud de su cuerpo por minuto.

Un flagelo consta de tres partes: cuerpo basal, gancho y filamento. El cuerpo

basal que se encuentra dentro de la clula est compuesto por un cilindro
central y varios anillos. Las bacterias Gram (-) tienen 2 pares de anillos, los
exteriores unidos a la pared celular y los interiores a la membrana citoplsmica.
En las bacterias Gram (+) slo existe un par de anillos, uno est en la
membrana citoplasmtica y el otro en la pared celular. Los flagelos funcionan
rotando como un sacacorcho lo que permite a la bacteria moverse en los
lquidos. Los anillos del cuerpo basal, a travs de reacciones qumicas que
consumen energa, rotan el flagelo. El filamento est compuesto de molculas
de una protena llamada flagelina.

No todas las bacterias tienen flagelos (son raros en los cocos) pero en aquellas
que los poseen (muchos bacilos y espirilos) se utilizan como criterio de
clasificacin la posicin y el nmero de flagelos:

Flagelos polares: monotricos, anfitricos y lofotricos

Flagelos peritricos

Las bacterias mviles se mueven en una direccin u otra por diferentes

razones. Su movimiento puede ser aleatorio, o bien acercarse o alejarse de algo
que hay en su ambiente como es buscar luz o alejarse del calor. Tambin
exhiben quimiotaxis que es un movimiento en respuesta a productos qumicos
del ambiente. Por ejemplo, las bacterias se acercan hacia niveles altos de
atrayentes como son los nutrientes y se alejan de los niveles altos de sustancias
inhibitorias como es el exceso de sales.

3.3.7. Fimbrias o pili

Son formaciones piliformes, no helicoidales, que no tienen nada que ver con el
movimiento. Suelen ser ms cortos, ms delgados y ms numerosos que los
flagelos. Si bien surgen del citoplasma, no se conoce que posean estructuras de
anclaje a la clula. Estn formados por subunidades de una protena llamada

25
pilina.

Diferentes tipos de pili estn asociados a diferentes funciones siendo las ms

conocidas la adherencia a superficies y la reproduccin sexual de bacterias
(conjugacin; paso de plsmidos a travs del pili de una clula a otra).

3.3.8. Endoesporas bacterianas

Algunas especies de bacterias producen formas de resistencia llamadas esporas

que pueden sobrevivir en condiciones desfavorables tales como el calor o la
sequa. Estas formas son metablicamente inactivas, pero bajo condiciones
ambientales apropiadas, pueden germinar (comenzar a crecer) y llegar a ser
clulas vegetativas metablicamente activas las cuales crecen y se multiplican.

Las esporas que se forman dentro de la clula se llaman endoesporas,

producindose una por clula. Existen distintos tipos segn su forma (ovoides,
esfricas) y localizacin dentro de la clula (centrales, subterminales y
terminales). Son muy comunes en el gnero Clostridium y Bacillus. Cuando
una endoespora se libera de la clula madre o esporangio es muy resistente al
calor (varias horas hirviendo en el caso de Clostridium botulinum). Las causas
de la resistencia al calor parecen ser debidas a que durante la esporulacin
ocurre un proceso de deshidratacin por el cual se elimina la mayor parte del
H2O de la espora. A parte, todas las esporas contienen grandes cantidades de
cido dipicolnico (DPA) que no se encuentra en las clulas vegetativas. El
DPA en forma de dipicolinato clcico supone el 5 - 10% del peso seco de la
endoespora y parece localizarse en la parte central de la espora.

Las endoesporas bacterianas se usan como proteccin al contrario que las

esporas fngicas que se usan para reproduccin.

3.4. Reproduccin de las bacterias

La reproduccin de las bacterias es asexual, por simple divisin. En general se

produce un alargamiento de la clula con divisin del ncleo y del citoplasma,
apareciendo una membrana de separacin. Hay veces que las nuevas clulas
formadas permanecen unidas en vez de separarse. El ritmo de reproduccin
suele ser una divisin cada 20/30 minutos, lo que quiere decir que en unas 11
horas podemos tener ms de 10 millones de clulas a partir de una sola.

26
3.5. Clasificacin de las bacterias

3.5.1. Reaccin Gram

Las bacterias gram positivas retienen el cristal violeta, mientras las de
gram negativas se decoloran.

3.5.2. Clasificacin de Bacterias por Familia

3.5.2.1. Lactobacilaceas

3.5.2.1.1. Streptococcus

Son anaerobios facultativos y estn constituidos por cocos inmviles que se

presentan tpicamente en cadenas, dependiendo de la forma en que se dividen y
condiciones de crecimiento. Se dividen en cuatro grupos: pigenos, viridans,
lcticos y enterococos.

3.5.2.1.2. Pediococcus.

Se ha encontrado en los alimentos la especie Pediococcus cerevisiae. Son

cocos aislados, en parejas, en cadenas cortadas y en ttradas. Son Gram
positivos catalasa negativos y microaerfilos. Produce cido lctico, crecen
bien en salmueras de cloruro sdico hasta una concentracin de 5,5% y
pobremente cuando la concentracin es alrededor de 10%. Su crecimiento
ptimo tiene lugar entre 25 a 32C.

3.5.2.1.3. Leuconostoc

Este gnero, llamado Betacoccus, comprende los estreptococos lcticos que

fermentan el azcar, produciendo cido lctico y considerables cantidades de
cido actico, alcohol etlico y dixido de carbono.

Son importantes las especies de leuconostoc en los alimentos por:

1.Producir diacetilo y otras sustancias aromticas

2.Tolerar altas concentraciones salinas.
3.Fermentacin rpida que otras bacterias lcticas y de producir suficiente
cantidad de cido como para inhibir el crecimiento de todas las bacterias
no lcticas.
4.Tolerancia a concentraciones azucaradas del L. Mesenteroides hasta 55 a
60%.

27
 5.Produccin de dixido de carbono a partir de los azcares, produciendo
demasiados ojos en ciertos quesos, la alteracin de alimentos con alto
contenido de azcar.

3.5.2.1.4. Lactobacillus.

Las bacterias lcticas de los alimentos pertenecen a este gnero, que son
bacilos generalmente largos y delgados, formando en la mayora de las
especies cadenas. Son microaerfilos, catalasa-negativos y Gram positivos, y
fermentan los azcares, dando como producto principal cido lctico.

Tabla 3.1. Principales gneros bacterianos de los alimentos

GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS

Cocos Cocos y cocobacilos
Micrococcus Acinetobacter
Staphylococcus Moraxella
Streptococcus
Pediococus Bacilos aerobios a cocos
Leuconostoc Peudomonas
Acetobacter
Bacilos formadores de Halobacterium
endosporas Alcaligenes
Bacillus Alteromonas
Clostridium Brucella
Halococcus
Bacilos no esporulados
Lactobacillus Bacilos anaerobios facultativos
Microcobacterium Aeromonas
Corynebacterium Vibrio
Enterobacter
Erwinia
Escherichia
Flavobacterium
Proteus
Salmonella
Serratia
Shigella
Yersinia

Bacilos espirales o curvos

Campylobacter

Hayes (1993).

28
Algunas especies pueden producir diacetilo. Su crecimiento optimo est entre
28C y 32C. Los lactobacilos son interesantes en los alimentos por que:

1.Fermentan los azcares produciendo cido lctico

2.La produccin de gas perjudica la calidad de algunos productos .
3.Su imposibilidad de sintetizar la mayora de las vitaminas que necesitan, lo
que les impide crecer bien en alimentos pobres en vitaminas.
4. Su termorresistencia hace que puedan sobrevivir a temperaturas de
pasteurizacin.

3.5.2.2. Micrococceas

3.5.2.2.1. Micrococcus

Son bacterias esfricas dispuestas en masas irregulares pero nunca

apelotonadas, son gram positivas y aerobias inmviles que crecen mejor entre
25 y 30C. Hay distintos tipos de micrococos en los alimentos se caracterizan
unos de los otros por:

1. Utilizar las sales amnicas como nica fuente de nitrgeno.

2. Fermentan los azcares, produciendo cido y algunos son cido
proteolticos.
3. Toleran gran cantidad de sal.
4. Resisten temperaturas de la pasteurizacin comercial de la leche (M.
Varians)
5. Otros son pigmentados y dan coloracin anormal a las superficies de
alimentos M. Flavus es amarillo y M. roseau es rosa.
6. Algunos crecen bien a temperaturas alrededor de 10C o incluso mas
bajas.

3.5.2.2.2. Staphylococcus

Son Gram positivos, anaerobios facultativos y crecen aislados, en parejas, en

ttradas o en masas irregularmente agrupadas como racimos de uvas. La
especie ms importante, Staphylococcus aureus, generalmente crece dando
color amarillo a naranja, aunque en ocasiones puede ser blanca.

3.5.2.3. Bacilceas

3.5.2.3.1. Bacillus.

29
Las endosporas de este gnero son aerobios o facultativos. Hay especies
mesfilas (B. Subtilis), termfilas (B. Stearothermophilus, B. Coagulans),
fuerte o dbilmente proteolticas e incluso no proteolticas, pueden o no formar
gas, unas son lipolticas y otras carecen de esta propiedad. Las dos principales
especies productoras de cido y gas, Bacillus polymyxa y B. Macerans, reciben
a veces el nombre de aerobacilos. Muchas especies mesfilas forman cido a
partir de la glucosa y otros azucares.

3.5.2.3.2. Clostridium.

Las endosporas de estas especies anaerobias o microaerobias. Muchas especies

fermentan activamente los carbohidratos, con produccin de cidos, entre los
que generalmente se encuentra el cido butrico y gases, usualmente dixido de
carbono e hidrgeno. Pueden ser mesfilos y termfilos, proteolticos o no. La
fuente principal de Clostridium la constituye el suelo, pero pueden tambin
encontrarse en el ensilado en malas condiciones, piensos y estircol.

3.5.2.4. Corinebacteriaceas

3.5.2.4.1. Microbacterium.

Las bacterias de este gnero son importantes por su resistencia a las

condiciones adversas y porque se usan para la produccin de vitaminas. Son
pequeas, bacilares , inmviles, gram positivas, no esporgenas, catalasa-
positivas, aerobias homofermentativas, produce cido lctico y a veces se unen
en forma de empalizada. Microbacterium lacticum es la especie ms
abundante. Las microbacterias son muy resistentes al calor, an no
produciendo esporas, resisten las temperaturas de pasteurizacin de la leche
incluso a 80 85C durante 10 minutos. Por tanto se encuentran en productos
como leche pasteurizada y en polvo. Crecen entre los 15C y 35C, siendo la
temperatura optima de crecimiento de unos 30C.

3.5.2.4.2. Corynebacterium

Es importante en los alimentos este gnero porque en l se incluye los

grmenes de difteria (enfermedad de la garganta). Corynebacterium diphteriae,
que puede ser transmitido con los alimentos. Corynebacterium pyogenes
determina mastitis en las vacas. Al corynebacterium bovis, constituido por
formas bacilares delgadas con el aspecto tpico del gnero, con abultamientos

30
en forma de mazo, se le culpado del enranciamiento de la nata. Las
corynebactarias se encuentran en el pescado fresco, el agua y el hielo.

3.5.2.5. Acinetobacteriaceas

3.5.2.5.1. Acinetobacter y Moraxella.

Son inmviles y su forma vara de bacilos gruesos a cocos; se disponen

preferentemente en parejas. El Acinetobacter es difcil diferenciarlo de
Moraxella. Los acinetobacter son importantes agentes alterantes de la carne de
aves y mariscos, pero se aslan de una gran variedad de alimentos crudos. Las
moraxelas son fundamentalmente parsitos animales y las estirpes.

3.5.2.6. Pseudomonadaceas

3.5.2.6.1. Pseudomonas

Varias especies de Pseudomonas son causa de alteraciones de los alimentos.

Son bacterias Gram negativas, generalmente mviles, no esporgenas y
bacilares. Las formas mviles presentan un flagelo o grupo de flagelos en uno
o en ambos extremos del bacilo, en lo que se distinguen del genero
Achromobacter, en el cual los flagelos estn distribuidos por toda la superficie
de la clula.

Las caractersticas que las hacen importantes en los alimentos son:

1. Su capacidad para utilizar como fuente de energa un a gran variedad de

compuestos de carbono distintos de los carbohidratos.
2. La produccin de sustancias que afectan desagradablemente al sabor.
3. Se capacidad para utilizar compuestos nitrogenados sensillos
4. El poder sintetizar sus propias factores de crecimiento o vitaminas.
5. Las actividades proteoltica y lipoltica de algunas especies.
6. Su tendencia aerobia, que les permite crecer rpidamente y originar
productos de oxidacin y muclago en superficies de alimentos.
7. Su capacidad de desarrollarse a bajas temperaturas (refrigeracin).
8. la produccin de pigmentos por ciertas especies como P. fluorescens y
P. nigricans.
9. No crece en aw altas (0.97-0.98). son temolbiles, son anaerobios y son
poco resistentes a la deshidratacin. Su crecimiento es pobre o nulo por
encima de 42C. Las pseudomonas llegan frecuentemente a los

31
 alimentos con el agua, tierra, utensilios y maquinaria; su presencia es
perjudicial.

3.5.2.6.2. Acetobacter.

Este tipo de bacterias productoras de cido actico oxidan el alcohol etlico a

cido actico. Son bacilos mviles o inmviles, Gram- negativos a Gram-
variables, no esporgenos, aerobios y generalmente catalasa-positivos. Se
dividen en dos gneros: Acetobacter, constituido por microorganismos que
oxidan el etanol (a CO2 + H2O), lactato (a carbonato) y varios aminocidos,
utilizan el cido ctrico como nutriente; y acetomonas, formado por
microorganismos que no oxidan el etanol, mviles tienen flagelos polares y
utilizan el glicerol como nutriente.

Oxidar el alcohol etlico a cido actico, los que las hace tiles en la
fabricacin del vinagre y perjudiciales para las bebidas alcohlicas.

3.5.2.6.3. Halobacterium.

Son bacterias bacilares halfilas obligadas y generalmente cromgenas.

Determinan la formacin de colores anormales en alimentos de gran contenido
salino, tales como pescado salado. Entre las especies ms importantes se halla
H. Salinarium.

3.5.2.7. Acromobacterias

Existen tres gneros capaces de crecer en los alimentos: Alcalgenes,

Achromobacter y Flavobacterium. Son bacilos gram-negativos, pequeos o
medianos aerobios o facultativos. Cuando son mviles sus flagelos se
extienden por toda la superficie. Generalmente no atacan a los carbohidratos y
de hacerlo su accin es muy dbil. Son incapaces en desarrollar a temperaturas
mayores a 37C, mayormente son psicrfilas; crecen en aw alta, son destruidas
fcilmente por el calor.

3.5.2.7.1. Alcalgenes.

32
Como su nombre indica, determina en el medio de cultivo una reaccin
alcalina. Alcalgenes viscolactis determina la aparicin de leches viscosas. El
A. Metalcalgenes crece, con formacin de mucosidad en el requesn.
Provienen de estircol, suelo, agua y polvos. Son estrictamente aerobias.

3.5.2.7.2. Achromobacter.
Como antes se ha dicho, estas bacterias no pigmentadas que provienen del
suelo y aguas son a menudo confundidas con pseudomonas; son responsables
del crecimiento viscoso en los alimentos.

3.5.2.7.3. Flavobacterium.
Especies de este gnero, amarillas o anaranjadas, determinan las coloraciones
anormales superficiales en las carnes y toman parte en el deterioro de los
mariscos, aves, huevos, mantequilla y leche. Ciertos miembros del grupo son
psicrfilos, habindose observado su crecimiento, tras la descongelacin, en
hortalizas congeladas.

3.5.2.8. Enterobacterias

Las bacterias entricas pueden separarse en dos grandes grupos:

a) Grupo entrico formado por bacterias que presentan caractersticas

comunes con las bacterias intestinales. El grupo entrico puede
subdividirse, a su vez, en dos:

Bacterias coliformes en el que se encuentran los gneros Escherichia y

Salmonella y est formado por bacterias intestinales (estas bacterias tienen
un tiempo de supervivencia en agua u otros ambientes extracorporales
reducido); y

Bacterias no-coliformes de bacterias cuyo hbitat natural es el agua o el

suelo pero que ocasionalmente pueden encontrarse en ambientes
intestinales. Las caractersticas metablicas de las bacterias del grupo de no-
coliformes son muy similares a las del grupo de coliformes y la
diferenciacin se basa principalmente en su hbitat.

a) Grupo de bacterias relacionadas. Comprende microorganismos

patgenos para humanos que viven en hbitats animales (Yersinia) y
microorganismos acuticos tanto de agua dulce (Vibrio y Aeromonas)
como de agua salada (Vibrio y Photobacterium). Algunas bacterias son
patgenas para animales de piscifactora (Aeromonas salmonicida) y hay
especies patgenas para el hombre (Vibrio cholerae y V. parahemolyticus).

33
3.5.2.8.1. Bacterias coliformes

Las bacterias de los gneros Escherichia, Aerobacter (Klebsiella, Enterobacter)

y Paracolaboratrum se incluyen el grupo coliforme o coli_aerogenes y en
conjuneto se les denomina microorganismos coliformes o bacterias coliformes.
Son bacilos cortos, definidos en los mtodos de examen de agua y de la leche
como todos aerobios y anaerobios facultativos, Gram-negativos, no forman
esporas, fermentan la lactosa con formacin de gas. Las dos especies mas
importantes son Escherichia coli y Aerobacter aerogenes ) llamada Klebsiella
aerogenes la forma inmvil y Enterobacter aerogenes la movil). Debido a que
E. Coli se considera principalmente de origen intestinal, mientras que A.
Aerogenes suelo proceder de vegetrales (aunque, ocasionalmente, tambien del
intestino), se ha estudiado bastante el modo de difernciarlas.

3.5.2.8.2. Erwinia

las especies de este gnero son patgenas de vegetales, en los que ocasionan
necrosis, agallas, marchitamientos y podredumbre, daando los frutos y otros
productos vegetales. Erwinia carotovora se estudiara mas tarde como
responsable de una alteracin de interes economico llamada podredumbre
blanda bacteriana. Son bacilus Gram-negativos, moviles.

3.5.2.8.3. Serratia

Las bacterias de este gnero tienen forma bacilar, son pequeas, aerobias,
Gram-negativas, mviles, productores de pigmentos rojos caractersticos que
dan u color rojo anormal a la superficie de los alimentos. La especie mas
frecuentemente encontrada es Serratia marcescens.

3.5.2.8.4. Proteus

Son habitantes del suelo especializados en la descomposicin de la materia

orgnica. Pueden ser fcilmente identificados por la presencia de la enzima
ureasa.

34
3.5.2.8.5. Salmonella

La Salmonella es habitante habitual del tracto intestinal de humanos,

animales de granja , aves y, ocasionalmente reptiles. Como patgeno para
humanos suele adquirirse normalmente por la ingestin de alimentos
contaminados, principalmente huevos, pollo carne y sus derivados.

Las bacterias del gnero Salmonella pueden agruparse en tres divisiones

dependiendo de su relacin con los animales superiores:

(1) bacterias que infectan slo a humanos (S. typhi y S. paratyphi);

(2) bacterias adaptadas a un husped animal (S. gallinarum, S. abortus-
equi, S. abortus-ovis, S. cholerasuis) y
(3) Salmonellas que no presentan preferencia de husped y son
patgenas tanto para hombres como para animales. En todos los
casos puede haber individuos portadores sanos (que no desarrollan la
enfermedad) que son agentes importantes de la dispersin del
patgeno

3.5.2.8.6. Shigella

Algunas especies de shigella que determinan disenteras bacilares son

transportadas por los alimentos.

3.5.2.8.7. Yersinia

Patgeno de roedores que puede pasar a humanos causando enfermedades

serias (peste bubnica o peste neumnica causada por Yersinia pestis) y
procesos diarricos (Yersinia enterocolitica).

3.5.2.9. Espirilceas

Vibrio es el nico genero de esta familia que se encuentra con cierta frecuencia
en los alimentos; se ha encontrado en la sal y en las salmueras utilizadas en la
preparacin de carnes y pescados.

3.5.2.10. Bruselceas

35
Se cita esta familia nicamente porque algunas de las bacterias patgenas que
comprende pueden ser transmitidas por los alimentos: Pasteurella tularensis,
de ardillas y conejos, puede determinar la tularemia del hombre; las especies de
Brusella de los animales ocasionan a veces brucelosis.

36
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. La cpsula de la clula procariota;

a) es constante
b) tiene un grosor inferior a 0,1
c) confiere proteccin ante la fagocitosis
d) se tie con los colorantes habituales
e) no interviene en el fenmeno de Neufeld

2. Una agrupacin de bacterias de 8 en 8 en forma de cubo recibe el

nombre de:
a) Diplos b) Ttradas c) Sarcinas d) Cadenas e)
Racimos

3. Son funciones del nucleoide: 1= La replicacin del ADN y la

segregacin del cromosoma; 2= La transcripcin; 4= La regulacin e
intervencin en la traduccin y en la transferencia gentica
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

4. Son funciones de la membrana citoplasmtica: 1= Actuar como

biomembranas: transporte, barrera osmtica; 2= Suplir la carencia de
estructuras especializadas en reacciones energticas (enzimas
respiratorios), secrecin (descarga de desechos y productos), sntesis
de estructuras y molculas externas; 4=Conferir rigidez a la bacteria
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

5. Los ribosomas bacterianos: 1= Son numerosos (18.000 por clula); 2=

Tienen una composicin de RNAr 60% y protenas 40 %; 4= Tienen
una subunidad grande de 70 S con 34 protenas y RNA de 23 S
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

6. Los plsmidos: 1=Son ADN extracromosmico; 2=De 100 a 1000

veces menor que el cromosoma con extremos engarzados (circular);
4=Confierenrasgos o caractersticas y no son necesarios para la
supervivencia.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

7. Los pili :
a) los comunes se encuentran en pequeo nmero 1- 4 por clula
b) estn constituidos por una protena denominadapilina de un
peso molecular de 17.000 daltons
c) los sexuales se encuentranen gran nmero 100-200 por clula
d) los comunes son largos de 20 nm
e) los sexuales son cortos
f) los sexuales son soportes de la adherencia y poseenadhesinas
8. Los cocos en cadena se denominan:
a) Micrococos b) Sarcinas c)Estafilococos
d) Estreptococos e) Diplococos

37
9. Las fimbrias : 1= Son abundantes (de 100 a 200 por clula); 2= Son
fibrillas de composicin variable; 4 = Tienen una funcin de
adherencia (colonizacin en tejidos y fijacin en biofilms)
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

10. Las bacterias con una morfologa en forma de coma reciben el

nombre de:
a) Cocos b) Bacilos c) Espirilos d) Vibrios e)
Sarcinas

11. La pared celular tiene importancia en la clasificacin de los grupos

taxonmicos mayores. Asi se agrupan: 1= En la Divisin I:
Gracillicuteslas bacterias Gram (-); 2= En la Divisin II: Firmicutes
las bacterias Gram (+); 4= En la Divisin III:Tenericutes Clase I:
Mollicutes las bacterias sin Pared Celular (micoplasmas)
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

12. La pared celular de las bacterias: 1=Es una estructura relativamente

rgida debido al peptidoglicano; 2=Es la envoltura ms interna de la
clula; 4=Da forma a las bacterias y la protege de los cambios
depresin.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

13. La estructura del esporo bacteriano: 1= Presenta un Core ( estructuras

de la forma vegetativa) compuesto de pared esporal, membrana
esporal,nucleoplasma (excntrico) y citoplasma; 2= Presenta un
Cortex (peptidoglicano especial)compuesto de intina y exina (con
queratina que le confiere la impermeabilidad); 4= Presenta un
Exosporium (2 cubierta lipoproteica)
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

14. La estructura de las bacterias Gram (-): 1= Es ms compleja;

2=Tiene membrana externa con una estructura semejante a la
membrana celular con una hoja externa de LPS y una hoja interna de
PS incluyendo porinas; 4= Tiene una capa fina de Peptidoglicano; 8=
No presenta un espacio periplasmtico con enzimas
a) 6 b) 7 c)13 d)14 e)15

15. La composicin y estructura del DNA en los procariotas es como en

los eucariotas: 1=Se ajusta al modelo de Watson y Crick con una
doble hlice de 20 nm; 2=Tiene como residuos cido fosfrico,
pentosas, bases pricas (A, G) y bases pirimdicas (C, T); 4=Est
distribuido en variossegmentos en lugar de una molcula nica
circular.

38
 a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

16. La capa mucosa del glicocalix:

a)Es gruesa, de consistencia gomosa, organizada

b)Es desprendible, soluble, no organizada

c)Est compuesta de unidades repetidas de polisacridos y

protenas

d)Excluye partculas (p.ej. tinta china en tincin negativa)

e)Confiere carcter mucoide a las colonias

17. Existen varios tipos de proteinas en la membrana celular:

1=Uniportadoras (una molcula y una direccin); 2= Simportadoras
(dos molculas y una direccin); 4= Antiportadoras (dos molculas y
dos direcciones)
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

18. En la sntesis de peptidoglicano existen varias etapas: 1=Sntesis de

precursores: NAM (N-acetil-murmico), NAG (N-acetil-
glucosamina)y peptidos; 2=Elongacin del polimero lineal; 3 =
Transpeptidacin(puentes entre polmeros); 4=Formacin del
disacrido tetrapeptido. En qu orden se realizan?
a)1-2-3-4 b)1-2-4-3 c)1-3-4-2 d)1-4-2-3 e)1-
4-3-2

19. En la esporulacin existen una serie de fases: 1. formacin de las

capas de exina e intina con incorporacin de cristeina; 2. formacin
de la corteza con incorporacin de cido dipicolnico; 3.formacin de
un filamento de cromatina con liberacin de antibitico y exoenzima;
4. formacin de un tabique de preespora; 5. formacin de un
protoplasto de la espora con la produccin de catalasa resistente
alcalor.
a) 3-4-5-2-1 b) 4-5-3-2-1 c) 5-3-4-1-2 d) 5-3-4-2-1
e)3-4-5-1-2

20. En la clasificacin por la posicin de los flagelos las bacterias se

denominan : 1= Montricas (tipo Vibrio); 2= Loftricas (tipo
Pseudomonas); 4= Anftricas (tipo Espirilos); 8= Pertricas (tipo
Enterobacterias)
a) 6 b) 7 c) 13 d)14 e)15

21. El significado y funcin del esporo bacteriano: 1=Es una forma de

resistencia frente a deficiencias nutritivas, desecacin, frio,
calor,presin, etc; 2=No se da en todas las bacterias, slo en algunas

39
 especies de bacilos; 4=Se utiliza en clasificacin lacapacidad de
esporular y la posicin del esporo en la bacteria.
a)3 b=4 c)5 d)6 e)7

22. El Pilus o los Pili sexuales: 1=Es una estructura tubular rgida de
pilina; 2=Tiene la funcin en la conjugacin de servir de puente de
transferencia de DNA entre la clula dadora y la receptora; 4=Tiene
tambin una funcin de adherencia (colonizacin tejidos y adherencia
enbiofilms)
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

23. El peptidoglicano: 1= es una molcula gigantesca que envuelve a la

clula; 2= la unidad repetitiva es un monmero de N-acetil
murmicounido a un pentapptido; 4= la unidad repetitiva es un
monmero deN-acetil murmico unido a un tetrapptido; 8= la unidad
repetitiva es un dmero de N-acetil glucosamina y N-acetil murmico
unido a un tetrapptido.
a)3 b)4 c)5 d)8 e)9

24. El mesosoma: 1= Son formaciones membranosas y tubulares; 2= Son

ms frecuentes en G +; 4= Aumenta la superficie y la funcin de
membrana as como la secrecin de enzimas (penicilinasas); 8= El
mesosoma central interviene en la divisin celular, replicacin DNA y
la unin al material nuclear
a)6 b)7 c)13 d)14 e)15

25. El gancho del filamento: 1=Es una formacin tubular; 2= En un

extremo se inserta el filamento; 4= En el otro extremo se inserta el
cuerpo basal y a travs de ste se ancla a la clula
a=3 b=4 c=5 d=6 e=7

26. El flagelo bacteriano : 1= Es un filamento helicoidal; 2= De 12 a 18

nm de dimetro; 4= Compuesto de subunidades proteicas
denominadas Pilinas de 40.000 dltones
a) 3 b) 4 c)5 d) 6 e) 7

27. El esporo bacteriano: 1=Presenta una apariencia birrefringente pues no

se tie con colorantes habituales; 2=Presenta una morfologa esfrica
u oval con un dimetro: de 0.2 a 2.0 ; 4=Tiene un alto contenido en
agua del 70 al 80%.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

28. El citoplasma soluble: 1= Es una solucin gelatinosa, densa; 2=Tiene

un alto contenido en agua (70 - 80 %); 4= No contiene molculas
disueltas (azcares, aminocidos, sales, etc).
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

40
29. Cual de las siguientes son funciones de la pared celular de los
procariotas: 1= Conferir rigidez a la clula; 2= Suministrar energa
para el transporte activo por fosforilacin oxidativa; 4= Ser el puntode
anclaje de bacterifagos.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

30. Cul de las siguientes es una fase del proceso de germinacin?

a) formacin de tabiques de preesporas
b) formacin de protoplastos de la espora
c) extrusin
d) maduracin
e) formacin de la corteza

31. Cul de la siguiente no es una funcin de la membrana

citoplasmtica de las bacterias?
a) suministrar la energa para e transporte activo por fosforilizacin
oxidativa
b) suministrar rigidez a la clula
c) ser una barrera osmtica
d) sintetizar o participar en la sntesis de la pared y de la cpsula
e) el formar mesosomas septales y laterales (funcin secretora).

32. Cuntos ribosomas tiene aproximadamente una clula procariota en

divisin?:
a) 18 b) 180 c) 1.800

d) 18.000 e) 180.000

33. Los coeficientes de sedimentacin de las subunidades grande y

pequea de ribosomas bacterianos son:
a) 30 y 50 b) 40 y 60 c) 30 y 60 d) 50 y 60 e) 40
y 50

34. En una clula de E. coli cuantos ribosomas y polisomas suele haber:

a) 18.000 ribosomas en 1.000 polisomas
b) 18.000 ribosomas en 100 polisomas
c) 1.000 ribosomas en 180 polisomas
d) 1.000 ribosomas en 18 polisomas
e) 500 ribosomas en 18 polisomas
35. Las clulas procariotas poseen: 1 = Pared celular con peptidoglicano
2= Retculo endoplasmtico; 4.= Aparato de Golgi; 8= Lisosomas 16.
Mitocondrias; 32. Ribosomas 70S; 64= Membrana citoplasmtica
a)63 b)65 c)67 d)97 e)99

36. Cul de las siguientes no es una denominacin para el ncleo de las

bacterias?
a) equivalente nuclear b) cromosoma bacteriano
c) nucleoplasma d) nucleolo e) nucleoide

41
37. Cul de la siguiente no es una funcin de la membrana
citoplasmtica de las bacterias?
a) suministrar la energa para el transporte activo por
fosforilizacin oxidativa
b) suministrar rigidez a la clula
c) ser una barrera osmtica
d) sintetizar o participar en la sntesis de la pared y de la cpsula
e) el formar mesosomas septales y laterales (funcin secretora).

38. Cul de las siguientes sustancias atraviesa la membrana por un

sistema de transporte del tipo de "Difusin facilitada"?
a) lactosa b) glucosa c) glicerol
d) galactosa

39. Una bacteria con un penacho de flagelos en un extremo se denomina:

a) monotrica b) lofotrica c) anfitrica d)
pertrica

40. Las enterobacterias como las Salmonellas o Escherichia en relacin

con los flagelos son:
a) pertricas b) lofotricas c) anfitricas d) monotricas

41. Los pili o fimbrias:

a) los comunes se encuentran en pequeo nmero 1-4 por clula
b) estn constituidos por una protena denominada pilina de un
peso molecular de 17.000 daltons
c) los sexuales se encuentran en gran nmero 100-200 por clula
d) los comunes son largos de 20 nm
e) los sexuales son cortos f) los sexuales son soportes de la
adherencia y poseen adhesinas
42. Cul de las siguientes no es una estructura de la espora bacteriana?
a) nucleoplasma excntrico
b) citoplasma duro y granuloso
c) cortex con peptidoglicano
d) cubierta intina
e) aparato de Golgi
f) exina con queratina
43. Cul de las siguientes es una fase del proceso de germinacin?
a) formacin de tabiques de preesporas
b) formacin de protoplastos de la espora
c) extrusin
d) maduracin
e) formacin de la corteza
44. El peptidoglicano: 1. es una molcula gigantesca que envuelve a la
clula; 2= la unidad repetitiva es un monomero de N-acetil murmico
unido a un pentapeptido; 4= la unidad repetitiva es un monomero de

42
 N-acetil murmico unido a un tetrapeptido; 8= la unidad repetitiva es
un dimero de N-acetil glucosamina y N-acetil murmico unido a un
tetrapptido
a)3 b)4 c)5 d)8 e)9

45. Son inclusiones citoplasmticas: 1. Grnulos de polifosfatos ; 2=

Grnulos de lpidos; 4= Grnulos de glucosa; 8= Vacuolas de gases
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

46. Son funciones del cromosoma bacteriano: 1. Replicacin del DNA;

2.=Transcripcin; 4= Sntesis de protenas; 8= Segregacin de
cromosomas
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

47. Son tipos de ADN extracromosmicos: 1. Factores sexuales; 2.=

Factores de resistencia; 4= Plsmidos determinantes de patogenicidad;
8= Plsmidos degradantes Sol:
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

48. En la replicacin del ADN extracromosmico: 1. Es dependiente de la

replicacin del cromosoma; 2= Existe competencia entre plsmidos;
4= Puede perderse el plsmido (curacin)
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

49. Los flagelos;

a) tienen una estructura helicoidal
b) son ramificados
c) son rgidos y rectos
d) son muy frecuentes en los cocos
e) tienen un dimetro de 200 mm

50. Los flagelos:

a) estn compuestos de una protena denominada pilina
b) el filamento est compuesto de 3 mono gemas
c) Presenta un cuerpo basal con 2-4 anillos segn sean de
bacterias gram positivas o gram negativas
d) intervienen en la adherencia o colonizacin
e) adems de protenas presentan unos lpidos denominados
"factor cuerda"
51. La composicin del peptidoglucano presente en la pared celular de
bacterias se determina por:
a) Serologa comparativa de protenas
b) Centrifugacin en gradiente de CsCI
c) Hibridacin del ADN mitocondrial
d) Cromatografa de hidrolizados cidos
e) Fusin de protoplastos
52. Cual de las siguientes partes de los flagelos no estn formadas por
flagelina?:
1) Filamento 2) asa 4) Anillo l8) Anillo S:

43
 a)3 b)6 c)12 d)13 e)14

53. Cual de las siguientes son funciones de la pared celular de los

procariotas: 1= Conferir rigidez a la clula ; 2= Suministras energa
para el transporte activo por fosforilacin oxidativa ; 4= Servir de
barrera mecnica y osmtica; 8= Ser el punto de anclaje de
bacterifagos; 16= Formar mesosomas septales o laterales
a)5 b)7 c)13 d)15 e)21

54. Cuando la concentracin osmtica del exterior de la clula es inferior

a la que existe en su interior?
a) La clula pierde agua
b) La clula gana agua
c) La clula se arruga
d) La clula secreta enzimas
e) Ninguna de las anteriores
55. Las bacterias Gram (-): 1= Se decoloran con alcohol-acetona; 2= La
coloracin final del Gram es roja; 4= Es espesor del pectidoglucano es
mayor (10nm) que en las Gram + ; 8= Presentan una membrana
externa con lpidos; 16= Presentan cidos teicoicos en la pared celular
a)3 b)7 c)11 d)27 e)31

56. Las formas L son resistentes a la penicilina porque:

a) No son bacterias b) Carecen de plsmidos
c) Carecen de pared celular d) Son protozoos
e) Sus propiedades bioqumicas permanecen inalteradas

57. Los flagelos: 1= No son visibles directamente al microscopio ptico;

2= Tienen una anchura aproximada de 20 nm; 4 = Son de naturaleza
glucdica; 8 = Pueden medir hasta 10 veces la longitud de la clula
a=7 b=11 c=13 d=14 e=15

58. La capsula de la celula procariota:

a) es constante
b) tiene un grosor inferior a 0.1 micras
c) se tie con los colorantes habituales
d) confiere proteccin ante la fagocitosis
e) no interviene en el fenmeno de Neufeld
59. La membrana externa de las bacterias G- contiene siempre: 1-
proteinas 2- fosfolipidos 4- lipopolisacaridos 8- polisacaridos 16-
acidos teicoicos
a) 5 b) 7 c) 10 d) 11 e) 23

60. El ADN es el portador de la informacion genetica en los seres vivos.

Esta informacion radica en:
a) su estructura primaria b) su estructura secundaria
c) su estructura terciaria d) asociacion DNA-
proteina

44
Capitulo 4. LA CELULA EUCARIOTICA: ESTRUCTURA Y
FUNCION

4.1. Cilios y flagelos

Al igual que las bacterias, muchas clulas eucariotas poseen estructuras para la
locomocin denominadas cilios y flagelos. Los cilios de los eucariotas son
idnticos a los flagelos de los eucariotas en estructura, aunque son ms cortos y
numerosos. Su estructura es ms compleja que la de los procariotas, estn
compuestos por microtbulos, 9 pares que rodean un par central todo ello
rodeado por una membrana. El flagelo de los eucariotas se mueve como un
ltigo al contrario de los procariotas que lo hacen rotando como un
sacacorchos.

4.2. Pared celular

Plantas, algas y hongos poseen pared celular mientras que el resto de los
eucariotas no la poseen. La pared celular mantiene la forma celular y previene
de la presin osmtica. La pared celular de las plantas, algas y hongos son
distintas y distinta a la de las bacterias en cuanto a su composicin y estructura
fsica. Por ejemplo, la pared celular de eucariotas no contiene peptidoglucano.
En plantas est compuesta de polisacridos como la celulosa y pectina. La de
los hongos filamentosos contiene quitina y celulosa y en levaduras manano. En
las algas existe celulosa, otros polisacridos y carbonato clcico.

4.3. Membrana citoplsmica

Independientemente de que la clula eucariota posea o no pared celular, posee

membrana citoplasmtica que rodea a la parte principal de la clula. La
membrana semipermeable es una bicapa lipdica que posee insertadas
protenas. Algunas de estas protenas atraviesan enteramente la membrana
creando poros a travs de los cuales los nutrientes entran dentro de la clula. A
estas protenas se las denomina permeasas.

Las diferencias existentes entre la membrana de eucariotas y procariotas

son:

- Los eucariotas contienen esteroles (fundamentalmente colesterol) que le

confieren rigidez a la membrana.
- En aquellos eucariotas que no poseen pared celular, la membrana est
reforzada por microtbulos de las protenas actina y miosina.
- Los eucariotas no localizan los enzimas implicados en la generacin de
energa metablica en su membrana.

45
4.4. Orgnulos celulares
Dentro de la membrana citoplsmica est el protoplasma que se divide en
carioplasma y citoplasma. El carioplasma es el material que hay dentro de la
membrana nuclear, mientras que el citoplasma es el material existente entre la
membrana nuclear y la membrana citoplsmica. En el citoplasma es donde se
encuentran los orgnulos celulares que son estructuras rodeadas de membrana
que realizan funciones especiales, tales como la fotosntesis y respiracin. Al
contrario que los procariotas, el citoplasma de los eucariotas posee una extensa
red de microtbulos y estructuras proteicas que constituyen el citoesqueleto de
la clula. Este citoesqueleto genera la forma de la clula y a travs de l se
mueven los orgnulos en el citoplasma.

a.- Ncleo

El ncleo de los eucariotas se caracteriza por su membrana nuclear; es una

doble membrana la cual se asemeja a dos membranas citoplasmticas juntas,
que contiene muchos poros grandes a travs de los cuales pasan sustancias
como protenas y RNA. Normalmente posee forma esfrica u oval. El ncleo
contiene la informacin hereditaria de la clula en la forma de DNA. En el
carioplasma que no se est dividiendo el DNA est combinado con protenas
como las histonas, dndole una apariencia fibrilar. Esta combinacin de DNA y
protenas se llama cromatina. Durante la divisin celular la cromatina se
condensa en cromosomas.

Dentro del carioplasma se encuentra el nucleolo, el cual aparece ms oscuro

con el microscopio electrnico. Alrededor del 5 al 10% del nucleolo es RNA,
siendo el resto protena. Esta estructura es el lugar de sntesis del RNA
ribosomal y de los componentes esenciales del ribosoma. Los componentes
proteicos de los ribosomas sintetizados en el citoplasma entran en el ncleo a
travs de los poros nucleares para combinarse con el RNA ribosomal recin
sintetizado. Tanto las protenas como el RNA forman las dos subunidades de
los ribosomas que salen del carioplasma a travs de los poros y se convierten
en funcionales en el citoplasma. Los ribosomas de eucariotas son mayores que
los de procariotas (80 S y 70 S respectivamente). Esto es debido a que las
subunidades de eucariotas son 60 S y 40 S (en procariotas son 50 S y 30 S).

b.- Retculo endoplsmico

El retculo endoplsmico es una red membranosa de sacos y tbulos que a

menudo estn conectados a la membrana nuclear y citoplsmica. Existen dos
formas de retculo endoplsmico: el rugoso y el liso. El rugoso posee

46
ribosomas y el liso no. Las protenas sintetizadas en el rugoso son liberadas en
el citoplasma o pasan a travs de su membrana dentro de los canales por donde
son distribuidas a distintas partes de la clula. El retculo endoplsmico liso
est implicado en la sntesis de glucgeno, lpidos y esteroides. Los canales del
retculo endoplsmico liso tambin sirven para la distribucin de las sustancias
sintetizadas en l.

c.- Aparato de Golgi

Est compuesto de sacos membranosos que tienen vesculas esfricas en sus

extremos. Fue descrito por primera vez por Camillo Golgi en 1898. Es el
centro de empaquetamiento de las clulas eucariotas, responsable del transporte
seguro de los compuestos sintetizados al exterior de la clula. El aparato de
Golgi est conectado a la membrana citoplasmtica donde se fusiona y as
poder excretar el contenido fuera de la clula, proceso que se llama exocitosis.
Otra funcin es la de empaquetar ciertos enzimas sintetizados en el retculo
endoplsmico rugoso en unos orgnulos llamados lisosomas. Estos enzimas
catalizan reacciones hidrolticas incluyendo proteasas, nucleasas, glicosidasas,
sulfatasas, lipasas y fosfatasas. El contenido de los lisosomas no se excreta sino
que permanece en el citoplasma y participa en la digestin citoplsmica de los
materiales ingeridos o absorbidos por la clula. El que los enzimas hidrolticos
permanezcan dentro del lisosoma protege a la clula de la accin ltica de estos
enzimas. En adiccin, el aparato de Golgi contiene glicosiltransferasas que
unen molculas de carbohidrato a protenas para formar glicoprotenas.

d.- Mitocondrias

Es un orgnulo citoplsmico donde se generan las molculas de ATP durante la

respiracin aerbica. La membrana interna est muy invaginada y es donde
tiene lugar la conversin de energa. Aunque las mitocondrias son orgnulos de
clulas eucariotas se parecen a las clulas procariotas; contienen sus propios
ribosomas, que son 70 S, su propio DNA el cual es una nica molcula circular
que contiene la informacin gentica necesaria para la sntesis de un limitado
nmero de protenas cuya sntesis tiene lugar en los propios ribosomas de las
mitocondrias. Finalmente, las mitocondrias se dividen para formar nuevas
mitocondrias de forma parecida a como lo hacen los procariotas e
independientemente del ncleo celular; sin embargo, no se pueden dividir si se
sacan del citoplasma.

e.- Cloroplastos

47
Es el lugar donde ocurren las reacciones fotosintticas, donde se utiliza la luz
como fuente de energa para convertir el CO2 en azcar y los tomos de O2 del
H2O en molculas de O2 gaseoso. El cloroplasto es una estructura rodeada por
una doble membrana cuyo interior se denomina estroma. La membrana interna
se pliega en el estroma formando sacos en forma de discos llamados tilacoides,
los cuales contienen la clorofila y los carotenos que intervienen en la
fotosntesis. Cada conjunto de tilacoides se llama grano. Algunos tilacoides se
unen a otros de otro grano formando una red. Los cloroplastos poseen las
mismas caractersticas que las mitocondrias (ribosomas 70 S, DNA circular,
fisin binaria). La similitud de las mitocondrias y los cloroplastos con los
microorganismos procariotas di base a la teora endosimbitica del origen de
estos orgnulos.

48
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. La transcriptasa (RNA polimerasa DNA dependiente): 1. Tienen un

peso molecular de 400.000 en bacterias 2. Tiene un peso molecular
mayor de 500000 en las clulas eucariotas 4. Tiene un peso molecular
de 64.000 en las mitocondrias 8. Tiene un peso molecular de 250.000
en los cloroplastos.
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

2. Los eucariotas, inmoviles, no fotosintticos y capaces de absorber

nutrientes a travs de su pared celular son:
a) Eubacterias b) Virus c) Priones d) Algas
e) Hongos

49
Capitulo 5. MOHOS Y LEVADURAS

5.1. Hongos

Los hongos son miembros del reino vegetal que no poseen races, tallos y
hojas, carecen del pigmento fotosinttico verde (la clorofila).

5.1.1. Mohos

Son hongos multicelulares que forman un entramado Filamentoso conocido

como micelio. Este compone de filamentos individuales llamados hifas.
Pueden crecer sumergidos en alimentos o superficialmente en cuyo caso el
crecimiento se caracteriza por aspecto Belloso o algodonoso.

5.1.1.1. Estructura de los mohos

Son organismos multicelulares, compuestos por clulas individuales que tienen
las mismas caractersticas que las bacterias, es decir, poseen un ncleo central
envuelto por el citoplasma, una membrana semipermeable que asegura el
intercambio con el exterior y una pared celular rgida. A veces, los ncleos
estn incluidos varios de ellos en una masa citoplasmtica sin separaciones (no
tabicados). Otras veces existe separacin (tabicados) entre cada citoplasma que
contiene un ncleo.

La reunin de diversas formas de todas estas clulas constituye un micelio, que

puede ser tan grande que lleva a verse incluso a simple vista. Un micelio tiene
varias ramificaciones o hifas, en cuyos extremos se desarrollan las esporas que
pueden quedar protegidas (esporangios) o al exterior (conidias). Las esporas se
pueden formar tambin en una clula cualquiera del micelio que se cubre de
una espesa y rgida pared (clamidosporas).

5.1.1.2. Reproduccin de mohos

Los mohos pueden desarrollarse a partir de un trozo de micelio, pero es raro

que este ocurra. La reproduccin de los mohos tiene lugar principalmente por
esporas asexuales, pero tambin pero tambin puede ocurrir por esporas
sexuales.

a) Esporas asexuales

Las esporas son ms difciles de destruir que el micelio y aguantan bien la

sequedad y altas temperaturas (30-50 C) durante largos perodos de tiempo. El
aire fcilmente lo desparrama y son conducidas a cualquier rincn para originar

50
nuevos mohos. Por ello en las empresas agroindustriales se deben limpiar bien
las paredes, suelos, etc., para evitar problemas con estos microorganismos. Los
tres tipos mas importantes son:

1. Conidios.- crecen en hifas espaciales denominados conidioforos

generalmente son abiertos.

2. Esporangiosporas.-crecen en hifas espaciales denominados

esporangioforo. Estn encerrados en un esporangioforo o saco.

3. Artrosforas o oidios.- se forman de la fragmentacin de una hifa cuyas

clulas se convierten en artrosporas.

Para Identificar un moho, se observa los esporangioforos son simples o

ramificados, tipo de ramificacin, tamao, forma, color y localizacin de
esporangios. Los conidios se pueden reconocer por su cabezuela.

b) Esporas sexuales

Llamados tambin hongos perfectos estos pueden ser no tabicados

(Ficomicetos ) o tabicados (Ascomicetos y Basidiomicetos).

Los Ficomicetos que ocasionan oosporas se denominan Oomicetos, que

generalmente son acuticos y raros en alimentos; y los que producen
zigosporas se denominan zigomicetos. Tanto las oosporas como zigosporas
son el resultado de la fusin de un gameto masculino y uno de femenino,
que estn recubiertas por una fuerte membrana que les permite resistir la
desecacin durante largos periodos de tiempo.

Los Ascomicetos producen esporas sexuales llamadas ascosporas, que se

encuentran en un asca o saco, en nmero generalmente de ocho por asca.
Los Basidiomicetos tambin producen esporas sexuales llamadas
basidiosporas, esta ltima, es de poca importancia en la microbiologa de
los alimentos.

5.1.2. Clasificacin de mohos

La clasificacin de los hongos es muy compleja y aqu vamos a ver slo lo ms

simple para poder seguir el curso. La clasificacin se basa en dos criterios: Las
hifas no tabicadas o tabicadas.

51
a) Hongos no tabicados

FICOMICETOS . Son hongos inferiores (en algunos casos se discute si

son hongos o no) y viven en ambientes acuosos. Destacan los gneros
Mucor que participa en la produccin de algunos tipos de alimentos y
Phytophthora alguno de cuyos miembros son patgenos vegetales (por
ejemplo P. infestans).

a) Mucor.
Son no septados, esperangioforos presentes en todas las partes del
moho, pudiendo ser simples o ramificadas, columela esfrica, cilndrica
o periforme, esporas lisas, los suspensores de las zigosporas son de
igual tamao, carecen de estolones, rizoides y esporangiolos. Las
especies muy difundidas son M. racemosus, M. Rouxii interviene en el
proceso Amilo de sacarificacin del almidn; algunos mucor toman
parte en la maduracin de quesos.

b. Rhizopus . Son no septados, posee estolones y rizoides que se

obscurecen frecuentemente al envejecer, los esporangioforos se
originan en ndulos en los que tambin forman los rizoides, los
esporangios son grandes y generalmente negros, columela hemiesfrica
y apfisis en forma de copa, micelio bastante algodonoso y carece de
esporangiolos. Frecuentemente se encuentra en el pan y en algunas
frutas (fresas y semejantes) y hortalizas.

Tabla 5.1. Principales gneros de mohos de los alimentos

NO TABICADOS TABICADOS
Ficomicetos (subclase Zigomicetos) Ascomicetos
Mucor Neurospora
Rhizopus Sclerotinia
Absidia
Thamnidium Deuteromicetos
Alternaria
Aspergillus
Botrytis
Cladosporium
Fusarium
Geotrichium
Penicillium

52
 c. Absidia. Semejante a rhizopus, del que se diferencia en que los
esporiangioforos se forman en las porciones internodulares y en que los
esporangios son pequeos y periformes.

d. Thamnidium. No son septados, esporangioforos con esporangios

apicales grandes y acumulos laterales de esporangiolos cerca de la base.
Los esporangiolos son como esporangios de miniatura con dos a doce o
mas esporas que se desarrollan en formaciones multiramificada que
crecen cerca de la base del esporangioforo.

b) Hongos tabicados

Llamados tambin hongos superiores se pueden agrupar en tres clases:

1. Ascomicetos. Son septados. Los ascomicetos sexuales, se forman por la

unin de dos clulas del mismo micelio y producen las distintas esporas
llamadas ascosporas, se encuentran en el interior de una bolsa o asca. En
los ascomicetos asexuales se reproducen por gemacin, los mas
importantes estn los hongos filamentosos Neurospora, y hongos
comestibles. Las otras especies pertenecen a las levaduras.

Neurospora (monilia). Tenemos a la neurospora sitophila. conocida

como hongo rojo del pan debido a que se desarrolla a menudo sobre
este alimento de color rosa y escasa consistencia, tambin sobre los
bagazos de la caa de azcar y otros alimentos. Micelio septado, areo
de filamentos largos formando una red poco apretada, hifas areas con
conidios ovales, abundantes de color rosa a rojo-naranja, que forman
cadenas ramificadas cerca de la parte superior de la colonia.

Sclerotinia. Ciertas especies son responsables de algunas

descomposiciones de hortalizas y frutas, en donde estn en la fase
conidial. Los conidios, en forma de limn, estn en cadenas, teniendo
un disyuntor que los separa.

2. Basidiomicetos. A este grupo pertenecen las levaduras. En ellos las

esporas sexuales (basidiosporas) se encuentran en el exterior de unas
estructuras como forma de maza denominadas basidios.

3. Deuteromicetos. Tradicionalmente se conocan como hongos imperfectos

porque en ellos no se haba podido encontrar la forma sexual y, por
consiguiente, no se sabe si producen ascosporas o basidiosporas.
Actualmente y mediante el uso de tcnicas de anlisis del ADN se ha
podido determinar que la mayora de ellos pertenecen al grupo de los
ascomicetos y, por alguna razn, han perdido la posibilidad de realizar la

53
 reproduccin sexual. Alguno de los hongos ms importantes en
microbiologa industrial son deuteromicetos: Penicillium productor de la
penicilina, Aspergillus productor de cido ctrico.

En esta clase de mohos los gneros ms importantes en los alimentos

especies con tabiques tranversales ms importantes son:

1. Alternaria. Estos mohos presentan el micelio tabicado con conidioforos y

conidios oscuros. Los conidios son se forma variada y tienen septas
transversales y longitudinales. Deterioran activamente productos vegetales.

2. Aspergillus. Estos mohos producen conidioforos estas terminan en una

protuberancia globosa o mazuda. Las conidias son esfricas, estn
formados por una sola clula y, en conjunto, presentan distintos colores.
Estos mohos crecen sobre mochos alimentos determinando coloraciones
amarillentas, verdosas u oscuras. Presentan micelio tabicado. Ciertas
especies de este genero producen aflatoxinas carcinogenticas, mientras
otras se emplean como elaboradoras de proteasas y cido ctrico. Se
encuentran ampliamente distribuidas y se pueden hallar en pasteles, tortas,
hortalizas, carnes y otros alimentos.

3. Penicilium. Estos organismos tienen un micelio septado, del que se forman

los conidiforos, que se ramifican cerca de su extremidad para formar un
dispositivo parecido a un pincel del que van las conidias. Las conidias se
forman a partir de la fialides. Sobre los alimentos producen colores tpicos
como el azul y verde azulado. Estos mohos son importantes en la
elaboracin de ciertos quesos. Otros tienen inters en la produccin de
antibiticos (por ejemplo, penicilina). Se encuentran ampliamente
distribuidos en el suelo, aire, polvo y otros muchos lugares, y se pueden
hallar en alimentos como el pan, pasteles, frutas y compotas. Algunas
especies producen la prodredumbre blanda de las frutas.

4. Botrytis. Estos organismos producen canidioforas largas, delgadas

frecuentemente pigmentadas. El micelio es tabicado y las conidias se
disponen en posicin apical. Las conidias son unicelulares y en conjunto de
color grisceo. Con frecuencia producen esclerocos irregulares de color
negro. Pueden causar un enmohecimiento gris en plantas y vegetales
comestibles. Determinan importantes enfermedades o alteraciones
comerciales en frutas y verduras. B. Cinerea presenta conidias y
conidioforas .

5. Cladosporium. Este genero se caracteriza por la presentacin de un

micelio tabicado con conidiforos oscuros que se ramifican varias veces
cerca del vrtice. Las conidias son tambin oscuras, con 1 o 2 clulas y a

54
 veces tiene forma de limn. C. Herbarun es una especie que produce
manchas negras en la carne de vaca.

6. Fusarium. Estos mohos producen un extenso micelio, que en los cultivos

aparece algodonoso con tonalidades rosas, prpuras o amarillas. Los
conidios tienen la forma de Canoa, pudiendo encontrarse aisladas o
formando cadenas. Estos hongos tienen importancia en el deterioro de
muchas frutas y verduras. Se encuentran asociados con la alteracin de los
pltanos denominada manchas del cuello.

7. Geotrichum (Oidium). Son hongos parecidos a las levaduras, que

presentan diversos colores, de los que mas frecuente es el blanco. El
micelio es tabicado y la reproduccin tiene lugar por fragmentacin del
micelio en artrosporas. En algunas ocasiones a estos organismos se les a
denominado. mohos de lechera, ya que son responsables del aroma y
sabor de muchos tipos de quesos. Tambin se designan como mohos de la
maquinaria porque se producen en el equipo en contacto con los alimentos
en las plantas de elaboracin, sobre todo en las de enlatado de tomate.

5.2. Levaduras

La mayora de las levaduras son hongos unicelulares microscpicos que no

forman micelio. Son seres de mayor dimensin que las bacterias, y con formas
variables (esfricas, ovaladas, cilndricas). Pueden tener de dos a incluso 100
micras de longitud y de 2 a 10 micras de dimetro

5.2.1. Estructura

Al igual que las bacterias, tienen ncleo, citoplasma, pared celular y membrana
citoplasmtica. El ncleo no tiene membrana de separacin y queda incluido
dentro del citoplasma. En este ltimo puede haber una o ms vacuolas, que son
bolsas con material de reserva (azcares, grasas) o con productos de desecho
del metabolismo celular. La membrana citoplsmica es semipermeable,
dejando pasar los elementos nutritivos que necesita la clula y permitiendo la
salida de los desechos de la misma.

5.2.2. Reproduccin de las levaduras

55
Las levaduras se reproducen de dos formas:

5.2.2.1. Asexuales
Por fisin simple. Como las bacterias.
Por gemacin: la levadura le sale una protuberancia con formacin de
nuevo ncleo y compartiendo el citoplasma durante un perodo de tiempo.
Despus forma una doble pared de separacin.

5.2.2.2. Sexuales
Las levaduras que pueden reproducirse sexualmente se conocen como
levaduras verdaderas este proceso implica la formacin de ascosporas.

5.2.3. Clasificacin

Las levaduras pertenecen a la divisin de hongos Eumicetos. Las verdaderas

levaduras encuadran en la clase Ascomicetos y las falsas o asporgenas en la
clase Deuteromicetos.

Tabla 5.2. Principales gneros de levaduras en los alimentos

VERDADERAS FALSAS

Ascomicetos Deuteromicetos
Debariomyces Candida
Pichia Rhodotorula
Saccharomyces Torulopsis

5.2.3.1. Ascomicetos
Se reproducen por medio de ascosporas seguida de la reproduccin sexual. Los
ascomycetos sobre todo las levaduras son importantes por que son utilizadas en
la industria de la fermentacin y como fuente de nutrientes pero tambin
participan en la reduccin de humos de las plantas muertas.

5.2.3.1.1. Debaryomices
Las levaduras redondas u ovales forman pelculas sobre las superficies de
carnes en salmuera, adems estas se conservan en temperaturas fras o frescas,
son las que se encuentran en refrigeracin a temperaturas de almacenan de
ciertas frutas y hortalizas.

56
5.2.3.1.2. Pichia
Son hongos de ciclo completo, esto significa que alterna la fase sexual con la
asexual, en su mayor parte de la propagacin asexual va con el ciclo conidio y
oidium, y la formacin de la asca se realiza en los extremos de las hifas.

5.2.3.1.3. Saccharomyces

Estas levaduras se encuentran especialmente en las fermentaciones, este tipo de

levaduras se encuentran tambin en la cerveza y el pan.

Se reproducen por gemacin multipolar o por formacin de ascosporas, puede

pueden tambin desarrollarse a partir de las clulas diploides cuando estas
representan la fase vegetativa. La especie S. Cereviceae se usa mucho en la
industria alimentaria, especialmente en la produccin de cerveza, vinos y
produccin de alhohol.

5.2.3.2. Deuteriomicetos
1. Candida. Son organismos levaduriformes que, en algunas ocasiones, se
han incluido entre los Hongos imperfectos; concretamente dentro de la familia
moniliaceae, junto con los gneros Trichothecium y Goetrichum. Se producen
por fragmentacin del micelio en blastosporas o por gemacin. Son levaduras
asporgenas que producen un pseudemicelio. Unas pocas especies tienen
importancia industrial y medica. Son corrientes en muchos alimentos como las
carnes frescas y curadas. Una de las especies produce el enranciamiento de la
margarina.

2. Rhodotorula. Son levaduras ascosporgenas que algunas veces producen

un pseudomicelio de tipo primitivo. Se producen por gemacin multipolar.
Muchas veces producen pigmentos rojos, tanto en los medios de cultivo como
en diversos tipos de alimentos. Estn ampliamente distribuidos en la naturaleza
y con frecuencia, se encuentran en el aire y en el polvo.

3. Torulopis (Torula). se trata de levaduras ascosporogenas que dan lugar a

clulas esfricas u ovales. Se producen por gemacin multipolar y a veces son
capaces de formar pseudomicelio de tipo primitivo. Ampliamente distribuidas
en la naturaleza y pueden crecer en alimentos refrigerados de diversas clases.

57
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Los mohos son :

a) Son hongos multicelulares y crecen a temperaturas altas
b) Son hongos multicelulares que crecen a pH bajo
c) Son hongos unicelulares que crecen en alta humedad
d) Son hongos pluricelulares que crecen en humedades bajas
e) Son hongos pluricelulares que crecen en un amplio rango de Aw.
2. Los mohos tienen la siguiente estructura:
a) Ncleo, ribosomas, citoplasma, membrana citoplasmtica, pared
celular
b) Ncleo, citoplasma, ribosomas, pared celular, tabiques
c) Ncleo, citoplasma, ribosomas, membrana citoplasmtica, hifas
d) Ncleo, ribosomas, citoplasma, retculo endoplasmatico, septos.
e) Ncleo, citoplasma, membrana citoplasmtica, pared celular,
cpsula
3. Los mohos se reproducen por :(Eleccin mltiple)
a) Desparramiento de conidios
b) Rompimiento de esporangio
c) Fragmentacin de una hifa.
d) Formacin de oosporas
e) Formacin de zigosporas.
4. Los mohos se clasifican en mohos tabicados y no tabicados, cual de las
alternativas es incorrecta:
a) Rhizopus son mohos no tabicados
b) Mucor es moho tabicado
c) Aspergillos es un moho tabicado
d) Penicillium es un moho tabicado
e) Absidia es un moho no tabicado
5. las levaduras se reproducen: (eleccin mltiple)
a) Fisin simple
b) Gemacin
c) Fragmentacin
d) Divisin celular
e) Formacin de ascosporas
6. Las levaduras se clasifican en sexuales y asexuales marque la
alternativa correcta
a) Pichia es una levadura sexual
b) Cndida es una levadura asexual
c) Saccharomyces es una levadura asexual
d) Rhodotorula es una levadura asexual
e) Devariomyses es una levadura sexual
7. Las levaduras son:
a) Hongos unicelulares que forman micelio
b) Seres de mayor dimensin que los virus
c) Hongos unicelulares que crecen en pHs altos
d) Hongos unicelulares que crecen en humedades altas
e) Hongos unicelulares que producen acidez

58
8. Los hongos captan sus alimentos por:
a) Fagocitosis b) Ingestin c) Fotosnteis
d) Absorcin e) Descomposicin

9. Cul de los siguientes tipos de esporas fngicas presenta movilidad?

a) Clamidosporas b) Ascosporas c) Zigosporas
d) Zoosporas e) Conidios s 30
10. Las levaduras se reproducen asexualmente por:
a) fisin b) Gemacin c) Ascosporas
d) La a y la b pueden ser ciertas e) La a y la c son ciertas d 30
11. Las tias son:
a) Micosis sistemticas b) Micosis cutneas
c) Micosis tipo micetomas eumicticos d) Micosis subcutneas b
30

12. Filobasidiella noeformans es

a) Una levadura ascomictica
b) Una levadura basidiomictica
c) Una levadura causante de micosis sistmica
d) La a y la c son ciertas
e) La b y la c son ciertas e 30
13. Candida albicans es:
a) Una levadura de la que no se conoce reproducin sexual
b) La forma levaduriforme de un hongo dimorfico
c) Una levadura de tipo ascomictico
d) Una levadura de tipo basidiomiceto
14. Los hongos se clasifican principalmente de acuerdo con:
a) Criterior bioqumicos b) Criterios genticos
c) Criterios morfolgicos d) Criterios serolgicos
15. Las blastomicosis y coccidioidiomicosis son micosis:
a) Cutneas b) Vaginales c) Subcutaneas
d) Sistemticas e) Oculares d 30

16. Cryptococcus neoformans es:

a) Una levadura b) Un hongo dimrfico
c) Un hongo filamentoso d) Una bacteria

59
Capitulo 6. NUTRICION MICROBIANA

6.1. Nutricin de los microorganismos

La gran meta que tiene un microorganismo es crecer y dividirse; para ello

necesita duplicar el material que posee. Las clulas utilizan elementos
qumicos que provienen del medio ambiente para transformarlos en los
constituyentes caractersticos que componen dicha clula. Estos compuestos
qumicos se llaman nutrientes y el proceso por el cual una clula transforma
estos nutrientes en sus componentes celulares se denomina anabolismo o
biosntesis. La biosntesis es un proceso que requiere energa. Esta energa se
obtiene del medio ambiente. Las clulas pueden utilizar tres tipos distintos de
fuentes de energa: luz, compuestos orgnicos o compuestos inorgnicos.
Aunque algunos organismos obtienen su energa de la luz, la mayor parte lo
hacen a travs de compuestos qumicos. Cuando estos compuestos qumicos se
rompen originando compuestos ms simples se libera energa y a este proceso
se le denomina catabolismo. El resultado colectivo de las reacciones anablicas
y catablicas es el metabolismo.

Cuando los microorganismos se separan de su hbitat (donde adquieren los

nutrientes) y se cultivan en laboratorios o industrias se deben usar medios de
cultivo que contengan los elementos qumicos necesarios para su crecimiento.

6.2. Nutrientes

Los nutrientes que requiere una clula para su crecimiento se pueden clasificar
en los siguientes grupos:

1.- Macronutrientes: carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno.

2.- Micronutrientes: fsforo, potasio, azufre, magnesio.

3.- Vitaminas y hormonas

4.- Elementos traza: zinc, cobre, manganeso, molibdeno, cobalto.

6.2.1. Macronutrientes

Carbono. Todos los organismos necesitan carbono en alguna de sus formas. El

carbono forma el esqueleto de los tres ms importantes nutrientes
(carbohidratos, lpidos y protenas) que se utilizan para la obtencin de energa
as como material celular. Los microorganismos que utilizan compuestos

60
orgnicos como fuente de carbono se llaman heterotrofos y aquellos que
utilizan el CO2 como fuente de carbono se llaman autotrofos.

Hidrgeno y Oxgeno. El hidrgeno y oxgeno forman parte de muchos

compuestos orgnicos. Se encuentran en el H2O, como componentes de
nutrientes y en la atmsfera. Adems el O2 se utiliza en la respiracin aerbica
como aceptor terminal de electrones.

Nitrgeno. Todos los organismos requieren nitrgeno. El nitrgeno es

metabolizado y entra a formar parte de las protenas, cidos nucleicos y
polmeros de la pared celular. Las fuentes de nitrgeno que pueden ser
utilizadas por diferentes organismos incluyen el N2 atmosfrico en algunos
procariotas, otros utilizan compuestos inorgnicos como nitratos, nitritos o
sales de amonio, mientras que otros requieren compuestos nitrogenados
orgnicos como son los aminocidos o pptidos.

6.2.2. Micronutrientes (c.a. 0,2 g / l)

Fsforo. El fsforo es esencial para la sntesis de cidos nucleicos y ATP;

tambin forma parte de los fosfolpidos y polmeros de la pared celular. El
fsforo se suministra normalmente como fosfato inorgnico; alternativamente
se puede utilizar fosfato orgnico como son los glicerofosfatos y fosfolpidos.

Potasio. El in potasio acta como coenzima y probablemente como catin en

la estructura de RNA y otras estructuras aninicas celulares.

Azufre. El azufre es necesario para la biosntesis de los aminocidos cisteina,

cistina y metionina. Tambin forma parte de coenzimas como biotina,
coenzima A y ferredoxina. El azufre se suministra en forma inorgnica como
sulfato u orgnica como cistina, cisteina y metionina.

Magnesio. Se utiliza como cofactor de reacciones enzimticas donde acta el

ATP.

6.2.3. Vitaminas y hormonas

Las vitaminas se clasifican en dos grupos, hidrosolubles y liposolubles. Dentro

de stas ltimas la vitamina A, D y E no son necesarias para el crecimiento de
las bacterias. Todas las vitaminas hidrosolubles, excepto el cido ascrbico,
son necesarias para el crecimiento de bacterias. La mayor parte de las

61
vitaminas hidrosolubles son componentes de coenzimas. En los medios
indefinidos se utiliza como fuente de vitaminas el extracto de levaduras.

6.2.4. Elementos traza (c.a. 25 mg / l)

En general los requerimientos de elementos traza se conocen slo

cualitativamente ya que es difcil demostrar su requerimiento debido a que las
cantidades necesarias se suelen encontrar a menudo como contaminantes en
otros constituyentes del medio. Son necesarios para activar algunos enzimas;
por ejemplo, el Mo6+ se necesita en la nitrogenasa que es el enzima que
cataliza la conversin del nitrgeno atmosfrico en amonaco en la fijacin
biolgica de nitrgeno.

6.3. Permeabilidad y transporte

La membrana citoplsmica controla el paso de los nutrientes dentro de la

clula, as como hacia fuera de la clula. Existen 4 mecanismos que regulan el
transporte de nutrientes:

1.- Difusion pasiva

Las molculas de H2O y algunos nutrientes liposolubles pasan libremente a

travs de la membrana hasta equilibrar concentraciones. No hay consumo de
energa.

2.- Difusion facilitada

Los nutrientes se unen a una protena transportadora para atravesar la

membrana pasando de mayor a menor concentracin. No hay consumo de
energa.

3.- Transporte activo

La mayor parte de los nutrientes son transportados mediante este mecanismo.

Este proceso permite concentrar altos niveles de nutrientes necesarios para las
actividades metablicas dentro de la clula. Hay consumo de energa. El ATP
distorsiona el sitio de unin de la protena transportadora dificultando a la
molcula salir de la clula.

4.- Transporte por translocacion de grupo

En este tipo la protena transportadora es un enzima que aade un grupo fosfato

del cido fosfoenolpirvico al nutriente durante el transporte. Este nutriente

62
alterado ya no es capaz de unirse a la protena transportadora por lo que se
acumula dentro de la clula.

PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Cul de los siguientes nutrientes pueden actuar como fuente de

carbono, fuente de nitrgeno y fuente de energa?
a) Glucosa b) Carbonato clcico c) Nitrato amnico
d) Pptidos e) Disacridos

2. Los microorganismos que crecen mejor a una concentracin de

oxgeno inferior a la atmosfrica se denominan:
a) Aerobios obligados b) Aerobios estrictos
c) Aerobios facultativos d) Microaerfilos
e) Anaerobios facultativos
3. La glucosa entra en la clula bacteriana atravesando la membrana
plasmtica por el proceso de:
a)difusin pasiva b)difusin facilitada
c)transporte activo d)translocacin de grupo
e)puede usar diversos sistemas
4. La maltosa y la lactosa entran en la clula bacteriana atravesando la
membrana plasmtica por el proceso de:
a)difusin pasiva b)difusin facilitada
c)transporte activo d)translocacin de grupo
e)puede usar diversos sistemas
5. El glicerol entra en la clula bacteriana atravesando la membrana
plasmtica por el proceso de:
a)difusin pasiva b)difusin facilitada
c)transporte activo d)translocacin de grupo
e)puede usar diversos sistemas
6. El oxgeno molecular entra en la clula bacteriana atravesando la
membrana plasmtica por el proceso de:
a) difusin pasiva b)difusin facilitada
c)transporte activo d)translocacin de grupo
e)puede usar diversos sistemas
7. La fosfotransferasa est implicada en el transporte al interior de la
clula de:
a)glicerol b)lactosa c)maltosa d)glucosa
e)bases pricas

8. El requerimiento de nitrgeno en la mayora de las bacterias

fotosintticas se suple con:
a)sales de amonio cuaternario b)aminocidos
c)nitratos d)amoniaco
e)nitrgeno molecular
9. La mayora de las bacterias, nutricionalmente, pertenecen al grupo de:
a)fotoautotrofos b)quimioautotrofos
c)fotoheterotrofos d)quimioheterotrofos

63
 e)prototrofos

10. Un organismo auxotrofo para la leucina: 1=es heterotrofo 2=necesita

leucina para crecer, adems de una fuente de carbono, nitrgeno,
azufre, fsforo... 4=el nico compuesto orgnico que requiere es
leucina.
a)1 b)2 c)3 d) 4 e)5

11. Cuales de las siguientes afirmaciones son ciertas?: 1=Los

microorganismos fijadores de nitrgeno toman ste de la atmsfera ;
2=Los microorganismos fijadores de nitrgeno tienen nitrogenasa;
4=Los microorganismos fijadores de nitrgeno toman ste del suelo
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

12. Un microorganismo que no necesita compuestos orgnicos de carbono

para crecer, que obtiene ATP por un proceso de fosforilacin
oxidativa, que utiliza el Fe(2+) como donador de electrones y el O2
como aceptor de electrones, pertenece, nutricionalmente, al grupo:
a) fotoautotrofos b)quimioautotrofos
c)fotoheterotrofos facultativos d)fotoheterotrofos
obligados
e)quimioheterotrofos
13. La membrana citoplasmtica es una barrera semipermeable
responsable del flujo de molculas dentro y fuera de la clula. El
trnsito de las mleculas por difusin: 1=es ms fcil cuanto ms
pequeas son las molculas; 2=es ms fcil si las molculas son
polares; 4=en el caso de las protenas se realiza a travs de pasillos
formados por las propias protenas de la membrana.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

14. Las bases pricas y pirimidnicas entran en la clula de los procariotas

por el sistema fosforibosil transferasa que es un sistema de transporte:
a)transporte activo b)difusin facilitada
c)exocitosis d)translocacin de grupo
e)difusin pasiva
15. Cul de estas caractersticas se corresponden con el factor V?
a) Termostable; NAD b) Termolbil; NAD
c) Termostable; hemina d) Termolbil; hemina
e) Ninguna de las anteriores

64
Capitulo 7. CULTIVO DE LOS MICROORGANISMOS: MEDIOS DE
CULTIVO

7.1. Diseo de los medios de cultivo

A la hora de disear un medio de cultivo no slo hay que tener en cuenta los
nutrientes sino tambin las condiciones fsicas que permitan el crecimiento de
los microorganismos.

1.- Aporte de nutrientes

La cantidad y naturaleza de los nutrientes en un medio de cultivo viene

determinada por el rendimiento de un producto en especial adems de los
requerimientos nutricionales del microorganismo.

2.- pH

Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado

de las sustancias producidas por el propio microorganismo; por ejemplo:

Utilizacin de carbohidratos ----> Produccin de cidos orgnicos ---->

Acidificacin

Catabolismo de protenas ----> Produccin de materiales nitrogenados ---->

Alcalinizacin

Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del
microorganismo. Estos cambios se pueden prevenir controlando el pH
mediante sistemas tampn. Uno de los ms utilizados en microbiologa es la
combinacin de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de
aproximadamente 6,8.

3.- Necesidades de gases

Los gases principales que afectan al desarrollo microbiano son el oxgeno y el

dixido de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al
oxgeno libre clasificndose en cuatro grupos:

65
 i.- Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxgeno libre.
ii.- Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxgeno libre.
iii.- Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia
como en ausencia de oxgeno libre.
iv.- Microaerfilas: bacterias que crecen en presencia de pequeas cantidades
de oxgeno libre.

Para desarrollar bacterias aerobias se incuban los medios de cultivo en

agitacin constante o introduciendo aire estril en el medio.

Los anaerobios estrictos son muy sensibles al O2 por lo que se debe evitar la
exposicin de estos microorganismos al O2. Se puede obtener un ambiente de
anaerobiosis por los siguientes mtodos:

A.- Agregando al medio de cultivo un compuesto reductor, como es el

tioglicolato sdico, para disminuir el contenido de O2.

B.- Quitando el O2 por procedimientos mecnicos y reemplazndolo

por N2 o CO2.

C.- Mediante reacciones qumicas dentro del recipiente que contiene el

medio de cultivo inoculado para combinar el oxgeno libre con otro
compuesto. Por ejemplo: al encender una vela se transforma el oxgeno
en dixido de carbono.

4.- Suministro de luz

Los organismos fotosintticos debern ser expuestos a una fuente de

iluminacin ya que la luz es su fuente de energa. Esta fuente de iluminacin
no debe plantear problemas de variacin de temperatura, por lo que suelen
usarse lmparas fluorescentes con un desprendimiento mnimo de calor.

5.- Control de la temperatura

El desarrollo de las bacterias depende de reacciones qumicas, y la velocidad

con que se efectan estas reacciones est influda por la temperatura, por lo que
la temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los
microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura ptima de
crecimiento clasificndose segn esto en los siguientes grupos:

i.- Psicrfilas: capaces de desarrollarse a 0 C o menos. Su temperatura

ptima es alrededor de los 15 C.

ii.-Mesfilas: crecen mejor entre 25 y 40 C.

66
 iii.- Termfilas: crecen mejor entre 45 y 60 C.

6.- Otros requerimientos

Halfilas: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de

sal (10 - 15%). Son aquellas bacterias aisladas del mar y ciertos alimentos.

Otras bacterias, como las aisladas en las fosas marinas, requieren presiones
superiores a las normales.

7.2. Tipos de medios de cultivo

7.2.1. Estado:

A.- Medios lquidos

B.- Medios slidos: llevan un agente solidificante (Agar) que es un

polisacrido acdico producido por ciertas algas rojas que gelifica
por debajo de 45 C. Se usa a una concentracin del 1,5%.

C.- Medios semislidos: agar a una concentracin del 0,7%.

7.2.2. Composicin:

A.- Medios sintticos o qumicamente definidos. Llevan fuente de carbono,

fuente de nitrgeno, sales que suplan iones (P, K, Mg, Fe, Ca...), otros
elementos como son estimuladores del crecimiento (eritritol para Brucella
abortus) pero siempre a concentraciones conocidas.

B.- Medios complejos o de composicin indefinida. Estos medios llevan

ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusin de cerebro, extracto
de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con
exactitud la composicin cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.

C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con

aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados
microorganismos (particularmente hetertrofos exigentes). Ejemplo: adiccin
de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas.

67
D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseo el
crecimiento especfico de un microorganismo particular (o grupo de
microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos
a partir de una poblacin microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de
carbono es selectivo para autotrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el
crecimiento de los Gram (+); utilizando maltosa como nica fuente de carbono
slo crecern los que usen maltosa.

E.- Medios diferenciales. Son aquellos destinados a facilitar la discriminacin

de microorganismos de una mezcla por sus propiedades diferenciales de
crecimiento en dichos medios. Ejemplo: Agar sangre diferencia hemolticos de
no hemolticos; McConkey diferencia lactosa (+) de lactosa (-).

F.- Medios de mantenimiento. Suelen ser distintos a los de crecimiento

ptimo ya que el crecimiento rpido y prolfico suele ocasionar la muerte
rpida de las clulas. Ejemplo: al aadir glucosa y utilizarla los
microorganismos producen cidos, acidificndose el medio por lo que es
preferible no utilizar glucosa en los medios de mantenimiento.

7.3. Aislamiento de microorganismos en cultivo puro

Un cultivo puro es aquel formado por clulas provenientes de una sla inicial y
por tanto pertenecientes a la misma especie y cepa. Es una situacin artificial
ya que en la Naturaleza los microorganismos se encuentran formando
poblaciones mixtas y heterogneas. Es un artificio obligado para estudiar cada
especie y cepa de microorganismo en particular.

1.- Mtodos para aislar cultivos puros

i. Tcnica de siembra por estras en placa.

ii. Tcnica de vertido en placa.
iii. Tcnica de enriquecimiento del cultivo: consiste en disear
condiciones de cultivo que favorezcan especficamente al
microorganismo que queremos aislar y que se encuentra en
pequeas cantidades.
iv. Tcnica de las diluciones en serie: se utiliza para microorganismos
cuya proporcin es mayoritaria dentro de la poblacin mixta.
v. Tcnica de aislamiento de una sola clula mediante un
micromanipulador.

2.- Mantenimiento y preservacin de cultivos puros

Se utilizan diversos procedimientos de acuerdo con las caractersticas y la

tolerancia del microorganismo en cuestin:

68
 i. Resiembra peridica en medios frescos.
ii. Preservacin de cultivos con una capa de aceite mineral.
iii. Liofilizacin
iv. Almacenamiento a temperaturas muy bajas en presencia de
agentes estabilizantes como glicerol o dimetilsulfxido. Nitrgeno
lquido (- 196 C).

3.- Colecciones de cultivos

La primera coleccin conocida de cultivos tipo fue la de Kral en Praga

(1900).
Estados Unidos (ATCC) est en Rockville (Maryland).
Francia (CIP) est en el Instituto Pasteur (Pars).
Reino Unido (NCYC) est en Norwich.
Espaa (CECT) est en Valencia.
Alemania (DSM) est en Darmstadt.
Holanda (CBS) est en Baarn.
Japn (IFO) est en Osaka.

69
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. El agar sangre es un medio de cultivo: 1=diferencial; 2=selectivo;

4=de mantenimiento; 8=mnimo; 16=complejo.
a)9 b)17 c)19 d)20 e)21

2. Un medio con extracto de levadura, glucosa y sales es un medio de

cultivo: 1=diferencial; 2=selectivo; 4=de mantenimiento; 8=mnimo
;16=complejo.
a)9 b)16 c)17 d)20 e)21

3. En un medio de cultivo, rico, complejo, que lleve un indicador de pH

que sea amarillo en medio cido, verde en medio neutro y azul en
medio alcalino, la utilizacin de un azcar como la lactosa se
observara en el medio como aparicin de color:
a)azul b)verde c)amarillo
d) no tendra ningn efecto en el color del medio
e)diferente segn se oxidase o redujese el indicador

4. En un medio de cultivo, rico, complejo, que lleve un indicador de pH

que sea amarillo en medio cido, verde en medio neutro y azul en
medio alcalino, la utilizacin de una protena se observara en el
medio como aparicin de color:
a)azul b)verde c)amarillo
d)no tendra ningn efecto en el color del medio
e)diferente segn se oxidase o redujese el indicador

5. Los medios de cultivo de mantenimiento: 1=deben llevar vitaminas;

2=nunca llevan glucosa; 4=pueden llevar glicerol.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

6. Cual de los siguientes microorganismos presenta un crecimiento

invasivo (swarming) cuando crece en una superficie de agar?:
a)Enterobacter b)Escherichia c)Proteus d)Yersinia
e)Serratia

7. Los medios de cultivo de mantenimiento: 1=deben llevar vitaminas;

2=nunca llevan glucosa; 4=pueden llevar glicerol.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

8. El medio de MacConkey es: 1=Selectivo; 2=Diferencial; 4=Contiene

lactosa.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

9. El CO2 como nica fuente de carbono es selectivo para:

a)autotrofos b)auxotrofos c)heterotrofos d)aerobios e)anaerobios

70
10. El nitrgeno es necesario para la vida celular, son fuentes de
nitrgeno: 1=el nitrato para los organismos fotosintticos 2=el
nitrgeno atmosfrico para los fijadores de nitrgeno 4=compuestos
reducidos de nitrgeno para la mayora de las bacterias.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

11. El crecimiento en agar sangre: 1=permite diferenciar a los

microorganismos catalasa positivos de los negativos; 2=permite la
observacin de la existencia de la enzima coagulasa; 4= permite la
observacin de la existencia y caractersticas de la hemolisis.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

71
Capitulo 8. CRECIMIENTO MICROBIANO

8.1. Tiempo de generacin

Las principales reacciones de la sntesis celular son reacciones de

polimerizacin, proceso por el cual los polmeros (macromolculas) se
sintetizan a partir de monmeros: sntesis de DNA, RNA y protenas; que una
vez sintetizadas se ensamblan formando las estructuras celulares tales como la
envuelta celular, flagelos, ribosomas, cuerpos de inclusin, etc. En la mayor
parte de los microorganismos este crecimiento contina hasta que las clulas se
dividen en dos nuevas clulas. El tiempo que requiere una clula para
completar su ciclo es muy variable y depende de factores nutricionales y
genticos. El intervalo que transcurre en la formacin de dos clulas a partir de
una clula se llama generacin y el tiempo requerido para esto es el tiempo de
generacin.

8.2. Clculo del tiempo de generacin

Tiempo de generacin (G) es el tiempo requerido para que una clula se divida
o una poblacin se duplique.

t
G = -----
n

Si partimos de una clula al cabo de una generacin habr duplicado su nmero

y as sucesivamente en cada generacin. Como se puede comprobar el
crecimiento se produce en progresin geomtrica:

1 generacin -------------> 2 clulas = 21

2 generaciones -------------> 4 clulas = 22
3 generaciones -------------> 8 clulas = 23
4 generaciones -------------> 16 clulas = 24
5 generaciones -------------> 32 clulas = 25

Si partimos de N clulas (en microbiologa los estudios se realizan con

poblaciones), a un tiempo determinado (Ta) tenemos un nmero de clulas
determinadas (Na). En la primera generacin se duplicar el nmero de clulas
(2Na) y as sucesivamente de tal manera que al cabo de un tiempo determinado
Tb el nmero de clulas determinadas ser Nb (Nb = 2n Na) donde n es el
nmero de generaciones transcurridas desde Ta hasta Tb. En esta frmula (Nb
= 2n Na) conocemos todos los parmetros excepto el nmero n de generaciones
transcurridas por lo que aplicando logaritmos ser posible calcularlo. Una vez

72
obtenido el nmero de generaciones n transcurridas en un tiempo t podremos
calcular el tiempo de generacin G para ese microorganismo.

Ta -------------> Na
1 generacin -------------> 2Na = 21 Na
2 generaciones -------------> 4Na = 22 Na
3 generaciones -------------> 8Na = 23 Na
4 generaciones -------------> 16Na = 24 Na
5 generaciones -------------> 32Na = 25 Na
n generaciones (Tb) -------> Nb = 2n Na

Nb = 2n Na

lg Nb = n lg 2 + lg Na

lg Nb - lg Na
n = ------------------------
lg 2

lg Nb / Na
n = ----------------
lg 2

Nb
n = 3,3 lg --------
Na

t
G = --------------------
3,3 lg Nb / Na

El tiempo de generacin de la levadura Saccharomyces cerevisiae es de 90

minutos y el de la bacteria Escherichia coli es 20 minutos. Esta bacteria tiene
un crecimiento muy rpido de tal manera que a partir de una sla clula se
obtienen al cabo de 8 horas (8 x 60 = 480 minutos; 480 : 20 = 24 generaciones;
224 = 2 x 106 clulas) 2 millones de clulas. Esta misma bacteria al cabo de dos
das se habra multiplicado hasta 2,2 x 1043 clulas. Una bacteria pesa
aproximadamente 10-15 -10-11 gramos por lo que el peso de todas estas clulas
es de aproximadamente 2,2 x 1030 gramos que equivalen a 8 veces el peso de la
Tierra.

73
8.3. Curva de crecimiento

Es la representacin grfica del logaritmo del nmero de clulas frente al

tiempo. La curva terica sera una recta pues los microorganismos estaran
creciendo constantemente pero en la prctica la curva presenta distintas fases:

Fase de latencia: perodo de adaptacin de un microorganismo a un

nuevo medio de cultivo.
Fase exponencial o logartmica: aumento regular de la poblacin que
se duplica a intervalos regulares de tiempo (G).
Fase estacionaria: cese del crecimiento por agotamiento de nutrientes,
por acumulacin de productos txicos, etc.
Fase de declinacin o muerte: el nmero de clulas que mueren es
mayor que el nmero de clulas que se dividen.

Las propiedades de un microorganismo dependern de la fase de la curva en

que se encuentren (la produccin de antibiticos se lleva a cabo en la fase
estacionaria).

8.4. Crecimiento sincrnico

Hasta ahora se ha descrito el modelo de crecimiento de poblaciones

bacterianas. Estos estudios no permiten concluir nada sobre el tipo de
crecimiento de las distintas clulas ya que en la mayora de los cultivos
bacterianos el tamao celular est distribuido al azar. Para obtener informacin
sobre el tipo de crecimiento de las distintas bacterias debe recurrirse a los
cultivos sincrnicos, es decir, cultivos en los que todos los individuos de una
poblacin estn en la misma etapa del ciclo celular. Esto se puede conseguir
por diversas tcnicas:

Induccin: cambios repetitivos de temperatura o suministrando

nutrientes.
Seleccin: filtracin o centrifugacin diferencial.

Una curva de crecimiento sincrnico es del siguiente tipo: el nmero de clulas

del cultivo permanece aproximadamente constante durante el tiempo en el que
las clulas recin formadas aumentan de tamao; luego, el nmero de clulas
se duplica de manera brusca.

74
8.5. Cultivo contnuo

Consiste en mantener la poblacin microbiana en fase exponencial de

crecimiento. Se utiliza en fermentaciones industriales que requieren actividad
metablica mxima. Los sistemas de cultivo contnuo pueden hacerse
funcionar como quimiostatos o como turbidostatos. En un quimiostato la
velocidad de flujo de entrada y salida de nutrientes se mantiene a un valor
determinado de tal manera que la velocidad de crecimiento del cultivo queda
ajustada a esa velocidad de flujo. En un turbidostato el sistema incluye un
dispositivo ptico que regula la turbidez controlando la velocidad de flujo.

8.6. Determinacin del crecimiento microbiano

El clculo del nmero de clulas que existen en una suspensin se puede llevar
a cabo mediante el recuento celular (microscopa, nmero de colonias), masa
celular (peso seco, medida del nitrgeno celular, turbidimetra) o actividad
celular (grado de actividad bioqumica en relacin al tamao de la poblacin).
Todos estos mtodos se clasifican en dos apartados: mtodos directos y
mtodos indirectos.

Mtodos directos:

Recuento del nmero de clulas en una cmara Thoma

Peso seco celular

Determinacin de nitrgeno o de protenas totales

Determinacin de DNA

Mtodos indirectos:

Recuento de colonias en placa

Recuento sobre filtro de membrana

Consumo de oxgeno

Liberacin de dixido de carbono

Concentracin de un enzima constitutivo

Decoloracin de un colorante

Incorporacin de precursores radiactivos

Medida de la turbidez

75
8.7. Efecto de los factores ambientales sobre el crecimiento

No todos los microorganismos responden de la misma manera a los factores

ambientales, lo que para unos puede ser beneficioso para otros es perjudicial.

8.7.1. Temperatura

Es de los factores ambientales que ms influye en el crecimiento de los

microorganismos. Al aumentar la temperatura aumenta la velocidad de las
reacciones enzimticas hasta una cierta temperatura a la cual las protenas,
DNA y otras macromolculas son sensibles y se desnaturalizan. Cada
microorganismo tiene una temperatura mnima, ptima y mxima de
crecimiento. La temperatura ptima siempre est ms cerca de la temperatura
mxima que de la mnima.

Psicrfilos: temperatura ptima baja (Pseudomonas, Flavobacterium,

Alcaligenes)
Mesfilos: temperatura ptima normal (la mayor parte de los
organismos)
Termfilos: temperatura ptima alta (microorganismos aislados de
reas volcnicas)
Termfilos extremos: temperatura ptima muy alta (Thermococcus
celer 103 C)

8.7.2. pH

Debido a que los microorganismos cambian el pH del medio cuando crecen se

debe aadir un tampn en el medio para mantener el pH constante. Estos
tampones funcionan en un rango de pH por lo que se deben utilizar diferentes
tampones dependiendo del pH que se quiera en el medio. Para pH neutros se
utiliza el tampn fosfato. Los ambientes naturales tienen un rango de pH que
oscila entre 5 y 9. Los microorganismos que crecen a pH inferiores a 5 se
denominan acidfilos (Thiobacillus pH: 0,5). Los microorganismos que crecen
a pH superiores a 9 se denominan alcalinfilos (Bacillus pH: 11).

8.7.3. Agua

Todos los organismos requieren H2O para vivir. Las sustancias absorben en
mayor o menor medida molculas de H2O que no estn disponibles para los
organismos. Esta disponibilidad del H2O es lo que se llama potencial de agua
(aw) cuyos valores van de 0 a 1. El aw del H2O pura es 1; el aw de los frutos
secos es 0,7; el aw de los campos de cultivo se sita entre 0,9 y 1,0.

76
 Halfilos: microorganismos que viven en altas concentraciones de
sales.
Osmfilos: microorganismos que viven en altas concentraciones de
azcares.
Xerfilos: microorganismos que viven en ambientes secos.

8.7.4. Oxgeno

Aerobios:

Obligados. Requieren O2 para crecer (21 %)

Facultativos. No requieren pero crecen mejor en presencia de

O2

Micraerfilos. Requieren pero a niveles ms bajos que los

atmosfricos (1 - 15 %)

Anaerobios:

Aerotolerantes. No requieren y crecen peor cuando el O2 est

presente

Obligados. La presencia de O2 es letal

77
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Cul de las siguientes no es una fase de la curva de crecimiento?

a) latencial b) diauxia c) crecimiento exponencial
d) estacionaria e) declinacin o muerte
2. Para determinar el nmero de bacterias vivas en un cultivo
microbiano. Cul de los siguientes sera el ms exacto?:
a)Recuento del nmero de clulas
b) Recuento de colonias en placa
c)Medida de turbidez
d) Peso seco celular
e) Consumo de oxgeno
3. Cul de los siguientes es un mtodo directo de determinacin del
nmero de bacterias?:
a) Volumen total/volumen bacteriano ( tipohematcrito)
b) Turbidimtrico mediante colormetro
c) Con nefelmetro
d) Recuento de viables
e) Determinacin del N total
4. Para determinar el nmero de bacterias por un mtodo directo. Cul
de los siguientes eligiras?:
a) microkjeldahl b) determinacin del peso seco
c) recuento de viables tras dilucin y cultivo
d) turbidimtrico
e) valor hematocrito del volumen total por volumen de medio
5. La divisin de un coco por un plano sucesivamente paralelo dando
una agrupacin en cadena se denomina:
a) Streptococcus b) Diplococo c) Tetrada
d) Sarcinas e) Staphylococcus
6. La divisin sucesiva en los tres planos del espacio de una bacteria
esfrica da lugar a una agrupacin denominada:
a) Diplococo b) Estreptococo
c) Sarcina d) Tetrada e)
Estafilococo
7. A qu se denomina esciparidad?:
a) a la fisin binaria transversal
b) a la rotura de la pared celular por un antibitico
c) es una agrupacin de diplos
d) a la simetra de los apndices bacterianos
e) a la estructura macromolecular de la membrana
8. Los nutrientes se agotan, se acumulan materias residuales txicas,
cambia el pH, disminuyen los aceptores de H, la tasa de divisin
celular disminuye, aumenta el nmero de microorganismos que
mueren. En que momento de la curva de crecimiento pueden tener
lugar todos estos fenmenos:
a) fase de latencia
b) fase logartmica

78
 c) fase estacionaria
d) fase de declinacin o muerte
e) Punto F
f) fase exponencial
9. Una bacteria creciendo en condiciones ideales de nutrientes y cambio
de medio, teniendo un tiempo de duplicacin de 15 minutos al cabo de
3 das, su masa equivaldra aproximadamente a:
a) 1 Dm cbico b) 1Hm cbico c) 1 Km
cbico
d) 10 elevado a 9 km cbicos e) 10 elevado a 12 km cubicos
10. Los microorganismos psicrfilos tienen una temperatura ptima de
crecimiento entre:
a) 0-10 C b) 10-20 C c) 20-40 C
d) 40-50 C e) 50-60 C
11. Una bacteria que crece en elevadas concentraciones salinas (p.e. en
una salina) se denomina:
a) acidfila b) basfila c) halfila

d) mesfila e) auxtrofa
12. Los microorganismos como el Vibrio cholerae que es capaz de crecer
y multiplicarse en condiciones de pH altos por encima de 8 o 9 se
denominan:
a) prottrofos b) auxtrofos c) littrofos
d) basofilos e) psicrfilos
13. En qu fase de la curva de crecimiento las clulas son grandes al
comienzo de la misma y a medida que el tiempo de duplicacin
disminuye el tamao medio se reduce?
a) latencia b) crecimiento exponencial
c) estacionaria d) declinacin
14. La frmula X= 0.69/Tg en la que Tg es el tiempo de generacin
corresponde a;
a) X= tiempo de duplicacin
b) X = tasa de crecimiento
c) X = velocidad de crecimiento
d) X = incremento de masa celular
e) dX = rgimen de nutrientes
15. Las bacterias con una temperatura ptima entre 50-60 C y un rango
de 25-80 C se denominan;
a) halfilas b) mesfilas c) psicrfilas
d) termfilas e) basfilas

16. En la siguiente frmula del crecimiento microbiano: K=1/t de

generacin, K es:
a) tasa de crecimiento
b) constante de crecimiento microbiano
c) pendiente de la recta de crecimiento exponencial
d) tiempo de duplicacin
e) ninguna de las anteriores
17. El tiempo de generacin del Escherichia coli es aproximadamente:

79
 a) 2 minutos b) 10 minutos c) 20 minutos
d) 40 minutos e) 60 minutos
18. En cul de las siguientes condiciones de cultivo no existira fase de
latencia?:
a) Trasfiriendo un inculo en fase de latencia a medio fresco de igual
composicin
b) Trasfiriendo un inculo en fase estacionaria a medio fresco de igual
composicin
c) Trasfiriendo un inculo en fase exponencial a medio mnimo
d) Trasfiriendo un inculo en fase exponencial a medio fresco de igual
composicin
e) ninguna de las anteriores
19. Mediante un cultivo continuo se puede estudiar: 1= La influencia de
determinados factores sobre el crecimiento de una poblacin; 2= Su
curva de crecimiento; 4= Utilizacin de sustratos; 8= Ecologa de
poblaciones microbianas
a)3 b)9 c)11 d)13 e)15

20. Cmo conservara una capa microbiana durante 10 aos?

a) Resembrandola peridicamente
b) En un medio de enriquecimiento
c) Liofilizndola y congelndola
d) en un medio de mantenimiento
e) Bajo aceite mineral en un medio definido.
21. Cronolgicamente las fases de la curva de crecimiento de un
microorganismo son:
a) Latencia, Exponencial y Estacionaria
b) Exponencial, Latencia y Muerte
c) Estacionaria, Exponencial y Latencia
d) Exponencial, Estacionaria y Latencia
e) Latencia, Estacionaria y Exponencial
22. En los experimentos de empobrecimiento sbito (step down):1= La
velocidad de sntesis del ARN disminuye inmediatamente; 2= La
velocidad de sntesis del ADN disminuye inmediatamente; 4= La
velocidad de sntesis de las proteinas se mantiene durante un tiempo;
8= La velocidad de divisin celular se mantiene durante un tiempo
a)9 b)11 c)12 d)13 e)15

23. La mayora de las bacterias se multiplican por:

a) Fisin binaria b) Fragmentacin de filamentos
c) Esporulacin d) Fisin terciaria
e) Cuerpos fructferos
24. Las bacterias halfilas:
a) Crecen a baja temperatura
b) Crecen a presin muy baja
c) Crecen entre 45 y 50 C
d) Crecen en condiciones de humedad inferiores al 60%
e) Crecen a elevada concentracin de sal

80
25. Los microorganismos que crecen mejor a una concentracin de
oxgeno inferior a la atmosfrica se denomina:
a) Aerobios obligados
b) Aerobios estrictos
c) Aerobios facultativos
d) Microaerfilos
e) Anaerobios facultativos
26. Qu bacterias se multiplican por fragmentacin de los filamentos?
a) Enterobacterias b) Pseudomonas
c) Estafilococos d) Actinomicetos
e) Rickettsias
27. Si una bacteria se multiplica por fisin binaria, cuntas clulas habr
originado despus de 7 generaciones?
a)7 b) 32 c) 64 d)128 e)256

28. El crecimiento de un microorganismo sometido a diferentes

condiciones ambientales (pH, temperatura, humedad, etc) es una
caracterstica:
a) Morfolgica b) Fisiolgica
c) Bioqumica d) Gentica
e) Ambiental
29. Una bacteria que crece en elevadas concentraciones salinas ( p.e. una
salina) se denomina:
a) acidofila b) basofila c) auxotrofa d) mesofila e) halfila

81
Capitulo 9. CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS:
ESTERILIZACION Y DESINFECCIN

9.1. Definiciones y conceptos

Esterilizacin: eliminacin de toda forma de vida, includas las esporas.

Desinfeccin: proceso de destruir los agentes infecciosos.

Antisepsia: operaciones o tcnicas encaminadas a crear un ambiente que

impida el desarrollo de los microorganismos e incluso pueda matarlos.

Asepsia: tcnicas empleadas para impedir el acceso de microorganismos al

campo de trabajo.

Antibiosis: fenmeno biolgico en el que existe una detencin o destruccin

del crecimiento microbiano debido a sustancias producidas por otro ser vivo.

Antimicrobianos: sustancias que matan o inhiben el crecimiento de los

microorganismos (antibacterianos, antifngicos, etc.).

Microbicidas: sustancias que matan las formas vegetativas, pero no

necesariamente las esporas de un microorganismo (bactericida, fungicida, etc.).

Microbiostticos: sustancias que inhiben el crecimiento de microorganismos

(bacteriostticos, fungistticos, etc.).

Antispticos: se refiere a sustancias que se aplican sobre el cuerpo.

Desinfectantes: se refiere a sustancias empleadas sobre objetos inanimados.

Agentes teraputicos: antimicrobianos empleados en el tratamiento de

infecciones.

Agentes quimioteraputicos: sustancias qumicas empleadas en el tratamiento

de enfermedades infecciosas o enfermedades causadas por la proliferacin de
clulas malignas.

Antibiticos: sustancias producidas por un ser vivo que se oponen a la vida

de otro ser vivo.

82
9.2. Muerte de las poblaciones microbianas y curvas de supervivencia

Criterio de muerte de un microorganismo: prdida irreversible de la

capacidad de reproduccin en un medio adecuado. Para poder determinar la
eficacia antimicrobiana (la muerte de los microorganismos) se utilizan tcnicas
que descubran a los sobrevivientes es decir, a los capaces de reproducirse; ya
que los incapaces de reproducirse estn muertos. Esto se determina
generalmente mediante mtodos cuantitativos de siembra en placa en los que
los supervivientes se detectan porque forman colonias.

Cuando una poblacin microbiana se expone a un agente letal, la cintica de la

muerte es casi siempre exponencial ya que el nmero de supervivientes
disminuye de forma geomtrica con el tiempo. Si representamos grficamente
el logaritmo del nmero de supervivientes frente al tiempo se obtiene una lnea
recta cuya pendiente negativa define la tasa de mortalidad. Esta tasa de
mortalidad nos dice slamente que fraccin de la poblacin inicial sobrevive a
un determinado perodo de tratamiento. Para determinar el nmero real de
sobrevivientes es necesario conocer adems el tamao inicial de la poblacin.
De acuerdo con esto, para establecer los procedimientos de esterilizacin hay
que tener en consideracin dos factores: la tasa de mortalidad y el tamao de la
poblacin inicial. En la prctica de la esterilizacin la poblacin microbiana
que ha de ser destruida es mixta. Como los microorganismos difieren
ampliamente en su resistencia a los agentes letales, los factores que se hacen
significativos son el tamao de la poblacin inicial y la tasa de mortalidad de
los miembros ms resistentes de la poblacin mixta. Para asegurar la fiabilidad
de los mtodos de esterilizacin se utilizan suspensiones de esporas de
resistencia conocida. Los procedimientos rutinarios de esterilizacin se disean
siempre de forma que proporcionen un amplio margen de seguridad.

9.3. Condiciones que influyen en la accion antimicrobiana

Temperatura: a mayor temperatura mayor accin.

Tipo de microorganismo: las clulas vegetativas en desarrollo son mucho ms

susceptibles que las esporas.

Estado fisiolgico de las clulas: las clulas jvenes son ms vulnerables que
las viejas.

Ambiente:

El calor es ms eficaz en un medio cido que en uno alcalino.

La consistencia del material, acuoso o viscoso, influye marcadamente
en la penetracin del agente.
Las concentraciones altas de carbohidratos aumentan, por lo general, la
resistencia trmica de los organismos.

83
 La presencia de materia orgnica extraa reduce notablemente la
eficacia de los agentes qumicos antimicrobianos por inactivar stos o
proteger al microorganismo.

9.4. Agentes esterilizantes fsicos

9.4.1. Altas temperaturas

La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es uno de los

mtodos ms efectivos para destruir microorganismos. Hay que distinguir entre
calor hmedo y calor seco. El hmedo mata los microorganismos porque
coagula sus protenas siendo ms rpido y efectivo que el calor seco que los
destruye al oxidar sus constituyentes qumicos. La accin letal del calor es una
relacin de temperatura y tiempo afectada por muchas condiciones. Por
ejemplo, las esporas de Clostridium botulinum son destruidas en 4 a 20
minutos a 120 C en calor hmedo, mientras que se necesitan alrededor de 2
horas de exposicin al calor seco para obtener los mismos resultados.

A.- Esterilizacin por calor hmedo: (se utiliza para soluciones acuosas)

Autoclave: El calor en la forma de vapor a saturacin y a presin es el agente

ms prctico para esterilizar ya que el vapor a presin proporciona
temperaturas superiores a las que se obtienen por ebullicin. El aparato
utilizado se llama autoclave (una olla que regula la presin interna y el tiempo).
Los autoclaves de laboratorio se emplean generalmente a una presin de vapor
de una atmsfera por encima de la presin atmosfrica lo cual corresponde a
una temperatura de 120 C. El tiempo de exposicin depende del volumen del
lquido, de tal manera que para volmenes pequeos (hasta unos 3 litros) se
utilizan 20 minutos a 120 C; si los volmenes son mayores debe alargarse el
tiempo de tratamiento. Algunos materiales no se deben esterilizar en el
autoclave. Sustancias que no se mezclan con el agua no pueden ser alcanzadas
por el vapor sobreviviendo los microorganismos que contengan. Otras
sustancias se alteran o son destruidas por tratamientos prolongados de calor
emplendose en estos casos otros mtodos de esterilizacin.

Tindalizacin: Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden calentarse

por encima de 100 C sin que resulten daadas. Consiste en el calentamiento
del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante 3 das con sucesivos perodos
de incubacin. Las esporas resistentes germinarn durante los perodos de
incubacin y en la siguiente exposicin al calor las clulas vegetativas son
destruidas.

Pasteurizacin: La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino) se

someten a tratamientos de calor controlado que slo matan a ciertos tipos de
microorganismos pero no a todos. La leche pasteurizada no es estril. La
temperatura seleccionada para la pasteurizacin se basa en el tiempo trmico

84
mortal de microorganismos patgenos (es el tiempo ms corto necesario para
matar una suspensin de bacterias a una temperatura determinada).
Mycobacterium tuberculosis es de los microorganismos patgenos ms
resistentes al calor que puede transmitirse por la leche cruda y se destruye en
15 minutos a 60 C. Posteriormente se descubri que Coxiella burnetti, agente
causal de la fiebre Q, se encuentra a veces en la leche y es ms resistente al
calor que Mycobacterium tuberculosis por lo que la pasteurizacin de la leche
se realiza a 62,8 C durante 30 minutos o a una temperatura ligeramente
superior, 71,7 C durante 15 segundos (Flash-Pasteurizacin).

B.- Esterilizacin por calor seco: (se utiliza para materiales slidos estables al
calor)

Horno Pasteur: El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar material

de vidrio y otros materiales slidos estables al calor. El aparato que se emplea
es el horno Pasteur. Para el material de vidrio de laboratorio se consideran
suficientes dos horas de exposicin a 160 C.

Incineracin: La destruccin de los microorganismos por incineracin es una

prctica rutinaria en los laboratorios. Las asas de siembra se calientan a la
llama de mecheros Bunsen. La incineracin tambin se utiliza en la
eliminacin de residuos hospitalarios.

9.4.2. Bajas temperaturas

En general, el metabolismo de las bacterias est inhibido a temperaturas por

debajo de 0 C. Sin embargo estas temperaturas no matan a los
microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos de
tiempo. Esta circunstancia es aprovechada por los microbilogos para
conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de
microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en tanques
de nitrgeno lquido a -196 C.

9.4.3. Radiaciones
A.- RADIACIONES IONIZANTES

Rayos gamma: Las radiaciones gamma tienen mucha energa y son emitidas
por ciertos istopos radiactivos como es el Co60 pero son difciles de controlar
ya que este istopo emite constantemente los rayos gamma en todas
direcciones. Estos rayos gamma pueden penetrar los materiales por lo que un
producto se puede empaquetar primero y despus esterilizar.

Rayos catdicos (Radiacin con haz de electrones): Se usan para esterilizar

material quirrgico, medicamentos y otros materiales. Una ventaja es que el
material se puede esterilizar despus de empacado (ya que stas radiaciones
penetran las envolturas) y a la temperatura ambiente.

85
B.- RADIACIONES NO IONIZANTES

Luz ultravioleta: La porcin ultravioleta del espectro incluye todas las

radiaciones desde 15 a 390 nm. Las longitudes de onda alrededor de 265 nm
son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 - 295 nm). Se usan
para reducir la poblacin microbiana en quirfanos, cuartos de llenado
aspticos en la industria farmacutica y para tratar superficies contaminadas en
la industria de alimentos y leche. La luz UV tiene poca capacidad para penetrar
la materia por lo que slo los microorganismos que se encuentran en la
superficie de los objetos que se exponen directamente a la accin de la luz UV
son susceptibles de ser destrudos.

9.4.4. Filtracin

Algunos materiales como los lquidos biolgicos (suero de animales,

soluciones de enzimas, algunas vitaminas y antibiticos) son termolbiles.
Otros agentes fsicos como las radiaciones son perjudiciales para estos
materiales e imprcticos para esterilizarlos, por lo que se recurre a la filtracin
a travs de filtros capaces de retener los microorganismos. Los
microorganismos quedan retenidos en parte por el pequeo tamao de los
poros del filtro y en parte por adsorcin a las paredes del poro durante su paso
a travs del filtro debido a la carga elctrica del filtro y de los
microorganismos. Debido al pequeo tamao de los virus, nunca es posible
tener certeza de que, por los mtodos de filtracin que dejan libre de bacterias
una solucin, se van a eliminar tambin los virus.

A.- Filtros de membrana

Los filtros de membranas son discos de steres de celulosa con poros tan
pequeos que previenen el paso de los microorganismos. Existen distintos tipos
de filtro dependiendo del tamao de poro. Estos filtros son desechables.
Adems de utilizarse en la esterilizacin de lquidos se usan en el anlisis
microbiolgico de aguas ya que concentran los microorganismos existentes en
grandes volmenes de agua.

B.- Filtros HEPA

Un filtro HEPA (High Efficiency Particulate Air) est compuesto por pliegues
de acetato de celulosa que retienen las partculas (includos los
microorganismos) del aire que sale de una campana de flujo laminar.

9.4.5. Desecacin

La desecacin de las clulas vegetativas microbianas paraliza su actividad

metablica. Este proceso fsico se utilizaba ampliamente antes del desarrollo de
la refrigeracin. El tiempo de supervivencia de los microorganismos despus

86
de desecados depende de muchos factores, entre ellos la especie microbiana.
En general, los cocos Gram (-) son ms susceptibles a la desecacin que los
cocos Gram (+). Las endoesporas bacterianas son muy resistentes a la
desecacin pudiendo permanecer viables indefinidamente.

9.5. Agentes esterilizantes qumicos

1.- Oxido de etileno: El requerimiento esencial para un agente qumico

esterilizante es que sea voltil as como txico para los microorganismos, de
manera que pueda ser fcilmente eliminado del objeto esterilizado despus del
tratamiento. Normalmente se utiliza el xido de etileno, un lquido que hierve a
10,7 C. Se usa en la industria para la esterilizacin de placas Petri, jeringas y
otros objetos de plstico que se funden a temperaturas superiores a los 100 C.
Debido a su alto poder de penetracin estos objetos se empaquetan primero y
despus se esterilizan. El xido de etileno acta inactivando enzimas y otras
protenas que contienen grupos sulfidrilos (R-SH) mediante una reaccin
llamada alquilacin (R-S-CH2CH2O-H).

2.- Glutaraldehido: Una solucin acuosa al 2% presenta una amplia actividad

antimicrobiana. Es efectivo frente a virus, clulas vegetativas y esporas de
bacterias y hongos. Se usa en medicina para esterilizar instrumentos urolgicos
y pticos.

9.5.1. Desinfectantes y antispticos

Esterilizacin: es el proceso de destruccin de todas las formas de vida

microbiana.

Desinfeccin: es el proceso de destruccin de los agentes infecciosos.

Desinfectantes: son aquellas sustancias qumicas que matan las formas

vegetativas y no necesariamente las formas de resistencia de los
microorganismos patgenos. Se refiere a sustancias empleadas sobre objetos
inanimados.

Antispticos: son aquellas sustancias qumicas que previenen el crecimiento o

accin de los microorganismos ya sea destruyndolos o inhibiendo su
crecimiento y actividad. Se refiere a sustancias que se aplican sobre el cuerpo.

9.5.2. Inorgnicos

1.- Metales: Los ms efectivos son el mercurio, plata, cobre y zinc. Actan
inactivando las protenas celulares al combinarse con ellas. Entre los

87
compuestos de mercurio que se emplean como antispticos en heridas
superficiales de la piel y mucosas estn el mercurocromo (mercromina) y el
mertiolato. Entre los compuestos de plata utilizados como antispticos est el
nitrato de plata (AgNO3) que en solucin al 1% se ha utilizado para prevenir
infecciones gonoccicas en los ojos de los recin nacidos aunque actualmente
se est reemplazando por antibiticos como la penicilina. Entre los compuestos
de cobre se encuentra el sulfato de cobre (CuSO4) que se utiliza como algicida
en los recipientes abiertos que contienen agua. Tambin es fungicida por lo que
se utiliza para controlar las infecciones fngicas de plantas (Mezcla
Bordolesa). Los compuestos de zinc tambin son fungicidas por lo que se
utilizan para tratar el pi de atleta.

2.- Acidos y lcalis: Actan alterando la permeabilidad y coagulando las

protenas. En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de
estos compuestos se encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico (HNO3),
hidrxido sdico (NaOH) e hidrxido potsico (KOH). Tienen aplicacin
limitada debido a su naturaleza custica y corrosiva. An as el NaOH se utiliza
en la industria del vino para limpiar las cubas de madera.

3.- Compuestos inorgnicos oxidantes: actan oxidando los componentes de

la membrana y enzimas. El agua oxigenada (H2O2) al 6% (20 volmenes) se
utiliza como antisptico en pequeas heridas de la piel.

4.- Halgenos: Los halgenos especialmente el cloro y el iodo son

componentes de muchos antimicrobianos. Los halgenos son agentes
fuertemente oxidantes por lo que son altamente reactivos y destructivos para
los componentes vitales de las clulas microbianas.

Cloro: La muerte de los microorganismos por accin del cloro se debe en parte
a la combinacin directa del cloro con las protenas de las membranas celulares
y los enzimas. As mismo en presencia de agua desprende oxgeno naciente (O)
que oxida la materia orgnica:

Cl2 + H2O ----------------> HCl + HClO (cido hipocloroso)

HClO ----------------> HCl + O (oxgeno naciente)

El gas cloro licuificado se utiliza en la desinfeccin del agua de bebida y

piscinas. El hipoclorito sdico (leja) al 1% se puede utilizar como
desinfectante domstico.

Iodo: El mecanismo mediante el cual el iodo ejerce su accin antimicrobiana

es debido a su accin oxidante. Adems la habilidad que tiene el iodo para
combinarse con el aminocido tirosina resulta en la inactivacin de enzimas y
otras protenas. El iodo se puede utilizar como antisptico bajo dos formas: i)
tintura de iodo, es una solucin alcohlica (tintura) de iodo (I2) ms ioduro
potsico (KI) o ioduro sdico (NaI). ii) iodforos, son mezclas de iodo (I2) con

88
compuestos que actan como agentes transportadores y solubilizadores del
iodo. Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine) es un complejo de iodo y
polivinil pirrolidona (PVP). Los iodforos tienen la ventaja de que no tien la
piel. Las preparaciones de iodo se utilizan principalmente para desinfectar la
piel as como en la desinfeccin de pequeas cantidades de agua. Los vapores
de iodo se utilizan a veces para desinfectar el aire.

9.5.3. Orgnicos

1.- Alcoholes: El alcohol metlico (1C) es menos bactericida que el etlico (2C)
y adems es altamente txico. Hay un aumento en el poder bactericida a
medida que aumenta la longitud de la cadena carbonada; pero como los
alcoholes con peso molecular superior al del proplico (3C) no se mezclan en
todas las proporciones con el agua, no se suelen utilizar como desinfectantes.
Los alcoholes actan desnaturalizando las protenas, disolviendo las capas
lipdicas y como agentes deshidratantes. El etanol al 96% se usa como
antisptico de la piel y como desinfectante en los termmetros clnicos orales y
algunos instrumentos quirrgicos.

2.- Fenol y compuestos fenlicos: Una solucin acuosa al 5% de fenol mata

rpidamente a las clulas vegetativas de los microorganismos. Sin embargo, las
esporas son mucho ms resistentes al fenol. Debido a que el fenol es txico y
tiene un olor desagradable ya casi no se usa como desinfectante o antisptico,
siendo reemplazado por compuestos fenlicos que son sustancias derivadas
del fenol menos txicas y ms activas frente a los microorganismos. Lysol es
una mezcla de compuestos fenlicos que se utiliza para desinfectar objetos
inanimados como los suelos, paredes y superficies. El fenol y compuestos
fenlicos actan alterando la permeabilidad de la membrana citoplsmica as
como desnaturalizando protenas.

9.6. Evaluacin de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y

antispticos

1.- Tcnica de dilucin en tubo: Primero se realizan diferentes diluciones del

agente qumico. El mismo volumen de cada dilucin se dispensa en tubos
estriles. A cada tubo se le aade la misma cantidad de una suspensin del
microorganismo utilizado como prueba. A determinados intervalos de tiempo
se transfiere una alcuota de cada tubo a otro tubo que contenga medio de
cultivo. Estos tubos inoculados se incuban a la temperatura ptima de
crecimiento del microorganismo utilizado como prueba durante 24 a 48 horas.
Al cabo de este tiempo se examina el crecimiento del microorganismo
mediante la aparicin de turbidez en el tubo (crecimiento +) o ausencia de
turbidez (crecimiento -). Aquellos tubos que presenten crecimiento negativo
indican la dilucin a la cual ese agente qumico mata al microorganismo
utilizado como prueba cuando este microorganismo es expuesto al agente
qumico durante ese perodo de tiempo.

89
2.- Tcnica de la placa de agar: Se inocula una placa que contenga medio de
cultivo slido con el microorganismo utilizado como prueba. El agente
qumico se coloca en el centro de la placa, bien dentro de un cilindro o
impregnado en un disco de papel. Al cabo de 24 a 48 horas se observan zonas
de inhibicin (crecimiento -) alrededor del agente qumico. Una modificacin
de esta tcnica es la incorporacin del agente qumico en el medio de cultivo
antes de verterlo sobre la placa. Una vez solidificado se inocula con el
microorganismo utilizado como prueba, se incuba y se examina el crecimiento
microbiano.

3.- Tcnica del coeficiente fenlico: Es una tcnica estandarizada que se

utiliza para comparar el poder desinfectante de un agente qumico frente al del
fenol. Es una modificacin de la tcnica de dilucin en tubo tal como se
describe a continuacin: (i) Se prepara una serie de tubos conteniendo cada uno
5 ml de diferentes diluciones del desinfectante. (ii) A la vez se prepara una
segunda serie de tubos que contengan diferentes diluciones de fenol. (iii) Cada
tubo de las dos series se inocula con 0,5 ml de un cultivo de 24 horas del
microorganismo utilizado como prueba (cepas especficas de Salmonella typhi
o Staphylococcus aureus). (iv) A los 5, 10 y 15 minutos se recoge una alcuota
de cada tubo que se inocula en otro tubo que contenga medio de cultivo estril.
(v) Estos tubos inoculados se incuban durante 24 a 48 horas y se observa el
crecimiento del microorganismo (aparicin de turbidez). (vi) La mayor
dilucin del desinfectante que mate a los microorganismos en 10 minutos pero
no los mate en 5 minutos se divide por la dilucin mayor de fenol que d los
mismos resultados. El nmero obtenido es el coeficiente fenlico de ese
desinfectante.

90
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Qu caractersticas bsicas debe reunir un producto qumico para ser

empledo como agente para esterilizar materiales:
a) txico para los microorganismos y soluble en agua
b) txico para los microorganismos y no explosivo
c) txico para los microorganismos y estable a pH cido
d) txico para los microorganismos y voltil

2. Un agente fsico o qumico que elimina todos los microorganismos se puede

denominar:
a) Desinfectante b) Esterilizante c)Esporocida
d) Antisptico e) Bacteriosttico

3. Para la desinfeccin / esterilizacin gaseosa se utilizan:

a)Yodforos b) Formol
c) Oxido de etileno y betapropiolactona d) Gas cloro y cloraminas
e) Cresoles y clorhexidina

4. La accin de los detergentes: 1=Sobre la pared celular disminuyela tensin

consiguiendo una fcil penetracin; 2=Sobre la membrana citoplsmica se
insertan sobre la capa lipdica creando canales y/o desorganizando la
membrana; 4=Sobre los ribosomas disociando las dos subunidades
impidiendo la sntesis de proteinas
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

5. En las tcnicas de evaluacin de la actividad de desinfectantes y

antispticos: 1= Se utiliza el coeficiente de fenol como un estndar ; 2= La
prueba de Rideal-Walter con subcultivos a los 2, 5, 10 y 15 minutos utiliza
el coeficiente de fenol como indice de la actividad del desinfectante y la
mxima dilucin a la que se debe utilizar; 4=Tambin se puede usar el
recuento de viables antes y despus de la accin del agente qumico
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

6. En la desinfeccin del agua de bebida en la produccin de agua potable se

puede utilizar: 1= Gas cloro; 2= Cloraminas; 4=Clorhexidina
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

7. Dentro de los agentes qumicos para el control de los microorganismos se

considera desinfectante/esterilizante gaseoso a:
a)formol b)aguaoxigenada c)betapropiolactona
d)alcohol isoproplico e)fenol

8. Cal de los siguientes mtodos fsicos por calor esteriliza?:

a) Calor seco (130 C 15') b) Autoclave(120 C 15')
c) Calor seco (130 C 60') d)Ebullicin (100 C)
e)Vapor fluente (100 C)

91
9. Algunas esporas de hongos, los quistes de protozoos, los virus
desnudos(hepatitis B, poliovirus) y algunas bacterias como M. tuberculosis,
Staphylococcus aureus presentan una resistencia relativa:
a)alta b)moderada
c)baja d)ninguna de las anteriores
e) algunas formas alta resitencia y otras moderadaresistencia

10. Cual de entre los siguientes agentes mutagenos produce inactivacion

insercional?:
a.- Luz ultravioleta b.- Rayos X
c.- Agentes alquilantes d.- Analogos de las bases
e.- Transposones

11. La probabilidad de que el objeto tratado no contenga siquiera un

superviviente, se llama:
a) Esterilidad b) Asepsia c) Antispsia
d) Higiene e) Profilaxis

12. Qu material esterilizaras en un bao Pasteur?

a) Vidrio b) Ropa c) Medios de cultivo
d) Plstico e) Asas de siembra

13. Qu material no esterilizaras en un autoclave?

a) Vidrio b) Ropa c) Medios de cultivos
d) Pipetas e) Libros

14. Si un tubo de ensayo contena 3000 bacterias y despus de someterla a un

proceso de esterilizacin queda slo 2 bacterias, decimos que el tubo de
ensayo est:
a) Estril b) No estril c)Parcialmente estril
d) Sucio e) Ninguna de las anteriores

15. En la desinfeccin del agua de bebida se suele utilizar:

a)Yodforos b) Compuestos de metales pesados
c) Formaldehdo y glutaraldehdo d) Gas cloro y cloraminas
e) Cresoles y clorhexidina

92
Capitulo 10. METABOLISMO MICROBIANO

10.1. Concepto de metabolismo

El trmino metabolismo se utiliza cuando nos referimos a todos los procesos

qumicos que tienen lugar dentro de una clula. Los elementos qumicos
bsicos que utiliza una clula provienen del medio ambiente y estos elementos
qumicos son transformados por la clula en los constituyentes caractersticos
que componen dicha clula. Estos compuestos qumicos se llaman nutrientes y
el proceso por el cual una clula transforma estos nutrientes en sus
componentes celulares se denomina anabolismo o biosntesis. La biosntesis es
un proceso que requiere energa. Esta energa se obtiene del medio ambiente.
Las clulas pueden utilizar 3 tipos distintos de fuente de energa: luz,
compuestos orgnicos y compuestos inorgnicos. Aunque algunos organismos
obtienen su energa de la luz, la mayor parte lo hacen a travs de compuestos
qumicos. Cuando estos compuestos qumicos se rompen originando
compuestos ms simples se libera energa. Este proceso se denomina
catabolismo. Las clulas tambin necesitan energa para otras funciones
celulares como es la motilidad (movimiento celular) y transporte de nutrientes.
Como hemos visto existen dos procesos bsicos de transformaciones qumicas
en las clulas: anabolismo y catabolismo. El resultado colectivo de las
reacciones anablicas y catablicas es el metabolismo.

10.2. Clasificacin de los organismos segn su fuente de carbono y energa

FUENTE DE ENERGIA FUENTE DE CARBONO

FOTOTROFOS LUZ

QUIMIOTROFOS QUIMICA

AUTOTROFOS CO2

HETEROTROFOS COMPUESTOS ORGANICOS

FUENTE DE ENERGIA FUENTE DE CARBONO

FOTOAUTOTROFOS LUZ CO2

FOTOHETEROTROFOS LUZ COMPUESTOS

ORGANICOS

QUIMIOAUTOTROFOS QUIMICA CO2

93
QUIMIOHETEROTROFOS QUIMICA COMPUESTOS
ORGANICOS

Fotoautotrofos: Vegetales, algas, bacterias fotosintticas.

Fotoheterotrofos: Bacterias

Quimioautotrofos: Bacterias.

Quimioheterotrofos: Animales, Protozoos, bacterias.

10.3. La energa y el poder reductor en el metabolismo microbiano:

papel del ATP y de los piridin nucletidos.

La energa qumica es la energa liberada cuando un compuesto orgnico o

inorgnico es oxidado. En biologa las unidades de energa ms usadas son la
kilocalora (Kcal) y el kilojulio (KJ). 1 Kcal = 4.184 KJ. La utilizacin de
energa qumica en los organismos vivos est implicada con las reacciones de
oxidacin-reduccin, llamadas REDOX ya que por cada oxidacin que ocurre
tiene que haber una reduccin. Una oxidacin se define como la eliminacin de
electrones de una sustancia y una reduccin se define como la adicin de
electrones a una sustancia. En bioqumica, las oxidaciones y reducciones
frecuentemente conllevan no slo la transferencia de electrones, sino de tomos
enteros de hidrgeno.

La energa liberada como resultado de las reacciones redox debe de

conservarse para ser utilizada por la clula. En los organismos vivos, la energa
qumica liberada en las reacciones redox se transfiere normalmente a una
variedad de compuestos fosfato en la forma de enlaces fosfato de alta energa.
El compuesto ms importante en los organismos vivos que contiene enlaces
fosfato de alta energa es el adenosn trifosfato (ATP). El ATP contiene 2
enlaces fosfato de alta energa. Se puede considerar que el ATP tiene por
objeto "atrapar" una parte de la energa libre que queda disponible en las
reacciones catablicas e impulsar reacciones biosintticas al activar ciertos
metabolitos intermediarios de la biosntesis.

Adems del ATP, existen otros compuestos de alta energa que activan
intermediarios metablicos y as impulsan ciertas reacciones de biosntesis:

Compuestos de alta energa Causa activacin en la biosntesis

de:
Guanina, Uridina Protenas, Peptidoglicano,
Glucgeno
Citidina Fosfolpidos

94
 Desoxitimidina Lipopolisacridos
Acetil coenzima A Acidos grasos

Ya hemos dicho que cuando ocurre una oxidacin tiene que haber una
reduccin, es decir una sustancia que acepte los electrones eliminados. En la
mayor parte de los casos, cada etapa de oxidacin de un metabolito implica la
eliminacin de dos electrones y, por ello, la prdida simultnea de dos
protones; esto equivale a la eliminacin de dos tomos de hidrgeno y se
denomina deshidrogenacin. Inversamente, la reduccin de un metabolito
implica la adiccin de dos electrones y de dos protones y se considera una
hidrogenacin. Los compuestos que con ms frecuencia llevan a cabo
oxidaciones y reducciones biolgicas (es decir, que sirven como aceptores de
tomos de hidrgeno liberados en las reacciones de deshidrogenacin y como
donadores de tomos de hidrgeno requeridos para las reacciones de
hidrogenacin) son dos piridn nucletidos: nicotinamida adenn dinucletido
(NAD) y nicotinamida adenn dinucletido fosfato (NADP). Estos dos piridn
nucletidos pueden fcilmente sufrir oxidaciones y reducciones reversibles en
el grupo nicotinamida. La oxidacin-reduccin reversible del NAD y del
NADP puede simbolizarse as:

NAD+ + 2H -----> NADH + H+

oxidado reducido

NADP+ + 2H -----> NADPH + H+

10.4. Mecansmos de obtencin de ATP

En el metabolismo, el ATP se genera por dos mecanismos bioqumicos

fundamentalmente diferentes: Fosforilacin a nivel de sustrato y fosforilacin
oxidativa.

1.- Fosforilacin a nivel de sustrato: Mediante la fosforilacin a nivel de

sustrato, el ATP se forma a partir de ADP por transferencia de un grupo fosfato
de alta energa de un intermediario de una ruta catablica. La siguiente
reaccin sirve de ejemplo:

Acido 2 fosfoglicricoAcido fosfoenolpirvico + ADPAcido pirvico +

ATP

Como consecuencia de la prdida de una molcula de H2O, el enlace ster de

baja energa del fosfato del cido 2-fosfoglicrico se convierte en un enlace

95
enlico de alta energa en el cido fosfoenolpirvico. Este fosfato de alta
energa puede luego ser transferido al ADP con lo que se produce una molcula
de ATP.

2.- Fosforilacin oxidativa (Transporte de electrones): En los diferentes

modos de metabolismo microbiano, incluyendo la respiracin y la fotosntesis,
el ATP se genera por transporte de electrones a travs de una cadena de
molculas transportadoras que tienen una orientacin fijada en la membrana
celular. Los componentes de la cadena son molculas transportadoras capaces
de sufrir oxidaciones y reducciones de modo reversible de tal manera que cada
miembro de la cadena es capaz de ser reducido por la molcula transportadora
que le precede y oxidado por la que le sigue.

En la cadena de transporte de electrones algunos miembros transportan tomos

de hidrgeno (un electrn ms un protn), mientras que otros transportan
slamente un electrn. La orientacin de los transportadores en la membrana
celular es tal que los transportadores de tomos de hidrgeno realizan el
transporte hacia fuera de la clula y los transportadores de electrones lo
realizan hacia el interior con lo que en cada confluencia se transporta fuera de
la clula un protn. La membrana celular es impermeable a los protones; como
resultado, el transporte de electrones retiene una porcin de energa qumica
liberada por la reaccin global de la cadena (oxidacin del donador primario de
electrones por el aceptor terminal de electrones). Esta energa se utiliza en los
sistemas de permeasas, movilidad celular por flagelos y en la sntesis de ATP a
partir de ADP y fosfato inorgnico. Esta sntesis de ATP est catalizada por un
enzima complejo unido a la membrana la ATP fosfohidrolasa (ATPasa). La
fosforilacin oxidativa se puede explicar aplicando el smil de la generacin de
energa elctrica a travs de agua embalsada. La membrana acta como una
presa que retiene el agua (en este caso los protones que se transportan fuera de
la clula a travs de la cadena transportadora de electrones); en el momento
que se abren las compuertas (ATPasa) este agua liberada (protones) mueve la
turbina (ATPasa) que genera energa elctrica (sntesis de ATP a partir de ADP
y fosfato inorgnico).

96
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Cul de estos compuestos lleva a cabo con ms frecuencia las

oxidaciones y reducciones biolgicas?
a) ATP b) DNA c) NAD d) FAD e)
ADP

2. La ATPasa es un enzima que cataliza la sntesis de ATP en:

a) Fosforilacin a nivel de sustrato
b) Fosforilacin oxidativa
c) No cataliza la sntesis de ATP
d) Acta independientemente del tipo de fosforilacin
e) Todas las dems respuestas son falsas

3. Cuando las reacciones redox, durante el catabolismo, ocurren en

ausencia de aceptores terminales exgenos de electrones, se
denomina:
a) Fermentacin b) Respiracin aerbica
c) Respiracin anaerbica d) Fosforilacin oxidativa
e) Anabolismo
4. En la clula debe existir un equilibrio entre las formas oxidadas y
reducidas de los piridn-nucletidos. Cuales son los dos componentes
mayoritarios en el interior de la clula?:
a) NAD+ y NADH b) NAD+ y NADPH
+
c) NAD y FADH d) NADP+ y NADPH
e)NADP+ YNADH
5. Un microorganismo que no necesita compuestos orgnicos de carbono
para crecer, que obtiene ATP por un proceso de fosforilacin
oxidativa, que utiliza el Fe(2+) como donador de electrones y el O2
como aceptor de electrones, pertenece, nutricionalmente, al grupo:
a) fotoautotrofos b)quimioautotrofos
c)fotoheterotrofos facultativos d)fotoheterotrofos
obligados
e)quimioheterotrofos
6. Qu tienen en comn los siguientes compuestos: succinil CoA,
oxalacetato y fosfoenolpiruvato.
a) Son donadores de e-
b) Son compuestos de baja energa
c) Son compuestos de alta energa
d) Son metabolitos precursores
e) Intervienen en la generacin de ATP por fosforilacin a nivel
de sustrato
7. Un proceso en el que est implicada la glicolisis, el ciclo de los cidos
tricarboxlicos TCA, el transporte de electrones con oxgeno como
aceptor final de electrones y una produccin de 38 ATP, CO2 y H2O
se denomina:
a)Respiracin aerobia b) Respiracin anaerobia
c)Fermentacin d)Fotosntesis bacteriana

97
 e) Ninguna de los anteriores

8. Los microorganismos que son anaerobios facultativos se caracterizan

por:
a) Ser oxidativos y fermentadores
b) tener un metabolismo tpicamente oxidativo
c) Ser aerobios
d) Ser anaerobios
e) tener un metabolismo tpicamente fermentativo
9. Los tipos trficos de bacterias segn la fuente de energa puede ser: 1=
fotoautotrofos; 2= fotoheterotrofos; 4= quimioautotrofos; 8=
quimioheterotrofos; 16= prototrofos; 32= auxotrofos
a)15 b)31 c)51 d)50 e)63

10. Cuando el aceptor final es el oxgeno que es reducido por los

electrones e hidrgeno liberados en la combustin de sustrato
orgnico?:
a) respiracin anaerobia b) respiracin aerobia
c) fermentacin d) las tres anteriores
e) ninguna de las anteriores
11. Cual de las siguientes afirmaciones es cierta?
b) En la fermentacin, el donador y el aceptor de electrones
son orgnicos y procedentes de la misma ruta degradativa
c) La fermentacin ocurre en presencia de un aceptor de
electrones exgeno
d) El aceptor de electrones ms comn en la respiracin
anaerobia es el fumorato
e) La fermentacin propinica es producida por
enterobacterias.
12. Qu sistema de transporte celular obedece a una respuesta a un
gradiente de concentracin?
a) Difusin facilitada b) Difusin pasiva
c) Transporte Activo d) "Binding Protein"
e) Transporte Activo secundario
13. El fenmeno de atenuacin se ha estudiado en:
a) Opern lactosa
b) Operones de sntesis de vitaminas
c) Operones de sntesis de aminocidos
d) Operones de sntesis de nucletido
14. Qu caracterstica tiene el peptido lider en los operones que
presentan atenuacin?:
a) El producto regulador se encuentra repetido en el pptido
lider
b) El producto regulador no se encuentra nunca en el pptido
lider
c) No existe relacin entre el producto regulador y el pptido
lider
d) Todas son ciertas

98
15. Regulacin por retroalimentacin en rutas ramificadas; el enzima
clave es nico en: 1= Regulacin concentrada; 2= Regulacin por
isoenzimas; 4= Regulacin acumulativa
a)1 b)3 c)5 d)6 e)7

16. Mediante el proceso de desnitrificacin se origina:

a) Nitrgeno gaseoso b) Nitrato c) Amonaco
d) Aminocidos e) Todas las anteriores
17. Se denominan aerobios y anaerobios aquellos que respectivamente sea
el oxigeno u otras moleculas:
a) la fuente de energia b) el dador de electrones
c) el donador de hidrogeno d) el aceptor final de
electrones
e) el transportador de electrones
18. Cuando el aceptor final es el oxigeno que es reducido por los
electrones e hidrogeno liberados en la combustion del sustrato
organica?:
a) respiracion aerobia b) respiracion anaerobia
c) fermentacion d) las tres anteriores
e) ninguna de las anteriores
19. Cuando el aceptor final es un compuesto organico que se reduce por
los electrones e hidrogeno liberados en la combustion del sustrato
organico?:
a) respiracion aerobia b) respiracion anaerobia
c) fermentacion d) las tres anteriores
e) ninguna de las anteriores
20. Cuando el aceptor final pueden ser nitratos, fumaratos, sulfatos,
carbonatos, y otros compuestos inorganicos?:
a) respiracion aerobia b) respiracion anaerobia
c) fermentacion d) las tres anteriores
e) ninguna de las anteriores

99
Capitulo 11. MICROORGANISMOS HETEROTROFOS

11.1. Mecanismos de obtencin de energa por microorganismos

quimioheterotrofos

Como ya hemos dicho, los organismos quimioheterotrofos son aquellos que

utilizan compuestos orgnicos como fuente de carbono y energa. Estos
organismos son los animales, protozoos, hongos y casi todas las bacterias. Las
vas utilizadas por los quimioheterotrofos para la oxidacin de compuestos
orgnicos y la conservacin de la energa en ATP se pueden dividir en dos
grupos:

1.- Fermentacin: cuando las reacciones redox ocurren en ausencia de

cualquier aceptor terminal de electrones.

2.- Respiracin: cuando se utiliza el oxgeno molecular o algn otro agente

oxidante como aceptor terminal de electrones. Aerbica: oxgeno; Anaerbica:
Nitrato, Sulfato, Fumarato, Oxido de Trimetilamina.

11.1.1. Fermentacin

Existen muchos tipos de fermentaciones pero en todas ellas slo ocurre una
oxidacin parcial de los tomos de carbono del compuesto orgnico y por lo
tanto slo se produce una pequea parte de la energa disponible.

La oxidacin en una fermentacin est acoplada a la reduccin de un

compuesto orgnico generado a partir del catabolismo del sustrato inicial, por
lo que no son necesarios aceptores externos de electrones. El ATP en la
fermentacin se produce a partir de la fosforilacin a nivel de sustrato. Como
consecuencia de la no participacin de un aceptor externo de electrones, el
sustrato orgnico experimenta una serie de reacciones oxidativas y reductoras
equilibradas; los piridn nucletidos reducidos en un paso del proceso son
oxidados en otro. Este principio general se ilustra en dos fermentaciones: la
fermentacin alcohlica (tpica del metabolismo anaerbico de la glucosa por
levaduras) y la fermentacin homolctica (tpica del metabolismo de algunas
bacterias lcticas). Ambos procesos fermentativos utilizan la ruta Embden-
Meyerhof: las dos molculas de NAD reducidas por esta ruta se reoxidan en
reacciones que implican un ulterior metabolismo del piruvato. En el caso de la
fermentacin homolctica, esta oxidacin ocurre como consecuencia directa de

100
la reduccin del cido pirvico a cido lctico. En el caso de la fermentacin
alcohlica, el cido pirvico se descarboxila primero para formar acetaldehdo
y la reoxidacin del NADH ocurre en paralelo con la reduccin del
acetaldehdo para formar etanol.

Las bacterias pueden producir productos fermentativos finales distintos al

cido lctico y al etanol debido a las diferencias en el metabolismo del cido
pirvico. Estos productos finales pueden ser cido frmico, 2,3 butanodiol,
isopropanol, cido butrico, butanol. La mayor parte de las fermentaciones
bacterianas pueden originar varios productos finales, pero ninguna
fermentacin da lugar a todos los productos finales.

Resultados de la fermentacin de la glucosa. El resultado final de la

glicolisis es el consumo de glucosa, la sntesis de 2 ATP y la produccin de
productos de fermentacin. Para el organismo el producto ms importante es el
ATP y los productos de la fermentacin son productos de desecho. Sin
embargo, estos productos son muy importantes para el cervecero, panadero,
quesero. La fermentacin anaerbica de glucosa por levaduras produce etanol
que es el producto principal de las bebidas alcohlicas, y la produccin de
cido lctico es el paso inicial en la produccin de productos lcteos
fermentados incluyendo el queso. Para los panaderos, la produccin de CO2
por la fermentacin de levaduras es el paso esencial en el esponjamiento del
pan.

El efecto Pasteur se produce en microorganismos capaces de realizar

metabolismo fermentador y respiracin aerobia (anaerobios facultativos). En
presencia de O2 utilizan la respiracin aerbica, pero pueden emplear la
fermentacin si no hay O2 libre en su medio ambiente. Pasteur fu el primero
en observar que el azcar es convertido en alcohol y CO2 por levaduras en
ausencia de aire, y que en presencia de aire se forma muy poco o nada de
alcohol, siendo el CO2 el principal producto final de esta reaccin aerbica.
Este efecto indica el mayor rendimiento energtico de la respiracin sobre la
fermentacin.

11.1.2. Respiracin aerbica (Rutas de utilizacin del piruvato por

aerobios)

La glucosa, tanto en el metabolismo respiratorio como en el fermentativo, se

transforma en cido pirvico por una de las siguientes rutas:

101
 a) Embden-Meyerhof (eucariotas y procariotas)
b) Pentosa fosfato (eucariotas y procariotas)
c) Entner Doudoroff (slo en ciertos procariotas como alternativa a la
ruta Embden-Meyerhof)

En la mayor parte de los aerobios, el piruvato sufre una descarboxilacin

oxidativa catalizada por un sistema enzimtico llamado complejo piruvato
deshidrogenasa que produce acetil-coenzima A (acetil-CoA). El acetil-CoA es
un metabolito precursor que puede entrar en rutas biosintticas;
alternativamente, puede ser oxidado completamente a CO2 a travs de una ruta
conocida como ciclo de Krebs o ciclo de los cidos tricarboxlicos (TCA). Este
ciclo es la principal va de generacin de ATP en los heterotrofos aerbicos
(por paso de electrones a travs de una cadena transportadora de electrones
desde los piridn nucletidos reducidos). El ciclo TCA genera adems tres
metabolitos precursores, a-cetoglutarato, succinil-CoA y oxalacetato. El ciclo
TCA efecta la oxidacin completa de una molcula de cido actico a CO2,
produce tres molculas de piridn nucletidos reducidos, una molcula de ATP
y una molcula de FAD reducido (flavoprotena que cede electrones a una
cadena de transporte independiente de piridn nucletidos).

Reacciones anaplerticas. El ciclo TCA, adems de oxidar el acetil CoA

(dentro del ciclo) genera metabolitos precursores que son utilizados en la
biosntesis (fuera del ciclo), por lo que requiere un aporte de cido oxalactico
que reponga el utilizado en la sntesis de los metabolitos precursores. Estas
reacciones de sntesis de oxalactico se denominan anaplerticas y
fundamentalmente consisten en reacciones que carboxilan el piruvato o el
fosfoenolpiruvato para obtener oxalacetato. Como resultado, el carbono
procedente del piruvato entra en el ciclo por dos rutas: va acetil-CoA y va
piruvato o fosfoenolpiruvato.

Ciclo del glioxilato. Durante la oxidacin de cido actico o cidos grasos que
se convierten en acetil-CoA sin la formacin intermedia de piruvato, ocurre
una modificacin especial del ciclo TCA conocida como ciclo del glioxilato.
Bajo estas circunstancias no puede generarse oxalacetato a partir de piruvato o
fosfoenolpiruvato (anaplerticas) ya que en los microorganismos aerbicos no
existe un mecanismo que sintetice piruvato a partir de acetato. El oxalacetato
requerido para la oxidacin del acetato se repone mediante la oxidacin de
succinato y malato, que se produce por una secuencia de dos reacciones. En la
primera reaccin el isocitrato, que es un intermediario normal del ciclo TCA,
se rompe para dar succinato y glioxilato. En la segunda reaccin el acetil-CoA
se condensa con el glioxilato para formar malato, el precursor inmediato del
oxalacetato. As, el ciclo del glioxilato acta como una secuencia anaplertica
que permite el funcionamiento normal del ciclo TCA.

102
Balance energtico de la respiracin aerbica. El TCA produce la completa
oxidacin del cido pirvico en 3 molculas de CO2 con la produccin de 4
molculas de NADH y una molcula de FADH. El NADH y FADH pueden ser
reoxidados a travs del sistema de transporte de electrones originando 3
molculas de ATP por NADH y 2 molculas de ATP por FADH. Tambin se
produce una molcula de ATP por fosforilacin a nivel de sustrato en la
oxidacin de a-cetoglutarato a succinato. En total suman 15 molculas de ATP
por ciclo. Como por cada molcula de glucosa se originan 2 molculas de cido
pirvico, en total seran 30 molculas de ATP. A estos hay que aadir las 2
molculas de ATP formadas en la glicolisis y los 2 NADH que en presencia de
O2 pueden ser reoxidados en el transporte de electrones originando 6
molculas de ATP. En total son 38 ATP por cada molcula de glucosa que
contrastan con los 2 ATP producidos en la fermentacin.

103
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. La ruta de Embden-Meyerhof es la ruta metablica ms utilizada para la

conversin de glucosa en:
a) Etanol b) Acido lctico c) CO2
d) Acido pirvico e) Acido butrico
2. Cul de los siguientes no es un metabolito precursor generado en el
ciclo de los cidos tricarboxlicos?
a) Cetoglutarato b) Acetil-CoA c) Succinil-CoA
d) Acido pirvico e) Oxalacetato
3. Los microorganismos Fotoauttrofos utilizan:
a) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono CO2
b) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos
c) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos e inorgnicos
d) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono la glucosa y
galactosa
4. Cual de las siguientes afirmaciones es falsa?:
a) En la fermentacin, el donador y el aceptor de electrones son
orgnicos y procedentes de la misma ruta degradativa
b) Para que ocurra la fermentacin es necesario un aceptor exgeno de
electrones
c) En la respiracin anaerobia el fumarato puede servir de aceptor final
de electrones
d) En la respiracin aerobia el donador ms comn de electrones es el
NADH

5. El ciclo de Calvin-Benson necesita una ruta anaplertica de obtencin, a

partir de glicerofosfato, de:
a) piruvato b) oxalacetato c) glioxlico
d) ribulosa-bifosfato e) fosfoenolpiruvato
6. La fermentacin de la glucosa conduce a la sntesis de 2 ATP. En qu paso
metablico ocurre esto:
a) Ciclo del TCA b) Ciclo del cido Glioxlico
c) Paso del pirvico al acetil-CoA d) Ciclo de Krebs
e) Ruta Emden-Meyerhoff
7. El ciclo del cido glioxlico es una ruta anaplertica para el mantenimiento
del ciclo del TCA cuando: 1=el producto catabolizado es un cido graso;
2=hay un exceso de pirvico; 4=el nutriente principal es un azcar distinto
de la glucosa; 8=el oxalactico no se puede sintetizar a partir de pirvico
a)1 b2) c)8 d)9 e)12

8. A qu se refiere el fenmeno denominado "Efecto Pasteur": 1=Al mayor

rendimiento energtico de la respiracin con respecto a la fermentacin;
2=Al mayor rendimiento energtico de la respiracin aerobia con respecto

104
 a la anaerobia; 4=Al mayor rendimiento energtico del metabolismo
quimioheterotrofo con respecto al quimioautotrofo; 8=Al descenso de la
produccin de etanol por las enterobacterias en presencia de oxgeno
a)1 b) 2 c)9 d)10 e)12

9. Un proceso en el que est implicada la glicolisis, el ciclo de los cidos

tricarboxlicos TCA, el transporte de electrones con SO4- como aceptor
final de electrones y una produccin de ATP, CO2 cidos orgnicos y SH2
se denomina:
a) Respiracin aerobia
b) Respiracin anaerobia
c) Fermentacin
d) Fotosntesis bacteriana
e) Ninguna de los anteriores
10. Los organismos hetertrofos: 1=Utilizan mayoritariamente carbohidratos
como fuente de energa; 2=Obtienen ATP por oxidacin de compuestos
inorgnicos ; 4=Pueden ser fermentadores o respiratorios.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

11. Los microorganismos hetertrofos pueden utilizar por lo general como

fuente de carbono:
a) CO2 atmosfrico y compuestos orgnicos oxidados
b) Compuestos orgnicos oxidados
c) CO2 atmosfrico
d) Compuestos orgnicos reducidos

105
Capitulo 12. MICROORGANISMOS AUTOTROFOS

12.1. Mecanismos de obtencin de energa por microorganismos

autotrofos

A diferencia de lo que ocurre en los heterotrofos las reacciones de

mantenimiento de los autotrofos, que obtienen su carbono celular del CO2,
tienen lugar en dos fases bioqumicas distintas:

1.- Sntesis de metabolitos precursores

2.- Sntesis de ATP y piridn nucletidos reducidos

12.1.1. Sntesis de metabolitos precursores: Ciclo de Calvin-Benson

Este ciclo es compartido por la mayora de los fotoautotrofos y los

quimioautotrofos. La mayor parte de los autotrofos (aunque hay excepciones)
fijan el CO2 mediante una reaccin catalizada por el enzima ribulosa difosfato
carboxilasa que convierte la ribulosa 1,5-difosfato en cido 3-fosfoglicrico, a
partir del cual se sintetizan todos los metabolitos precursores. Sin embargo, la
fijacin de CO2 depende de la disponibilidad de ribulosa difosfato. Por
consiguiente, parte del cido fosfoglicrico debe de utilizarse para regenerar
este aceptor de CO2 (Ribulosa difosfato). El ciclo de Calvin-Benson puede
dividirse en 3 fases:

1.- Fijacin de CO2

2.- Reduccin del CO2 fijado
3.- Regeneracin del aceptor de CO2

El ciclo de Calvin-Benson, en lugar de producir ATP y reducir piridn

nucletidos, los consume. En los autotrofos tales compuestos se sintetizan por
otros mecanismos.

12.1.2. Sntesis de ATP y piridn nucletidos reducidos

A.- Quimioautotrofos

Los quimioautotrofos obtienen ATP y poder reductor mediante la oxidacin de

compuestos inorgnicos. Los substratos que pueden servir como fuente de
energa son H2, CO, H3N, NO2-, Fe2+ y compuestos reducidos de azufre (H2S,
S, S2O3-). En este tipo de metabolismo respiratorio, los electrones de estos
compuestos pasan a travs de una cadena de transporte de electrones que
genera ATP por el modo que opera en los heterotrofos (fosforilacin

106
oxidativa). El aceptor terminal de electrones de la cadena de los
quimioautotrofos es normalmente el O2. Algunos de estos substratos
inorgnicos (H2 y CO) son agentes reductores suficientemente potentes como
para reducir directamente a los piridn nucletidos, pero otros no lo son. Estos
agentes reductores dbiles (NO2- y Fe2+) reducen los piridn nucletidos por un
proceso llamado transporte inverso de electrones; en el cual parte de la
fuerza motora de protones generada en el funcionamiento de la cadena normal
de transporte de electrones se utiliza para impulsar electrones en una direccin
inversa, que de otro modo sera termodinmicamente desfavorable, a travs de
otra cadena que une el sustrato inorgnico con los piridn nucletidos oxidados
que resultan por ello reducidos.

B.- Fotoautotrofos

Los fotoautotrofos obtienen ATP y poder reductor mediante la

fotofosforilacin, proceso por el que los organismos fototrofos convierten la
energa radiante de la luz en energa metablica y poder reductor. Existen dos
tipos de fotosntesis, la oxignica y la anoxignica.

Fotosntesis oxignica: La generacin de ATP y poder reductor se lleva a cabo

en dos centros de reaccin fotoqumica diferentes llamados fotosistema I (PSI)
y fotosistema II (PSII), los cuales contienen clorofila y se localizan en las
membranas de los tilacoides. Estos dos fotosistemas actan de una manera
conjunta en cianobacterias, algas y plantas. i) Cuando la luz es absorbida por
las molculas de clorofila existentes en el PSI, stas molculas de clorofila se
fotoactivan lo que les permite oxidarse. Los electrones eliminados de las
molculas de clorofila del PSI son aceptados por el NADP reducindose a
NADPH2. Todo esto deja a las molculas de clorofila del PSI temporalmente
deficientes en electrones lo que les confiere una carga positiva. ii) De la misma
manera, la luz absorbida por las molculas de clorofila existentes en el PSII
provoca que un electrn sea eliminado de cada molcula. Estos electrones
pasan a travs de un sistema transportador de electrones hasta que llegan al PSI
donde son aceptados por las molculas de clorofila deficientes en electrones
que se reducen. Este sistema transportador de electrones es parecido al descrito
en la fosforilacin oxidativa, utilizndose la energa liberada para la sntesis de
ATP. La diferencia radica en que el donador primario de electrones es la
clorofila del PSII y el aceptor terminal de electrones es la clorofila del PSI
(NADH2 y O2 respectivamente en la fosforilacin oxidativa). iii) En este punto
la clorofila del PSII es deficiente en electrones. Sin embargo, esta clorofila es
un fuerte agente oxidante que obtiene los electrones necesarios para reducirse
de las molculas de H2O. Esta oxidacin del H2O genera oxgeno gaseoso. Las
cianobacterias, algas y plantas son organismos que generan oxgeno mediante
la fotosntesis oxignica, siendo los responsables de la produccin mayoritaria
del oxgeno que existe en la atmsfera terrestre. La atmsfera de la primitiva
Tierra no contena oxgeno hasta que se desarrollaron las cianobacterias hace
entre 1000 y 3000 millones de aos. El desarrollo de los organismos aerobios
slo fu posible despus de que se acumularan en la atmsfera apreciables

107
cantidades de O2 (generado mediante la fotosntesis oxignica de las
cianobacterias).

Fotosntesis anoxignica: Los fototrofos anoxignicos convierten la energa de

la luz en energa qumica necesaria para el crecimiento; sin embargo, y al
contrario que las plantas, algas y cianobacterias en este proceso de
transformacin de la energa no se produce oxgeno y por ello se le llama
fotosntesis anoxignica. Otra diferencia es que los fototrofos anoxignicos
contienen un tipo de clrofila, bacterioclorofila, diferente a la clorofila de las
plantas. Estas bacterias contienen adems carotenoides, pigmentos encargados
de la absorcin de la energa de la luz y posterior transmisin a la
bacterioclorofila. El color de estos pigmentos son los que le dan el nombre a
estas bacterias: bacterias rojas y bacterias verdes. En las cianobacterias estos
pigmentos captadores de luz son las ficobilinas, de ah su nombre: bacterias
azules (cianobacterias). En las bacterias rojas y bacterias verdes slo existe un
fotosistema, de tal manera que la energa absorbida de la luz se utiliza para
transportar un electrn desde la clorofila a la cadena de transporte de electrones
que finalmente cede el electrn a la misma clorofila. En esta cadena de
transporte de electrones se genera la energa necesaria para sintetizar ATP. Sin
embargo, el transporte de electrones es cclico (el donador primario de
electrones y el aceptor terminal de electrones es la misma clorofila) no
existiendo por lo tanto reduccin de NADP a NADPH. Esta reduccin se lleva
a cabo mediante transporte inverso de electrones gracias a los electrones
donados por el hidrgeno gaseoso (H2) o el sulfuro de hidrgeno (H2S). En
cualquier caso nunca se produce O2.

108
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Los microorganismos quimioautotrofos utilizan:

a) como fuentes de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos
b) fuente de energa, compuestos qumicos y fuente de carbono, CO2
atmosfrico
c) fuente de energa, luz y fuentes de carbono, CO2
d) fuentes de carbono, luz y fuente de energa, compuestos orgnicos
2. El sistema de fotofosforilacin de las bacterias rojas: 1=es oxignico;
2=puede ser cclico; 4=contiene dos fotosistemas (I y II); 8=siempre
conduce a la sntesis de ATP Soluciones:
a)6 b) 10 c) 11 d)14 e)15

3. En las cianobacterias y las bacterias rojas, la reduccin del CO2 para la

obtencin de los metabolitos precursores ocurre por el ciclo:
a) TCA b)Calvin-Benson c) Glioxlico
d) Acido ctrico e)no se reduce porque son hetertrofas
4. En la fotofosforilacin no cclica oxignica, los e- que regeneran el PSII
(fotosistema II) son suministrados por:
a) PSI b)cualquier compuesto reducido
c)agua d) CO2 e)NADPH
5. Qu bacteria autotrofa oxida nitrito a nitrato?
a) Pseudomonas b)Nitrosomonas
c) Hidrogenomonas d) Nitrobacter
e) ninguna de las anteriores
6. En el metabolismo auttrofo, para que se obtengan los piridn nucletidos
reducidos, es necesario un transporte inverso de electrones, excepto
cuando el donador de electrones es:
a) NO2- b)H2 c)SH2 d)S2O3= e)NH3

7. Cual de los siguientes grupos microbianos realiza transporte inverso de

electrones?:
a) los microorganismos que realizan respiracin anaerobia
b) algunos microorganismos capaces de fermentar azcares
c) todos los microoragsmismos quimioautotrofos
d) casi todos los microorganismos quimioautotrofos
e) casi todos los mciroorganismos quimioheterotrofos
8. La fotofosforilacin cclica es un: 1=Sistema de obtencin de energa;
2=Sistema de obtencin de poder reductor ; 4=Sistema de obtencin de
metabolitos precursores; 8=Sistema de obtencin de oxgeno a partir de
agua.
a)1 b)3 c)9 d)11 e)15

9. La fotofosforilacin no cclica, que realizan las bacterias rojas, es un:

1=Sistema de obtencin de energa; 2=Sistema de obtencin de poder
reductor; 4=Sistema de obtencin de metabolitos precursores; 8=Sistema
de obtencin de oxgeno a partir de agua.
a)1 b)3 c)9 d)11 e)15

109
10. La fotofosforilacin no cclica, que realizan las cianobacterias, es un:
1=Sistema de obtencin de energa; 2=Sistema de obtencin de poder
reductor; 4=Sistema de obtencin de metabolitos precursores; 8=Sistema
de obtencin de oxgeno a partir de agua
a)1 b)3 c)9 d)11 e)15

11. Los microorganismos auttrofos utilizan como fuente de carbono:

a) CO2 atmosfrico y compuestos orgnicos
b) CO2 atmosfrico y succinato
c) CO2 atmosfrico
d) Compuestos orgnicos reducidos

12. Los microorganismos fotolittrofos utilizan:

a) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
inorgnicos
b) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos
c) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos e inorgnicos
d) como fuente de energa la luz y como fuente de carbono la glucosa y
galactosa

110
Capitulo 13. BIOSNTESIS

13.1. Biosntesis

La clula es una excelente "industria qumica" encargada de ensamblar las

intrincadas molculas de la vida. Muchas de estas sustancias qumicas
"fabricadas" por las clulas son tan complejas que todava no han podido ser
sintetizadas artificialmente por los qumicos en el laboratorio. Sin embargo, las
bacterias pueden sintetizarlas a partir de los nutrientes y a temperatura
ambiente. Estas sustancias son:

1.- Sustancias nitrogenadas, incluyendo protenas (como son los enzimas) y

cidos nucleicos (DNA y RNA).

2.- Carbohidratos, donde se incluyen polisacridos complejos como es la

parte correspondiente del peptidoglucano de la pared celular.

3.- Fosfolpidos, los cuales son componentes importantes de la membrana

citoplsmica.

13.1.1. Sustancias nitrogenadas

A.- Protenas

El cido glutmico es el aminocido ms importante a partir del cual las

bacterias sintetizan otros aminocidos. En Escherichia coli el cido glutmico
se obtiene por reduccin aminada del cido a-cetoglutrico. Este cido
glutmico se puede transformar en otros aminocidos por dos mecanismos:

Transaminacin: el grupo amino del cido glutmico se intercambia por un

tomo de oxgeno de diversos cidos orgnicos convirtindolos en
aminocidos. Por ejemplo, la sntesis de alanina a partir de la transaminacin
del cido pirvico:

Ac. glutmico (-NH2) + Acido pirvico (=O) Acido a-cetoglutrico (=O) +

Alanina (-NH2)

Alteracin de la estructura molecular: la otra va por la cual el cido

glutmico se utiliza para sintetizar otros aminocidos es alterando su estructura
molecular. Estos cambios estructurales requieren energa en forma de ATP. Un
ejemplo es la sntesis de prolina:

111
Acido glutmico + ATP + NADH2 Semialdehido del cido glutmico +
ADP + P + NAD H2O + Pirrolina-5-cido carboxlico + NADPH2
Prolina + NAD

Una vez sintetizados, estos aminocidos deben activarse para as poder ser
utilizados en la sntesis de protenas. Las clulas activan los aminocidos
usando la energa del ATP de la siguiente manera:

Aminocido + ATP Aminocido-AMP + Pirofosfato

La sntesis de protenas se ver en captulos posteriores.

B.- Acidos nucleicos

Los aminocidos son utilizados tambin por las clulas para sintetizar
nucletidos (bloques constituyentes de los cidos nucleicos). Existen dos tipos
de nucletidos segn el azcar que contengan:

Ribonucletidos: ribosa; sntesis de RNA

Deoxiribonucletidos: deoxiribosa; sntesis de DNA

Estos nucletidos tambin se clasifican en dos grupos segn la base

nitrogenada que contengan:

Purinas: adenina o guanina

Pirimidinas: citosina, timina o uracilo

En la biosntesis de las purinas se requieren los aminocidos glicina, asprtico

y glutamina adems de energa en forma de ATP y GTP (guanosina trifosfato).
En la biosntesis de las pirimidinas se requieren los aminocidos glutamina y
cido asprtico as como energa en forma de ATP. En ambos casos la ribosa
fosfato se obtiene a partir de glucosa.

Una vez que se han sintetizado los nucletidos, stos se activan por ATP. En
este proceso el nucletido, que ya contiene un grupo fosfato, adquiere otros dos
grupos fosfato. Por ejemplo, la guanosina monofosfato se activa a guanosina
trifosfato:

GMP + 2 ATP GTP + 2 ADP

112
El ATP, adems de ser una molcula que intercambia energa, es la forma
activa de un nucletido, la adenosina monofosfato (AMP), que se utiliza para
sintetizar cidos nucleicos.

La biosntesis de DNA y RNA a partir de los nucletidos activados la veremos

en captulos posteriores.

13.1.2. Carbohidratos

Los microorganismos sintetizan carbohidratos mediante diferentes mecanismos

segn sean autotrofos (CO2) o heterotrofos (compuestos orgnicos como la
glucosa) a partir de los cuales obtienen los diferentes monosacridos. Estos
monosacridos deben ser activados para poder ser ensamblados en los
polisacridos correspondientes. Por ejemplo, la forma activada de la glucosa es
uridin difosfato glucosa (UDP-Glucosa) y la fuente de energa usada es ATP y
UTP:

Glucosa + ATP + UTP UDP-Glucosa + ADP + Pirofosfato

Biosntesis del peptidoglucano de la pared celular: La sntesis de los

polisacridos bacterianos se puede ilustrar mediante la biosntesis del
peptidoglucano. Si bien este peptidoglucano est localizado en la pared celular,
la mayora de la energa utilizada en este proceso biosinttico se consume
dentro de la clula. Los distintos pasos involucrados en este proceso se
sumarizan en:

(i) A partir de glucosa y utilizando ATP y UTP se obtiene N-

acetilglucosamina-UDP (NAG-UDP).
(ii) Algunas de estas molculas de NAG-UDP se utilizan para obtener
N-acetilmurmico-UDP (NAM-UDP). La energa requerida en este
paso se obtiene a partir del fosfoenolpirvico.
(iii) A cada molcula de NAM-UDP se le unen 5 aminocidos para
formar una cadena pentapeptdica. La adicin de cada aminocido
requiere energa en forma de ATP.
(iv) El grupo UDP del NAM-pentapptido-UDP se reemplaza por un
lpido llamado lpido transportador.
(v) A este NAM-pentapptido-lpido transportador se le une una
molcula de NAG-UDP para formar una unidad completa activada
que se insertar en la cadena de peptidoglucano.
(vi) Esta unidad completa activada se transporta, con la ayuda del lpido
transportador, a travs de la membrana hacia la pared celular.
(vii) Una vez en la pared celular, esta unidad completa activada se une a
una cadena de peptidoglucano alargndose esta cadena en una
unidad.

113
 (viii) El ltimo paso es la unin de esta cadena a otras cadenas para
formar la malla del peptidoglucano que constituye la estructura de
la pared celular. Esta unin se inicia con la eliminacin del quinto
aminocido de la cadena pentapeptdica, reaccin catalizada por el
enzima transpeptidasa. La rotura de este enlace libera energa que es
utilizada por la transpeptidasa para unir los tetrapptidos de dos
cadenas distintas (el tercer aminocido de una con el cuarto
aminocido de otra).

13.1.3. Lpidos

Los lpidos ms importantes de las clulas bacterianas son los fosfolpidos que,
junto con las protenas, forman la estructura de la membrana citoplsmica. La
va general por la cual los microorganismos sintetizan fosfolpidos comienza a
partir de glucosa (6C) que a travs de la glucolisis se oxida originando dos
molculas de cido pirvico (3C) que a su vez se descarboxila a acetil-CoA
(2C); este acetil-CoA puede carboxilarse para formar malonil-CoA (3C). Esta
ltima reaccin consume energa en forma de ATP:

Acetil-CoA + CO2 + ATP Malonil-CoA + ADP + P

El acetil-CoA y malonil-CoA son las formas activas del cido actico y

malnico respectivamente las cuales se utilizan para sintetizar cidos grasos de
cadena larga:

(2C) Acetil-CoA + (3C) Malonil-CoA Acetil-protena + Malonil-protena

(4C) Butiril-protena + CO2 + Malonil-protena (6C)-protena +
CO2+ Malonil-protena (16C 18C)-protena + CO2

Una vez formados los cidos grasos de cadena larga, stos se utilizan para
sintetizar los fosfolpidos. Para ello se necesita adems glicerol fosfato,
compuesto que se obtiene por reduccin de la dihidroxiacetona fosfato que es
un intermediario en la glucolisis. A cada molcula de glicerol fosfato se le unen
dos molculas de cidos grasos de cadena larga para formar una molcula de
cido fosfatdico que es un fosfolpido sencillo a partir del cual se sintetizan
otros fosfolpidos mediante la unin de otros grupos qumicos al grupo fosfato.
Por ejemplo, el aminocido serina se puede adiccionar al cido fosfatdico para
formar fosfatidilserina. La energa que se requiere en esta reaccin se obtiene
a partir de la citidina trifosfato (CTP):

Acido fosfatdico + CTP + Serina Fosfatidilserina + CMP + Pirofosfato

114
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Los microorganismos quimiolitotrofos utilizan:

a) como fuentes de energa la luz y como fuente de carbono compuestos
orgnicos
b) fuente de energa, compuesto inorgnicos reducidos y fuentes de
carbono, CO2 atmosfrico
c) fuente de energa, compuestos inorgnicos reducidos y fuentes de
carbono, compuestos orgnicos
d) fuentes de carbono, CO2 atmosfrico y fuente de energa, compuestos
orgnicos
2. En una clula de Escherichia coli cuntas molculas de DNA suelen haber;
a) centenas b) millares c) millones d) billones

3. Las fases de microciclo son: 1= Iniciacin; 2= Elongacin; 3= Terminacin;

4.= Disociacin En qu orden suceden?:
a)1-2-3-4 b) 4-1-2-3 c) 4-1-3-2 d) 2-3-1-4 e) 1-2-4-3

4. Son enzimas que intervienen en la multiplicacin: 1= DNA polimerasas;

2.= Polinucletidos-ligasas; 4= Endonucleasas; 8= Girasa
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

5. Cul de los siguientes eventos no se dan en la sntesis de protenas en el

llamado "microciclo"?:
a) las cadenas polipeptidicas crecen por su terminacin carboxlica
b) las cadenas polipeptidicas estn unidas al RNAt por su enlace ester
c) el RNAt ocupa dos puntos adyacentes D (peptidil o dador) y A
(aminoacil o aceptor)
d) en la disociacin de las dos subunidades de ribosomas intervienen
varios factores
e) en la transferencia se sustituye el enlace ester por el enlace peptdico

115
Capitulo 14. ECOLOGIA MICROBIANA

14.1. Microbiologia del suelo

Existe una gran diversidad de microorganismos que viven en el suelo. El

nmero y tipos de microorganismos presentes en el suelo depende de diversos
factores ambientales como son los nutrientes, humedad, aireacin, temperatura,
pH, prcticas agrcolas, etc. Existen del orden de varios miles de millones de
bacterias por gramo de suelo. La mayor parte son heterotrofos, siendo comunes
los bacilos esporulados, los actinomicetos que son los responsables del olor a
tierra mojada, y en la rizosfera (regin donde el suelo y las races de las plantas
entran en contacto) especies de los gneros Rhizobium y Pseudomonas.

1.- Ciclos biogeoqumicos

El planeta Tierra acta como un sistema cerrado en el que las cantidades de

materia permanecen constantes. Sin embargo, s existen continuos cambios en
el estado qumico de la materia producindose formas que van desde un simple
compuesto qumico a compuestos complejos construidos a partir de esos
elementos. Algunas formas de vida, especialmente las plantas y muchos
microorganismos, usan compuestos inorgnicos como nutrientes. Los animales
requieren compuestos orgnicos ms complejos para su nutricin. La vida
sobre la Tierra depende del ciclo de los elementos qumicos que va desde su
estado elemental pasando a compuesto inorgnico y de ah a compuesto
orgnico para volver a su estado elemental. Los microorganismos son
esenciales en estas transformaciones qumicas.

Ciclo del nitrgeno: La fijacin biolgica de nitrgeno, crucial en el ciclo

biogeoqumico del nitrgeno, es considerada, despus de la fotosntesis, como
el proceso bioqumico ms importante para el mantenimiento de la vida sobre
la Tierra.

14.2. Microbiologa del aire

La superficie de la Tierra (suelo y agua) es la fuente de los microorganismos en

la atmsfera. El viento forma polvo del suelo y estas partculas de polvo
transportan los microorganismos del suelo al aire. Adems, las gotas de agua
que se originan en la superficie de los ocanos y otros cuerpos de H2O
naturales como consecuencia de la salida de burbujas de aire, pueden contener
microorganismos que penetran en la atmsfera. Las esporas de hongos
constituyen la mayor proporcin de microorganismos en el aire.

116
14.3. Microbiologa del agua

El tipo de microorganismo encontrado en un ambiente acutico viene

determinado por las condiciones fsicas y qumicas que prevalecen en ese
ambiente. Estas condiciones ambientales varan de un extremo a otro
dependiendo de la temperatura, luz, pH y nutrientes.

Temperatura: La temperatura de la superficie est comprendida entre los 0 C

de los polos y los 40 C del ecuador. En las profundidades la temperatura ronda
los 5 C. Pyrodictium occultum aislado de las aguas que rodean la isla de
Vulcano en Italia tiene una temperatura ptima de crecimiento de 105 C y no
crece por debajo de 82 C.

Luz: La mayor parte de las formas de vida acutica dependen, directa o

indirectamente, de los productos metablicos de los organismos fotosintticos.
Los principales organismos fotosintticos de los ambientes acuticos son las
algas y cianobacterias. Su crecimiento est restringido a las capas altas de las
aguas (0-50 m y en condiciones ptimas de claridad hasta 125 m).

pH: Los microorganismos acuticos crecen mejor a pH: 6,5 - 8,5. El pH del
agua de mar va de 7,5 a 8,5. Los lagos y ros presentan un gran rango de pH
dependiendo de las condiciones ambientales locales (pH: 1,0 - 11,5).

Nutrientes: La cantidad y tipo de nutrientes presentes en un ambiente acutico

influye significativamente en el crecimiento microbiano. Los nitratos y fosfatos
son constituyentes inorgnicos comunes que promueven el crecimiento de las
algas. Cantidades excesivas de ellos causan un crecimiento excesivo de las
algas de tal manera que se reduce la cantidad de oxgeno en el agua
provocando asfixia en otras formas de vida acutica.

14.4. Agua de consumo humano

El agua de consumo humano de la mayor parte de las comunidades y

municipios proviene de aguas superficiales (ros, arroyos y lagos). Estas aguas
pueden estar contaminadas con residuos domsticos, agrcolas e industriales.
Estos contaminantes se pueden clasificar en tres categoras: qumicos, fsicos y
biolgicos. Nosotros nos centraremos en los ltimos. El agua puede
comprometer a la salud y la vida si contiene microorganismos patgenos. Los
patgenos ms frecuentes que se transmiten a travs del agua son aquellos que
causan infecciones del tracto intestinal (fiebre tifoidea, sigelosis, clera,
enteritis virales, etc.). Estos microorganismos estn presentes en las heces u
orina de las personas infectadas por lo que pueden pasar al agua que en ltima
instancia sirve como fuente de bebida. Para prevenir la transmisin de estos
patgenos se debe:

117
 1.- Purificar el agua de consumo (Potabilizacin)
2.- Tratar las aguas residuales (Depuracin)
3.- Control microbiolgico de las aguas de consumo

Los controles microbiolgicos rutinarios para determinar la potabilidad del

agua (agua exenta de microorganismos patgenos y sustancias qumicas
peligrosas para la salud) no se basan en el aislamiento e identificacin de
microorganismos patgenos sino que se basan en la bsqueda de
microorganismos cuya presencia indique la posibilidad de la presencia de
microorganismos patgenos. Estos microorganismos indicadores sirven como
um sistema de alarma. Un microorganismo indicador es un tipo de
microorganismo cuya presencia en el agua es una evidencia de que el agua est
contaminada con materia fecal de humanos u otros animales de sangre caliente.
Este tipo de contaminacin fecal significa que cualquier microorganismo
patgeno que exista en el tracto intestinal de estos animales puede estar
presente tambin en el agua. El microorganismo utilizado como indicador es
Escherichia coli y su deteccin se puede hacer mediante el cultivo en caldo
lactosado y determinacin del nmero ms probable (NMP) o mediante
filtracin en membrana usando medios selectivos y diferenciales.

14.5. Microbiologa de los alimentos

Una vez que los microorganismos colonizan los alimentos, estos

microorganismos se pueden multiplicar puesto que encuentran los nutrientes
necesarios para su desarrollo y como resultado del metabolismo microbiano
estos alimentos se alteran. No obstante, slamente una parte de esta microbiota
inicial llega a proliferar suficientemente como para producir la alteracin de los
alimentos. El que slamente una parte de la microbiota inicial sea capaz de
desarrollarse masivamente, en un alimento concreto, viene condicionado por
una serie de factores intrnsecos del propio alimento as como de factores
extrnsecos del medio ambiente que le rodea: pH, humedad, temperatura de
conservacin, etc.

Consecuencias del desarrollo de microorganismos en los alimentos

Los efectos que produce el desarrollo de microorganismos en los alimentos,

tanto beneficiosos como perjudiciales, se sumarizan a continuacin:

1.- Alteracin de los alimentos (microorganismos alterantes)

Los microorganismos al crecer y utilizar los alimentos como fuente de

nutrientes producen cambios en la apariencia, sabor, olor y otras cualidades del
alimento. Estos procesos de degradacin son:

118
a.- Putrefaccin

Protenas alimentos + Microorganismos proteolticosAminocidos + Aminas

+ NH3 + SH2

b.- Fermentacin

Carbohidratos alimentos + Microorganismos sacarolticos Acidos +

Alcoholes + Gases

c.- Enranciamiento

Grasas alimentos + Microorganismos lipolticosAcidos grasos+Glicerol

2.- Enfermedades de origen microbiano (microorganismos patgenos)

a.- Infeccin alimentaria: Salmonelosis

b.- Intoxicacin alimentaria: Botulismo

3.- Alimentos producidos por microorganismos (microorganismos

industriales)

a.- Vegetales: vino, aceitunas

b.- Lcteos: yogurt, queso

c.- Protena de origen unicelular (SCP): clulas de bacterias, levaduras, algas

y hongos filamentosos.

119
Capitulo 15. CARACTERISTICAS GENERALES DE LOS VIRUS (I)

15.1. Estructura

El tamao de los virus est comprendido entre 20 y 300 nm. Ya que la

mayora miden menos de 250 nm, lmite de resolucin del microscopio ptico,
slo son visibles con ayuda del microscopio electrnico.

Los virus estn compuestos de un ncleo central formado por cido nucleico
(DNA o RNA, pero nunca los dos en el mismo virin) rodeado por una
protena que constituye la cpsida. El ncleo central y la cpsida forman
conjuntamente la nucleocpsida del virin. Adems de las protenas de la
cpsida, muchos virus contienen dentro de la cpsida uno o ms enzimas que
actan en la replicacin de los cidos nucleicos del virus, polimerasas. Los
retrovirus contienen la transcriptasa inversa que sintetiza una cadena de DNA a
partir de RNA viral. Algunos virus contienen adems una estructura que rodea
a la nucleocpsida denominada envuelta formada por lpidos (mayoritariamente
fosfolpidos aunque tambin existen glicolpidos, cidos grasos, etc.). Esta
envuelta puede as mismo tener espculas constituidas por glicoprotenas.

15.2. Clasificacin y nomenclatura de los virus

Las caractersticas usadas para la clasificacin de los virus se basan en:

a.- Tipo de clulas hospedadoras (animal, vegetal, bacteriana)

b.- Naturaleza qumica del cido nucleico (RNA, DNA)
c.- Morfologa del virin (helicoidal, icosadrico, complejo)
d.- Lugar de replicacin (ncleo, citoplasma)

En cuanto a su nomenclatura, los sufijos empleados son:

FAMILIA : viridae Herpesviridae

SUBFAMILIA : virinae Alfaherpesvirinae

GENERO : virus Herpes simplex virus

Los prefijos suelen referirse a alguna caracterstica de la familia. Por ejemplo

Picornaviridae significa pequeo virus RNA. Hepadnaviridae significa virus
DNA que causa enfermedad en el hgado.

120
15.3. Caractersticas generales de los virus (ii)

15.3.1. Replicacin de los virus animales

Los bacterifagos difieren de los virus animales y vegetales en sus

mecanismos de entrada, sntesis y ensamblaje de los nuevos componentes
virales as como en los mecanismos de maduracin y liberacin.

1.- Adsorcin

El primer paso en el proceso de infeccin viral es la unin o adsorcin del

virin sobre un receptor especfico de la superficie de una clula susceptible.
Una clula que no tenga el receptor especfico para ese virus no ser infectada.
Las estructuras responsables de la unin especfica al receptor son las protenas
de la cpsida o en el caso de los virus con envuelta las glicoprotenas de las
espculas.

2.- Penetracin

El segundo paso en el proceso de infeccin viral es la penetracin del virin

dentro de la clula hospedadora. Virus con envuelta: existe una fusin de la
membrana de la clula hospedadora y la envuelta viral, lo que permite la
liberacin de la nucleocpsida dentro del citoplasma. Virus sin envuelta: son
includos dentro de una vacuola formada en la membrana que se integra en el
aparato de Golgi liberando la nucleocpsida. El cido nucleico debe ser
liberado de la cpsida para que est disponible para la transcripcin, traduccin
y replicacin. Dependiendo de los virus, esta desintegracin de la cpsida
ocurre en vacuolas, citoplasma o ncleo.

3.- Biosntesis de los componentes virales

Como ocurre en el caso de los bacterifagos, la biosntesis de los componentes

de los virus animales dentro de la clula hospedadora se divide en funciones
tempranas y tardas. Las funciones tempranas son aquellos acontecimientos
bioqumicos dirigidos a paralizar el metabolismo de la clula para redirigirlo
hacia la sntesis de los primeros mRNA virales. Las funciones tardas son
aquellas que sintetizan posteriormente otras protenas y el ensamblaje de la
nucleocpsida.

121
4.- Maduracin y ensamblaje

Cuando se han sintetizado un nmero crtico de varios componentes virales,

stos se ensamblan en partculas vricas maduras en el ncleo y/o citoplasma de
la clula infectada. En este ensamblaje y al contrario de lo que ocurre en los
bacterifagos, no estn implicados enzimas biosintticos especiales, sino que
ocurre de forma espontnea debido a la gran afinidad de la cpsida con el cido
nucleico viral. La maduracin se puede definir como la fase de la infeccin
viral durante la cual los componentes estructurales del virin se producen y
ensamblan con el nuevo cido nucleico viral para formar la nucleocpsida.

5.- Liberacin

La liberacin de los viriones maduros es el paso final en la multiplicacin viral.

Los mecanismos de liberacin varan segn el tipo de virus. En algunos virus la
clula hospedadora se desintegra liberando los viriones. Tambin pueden ser
liberados a ciertos perodos de tiempo mediante exocitosis o a travs de canales
especiales (tbulos). El nmero de partculas vricas que se obtienen vara
segn el tipo de virus, tipo de clula y las condiciones de crecimiento. El
rendimiento medio en plantas y animales va desde varios miles a cerca de un
milln de viriones por clula, comparado con los varios cientos de fagos que se
obtienen en una clula bacteriana.

15.3.2. Replicacin de virus DNA (Herpes simplex virus)

Despus de la adsorcin, penetracin y eliminacin de la cubierta, el cido

nucleico viral es liberado y migra al ncleo de la clula hospedadora.
Posteriormente empieza a transcribirse la porcin de DNA vrico
correspondiente a los genes tempranos. Tiene lugar la traduccin, siendo los
productos de estos genes enzimas requeridos para la multiplicacin del DNA
vrico. En la mayora de los virus DNA, la transcripcin temprana se lleva a
cabo con la transcriptasa (RNA polimerasa) del hospedador, salvo en el caso de
los poxvirus. Algn tiempo despus de la iniciacin de la multiplicacin del
DNA, comienza la transcripcin y traduccin de los genes tardos que todava
no haban empezado a expresarse. La sntesis de las protenas de la cpsida
ocurre en el citoplasma de la clula hospedadora. Posteriormente las protenas
de la cpsida migran al ncleo donde tiene lugar la maduracin: el DNA vrico
y las protenas de la cpsida se ensamblan para formar las partculas vricas
completas.

15.3.3. Replicacin de virus RNA

La multiplicacin de los virus RNA es esencialmente la misma que la de los

virus DNA excepto que los mecanismos para generar el mRNA son distintos en

122
los diferentes grupos de virus RNA. Una vez que el RNA vrico y las protenas
son sintetizados, la maduracin tiene lugar de una manera similar en el
citoplasma.

ssRNA (+)

_____(+) ______(+) --1--> ______(-) <----> ______(+) ---->

Virin

Cpsida

ssRNA (-)

_________ (-) _________ (-) --1--> _________ (+) ----->

Virin

Cpsida

dsRNA (+/-)

_________ (-) _________ (+) _________ (-) --1--> _________ (+) ---->
Virin

Cpsida

1 = RNA polimerasa RNA dependiente

Retrovirus

Los retrovirus son agentes infecciosos que producen bastantes enfermedades en

vertebrados. Un grupo de retrovirus (HIV) producen SIDA. Estos virus llevan
su propia polimerasa, que utiliza el RNA del virus para sintetizar un DNA
complementario de cadena nica que, a su vez, es replicado para formar un
DNA de cadena doble. El enzima que lleva a cabo la copia de RNA a DNA es,
a su vez, capaz de degradar el RNA vrico original. Este enzima es una DNA
polimerasa RNA dependiente que se llama transcriptasa inversa. El DNA
formado a partir del material gentico del virus se integra en el DNA del
cromosoma de la clula hospedadora. En este estado integrado el DNA del
virus se denomina provirus. A diferencia de los profagos, los provirus nunca se
liberan del cromosoma. Una vez que el provirus se ha integrado en el DNA de
la clula hospedadora, ste puede mantenerse de una manera latente asociado al
material gentico de la clula hospedadora y multiplicarse cada vez que ste se
duplica. En otros casos el provirus empieza a transcribirse sirviendo este RNA

123
como mRNA para la la sntesis de las protenas vricas y como material
gentico para su incorporacin en nuevos viriones que pueden infectar a las
clulas adyacentes.

_____ RNA _____ DNA _____ RNA --2--> _____ DNA ----> _____
DNA ----> ______ RNA

2 = DNA polimerasa RNA dependiente

15.4. Estudio de los virus adn

15.4.1. Viruela

El virus es transmitido primariamente por va respiratoria e infecta diversos

rganos antes de su paso al torrente sanguneo (viremia) que conduce a la
infeccin de la piel y a la produccin de los sntomas ms caractersticos:
fiebre, malestar, dolor de cabeza, fuerte dolor renal. La multiplicacin del virus
en las capas epidrmicas de la piel causa las lesiones. La viruela fu la primera
enfermedad frente a la que se indujo inmunidad de forma artificial y es la
primera en ser erradicada de la poblacin humana. Se ha estimado que durante
la Edad Media el 80% de la poblacin europea poda esperar que a lo largo de
su vida iba a contraer la viruela. La ltima vctima en padecer viruela fu una
persona en 1977 en Somalia.

15.4.2. Varicela

Es una enfermedad infantil relativamente moderada. La varicela se contrae por

infeccin del sistema respiratorio, localizndose el virus, al cabo de unas dos
semanas, en las clulas de la piel. La piel infectada presenta vesculas durante 3
4 das, tiempo en el cual las vesculas se llenan de pus, se rompen y forman
una costra para despus sanar. Cuando la varicela afecta a adultos, la
enfermedad es ms grave y la tasa de mortalidad significativa

Despus de una infeccin primaria el virus alcanza los nervios perifricos y se

mueve hacia los ganglios nerviosos centrales donde persiste como DNA vrico
en forma latente. Ms adelante, a veces despus de dcadas, el virus puede
reactivarse. El desencadenante puede ser el estrs o simplemente la
disminucin de inmunocompetencia asociada al envejecimiento. Los viriones
producidos por el DNA reactivado se desplazan a lo largo de los nervios
perifricos hasta los nervios sensoriales de la piel donde producen una nueva
multiplicacin vrica en forma de herpes-zster apareciendo vesculas similares
a las de la varicela pero localizadas en zonas definidas, siendo tpica su
distribucin alrededor de la cintura aunque se pueden ocasionar infecciones
faciales y del tronco superior.

124
15.4.3. Hepatitis B

Las personas en contacto directo con sangre, como mdicos, enfermeras,

dentistas y personal de laboratorio, presentan una incidencia de esta
enfermedad considerablemente superior a la de la poblacin en general (x5).
Adems de la transmisin por sangre portadora de virus, la hepatitis B puede
transmitirse por medio de cualquier secrecin o fludo corporal (saliva,
lgrimas, leche materna y semen). El perodo de incubacin medio es de 12
semanas siendo los sntomas muy variables. En las primeras etapas incluyen
prdida de apetito, fiebre moderada y dolor articular apareciendo la ictericia
ms tarde. El 90% de las hepatitis B concluyen con una recuperacin total.

15.5. Estudio de los virus ARN

15.5.1. SIDA

El primer caso de SIDA ocurri en USA probablemente entre los aos 60 y 70

pero no fu reconocida como una nueva enfermedad hasta 1981 en San
Francisco. En 1982 se declararon 159 casos (158 hombres y 1 mujer). Desde
entonces la incidencia ha ido incrementando de una forma alarmante, de tal
manera que se estima que para el ao 2000 unos 40 millones de personas
pueden estar infectadas con el virus. Se han propuesto varias teoras sobre el
origen del virus del SIDA. La actual sostiene que el HIV apareci por mutacin
de un virus que ha sido endmico durante muchos aos en algunas zonas de
Africa Central. Se ha especulado que el HIV fu transportado a Hait, en el
Caribe, por los haitianos que haban vivido en Africa Central. Se supone que
pas de Hait a USA a travs de inmigrantes haitianos y de homosexuales
norteamericanos que haban veraneado en Hait.

Agente causante del SIDA

En 1983 el patgeno causante de esta enfermedad haba sido identificado como

un retrovirus, conocido ahora como virus de la inmunodeficiencia humana
(HIV). Existen 2 virus relacinados: HIV-1 y HIV-2. Ambos tipos causan el
mismo dao al sistema inmune del paciente.

Estructura del HIV

125
La porcin interna consiste en 2 copias de RNA monocatenario y 2 copias del
enzima transcriptasa inversa. Ambas molculas estn contenidas en una
cpsida que a su vez est rodeada por una envuelta que contiene la protena 17
y una membrana lipdica que lleva insertadas glicoprotenas. Estas
glicoprotenas le permiten al virus unirse al receptor CD4 que existe en la
superficie de los linfocitos T4. Estas clulas son destruidas durante la
multiplicacin viral. El virus es tambin capaz de infectar a macrfagos y
linfocitos B. Aparentemente estas clulas no son destruidas durante la
liberacin de los nuevos virus por lo que actan como reservorios.

Sintomatologa del SIDA

El SIDA es la fase final de una infeccin por HIV. Tras la infeccin inicial por
contactos homosexuales y/o heterosexuales (semen, sangre y fluidos
vaginales), uso de jeringuillas compartidas entre drogadictos, transfusiones de
sangre contaminada, de madre a hijo antes del parto o durante el parto, el
paciente experimenta la seroconversin, es decir d un resultado positivo en las
pruebas utilizadas para detectar anticuerpos frente al HIV. Los primeros
sntomas, fiebre y malestar, pueden aparecer hasta 11 aos despus (en el 20%
al 30% de los casos es a los 5 aos). Esto es debido a que los anticuerpos
producidos frente al virus controlan las multiplicaciones virales durante un
perodo de tiempo, incluso aos. Sin embargo, no eliminan completamente el
virus debido a su estado de provirus en los linfocitos T4. Cuando una clula T4
que lleve el provirus es estimulada en la respuesta inmune, el HIV es activado
y se replica matando a la clula T4. Por lo que la activacin del sistema inmune
contribuye a la destruccin de un componente esencial del propio sistema
inmune, las clulas T4, ya que son esenciales para el normal funcionamiento de
linfocitos T, B y macrfagos. Hasta que llega un momento en el que el sistema
inmune est daado de tal manera que ya no puede controlar al virus. En este
momento aparecen los sntomas del SIDA. An no se sabe cul es el porcentaje
de personas infectadas por HIV que desarrollarn totalmente el SIDA. Casi
todos los que desarrollan SIDA fallecen en un plazo de 200 a 400 das. La
causa de la muerte suele ser una infeccin oportunista o un sarcoma de Kaposi
(cncer de piel y vasos sanguneos).

Tratamiento

Hay dos campos bsicos en la investigacin sobre el SIDA: algunos cientficos

buscan vacunas para prevenir la enfermedad mientras que otros investigan
frmacos para su tratamiento.

126
AZT (Azidotimidina): No cura el SIDA pero retarda la multiplicacin viral por
lo que prolonga la vida del paciente. El AZT es un anlogo de la timidina que
"engaa" a la transcriptasa inversa pero no a la DNA polimerasa parando la
adicin de nuevos nucletidos en la sntesis de DNA viral. Como efectos
secundarios (30-40% de los pacientes) est la anemia ya que daa a la mdula
sea.

DDI (Dideoxyinosidina): Acta de forma similar al AZT y aunque es menos

efectivo es menos txico.

CD4: Es la glicoprotena que acta como receptor de los linfocitos T4 para el

HIV obtenida por ingeniera gentica. En la fase experimental (en laboratorio)
funcion bien.

Inhibidores de la proteasa: Actan inhibiendo a la proteasa que participa en

la hidrlisis de las protenas de la cpsida bloqueando por tanto la maduracin.

Cocktail: Es una mezcla de AZT (replicacin) e inhibidores de la proteasa

(maduracin).

15.6. Agentes infecciosos no convencionales

15.6.1. Viroides

Slamente se han encontrado en plantas donde pueden ocasionar importantes

daos en los cultivos de patata y limn. Los viroides son trozos pequeos (300-
400 nucleotidos) de RNAss que no poseen cpsida. Este RNA no parece
codificar para ninguna protena (no pueden actuar como mRNA) por lo que su
replicacin depende totalmente de la maquinaria metablica de la clula
huesped. No se sabe exactamente como causan enfermedad. Se cree que los
viroides podran proceder evolutivamente de los intrones.

15.6.2. Priones

Parecen ser protenas aunque se multiplican en la clula hospedadora. Todas

las enfermedades conocidas causadas por priones son neurolgicas. Dentro de
estas se incluyen el kuru, Creutzfeldt-Jakob y scrapie. El scrapie es una
enfermedad de las ovejas (to scrape = rascarse). El animal infectado se rasca
contra las cercas y paredes hasta dejar zonas del cuerpo en carne viva, va
perdiendo el control motor y acaba por morir.

127
Ovejas con scrapie Vacas locas Encefalopata espongiforme en humanos

15.7. Virus oncogenicos: mecanismos moleculares de oncogenesis viral

Cncer es el nombre colectivo que se da a un determinado nmero de

enfermedades que se caracterizan por un crecimiento incontrolado de las
clulas. Cuando las clulas se multiplican de una manera incontrolada el
conjunto de tejido que se desarrolla como consecuencia de tal multiplicacin se
denomina tumor. No todos los tumores son cancerosos (tumor maligno). A un
tumor no canceroso se le denomina tumor benigno. Los tumores se denominan
generalmente con el sufijo -oma despus del nombre del tejido en el cual se
desarrollan. Existen tantos tipos de cncer como tipos de clulas existen en el
cuerpo humano (ms de 100) pudindose agrupar la mayora en las siguientes
categoras:

1.- Leucemias: produccin anormal de leucocitos por la mdula sea.

2.- Linfomas: produccin anormal de linfocitos por el sistema linftico.

3.- Sarcomas: tumores slidos que crecen a partir de tejido conectivo,

cartlagos, huesos, msculos y tejido adiposo.

4.- Carcinomas: tumores slidos que crecen a partir del tejido epitelial, siendo
la forma ms comn de cncer.

Las clulas cancergenas no son sensibles a las seales que inhiben la

reproduccin excesiva de las clulas normales, creciendo de una forma
incontrolada. En la mayora de las personas que mueren de cncer la causa de
muerte no es el tumor primario que desarrollaron sino la diseminacin del
cncer a otras partes del cuerpo. El cncer tiene tres caractersticas
principales:

1.- Hiperplasia: proliferacin incontrolada de las clulas

2.- Anaplasia: anormalidades estructurales de las clulas que conllevan a una

reduccin o prdida de sus funciones.

128
3.- Metstasis: habilidad de las clulas malignas para abandonar el tumor y
establecer un nuevo tumor en otro lugar dentro del huesped.

La induccin del cncer se denomina oncognesis. Prcticamente cualquier

cosa que pueda alterar el material gentico de una clula es un agente
potencialmente cancergeno. Actualmente se sabe que algunos tipos de cncer
estn producidos por virus que se denominan virus oncognicos. Tanto virus
con DNA como virus con RNA son capaces de inducir tumores en animales.
Cuando esto ocurre se dice que las clulas afectadas se han transformado, de
manera que han adquirido propiedades distintas a las de las clulas no
infectadas o a las de las clulas infectadas que no forman tumores. Una
caracterstica que distingue a todos los virus oncognicos es que su material
gentico se integra en el DNA de la clula hospedadora y se replica con l sin
llegar a lisarse la clula huesped. Las clulas transformadas pierden una
propiedad denominada inhibicin por contacto. Las clulas normales en cultivo
presentan movimiento ameboide y se dividen repetidamente hasta que entran
en contacto unas con otras. En este momento se detiene tanto el movimiento
como la divisin celular formndose una monocapa en el cultivo celular. Las
clulas transformadas no exhiben esta inhibicin por contacto en cultivo celular
sino que forman masas celulares de tipo tumoral. Otras propiedades de las
clulas transformadas son que producen tumores cuando se inyectan en
animales susceptibles, tambin tienden a ser ms redondeadas que las clulas
normales y a presentar ciertas anormalidades cromosmicas (nmero inusual,
cromosomas fragmentados).

Dentro de los virus RNA slo los miembros de la familia Retroviridae pueden
causar cncer en animales: Virus de la leucemia humana de clulas T (HTLV-
1) (leucemias y linfomas en humanos).

En contraste, dentro de los virus DNA pueden causar cncer los miembros de 3
familias:

1.- Papovaviridae: Virus del papiloma (verrugas benignas y cncer de tero)

2.- Herpesviridae: Virus de Epstein-Barr (EBV) (Linfoma de Burkitt, tiene

afinidad por los linfocitos transformndolos)

3.- Adenoviridae:

129
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Cual de las siguientes etapas del ciclo ltico de un fago se entiende

desde el comienzo (inoculacin del cultivo bacteriano con un virus)
hasta que se pueden detectar los primeros viriones en el cultivo?
a.- Fase de eclipse b.- Fase de latencia

c.- Fase de acumulacin intracelular d.- Eclosin

2. La inyeccin de material gentico vrico (en fagos T pares) en la

bacteria hospedadora es un proceso que: 1=Necesita aporte de energia
por parte del hospedador; 2= A veces si la necesita dependiendo del
fago implicado; 4= No necesita aporte de energia por por parte del
hospedador; 8= El proceso consume energia que es aportada por el
fago.
a)3 b)6 c)12 d)14 e)15

3. La especificidad de los bacterifagos es en general:

a) Muy alta b) Son poco
especficos

c) Tienen una especificidad intermedia

4. Se confirma el hecho de la disociacin del DNA y la cpsida de los

bacterifagos por:
a) La existencia del perodo de eclipse
b) La existencia del perodo de latencia

c) La existencia del perodo de acumulacin intracelular

d) La existencia del perodo de eclosin

5. La transcripcin prioritaria del DNA del fago se consigue: 1= Sntesis

de nuevos factores sigma; 2= Modificacin y cambio de afinidad de
la RNA polimerasa por los nuevos factores sigma; 4= Acoplando la
transcripcin a la duplicacin del DNA; 8= Sntesis de nuevas RNA
polimerasas
a)3 b)6 c)7 d)11 e)15

6. La capsida de los virus est formada por capsmeros. Qu ventajas

representa esta estructura? 1. Economa en la informacin gentica
necesaria para su sntesis 2. Facilita la liberacin de DNA 4. Se
eliminan (durante su ensamblaje) las defectuosas 8. Se incrementa la
proteccin del Acido nucleico
a)5 b)7 c)10 d)11 e)15

7. Cules de las siguientes son caractersticas distintivas de los virus? 1.

Poseen un slo tipo de cido nucleico (DNA o RNA) 2. Poseen slo

130
 parte de la maquinaria metablica y por ello son parsitos
intracelulares 4. No poseen maquinaria metablica propia 8. Pueden
poseer ADN y ARN pero en general slo poseen uno de los dos
a)3 b)5 c)7 d)13 e)15

8. En una infeccion viral en que orden aparecen la produccionde las

siguientes defensas?:
a) Interferon, IgG, IgM b) Interferon, IgM, IgG

c) IgM, IgG, Interferon d) IgM, Interferon, IgG

e) IgG, IgM, Interferon B 38

9. Son utiles en el tratamiento de algunas infecciones viricas: 1 -

amantadina 2 - desoxiuridinas 4 - arabinosidos (Ava A, Ava C) 8 -
tiosemicarbazonas 16 - anticolinergicos 32 - adrenergicos
a) 6 b) 7 c) 15 d) 27 e) 31

10. La invasin de la infeccin viral puede realizarse: 1. Por contiguidad

2. Por va sangunea 4. Por va nerviosa 8. Por va linftica
a)6 b)7 c)13 d)14 e) 15

11. En la virologa diagnstica por mtodos serolgicos detectando un

aumento del ttulo de anticuerpos en un intervalo de 2-4 semanas se
utilizan principalmente 3 tipos de reacciones; 1. Precipitacin 2.
Aglutinacin 3. Neutralizacin 4. Fijacin del complemento 5.
Inhibicin de la hemaglutinacin
a) 1-2-3 b) 2-3-4 c)3-4-5 d) 4-5-1 e) 4-
5-2

12. Los arabinsidos A y C se usan en el tratamiento de algunas

infecciones virales porque inhiben la siguiente fase de la infeccin
viral:
a) Adsorcin
b) Penetracin y liberacin cido nucleico
c) Replicacin cido nucleico
d) Transcripcin
e) Traduccin
13. Las desoxiuridinas se usan en el tratamiento de algunas infecciones
virales porque inhiben la siguiente fase de la infeccin viral:
a) Adsorcin
b) Penetracin y liberacin cido nucleico
c) Replicacin cido nucleico
d) Transcripcin
e) Traduccin
14. En el proceso de replicacin de los virus y en la fase de infeccin
existen 3 etapas: 1. Adsorcin 2. Penetracin 3. Liberacin de cido
nucleico. En qu orden se realizan?

131
 a) 1-2-3 b) 1-3-2 c) d-3-1 d) 2-1-3

15. En la replicacion de virus animales se dan diversas fases: 1 - adsorcion

2 - penetracion 3 - sintesis de virus 4 - liberacion del acido nucleico 5
- maduracion (ensamblaje y union) 6 - liberacion (lisis o gemacion)
Cual de los siguientes es la secuencia correcta?:
a) 1-2-3-4-5-6 b) 1-2-4-3-5-6 c) 1-2-4-3-6-
5

d) 2-1-3-4-5-6 e) 2-1-4-3-6-5

16. Los acidos nucleicos en los virus:

a) un virus puede llevar tanto ADN como ARN
b) son monocatenarios
c) estan divididos en varios segmentos (o moleculas)
d) tienen un peso molecular proporcional al tama|o del virus
e) soportan la informacion y la infecciosidad
17. El diagnostico de las virosis puede realizarse: 1- por aislamiento en un
laboratorio especializado 2- por metodos serologicos en un laboratorio
no especializado 4- por metodos serologicos demostrando el aumento
del titulo entre dos muestras del suero del enfermo
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

18. A que familia pertenece el virus de la verruga simple y el del

condiloma acuminado?:
a) poxvirus b) herpes virus c)
adenovirus
d) papovavirus e) reovirus
19. Que virus de los siguientes tiene estructura compleja o simetria no
bien definida?:
a) Rabdovirus b) Adenovirus c) Poxvirus
d) Poliovirus e) Ortomyxovirus
20. Son familias del virus ADN bicatenario con envoltura: 1. Poxviridae
2) Adenoviridae 4. Papovaviridae 8. Herpesviridae
a)6 b)9 c)12 d)14 e) 15

21. Son familias de virus ADN desnudos: 1. Poxviridae b) Adenoviridae

4. Papovaviridae 8. Herpesviridae
a)6 b)9 c)12 d)14 e) 15

22. El antgeno Australia es el antgeno de mayor importancia en el

diagnstico de la hepatitis B. Qu otro nombre recibe?
a) HBcAg b)HBeAg c)HBsAg
d) Polimerasa e) Hemaglutinina
23. Existen varias formas de infeccin con el virus de la hepatitis B: 1.
Hepatitis aguda 2. Hepatitis fulminante 4. Hepatitis crnica 8.
Infeccin anictrica
a)11 b)12 c)13 d)14 e)15

132
24. Es un ribovirus con simetra icosadrica y cubierto con membrana:
a) Picornavirus b) Reovirus c) Togavirus
d) Paramyhxovirus e) Rabdovirus
25. Que virus puede dar un cuadro inicial de fiebre, cefalalgia, angina,
vomitos, dolores neuralgicos seguidos a los 2 o 3 dias de otro cuadro
con dolor muscular, meningismo, paralisis flacidas asimetrias, que
pueden conducir a una atrofia muscular y a una deformidad osea:
a) rinovirus b) arbovirus c) rabdovirus
d) virus de la encefalitis venezolana e) virus de la poliomielitis

26. Que virus puede dar un cuadro clinico de un rash maculo-papular y

vesiculas unilateral y limitado a la zona de inervacion de un nervio?:
a) virus de la viruela b) virus de la varicela y herpes-soster
c) virus del herpes labial d) adenovirus
e) picornavirus
27. Las infecciones de los virus, herpes, poxvirus y adenovirus, en las que
la liberacion del virus se efectua por citolisis de las celulas son
infecciones a nivel celular:
a) productivas citoliticas b) persistentes c)
productivas estables
d) cultivos portadores e) no productivas, integradas o
latentes
28. En la tecnica inmunoenzimatica (ELISA) para el diagnostico de la
hepatitis virica B se absorbe el anticuerpo contra el antigeno Australia
(antigeno de superficie del virus) en una superficie. En diversas
muestras se a|ade solamente el antigeno Australia marcado (con la
enzima) y en otras el antigeno marcado junto con el suero del
paciente. Si existe una inhibicion competitiva y las muestras con suero
del enfermo tienen menos actividad enzimatica (por adicion del
sustrato y reaccion colorimetrica) que las muestras solamente con el
antigeno marcado esto indica que en el suero del paciente:
a) existe antigeno Australia
b) no existe antigeno Australia
c) existen anticuerpos contra el antigeno Australia
d) no existen anticuerpos contra el antigeno Australia
e) no se puede afirmar ninguna de las anteriores
29. La fiebre amarilla esta producida por:
a)picornavirus b)arbovirus c)arenavirus
d)orthomyxovirus e)retrovirus

30. Un cuadro con cefalgias, faringitis, nauseas, mialgias y una curva

febril monofasica del dia tercero al septimo puede corresponder a una
infeccion por poliovirus. Pero a que forma puede corresponder este
cuadro:
a)forma paralitica b) forma meningitica
c)forma abortiva d)forma inaparente

133
31. Son secuelas paralticas de la poliomelitis medular; 1. Escoliosis y
contracturas 2. Atrofia de las piernas y equinovaro 4. Opisttomo y
trismo
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

32. En la patogenia de la poliomelitis: 1. El virus se ingiere por la boca 2.

Se produce infeccin primaria de la mucosa orofaringea 4. Se
multiplica en intestino (placas de Peyer) 8. Pasa a sangre y de aqu a
otros tejidos extraneurales 16. Desde orofaringe y otros tejidos alcanza
mdula espinal y bulbo raquideo
a)23 b)27 c)29 d)30 e)31

33. En la fiebre amarilla: 1. La transmisin se efecta por medio del

mosquito Aedes aegypti (hembra) 2. Existe fiebre bifsica 4.
Aparecen ictericia y hemorragias 8. Puede terminar fatalmente en
cualquier perodo
a)7 b)9 c)12 d)14 e)15

34. El virus de la hepatitis A: 1. Es un virus ADN con simetra icosadrica

2. Es un enterovirus 4. Es un picornavirus 8. Es un virus RNA con
simetra icosadrica.
a)7 b)10 c)11 d)14 e)15

35. Existen varias formas clnicas de Poliomilitis; 1. Formas inaparentes

(90-95%) 2. Formas abortivas (4-8%) 4. Formas paralticas (0.1%) 8.
Formas meningticas (1%) 16. Formas crnicas (3%)
a)7 b)13 c)15 d)29 e)31

36. Los virus que se transmiten al hombre por vectores hematofagos y que
se multiplican tanto en las celulas humanas como en las celulas de los
vectores invertebrados se agrupan bajo la denominacion de:
a) arbovirus b) reovirus c) picornavirus
d) rabdovirus e) picornavirus

37. Cuales son arbovirus? Es decir, virus transmitidos por vectores

artropodos hematfagos: 1- Togavirus 2- Bunyavirus 4- Orbivirus
a) 3 b) 4 c) 5 d) 6 e) 7

38. Son ribovirus con simetria helicoidal: 1 - orthomyxocirus 2 -

paramyxovirus 4 - coronavirus 8 - bunyavirus 16 - orbivirus 32 -
adenovirus 64 - retrovirus
a) 38 b) 54 c) 71 d) 79 e)
103

39. Los arbovirus mediante su accion patogena dan diversos cuadros

patologicos que reciben diversas denominaciones. Fundamentalmente
son de tres tipos: 1 - formas encefaliticas 2 - formas paraliticas 4 -
formas meningiticas 8 - formas hemorragicas 16 - formas febriles 32 -
formas exantematicas

134
 a) 22 b) 25 c) 29 d) 31 e) 63

40. Un cuadro clinico bifasico: En la primera fase de viremia, fiebre,

cefalea, raquialgias. En la segunda fase o toxica con hemorragias
puntuales (paladar, epistaxis, hematemesis) y una intensa ictericia y
cuadro toxico. Que virus o patogenia viral puede producirla?:
a) virus de la hepatitis A b) virus de la hepatitis B
c) arenavirus d) virus de la fiebre
amarilla
e) virus del dengue
41. El perodo de incubacion: 1- Es muy prolongado (de 200 dias) en el
sarampion 2- Es muy extenso (de 100 dias) en la gripe 4- Es muy
corto (1 dia) en la rabia 8- Es muy extenso (de 100 dias) en la hepatitis
B
a) 8 b) 9 c) 10 d) 11 e) 15

135
Capitulo 16. TOXIINFECCIONES ALIMENTARIAS Y OTRAS
AFECCIONES TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS

16.1. Introduccin

El termino de toxiinfeccin alimentaria se emplea corrientemente para referirse

a un amplio grupo de enfermedades o condiciones clnicas que afectan al tracto
gastrointestinal.

Las enfermedades o lesiones producidas por el consumo de alimentos

contaminados, es una de las principales causas de perdida econmica,
enfermedad y muerte en le mundo.

Se estima segn estadsticas recientes, que solo en los Estados Unidos de

Norteamrica aproximadamente 33 millones de personas por ao sufrirn
enfermedades o lesiones como consecuencia del consumo de alimentos
contaminados por microorganismos o toxinas, de estos, se calcula por lo menos
9,000 casos sern mortales.

Las perdidas econmicas ocasionadas por estos casos asciende a cifras

alarmantes tales como 6.700 millones de dlares al ao. Los costos
ocasionados como consecuencias de incidentes de intoxicaciones alimentaras
alcanzan cifras muy elevadas como por ejemplo: un brote de botulismo por
consumo de salmn enlatado en Blgica (1982) produjo una perdida de 140
millones de dlares. Otro brote producido por la contaminacin de queso por
Listeria en Estados Unidos (1985) ocasiono perdidas por 700 millones de
dlares.

En el Per, la epidemia del clera en 1991 que incluso se extendi hasta pases
de Centroamrica y Mxico produjo mas de 340,000 casos y 3,600 muertes,
segn un estudio de la Oficina Panamericana de Salud (OPS, 1991) y la FSIS
de los EE. UU. Esto significo una perdida para nuestro pas en el mercado
externo de 175 millones de dlares y en el mercado interno las perdidas
ascendieron a aproximadamente 32 millones de dlares en el sector pesquero y
cerca de 16 millones de dlares en el comercio ambulatorio.

16.2. Generalidades sobre la etiologa y epidemiologa de las

enfermedades transmitidas por alimentos
a) Infecciones.- Es la penetracin de microorganismos altamente
especializados en los tejidos donde se multiplican y provocan reacciones de
defensa que se reconocen como manifestaciones patolgicas en el
organismo afectado. Ejm. Salmonella, E. coli, Shigella.

136
b) Intoxicaciones.- Son las manifestaciones patolgicas en el organismo
infectado producidas por una toxina formada por los microorganismos, bien
en el alimento o bien solo en el intestino del hombre.
c) Infestacin.- Describe los cuadros patolgicos producidos por la invasin
del organismo por parsitos.
d) Transmisin.- Hay que diferenciar entre infecciones e intoxicaciones y
entre infecciones con DMI (dosis mnima infectiva) o DI50 (dosis infectiva
que produce la enfermedad en el 50 % de la poblacin) bajas o altas. En
muchos casos no est totalmente claro si el proceso es intoxicativo o
infectivo.

La DMI vara entre las personas dependiendo de su estado general de salud

y de la forma como se ingieren las bacterias (en ciertas condiciones las
DMI pueden ser muy baja por lo que es muy necesaria la higiene).

e) Morbilidad.- Solo se declara un 10 % de las toxiinfecciones

aproximadamente por lo que la incidencia real de estas enfermedades no
est clara.

16.3. Los microorganismos como agentes patgenos transmitidos por

alimentos

Por otra parte, ciertos microorganismos patgenos son potencialmente

transmisibles a travs de los alimentos. En estos casos, las patologas que se
producen suelen ser de carcter gastrointestinal, aunque pueden dar lugar a
cuadros ms extendidos en el organismo e, incluso, a septicemias.

Las patologas asociadas a transmisin alimentaria pueden ser de dos tipos:

infecciones alimentarias producidas por la ingestin de microorganismos o
intoxicaciones alimentarias producidas como consecuencia de la ingestin de y
toxinas bacterianas producidas por microorganismos presentes en los
alimentos. En ciertos casos, pueden producirse alergias alimentarias causadas
por la presencia de microorganismos.

En cualquier caso, para que se produzca una toxiinfeccin es necesario que el

microorganismo haya producido:

a) Suficiente nmero para colonizar el intestino.

b) Suficiente nmero para intoxicar el intestino.
c) Cantidades de toxina significativas.

Los tipos de microorganismos patgenos con importancia alimentaria

comprenden bacterias, protozoos y virus, en el caso de las infecciones
alimentarias, y bacterias y hongos (mohos) en el caso de las intoxicaciones.

137
Para que una bacteria pueda causar una infeccin, adems de las condiciones
anteriores es necesario que el microorganismo presente un rango de
temperaturas de crecimiento compatible con la temperatura corporal de los
organismos superiores (40C). Esto es la causa de que patgenos vegetales no
sean patgenos animales y que la mayora de psicrfilos y psicrtrofos no sean
de gran relevancia en patologa.

Por ltimo, debido a la importancia en salud pblica de las toxiinfecciones

alimentarias, la labor del microbilogo de alimentos se dirige, en muchos
casos, al control destinado a evitar el consumo de productos elaborados en
condiciones deficientes, mal procesados y que, por tanto, sean potencialmente
peligrosos. Para ello, ha tenerse en cuenta, a la hora de realizar un anlisis
microbiolgico de alimentos:

a) Las fuentes de contaminacin del alimento.

b) Las rutas de infeccin del patgeno.
c) La resistencia de los patgenos a condiciones adversas.
d) Las necesidades de crecimiento de los patgenos.
e) Minimizar la contaminacin y el crecimiento de los microorganismos.
f) Tcnicas de deteccin y aislamiento.
g) Mtodo de muestreo proporcional al riesgo.

Todo lo anterior obliga a la regulacin legal de las caractersticas

microbiolgicas de cada alimento, lo que comprende la definicin de cada
alimento o producto alimentario y las regulaciones sobre la tolerancia del
nmero de microorganismos permisibles. (los llamados valores de referencia).

16.4. Origen de los microorganismos patogenos presentes en los alimentos:

Los alimentos presentan siempre microorganismos en su superficie o en su

interior. Estos microorganismos pueden ser de origen:

Endgenos .- ya presentes en el interior de las estructuras del alimento donde

pueden provocar zoonosis, enfermedades animales no transmisibles al hombre
y enfermedades vegetales no transmisibles al hombre. Los agentes endgenos
son eliminados en mataderos (animales enfermos) o durante el procesado
(pasteurizacin).

Exgenos.- se incorporan al alimento durante su manipulacin y procesado,

atendiendo su relacin con el consumidor, estas pueden ser agentes patgenos
o alterantes (saprfitos).

En cualquier caso, los alimentos son una va importante de transmisin de

microorganismos que pueden causar infecciones e intoxicaciones que, en
general tienen un tiempo de incubacin corto (2-10 h.) y suelen cursar con

138
sndromes gastrointestinales. Puesto que algunas de estas patologas tienen una
DMI (dosis mnima infectiva) muy baja es muy necesaria la higiene de los
alimentos y de los procesos de elaboracin.

A. Infecciones alimentarias transmitidas por bacterias:

1. Salmonella SSP.

La Salmonella ssp es un bacilo gram negativo, de gran ocurrencia en

animales especialmente en aves y porcinos. La salmonella typhi
produce la fiebre tifoidea en humanos. Otras bacterias paratifoideas
ocasionan la salmonelosis, enfermedad con sntomas menos agudos.

El origen de las salmonelas puede ser endgeno (animales portadores) o

exgeno; las prcticas ganaderas favorecen la infeccin a travs de los
piensos que pueden generar portadores asintomticos y del manejo de
los animales en el matadero (aves, cerdos, terneros). En cualquier caso,
los nmeros iniciales suele ser pequeos y la contaminacin aparece si
el alimento no es tratado correctamente desde el punto de vista trmico.
Las medidas profilcticas se dirigen al control de animales portadores,
procesamiento de alimentos (pasteurizacin) y reduccin de las
posibilidades de contaminacin exgena.

Esta bacteria esta asociada con los siguientes alimentos: Carnes cruda,
carnes de ave, huevos, leche y productos derivados, pescado,
camarones, mayonesa, mantequilla de man, cocoa y chocolate. Varias
especies de salmonella han sido aisladas a partir de las cscaras del
huevo, sin embargo, la S. Enteritidis es capaz de ingresar al interior del
huevo, ubicndose en la yema.

Las poblaciones susceptibles que desarrollan los sntomas mas severos

son los nios, ancianos y enfermos.

2. Shigelosis o disentera bacilar

La shigella produce Shigelosis o disentera bacilar. Las shigelas son de

origen humano y los animales no son reservarios de ellas, por lo que las
contaminaciones se producen por va de la manipulacin humana del
alimento. La DMI vara mucho dependiendo de si se ingiere la bacteria
con alimentos slidos (alta) o lquidos como leche o agua (baja). Las
medidas de prevencin se basan en reducir e higienizar la manipulacin
humana y evitar el desarrollo del microorganismo con una correcta
refrigeracin. Es invasiva.

3. Escherichia coli

Existen cuatro clases reconocidas de E.coli:

139
 Enterovirulentas causantes de gastroenteritis en humanos, llamadas
tambin enterotoxignicos no invasivos productores de una
enterotoxina termolbil de alto peso molecular, las cuales comprometen
diarreas principalmente en infantes.

El agua empleada en el proceso de los alimentos, puede contaminar casi

toda clase de ellos, rara vez han sido aislados en productos lcteos y
quesos semiblandos

Enteropatognicas. Las cuales producen un mecanismo de excrecin

de enterotoxinas y pueden afectar a humanos, bovinos y cerdos.
Generalmente es capaz de contaminar casi todos los alimentos con una
ligera preferencia por la carne cruda y el pollo.

Enterohemorrgicas. Son las que producen una potente toxina que

causan un dao severo en la pared intestinal. Estn asociados a
alimentos como hambuguesas semicrudas, leche y otras carnes

Enteroinvasivas. Estas daan las paredes intestinales, que penetran a la

mucosa intestinal y las colonizan, son responsables de la llamada
disentera bacilar. Prcticamente puede contaminar cualquier alimento

Las medidas profilcticas se dirigen a la eliminacin de animales

enfermos, control de la contaminacin por manipulacin humana y
refrigeracin adecuada para evitar el crecimiento de las bacterias
presentes.

4. Enteritis por yersinia enterocolitica

Yersimia enterocolitca en una bacteria psicrotrofa que probablemente

causa zoonosis y puede transmitirse a travs de alimentos animales
infectados. Produce una enfermedad con posibles complicaciones
reumatoides. Las medidas profilcticas son similares a las de
Salmonella aunque en este caso no sirve la conservacin a baja
temperaturas por el carcter psicrotrfo.

5. Diarreas por vibrio parahaemolyticus y v. Cholerae

V. parahaemolyticus es un bacilo Gram-negativo presente en las aguas

marinas, halotolerante. Produce al ingerirlo una gastroenteritis febril en
la que las heces aparecen teidas de sangre. Se ingiere con productos
marinos crudos o no bien tratados. Otras especies prximas aparecen en
salmueras y salazones.

140
 V. Cholerae es un Bacilo gram negativo responsable de la infeccin
conocida como clera, enfermedad diarreica aguda que en muchos
casos puede ser mortal. Es generalmente asociado a las condiciones
sanitarias deficientes y fuentes de agua contaminada. La infeccin se
produce a travs del consumo de peces y mariscos procedentes de aguas
contaminadas y cuyo procesamiento es deficiente.

La profilaxis se centra en su eliminacin por coccin, prevencin de la

recontaminacin y prevencin de su multiplicacin mediante
refrigeracin o congelacin.

6. Enteritis por Campylobacter.

Campylobacter jejuni es un bacilo gram negativo curvado

microaerofilo, reconocido como un importante enteropatgeno. A partir
de 1972 se desarrollaron mtodos para su reconocimiento a partir de la
heces y es desde entonces que se le ha asociado con un gran numero de
casos de diarreas agudas.

Esta presente muchas veces en las fuentes de agua no clorinados tales

como acequias, riachuelos y estanques. La enfermedad producida por C.
jejuni es conocida como Campilobacteriosis. Se requiere una ingestin
de entre 400 a 500 bacterias para producir la enfermedad en un
individuo adulto.

Bacteria presente en el intestino de ganado vacuno, perros, aves y

ovejas. Causa una infeccin entrica con vmitos, dolor agudo y diarrea
explosiva. Se puede transmitir a travs de los mismo alimentos que
Salmonella o Yersimia (carne cruda de cerdo o ave, leche cruda).

Produce una infeccin invasiva del epitelio intestinal.

La profilaxis se centra en eliminar la bacteria del alimento, prevenir la

recontaminacin y conservar adecuadamente.

7. Enteritis producidas por bacillaceae

Producidas por Clostridum perfringens o por Bacillus cereus. Se

requieren altos nmeros de bacterias (105 ufc/g) y pueden producirse en
alimentos tratados trmicamente e, incluso, protegidos frente a la
recontaminacin.

El C. Perfringes es un bacilo grande, inmvil, gram positivo,

esporulado, que produce distintos tipos de toxinas A, B, C, D, y E, la
ms poderosa es del tipo C que causa una enfermedad conocida como

141
 enteritis necrtica, se caracterizan por dolores abdominales y diarreas
profundas; generalmente no hay vmitos, ni nauseas ni fiebre. Se han
aislado de una gran variedad de alimentos, predominando las carnes
crudas de mamferos y aves.

Bacillus cereus es un bacilo gram positivo formador de esporas,

produce dos tipo de toxinas, la primera una protena de alto peso
molecular que causa diarreas y otra debajo peso molecular que causa
vmitos. Esta asociacin a una gran variedad de alimentos, los que
incluyen carne, leche, vegetales y pescado para la intoxicacin diarreica
y a los productos y derivados del arroz, papa y alimentos que contengan
almidones, pastas y quesos estn asociados con la intoxicacin emtica.

Las prevencin pasa por enfriar rpidamente el alimento cocinado que

no vaya a ser consumido para evitar el desarrollo de las formas
vegetativas de la bacteria.

B. Intoxicaciones alimentarias agudas

1. Botulismo: Intoxicacin por Clostridium botulinum

C. botulinum produce una intoxicacin mediante bajas dosis de una

neurotoxina muy potente que produce al esporular. Actualmente se
conocen siete serotipos, de estos, los tipos A, B, E, y F causan el
botulismo en humanos. Es una bacteria anaerobia que puede crecer en
conservas de alimentos de pH relativamente alto (>4.5) que no se han
tratado trmicamente de forma adecuada. Se ha detectado un tipo de
botulismo infantil producido por la ingestin de esporas que germinan y
vuelven a esporular en el intestino produciendo de nuevo la toxina.

La toxina ha sido hallada en una considerable variedad de alimentos

enlatados tales como maz enlatado,, pimienta ,arvejas , sopas, carnes,
esprragos, hongos, aceitunas, espinaca, atn, pollo, pate y fiambres,
salsas, langosta, jamn, y pescado ahumado y salado.

Profilaxis: tratamiento trmico adecuado de las conservas usando

tratamiento 12 D u otros agentes coadyuvantes (sal, nitratos) para
alimentos con pH > 4.5. La toxina botulnica es termolbil y se destruye
si se calienta la conserva.

2. Intoxicacin Estafiloccica.

Coco gram positivo capaz de producir una protena toxica termoestable

que produce intoxicacin en humanos conocida como
estafiloenterotoxicosis. Un microgramo de la toxina puede producir la
intoxicacin y esta cantidad esta asociada con una poblacin de S.
Aureus a 105 por gramo.

142
 Producida por la ingestin de alimentos en los que ha crecido una cepa
patgena de Staphylococus aureus productora de enterotoxina
termorresistente. La principal reserva de S. aureus es la piel, y cavidad
buconasal de operarios que pueden contaminar los alimentos cuyo
contenido en agua es bajo (productos de pastelera, jamn curado...)
porque a mayor aw otra flora sobrecrece a S. aureus. La enfermedad es
muy rpida con vmitos y dolor aguado, suele durar menos de 30 horas.

Las medidas profilcticas van encaminadas a disminuir la

contaminacin y el desarrollo de las bacterias mediante tratamientos
trmicos adecuados; la destruccin de las toxinas es muy difcil dada su
termorresistencia.

3. Intoxicacin por bacillus cereus.

B. cereus como C. perfingeus, una bacteria oblicua y su ingestin en

bajas cantidades es inocua. Produce dos tipos de sndromes:
intoxicacin diarrica (asociada a una toxina termosensible similar a la
de C. perfingens que se produce durante el crecimiento exponencial y
que est asociada a alimentos como sopas de ave, carne, salsas,
pudding) y una forma emtica (asociada a una toxina termorresisitente
similar a la de S. aureus y asociada a arroz, y otros alimentos ricos en
almidn cocinados).

Profilaxis: dada la termorresistencia de las esporas hay que procurar

enfriar muy rpidamente los alimentos cocinados ricos en almidn, y
conservarlos a baja temperatura, para evitar el crecimiento de las
formas vegetativas.

4. Sndromes causados por bacterias productoras de aminas

vasopresoras

Muchas bacterias son capaces de descarboxilar activamente

aminocidos produciendo aminas vasopresoras causantes de manchas
rojas en la piel, mareos y, a veces, dificultades respiratorias. La relacin
dosis - efecto varia mucho de unos individuos a otros.

5. Papel de otras bacterias toxignicas

Quiz algunos estreptococos del grupo D pueden producir algunas

toxinas cuando estn en grandes concentraciones (casos exticos y poco
relevantes para nosotros).

C. Intoxicaciones alimentarias crnicas

Muchos mohos son productores de substancias proteicas de bajo peso

molecular y accin txica conocidas como micotoxinas. Elevadas
ingestiones de micotoxinas pueden producir cuadros agudos fcilmente
detectables; pero estos casos son raros, es ms frecuente la intoxicacin

143
 por bajas dosis de micotoxinas que pueden producir intoxicaciones
crnicas con efectos oncognicos o inhabilitantes en diferentes rganos
(hgado, rin, cerebro).

Las micotoxinas pueden ingerirse por contaminacin con mohos de

alimentos de baja actividad de agua (queso, mermelada, alimentos
curados, cereales) o por piensos, en el caso de animales con
intoxicaciones crnicas pueden transmitir las toxinas a travs de sus
productos (huevos, leche).

Debido al bajo peso molecular las micotoxinas suelen ser muy

termorresistentes y pueden difundir grandes distancias en los alimentos
por lo que tratamientos trmicos suelen ser inefectivos y la simple
eliminacin del moho no evita la micotoxina.

Existe una gran preocupacin por la actividad toxignica de los mohos

considerados beneficiosos presentes en algunos alimentos (queso,
embutidos).

Las profilaxis se centran en evitar la contaminacin por hongos de los

alimentos y piensos (quesos, pan, harinas, cereales, frutas y
mermeladas) no solo por razones estticas sino tambin sanitarias.

D. Infecciones cuya via de transmision principal no son los alimentos:

1. Bases epidemiolgicas.

Hay enfermedades transmitidas por alimentos que no presentan el

cuadro de gastroenteritis tpico. En este caso es necesaria la ingestin de
un nmero muy reducido de microorganismos (bacteria, virus o
gusano).

En el caso de bacterias, cuando estas se ingieren en agua o entre

comidas pueden provocar los sndromes con nmeros mucho menores
debido a que pasan rpidamente por el estmago y el cido gstrico no
puede producir en ellas efecto.

2. Enfermedadades del aparato respiratorio transmitidas por los

alimentos.

Tanto la difteria, producida por Corynebacterium diphteriae, como la

faringitis, producida por Staphylococus pyogenes, pueden ser
transmitidas por los alimentos. Ambos microorganismos son
termosensibles y un tratamiento trmico adecuado y medidas higinicas
para evitar la posterior contaminacin del alimento son suficientes para
evitarlo

3. Otras enfermedades transmitidas por los alimentos.

144
 Histricamente la leche de vacas mastticas ha sido una va de contagio
de tuberculosis producida por Mycobacterium bovis, sin embargo las
prcticas de pasteurizacin habituales han eliminado esta va de
contagio.

Ms relevantes son las bacterias del gnero Brucella. B. melitensis

provoca la fiebre de malta y se transmite por la leche de cabra u oveja,
B. abortus se transmite por la leche de vaca. Ambos tipos de bacterias
pueden destruirse con los tratamientos trmicos habituales de la leche o
de la nata o crema. En este sentido es especialmente relevante la
utilizacin de leche pasteurizada en la produccin de quesos de cabra u
oveja para evitar la transmisin de la brucelosis.

4. Enfermedades entricas bacterianas transmitidas principalmente

por el agua:

Como se ha comentado, algunos microorganismos tienen DMI muy

bajas cuando se ingieren con agua y el estmago est vaco. Salmonella
y Shigella pueden producir toxiinfecciones de esta forma. Asimismo
Vibrio cholerae se transmite a travs del agua. Por consiguiente es
necesario hacer tratamientos de higienizacin del agua para llegar a
valores de nmero de microorganismos muy bajos, y utilizar aguas de
alta calidad bacteriolgica para cualquier proceso relacionado con los
alimentos.

E. Virosis transmitidas por los alimentos.

El nmero de unidades infectivas que puede producir la enfermedad es

muy bajo. Normalmente no suelen aislarse en los laboratorios de
microbiologa de alimentos porque su manipulacin es tcnicamente
compleja.

1. Hepatitis tipo A

Este virus se transmite a travs del agua contaminada con materia fecal
y de alimentos muy manipulados en condiciones de higiene deficientes
(ensaladas de patatas, frutas contaminadas, zumos contaminados) y
productos marinos presentes en zonas costeras contaminadas. El virus
es termorresistente por lo que la proflaxis ha de centrarse en la higiene
del operario, agua y productos.

2. Otras virosis entricas humanas.

Su incidencia real no est muy clara, se han asociado a veces al

consumo de productos marinos costeros como mejillones o percebes,
presentes en aguas contaminadas y no tratadas adecuadamente desde el
punto de vista trmico.

3. Virosis de origen animal.

145
 En general los virus que producen enfermedades en los animales no son
patgenos para el hombre, ni siquiera los oncognicos productores de
tumores. En cualquier caso, estos virus se inactivan por tratamiento
trmico.

PICORNAVIRUS: grupo complejo de virus con ARN de doble cadena

(aunque no se si todos la tienen o slo algunos). A este grupo pertenece
una serie de virus interesantes como el de la Hepatitis a (transmisible
por alimentos),. el virus de la poliomelitis, el del resfriado, el de la
fiebre aftosa y una serie de virus denominados enterovirus o echovirus
que viven principalmente en el intestino y que pueden causar efectos
citopticos aunque en ocasiones las enfermedades que producen no son
evidentes. Es interesante tambin tener en cuenta los denominados
reovirus causantes de patologas tanto a nivel de tracto respiratorio
(resfriados) como a nivel intestinal (diarreas); [quiz estos virus sean
responsables de los procesos diarreicos asociados a ciertos resfriados u
otros procesos febriles.

F. Enfermedades por protozoos transmitidas a traves de los alimentos.

Los protozoos parsitos tienen como hbitat habitual el intestino

humano de donde salen a travs de las heces para, a veces, ser
transportados por otros portadores secundarios. En algunas ocasiones
pueden atravesar la barrera intestinal y producir infestaciones masivas.
Normalmente adoptan formas de resistencia denominados quistes.

Su deteccin en animales es con frecuencia difcil y por tanto la medida

profilctica ms segura es el tratamiento trmico adecuado puesto que
son organismos termosensibles.

Las patologas ms relevantes son la disentera amebiana (producida

por Entamoeba histolytica, transmitida a travs del agua, frutas y
verduras), giardiasis (producida por Giardia lamblia y transmitida a
travs del agua en zonas endmicas), toxoplamosis (Toxoplasma gondii
transmitido a travs de la carne cruda, zoomosis de animales de
compaa) y la cristosporidiosis (Cryptosporidium parvum, transmitido
a travs de la carne cruda).

G. Enfermedades por helmintos.

Los helmintos tienen ciclos biolgicos ms complicados que los de los

protozoos; pero como ellos forman quistes que, al ser ingeridos,
producen la infestacin del hombre. Otra va de entrada son las aguas
contaminadas con huevos de los gusanos.

Las enfermedades ms importantes producidas por helmintos son:

Teniasis (producidas por Tenia solium de origen porcino o T. saginata
de origen vacuno, que forma en los animales unos quistes denominados
cistercercos), Difolobotriasis (producida por Diphyllobothrium latum,

146
parsito de peces), la Hidatidosis o Equinococosis (producida por
Echinococcus granulosus, enfermedad muy grave por los quistes que
causa el gusano; al hombre suele transmitirse por los perros, aunque
otras carnes o aguas contaminadas pueden ser su vehculo), la
triquinosis (producida por Trichinella spiralis que forma quiste
intramusculares en cerdos de granja); la anisakiasis (producida por
Anisakis marina transportada por peces como el arenque); Capilariasis
(producida por Capillaria philipina y transmitida por el consumo de
carnes o pescados crudos, en una enfermedad que no se ha descrito en
nuestra zona geogrfica) y Ascaridiosis (producida por Ascaris
lumbricoides transmitida por contacto persona-persona cuando la
higiene no es correcta y hay contaminacin fecal.

En general las enfermedades producida por helmintos se deben al

consumo de alimentos contaminados endgenamente (animales
infestados) o exgenamente (contaminacin fecal en aguas u hortalizas)
que se consumen crudos o insuficientemente lavados y cocinados. Las
medidas profilctica, a parte de las higinicas, pasan por la congelacin
y tratamiento trmico adecuado de las carnes infestadas para inactivar
las larvas enquistadas. En muchos casos, el veterinario puede detectar la
enfermedad por estudio de las canales (cisticercosis y triquinosis).

147
 PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. Cul de los siguientes es el grado mnimo de infeccin sin respuesta

del huesped?
a) Colonizacin b) Infeccin inaparente
c) Enfermedad infecciosa d) Todas las anteriores
e) Ninguna de las anteriores
2. Un animal libre de grmenes al que se le implanta la flora normal de
otra especie (por ejemplo humana) se denomina:
a) axnico b) gnotoxnico c)
heteroxnico
d) holoxnico e) plurixnico
3. Son neurotoxinas: 1= Tetnica; 2= Botulnica; 4= Colrica; 8= La
producida por Staphilococcus aureus; 16= La producida por
Escherichia coli.
a) 3 b) 7 c) 11 d) 19 e) 23

4. En la estructura qumica de las endotoxinas: 1=La fraccin interna es

un lpido; 2= La fraccin central es un polisacarido idntico en los G-
; 4= La fraccin externa es una cadena de oligosacaridos diferentes en
los G- .
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

5. La penetracion de bacterias patogenas: 1= todas las bacterias tienen

capacidad de penetracin; 2= algunas tienen capacidad de penetracion
activa (Salmonella, Shigella, Neisseria); 4= algunas tienen capacidad
de penetracion pasiva (fiebre recurrente, peste); 8= las modalidades
de la infeccion dependen de la capacidad de penetracion (colonizacion
mucosa, penetracion, difusin
a) 12 b) 13 c) 14 d) 15 e) 16

6. Son modelos de relaciones Huesped-Parasito: 1= saprofitos; 2=

simbiontes o parasitos; 4= predador-presa; 8= comensalismo; 16=
mutualismo; 32= parasitismo
a) 29 b) 30 c) 31 d) 59 e) 63

7. La exotoxina del Vibrio cholerae es un ejemplo de:

a) Neurotoxina b) Enterotoxina c)
Hemolisina

d) Leucocidina e) De accin general

8. La exotoxina del Clostridium tetani es un ejemplo de:

a) Neurotoxina b) Enterotoxina c)
Hemolisina

d) Leucocidina e) De accin general

9. La exotoxina del Clostridium botulinum es un ejemplo de:

148
 a) Neurotoxina b) Enterotoxina c)
Hemolisina
d) Leucocidina e) De accin general

10. El Micobacterium leprae es un ejemplo de:

a) Parsito extracelular b) Parsito intracelular
obligado
c) Parsito intracelular facultativo d) Todos los anteriores
e) Ninguno de los anteriores
11. La Brucella es un ejemplo de:
a) Parsito extracelular b) Parsito
intracelular obligado
c) Parsito intracelular facultativo d) Todos los anteriores
e) Ninguno de los anteriores
12. El Vibrio cholerae en relacin con la penetracin en los tejidos es un
ejemplo de:
a) Bacteria sin capacidad de penetracin
b) Bacteria con capacidad de penetracin activa
c) Bacteria con capacidad de penetracin pasiva
d) Todas las anteriores
e) Ninguna de las anteriores
13. El agente productor de la peste en relacin con la penetracin en los
tejidos es un ejemplo de:
a) Bacteria sin capacidad de penetracin
b) Bacteria con capacidad de penetracin activa
c) Bacteria con capacidad de penetracin pasiva
d) Todas las anteriores
e) Ninguna de las anteriores
14. La Salmonella en relacin con la penetracin en los tejidos es un
ejemplo de:
a) Bacteria sin capacidad de penetracin
b) Bacteria con capacidad de penetracin activa
c) Bacteria con capacidad de penetracin pasiva
d) Todas las anteriores
e) Ninguna de las anteriores
15. El Corynebacterium diphteriae en relacin con la penetracin en los
tejidos es un ejemplo de:
a) Bacteria sin capacidad de penetracin
b) Bacteria con capacidad de penetracin activa
c) Bacteria con capacidad de penetracin pasiva
d) Todas las anteriores
e) Ninguna de las anteriores
16. La adherencia microbiana: 1. Es un fenmeno de superficie 2. Es un
fenmeno especfico 4. Est ligado a estructuras superficiales o a
polimeros extracelulares 8. Las adhesinas microbianas se combinan
con los receptores celulares 16. Es una combinacin o unin estereo-
especfica como la unin antgeno-anticuerpo.
a)21 b)24 c)27 d)29 e)31

149
17. Las endotoxinas son:
a) proteinas b) lipidos c) polisacaridos
d) lipopolisacaridos e) lipoprotenas

18. Las exotoxinas: 1= tienen naturaleza lipopolisacaridica; 2= la mayoria

estan codificadas en ADN cromosomico y solo alguna (enterotoxina
de E. coli) en ADN plasmidico; 4= presentan toxicidad elevada (DL
50 = 10 elevado a -3 a 10 elevado a -9 mg); 8= la accion es especifica
asi como el cuadro clinico y el mecanismo de accion Sol.:
a) 10 b) 12 c) 13 d) 14 e) 15

19. Son modelos de relaciones Huesped-Parasito: 1= saprofitos; 2=

simbiontes o parasitos; 4= predador-presa; 8= comensalismo; 16=
mutualismo; 32= parasitismo Sol.:
a) 29 b) 30 c) 31 d) 59 e) 63

20. Son defensas externas en la resistencia inespecfica a la infeccin: 1=

El revestimiento cutaneo mucoso; 2= La acidez; 4= La descamacin
y el arrastre; 8= Las sustancias bactericidas.
a)5 b)7 c)13 d)14 e)15

21. Las defensas antibacterianas inespecificas pueden ser internas o

externas. Dentro de estas ltimas se encuentran: 1= El revestimiento
cutaneo-mucoso; 2= La descamacin; 4= El arrastre de las
secrecciones y fluidos; 8= Las sustancias bactericidas.
a)7 b)11 c)13 d)14 e)15

22. Son sustancias bactericidas: 1= Acidos grasos; 2= Lisozimas; 4=

Bilis; 8= Lactotransferasa.
a)5 b)7 c)13 d)14 e)15

23. La inmunidad desarrollada durante la enfermedad infecciosa es un

ejemplo de:
a) Inmunidad natural b) Inmunidad adquirida
activa
c) Inmunidad adquirida pasiva d) Resistencia
e) Ninguna de las anteriores
24. Son vas de difusin en la infeccin o en la invasin: 1= Contiguidad ;
2= Va linftica; 4= Va drmica; 8= Va sangunea; 16= Va
nerviosa.
a)9 b)27 c)29 d)30 e)31

25. La penetracion de bacterias patogenas: 1= todas las bacterias tienen

capacidad de penetracin; 2= algunas tienen capacidad de penetracion
activa (Salmonella, Shigella, Neisseria); 4= algunas tienen capacidad
de penetracion pasiva (fiebre recurrente, peste); 8= las modalidades
de la infeccion dependen de la capacidad de penetracion (colonizacion
mucosa, penetracion, difusion)
a) 12 b) 13 c) 14 d) 15 e) 16

150
26. El perodo de incubacin de la fiebre tifoidea es de:
a) De 1 a 7 horas
b) De 10 a 24 horas
c) c) De 10 a 14 das
d) De 1 a 2 meses
e) Meses o aos
27. Cul de las siguientes bacterias es un parsito intracelular obligado?
a) Pseudomonas b) Cocos Gram + c)
Vibrios
d) Clamidias e) Arqueobacterias

28. La mayora de los microorganismos que habitan el intestino del

hombre pertenecen al grupo de los:
a)microaerfilos b)anaerobios facultativos
c)anaerobios estrictos d)enterobacterias
e)enterococos
29. Cuales de las siguientes afirmaciones son ciertas para el gnero
Brucella ?: 1=Puede crecer intracelularmente 2=Tiene apetencia por
eritritol 4=Puede producir abortos en ganado 8=Resiste la temperatura
de pasteurizacin. Soluciones:
a)5 b)6 c)7 d)13 e)15

30. Cual de las siguientes sustancias producidas por Pseudomonas es de

estructura proteica, semejanta a las protenas vricas y letal para
algunos individuos de la misma especie?:
a)Hemolisina b)Exotoxina A
c)Pigmentos coloreados d)Bacteriocinas
e)Enterotoxina
31. Las bacteriocinas son: 1=de estructura proteica 2=enzimas de defensa
frente al ataque inmunitario 4=letales para microorganismos de la
misma especie que quien las produce 8=tiles en terapia
antiinfecciosa.
a)4 b)5 c)6 d)12 e)13

32. Cuales de las siguientes afirmaciones son ciertas para el gnero

Brucella ?: 1=Puede crecer intracelularmente 2=Tiene apetencia por
cistena 4=Puede producir abortos en ganado 8=Resiste la temperatura
de pasteurizacin.
a)5 b)6 c)7 d)13 e)15

33. Legionella pneumophila, 1=es una enterobacteria 2=se adquiere por

va respiratoria 4=es un parsito intracelular 8=es responsable de la
fiebre de Pontiac.
a)3 b)9 c)11 d)14 e)15

34. Cuales de las siguientes afirmaciones son ciertas para el gnero

Brucella ?: 1=Puede crecer intracelularmente 2=Tiene apetencia por

151
 eritritol 4=Puede producir abortos en el ganado 8=Se destruye a la
temperatura de pasteurizacin.
a)7 b)9 c)11 d)13 e)15

35. Legionella : 1=Requiere cistena y hierro 2=Puede crecer

intracelularmente 4=Es sensible a eritromicina 8=Produce la fiebre de
Pontiac 16=Produce neumona atpica.
a)12 b)13 c)15 d)27 e)31

36. La conjuntivitis del recin nacido u oftalmia neounatorum es un

cuadro clnico producido por:
a) Estafilococo b) Meningococos
c) Gonococo d) Clostridios e) Haemophilus
37. Cul de estos gneros se caracteriza por su incapacidad de sintetizar
los factores X y V?
a) Pasteurella b) Haemophilus c)
Gardnerella
d) Veillonella
38. Cul de estos gneros es un bacilo G- anaerobio estricto?
a) Fusobacterium b) Mycobacterium
c) Chromobacterium d) Corynebacterium
e) Todos los anteriores
39. Cuales de las siguientes son especies del gnero Salmonella ?:
1=tiphy 2=dysenteriae 4=aeruginosa 8=enteritidis.
a)1 b)3 c)5 d)9 e)11

40. En algunas ocasiones Proteus puede producir infecciones,

fundamentalmente sern:
a) Intestinales b)urinarias c)respiratorias
d) de la piel e)de heridas
41. Qu microorganismo de los siguientes puede producir una septicemia
grave en individuos que presentan un exceso de hierro en sangre?:
a) Vibrio cholerae
b) Vibrio vulnificus
c) Mycobacterium tuberculosis
d) Haemophilus influenzae
e) Francisella tularensis e) Lectospira interrogans
42. Vibrio cholerae, 1=invade las clulas intestinales, 2=provoca diarrea
acuosa (agua de arroz) 4=es muy sensible a la acidez estomacal.
a)3 b)4 c)5 d) 6 e)7

43. La toxina colrica: 1=Provoca la acumulacin de AMPcclico, 2=Slo

el componente A entra en la clula 4=El componente B se fija a un
receptor (GM1) de la clula epitelial. Soluciones:
a)3 b)4 c)5 |d) 6 e)7

152
44. Los microoganismos del gnero Photobacterium: 1=Son de origen
marino 2=Producen luz propia 4=Algunos son patgenos de peces
8=Estn emparentados con los vibrios.
a)2 b)3 c)10 d)11 e)15

45. Uno de los siguientes gneros de enterobacterias no realiza la

fermentacin butanodilica:
a)Klebsiella b)Enterobacter
c)Escherichia
d)Erwinia e)Serratia
46. El tratamiento del clera puede ser:
a) Eritromicina
b) Ampicilina
c) Combatir la deshidratacin y/o Tetraciclina
d) Isoniazida, Rifampicina, Estreptomicina
e) Penicilina
47. Erwinia sp: 1=es un peligroso productor de neumona 2=es patgena
para las plantas 4=es una enterobacteria que produce fermentacin
butanodilica.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

48. La toxina colrica: 1=Provoca la acumulacin de AMPcclico en el

interior de la clula epitelial 2=Slo el componente A entra en la
clula 4=El componente B se fija a un receptor (ganglisido GM1) de
la clula epitelial.
a)3 b)4 c)5 d) 6 e)7

49. Cual de los siguientes enzimas sintetizados por Vibrio cholerae

provoca la formacin de receptores celulares para la toxina colrica?:
a)adhesina b)sialidasa c)mucinasa d)hidrogenoliasa
e)hemolisina

50. Los microoganismos del gnero Photobacterium: 1=Son de origen

marino 2=Producen luz propia 4=Son muy sensibles a los
contaminantes qumicos 8=Estn emparentados con los vibrios.
a)2 b)3 c)10 d)11 e)15

51. Klebsiella pneumoniae: 1=es un peligroso productor de neumona

2=es capsulado 4=es una enterobacteria que produce fermentacin
cido-mixta.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

52. Shigella dysenteriae: 1=es una enterobacteria 2=es una bacteria

invasiva 4=est muy relacionada con Salmonella con quin puede
recombinarse 8=produce disentera bacilar.
a)3 b)9 c)11 d)13 e)15

53. La capacidad de fermentar el disacrido lactosa: 1=es una

caracterstica muy importante para diferenciar unas enterobacterias de

153
 otras 2=requiere una galactsido permeasa 4=requiere una Beta-
galactosidasa.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

54. Vibrio cholerae, 1=invade las clulas intestinales, 2=provoca diarrea

acuosa (agua de arroz) por accin de una toxina que interfiere con el
sistema adenilciclasa 4=es muy sensible a la acidez estomacal.
a)3 b)4 c)5 d) 6 e)7

55. Se asocia al consumo de pescado crudo, o poco cocinado, la

gastroenteritis por :
a)Salmonella enteritidis b)Campylobacter
coli
c)Shigella dysenteriae d)Vibrio cholerae
e)Vibrio parahaemolyticus
56. Cual de los siguientes enzimas sintetizados por Vibrio cholerae
provoca la formacin de receptores celulares para la toxina colrica?:
a)adhesina b)sialidasa c)mucinasa
d)hidrogenoliasa e)hemolisina
57. El Escherichia coli enterotoxignico (ECEI) produce una
gastroenteritis semejante al :
a)clera b)disentera bacilar
c)salmonelosis d)intoxicacin estafiloccica
e)campilobacteriosis
58. Unos bacilos G-, anaerobios facultativos , mviles, que no fermentan
la lactosa pero si la glucosa con produccin de gas pertenecen al
gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
59. Unos bacilos G-, anaerobios facultativos , inmviles, que no
fermentan la lactosa rpidamente y no producen desaminasa ni SH2 ni
gas ni glucosa pertenece al gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
60. Unos bacilos G-, anaerobios facultativos , mviles, lactosa +, glucosa
+, con produccin de gas IMViC ++-- pueden pertenecer al gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
61. Unos bacilos G-, anaerobios facultativos , mviles, lactosa +,IMViC
++-- pueden pertenecer al gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
62. Un coco G-, anaerobio facultativo , mviles, ureasa + fenil alanina-,
desaminasa+, puede ser:
a) Escherichia b) Enterobacter c)
Citrobacter
d) Proteus e) Serratia
63. Un coco G-, anaerobio facultativo , lactosa+, IMViC ++--, puede
pertenecer al gnero:

154
 a) Escherichia b) Enterobacter c)
Citrobacter
d) Proteus e) Serratia
64. Un cuadro clnico de vmitos y diarrea fecaloide muy abundante
(301/dia), con aspecto de agua de arroz, con deshidratacin e
hipovolemia puede estar producido por:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi c) Vibrio
cholerae d) Shigella dysenteriae e) Yersinia pestis

65. Un cuadro clnico con inflamacin de uno o varios ganglios,

ulceracin de los mismos (bubn), acompaado de un sndrome
infeccioso y un sndrome txico, puede estar producido por:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
66. Qu microorganismo puede ser transmitido por Xenopsylla cheopsis:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis

67. En el diagnstico bacteriolgico de qu microorganismo realizamos la

prueba del filamento con desoxicolato sdico sobre las colonias.
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae e)
Yersinia pestis
68. El serodiagnstico de Widal y Felix con antgeno O, H y Vi se utiliza
para diagnosticar las infecciones debidas a:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
69. Qu microorganismo tiene una patogenia de ingestin, infeccin de
vasos linfticos y ganglios mesentricos; circulacin por vasos
linfticos, conductos torcicos y paso a sangre; diseminacin a bazo,
rin, hgado y vescula; infeccin de placas de Peyer; excreccin.
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
70. El medio selectivo TCBS (tiosulfato-citratos-sales biliares) se utiliza
para aislar:
a) Vibrio cholerae
b) Salmonella-Shigella
c) Streptococcus pyogenes
d) Mycobacterium tuberculosis
e) Mycobacterium leprae
71. El medio dexosicolato-citrato se utiliza como medio selectivo para
aislar:
a) Vibrio cholerae
b) Salmonella-Shigella

155
 c) Streptococcus pyogenes
d) Mycobacterium tuberculosis
e) Mycobacterium leprae
72. Qu enfermedad infecciosa cursa con marcada deshidratacin e
hipovolemia?
a) Botulismo b) Tetano c) Clera
d) Tularemia e) Carbunco
73. Cul de los siguientes gneros de la familia Enterobacteriacea no
fermentan la lactosa?: 1. Proteus 2. Escherichia 4. Enterobacter 8.
Providencia.
a)1 b)5 c)7 d)9 e)13

74. Y. enterocoltica, es un microorganismo que est asociado a

infecciones de tipo:
a) Peste b) Gastroenteritis asociada con diarrea
c) Pneumonia d)Septicemia
75. Los microorganismos pertenecientes al gnero Salmonella se
caracterizan por:
a) Ser mviles b) Ser agar (+) c) Ser
SH2 (+)
d) Ser lactosa positivo e) Ninguna de las anteriores
76. En el tratamiento clnico de la peste se emplea como antibitico de
eleccin primaria:
a) Estreptomicina b) Rifampicina
c) Cloramfenicol d) Tetraciclina e)
Cefalosporinas
77. Que microorganismo suele transmitirse por Pediculus humanus:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
78. Unos sntomas de fiebre progresiva y confusin con aglutinaciones de
Widal-Felix que pasaron del ttulo 1/40 el da 3 al 1/640 el da 18
puede tratarse de:
a) Clostridium tetani b) Mycobacterium tuberculosis
c) Fiebre recurrente d) Fiebre tifoidea
e) Gangrena gaseosa
79. Un cuadro clnico con fiebre, dolores abdominales, nauseas, vmitos y
diarrea abundante (jalea de grosella), puede estar producido por:
a) Yersinia pestis b) Escherichia coli
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Salmonela thyphi
80. Qu infeccin se transmite por contacto directo e indirecto (manos,
alimentos, objetos, moscas, etc), ha sido uno de los grandes azotes de
la humanidad, es muy frecuente en campos de batalla, requiere una
dosis infectiva baja para el contagio y entra por va digestiva:
a) Disenteria bacilar por Shigella
b) Tetanos
c) Carbunco
d) Salmonelosis

156
 e) Glomerulonefritis
81. Unas colonias lactosa +, en MacConkey (color rosa) con un Kliger de
cido en fondo y alcalino en slant (glucosa +, lactosa-), formacin de
gas y produccin de SH2, con la prueba de las desaminasas (FAD)
negativa y la prueba de las betagalactosidasas (ONPG) tambin
negativas, puede ser:
a) Staphylococcus epidermidis
b) Streptococcus pyogenes
c) Especies de Salmonella
d) Sthaphylococcus aureus
e) Klebsiella pneumoniae
82. Un bacilo G-, anaerobio facultativo mvil, que no fermenta la lactosa
pero si la glucosa con produccin de gas puede pertenecer al gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
83. Que microorganismo produce la peste bubnica:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
84. Un cuadro clnico con inflamacin de uno o varios ganglios,
ulceracin de los mismos (bubn) acompaado de un sndrome
infeccioso y un sndrome txico, puede estar producido por:
a) Yersinia pestis b) Escherichia coli
c) Vibrio cholerae d) Salmonella thyphi
e) Shigella dysenteriae
85. Un bacilo G-, anaerobio facultativo, mvil, lactosa +, IMViC++--,
puede pertenecer al gnero:
a) Yersinia b) Klebsiella c) Salmonella
d) Escherichia e) Shigella
86. Un bacilo G-, anaerobio facultativo, lactosa+ IMViC++--, puede
pertenecer al gnero: a) Citrobacter b) Escherichia c) Enterobacter d)
Proteus e) Serratia a 25
Que microorganismo produce el clera:
a) Escherichia coli b) Salmonella thyphi
c) Vibrio cholerae d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis
87. El perodo de incubacin de la Enterocolitis por Salmonella es de:
a) De 1 a 7 horas b) De 10 a 24 horas
c) De 10 a 14 das d) De 1 a 2 meses e)
Meses o aos
88. Un bacilo G-, anaerobio facultativo, inmvil, no fermenta la lactosa
rpidamente y no produce desaminasa ni SH2 ni gas ni glucosa, puede
pertenecer al gnero:
a) Salmonella b) Escherichia c) Shigella
d) Yersinia e) Klebsiella
89. Un cuadro clnico de vmitos y diarrea fecaloides muy abundantes(30
L/da), con aspecto de agua de arroz con deshidratacin e hipovolemia
puede estar producida por:
a) Salmonella thyphi b) Vibrio cholerae

157
 c) Escherichia coli d) Shigella dysenteriae
e) Yersinia pestis

90. Los microorganismos como el Vibrio cholerae que es capaz de crecer

y multiplicarse en condiciones de pH altos por encima de 8 o 9 se
denominan:
a) prototrofos b) auxotrofos c) litotrofos
d) psicrofilos e) basofilos
91. El medio selectivo agar SS se utiliza para aislar:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-Shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium leprae
e) Streptococcus pyogenes
92. El tratamiento de eleccin en la fiebre tifoidea es:
a) Tetraciclina
b) Cloramfenicol y ampicilina
c) Combatir la deshidratacin y tetraciclina
d) Isoniazida, Rifampicina, Estreptomicina
e) Penicilina
93. El tratamiento del colera puede ser:
a) Tetraciclina
b) Cloramfenicol y ampicilina
c) Combatir la deshidratacin y tetraciclina
d) Isoniazida, Rifampicina, Estreptomicina
e) Penicilina
94. Cuales de las siguientes afirmaciones acerca de Bdellovibrio es falsa?
a) Es un organismo fermentador
b) Se produce en el espacio periplsmico de bacterias Gram-
c) Es un organismo aerobio
d) Es un Gram-
e) Existen mutantes de vida independiente de la presa
95. El Tracoma es una enfermedad producida por:
a) Treponema trachomatis b) Rickettsia trachomatis
c) Salmonella trachomatis d) Micrococcus trachomatis
e) Chlamydia trachomatis
96. Cul de los siguientes estados o estructuras bacterianas no son
capaces de regenerar una pared celular?
a) Formas L b) Protoplastos c) Esferoplastos
d) Micoplasmas e) Streptobacillus moniliformis
97. Al realizar la tincin de Macchiavello en el gnero Chlamydia los
cuerpos reticulares aparecen teidos de color:
a) Azul b) Rojo c) Verde
d) Amarillo e) Marrn
98. Cul de las siguientes especies produce neumonitis en hombres?
a) Rickettsia rickettsii b) Rschalinea quintana
c) Chlamydia trachomatis d) Chlamydia psittaci
e) Mycoplasma pneumoniae
99. Cul de las siguientes especies del gnero Rickettsia produce fiebre
botunosa?

158
 a) R. tsutsugamuski b) R. rickettsii c) R.
prowazekii
d) R. conorii e) R. thyphi
100. Cual de las siguientes especies de la tribus Rickettsiaceae crece en
agar sangre?
a) R. Prowazekii b) Rochalimea quintana
c) Coviella burnetii d) R. cronorii
e) Ninguna de las anteriores
101. Cul de las siguientes especies es el agente casual de la fiebre Q?
a) R. Coronii b) Rochalinea quintana
c) Covoella burnetti d) R. thyphi e) R. reckettsii
102. Cocos gram- positivos. Estafilococos y Estreptococos.
La accin patgena de Streptococcus pyogenes est facilitada por las
toxinas y enzimas producidos por la cepa; entre estas se encuentran: 1.
Estreptolisina 2. Toxina eritrogenica 4. Coagulasa 8. Estreptoquinasa
16. Estreptodornasa.

a)24 b) 25 c)27 d)29 e)31 e 27

103. En la identificacin de Streptococcus pneumoniae se utiliza la:

a) Reaccin de Nelson b) Reaccin de Quellung
c) Reaccin de VDRL d) Reaccin de Widal y Felix
e) Reaccin de Dick
104. Para identificar la toxina eritrognica de Streptococcus pyogenes o
para diagnosticar la eripsela o escarlatina se utiliza la:
a) Reaccin de Nelson b) Reaccin de Quellung
c) Reaccin de VDRL d) Reaccin de Widal y
Felix
e) Reaccin de Dick
105. El medio agar sangre se utiliza para el aislamiento e identificacin de:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-Shigella
c) Streptococcus pyogenes d) Mycobacterium
tuberculosis
e) Mycobacterium leprae
106. La eripsela y la escarlatina son cuadros clnicos producidos por:
a) Staphylococcus aureus
b) Estreptococos del grupo A (S. pyogenes)
c) Estreptococcus del grupo D (Enterococos)
d) Estreptococcus viridans
e) Streptococcus pneumoniae
107. La accin patgena de los estreptocococos se lleva a cabo a travs de
sus enzimas y toxinas. Cules de las siguientes son toxinas o enzimas
importantes de los estreptococos del grupo A: 1. Estreptolisina 2.
Toxina eritrognica 4. Estreptoquinasa 8. Estreptodornasa 16.
Neurotoxina 32. Estreptonefrotoxina.
a)15 b) 46 c) 47 d) 60 e) 63

108. Un cuadro clnico con escalofros, tos, fiebre, punta de costado,

disnea, esputos herrumbrosos y leucocitosis corresponde a:

159
 a) Carbunco pulmonar b) Neumolia lobar por
neumococos
c) Mionecrosis d) Bronquitis por
Haemophilus
e) Tularemia por Fracisella
109. Staphylococcus aureus se diferencia de los otros miembros del gnero
Staphylococcus por:
a) Ser catalasa + b) Ser G+
c) Ser coagulasa + (90-98%) d) Ser anaerobio facultativo
110. El tratamiento especfico para las infecciones por Streptococcus
pneumoniae, se basa preferentemente en la administracin al paciente
de:
a) Kanamicina b) Streptomicina c)
Tetraciclina
d) Cloramfenicol e) Penicilina
111. En Streptococcus pneumoniae la fijacin del DNA exgeno durante el
proceso de transformacin se;
a) requiere que el DNA sea de doble cadena y de un tamao
mnimo de 400-500 pares de bases
b) Requiere que el DNA sea de doble cadena y de un tamao
menor a 400 pares de bases
c) Mecanismo especfico que slo reconoce ADN homologo de
doble cadena
d) Mecanismo especfico para ADN homlogo de cadena
sencilla A 27
112. Unos cocos Gram+, agrupacin irregular, catalasa +, fermentacin
anaerobia de la glucosa, puede ser:
a) Bacillus tetani b) Bacillus anthracis
c) Staphylococcus aureus d) Micrococcus sp.
e) Especies del gnero Streptococcus
113. Unas colonias pequeas, hemolticas en agar sangre, compuestas por
cocos G+, con agrupacin en cadenas, produciendo una hemolisis
beta, insoluble en bilis y resistentes a la optoquina, puede ser:
a)Staphylococcus epidermidis b) Streptococcus pyogenes
c) Especies de Salmonella d) Sthaphylococcus aureus
e) Klebsiella pneumoniae

114. Streptococcus pneumoniae: 1. No tiene cpsula y es insoluble en bilis

2. Se presenta en diplos o pequeas cadenas presentando forma
lanceolada 4. Los cuadros clnicos que producen son: neumonia lobar
por contigidad y procesos piogenos como sinusitis y otitis 8. El
tratamiento de eleccin es Penicilina.
a)6 b)7 c)13 d)14 e)15 d) 27

115. Unos cocos gram +, catalasa -, agrupacin en diplococos o cadenas

pueden pertenecer a:
a) Bacillus tetani b) Bacillus anthracis
c) Staphylococcus aureus d) Micrococcus sp.
e) Especies del gnero Streptococcus

160
116. Unos cocos G+ lanceolados, en diplococos o cadenas cortas, con
cpsula, solubles en bilis y sensibles a la optoquina se puede
identificar como pertenecientes a la especie:
a) Staphylococcus epidermidis b) Streptococcus pyogenes
c) Streptococcus faecalis d) Streptococcus
pneumoniae
e) Diplococcus haemophilus

117. La glomerunefritis puede estar producida por:

a) Treponema pertenue b) Streptococcus pyogenes
c) Neisseria meningitidis d) Bacillus anthracis
e) Borrelia recurrentis

118. Unos cuadros clnicos de: Accin directa sobre piel y mucosa:
foliculitis, forunculos, anthrax; Accin txica: intoxicacin
alimentaria; Metstasis visceral localizadas; Procesos generalizados
pueden estar producidos por las cepas de la especie:
a) Streptococcus pyogenes b) Bacillus anthracis
c) Clostridium botulinum d) Staphylococcus aureus
e) Shigella disenteria

119. Unos cocos no esporulados, con agrupacin irregular, catalasa+ y con

fermentacin anaerobia de la glucosa, pertenecer al gnero:
a) Staphylococcus b) Micrococcus c)
Streptococcus
d) Sporosarcina e) Sarcina

120. Unas colonias mucosas y traslucidas, grandes que forman cuerdas o

hilos de moco cuando se las levanta con un asa de platino, lactosa +,
compuesta por cocobacilos G-, que dan las reacciones de IMViC--++,
puede ser de:
a) Staphylococcus epidermidis b) Streptococcus
pyogenes
c) Especies de Salmonella d) Sthaphylococcus
aureus
e) Klebsiella pneumoniae

121. Unas colonias medianas, no hemolticas, blancas, compuestas por

cocos G+, agrupacin irregular, catalasa +, coagulasa -, manitol -,
puede ser de:
a) Staphylococcus epidermidis
b) Streptococcus pyogenes
c) Especies de Salmonella
d) Sthaphylococcus aureus
e) Klebsiella pneumoniae
122. Unas colonias medianas, hemolticas, amarillas y con pigmento
amarillo, con microorganismos en forma de cocos G+, catalasa+,
coagulasa+, manitol +, puede ser de:

161
 a) Staphylococcus epidermidis b) Streptococcus pyogenes
c) Especies de Salmonella d) Sthaphylococcus aureus
f) Klebsiella pneumoniae

123. Un cuadro clnico de nauseas, vmitos, palidez, transpiracin, dolor

abdominal o calambres abdominales con diarrea y temperatura normal
con un comienzo a las tres horas de la ingestin de un alimento
sospechoso de estar contaminado es muy probable que sea una
intoxicacin alimentaria debida a:
a)Streptococcus pyogenes b) Staphylococcus aureus
c) Costridium botulinum d) Vibrio cholerae
e) Ninguno de los anteriores

124. Streptococcus pyogenes produce el cuadro clnico de:

a) Pian b) Reumatismo c) Fiebre recurrente
d) Carbunco e) Botulismo

125. La erisipelaela est producida por:

a) Staphylococcus aureus b) Staphylococcus
pyogenes
c) Neisseria gonorrhoeae d) Treponema pallidum
e) Leptospira icterohaemorrhagiae

126. En la fiebre reumtica: 1. Existe generalmente una infeccin

estreptoccica en la garganta (anginas) 2. Se pueden aislar de la
garganta estreptococo 4. Al cabo de 10-14 das aparece el cuadro de
reumatismo con dolor e inflamacin de articulaciones.
a)3 b)4 c)5 d)6 e)7

127. El Streptococcus pyogenes produce el cuadro clnico de:

a) Pian b) Reumatismo c) Fiebre recurrente
d) Carbunco e) Botulismo

128. Penicilina y eritromicina son los tratamientos de eleccin en las

infecciones por:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium leprae
e) Streptococcus pyogenes

129. El perodo de incubacin de una intoxicacin alimentaria por

estafilococos es de:
a) De 1 a 7 horas b) De 10 a 24 horas
c) De 10 a 14 das d) De 1 a 2 meses
e) Meses o aos

130. El Streptococcus pneumoniae: 1. No tiene capsula y es insoluble en

bilis 2. Se presenta en diplos o pequeas cadenas presentando forma
lancealada 4. Los cuadros clnicos que producen son: neumonia lobar

162
 por contigidad y procesos piogenos como sinusitis y otitis 8. El
tratamiento de eleccin es Penicilina.
a)6 b)7 c)13 d)14 e)15

131. En las zonas de la lesin neumnica en la Neumona neumoccica se

encuentran los siguientes cambios histopatolgicos del tejido
pulmonar: 1. Existe una zona de edema externo con los alveolos llenos
de lquido edematoso que contiene neumococos 2. Mas internamente
existe otra zona de condensacin precoz con algunos
polimorfonucleares y algunos hematies 4. Ms internamente se
encuentra la zona de condensacin avanzada con abundantes
polimorfonucleares con neumococos fogocitados 8. Finalmente en la
zona central existe una zona de caseificacin en que se coagula las
protenas de las polimorfonucleares, neumococos y pus.
a)7 b)12 e)13 d)14 e)15

132. Unos cocos Gram+, agrupacin irregular, catalasa +, no fermentando

la glucosa en condiciones anaerobias puede ser:
a) Bacillus tetani b) Bacillus anthracis
c) Staphylococcus aureus d) Micrococcus sp.
e) Especies del gnero Streptococcus

133. El Clostridium botulinum produce el cuadro clnico de:

a) Pian b) Reumatismo c) Fiebre recurrente
d) Carbunco e) Botulismo
134. El Bacillus anthracis produce el cuadro clnico de:
a) Pian b) Reumatismo c) Fiebre
recurrente
d) Carbunco e) Botulismo
135. Los Clostridium tetani y botulinum son clostridium:
a) Neurotxicos b) histotxicos c)
Enterotxicos
d) Pigenos e) miotxicos
136. Unos de los microorganismos que se encuentra con ms frecuencia en
la gangrena gaseosa es:
a) Clostridium dificile b) Clostridium botulinum
c) Clostridium perfringens d) Bacillus anthracis
e) Bacillus cereus
137. Un cuadro clnico de dolor en la herida, edema, hinchazn, exudado
serohemorragico, crepitacin de los tejidos a la presin puede estar
producido por una infeccin de:
a) Clostridium tetani
b) Mycobacterium tuberculosis
c) Fiebre recurrente
d) Fiebre tifoidea
e) Gangrena gaseosa
138. Un anaerobio, bacilo G+, esporulado con espora deformante y
terminal puede ser:
a) Bacillus tetani b) Bacillus anthracis

163
 c) Staphylococcus aureus d) Micrococcus sp.
e) Especies del gnero Streptococcus
139. El carbunco puede estar producido por:
a) Treponema pertenue b) Streptococcus pyogenes
c) Neisseria meningitidis d) Bacillus anthracis
e) Borrelia recurrentis
140. Un cuadro sintomatolgico de parlisis espsticas y convulsiones
evidenciado por trismus, risa sardnica y opistotonos suele estar
producido por:
a) Clostridium tetani b) Mycobacterium tuberculosis
c) Fiebre recurrente d) Fiebre tifoidea
e) Gangrena gaseosa

141. Un bacilo G+ con los extremos rectos, capsulado, esporulado con

espora central o subterminal no deformante puede ser:
a) Bacillus tetani b) Bacillus anthracis
c) Staphylococcus aureus d) Micrococcus sp.
e) Especies del gnero Streptococcus
142. En el carbunco humano: 1. Las formas externas son la pustula maligna
y el edema maligno 2. Las formas internas pueden ser pulmonar,
intestinal, faringea, nerviosa 4. La septicemia tiene una mortalidad del
75% 8. Debe su nombre (carbunco) al color negruzco que toma la
sangre y la escara negra de la pustula.
a)6 b)7 c)13 d)14 e)15

143. Un espasmo completo en enfermedad avanzada: El paciente rgido en

opistotonos moderado, con los brazos extendidos y abdomen en tabla,
pudiendo producirse un paro respiratorio. En qu infeccin puede
aparecer un cuadro como ste?
a) Clostridium tetan b) Mycobacterium tuberculosis
c) Fiebre recurrente d) Fiebre tifoidea
e) Gangrena gaseosa
144. Para qu utilizan el enzima catalasa las micobacterias?:
a) como endotoxina b) como exotoxina
c) como protena inductora de anticuerpos
d) es un enzima capaz de capturar hierro
e) es un enzima para la defensa del ataque de los macrfagos
145. Para qu le sirven los sulfolpidos a las micobacterias?:
a) como endotoxinas
b) como exotoxinas
c) para crecer de forma acordonada
d) para capturar hierro
e) para la defensa del ataque de los macrfagos
146. Mycobacterium leprae, 1=tiene apetencia por tejido pulmonar, 2=no
se ha conseguido cultivar en el laboratorio en medios de cultivo, 4=es
de crecimiento muy lento 8=puede contagiarse por va respiratoria.
a)6 b)7 c)13 d)14 e)15

164
147. Mycobacterium tuberculosis: 1=tiene apetencia por tejido pulmonar,
2=no se ha conseguido cultivar en el laboratorio en medios de cultivo,
4=es de crecimiento muy lento 8=puede contagiarse por va
respiratoria.
a)6 b)7 c)9 d)13 e)15

148. Los microorganismos del gnero Nocardia: 1=Tienen cidos

miclicos en la pared celular, 2=Son cido-alcohol resistentes 4=Son
Gram positivos 8=Son filamentosos.
a)2 b)3 c)10 d)11 e)15

149. La prueba de la tuberculina: 1=es una reaccin de hipersensibilidad

2=se da contra ciertas protenas de Mycobacterium tuberculosis
4=sirve para diagnosticar tuberculosis 8=es positiva desde el primer
momento del contagio de Mycobacterium tuberculosis
a)2 b)3 c)5 d)10 e)11

150. Qu son las exoquelinas?:

a) endotoxinas de las micobacterias
b) exotoxinas de las micobacterias
c) protenas responsables de la reaccin de la prueba de la
tuberculina
d) siderforos de las micobacterias
e) molculas de resistencia al ataque de los macrfagos de las
micobacterias
151. Cul de estos gneros presenta cidos micrticos en su pared celular
y sin embargo no es cido-alcohol resistente?
a) Nocardia b) Corynebacterium
c) Mycobacterium d) Ninguno de los anteriores
152. Cules de estas caractersticas corresponden a la toxina diftrica? 1.
Es una cadena polipptica formada por densos fragmentos 2. Todos
los fragmentos son necesarios para la accin txica de las clulas 4. El
fragmento A une la toxina a la clula 8. El fragmento B penetra en la
clula
a)3 b)5 c)9 d)15

153. Cules de estos factores txicos no intervienen en la patognesis de

Mycobacterium tuberculosis?
a) Cord factor b) Sulfolpidos
c) Micotoxinas d) Exoquelina
154. En cul de estos medios crece Mycobacterium leprae?
a) Agar sangre b) Agar sangre-
chocolate
c) Agar infusin cerenbro-corazn d) Planta de pi de ratn d
29
155. Cul de estos microorganismos es cido-alcohol resistente?
a) Fusobacterium b) Mycobacterium

c) Chromobacterium d) Corynebacterium

165
 e) Todos los anteriores
156. Cules de estas caractersticas corresponden a la lepra tuberculoide?
1. Progresiva 2. Contagiosa 4. Suave 8. Se desarrolla hipersensibilidad
retardada
a)3 b)7 c)11 d)12 e)15

157. Cules de estas caractersticas corresponden a la toxina diftrica? a) es

una cadena polipeptdica formada por dos fragmentos b) Todos los
fragmentos son necesariso para la accin 4. El fragmento A penetra en
la clula 8. El fragmento B une la toxina a la clula
a)3 b)5 c)9 d)13 e)15

158. La aparicin de colonias gris oscuras o negras en agar-cistena-telurito

nos indica la presencia de:
a) Fusobacterium b) Mycobacterium c)
Chromobacterium
d) Corynebacterium e) Nocardia
159. La toxina diftrica acta inhibiendo la sntesis de:
a) Acidos nucleicos b) Protenas c)
Carbohidratos
d) Lpidos e) Ninguna de las anteriores
160. Cules de estas caractersticas corresponden a la toxina diftrica? 1.
Es una cadena polipeptdica formada por dos fragmentos 2. El
fragmento A une la toxina a la clula 4. El fragmento B penetra en la
clula 8. Todos los fragmentos son necesarios para la accin txica en
las clulas
a)3 b)5 c)9 d)13 e)15

161. Cules de estas caractersticas corresponden a la lepra lepromatosa?

1. Progresiva 2. Contagiosa 4. Suave 8. Se desarrolla hipersensibilidad
retardada
a)3 b)7 c)11 d)13 e)15

162. Cul de estos microorganismos origina micetoma?

a) Actinomyces israelii b) Nocardia asteroides
c) Mycobacterium bovis d) Nocardia brasiliensis
e) Mycobacterium tuberculosis
163. Cul de estos factores txicos no interviene en la patognesis de
Mycobacterium tuberculosis ?
a) Cord factor b) Micotoxina c)
Sulfolpidos
d) Exoquelina e) Catalasa
164. En el tubrculo o granuloma que se forma en la infeccin con
Mycobacterium tuberculosis: 1. En la zona central hay clulas
gigantes 2. En la zona media hay clulas conjuntivas 4. En la zona
perifrica hay fibroblastos, monocitos y linfocitos.
a)3 b) 4 c)5 d)6 e)7

166
165. La inoculacin experimental al cobaya se utiliza para el diagnstico
microbiolgico de infecciones por:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium
leprae
e) Streptococcus pyogenes
166. La isoniazida, rifampicina y estreptomicina so n los antibiticos de
eleccin para el tratamiento de infecciones por:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium leprae
e) Streptococcus pyogenes
167. Que microorganismo produce en su comienzo una lesin de chancro
primario indurado, diseminacin linftica o hematgena con pequeos
sntomas en la puerta de entrada o chancros duros primarios?
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium leprae
e) Streptococcus pyogenes
168. El medio de Lowentein-Jensen se utiliza para cultivar:
a) Vibrio cholerae b) Salmonella-Shigella
c) Mycobacterium tuberculosis d) Mycobacterium
leprae
e) Streptococcus pyogenes
169. El Mycobacterium leprae: 1. No es cultivable; se multiplica con
extraordinaria lentitud 2. Tiene predileccin por el sistema nervioso 4.
Es exclusivo del hombre 8. Es sensible a la Dapsona.
a)6 b) 7 c) 13 d) 14 e)15

170. Son micobacterias atpicas: 1. Mycobacterium kansasi 2.

Mycobacterium avium 4. Mycobacterium tuberculosis 8.
Mycobacterium leprae 16. Mycobacterium intracellulare 32.
Mycobacterium scrofulaceum.
a)50 b)51 c) 59 d) 62 e) 63

171. El perodo de incubacin de la lepra es de:

a) De 1 a 7 horas b) De 10 a 24 horas c) De 10 a
14 das
d) De 1 a 2 meses e) Meses o aos
172. Cual de las siguientes Mycobacterias puede producir tuberculosis en
los animales y en el hombre: 1. M. tuberculosis 2. M. bovis 4. M.
africanum 8. M. microti 16. M. Kansasi 32. M. avium.
a)9 b)13 c) 15 d) 31 e)63

173. Unos sntomas de fiebre, sudoracin, astenia y adelgazamiento

acompaado o no con sntomass locales variables de tos, dolor pleural,
puede estar producido por:
a) Clostridium tetani b) Mycobacterium tuberculosis
c) Fiebre recurrente d) Fiebre tifoidea
e) Gangrena gaseosa

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 BIBLIOGRAFIA

ADAMS, M. Y MOSS, M. 1998. Microbiologa de los Alimentos.

Acribia, S.A. Zaragoza (Espaa)

ALINA, M.; VEGA, C. Y GARRIDO, T. 1983. Control microbiolgico

de la Leche y productos lcteos. Edit. CLEIBA. Lima
(Per).

BOCK. 1995. Microbiologa. Prentice Hall Mxico

CAPS, A. Y ABRIL, J. 1999. Procesos de Conservacin de Alimentos.

Ediciones Mundi Prensa. Madrid (Espaa).

COLOMA, A. 2003. Microbiologia Agroindustrial. Editorial

Universitaria UNA Puno.

FRAZIER, W 1981.- Microbiologa de los Alimentos, Edit. Acribia

Zaragoza (Espaa)

HAYES, P. 1993. Microbiologa e Higiene de los Alimentos. Editorial

Acribia, S.A. Zaragoza (Espaa).

JACK, L. 1985. Microbiologa de Laboratorio Edit. Interamericana.

Mxico.

LAURA E. 1995, Manual para el control de calidad de los alimentos

Universidad Nacional del altiplano Facultad de Ciencias
Biolgicas, Puno (Per )

MADIGAN, T. 1993 Introduccin a la Microbiologa Editorial

Prentice Hall Hispanoamericana, Espaa

MASSON. 1996. Tratado de Microbiologa. 4ta edicin Barcelona

Espaa.

MENDO M. 1990. Medios de cultivo en Microbiologa Manual de

laboratorio. Tercera edicin Universidad Nacional Mayor
de San Marcos, Facultad de Ciencias Biolgicas.

NICKERSON J. 1981. Microbiologa de los alimentos , Cap. I 278 p.

SAENZ, A. 1987. Manual de tcnicas de Coloracin. Lima Per.

SINELL I 1981. Introduccin a la higiene de los Alimentos,

Adulteracin de Alimentos, Editorial Acribia, Barcelona
Espaa 167p.

168
STUART, W. 2000. Microbiologa. Editorial Mc Graw Hill
Interamericana, Mxico

VOLK, W. 1997. Basic Microbiology. 8va edicin New York Estados

Unidos

169