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Conselho Regional de Medicina Veterinria do Estado de Minas Gerais

PROJETO DE EDUCAO CONTINUADA

o CRMV-MG participando do processo de atualizao


tcnica dos profissionais e levando informaes da
melhor qualidade a todos os colegas.

VALORIZAO PROFISSIONAL
compromisso com voc

www.crmvmg.org.br
Editorial
Caros colegas,
Novamente temos a satisfao de encaminhar co-
munidade veterinria e zootcnica mineira o volume 73
do Cadernos Tcnicos, o segundo fascculo de 2014.
A Escola de Veterinria e o Conselho Regional de
Medicina Veterinria de Minas Gerais, com satisfao
consolidam a parceria e compromisso entre as duas ins-
tituies com relao Educao Continuada da comu-
nidade dos mdicos veterinrios e zootecnistas de Minas
Gerais.
O presente nmero aborda, de forma objetiva, a te-
mtica sobre Sanidade em Organismos Aquticos, dis-
correndo sobre relevantes pontos das principais enfer-
midades que acometem a piscicultura nacional. O tema
apresentado importante, uma vez que a Sanidade de
Organismos Aquticos uma rea pouco conhecida pe-
los mdicos veterinrios e zootecnistas, mas que possui
alta relevncia para a cadeia produtiva do peixe de gua
doce. Deste modo, este volume poder contribuir para
o melhor entendimento destas questes pelos profissio-
nais da rea, alm de apresentar os problemas e solues
queles que querem se iniciar nesta rea.
Com este nmero do Cadernos Tcnicos esperamos
contribuir tanto para a conscientizao quanto para a in-
Universidade Federal formao dos colegas, auxiliando para que possam cons-
de Minas Gerais
truir as melhores opes de atendimento aos desafios
Escola de Veterinria de um novo setor em franca expanso na produo de
Fundao de Estudo e Pesquisa em
Medicina Veterinria e Zootecnia alimentos em nosso pas.
- FEPMVZ Editora
Portanto, parabns comunidade de leitores que uti-
Conselho Regional de lizam o Cadernos Tcnicos para aprofundar seu conhe-
Medicina Veterinria do
Estado de Minas Gerais cimento e entendimento sobre Sanidade de Organismos
- CRMV-MG
Aquticos, em benefcio da sociedade.
www.vet.ufmg.br/editora Prof. Antonio de Pinho Marques Junior
Correspondncia: Editor-Chefe do Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia (ABMVZ) -
CRMV-MG n 0918
FEPMVZ Editora
Caixa Postal 567 Prof. Jos Aurlio Garcia Bergmann
30161-970 - Belo Horizonte - MG Diretor da Escola de Veterinria da UFMG - CRMV-MG n 1372
Telefone: (31) 3409-2042 Prof. Marcos Bryan Heinemann
Editor do Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia - CRMV-MG n 1372
E-mail:
editora.vet.ufmg@gmail.com Prof. Nivaldo da Silva
Presidente do CRMV-MG - CRMV-MG n 0747
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Prof. Nivaldo da Silva
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CADERNOS TCNICOS DE
VETERINRIA E ZOOTECNIA
Edio da FEPMVZ Editora em convnio com o CRMV-MG
Fundao de Estudo e Pesquisa em Medicina Veterinria e
Zootecnia - FEPMVZ
Editor da FEPMVZ Editora:
Prof. Antnio de Pinho Marques Junior
Editor do Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia:
Prof. Marcos Bryan Heinemann
Editores convidados para esta edio:
Danielle Ferreira de Magalhes Soares
Pedro Lcio Lithg
Revisora autnoma:
Angela Mara Leite Drumond
Tiragem desta edio:
9.300 exemplares
Layout e editorao:
Solues Criativas em Comunicao Ldta.
Impresso:
O Lutador

Permite-se a reproduo total ou parcial,


sem consulta prvia, desde que seja citada a fonte.

Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia. (Cadernos Tcnicos da Escola de Veterinria da


UFMG)
N.1- 1986 - Belo Horizonte, Centro de Extenso da Escola deVeterinria da UFMG, 1986-1998.
N.24-28 1998-1999 - Belo Horizonte, Fundao de Ensino e Pesquisa em Medicina Veterinria e
Zootecnia, FEP MVZ Editora, 1998-1999
v. ilustr. 23cm
N.29- 1999- Belo Horizonte, Fundao de Ensino e Pesquisa em Medicina Veterinria e
Zootecnia, FEP MVZ Editora, 1999Periodicidade irregular.
1. Medicina Veterinria - Peridicos. 2. Produo Animal - Peridicos. 3. Produtos de Origem
Animal, Tecnologia e Inspeo - Peridicos. 4. Extenso Rural - Peridicos.
I. FEP MVZ Editora, ed.
Prefcio
Henrique Csar Pereira Figueiredo - CRMV-MG 5839
Carlos Augusto Gomes Leal - CRMV-MG 7296
Professores de Sanidade e Doenas de Animais Aquticos da Escola de
Veterinria da Universidade Federal de Minas Gerais

A aquicultura uma nova fronteira do


agronegcio brasileiro. Com difuso por
todo o territrio nacional, a produo de
animais aquticos atingiu, em 2001, a marca
de 628 mil toneladas, e com estimativa de
crescimento de 20% ao ano. Nesse cenrio
o Brasil ocupa o segundo lugar no ranking
de pases produtores das Amricas, deven-
do em 2015, atingir a primeira posio. Na
aquicultura brasileira destaca-se a produo
da tilpia do Nilo e de espcies de peixes na-
tivos, como o tambaqui, pacu e os hbridos
de pintado. Juntamente com esse aumento
de produo temos tambm um desafio
significativo para os mdicos veterinrios e
demais tcnicos da aquicultura quanto aos
aspectos sanitrios da produo. Nos lti-
mos anos diversas doenas infecciosas tm
sido caracterizadas nas pisciculturas do pas,
muitas vezes causando perdas econmicas
e atingindo taxas de mortalidade elevadas.
Nessa edio de Cadernos Tcnicos ns
abordaremos as principais doenas infec-
ciosas que ocorrem frequentemente nos sis-
temas de produo de peixes, bem como as
alternativas disponveis para o seu controle
e preveno. Muitas dessas doenas so con-
sideradas como emergentes na aquicultura
mundial, o que torna a difuso de novos co-
nhecimentos estratgica para a atuao dos
mdicos veterinrios que atuam nesse ramo
da produo animal.
Sumrio

1 Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes.......9


Frederico Augusto de Alcntara Costa;
Carlos Augusto Gomes Leal (CRMV-MG 9014);
Henrique Csar Pereira Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes de gua doce, uma
doena emergente e perigosa.

2 Columnariose em peixes de gua doce.......................................................20


Gustavo M. Barony;
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839);
Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014)
Columnariose em peixes: ocorrncia, sinais clnicos, diagnstico, tratamento e
controle em piscicultura.

3 Septicemia por Aeromonas mveis em peixes...........................................33


Thais F. Oliveira;
Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340);
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839);
Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014)
O artigo aborda os principais aspectos tericos e prticos dos casos de
septicemia por Aeromonas mveis em peixes cultivados.

4 Infeco por Streptococcus iniae em peixes...............................................45


Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340);
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839);
Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014)
Infeco por Streptococcus iniae em peixes: manifestao clnica, ocorrncia e
impacto para a piscicultura mundial.

5 Infeco por Weissella ceti em peixes.........................................................57


Frederico Augusto de Alcntara Costa;
Carlos Augusto Gomes Leal (CRMV-MG 9014);
Henrique Csar Pereira Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Doena septicmica por Weissella ceti enfermidade emergente na truticultura
brasileira.
6 Antibioticoterapia em peixes....................................................................66
Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340);
Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014);
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Antibioticoterapia em peixes: principais drogas, vias de administrao e
objetivos do tratamento.

7 Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas...79


Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340);
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839);
Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014)
O presente artigo descreve os principais procedimentos para coleta e remessa de
peixes para o diagnstico de doenas infecciosas.
1. Infeco por bigstockphoto.com

Streptococcus
dysgalactiae subsp.
dysgalactiae em peixes
Frederico Augusto de Alcntara Costa1
Carlos Augusto Gomes Leal2 (CRMV-MG 9014)
Henrique Csar Pereira Figueiredo2* CRMV-MG 5839)
1
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, Faculdade de Medicina Veterinria/UFU
2
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, DMVP, Escola de Veterinria/UFMG
*autor para correspondncia: figueiredoh@yahoo.com

1. Introduo gnero Seriola (amberjack e yello-


wtail) em pases asiticos. A bactria
A infeco causada pela bactria
Streptococcus dysgalactiae subsp. dysga- causa leses granulomatosas na muscu-
lactiae (SDD) bem descrita em peixes latura dos peixes, geralmente no pedn-
marinhos cultivados, causando perdas culo caudal.
econmicas sig- No ano de
nificativas princi- No ano de 2007, esse patgeno foi 2007, esse pa-
palmente para a identificado como causador de surto tgeno foi iden-
cadeia produtiva de infeco em uma fazenda de tilpia tificado como
de espcies do do Nilo no Estado do Cear, Brasil. causador de
1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 9
surto de infeco em dysgalactiae (SDD),
No ano de 2007, esse
uma fazenda de tilpia do geralmente causador
pat SDD tambm
Nilo no Estado do Cear, de doenas em animais
descrita como um
Brasil. O principal sinal domsticos1,2. Em se-
patgeno emergente
clnico observado foi a res humanos, a bactria
na piscicultura,
presena de abscessos na provocando leses SDE causa principal-
musculatura na regio da granulomatosas mente faringite, alm
base da nadadeira caudal na musculatura de de leses superficiais,
de alguns animais acome- peixes marinhos e de como celulite e forma-
tidos. Esse foi o primeiro gua doce geno foi o de abscessos3. A
relato de infeco por S. identificado como subespcie SDD bem
dysgalactiae subsp. dysga- causador de surto caracterizada como
lactiae em peixe de gua de infeco em uma causadora de endome-
doce. Desde ento, di- fazenda de tilpia do trite, mastite clnica e
versos surtos vm sendo Nilo no Estado do subclnica, artrite e ce-
observados em tilapicul- Cear, Brasil. lulite em bovinos, alm
turas na regio Nordeste de relatos de bactere-
do Brasil. Apesar das ta- mia, menigoencefalite e
xas moderadas de mortalidade durante mastite em ovinos4,5,6. SDD tambm
os surtos por SDD em tilpias, a doena descrita como um patgeno emergen-
tem causado perdas econmicas para os te na piscicultura, provocando leses
produtores, seja pela queda no desem- granulomatosas na musculatura de
penho produtivo ou pela condenao da peixes marinhos e de gua doce7,8.
carcaa dos peixes que apresentam leses Os isolados de S. dysgalactiae
na musculatura. Outro agravante da do- subsp. dysgalactiae causadores de do-
ena a presena de abscessos que po- ena em peixes so classificados como
dem reduzir a eficincia da antibiotico- estreptococos -hemoltico perten-
terapia em lotes de animais acometidos, cente ao grupo C de Lancefield, cata-
dificultando que o quadro de infeco lase negativo e oxidase positivo9.
seja debelado.
3. Epidemiologia
2. Etiologia
Streptococcus dysgalactiae uma bac- 3.1 Espcies susceptveis
tria gram-positiva dividida em duas O primeiro relato de infeco por
subespcies: S. dysgalactiae subsp. S. dysgalactiae subsp. dysgalactiae em
equisimilis (SDE), patgeno restrito peixes ocorreu no Japo, em 2002. A
de humanos; e S. dysgalactiae subsp. bactria foi isolada de duas espcies ma-
10 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
rinhas cultivadas: amberjack (Seriola 3.2 Distribuio
dumerili) e yeollowtail (Seriola quin-
Entender a distribuio dos isola-
queradiata). Os animais acometidos
dos de um determinado patgeno e as
apresentavam reas com leses necrti-
relaes entre essas amostras essencial
cas, principalmente na regio do pedn-
dentro dos estudos epidemiolgicos
culo caudal7. Desde o primeiro relato,
para maior conhecimento da doena
surtos causados por SDD em fazendas provocada por esse agente e para o de-
de peixes marinhos tm sido descritos, senvolvimento de mtodos de controle
incluindo diversas espcies, como: kin- mais eficazes. Atualmente, os estudos de
gfish (Seriola lalandi), tainhas (Mugil diversidade gentica dos isolados utili-
cephalus, Liza alata, Liza haematochei- zando ferramentas de genotipagem di-
la), pompano (Trachinotus blochii), es- versas associados aos dados epidemio-
turjo (Acipenser schrenkii) e beijupir lgicos da doena, que recebe o nome
(Rachycentrum canadum)10,11,12,13. de epidemiologia molecular, vm con-
Em 2007 foi relatado o primeiro tribuindo para o conhecimento mais
caso de infeco por aprofundado do patge-
SDD em peixes de gua no e sua distribuio.
Animais dos
doce. O surto aconte- Uma variabilidade
lotes acometidos
ceu em uma fazenda de
apresentavam abscessos gentica de isolados de
produo de tilpia do uma mesma espcie de
na musculatura,
Nilo (Oreochromis niloti- patgeno pode implicar
principalmente na
cus) em tanques-rede no mtodos de controle
regio da base da
Estado do Cear, Brasil8. nadadeira. diferenciados, devido a
Alguns animais dos lotes diferentes perfis de sus-
acometidos apresenta- ceptibilidade aos antibi-
vam abscessos na musculatura, princi- ticos. Alm disso, essa diversidade ge-
palmente na regio da base da nadadei- ntica pode estar relacionada tambm a
ra, assim como observado em infeces uma conformao antignica diferente
por SDD em peixes marinhos7. Surtos entre os isolados, no havendo uma
causados por esse patgeno continu- proteo cruzada no desenvolvimento
am ocorrendo em cultivos de tilpia do de uma vacina homloga. E, ainda, os
Nilo em tanque-rede nos Estados do estudos genticos nos auxiliam no en-
Nordeste do pas, e em alguns casos os tendimento dos resultados epidemiol-
lotes acometidos esto sendo diagnosti- gicos sobre distribuio e disseminao
cados com infeces concomitantes de do patgeno.
Streptococcus dysgalactiae subsp. dysga- As infeces por SDD em peixes
lactiae e Streptococcus agalactiae .
14,15
marinhos ocorrem em grande par-
1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 11
te do continente asitico, acometen- discriminatrio e revelou a presena
do pisciculturas de diversas regies de trs perfis genticos diferentes. Os
do Japo, China, Taiwan, Malsia e resultados demonstraram tambm que
Indonsia9,10,11. As amostras de SDD os padres genticos distintos esto
oriundas dos diferentes pases apresen- relacionados origem geogrfica dos
tam diversidade gentica considervel. mesmos no Brasil14.
Estudos utilizando o BSFGE (Biased
Sinusoidal Field Gel Electrophoresis) 4. Manifestao clnica
como mtodo de genotipagem de- Dependendo do estgio e do grau
monstram que os isolados de S. dysga- de infeo por S. dysgalactiae subsp.
lactiae subsp. dysgalactiae da Malsia e dysgalactiae, os peixes acometidos po-
Indonsia apresentam um padro ge- dem apresentar escurecimento da pele
ntico diferente e baixa relao epide- e alteraes comportamentais, como
miolgica com as amostras dos outros hiporexia e letargia. A presena de le-
pases asiticos16. ses no tecido muscular e/ou subcut-
No Brasil a bactria SDD foi isola- neo, como eroses, ulceraes e, prin-
da de dois Estados: Cear e Alagoas. Os cipalmente, abscessos, so os sinais
sinais clnicos observados nos animais clnicos mais evidentes observados nas
cultivados em fazendas de ambos os diferentes espcies susceptveis11,17,18.
Estados foram similares. Um estudo de Essas leses possuem uma maior pre-
genotipagem dos isolados dos surtos disposio de se desenvolverem no pe-
ocorridos no pas foi realizado recen- dnculo caudal, na musculatura prxi-
temente. Foram testadas tcnicas mo- ma base da nadadeira caudal (Figuras
leculares como sequenciamento de um 1 e 2)17,11. No entanto, em alguns casos,
gene bastante conserva- as leses podem ser ob-
do para essa espcie, o Os peixes acometidos servadas na base das na-
sodA, mtodos baseados podem apresentar dadeiras peitorais e dor-
na tcnica de reao em escurecimento da sal (Figuras 3 e 4)17,18,19.
cadeia pela polimerase pele e alteraes Essas leses acarretam
(PCR - ERIC e REP- comportamentais, como em perdas econmicas
PCR), alm da tcni- hiporexia e letargia. significativas, uma vez
ca de eletroforese em A presena de leses que aumenta a taxa de
campo pulstil (PFGE). no tecido muscular e/ carcaas descartadas
Dentre os mtodos de ou subcutneo, como durante o abate e pro-
genotipagem, o PFGE eroses, ulceraes
cessamento de pescado
foi considerado a tc- e, principalmente,
no frigorfico.
nica com maior poder abscessos.
12 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Figura 1. Presena de ulceraes (setas) no
pednculo caudal de peixe da espcie Seriola
dumerili17.

Figura 2. Tilpia do Nilo apresentando au-


mento de volume na regio da base da nada-
deira caudal, sugestivo de abscesso. Animal
examinado durante surto de infeco por
SDD em uma tilapicultura no Brasil.

Figura 3. Presena de abscessos subcutneos


(setas) na base das nadadeiras caudal e dor-
sal em tilpia do Nilo infectada experimental-
mente por SDD.

Figura 4. Presena de contedo purulento


inciso do abscesso (elipse).

1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 13


5. Patogenia Em peixes marinhos
al e intramuscular8,19.
Contudo, o padro de
Ainda se tem pou- do gnero Seriola,
transmisso observado
co conhecimento a res- infeces experimentais
nas fazendas brasileiras
peito dos mecanismos utilizando rotas no
sugere que a gua tam-
utilizados pela bactria invasivas, como imerso
em gua contendo a bm seja um fator disse-
S. dysgalactiae subsp.
bactria e a via oral, minador, como observa-
dysgalactiae durante
so capazes de causar a do para Seriola sp9.
a infeco em peixes.
doena. Alguns estudos de-
Estudos histopatolgi-
monstram que a viru-
cos de peixes marinhos
lncia desse patgeno
acometidos por SDD demonstram
em peixes est comumente associada
um quadro de septicemia durante a
alta capacidade de se aderir e invadir os
infeco. Observou-se a presena de
tecidos do hospedeiro. Essa habilidade
infiltrados inflamatrios no somente
da bactria SDD favorecida pelas pro-
no pednculo caudal, como tambm
priedades hidrofbicas e a alta capacida-
no corao e no bao18. Alm disso,
de de hemaglutinao de sua superfcie
foram observados microabscessos sis-
celular8.
tmicos e inflamaes granulomatosas
multifocais, sugestivos de embolismo Alm disso, outras hipteses tm
bacteriano17. sido levantadas quanto aos possveis
Quanto s vias de infeco da bac- mecanismos de virulncia do patgeno.
tria, diversas rotas foram testadas em Por exemplo, a presena de genes que
laboratrio para tentar entender o in- codificam a exotoxina streptolisina S
cio do processo infeccioso. Em peixes em isolados de SDD de peixes indicam
marinhos do gnero Seriola, infeces a importncia dessa hemolisina na pato-
experimentais utilizando rotas no in- gnese da doena20.
vasivas, como imerso em gua conten-
do a bactria e a via oral, so capazes de 6. Fatores predisponentes
causar a doena com reproduo dos Apesar de no haverem estudos de-
sinais clnicos, como o aparecimento talhados, os fatores que predispem ao
de abscessos na mus- desenvolvimento da do-
culatura18. Em tilpias O padro de ena causada por SDD
do Nilo, a reproduo transmisso observado parecem ser semelhantes
da doena somente foi nas fazendas brasileiras queles descritos para
possvel utilizando vias sugere que a gua outras infeces bacte-
invasivas de infeco, tambm seja um fator rianas em peixes, prin-
ou seja, intraperitone- disseminador. cipalmente as estrepto-
14 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
cocoses. Dentre esses dissolvido abaixo de 2
Baixas concentraes
fatores, destacam-se as mg/L e baixa renovao
de oxignio dissolvido
baixas concentraes de de gua) e altas densi-
na gua, aumento das
oxignio dissolvido na dades de estocagem, os
taxas de compostos
gua, aumento das taxas nitrogenados animais infectados apre-
de compostos nitroge- (principalmente sentaram as leses ca-
nados (principalmente amnia e nitrito) ractersticas da doena,
amnia e nitrito) e ele- e elevao da como abscessos no pe-
vao da temperatura temperatura da gua. dnculo caudal19.Essas
da gua. Todos esses fa- observaes sugerem
tores esto correlaciona- que fatores que causam
dos e geralmente ocorrem em fase final estresse aos peixes e que ao mesmo tem-
de produo, quando as densidades de po favorecem um maior crescimento da
estocagem de peixes so maiores e as bactria so cruciais para a ocorrncia
taxas de arraoamento so consequen- dos surtos de SDD em tilpia do Nilo.
temente mais elevadas, em especial nos Em peixes marinhos, embora a in-
perodos mais quentes do ano. Isso fa- feco por SDD ocorra tambm somen-
vorece a queda na qualidade da gua e te em fase final de abate (acima de 0,5
uma maior susceptibilidade dos peixes kg) e em altas densidades de estocagem,
infeco por Streptococcus dysgalactiae as infeces experimentais foram capa-
subsp. dysgalactiae. Alm disso, esse pa- zes de reproduzir os sinais clnicos da
tgeno tem uma maior taxa de cresci- doena mesmo na ausncia de fatores
mento em temperaturas mais elevadas, predisponentes, ou seja, em animais de
sendo observados os surtos em tilpia menor peso e com menor densidade de
do Nilo produzidas em tanque-rede ge- peixes11,17. Isso pode representar uma
ralmente em ocasies em que a tempe- maior virulncia das amostras de SDD
ratura da gua est acima dos 30oC15,19. isoladas de peixes marinhos e/ou uma
Em laboratrio no foi possvel re- maior susceptibilidade destes em rela-
produzir os sinais clnicos em tilpias o tilpia do Nilo.
do Nilo na ausncia dos fatores predis-
ponentes, mesmo em doses bacterianas Diagnstico
elevadas e utilizando rotas de infeco As alteraes causadas pela infeco
invasivas . Quando as mesmas doses por SDD em peixes, como abscesso e
8

do patgeno foram utilizadas durante ulceraes na base da nadadeira caudal,


infeco experimental, mas reproduzin- embora sejam caractersticas, no po-
do em condies laboratoriais os fatores dem ser consideradas leses patogno-
de baixa qualidade de gua (oxignio mnicas da doena. A presena de abs-
1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 15
cessos na musculatura exame diagnstico.
O diagnstico
pode ser observada tam- Os meios de cultivo
conclusivo da doena
bm em outras doenas a serem utilizados para o
realizado pelo
bacterianas, como no isolamento de SDD so:
isolamento bacteriano
caso das infeces por e subsequente gar base suplementado
Streptococcus agalactiae identificao utilizando com sangue a 10% (gar
e Streptococcus iniae21. mtodos fenotpicos e/ sangue); BHI gar (in-
Portanto, no se pode ou moleculares. fuso crebro corao);
dar um diagnstico con- THA (Todd-Hewitt
clusivo de S. dysgalactiae gar); e gar Congo Red.
subsp. dysgalactiae em peixes somente O crescimento bacteriano ocorre a uma
pela observao das leses. temperatura tima de 28oC por um pe-
O diagnstico conclusivo da doena rodo de 24 a 72 horas13.
realizado pelo isolamento bacteriano Aps o isolamento, os testes de tria-
e subsequente identificao utilizando gem a serem realizados so gram, catala-
mtodos fenotpicos e/ou moleculares. se e oxidase. Os resultados obtidos so
Os peixes a serem coletados para reali- a observao de coccos gram-positivos
zao do diagnstico devem ser animais ao microscpio e identificado como ca-
vivos que apresentem os sinais clnicos talase negativo e oxidase positivo. Para
da doena e que no tenham sido tra- confirmao do diagnstico, devem ser
tados com nenhum antibitico nos 10 realizados outros testes fenotpicos e/
dias que precedem a coleta. Os tecidos ou moleculares.
de eleio para exame bacteriolgico so A identificao do grupo de
crebro, rim, bao e fgado, devendo ser Lancefield utilizando kits comerciais de
feita a coleta de fragmentos ou swab soroaglutinao so relativamente sim-
de tecido de forma assptica. No caso ples de serem realizados, e o resultado
do diagnstico de SDD, importante a ser observado para SDD ser positivo
que o animal com suspeita da doena para o grupo C. Outros exames fenot-
seja enviado inteiro, e no fragmento de picos podem ser realizados, como o tes-
tecidos coletados por necropsia, para te de provas bioqumicas utilizando o
que o exame bacteriolgico seja realiza- API 20 Strep8.
do de forma mais abrangente e eficaz. O Quanto aos testes moleculares, exis-
isolamento do agente das leses, como te disponvel a sequncia de primers
abscessos, eroses ou ulceraes, no para uma PCR S. dysgalactiae especfica,
recomendado devido alta contamina- que pode ser utilizada como a confir-
o por bactrias ambientais no tecido mao mais acurada do diagnstico22. A
lesionado, reduzindo a eficincia do extrao de DNA de amostras de SDD
16 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
para a PCR pode ser re- anorexia marcante como
O principal tratamento
alizada pelas metodo- observado em outras in-
recomendado em
logias padro utilizadas feces bacterianas15,19.
casos de surtos por S.
para bactrias gram-po- dysgalactiae subsp. Por outro lado, a presen-
sitivas ou com kit comer- dysgalactiae a a de abscessos na mus-
cial de extrao de DNA. antibioticoterapia oral. culatura pode reduzir a
eficincia do antibitico,
Tratamento
diminuindo sua atuao
O principal tratamento recomenda- frente s clulas bacterianas no interior
do em casos de surtos por S. dysgalactiae da leso, seja pela membrana que envol-
subsp. dysgalactiae a antibioticoterapia ve a regio, criando uma barreira fsica,
oral. No Brasil, somente os antibiticos ou pelo baixo pH que pode reduzir a ati-
base de florfenicol so aprovados pelo vidade do antimicrobiano15,19,24.
Ministrio da Agricultura Pecuria e
Abastecimento (MAPA) para o uso em Controle e preveno
tilpias23. O controle e a preveno da doen-
As amostras de SDD isoladas de a causada por SDD em peixes depen-
peixes marinhos e de tilpia apresen- dem fundamentalmente de um manejo
tam, at o momento, um perfil de sen- sanitrio bem estabelecido na fazenda
sibilidade ao florfenicol. Por outro lado, e do diagnstico adequado em casos de
um grande nmero de amostras isoladas surtos. A inspeo dos peixes durante
de peixes marinhos resistente oxite- o processo de abate importante para
traciclina e possui o gene de resistncia identificar possveis leses na muscu-
tet M9. latura, sugestivas de infeco por SDD.
Ainda existem muitas questes a se- Em algumas fazendas, a doena pode es-
rem esclarecidas quanto eficincia real tar ocorrendo sem que o produtor per-
da antibioticoterapia in ceba, uma vez que no
vivo em peixes infecta- O controle e a existem taxas de morta-
dos por SDD. Por um preveno da doena lidade considerveis. A
lado, o quadro clnico da causada por SDD identificao da doena
doena parece facilitar o em peixes dependem o quanto antes permite
tratamento por via oral, fundamentalmente de a adoo de medidas que
uma vez que os animais um manejo sanitrio evitem a proliferao in-
acometidos continuam a bem estabelecido desejada do patgeno,
se alimentar mesmo que na fazenda e do que poder acometer
em menores taxas, mas diagnstico adequado outros lotes, causando
no apresentam uma em casos de surtos. perdas econmicas con-
1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 17
siderveis pelo descarte da carcaa de dysgalactiae species group: gene content, molecular
adaptation, and promoter evolution. Genome Biol.
animais que apresentarem leses. Evol., v.3, p.168185, 2011.
Na sia, uma vacina monovalente 3. BROYLES LN, VAN BENEDEN C, BEALL B, et
inativada contra SDD para preveno al. Population-based study of invasive disease due
da doena em peixes do gnero Seriola to -hemolytic streptococci of groups other than A
and B. Clin Infect Dis;48:706-12, 2009.
foi patenteada25. No Brasil, no foi de-
4. AARESTRUP, F.M.; JENSEN, N.E. Genotypic
senvolvido, at o momento, nenhum and phenotypic diversity of Streptococcus dysgalac-
imunoprofiltico contra esse agente em tiae strains isolated from clinical and subclinical ca-
ses of bovine mastitis. Vet Microbiol, 53: 31523,
tilpias. No entanto, a vacinao contra 1996.
Streptococcus agalactiae, patgeno mais 5. CHENIER, S.; LECLERE, M.; MESSIER, S. et al.
impactante para a tilapicultura nacional, Streptococcus dysgalactiae cellulitis and toxic shock
like syndrome in a brown Swiss cow. J. Vet. Diagn.
j vem sendo empregada em muitas tila- Invest., v.20, p.99103, 2008.
piculturas. Diante disso, a possibilidade
6. SENO, N. e AZUMA, R. A study on heifer mastitis
de desenvolver uma vacina polivalen- in Japan and its causative microorganisms. Nat Inst
te contra S. agalactiae e S. dysgalactiae Anim Health Q, 23: 8291, 1983.
subsp. dysgalactiae tende a ser uma rea- 7. NOMOTO, R.; MUNASINGHE, L.I.; JIN, D.H.
et al. Lancefield group C Streptococcus dysgalactiae
lidade nos prximos anos, aproveitan- infection responsible for fish mortalities in Japan. J.
do o procedimento de vacinao para Fish Dis., v. 27, n. 12, p. 679-686, 2004.
a proteo de tilpias do Nilo frente a 8. NETTO, L. N.; LEAL, C. A. G.; FIGUEIREDO, H.
dois patgenos presentes na piscicultu- C. P. Streptococcus dysgalactiae as an agent of septi-
caemia in Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.). J.
ra brasileira. Fish Dis., v. 34, n. 9, p. 251-254, 2011.
Uma vacina a ser desenvolvida 9. ABDELSALAM, M.; CHEN, S.C.; YOSHIDA,
contra SDD deve, no entanto, levar em T. Surface properties of Streptococcus dysgalactiae
strains isolated from marine fish. Bull Eur Assoc
considerao a diversidade no perfil ge- Fish Pathol, 29:1523, 2009.
ntico apresentado entre os isolados de 10. ABDELSALAM, M.; ALAA, A.; EISSA, A.
diferentes regies14,19. Essa variabilidade Streptococcus dysgalactiae: An emerging pathogen
gentica pode implicar diferentes perfis of fishes and mammals. International Journal of
Veterinary Science and Medicine, 1, 16, 2013.
antignicos das amostras nacionais de S.
11. NOMOTO, R.; UNOSE, N.; SHIMAHARA, Y. et
dysgalactiae subsp. dysgalactiae. al. Characterization of group C Streptococcus dysga-
lactiae isolated from farmed fish. J. Fish Dis., v. 29, n.
7. Referncias 11, p. 673-682, 2006.

bibliogrficas 12. YANG, W. e LI, A. Isolation and characterization of


Streptococcus dysgalactiae from diseased Acipenser
1. VANDAMME, P.; POT, B.; FALSEN, E. et al. schrenckii. Aquaculture, 294:147, 2009.
Taxonomic study of Lancefield streptococcal
13. QI, Z.T., TIAN, J.Y., ZHANG, Q.H., SHAO, R.,
groups C, G, and L (Streptococcus dysgalactiae) and
QIU, M., WANG, Z.S., WEI, Q.J., HUANG, J.T.
proposal of S. dysgalactiae subsp. equisimilis subsp.
Susceptibility of Soiny Mullet (Liza haematochei-
nov.. Int J Syst Bacteriol, v.46, p. 77481, 1996.
la) to Streptococcus dysgalactiae and physiological
2. SUZUKI, H.; LEFEBURE, T.; HUBISZ, M.J. et al. response to formalin inactivated S. dysgalactiae.
Comparative genomic analysis of the Streptococcus Pakistan Veterinary Journal, 33(2), 234-237, 2013.

18 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


14. COSTA, F.A.A., LEAL, C.A.G, LEITE, R.C., Cincia Animal) Escola de Veterinria/UFMG,
FIGUEIREDO, H.C.P. (2013) Genotyping of Belo Horizonte, MG.
Streptococcus dysgalactiae strains isolated from Nile
tilapia, Oreochromis niloticus (L.). Journal of Fish 20. ABDELSALAM M, CHEN SC, YOSHIDA T.
Diseases, 2013. (doi: 10.1111/jfd.12125) Dissemination of streptococcal pyrogenic exotoxin
G (spegg) with an IS-like element in fish isolates
15. FIGUEIREDO, H. C. P.; LEAL, C. A. G.; of Streptococcus dysgalactiae. FEMS Microbiol
CARVALHO-CASTRO, G. A.. Infeco por Lett;309:10513, 2010.
Streptococcus dysgalactiae: uma nova doena para a
tilpia do Nilo. Panorama da Aquicultura, Rio de 21. FIGUEIREDO, H. C. P.; NETO, L. N.; LEAL,
Janeiro, p. 42 - 49. C.A.G. et al. Streptococcus iniae outbreaks in
Brazilian Nile tilapia (Oreochromis niloticus) farms.
16. ABDELSALAM, M.; CHEN, S., YOSHIDA, Braz. J. Microbiol., vol.43, n.2, pp. 576-580, 2012.
T. Phenotypic and genetic characterizations of
Streptococcus dysgalactiae strains isolated from 22. HASSAN A.A., KHAN I.U. E LAMMLER C.
fish collected in Japan and other Asian countries. Identification of Streptococcus dysgalactiae strains
FEMS Microb. Lett., v. 302, n. 1, p. 32-38, 2010. of Lancefield group C, G and L by polymerase
chain reaction. Journal of Veterinary Medicine 50,
17. HAGIWARA, H., TAKANO, R., NOGUCHI, 161165, 2003.
M., NARITA, M. A study of the lesion induced in
Seriola dumerili by intradermal or intraperitoneal 23. MAPA. MINISTRIO DA AGRICULTURA E
injection of Streptococcus dysgalactiae. Journal of PECURIA. Compndio de produtos veterin-
Comparative Pathology, 140, 25-30, 2009. rios. (2014). Disponvel em: <http://www.cpvs.
com.br/cpvs/index.html>. Acesso em: 25 fev.
18. HAGIWARA, H., TAKANO, R., NOGUCHI, 2014.
M., NARITA, M. Lesions induced in Seriola du-
merili following exposure to Streptococcus dysga- 24. BROOK, I. Microbiology of polymicrobial ab-
lactiae by oral treatment or immersion. Journal of scesses and implications for therapy. Journal of
Comparative Pathology, 143, 262-267, 2010. Antimicrobial Chemotherapy 50, 805810, 2002.

19. COSTA, F.A.A. Molecular epidemiology and de- 25. KYORITSU SEIYAKU KK. RYOKO, T.
velopment of vaccines against emerging pathogens Inactivated vaccine using fish Streptococcus dysga-
for Brazilian fish farming: Streptococcus dysgalac- lactiae as antigen. JP 2007-326794A. 20 dez., 2007.
tiae and Weissella ceti. 2013. 64f. Tese (Doutorado,

1. Infeco por Streptococcus dysgalactiae subsp. dysgalactiae em peixes 19


2. Columnariose em
peixes de gua doce

Gustavo Morais Barony


Henrique Csar Pereira Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos Augusto Gomes Leal* (CRMV-MG 9014)
*carlosleal@vet.ufmg.br

1. Introduo pactante, a segunda enfermidade que


mais causa prejuzos indstria ameri-
A columnariose uma das princi-
cana do bagre-do-canal (Ictalurus punc-
pais doenas infecciosas de peixes de
tatus)2. No Brasil, no existem dados
gua doce em todo o mundo. Essa en-
sobre seu impacto na
fermidade causada pela
bactria Flavobacterium A columnariose uma produo de peixes; po-
columnare, que acomete das principais doenas rm, surtos da doena
tanto peixes cultivados infecciosas de peixes de so frequentemente ob-
como de vida livre. H gua doce em todo o servados nas piscicultu-
relatos da infeco por mundo. ras nacionais3,4,5,6.
F. columnare em carpas, Apesar de ser um pa-
bagres, salmondeos, enguias, tilpias tgeno clssico de peixes
e peixes ornamentais1. Altamente im- e h bastante tempo caracterizado, esse
20 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
microrganismo continua frequentemente isolado
Um dos principais
sendo um dos principais do muco de superfcie
problemas sanitrios
problemas sanitrios e brnquias de peixes
para a piscicultura de
para a piscicultura de de gua de doce1,6,8. F.
gua doce no Brasil.
gua doce no Brasil3,4,5,6. columnare capaz de
Essa bactria um entra- sobreviver na gua de
ve principalmente para produo de for- cultivo por at dois anos, mantendo sua
mas jovens (larvas, alevinos e juvenis), infectividade por at cinco meses9. A
essenciais para a viabilidade da cadeia ocorrncia dessa doena est associada
produtiva pisccola de a fatores predisponentes
espcies nativas e exti- Flavobacterium que aumentam a suscep-
cas no pas. Ao longo do columnare o tibilidade dos animais
texto sero descritos os agente etiolgico da ao agente etiolgico.
principais aspectos te- columnariose. Amostras com alta vi-
ricos e prticos relacio-
nados ocorrncia dessa Tabela 1 Caractersticas fenotpicas
doena, bem como seu diagnstico, tra- da bactria Flavobacterium
columnare12
tamento, preveno e controle.
2. Agente etiolgico: Teste fenotpico Resultado
taxonomia e diversidade Produo de flexirrubina +
gentica Absoro de Vermelho-Congo +
Flavobacterium columnare o agente Produo de Catalase +
etiolgico da columnariose. O primeiro Reduo de Nitrato +
relato de ocorrncia da doena data de Produo de H2S +
19227. Fenotipicamente essa bactria Hidrlise de quitina -
caracterizada como: bastonete longo, Hidrlise de colgeno +
gram-negativo, mvel (com motilidade Hidrlise de tirosina +
do tipo gliding ou, na traduo literal do Hidrlise de DNA +
ingls, motilidade por deslizamento), Hidrlise de lecitina +
forma colnias com diferentes morfolo- Crescimento em TSB* -
gias, com colorao amarelada (produz Crescimento a 15C +
um pigmento denominado flexirrubi- Crescimento a 37C +
na) e no cresce em meios de cultura Crescimento em 0% de NaCl +
convencionais (Tabela 1). Pertencente Crescimento em 0,5% de NaCl +
famlia Flavobacteriaceae, esse patge-
Crescimento acima de 1% NaCl -
no amplamente disseminado em am-
bientes dulccolas, bem como tem sido *
Caldo Soja Tripticasena

2. Columnariose em peixes de gua doce 21


rulncia podem infectar foi reclassificada como
Flavobacterium
peixes sadios; porm, Flavobacterium colum-
columnare no
fatores de risco que pro- nare13, sendo a deno-
cresce nos meios de
movem exacerbado es- minao aceita e ado-
cultura utilizados
tresse nos peixes provo- tada pelo Manual de
convencionalmente
cam o desencadeamento Bergey de Bacteriologia
para o isolamento de
de surtos .
10,11 Sistemtica.
bactrias patognicas
Desde sua primei- Flavobacterium co-
para peixes, como
ra descrio em 1922, gar sangue, gar soja lumnare uma bactria
esse microrganismo so- que apresenta peculiari-
tripticasena e gar
freu diversas alteraes nutriente dades quanto ao seu iso-
na denominao de sua lamento e cultivo in vitro.
espcie bacteriana . 1,13 No cresce nos meios de
Inicialmente, devido sua morfologia cultura utilizados convencionalmente
microscpica de bastonetes finos e alon- para o isolamento de bactrias patogni-
gados, e a apresentao clnica da do- cas para peixes, como gar sangue, gar
ena caracterizada por leses na regio soja tripticasena e gar nutriente . Em
1

dorsal dos peixes, foi classificado como geral, o cultivo desse microrganismo
Bacillus columnaris. Aps o primeiro realizado em meios relativamente po-
isolamento em meio de cultura, foi pos- bres em nutrientes, mas com a presena
svel sua caracterizao fenotpica e a de algumas substncias essenciais para seu
determinao de sua similaridade com crescimento, como no caso o colgeno. Os
os membros da ordem Myxobacteria. principais meios de cultura utilizados para
Como possua a capacidade de degra- isolamento de F. columnare so: meio de
dao de colgeno, essa bactria foi Ordal; caldo ou gar Shieh (na sua verso
renomeada como Chondrococcus colu- original ou15modificado); e no meio de
mnaris14. Posteriormente, foi reclassi- Hsu-Shotts (MHS) (Tabela 2).
ficada como Flexibacter columnaris12, Tabela 2 Composio do meio de
sendo alocada taxonomicamente na Hsu-Shotts (MHS)
famlia Flavobacteriaceae . A doena
13

causada por esse microrganismo foi Ingrediente Quantidade (g/L)


conhecida por muitos anos como flexi- Gelatina (colgeno) 3

bacteriose, sendo que alguns materiais Triptona 2


didticos disponveis atualmente ainda Extrato de Levedura 0,5
utilizam essa denominao. Finalmente, Cloreto de clcio 0,15
em 1996, aps a realizao de estudos gar Bacteriolgico* 15
de taxonomia polifsica, essa bactria Para meio slido. Para caldo MHS, no usar o gar.
*

22 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


Em condies de cultivo, essa bact- ao banco de bactrias do Laboratrio
ria pode apresentar quatro morfologias de Doenas de Animais Aquticos
de colnia distintas16: lisa e rizoide, com AQUAVET (Escola de Veterinria
colorao amarelada; rugosa e rizoide, UFMG) apresentam essa morfologia,
com bordas irregulares e de colorao independentemente do hospedeiro de
mais alaranjada; lisa, de bordas arredon- origem.
dadas e colorao amarelada; e, por fim, A dificuldade da diferenciao de
lisa, polimrfica, de colorao branca isolados de F. columnare por anlises fe-
levemente amarelada. notpicas acarretou o desenvolvimento
Independentemente da morfolo- de tcnicas de biologia molecular para
gia, as colnias mantm-se fortemente estudos de diversidade intraespecfica2.
aderidas ao gar, e o morfotipo mais A anlise de polimorfismos no tamanho
comumente encontrado nos isolados de fragmentos de restrio (RFLP) do
de peixes o rugosa-rizoide16 (Figura gene 16S do RNA ribossmico (rRNA)
1). Amostras com essa morfologia tm foi padronizada e tem sido utilizada para
sido descritas como mais virulentas que avaliar a diversidade gentica desse mi-
isolados com demais morfotipos16. No crorganismo2,17,18,19,20,21. Essa metodolo-
Brasil, todos os isolados pertencentes gia permitiu a discriminao das amos-

Figura 1: Isolado de F. columnare em gar MHS, onde pode ser verificada a morfologia rugosa-rizoide
com colorao amarela caracterstica das colnias.

2. Columnariose em peixes de gua doce 23


tras de F. columnare em trs variantes 3. Patognese e caracterizao
genticas, ou genomovars2,18,21. A dis- clnica da doena
tribuio mundial desses genomovars A patognese da doena est asso-
ainda pouco conhecida, mas diversos ciada: sntese e secreo de enzimas e
estudos dos isolados permitiram uma fatores de virulncia que propiciam a in-
associao do genomovar e grau de feco e degradao tecidual; e adeso
virulncia com diferentes temperatu- s superfcies corpreas e tecido bran-
ras2,19,22. O genomovar I tem uma abran- quial. A enzima condroitina-AC-liase e
gncia global19, sua ocorrncia j foi des- diversas proteases que degradam com-
crita na Europa, Amrica ponentes do tegumento
do Norte, sia e, pela O genomovar II tem e tecido muscular (como
primeira vez, em amos- sido frequentemente o cido hialurnico e
tras de tilpias do Nilo isolado de peixes de sulfato de condroitina)
(Oreochromis niloticus) clima tropical e so os principais fatores
no Brasil3. Entretanto, incapaz de crescer na de virulncia associados
sua virulncia e frequ- temperatura de 15. J degradao tecidual,
ncia so maiores em foi isolado de surtos na propiciando a infeco
peixes de clima tempe- piscicultura brasileira e que ocasionam as le-
rado, principalmente sal- de duas espcies nativas. ses verificadas durante
mondeos19, e isolados a infeco nos peixes20,23.
dessa variante podem crescer entre 15 Alm desses, sua aderncia s superf-
e 37C21. O genomovar II tem sido fre- cies corpreas (pele, brnquias e na-
quentemente isolado de peixes de clima dadeiras) tem sido descrita como uma
tropical e incapaz de crescer na tem- etapa fundamental na patognese da
peratura de 15C2,10,19,22. Essa variante doena24. Com o acometimento de regi-
o principal associado a surtos de colu- es amplas da pele e tecido branquial, a
mnariose na produo do mais impor- infeco pode evoluir para um processo
tante peixe da piscicultura americana, o septicmico, culminando com a morte
bagre-do-canal (Ictalurus punctatus), e j dos animais24,25.
foi isolado de surtos na Os principais fatores
piscicultura brasileira de Fatores de risco: de risco para ocorrncia
duas espcies nativas, su- animais jovens; estresse; de surtos de columna-
rubim (Pseudoplatystoma qualidade da gua; riose so: animais jo-
corruscans) e pacam variaes bruscas na vens (larvas e alevinos);
(Lophiosilurus alexan- temperatura; alta estresse oriundo da
dri), e de tilpias do densidade; doenas manipulao grosseira;
Nilo .3 associadas. transporte prolongado;
24 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
problemas de qualidade da gua; va- se de RFLP do gene 16S do rRNA, os
riaes bruscas na temperatura da isolados de diferentes espcies nativas
gua; em regies tropicais, a reduo apresentaram variao gentica3,5 intra
na temperatura da gua; alta densida- e interespecfica, tendo sido vistos mais
de de estocagem; leses mecnicas no de um genomovar presentes em um ni-
tegumento; doenas parasitrias asso- co surto no pas3.
ciadas; outros fatores que promovam A columnariose uma doena ca-
estresse aos peixes. No Brasil, os surtos racterizada pelo acometimento da su-
so comumente observados: nos pri- perfcie externa dos peixes (pele, na-
meiros dias ps-ecloso dadeiras e brnquias),
em laboratrios de lar- A columnariose uma que raramente apresenta
vicultura; durante os doena caracterizada quadros de septicemia4.
processos de masculini- pelo acometimento da As brnquias so descri-
zao de tilpias do Nilo superfcie externa dos tas como o principal r-
(Oreochromis niloticus), peixes (pele, nadadeiras go afetado na infeco
principalmente quando e brnquias), que por F. columnare em al-
realizado em hapas e raramente apresenta gumas espcies de peixes
com altas densidades de quadros de septicemia. de clima temperado26. J
estocagem; durante o em espcies tropicais,
treinamento alimentar de espcies nati- o tegumento usual-
vas carnvoras; ps-transporte; ps-po- mente o tecido mais acometido pela
voamento de tanques-rede, principal- bactria. Os sinais clnicos da doena
mente quando necessria a utilizao nas fases iniciais so caracterizados por
de bolses; no inverno nas regies Sul letargia, anorexia, melanose (varivel)
e Sudeste. Os surtos podem ocorrer de e pela eroso de nadadeiras, principal-
forma hiperaguda, cursando com mor- mente da caudal e dorsal (Figura 2 A e
talidades de at 80% do lote em 24-48 B). Posteriormente, com a evoluo da
horas aps o incio da manifestao dos doena (24-48 horas aps o contgio),
sinais clnicos da doena. No Brasil, a ocorre o acometimento dos tecidos ad-
ocorrncia da doena j foi descrita em jacentes, causando a eroso completa
piracanjuba (Brycon orbignyanus), pacu das nadadeiras, necrose da pele e do te-
(Piaractus mesopotamicus), cascudo cido muscular24,22. Macroscopicamente,
(Hypostomus plecostomus) e tambaqui os animais apresentam reas esbranqui-
(Colossoma macropomumi)5, alm de adas na pele, principalmente na regio
surubim (Pseudoplatystma corruscans) e caudal e dorsal do corpo (Figura 2 C, D
pacam (Lophiosilurus alexandri)3, bem e E). Essa necrose circunscrita ao redor
como tilpia do Nilo. Atravs da anli- da nadadeira dorsal levou denomina-
2. Columnariose em peixes de gua doce 25
Figura 2 Sinais clnicos de columnariose em peixes: A- eroso de nadadeira caudal em pacam; B-
eroso de nadadeiras caudal e dorsal em tilpia do Nilo; C- necrose da pele em pacam; D- leses em
forma de sela em pacam; E- alevino de tilpia com necrose da pele na regio dorsal e cranial.

o popular da enfermi-
O diagnstico da 4. Diagnstico
dade de doena da sela columnariose O diagnstico da co-
(saddleback disease), de- baseado no isolamento lumnariose baseado no
vido aparncia visual e identificao da isolamento e identifica-
da leso, semelhante a bactria a partir de o da bactria a partir
uma sela de montaria26,27. peixes moribundos, com
de peixes moribundos,
Em estado avanado, po- sintomatologia clnica com sintomatologia cl-
dem ocorrer bacteremia sugestiva. nica sugestiva28. Embora
e infeces secund- a columnariose seja uma
rias por outros patgenos bacterianos doena comum e que pode infectar qua-
e parasitrios27. No tecido branquial, o se todos os peixes de gua doce, ainda
quadro se caracteriza inicialmente pela frequentemente subdiagnosticada. O
formao de reas plidas de colora- no crescimento em meios de cultura
o branca e amarelada, com produo convencionais usados no diagnstico de
excessiva de muco e congesto vascu- doenas de peixes e rpida evoluo da
lar10,27. Microscopicamente, possvel enfermidade durante os surtos dificul-
visualizar alteraes patolgicas, como tam o diagnstico29.
hiperplasia branquial, e, em casos mais Para o diagnstico, os animais mo-
graves, fuso de lamelas e at de fila- ribundos devem ser enviados preferen-
mentos branquiais10. cialmente vivos ao laboratrio. Porm,
26 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Figura 3
Eletroforese em gel
de agarose a 2% do
amplicon da PCR
espcie-especfica
para Flavobacterium
columnare. 1 =
marcador de DNA,
2-5 amostras de F.
columnare.

plenamente possvel a realizao do riana pode ser realizada por testes feno-
diagnstico a partir de animais enviados tpicos3 e moleculares (PCR e PCR em
resfriados, em caixas isotrmicas com tempo real).
gelo (normal ou reciclvel). O tempo de Com a popularizao dos mtodos
transporte mximo recomendado nes- moleculares, diversas tcnicas tm sido
ses casos de 48 horas. O congelamento utilizadas para a confirmao da espcie
promove a lise das clulas de F. colum- bacteriana e para deteco da bactria F.
nare, devido formao de cristais de columnare a partir de determinados teci-
gelo e rompimento da clula bacteriana dos de peixes infectados31,32. A primeira
em temperaturas abaixo de 0C. Assim ferramenta molecular padronizada para
sendo, o envio de material congelado diagnstico de F. columnare foi a PCR
no recomendado para o diagnstico e sequenciamento do gene da subuni-
bacteriolgico da doena. Mas, a partir dade 16S do RNA ribossmico21. No
desse material, possvel a deteco do ano de 2004, foi desenvolvida uma PCR
patgeno por mtodos moleculares. espcie-especfica para a confirmao e
Os principais tecidos utilizados para deteco de F. columnare31. Esse mto-
o isolamento da bactria so rim, fgado, do tem sido utilizado pelo AQUAVET
tecido subcutneo adjacente s reas (EV-UFMG) desde 2007 e vem apre-
de necrose da pele e tecido branquial, sentando uma alta eficincia para o
nos casos de infeco desse rgo30. diagnstico da doena. Na Figura 3
Posteriormente, ao isolamento em cul- apresentada uma imagem do produto
turas puras em meios especficos (como da PCR espcie-especfica para F. colu-
supramencionado), a morfologia da mnare com peso molecular de 675 pares
colnia, morfologia microscpica na de base, aps a eletroforese em gel de
colorao de gram, e testes de catalase agarose.
e oxidase so utilizados com triagem Adicionalmente, outros mtodos
inicial. A confirmao da espcie bacte- mais modernos, como PCR em tempo

2. Columnariose em peixes de gua doce 27


real (qPCR), so dispo- sal comum), permanga-
Tratamentos baseados
nveis para a confirma- nato de potssio, sulfato
na realizao de
o da espcie e deteco de cobre e cloramina-T.
banhos com substncias
desse patgeno a partir A utilizao de cloreto
desinfetantes ou a
de amostras de tecidos32. antibioticoterapia oral de sdio acima de 0,5%
dos lotes. in vitro inibe o cresci-
5. Tratamento
mento e a aderncia de
Por ser uma doena colnias de F. columnare
bacteriana que acomete o tegumento em gar. Isso fez com que diversos au-
e/ou as brnquias, os tratamentos em tores testassem in vivo a utilizao desse
casos de surtos de columnariose so sal, e diversos resultados abordam uma
baseados na realizao de banhos com reduo significativa de mortalidade
substncias desinfetantes ou a antibioti- por uso de banhos de 1% de NaCl10,26,27.
coterapia oral dos lotes1. Devido rpi- No Brasil, melhores resultados no con-
da progresso da doena, e para uma te- trole da columnariose em casos de sur-
rapia eficaz, esta deve ser iniciada o mais tos em larvas e juvenis de tilpia do Nilo
rpido possvel, imediatamente aps tm sido obtidos com banhos de 2%
a observao de sinais clnicos. Assim de NaCl por 30 minutos, por trs dias
sendo, em casos de evoluo hiperagu- consecutivos. O cloreto de sdio deve
da da doena (dependendo dos fatores ser utilizado com cautela em espcies
de risco e virulncia da amostra), pode de peixes nativos, pois muitas dessas
no haver tempo hbil para a execuo no apresentam boa resistncia a varia-
de tratamentos nos lotes acometidos29. es na osmolaridade da gua e podem
Alm do tratamento teraputico, ba- morrer. Adicionalmente, de maneira
nhos profilticos podem ser realizados profiltica, pode ser realizada a salini-
com substncias desinfetantes, para zao a 0,5% da gua em sistemas de
evitar a ocorrncia da infeco em fases recirculao, comumente utilizados
crticas em que a enfer- nas fases iniciais do cul-
midade frequentemente As principais tivo, como incubao de
acomete os animais, por substncias utilizadas ovos e na larvicultura.
exemplo, ps o transpor- para o tratamento Essa osmolaridade mais
te de animais33. da columnariose via elevada inibe o cresci-
As principais subs- banho so o cloreto mento e consequente-
tncias utilizadas para de sdio (NaCl, sal mente a ocorrncia de
o tratamento da colum- comum), permanganato surtos de columnario-
nariose via banho so o de potssio, sulfato de se. Dados da literatura
cloreto de sdio (NaCl, cobre e cloramina-T. demonstram que o per-
28 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
manganato de potssio (2 mg/L), sul- ca os tratamentos ainda podem apresen-
fato de cobre (0,5 mg/L por 12 horas, tar falhas, devido anorexia ocasionada
adio na gua do tanque) e cloramina- pela infeco e a no ingesto da rao
-T (15 mg/L) so eficientes na profila- medicada25,33.
xia da infeco por F. columnare, sendo A OTC uma droga eficiente no
que, em casos de surtos, concentraes combate de columnariose, bem como
maiores por perodos curtos de tempo de outras doenas causadas por bact-
so utilizadas1. Porm, esquemas te- rias gram-negativas e positivas27. Na li-
raputicos definidos para controle da teratura, as doses recomendadas para o
columnariose com essas substncias tratamento da infeco por F. columnare
so descritos apenas para truta-arco- variam entre 50 e 100 mg OTC por qui-
-ris (Oncorhyncus mykisss), bagre-do- lo de peso vivo, em via oral, durante 10
-canal e outras espcies no cultivadas dias26,27. O florfenicol apresenta-se tam-
no pas. bm altamente eficiente no tratamento
A antibioticoterapia oral a prin- da columnariose quando administrado
cipal alternativa para o tratamento da por via oral. A dose recomendada pelo
columnariose em casos de surtos agu- fabricante de 10 mg de FFC por quilo
dos, principalmente em sistemas de de peso vivo, durante 10 dias consecu-
cultivo em que a realizao de banhos tivos. Essa dosagem tem se mostrado
difcil ou invivel (Ex. gaiolas, tanques eficiente no controle da doena em ale-
de terra de amplas dimenses etc.). Os vinos de tilpia do Nilo e peixes nati-
antibiticos so em geral misturados vos, principalmente bagres e tambaqui
rao nas prprias fazendas ou ainda (Colossoma macropomum). J para algu-
podem ser incorporados na rao du- mas espcies de peixes exticos, como
rante a fabricao. Para isso a empresa Sunshine bass, doses 50% maiores des-
de rao deve possuir uma licena es- se frmaco tm sido recomendadas34.
pecfica de acordo a legislao vigente Embora as amostras de F. columnare ain-
no pas, e a requisio da mistura deve da no tenham apresentado resistncia
ser realizada por um mdico veterinrio a OTC e FFC, os estudos de resistncia
regularmente matriculado no conselho a antibiticos na aquacultura brasileira
de classe. Atualmente, produtos base ainda no so muito amplos. Por isso o
dos antibiticos oxitetraciclina (OTC) uso de antibiticos deve ser realizado
e florfenicol (FFC) so licenciados para com cautela, apenas como medida de
uso na aquacultura e utilizados no tra- controle, e, se possvel, sinergicamente
tamento da columnariose. Apesar da com substncias desinfetantes para que
ampla sensibilidade das amostras de F. seja reduzido o risco de seleo e desen-
columnare a esses antibiticos, na prti- volvimento de amostras resistentes1.
2. Columnariose em peixes de gua doce 29
6. Controle e preveno Amplamente utilizadas na preven-
o de outras doenas bacterianas em
A preveno e controle da doen-
peixes, o uso de vacinas no um mto-
a devem se basear em boas prticas
do consagrado para imunoprofilaxia da
de manejo e a adoo de medidas para
columnariose. Embora existam diversas
evitar e mitigar os fatores de risco que
vacinas bem-sucedidas experimental-
propiciam a ocorrncia da doena15,27.
mente, a utilizao comercial dessas
Alm disso, tratamentos profilticos
ainda restrita, sendo adotadas em alguns
podem (e devem) ser realizados em si-
poucos pases. A imunizao via banho
tuaes de estresse que predispem a
com uma bacterina demonstrou pro-
ocorrncia da columnariose. Como as
teger carpas comuns da columnariose
substncias desinfetantes atuam de ma-
em condies experimentais. Contudo,
neira inespecfica, geralmente alterando
esse produto no induz resposta imune
a fisiologia da clula bacteriana ou ina-
humoral significativa e protetora nesses
tivando componentes da superfcie do
peixes. Resultados semelhantes foram
microrganismo, a induo de resistncia
obtidos com uso de bacterina semelhan-
a esses produtos improvvel ou de bai-
te em bagre-do-canal12.
xa possibilidade. Assim
No Brasil, estudo ava-
sendo, esses tratamen- A preveno e controle
liando o uso de bacterina
tos podem ser utiliza- da doena devem se
por via injetvel e oral
dos rotineiramente com basear em boas prticas
demonstrou que, por
segurana. de manejo e a adoo
via parenteral, a induo
Diversos estudos de medidas para evitar
de imunoglobulinas es-
demonstram a associa- e mitigar os fatores de
pecficas significativa;
o entre a ocorrncia risco.
porm, sua concentrao
de surtos de columna-
no est diretamente re-
riose e altos nveis de
lacionada proteo contra a doena29.
amnia/nitrito, alta densidade de esto-
Nos EUA, uma vacina viva atenuada
cagem e leses cutneas10,24. Durante o
administrada por imerso licenciada
transporte dos animais (larvas, alevinos
para o uso em bagre-do-canal. Sua prin-
e juvenis) e diferentes fases do cultivo
cipal aplicao para imunizao de lar-
(incubao de ovos e larvas; masculini-
vas entre 10 e 48 dias ps-ecloso. Em
zao em hapas; treinamento alimentar
condies experimentais, esse produto
de peixes nativos carnvoros etc.), a con-
propiciou uma porcentagem relativa de
centrao de oxignio dissolvido, bem
sobrevivncia (RPS) dos animais vaci-
como outros parmetros limnolgicos
nados de 57 a 94 %. Apesar da eficincia
devem ser estritamente monitorados e
e aplicabilidade, esse produto possui in-
controlados.

30 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


certezas quanto sua segurana. Existe Journal of Bacteriology Research, v. 2, p. 22-29, 2010.
a possibilidade terica de recuperao 7. DAVIS, H.S. A new bacterial disease in freshwater
fishes. United States Bureau of Fisheries Bulletin, v.
da virulncia da amostra vacinal aps a 38, p. 38-63, 1922.
administrao nos animais ou sua libe- 8. PILARSKI, F. Estudo da Columnariose de quar-
rao no ambiente35. Testes laborato- to espcies de peixes tropicais: Isolamento e
Caractarizao de Flavobacterium columnare. 69 f.
riais demonstram uma pequena chance Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Faculdade
da reinfeco dos peixes com a amostra de Zootecnia e Engenharia de Alimentos,
vacinal35. Porm, isso poderia permitir Universidade de So Paulo, Pirassununga, 2002.

que esse patgeno voltasse a ocasionar 9. KUNTTU, H.M.T., SUNDBERG, L.-R.,


PULKKINEN, K., VALTONEN, E.T. Environment
doena na espcie cultivada ou em ou- may be the source of Flavobacterium columnare out-
tras de vida livre, podendo dizim-las breaks at fish farms. Environmental Microbiology
Reports, v. 4, p. 398-402, 2012.
nas vises mais cataclsmicas. Por esse
10. SHOTTS, E.B., STARLIPER, C.E. Flavobacterial
motivo, em diversos pases, principal- Diseases: Columnaris Diseases, Cold-water
mente na Comunidade Europeia, o uso Disease and Bacterial Gill Disease. In: Who, P.T.K.,
Bruno, D.W. FISH DISEASES AND DISORDERS
de vacinas vivas atenuadas proibido. VOLUME 3: Viral, Bacterial and Fungal Infections.
Oxon: CAB International, 1999, p. 559-576.
7. Referncias bibliogrficas 11. WEDEMEYER, G.A. PHYSIOLOGY OF FISH
1. DECLERCQ, A.M., HAESEBROUCK, F., VAN IN INTENSIVE CULTURE SYSTEMS. 1. ed.
DEN BROECK, W., BOSSIER, P., DECOSTERE, Londres, UK: Clapman & Hall, 1996, 232 p.
A. Columnaris disease in fish: a review with em-
phasis on bacterium-host interactions. Veterinary 12. BERNARDET, J.F., GRIMONT, P.A.D.
Research, v. 44, 2013. Deoxyribonucleic acid relatedness and phenotypic
characterization of Flexibacter columnaris sp. nov.,
2. ARIAS, C.R., WELKER, T.L., SHOEMAKER, nom. rev., Flexibacter psychrophilus sp. nov., nom.
C.A., ABENATHY, J.K., KLESIUS, P.H. Genetic rev., and Flexibacter maritimus. Int. J. of Syst. Evol.
fingerprinting of Flavobacterium columnare isolates Microbiol., v. 39, p. 346-354, 1989.
from cultured fish. Journal of Applied Microbiology.
13. BERNARDET, J.F., SEGERS, P., VANCANNEYT,
3. BARONY, G.M., LUZ, R.K., FIGUEIREDO, M., BERTHE, M., KERSTERS, K.,
H.C.P., LEAL, C.A.G. New hosts and genetic di- VANDAMME, P. Cutting a Gordian knot: emend-
versity of F.columnare strains isoladed from dis- ed classification and description of the genus
eased tilapia and native Brazilian species. Journal of Flavobacterium, emended description of the family
Fish Diseases, Paper submetido, 2014. Flavobacteriaceae, and proposal of Flavobacterium
hydatis nom. nov. (basonym, Cytophaga aquatilis
4. FIGUEIREDO, H.C.P., KLESIUS, P.H., ARIAS,
Strohl and Tait 1978). Int. J. of Syst. Evol. Microbiol.,
C.R., EVANS, J., SHOEMAKER, C.A., PEREIRA
v. 46, p. 128148, 1996.
JR., D.J., PEIXOTO, M.T.D. Isolation and charac-
terization of strains of Flavobacterium columnare 14. ORDAL, E.J., RUCKER, R.R. Pathogenic myxo-
from Brazil. Journal of Fish Diseases, v. 28, p. 199- bacteria. Proceedings of the Society for Experimental
204, 2005. Biology and Medicine, v. 56, p. 1518, 1944.
5. PILARSKI, F., ROSSINI, A.J., CECCARELLI,P.S. 15. BULLOCK, G.L., HSU, T.C., SHOTTS JR., E.B.
Isolation and characterization of Flavobacterium co- Columnaris disease of fishes. US Fish & Wildlife
lumnare (Bernardet et al. 2002) from four tropical Publications, v. 129, 1989.
fish species in Brazil. Braz. J. Biol., v. 68, p. 409-414,
2008. 16. KUNTTU, H.M.T., SUOMALAINEN, L.R.,
JOKINEN, E.I., VALTONEN, E.T. Flavobacterium
6. SEBASTIO, F.A., PILARSKI, F., LEMOS, columnare colony types: Connection to adhesion
M.V.F. Isolation and molecular characterization of and virulence? Microbial Pathogenesis, v. 46, p. 21-
Flavobacterium columnare strains from fish in Brazil.

2. Columnariose em peixes de gua doce 31


27, 2009. Pathogens: Diseases of Farmed and Wild Fish. 4.
ed. Chichester, UK: Praxis Publishing, 2007. 552 p.
17. AVENDANO-HERRERA R., GHERARDELLI
V., OLMOS P., GODOY M.G., HEISINGER A. 27. NOGA E.J. 2010. Fish Disease: Diagnoses and treat-
& FERNANDEZ J. Flavobacterium columnare as- ment. Second edition. Wiley-Blackwell. 382-383.
sociated with mortality of salmonids farmed in
Chile: A case report of two outbreaks. Bulletin of 28. FARMER, B. IMPROVED METHODS FOR THE
the European Association of Fish Pathologists, v. 31, ISOLATION AND CHARACTERIZATION
p. 3644, 2011. OF FLAVOBACTERIUM COLUMNARE. 62 p.
Dissertao. (Master of Science) Agricultural and
18. DARWISH, A.M., ISMAIEL, A.A. Genetic di- Mechanical College, Louisiana State University.
versity of Flavobacterium columnare examined by 2002.
restriction fragment length polymorphism and
sequencing of the 16S ribosomal DNA gene and 29. LEAL, C.A.G., CARVALHO-CASTRO, G.A.,
the 16S23S rDNA spacer. Molecular and Cellular SACCHETIN, P.S.C., LOPES, C.O., MORAES,
Probes, v. 19, p. 267-274, 2005. A.M., FIGUEIREDO, H.C.P. Oral and parenteral
vaccines against Flavobacterium columnare: evalu-
19. LAFRENTZ, B.R., LAPATRA, S. E., ation of humoral immune response by ELISA
SHOEMAKER, C.A., KLESIUS, P.H. and in vivo efficiency in Nile tilapia. Aquaculture
Reproducible challenge model to investigate the International, v. 18, p. 657-666, 2010.
virulence of Flavobacterium columnare genomovars
in rainbow trout Oncorhynchus mykiss. Diseases of 30. MORISSON, C., CORNICK, J., SHUM, G.,
Aquatic Organisms, v. 101, p. 115-121, 2012. ZWICKER, B. Microbiology and histopathology
of saddleback disease of underyearling Atlantic
20. SUOMALAINEN, L.-R., TIIROLA, M., salmon, Salmo salar L. Journal of Fish Diseases, v. 4,
VALTONEN, E.T. Chondroitin AC lyase ac- p. 243-258, 1981.
tivity is related to virulence of fish pathogenic
Flavobacterium columnare. Journal of Fish Diseases, 31. DARWISH, A.M., ISMAIEL, A.A., NEWTON,
v. 29, p. 757-763, 2006. J.C., TANG, J. Identification of Flavobacterium
columnare by a species-specific polymerase chain
21. TRIYANTO, WAKABAYASHI, H. Genotypic di- reaction and renaming of ATCC43622 strain to
versity of strains of Flavobacterium columnare from Flavobacterium johnsoniae. Molecular and Cellular
diseased fishes. Fish Pathology v. 34, p. 65-71, 1999. Probes v.24, p. 421-427, 2004.
22. OLIVARES-FUSTER, O., BAKER, J.L., 32. PANANGALA, V.S., SHOEMAKER, C.A.,
TERHUNE, J.S., SHOEMAKER, C.A., KLESIUS, KLESIUS, P.H. TaqMan real-time polymerase
P.H., ARIAS, C.R. Host-specific association be- chain reaction assay for rapid detection of
tween Flavobacterium columnare genomovars and Flavobacterium columnare. Aquaculture research, v.
fish species. Systematic and Applied Microbiology, v. 38, p. 508-517, 2007.
30, p. 624-633, 2007.
33. FIGUEIREDO, H. C. P., LEAL, C. A. G.
23. XIE, H.X., NIE, P., CHANG, M.X., LIU, Y., YAO, Columnariose: Doena da Piscicultura Moderna.
W.J. Gene cloning and functional analysis of Panorama da Aqicultura, v. 17, p. 32-37, 2007.
glycosaminoglycan-degrading enzyme chondroi-
tin AC lyase from Flavobacterium columnare G4. 34. DARWISH, A.M., BEBAK, J.A., SCHRADER,
Archives of Microbiology, K.K. Assessment of Aquaflor , copper sulphate and
potassium permanganate for control of Aeromonas
24. DECOSTERE, A., HAESEBROUCK, F., hydrophila and Flavobacterium columnare infection
TURNBULL, J.F., CHARLIER, G. Influence of in sunshine bass, Morone chrysops female Morone
water quality and temperature on adhesion of high saxatilis male. Journal of Fish Diseases, v. 35, p. 637-
and low virulence Flavobacterium columnare strains 647, 2012.
to isolated gill arches. Journal of Fish Diseases, v. 22,
p.1-11, 1999. 35. SHOEMAKER, C.A., KLESIUS, P.H., EVANS,
J.J. Immunization of eyed channel catfish, Ictalurus
25. ROBERTS, R.J. The Bacteriology of Teleosts. punctatus, eggs with monovalent Flavobacterium
In: ROBERTS, R.J. Fish Pathology. West Sussex: columnare vaccine and bivalent F. columnare and
Wiley-Blackwell, 2012. p. 339-382. Edwardsiella ictaluri vaccine. Vaccine, v. 25, p. 1126-
1131, 2007.
26. AUSTIN, B., AUSTIN, D. Bacterial Fish

32 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


3. Septicemia por
Aeromonas mveis
em peixes

Thais F. Oliveira bigstockphoto.com

Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340)


Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos A. G. Leal* (CRMV-MG 9014)
*carlosleal@vet.ufmg.br

1. Introduo destaca-se como principal agente etio-


lgico envolvido em quadros septicmi-
Septicemia por Aeromonas mveis
cos1. Essa bactria tambm tem sido iso-
a denominao conferida doena cau-
lada a partir de amostras de gua potvel
sada por bactrias mesfilas e mveis do
e alimentos, sendo de significativa im-
gnero Aeromonas em peixes1. As prin- portncia tanto para a sade pblica hu-
cipais espcies patognicas relacionadas mana como para a sade animal2. Casos
a esse gnero bacteriano de surtos causados por
so: A. caviae, A. sobria, Septicemia por esse patgeno tm sido
A. bestiarum, A. veronii e Aeromonas mveis a relatados mundialmente
A. hydrophila. Essas es- denominao conferida em diferentes hospedei-
pcies so ubquas em doena causada por ros, como, por exemplo,
ambientes aquticos e, bactrias mesfilas rpteis, anfbios e ma-
dentre elas, a bactria e mveis do gnero mferos3. Em peixes, as
Aeromonas hydrophila Aeromonas em peixes. infeces por Aeromonas
3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 33
mveis causam alta mortalidade e por amostras mesfilas, mveis e no
significativas perdas econmica na pis- pigmentadas, associado principalmente
cicultura4. No Brasil, essas bactrias tm com infeces em seres humanos, tendo
sido descritas como agentes etiolgicos como principal representante a espcie
de surtos em fazendas de espcies de Aeromonas hydrophila. O outro grupo
peixes exticos e nativos5. foi composto por isolados psicrotrfi-
cos imveis e pigmentados, tendo como
principal representante o patgeno de
2. Agente etiolgico: peixes Aeromonas salmonicida7.
Taxonomia e Diversidade
As Aeromonas so caracterizadas
Pertence classe Gamma como bastonetes, gram-negativos, no
proteobacteria, ordem Aeromonadales formadores de esporos, em geral oxi-
e famlia Aeromonadaceae, as bac- dase positiva, anaerbicas facultativas e
trias do gnero Aeromonas so quimiorganotrficas. Adicionalmente,
microrganismos ubquos em ambientes so capazes de crescer a 0 % de NaCl,
aquticos. Alm disso, essas bactrias mas no em 6% de NaCl, produzem ci-
tm sido frequentemente isoladas de do a partir de inositol e a maioria delas
peixes saudveis e doentes, produtos resistente ao agente vibriosttico 0/129
alimentcios, fezes de animais e de seres (2,4- diamino - 6 ,7 - diisopropilpteri-
humanos, assim como de outras amos- dina). De acordo com a ltima verso
tras clnicas e ambientais6. A primeira do Manual de Bergey de Bacteriologia
descrio de um exemplar desse gnero Sistemtica, 14 espcies bacterianas
data de 1891, quando Stainer relatou a so pertencentes ao gnero Aeromonas,
ocorrncia de infeces em rs causadas sendo essas Aeromonas hydrophila (com
por um microrganismo denominado trs subespcies: hydrophila, dhakensis e
poca como Bacillus hydrophillus fuscus ranae), Aeromonas bestiarum, Aeromonas
(hoje Aeromonas hydrophila). Alguns salmonicida (com cinco subespcies:
anos depois, em 1894, foi realizado o salmonicida, masoucida, smithia, achro-
relato da infeco em truta-arco-ris por mogenes e pectinolytica), Aeromonas ca-
um patgeno similar. Porm, a descrio viae, Aeromonas media, Aeromonas eucre-
formal do gnero ocorreu dcadas nophila, Aeromonas sobria, Aeromonas
depois, sendo realizada por Stainer em veronii, Aeromonas jandaei, Aeromonas
1943. Na dcada de 1970, as espcies de schubertii, Aeromonas trota, Aeromonas
Aeromonas foram classificadas em dois allosaccharophila, Aeromonas enche-
grupos em funo da sua temperatura leia e Aeromonas popoffii. Porm, mais
de crescimento, motilidade e produo 11 novas espcies foram descritas em
de pigmentos. Um grupo foi composto artigos cientficos e so aceitas atual-
34 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
mente: Aeromonas simiae, Aeromonas o para suplantar esses problemas7.
molluscorum, Aeromonas bivalvium, Em 1997, Borrel e colaborado-
Aeromonas tecta, Aeromonas aquariorum, res desenvolveram uma tcnica base-
Aeromonas piscicola, Aeromonas fluvialis, ada na RFLP de produtos de PCR do
Aeromonas taiwanensis, Aeromonas sa- gene 16S rRNA para a identificao de
narellii, Aeromonas diversa e Aeromonas Aeromonas spp.9. Esse mtodo tem sido
rivuli8. Adicionalmente, estudo recente amplamente utilizado para identificao
demonstrou que as bactrias Aeromonas de amostras isoladas de casos clnicos
hydrophila subsp. dhakensis e Aeromonas de doenas em peixes8. No entanto, em
aquariorum tratam-se do mesmo mi- alguns casos, essa tcnica no capaz de
crorganismo, sendo proposta sua reclas- diferenciar espcies estreitamente rela-
sificao como Aeromonas dhakensis8. cionadas, que apresentam sequncias
A identificao das espcies muito similares do gene 16S rRNA. Isso
de Aeromonas tem sido historicamen- tem sido verificado em parte das novas
te realizada por mtodos fenotpicos espcies de Aeromonas descritas na lite-
e moleculares8. Numerosos sistemas ratura. A espcie A. pisccola apresenta o
bioqumicos tm sido propostos para mesmo padro de RFLP que A. salmoni-
a identificao desses microrganismos. cida e a sequncia 16S rRNA 99,8-100%
Apesar da ampla utilizao, esses testes similar A. bestiarum. O mesmo ocorre
so capazes apenas de discriminar com com A. caviae e A. aquariorum, que apre-
segurana as espcies em trs gran- sentam 99,8% de similaridade no gene
des grupos fenotpicos: o complexo 16S rRNA e o mesmo padro de RFLP.
Aeromonas hydrophila (composto por Porm, A. aquariorum foi isolada origi-
A. hydrophila, A. bestiarum, A. salmonici- nalmente de peixes ornamentais, mas
da e A. popoffii); complexo Aeromonas no tem sido at agora isolada de esp-
caviae (A. caviae, A. media e A. eucre- cies aqucolas. A RFLP tambm no
nophila); e o complexo Aeromonas so- til para 8% das amostras de Aeromonas
bria (A. sobria, A. veronii, A. jandaei e que apresentam mutaes no gene 16S
A. trota). As demais espcies descritas rRNA na regio alvo das endonucleases
recentemente apresentam padres fe- utilizadas7.
notpicos que as classificam dentro dos O sequenciamento e anlise
trs supramencionados complexos. As filogentica de genes housekeeping,
identificaes fenotpicas para essas como gyrB e rpoD, tem sido utilizado
bactrias so imprecisas e geram resulta- de maneira complementar RFLP para
dos inconclusivos na maioria dos casos. uma melhor discriminao das espcies
Nesse contexto, os mtodos molecula- de Aeromonas. Alm desses, esquemas
res tm se apresentado como uma solu- de anlise de sequncias em mltiplos
3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 35
locus (MLST) tm sido 20 tipos genticos (se-
As bactrias do gnero
desenvolvidos para ava- quence types) distintos
Aeromonas so
liao de Aeromonas caracterizados.
frequentemente isoladas
spp. . O primeiro MLST
7
em ambientes aquticos 3. Principais
para Aeromonas com
e na microbiota de hospedeiros e
acesso pblico foi criado
peixes, anfbios e outros doena clnica
por Martino e colabora-
mamferos. As bactrias do g-
dores (2011) (http://
pubmlst.org/aeromo- nero Aeromonas so
nas) . Esse inclui seis genes (gyrB, frequentemente isoladas em ambientes
10

Grol, gltA, metG, ppsA e recA, com total aquticos e na microbiota de peixes,
de 3.084 nucleotdeos). O mtodo foi anfbios e outros mamferos . Esses
6,11

testado em 96 amostras contendo iso- patgenos tm sido associados a casos


lados de referncia e de campo, sendo de infeco em um amplo nmero de
79,2 % obtidas a partir de peixes do- espcies de peixes cultivados e de vida
entes e o restante de amostras de gua. livre no mundo. No Brasil, casos de in-
A tcnica permitiu a feco por Aeromonas
identificao precisa dos No Brasil, casos foram spp. foram descritos em
isolados e tem sido con- descritos em carpa, carpa (Cyprinus car-
siderada uma alternativa tilpia, piracanjuba, pio)12, tilpia do Nilo
vivel para identificao beta, pacu e matrinx. (Oreochromis niloti-
e determinao das re- cus), jundi (Rhamdia
laes epidemiolgicas quelen), piracanjuba
das amostras de Aeromonas . Alm de
7,10 (Brycon orbignyanus), beta (Betta splen-
permitir a identificao das espcies, dens) , pacu (Piaractus mesopotamicus)
5 1

o MLST um mtodo utilizado para e matrinx (Brycon amazonicus) . Os


13

a avaliao da diversidade gentica de surtos tm sido historicamente impac-


amostras de uma mesma espcie. Em tantes, principalmente em sistemas de
estudo recente realizado no AQUAVET, cultivo de espcies nativas. Contudo,
30 amostras de A. hydrophila isoladas de recentemente, as infeces por A. hydro-
casos clnicos de doen- phila tm aumentado em
as em peixes e gua das fazendas de tilpia do
Infeces por Nilo.
fazendas foram avalia-
Aeromonas podem As infeces por
das pelo MLST . Uma
10
se manifestar como Aeromonas podem se
alta diversidade genti-
doena ulcerativa ou em manifestar de formas cli-
ca foi observada nesses
quadros de septicemia nicamente distintas em
isolados, com mais de
hemorrgica. peixes, principalmente
36 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
como doena ulcerativa (semelhante letargia, anorexia, brnquias plidas e
furunculose causada por A. salmonicida melanose so observados inicialmen-
em peixes de clima temperado) (Figura te. Com a evoluo do quadro clnico,
1) ou em quadros de septicemia hemor- pode-se observar hiperemia, petquias
rgica (Figura 2)7. Esta ltima a mani- e hemorragia na pele, boca e base das
festao mais comum e importante da nadadeiras (Figura 2). Adicionalmente,
enfermidade, e geralmente associada ascite, exoftalmia e natao errtica po-
a infeces por Aeromonas hydrophila dem ser observadas1,14,15. A sintomato-
no Brasil. A infeco est associada a logia nervosa e o quadro de septicemia
um quadro de infeco generalizada, podem ser confundidos com os sinais
acometendo principalmente rins, fga- clnicos ocasionados por infeces por
do, bao, brnquias, musculatura es- Streptococcus sp., sendo necessrio um
queltica e crebro1. Sinais clnicos de diagnstico laboratorial mais acurado

Figura 1: doena ulcerativa causada por Aeromonas hydrophila em peixes: A- piracanjuba coletada
durante um surto em fazenda no Brasil apresentando ulcerao cutnea (seta); B- carpa colorida apre-
sentando ulcerao na boca; C- carpa colorida com ulcerao cutnea (seta).

3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 37


para determinar o agente dos tbulos proximais. E
necropsia podem
etiolgico envolvido no a parede da bexiga nata-
ser observados a
surto .
1
tria pode estar espessa-
presena de exsudato
necropsia podem serosanguinolento na da, congesta e com infil-
ser observados a presen- cavidade celomtica, trado edematoso19. Em
a de exsudato serosan- hemorragia visceral, peixes com septicemia,
guinolento na cavidade hepatomegalia, fgado pode ser observada ne-
celomtica, hemorragia plido com petquias, crose dos tecidos do rim,
visceral, hepatomegalia, esplenomegalia, rins bao e mucosa intestinal,
fgado plido com pet- hiperplsicos e friveis. assim como reas de ne-
quias, esplenomegalia, crose focal no corao,
rins hiperplsicos e fri- fgado, pncreas e gna-
veis. Petquias e sufuses podem ser das. A presena de melanina livre ou
observadas na parede interna da cavida- lipofuscina pode ser observada a partir
de celomtica16,17,18. Na histopatologia, da ruptura de melano-macrfagos14. A
pode-se observar leses cutneas sem gravidade da infeco dependente do
bordas definidas com inflamao granu- estado imunolgico dos peixes. Casos
loctica necrosante e contedo exsudati- mais graves podem acometer diferentes
vo abundante. Observa-se a desintegra- rgos, prejudicando funes vitais e le-
o de fibras musculares caracterizada vando o peixe ao bito14,15.
por edema intersticial inflamatrio. Os A transmisso da bactria A. hydro-
rins apresentam-se com distrofia e for- phila em sistemas de cultivo ocorre por
mao de gotculas hialinas no epitlio via direta com contato direto de peixes

Figura 2: septicemia hemorrgica causada por Aeromonas hydrophila em peixes: A- tilpia do Nilo
infectada experimentalmente, em que pode ser verificado um quadro severo de hemorragia na base
de nadadeiras (setas); B- pintado amaznico (Leiarius marmoratus x Pseudoplatystoma reticulatum)
apresentando hiperemia pronunciada na regio periocular (seta preta) e hiperemia cutnea (setas
vermelhas).

38 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


infectados e sadios, e por contato indi- que geralmente esto relacionadas com
reto, atravs da veiculao da bactria a lise de clulas e tecidos15.
via gua. Adicionalmente, a ingesto de O sistema de secreo do tipo III
rao contaminada tem sido descrita um fator de virulncia importante nes-
como uma potencial fonte de infeco sa bactria. Esse sistema constitudo
para os peixes14. por uma estrutura basal que ancora um
injectsoma em formato de agulha na
4. Patognese da Doena e membrana celular da bactria, e nor-
Fatores de Risco
malmente induzido por contato entre
A interao entre Aeromonas hydro- bactria-hospedeiro. A partir desse sis-
phila e o peixe depende de diversos tema, a bactria capaz de introduzir
mecanismos para que ocorra a infeco. toxinas bacterianas diretamente no cito-
Fatores de virulncia como antgeno O, plasma da clula do peixe. Tais substn-
cpsula, camada S, exotoxinas (hemoli- cias alteram as funes celulares e im-
sinas e enterotoxinas), exoenzimas que pedem que ocorra uma resposta imune
digerem componentes celulares e o sis- e, consequentemente, a eliminao da
tema de secreo tipo III (SSTT) esto bactria1,5.
relacionados patognese da doena A intensificao da piscicultura pro-
em peixe .1
picia alteraes no ambiente dos siste-
As estruturas de superfcie, como mas de cultivo e o estresse dos peixes.
cpsulas e flagelos laterais, de Aeromonas Esses so fatores predisponentes para o
hydrophila esto relacionadas auto- aparecimento de surtos de infeces por
agregao e hemaglutinizao. Os li- Aeromonas mveis1. Baixa qualidade da
popolissacardeos (LPS), presentes na gua, altas densidades de estocagem
membrana externa desse microrganis- e a realizao de manejos de maneira
mo, exercem potente efeito pr-infla- incorreta, com alto estresse dos ani-
matrio, ocasionando distrbios vascu- mais, corroboram o desencadeamento
lares sistmicos. O antgeno O (poro se surtos da doena1. A infeco por A.
mais externa do LPS) responsvel por hydrophila ocorre com maior frequn-
promover a evaso bacteriana contra cia em perodos de temperaturas mais
componentes do sistema complemen- baixas, quando a resposta imunolgica
to e clulas fagocticas. dos peixes mais baixa
Adicionalmente, esse pa- Fatores predisponentes: devido anorexia e bai-
tgeno possui vrias en- baixa qualidade da xa qualidade da gua.
zimas, como proteases, gua, altas densidades, Porm, em temperaturas
hemolisinas, amilase, alto estresse dos mais elevadas (acima de
gelatinase, entre outras, animais. 30oC), surtos da doen-
3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 39
a tambm podem ocorrer1,16. Surtos sugerem a especificidade desse micror-
da doena tm sido comumente verifi- ganismo como patgeno primrio para
cados no pas: aps o transporte dos peixes5,22.
peixes (principalmente associados a
5. Diagnstico
intercorrncias no transporte de ori-
gens diversas, como problemas na de- O diagnstico das infeces
purao, temperatura elevada durante por Aeromonas mveis baseado
o transporte etc.), principalmente de no isolamento e identificao do
juvenis de espcies nativas; nos pri- microrganismo. O diagnstico clnico
meiros dias aps o povoamento de apresenta pouca aplicabilidade, pois
gaiolas; aps a seleo e classificao os sinais clnicos da doena so gen-
dos peixes (principalmente animais ricos e podem ser confundidos com
adultos, em que a operao mais di- outras infeces bacterianas em peixes,
fcil, consequentemente mais estres- como estreptococoses e infeces por
sante para os animais); em cultivos Edwardsiella. Para o diagnstico via
em gaiolas sob altas densidades de exame bacteriolgico, os peixes com
estocagem associados elevao da sintomatologia clnica da doena de-
temperatura da gua; em peixes cul- vem ser coletados e enviados vivos ou
tivados em tanques de terra durante sob refrigerao (em caixa de isopor,
o inverno, em regies onde a tempe- para evitar a degradao dos peixes)
ratura da gua encontra-se abaixo da ao laboratrio. O exame bacteriol-
zona de conforto trmico para a esp- gico baseado na coleta assptica de
cie cultivada; entre outros1. fragmentos de diferentes rgos dos
Por se tratar de uma bactria ub- peixes, principalmente crebro e rim, e
qua em ambientes aquticos, a infec- inoculadas em meios de cultivo, como
o por Aeromonas hydrophila citada gar sangue ou gar soja tripticase-
por alguns autores como sendo oportu- na (TSA). A antissepsia na coleta dos
nista, j que est direta- fragmentos de rgos
mente associada a con- O diagnstico essencial para um
dies de estresse dentro das infeces por diagnstico acurado
do sistema de cultivo .
20,21 Aeromonas mveis dos casos de infeco
Entretanto, a identifica- baseado no isolamento por Aeromonas mveis.
o de fatores de viruln- e identificao do Como algumas amostras
cia altamente especficos microrganismo. O no patognicas desses
e a patogenicidade eleva- diagnstico clnico microrganismos
da de algumas amostras apresenta pouca so constituintes da
dessa espcie bacteriana,
aplicabilidade. microbiota do muco
40 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
e trato digestrio, essas podem boa resoluo para identificao das
contaminar as amostras e originar espcies de Aeromonas (alta variabili-
resultados falso-positivos. Por muitos dade intra e interespcie); portanto,
anos as Aeromonas foram hegemoni- no aplicvel. Aps a identificao da
camente os patgenos mais frequen- espcie bacteriana, no caso da espcie
temente associados a infeces em Aeromonas hydrophila, alguns mtodos
peixes cultivados. Atualmente, o ce- tm sido utilizados para caracterizao
nrio bem mais amplo quanto ao e diferenciao de amostras patogni-
nmero de patgenos que acometem cas e no patognicas. Um exemplo
as pisciculturas. Dentre outros fato- a deteco de genes estruturais do sis-
res, muitos desses casos pretritos tema de secreo do tipo III (SSTT),
de infeces por Aeromonas mveis que conferem maior virulncia bac-
podem ter sido ocasionados por tria5. Adicionalmente, a realizao de
problemas no isolamento e resultados testes de sensibilidade a antimicrobia-
falso-positivos1. nos so importantes para a prescrio
Aps a incubao de 24-48 horas da correta antibioticoterapia para o
a 28oC, so realizados testes primrios tratamento do caso. Diversos estudos
de caracterizao bacteriana, como relatam a ocorrncia de amostras de
colorao de gram, catalase e oxida- Aeromonas resistentes a diferentes an-
se. Posteriormente, a identificao da tibiticos, incluindo a oxitetraciclina,
espcie bacteriana pode ser realizada um dos frmacos mais comumente uti-
por mtodos bioqumicos e molecu- lizados para o tratamento de doenas
lares, mas, como supramencionado, bacterianas em peixes. importante
os testes moleculares so os mais in- atentar que os patgenos de animais
dicados. A metodologia que apresen- aquticos apresentam critrios e me-
ta maior celeridade e menor custo todologias especficas para realizao
por exame a amplificao por PCR de testes de sensibilidade a antimicro-
(reao em cadeia da polimerase) do bianos. Para esses microrganismos,
gene 16S rRNA seguido da anlise de no recomendada a utilizao de
RFLP1,9. Outros mtodos, como o se- protocolos padro de antibiograma e
quenciamento e anlise com o algo- determinao da CIM (concentrao
ritmo BLAST de genes conservados inibitria mnima) para patgenos
(housekeeping), como rpoD, gyrB e veterinrios. Os procedimentos aceitos
cps60, podem ser utilizados; porm, internacionalmente para determinao
apresentam tempo e custos mais eleva- da sensibilidade a antimicrobianos em
dos. A avaliao filogentica da sequ- amostras de Aeromonas mveis so
ncia do gene 16S rRNA no apresenta os descritos nos manuais VET03-A
3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 41
(discos de difuso) e aps a introduo da an-
O tratamento
VET04-A (CIM) do tibioticoterapia, mortali-
realizado com a
Clinical and Laboratory dades podem continuar
administrao
Standards Institute a ocorrer. Isso decorre
de antibiticos,
(CLSI) .23,24
do fato supracitado, de
principalmente por
via oral, adicionados que os animais doentes
6. Tratamento,
Controle e rao. no iro ingerir a rao
Preveno com o medicamento,
chegando a bito.
O tratamento realizado com a A profilaxia pode ser obtida a partir
administrao de antibiticos, princi-
de boas prticas de manejo, evitando
palmente por via oral, adicionados
altas densidades de estocagem, reali-
rao. No Brasil, dois antibiticos so
zao de arraoamento correto e redu-
licenciados para uso na aquicultura e
zindo injrias e fatores estressantes que
aplicveis ao tratamento das infeces
poderiam favorecer a ocorrncia de
por Aeromonas mveis, a oxitetracicli-
surtos por esse patgeno. Controle da
na e o florfenicol25. As doses adminis-
qualidade da gua tambm deve ser re-
tradas para o tratamento da doena so
alizado rotineiramente16; assim como
de 100mg/Kg de peso vivo (PV) para
oxitetraciclina e 10mg/Kg de PV para o controle de infestaes parasitrias, a
florfenicol. Independentemente do fr- partir da realizao de banhos terapu-
maco utilizado, o tratamento deve ser ticos com permanganato de potssio,
realizado por 10 dias consecutivos15. O sulfato de cobre ou cloreto de sdio. A
tratamento teraputico, presena desses agentes
apesar da eficincia dos A profilaxia pode ser infecciosos pode acar-
frmacos, pode apresen- obtida a partir de boas retar em leses de tegu-
tar falhas devido ano- prticas de manejo. mento e predispor s in-
rexia gerada pela doena. feces secundrias por
Desse modo, o tratamento dos lotes nos agentes bacterianos, principalmente A.
casos de surtos ter objetivo metafilti- hydrophila. Adicionalmente, podem ser
co. Esse visa ao tratamento de toda a po- administradas vitaminas C e E, que pro-
pulao do tanque, mas ter eficincia movem a estimulao do sistema imune
principalmente nos peixes ainda sadios dos peixes17. A vacinao uma alterna-
ou em perodo de incubao da doena tiva para a preveno das infeces por
(evitando assim a infeco), como tam- Aeromonas nas pisciculturas mundiais.
bm animais subclnicos ou no incio do No mundo, existem vacinas comerciais
quadro clnico e que ainda apresentam apenas para a preveno de surtos oca-
apetite1. Nos casos de surtos, mesmo sionados por Aeromonas salmonicida em
42 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
peixes (AQUAVAC FNM e NORVAX 8. BEAZ-HIDALGO, R.; MARTINEZ-MURCUA,
A.; FIGUERAS, M. J. Reclassification of Aeromonas
MINOVA 6)26. Porm, no existem va- hydrophila subsp. dhakensis Huys et al. 2002 and
cinas comercias para a preveno das Aeromonas aquariorum MARTINEZ-MURCIA
et al. 2008 as Aeromonas dhakensis sp. nov. comb
infeces por A. hydrophila. Diferentes nov. and emendation of the species Aeromonas
tipos de vacinas tm sido testados em hydrophila. Syst. Appl. MIcrobiol., v. 36, n. 3, p. 171-
176, 2013.
condies experimentais contra esse pa-
9. BORRELL, N.; ACINAS, S. G.; FIGUERAS, M.
tgeno a partir de componentes da pr- J. et al. Identification of Aeromonas clinical isolates
pria bactria. Contudo, essas diferentes by restriction fragmente lenght polymorphidm of
preparaes apresentam variveis graus PCR-amplified 16S rRNA genes. J. Clin. Microbiol.,
v. 35, n. 7, p. 1671-1674, 1997.
de proteo em peixes devido alta va-
10. MARTINO, M. E.; FASOLATO, L.;
riabilidade antignica das amostras de MONTEMURRO, F. et al. Determination of mi-
A. hydrophilla27,28. No Brasil, no existe crobial diversity of Aeromonas strains on the basis
of multilocus sequence typing, phenotype, and
nenhuma vacina licenciada para uso em presence of putative virulence genes. Appl. Environ.
pisciculturas29. Microbiol., v. 77, n. 14, p. 4986-5000, 2011.
11. LORN, J. G., FARFN, M.; FUST, M. C.
7. Referncias bibliogrficas Molecular phylogenetics and temporal diversifica-
tion in the genus Aeromonas based on the sequence
1. FIGUEIREDO, H. C. P.; CARVALHO-CASTRO,
of five housekeeping genes. PLOS One, v. 9, n. 2,
G. A.; LEAL, C. A. G. et al. Quem tem medo de
e88805.
Aeromonas? Panorama da Aquicultura, v. 18, n.
108, p. 26-31, 2008. 12. FALCO, A.; FROST, P.; MIEST, J. et al. Reduced
inflammatory response to Aeromonas salmonicida
2. EDBERG, S. C.; BROWME, F. A.; ALLEN, M.
infection in common carp (Cyprinus carpio L.) fed
J. Issues for microbial regulation: Aeromonas as a
with -glucan supplements. Fish Shellfish Immunol.,
model. Crit. Rev. Microbiol., v. 33, n. 1, p.89-100,
v. 36, n. 6, p. 1051-1057, 2012.
2007.
13. OLIVEIRA, S. R.; SOUZA, R. T. Y.; BRASIL, E.
3. VIVAS, J.; CARRACEDO, B.; RIANO, J. et al.
M. et al. LD50 of the bactria Aeromonas hydrophila
Behavior of an Aeromonas hydrophila aroA live vac-
to matrinx, Brycon amazonicus. Acta Amazonica, v.
cine in water microcosm. Appl. Environ. Microbiol.,
41, n. 2, p. 321-326, 2011.
v. 70, n. 5, p. 2702-2708, 2004.
14. NOGA, E. J. Fish disease: diagnosis and treatment.
4. FANG, H. M.; GE, H.; SIN, Y. M. Cloning, charac-
BlackwellPublishing, 2010, 367p.
terization and expression of Aeromonas hydrophila
major adhesion. Fish Shellfish Immunol., v. 16, n. 5, 15. AUSTIN, B; AUSTIN, D.A. Bacterial Fish
p. 645-658, 2004. Pathogens. Diseases of Farmed and Wild Fish, 4.
ed. Chichester: Springer/Prazis Publishing, 2007.
5. CARVALHO-CASTRO, G. A.; LOPES, C. O.;
553p.
LEAL, C. A. G. et al. Detection of type III secre-
tion system genes in Aeromonas hydrophila and 16. KUBITZA, F. Principais parasitoses e doenas em
their relationship with virulence in Nile tilapia. Vet. tilpias. Panorama da Aquicultura, v. 10, n. 60, p. 39-
Microbiol., v. 144, n. 3-4, p. 371-376, 2010. 53, 2000.
6. JANDA, J. M.; ABBOTT, S. L. The genus 17. KUBITZA, F. Antecipando-se s doenas na tila-
Aeromonas: taxonomy, pathogenicity and infec- picultura. Panorama da Aquicultura, v. 15, n. 89, p.
tion. Clin. Microbiol. Rev., v. 23, n. 1, p.35-73, 2010. 15-23, 2005.
7. BEAZ-HIDALGO, R.; FIGUERAS, M. J. 18. L EMOS, J. B.; RODRIGUES, M. E. B.;
Aeromonas spp. whole genomes and virulence fac- LOPES, J. P. Diagnstico de ectoparasitas e
tors implicated in fish disease. J. Fish. Dis., v. 36, n. 4, bactria em tilpias (Oreochromis niloticus)
p. 371-388, 2013. cultivadas na regio de Paulo Afonso, Bahia.

3. Septicemia por Aeromonas mveis em peixes 43


Rev. Bras. Eng. Pesca, v. 1, n. 1, p. 75-90, 2006. 24. CLSI. Methods for broth dilution susceptibility
testing of bacteria isolated from aquatic animals:
19. REHULKA, J.Aeromonascauses severe skin lesions Approved Guideline VET04-A. Clinical and
in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss): clinical Laboratory Standards Institute, Wayne.
pathology, haematology and biochemistry. Acta
Veterinaria Brno, v. 71, n. 3, p. 351-360, 2002. 25. PADUA, S. B.; MENEZES FILHO, R. N.; CRUZ,
C. Alevinos saudveis: o ponto de partida para uma
20. FIGUERAS, M. J.; BEAZ-HIDALGO, R.; produo estvel. Panorama da Aquicultura, v. 22, n.
PAREDES, K. Furunculosis y otras infecciones 134, p. 30-37, 2012.
producidas por Aeromonas. In: Enfermedades in-
fecciosas del cultivo de Salmonidos en Chile y el 26. MSD ANIMAL HEALTH. Vaccines and related
Mundo (ed. by R. Avendano-Herrera), p. 285 products. Disponvel em: http://www.thefishsite.
374. Niva Chile S.A., Puerto Varas, Chile. 2011. com/focus/msd-animal-health/216/merck-pro-
duct-overview-vaccines. Acesso em: 17 mai. 2014.
21. KOZINSKA, A.; PEKALA, A. Characteristics
of diasease spectrum in relation to species, sero- 27. POOBALANE, S.; THOMPSON, K. D.; ARDO,
groups and adhesion ability of motile aeromonads L. et al. Production and efficacy of an Aeromonas
in fish. Scientific World Journal, 2012, 949358. hydrophila recombinant S-layer protein vaccine in
fish. Vaccine, v. 28, n. 20, p. 3540-3547, 2010.
22. PRIDGEON, J. W.; KLESIUS, P. H.; SONG, L. et
al. Identification, virulence, and mass spectrometry 28. TU, F. P.; CHU, W. H.; ZHUANG, X. Y. et al. Effect
od toxic ECP fractions of West Alabama isolates of of oral immunization with Aeromonas hydrophila
Aeromonas hydrophila obtained from a 2010 dis- ghosts on protection against experimental fish in-
ease outbreak. Vet. Microbiol. v. 163, n. 3-4, p. 336- fection. Lett. Appl. Microbiol., v. 50, n. 1, p.13-17,
343, 2013. 2010.
23. CLSI. Methods for antimicrobial disc susceptibil- 29. FIGUEIREDO, H. C. P.; LEAL, C. A. G.
ity testing of bacterial isolated from aquatic ani- Tecnologias aplicadas em sanidade de peixes. R.
mals: Approved Guideline VET03-A. Clinical and Bras. Zootec., v. 37, suplemento especial, p.08-14,
Laboratory Standards Institute, Wayne. 2006. 2008.

44 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


4. Infeco por
Streptococcus
iniae em
peixes

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Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340)
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos A. G. Leal* (CRMV-MG 9014)
*carlosleal@vet.ufmg.br

1. Introduo encefalite, altos ndices de mortalidade


e perdas econmicas significativas1.
Streptococcus iniae considerado
um dos principais agentes etiolgicos O primeiro isolamento e a identi-
causadores de ficao desse patgeno
estreptococoses em Streptococcus iniae data de 1976 e foram
diversas espcies de considerado um dos realizados a partir de
peixes de gua doce e principais agentes abscessos subcutneos
marinhos. As infeces etiolgicos causadores em uma espcie amaz-
em peixes causadas por de estreptococoses em nica de golfinho de gua
essa bactria esto as- diversas espcies de doce (Inia geoffrensis)2.
sociadas a quadros de peixes de gua doce e Desde ento, observa-
septicemia e meningo- marinhos. ram-se infeces por S.
4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 45
iniae em pisciculturas na plantel em casos de sur-
No Brasil, esse
maioria dos continentes to7. Esse microrganis-
microrganismo foi
(Figura 1). Surtos da
associado pela primeira mo foi por muitos anos
doena em peixes foram
vez a um caso de surto considerado o principal
relatados nos Estados em fazendas de tilpia entrave sanitrio para
Unidos, Canad, Caribe, do Nilo no ano de 2012 as tilapiculturas naque-
Japo, China, Singapura, la regio, bem como no
Taiwan, Israel, Bahrein, restante do mundo8.
Indonsia e Austrlia3,4,5,6. No Brasil, Apesar de sua importncia histrica,
esse microrganismo foi associado pela os casos de infeco por esse patge-
primeira vez a um caso de surto em fa- no vm apresentando um decrscimo
zendas de tilpia do Nilo nos ltimos anos, sendo
(Oreochromis niloticus) sobrepujados pelos ca-
Foi por muitos anos
no ano de 2012 .1
considerado o principal sos de surtos causados
Essa bactria um entrave sanitrio para por Streptococcus aga-
dos patgenos de maior as tilapiculturas. lactiae. Adicionalmente,
relevncia para a produ- casos de infeco por S.
o comercial de pei- iniae tm sido relatados
xes tropicais, principalmente na sia . em seres humanos, principalmente
3

Nesse continente, os principais peixes como doena ocupacional (infeces


acometidos so as tilpias, sendo ob- cutneas) oriunda da manipulao de
servadas mortalidades de 30 a 50% do peixes de cultivos vivos infectados,

Figura 1. Mapa demonstrando a distribuio mundial (pases marcados em vermelho) da ocorrncia de


surtos por Streptococcus iniae em pisciculturas.

46 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


assim como de peixes ornamentais6,7. cos causadores de septicemia e menin-
Em pessoas imunossuprimidas, ocor- goencefalite em peixes: Streptococcus
rncias de casos de bacteremia, artrite, parauberis12, Streptococcus agalac-
meningite, endocardite e osteomielite tiae , Streptococcus dysgalactiae14,
13

tambm j foram descritas4,7. Streptococcus iniae1,3, Streptococcus pho-


cae15 e Streptococcus ictaluri11. No Brasil,
2. Etiologia e Diversidade S. agalactiae, S. dysgalactiae e S. iniae fo-
Gentica ram descritos como agentes causadores
Pertencente famlia Strepto de septicemia e meningoencefalite em
coccaceae, o gnero Streptococcus abran- tilpia do Nilo1,13,14.
ge uma ampla gama de espcies bacteria- S. iniae uma das principais esp-
nas associadas a processos infecciosos cies bacterianas do gnero Streptococcus.
em seres humanos e em animais, bem Essa bactria pode ser encontrada no
como microrganismos ambiente aqutico, em sedimentos, em
saprfitos ou no pato- peixes portadores e/ou
Os principais agentes outros animais aquti-
gnicos. Atualmente,
etiolgicos causadores cos. Aps sua introduo
104 espcies e 20 subes-
de septicemia e em uma propriedade,
pcies bacterianas so
meningoencefalite em mesmo com a remoo
descritas como perten-
peixes: Streptococcus de animais doentes, a
centes a esse gnero9. Os parauberis12,
Streptococcus so cocos bactria pode permane-
Streptococcus cer em biofilmes na tu-
gram-positivos, com agalactiae13,
dimetro de 0,3-2,0 m, bulao, tanques e filtros
Streptococcus da piscicultura16. S. iniae
organizados em pares ou dysgalactiae14, anaerbio facultativo
cadeia lineares curtas, Streptococcus iniae1,3, e cresce muito bem em
catalase negativos, no Streptococcus phocae15
meios de cultivos, como
mveis e no formado- e Streptococcus ictaluri.
gar BHI, gar sangue
res de esporos10. Alm
e gar Todd-Hewitt.
das caractersticas feno-
Colnias mucoides com reas -hemo-
tpicas, o tipo de hemlise e a sorotipa-
ltica, aps 24 a 48 horas de incubao a
gem baseada na antigenicidade de po-
28C em placas de gar sangue, so ob-
lissacardeos capsulares, denominados
servadas1,17. No crescem a 10C e 45C
de Grupos de Lancefield, tm sido em- nem em meios de cultivo com pH 9,617.
pregados para caracterizar as diferentes Os isolados obtidos dessa bactria no
espcies de Streptococcus11. se enquadram em nenhum grupo de
Seis espcies tm sido descritas Lancefield, e a identificao bioqumica
como os principais agentes etiolgi-
4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 47
a partir de kits comer- nos e peixes, observou-
No Brasil, os isolados
ciais inconclusiva .
1
se alta similaridade entre
de tilpia do Nilo
A caracterizao de eles quando analisados
apresentaram dois
isolados de S. iniae em por PFGE21. No Brasil,
padres genticos
grupos de acordo com os isolados de tilpia
distintos.
as caractersticas fenot- do Nilo apresentaram
picas, bioqumicas e de dois padres genticos
virulncia uma forma importante de distintos quando avaliados por PFGE.
identificar e tipagem de isolados patog- Amostras com diferentes gentipos fo-
nicos. Porm, essa forma ram isoladas de um mes-
de tipagem no foi capaz Casos de infeco por mo caso, mostrando que
de distinguir as amos- S. iniae foram descritos diferentes clones podem
tras invasivas das no em seres humanos, ocorrer simultaneamen-
invasivas, assim como golfinhos e peixes. te durante um caso de
isolados obtidos de se- surto. A estrutura gen-
res humanos e peixes . 18 tica das populaes de S.
A utilizao de ferramentas molecula- iniae isoladas de tilpias em diferentes
res para a genotipagem desses isolados regies do mundo ainda desconhecida.
tem sido realizada por diferentes meto- 3. Espcies susceptveis,
dologias, como RFLP (Polimorfismo transmisso e doena clnica
de Fragmentos de Restrio)19, RAPD em tilpias
(Amplificao Randmica de DNA
Casos de infeco por S. iniae fo-
Polimrfico)20 e PFGE (Eletroforese
ram descritos em seres humanos4,7, gol-
em Campo Pulstil)21. Por RFLP, os iso-
finhos2, morcegos5 e peixes. Atualmente
lados de S. iniae apresentaram padres
existem 34 espcies de peixes, de gua
genticos distintos de acordo com a
doce e marinhos, susceptveis infeco
origem geogrfica (Estados Unidos e
por S. iniae, incluindo diferentes esp-
Israel), mas no houve distino entre
cies e hbridos de tilpia
os isolados obtidos de
(Tabela 1).
trutas e tilpias dentro A transmisso da A transmisso da
de cada regio19. J por bactria ocorre por bactria ocorre por con-
RAPD, os isolados obti- contato direto, entre tato direto, entre pei-
dos de trutas so distin- peixes infectados e xes infectados e sadios,
tos de isolados oriundos sadios, e por contato e por contato indireto,
de outros peixes20. Na indireto, atravs da atravs da veiculao do
comparao de isolados veiculao do patgeno, patgeno, via gua prin-
obtidos de seres huma- via gua cipalmente. Em condi-
48 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Tabela 1. Principais espcies de peixes susceptveis
infeco por Streptococcus iniae
Espcies susceptveis*
Acanthopagrus australis3 Oreochromis niloticus1
Anisotremus spp. 3
Pagrus pagrus4
Arothron hispidus3 Paralichthys olivaceus3
Cromileptes altivelis3 Plecoglossus altivelius3
Dicentrarachus labrax3 Pomadasys stridens3
Epinephalis tauvina3 Sardinops melanostictus17
Epinephelus guttatus 18
Scaridae spp. 3
Haemulidae spp. 3 Scarus taeniopterus22
Ictalurus punctatus17 Sciaenops occellatus3
Lates calcarifer3 Seriola quingueradiata3
Lutjanus campechanus22 Siganus spp. 3
Morone chrysops x M. sexatilis3 Sparisoma aurofrenatum22
Mugus cephalus 3
Sparisoma viridae3
Ocyurus chrysurus22 Sparus aurata4
Onchorhynchus kisutch3 Synodus variegates3
Onchorhynchus rhodurus var. macrostemus3 Tilapia niloticus x T. aureas3
Oncorynchus mykiss4 Variola louti3
*Os nmeros sobrescritos so referentes as publicaes que descrevem a espcie como susceptvel.

es experimentais, a presena dos fatores de


transmisso pode ser re- No campo, a presena risco, o microrganismo
alizada por: coabitao de peixes portadores transmitido e causa
entre animais infectados parece ser o principal infeco nos animais sa-
e sadios; por via oral; via
reservatrio da bactria. dios23. Canibalismo e a
injeo intraperitoneal; ingesto de fezes de ani-
e via banhos de imerso em peixes com mais contaminados tambm so descri-
ou sem presena de leses cutneas. No tos como potenciais formas de propaga-
campo, a presena de peixes portadores o da infeco por S. iniae em sistemas
parece ser o principal reservatrio da de cultivo comerciais23.
bactria. Quando esses coabitam os sis- No Brasil, os casos da infeco por
temas de cultivo com animais sadios ou S. iniae foram observados em peixes na
esto presentes no ambiente (Ex. peixes fase de pr-abate24. Porm, acredita-
de vida livre nos mananciais onde esto -se que alevinos possam ser portadores
alojadas as gaiolas ou tanques-rede), na assintomticos da bactria e introduzir
4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 49
esse patgeno em plan- lmina dgua. Outros si-
Os alevinos no
tis livres. Dessa forma, nais clnicos observados
apresentam sinais
uma larvicultura que em peixes infectados so
clnicos da doena.
possua matrizes infecta- anorexia, letargia, mela-
das com a bactria pode nose, distrbios respira-
disseminar a doena entre propriedades trios, exoftalmia, opacidade de crnea,
em diferentes regies do pas. Como os hemorragia e ulcerao de tegumento,
alevinos no apresentam sinais clnicos hemorragia perianal e ascite,4,22,23,24,25,26.
da doena (em uma infeco natural), Na necropsia, podem ser verificados:
so alojados nas fazendas e podero ma- acmulo de lquido serossanguinolento
nifestar a doena na fase adulta, aps a na cavidade celomtica; esplenomega-
introduo e transmisso do patgeno lia; hepatomegalia e palidez dos rgos
para os outros peixes da propriedade24. internos; petquias e sufuses em r-
Em condies experimentais, mesmo gos da cavidade celomtica4. Na avalia-
alevinos de tilpias do Nilo podem o histopatolgica, as principais altera-
apresentar sinais clnicos da infeco es patolgicas causadas pela infeco
por S. iniae, fato que no so: epicardite e pericar-
observado em condi- A infeco por S. iniae dite fibrogranulomatosa;
es de campo . 8,25
causa uma doena esteatose granulomatosa
A infeco por septicmica em tilpias, do pericrdio; peri-he-
S. iniae causa uma do- sendo capaz de invadir patite fibrinosa; atrofia
ena septicmica em diferentes rgos do de lamelas secundrias
tilpias, sendo capaz de peixe. das brnquias; crebro
invadir diferentes rgos com meningite fibrinosa
do peixe acometido e e infiltrado perivascular
se multiplicar. Um dos principais teci- mononuclear, vasculite e gliose;
dos acometidos pela bactria o siste- vasculite granuloctica multissistmica
ma nervoso central, onde verificado pode ser visualizada na bexiga natat-
um quadro severo de ria, rim e bao do peixe
meningoencefalite. Por Sinais clnicos da acometido22. Estudo re-
esse motivo, alguns dos doena so de origem cente confirmou o cre-
principais sinais clnicos nervosa, como, por bro como rgo-alvo da
da doena so de ori- exemplo, a natao bactria, sendo diagnos-
gem nervosa, como, por errtica e perda de ticado, por anlise his-
exemplo, a natao err- equilbrio e orientao topatolgica, um quadro
tica e perda de equilbrio do peixe na lmina de leptomeningite linfo-
e orientao do peixe na dgua. -histioctico, meningo-
50 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
encefalite, encefalite e causados por S. iniae,
Duas formas de
meningite em tilpias do
manifestao clnica da fato que, especulativa-
Nilo infectadas por via
doena so observadas: mente, pode estar asso-
intraperitoneal27.
1- forma subaguda; 2- ciado baixa1 virulncia
O curso da doena forma aguda. das amostras . Contudo,
no peixe infectado va- no existem evidncias
rivel e depende da pre- cientficas que atestem
sena e intensidade dos fatores de risco, essa informao. Alm da virulncia das
virulncia da amostra e status imune do amostras, fatores ligados s linhagens de
peixe24. Em geral, duas formas de mani- peixes cultivadas e sistemas de produo
festao clnica da doena so observa- adotados no pas podem contribuir ou
das: 1- forma subaguda; 2- forma aguda. influenciar a ocorrncia dessa doena.
A forma subaguda ocorre entre 2-4 dias Uma maior prevalncia da infeco por
ps-infeco, com evoluo gradual, e S. agalactiae pode propiciar um efeito de
os peixes infectados apresentam sinais excluso competitiva com relao a S.
clnicos de injria de tegumento, mela- iniae. Esse fenmeno tambm tem sido
nose e natao errtica. Nessa forma, a observado em outras regies do mundo.
morbidade e mortalidades observadas Em algumas tilapiculturas da Amrica
so baixas nas propriedades acometidas. Central, onde programas de vacinao
J a forma aguda a mais grave e devas- massal contra S. agalactiae tm sido re-
tadora da doena. Sua evoluo ocorre alizados, a ocorrncia de casos de in-
de maneira muito rpida e altas morta- feco por S. iniae tem incrementado.
lidades so observadas, principalmente Isso denota que, em condies naturais,
durante a noite. A observao de sinais essa competio entre patgenos pode
clnicos muitas vezes limitada, devido existir. Quando exercida uma presso
evoluo rpida da doena e morte de seleo sobre um deles, como, por
aguda dos animais. Apesar disso, peixes exemplo, um programa de vacinao,
com opacidade de crnea e exoftalmia o outro microrganismo circulante, que
podem ser verificados23. at ento estava inibido, pode reemergir
Isolados de S. iniae so descritos na como causador de surtos28.
literatura como altamente patognicos
para peixes. Porm, as amostras 4. Patognese e fatores de risco
brasileiras isoladas de tilpia do Nilo para a doena
parecem ser menos virulentas quando At o momento, a patognese
comparadas a isolados de S. iniae de e mecanismos de virulncia de S. iniae
diferentes regies do mundo24. No pas patognicos para peixes no so com-
existe uma baixa casustica de surtos pletamente conhecidos16. Sabe-se que
4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 51
a bactria tem a capacidade de invadir da doena ou potencializ-la. O cultivo
e se disseminar na corrente sangunea de peixes em tanques-rede o principal
de peixes, infectando diferentes rgos. sistema de produo utilizado no Brasil
Para isso, fatores de virulncia, como e, nesse sistema, os peixes so criados em
polissacardeo capsular, citolisina S, a altas densidades de estocagem, o que fa-
enzima fosfoglicomutase e a protena vorece a infeco por S. iniae. Todos esses
M-like, so requeri- fatores foram observados
dos . O polissacar-
24,26
O diagnstico e a nos surtos da infeco
deo capsular e a protena identificao do agente por S. iniae no Brasil. Os
M-like possibilitam a infeccioso podem ser casos ocorreram durante
evaso da bactria do sis- realizados atravs da o vero, com temperatura
tema imune dos peixes, associao de sinais da gua igual ou superior
evitando a fagocitose clnicos e exames a 30oC, em tilpias do
pelos macrfagos29,30. A laboratoriais. Nilo adultas, cultivadas
citolisina S uma prote- em tanque-rede1. Como
na que provoca hemlise nas hemcias supracitado, a frequncia
dos peixes31. A fosfoglicomutase, por de ocorrncia da doena no pas baixa.
sua vez, confere uma maior rigidez pa- Portanto, outros fatores de risco podem
rede celular da bactria, inibindo, dessa ser essenciais para a infeco por S. iniae
forma, a ao de peptdeos antimicro- em tilapicultura, sendo esses no verifica-
bianos32. A associao desses fatores dos ou poucos presentes nas piscicultu-
modula a virulncia das amostras bacte- ras nacionais.
rianas, potencializando a surgimento da 5. Diagnstico
doena nos peixes.
As condies de cultivo e alteraes O diagnstico e a identificao do
de fatores ambientais causam estresse agente infeccioso podem ser realizados
fisiolgico nos peixes e predispem atravs da associao de sinais clnicos
ocorrncia da doena24. Em piscicultu- e exames laboratoriais. Devido ampla
ras, os principais fatores predisponentes gama de hospedeiros susceptveis e si-
para a ocorrncia de surtos de S. iniae nais clnicos genricos verificados nos
so as altas densidades de estocagem e o casos de infeces em peixes pelas dife-
aumento da temperatura da gua. Outro rentes espcies do gnero Streptococcus,
ponto importante a idade do lote, o diagnstico laboratorial indispens-
pois, como mencionado anteriormente, vel para a determinao do agente etio-
a doena ocorre geralmente em peixes lgico envolvido . O diagnstico de
33

adultos. O tipo de sistema de produo estreptococose por S. iniae em peixes


tambm pode predispor ocorrncia baseado no isolamento e identificao
52 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
do microrganismo. Peixes moribundos e API 20 Strep, no so capazes de
com sintomatologia clnica da doena identificar S. iniae24.
devem ser coletados e encaminhados vi- Com o desenvolvimento e populari-
vos ou refrigerados para os laboratrios zao de tcnicas moleculares para iden-
de diagnstico24. tificao de microrganismos e diagns-
No laboratrio, o diagnstico pode tico de doenas, foi possvel a realizao
ser realizado por bacteriologia ou por de reaes de PCR para identificao de
mtodos moleculares. Por causar qua- S. iniae com iniciadores espcie-espec-
dros de septicemia e meningoencefa- ficos ou universais para genes conserva-
lite, o isolamento de S. iniae pode ser dos associadas ao sequenciamento e
realizado a partir da coleta do sistema anlise filogentica3. A grande vantagem
nervoso central e de rgos altamente desses testes que, alm da confirmao
vascularizados ou que desempenham da espcie bacteriana envolvida no sur-
funes imunolgicas, como rim, f- to, permitem tambm o diagnstico di-
gado e bao, dos peixes acometidos. reto a partir de tecidos infectados sem a
Fragmentos desses rgos so coleta- necessidade de isolamento bacteriano24.
dos de maneira assptica e plaqueados
em gar sangue24, gar BHI (Infuso
6. Tratamento, preveno e
Crebro Corao) TSA (gar Soja
controle
Tripticasena) ou THA (Todd-Hewitt). A antibioticoterapia oral tem se
Aps o perodo de incubao de 24-48 mostrado eficaz no tratamento nos ca-
horas, a identificao primria do agen- sos de infeco por S. iniae em peixes.
te infeccioso baseada na avaliao da J foi demonstrado que os antibiticos
morfologia das colnias por micros- base de cefatoxima, eritromicina,
copia ptica (colorao ofloxacina, penicilina,
pelo mtodo de Gram), A antibioticoterapia tetraciclina, florfenicol e
tipo de hemlise, padro oral tem se mostrado vancomicina so eficazes
de antgenos capsulares eficaz no tratamento no controle de S. iniae
(no classificado em ne- nos casos de infeco em ensaios experimen-
nhum grupo Lancefield) por S. iniae em peixes. tais in vitro. In vivo, a
e testes bioqumicos administrao de florfe-
(catalase e oxidase, por nicol foi eficiente para
exemplo) . Entretanto, isolados suspei- o controle da mortalidade de tilpias
34

tos no podem ser identificados como S. do Nilo infectadas experimentalmente


iniae apenas pelo uso de testes sorolgi- com S. iniae35.
cos e bioqumicos. O uso de kits comer- No Brasil, apenas antibiticos base
cias, como Slidex Latex Agglutination de florfenicol e oxitetraciclina podem

4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 53


ser utilizados para conduzir uma inter- vos da bactria, essa terapia pode incor-
veno teraputica em surtos dentro de rer em falhas.
uma piscicultura comercial36. No con- A vacinao uma alternativa para
texto nacional, a droga que tem se mos- a preveno e controle das infeces
trado mais aplicvel ao tratamento das por Streptococcus iniae nas pisciculturas.
infeces por S. iniae florfenicol. O tra- Diversas vacinas tm sido desenvolvi-
tamento teraputico deve ser realizado das contra diferentes Streptoccocus pa-
por via oral, misturado rao, durante tognicos para peixes, sendo que, atu-
a fase de surto da doena. Este tem por almente, no mundo, j existem vacinas
objetivo evitar a infeco dos animais comercializadas contra S. iniae (Norvax
sadios e promover a cura dos animais Strep Si e Aquavac Garvetil)26,37. Esses
subclnicos ou em fases iniciais da doen- produtos, de acordo com os fabricantes,
a, que ainda ingerem rao. De acordo so indicados para utilizao em trutas-
com dados de genricos de literatura, o -arco-ris, tilpias do Nilo ou qualquer
florfenicol na dose de 10 outra espcie susceptvel
mg/kg de peixe/dia, por A vacinao uma supramencionada. As va-
um perodo de 10 dias, alternativa para a cinas desenvolvidas, ini-
eficiente no controle da preveno e controle cialmente, foram eficazes
infeco por S. iniae . 10
das infeces por no combate da doena,
Porm, estudo realizado Streptococcus iniae nas sendo capaz de reduzir
por Gaunt e colaborado- pisciculturas. de 50% para 5% as mor-
res demonstrou que uma talidades causadas por
dose 50% maior (15 mg/ esse patgeno em fazen-
Kg de peso vivo) apresenta melhor efici- das. Porm, esses imunobiolgicos no
ncia no controle da infeco por S. iniae apresentaram eficcia de proteo por
em tilpias do Nilo35. Alternativamente, longos perodos, pois a bactria foi capaz
a administrao de antibitico base de de variar o polissacardeo capsular. Isso
oxitetraciclina tem sido descrita na lite- promoveu a emergncia de uma nova
ratura como eficiente no controle de in- cepa de S. iniae, com um sorotipo cap-
feces contra bactrias gram-positivas sular diferente do daquela utilizada na
e gram-negativas em peixes10. Contudo, produo da vacina. Dessa forma, novas
no existem dados demonstrando a sua vacinas esto sendo desenvolvidas para
aplicao teraputica em tilpias infec- tentar induzir imunidade aos diferentes
tadas por S. iniae. Como a oxitetraciclina sorotipos de S. iniae16,25,26,37. No Brasil,
possui capacidade reduzida de transpor no existem vacinas licenciadas contra
a barreira hematoenceflica, e o sistema esse patgeno. Alm disso, no existem
nervoso central um dos principais al- estudos da eficincia das vacinas comer-
54 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
ciais disponveis no mundo frente a de- 7. DODSON, S. V.; MAURER, J. J.; SHOTTS, E. B.
Biochemical and molecular typing of Streptococcus
safios com as amostras isoladas no pas. iniae isolated from fish and human cases. J. Fish Dis.,
O controle da infeco por S. iniae v. 22, n. 5, p. 331-336, 1999.
em pisciculturas baseado na manuten- 8. ZHOU, S. M.; FAN, Y.; ZHU, X. Q. et al. Rapid
identification of Streptococcus iniae by specific PCR
o adequada das condies ambientais, assay utilizing genetic markers in ITS rDNA. J. Fish
aquisio de alevinos livres do patge- Dis., v. 34, n. 4. P. 265-217, 2011.
no, realizao de tratamentos tticos 9. LPSN. List of prokaryotic names with standing in
nomenclature: Genus Streptococcus. Disponvel
com antibiticos, descarte adequado de em: <http://www.bacterio.net/streptococcus.
animais mortos e/ou com sinais clnicos html>. Acesso em: 30 jan. 2014.
de doena neurolgica, boas prticas de 10. AUSTIN, B; AUSTIN, D.A. Bacterial Fish
manejo, manejo sanitrio e a implemen- Pathogens. Diseases of Farmed and Wild Fish, 4.
ed. Chichester: Springer/Prazis Publishing, 2007.
tao de um programa de biosseguran- 553p.
a. Esses so procedimentos genricos 11. SHEWMAKER, P. L.; CAMUS, A. C.; BAILIFF,
recomendados para minimizar o impac- T. et al. Streptococcus ictaluri sp. nov., isolated from
Channel Catfish Ictalurus punctatus broodstock.
to e impedir a introduo de doenas Int. J. Syst. Evol. Microbiol., v. 57, n. 7, p. 1603-1606,
infecciosas em uma piscicultura24,37. 2007.
12. DOMENECH, A; DERENAAANDEZ-
7. Referncias bibliogrficas GARAYZABAL, J. F.; PASCUAL, C. et al.
1. FIGUEIREDO, H. C. P.; NOBREGA-NETTO, L.; Streptococcosis in cultured turbot, Scophthalmus
LEAL, C. A. G. et al. Streptococcus iniae outbreaks maximus (L.), associated with Streptococcus parau-
in brazilian Nile tilpia (Oreochromis niloticus L.) beris. J. Fish Dis., v. 19, n. 1, p. 3338, 1996.
farms. Braz. J. Microbiol., v. 43, n. 2, p. 576-580, 13. MIAN, G. F.; GODOY, D. T.; LEAL, C. A. G. et
2012. al. Aspects of the natural history and virulence of S.
agalactiae infection in Nile tilapia. Vet. Microbiol. v.
2. PIER, G. B.; MADIN, S. H. Streptococcus iniae sp.
136, n. 1-2, p. 180-183, 2008.
nov., beta hemolytic Streptococcus isolated from an
amazon freshwater dolphin, Iniae geoffrensis. Int. J. 14. NOBREGA-NETTO, L.; LEAL, C.A.G.;
Syst. Bacteriol., v. 26, n. 4, p.545553, 1976. FIGUEIREDO, H.C.P. Streptococcus dysgalactiae as
an agent of septicemia in Nile tilapia, Oreochromis
3. AGNEW, W.; BARNES, A. C. Streptococcus iniae:
niloticus (L.). J. Fish Dis., v. 34. n. 3, p. 251-254,
An aquatic pathogen of global veterinary signifi-
2011.
cance and challenging candidate for reliable vacci-
nation. Vet. Microbiol., v. 122, n. 1-2, p. 115, 2007. 15. GIBELLO, A.; MATA, A. I.; BLANCO, M. M. et
al. First identification of Streptococcus phocae iso-
4. EL AAMRI, F.; CABALLERO, M. J.; REAL, F. et
lated from Atlantic Salmon (Salmo salar). J. Clin.
al. Streptococcus iniae in gilthead seabream (Sparus
Microbiol., v. 43, n. 1, p. 526-527, 2005.
aurata, L.) and red porgy (Pagrus pagrus, L.): ultras-
tructural analysis. Vet. Pathol., (in press), p. 1-4, 2014. 16. MILLARD, C. M.; BAIANO, J. C. F.; CHAN, C. et
al. Evolution of the capsular operon of Streptococcus
5. NAWAWI, R. A., BAIANO, J.; BARNES, A. C.
iniae in response to vaccination. Appl. Environ.
Genetic variability amongst Streptococcus iniae iso-
Microbiol. v. 78, n. 23, p. 8219-8226, 2012.
lates from Australia. J. Fish. Dis., v. 31, n. 4, p. 305-
309, 2008. 17. KUSUDA, R.; SALATI, F. Enterococcus seriolo-
cida and Streptococcus iniae. In: WOO, P. T. K.;
6. ZHOU, S. M.; XIE, M. Q.; ZHU, X. Q. et al.
BRUNO, D. W. Fish diseases and disorders: viral,
Identification and genetic characterization of
bacterial and fungal infections. Nova Iorque, CABI
Streptococcus iniae strains isolated from diseased
Publishing, p. 309-3013, 1999.
fish in China. J. Fish Dis., v. 31, n. 11, p 869-875,
2008. 18. DODSON, S. V.; MAURER, J. J.; SHOTTS, E. B.

4. Infeco por Streptococcus iniae em peixes 55


Biochemical and molecular typing of Streptococcus 29. LOWE, B. A.; MILLER, J. D.; NEELY, M. N.
iniae isolated from fish and human cases. J. Fish Dis., Analysis of the polysaccharide capsule of the sys-
v. 22, n. 5, p. 331-336, 1999. temic pathogen Streptococcus iniae and its impli-
cations in virulence. Infect. Immun., v. 75, n. 3, p.
19. ELDAR, A.; LAWHON, S.; FRELIER, P. F. et al. 12551264, 2007.
Restriction fragment length polymorphisms of 16s
rDNA and of whole rRNA genes (ribotyping) of 30. LOCKE, J. B.; AZIZ, R. K.; VICKNAIR, M. R. et
Streptococcus iniae strains from the United States at. Streptococcus iniae M-like protein contributes
and Israel. FEMS Microbiol. Let., v. 151, n. 2, p. 155- to virulence in fish and is a target for live attenuated
162, 1997. vaccine development. PLoS ONE, v. 3, n.7, e2824,
2008.
20. KVITT, H.; COLORNI, A. Strain variation and
geographic endemism in Streptococcus iniae. Dis. 31. LOCKE, J. B.; COLVIN, K. M.; VARKI, N. et al.
Aquat. Organ., v. 61, n. 1-2, p. 67-73, 2004. Streptococcus iniae -hemolysin streptolysin S is a
virulence factor in fish infection. Dis. Aquat. Org., v.
21. NAWAWI, R. A.; BAIANO, J.; BARNES, A. C. 76, n. 1, p. 1726, 2007.
Genetic variability amongst Streptococcus iniae iso-
lates from Australia. J. Fish Dis., v. 31, n. 4, p. 305- 32. BUCHANAN, J. T.; STANNARD, J. A.; LAUTH,
309, 2008. X. et al. Streptococcus iniae phosphoglucomutase is
a virulence factor and a target for vaccine develop-
22. KEIRSTEAD, N. D.; BRAKE, J. W.; GRIFFIN, ment. Infect. Immun., v. 73, n. 10, p. 69356944,
M. J. et al. Fatal septicemia caused by the zoonotic 2005.
bacterium Streptococcus iniae during an outbreak in
Caribbean reef fish. Vet. Pathol., (in press), 2013. 33. MATA, A. I.; GIBELLO, A.; CASAMAYOR, A. et
al. Multiplex PCR assay for detection of bacterial
23. BROMAGE, E. S.; OWENS, L. Infection of bar- pathogens associated with warm-water streptococ-
ramundi Lates calcarifer with Streptococcus iniae: cosis in fish. Appl. Environ. Microbiol., v. 70, n. 5, p.
effects of different routes of exposure. Dis. Aquat, 3183-3187, 2004.
Org., v. 52, n. 3, p. 199-205, 2002.
34. GLAZUNOVA, O. O.; RAOULT, D.; ROUX, V.
24. FIGUEIREDO, H. C. P.; NOBREGA-NETTO, Partial sequence comparison of the rpoB, soda, gro-
L.; LEAL, C. A. G. Streptococcus iniae: um grande EL, and gyrB genes within the genus Streptococcus.
vilo da aquicultura mundial identificado no Brasil. Int. J. Syst. Evol. Bacteriol., v. 59, n. 9, p. 2317-2322,
Panorama da Aqicultura, v. 19, n. 112, p. 26-29, 2009.
2009.
35. GAUNT, P. S.; ENDRIS, R.; MCGINNIS, A. et al.
25. SHELBY, R. A.; KLESIUS, P. H.; SHOEMAKER, Determination of florfenicol dose rate in feed for
C. A. et al. Passive immunization of tilapia, control of mortality in Nile tilapia infected with
Oreochromis niloticus (L.), with anti-Streptococcus Streptococcus iniae. J. Aquat. Anim. Health, v. 22, n.
iniae whole sera. J. Fish Dis., v. 25, n. 1, p.1-6, 2002. 3, p. 158-166, 2010.
26. LOCKE, J. B.; VICKNAIR, M. R.; OSTLAND, V. 36. PADUA, S. B.; MENEZES FILHO, R. N.; CRUZ,
E. et al. Evaluation of Streptococcus iniae killed bac- C. Alevinos saudveis: o ponto de partida para uma
terin and live attenuated vaccines in hybrid strped produo estvel. Panorama da Aquicultura, v. 22, n.
bass through injection and bath immersion. Dis. 134, p. 30-37, 2012.
Aquat. Org., v. 89, n. 2, p. 117-123, 2010.
37. SHOEMAKER, C. A.; LAFRENTZ, B. R.;
27. BAUMS, C. G.; HERMEYER, K. LEIMBACH, S. KLESIUS, P. H. et al. Protection against heterolo-
et al. Establishment of a model of Streptococcus iniae gous Streptococcus iniae isolates using a modified
meningoencephalitis in Nile tilapia (Oreochromis bacterin vaccine in Nile tilapia, Oreochromis niloti-
niloticus). J. Comp. Path., v. 149, n. 1, p. 94-102, cus (L.). J. Fish Dis., v. 33, n. 7, p. 537-544, 2010.
2013.
28. BACHRACH, G.; ZLOTKIN, A.; HURVITZ, A.
et al. Recovery of Streptococcuss iniae from diseased
fish previously vaccinated with a streptococcus vac-
cine. Appl. Environ. Microbiol., v. 67, n. 8, p. 3756-
3758, 2001.

56 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


5. Infeco por
Weissella ceti em peixes

Frederico Augusto de Alcntara Costa1 bigstockphoto.com


Carlos Augusto Gomes Leal2 (CRMV-MG 9014)
Henrique Csar Pereira Figueiredo2* (CRMV-MG 5839)
1
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, Faculdade de Medicina Veterinria/UFU
2
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, DMVP, Escola de Veterinria/UFMG
*autor para correspondncia:
figueiredoh@yahoo.com

Introduo entanto, os problemas sanitrios esto


entre os principais entraves na cadeia
Pertencente famlia dos salmon-
deos, a truta-arco-ris (Oncorhynchus produtiva dessa espcie, sendo a maio-
mykiss) originria de regies de clima ria de seus patgenos e doenas j bem
temperado e possui conforto trmico descrita pela literatura.
abaixo de 20C. Por esse motivo, as Recentemente a bactria Weissella
truticulturas nacionais esto localizadas ceti foi identificada como patgeno
em regies restritas do pas, onde o cli- emergente da piscicultura mundial cau-
ma e a temperatura da sador de uma doena
gua so mais frios. A A bactria Weissella ceti septicmica em trutas-
truta-arco-ris uma das foi identificada como -arco-ris. O primeiro
espcies de peixe mais patgeno emergente da caso dessa enfermidade
cultivadas comercial- piscicultura mundial em peixes ocorreu no
mente em todo o mun- causador de uma ano de 2007, em uma
do, principalmente em doena septicmica em truticultura na China. O
pases da Europa. No trutas-arco-ris. surto acometeu animais
5. Infeco por Weissella ceti em peixes 57
adultos em fase final de abate, causando picamente classificadas como cocos
um quadro clnico de hemorragia gene- ovalados gram-positivos, catalase ne-
ralizada e alta taxa de mortalidade nos gativos, heterofermentativos e no
lotes cultivados. mveis. Bactrias do gnero Weissella
O primeiro surto da doena no so comumente isoladas do solo,
Brasil foi observado no vero de 2008, alimentos fermentados e do intestino
em uma fazenda de trutas-arco-ris no de animais saudveis, incluindo peixes
Estado do Rio de Janeiro. Os sinais cl- (barramundi, Lates calcarifer)1,2.
nicos desse surto foram semelhantes A primeira descrio de uma bac-
queles descritos na China. No entan- tria do gnero Weissella como causa-
to, a doena neste caso acometia todas dora de doena em peixes ocorreu em
as faixas etrias do ciclo de produo, uma truticultura na China, em 20073.
desde alevinos at reprodutores. Altas Em seguida, foram acompanhados
taxas de mortalidade tambm foram surtos da doena em fazendas de
constatadas. Em 2013, surtos causados truta-arco-ris no Brasil, e os isolados
pela bactria Weissella ceti foram descri- obtidos tinham uma alta similaridade
tos nos EUA, e os animais acometidos gentica (pela anlise da sequncia do
apresentavam sinais clnicos semelhan- gene 16S rRNA) com as amostras chi-
tes aos observados na China e no Brasil. nesas4,5. No entanto, essas amostras
O cultivo de trutas-arco-ris no no possuam identidade gentica si-
Brasil est restrito s regies de cli- milar a nenhuma outra espcie do g-
ma mais frio do Sul e Sudeste do pas. nero, sendo, portanto, denominadas
Embora a escala de produo de trutas- Weissella sp.
-arco-ris no Brasil no seja elevada, o Recentemente, durante um es-
alto valor de mercado desse peixe se tudo sobre a microbiota de baleias
tornou um atrativo econmico nas ci- (Mesoplodon bidens), pesquisadores
dades onde produzido. Nos ltimos isolaram e identificaram amostras de
anos, surtos causados pela bactria uma nova espcie do gnero Weissella
Weissella ceti tm sido responsveis por que foram nomeadas como Weissella
perdas econmicas significativas nessas ceti sp. nov6. A anlise das sequncias
regies, principalmente no perodo de do gene 16S rRNA dos isolados de W.
vero, nos meses mais quentes do ano. ceti de baleias apresentaram alta si-
milaridade gentica (> 99%) com as
Etiologia amostras da China, Brasil e EUA, iso-
As espcies pertencentes ao gne- ladas de surtos em fazendas de truta-
ro Weissella fazem parte do grupo de -arco-ris, sugerindo que todas per-
bactrias do cido lctico. So fenoti- tenam a essa nova espcie7.
58 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Espcies No Brasil, os surtos
tras espcies de peixe
susceptveis e causados pelo patgeno de importncia econ-
distribuio da mica, embora os rela-
foram observados nos
doena tos de infeco natural
Estados do Rio de
A infeco natu- Janeiro, So Paulo e tenham ocorrido at o
ral por Weissella ceti foi Minas Gerais. momento somente em
descrita, at o momen- trutas-arco-ris.
to, apenas em trutas- A infeco por Weissella Doena clnica
-arco-ris (Oncorhynchus ceti em trutas-arco-
mykiss). O diagnstico A infeco por
ris causa uma Weissella ceti em tru-
da doena ocorreu em doena septicmica
trs pases: China, Brasil tas-arco-ris causa uma
com hemorragia doena septicmica
e Estados Unidos3,4,7,8. generalizada,
Aparentemente no acometendo animais na com hemorragia gene-
existe nenhuma relao fase de alevino, juvenil e ralizada, acometendo
epidemiolgica entre animais na fase de ale-
adulto.
os surtos ocorridos nos vino, juvenil e adulto
trs pases, uma vez que (Figura 1). Os animais
no existe histrico de transferncia de acometidos apresentam exoftalmia,
material biolgico (ovos embrionados, ascite, prolapso retal e hemorragia,
larvas e adultos de trutas-arco-ris) en- principalmente na regio da base
tre os pases. No Brasil, os surtos cau- das nadadeiras, pele, boca, cavidade
sados pelo patgeno foram observa- bucal, lngua e olhos (Figuras 2-5).
dos nos Estados do Rio Alm disso, os peixes
de Janeiro, So Paulo e necropsia, o quadro infectados apresentam
Minas Gerais7. de hemorragia fica anorexia, letargia e,
Infeces expe- mais evidente, com a em alguns casos, pode
rimentais, utilizando presena de petquias e ser observada natao
altas doses de clulas sufuses na musculatura errtica, por acometi-
de W. ceti, foram capa- da parede da cavidade mento do sistema ner-
zes de causar doena e celomtica e vsceras. voso central3,4,7.
mortalidade em peixes necropsia, o
da espcie tilpia do quadro de hemorragia fica mais
Nilo (Oreochromis niloticus) e carpa evidente, com a presena de
(Carassius carassius)3,4. Esses estudos petquias e sufuses na musculatura
demonstram que existe potencial da da parede da cavidade celomtica e
bactria para causar doenas em ou- vsceras (fgado, intestino, estmago

5. Infeco por Weissella ceti em peixes 59


Figura 1. Trutas-
arco-ris de diferen-
tes faixas etrias
acometidas por
Weissella ceti.

Figura 2. Truta-arco-ris apresentando ascite


(seta preta), exoftalmia e hemorragia na regio
periocular (seta vermelha).

Figura 3. Em maior aumento: hemorragia na


regio periocular (seta vermelha) e boca (seta
preta).

Figura 4. Juvenil de truta-arco-ris apresentando


hemorragia na base da nadadeira peitoral e na
pele (setas).

Figura 5. Foto ventral de uma truta-arco-ris com


prolapso retal (elipse).

60 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


Figura 6. Petquias e sufuses na musculatura Figura 7. Hemorragia no tero final do intestino
da parede da cavidade celomtica (elipse). (seta).

e corao), alm de espleno e ser um patgeno com alta virulncia.


nefromegalia (Figuras 6 e 7). Em Alm disso, infeces experimentais
casos de ascite, pode ser observado em trutas-arco-ris demonstraram que a
um lquido serossanguinolento na bactria capaz de causar a doena mes-
cavidade celomtica4,9. mo por vias no invasivas, como a bran-
As alteraes microscpicas causa- quial. A enfermidade foi reproduzida
das pela infeco esto associadas com tambm em um ensaio de co-habitao
o quadro de septicemia, podendo ser em que os peixes infectados no tinham
observados infiltrados inflamatrios contato direto com outros saudveis,
de clulas mononucleares no crebro, mas, por estarem no mesmo ambiente,
corao e regio retrobulbar dos olhos. a transmisso ocorreu pela gua e oca-
Em casos crnicos da doena, necrose sionou a infeco desse ltimo grupo4.
multifocal no crebro e corao pode Demonstrou-se assim a capacidade des-
ser constatada4. se patgeno de infectar, proliferar, so-
breviver e transmitir de animais doentes
Patognese da doena para saudveis pela gua.
O conhecimento da patogenia da Recentemente foi realizado o se-
infeco por Weissella ceti em peixes ain- quenciamento do genoma de uma
da muito restrito por ser uma doena amostra de W. ceti isolada de truta-arco-
recente na piscicultura -ris nos EUA. A anlise
mundial. A capacidade desse desse genoma mostrou
A bactria W. ceti patgeno de infectar, que essa bactria possui
causa uma doena seve- proliferar, sobreviver e grupos de genes associa-
ra e com altas taxas de transmitir de animais dos a fatores de viruln-
mortalidade nas truti- doentes para saudveis cia que no apresentam
culturas, demonstrando pela gua. homologia com o geno-
5. Infeco por Weissella ceti em peixes 61
ma de nenhuma outra amostra do g- um maior nvel de estresse dos peixes
nero Weissella. Isso sugere que, ao longo e parecem aumentar a transmisso do
da evoluo, essa bactria desenvolveu patgeno11.
alguns mecanismos que a tornam capaz
de causar o quadro de infeco severo
Diagnstico
em trutas-arco-ris. Dentre os fatores Em trutas-arco-ris, infeces cau-
de virulncia encontrados, destacam- sadas por outros agentes bacterianos,
-se aqueles associados adeso do pa- alm da Weissella ceti, e at mesmo al-
tgeno no hospedeiro, como adesinas gumas infeces virais, podem causar
e protenas muco-ligantes10. Contudo, a doena com quadro clnico de hemor-
participao de cada um desses fatores ragia generalizada. Por isso, anlises la-
na patognese da doena ainda precisa boratoriais criteriosas, utilizando ferra-
ser demonstrada. mentas de diagnstico bacteriolgico e
virolgico, so indispensveis.
Fatores predisponentes da
Dentre as enfermidades vi-
doena
rais que devem ser consideradas
A truta-arco-ris uma espcie de no diagnstico diferencial, temos a
peixe originria de regies de clima Septicemia Hemorrgica Viral e a
temperado e por isso possui uma Necrose Hematopoitica Infecciosa,
faixa de conforto trmico entre 10 a ambas causadas por vrus da fam-
15oC. O principal fator que predis- lia Rhabdoviridae, sendo obrigat-
pe doena causada pela bactria ria a notificao de sua ocorrncia
W. ceti o aumento da Organizao Mundial
temperatura da gua. O principal fator que de Sade Animal14.
Os surtos da doena predispe doena Entre as doenas de
so observados princi- causada pela bactria etiologia bacteriana que
palmente no perodo W. ceti o aumento da cursam com quadro de
de vero, nos meses temperatura da gua. septicemia hemorrgica
mais quentes do ano, em trutas-arco-ris, as
quando a temperatu- de maior relevncia so: a Doena da
ra da gua est acima dos 17C 3,4,8. Boca Vermelha, causada pela bactria
Outros fatores que favorecem a do- Yersinia ruckeri; as Streptococoses, cujo
ena so as altas densidades de esto- principal agente causador de doenas,
cagem que, por consequncia, levam nas truticulturas, pertencente ao gru-
a uma baixa qualidade da gua, com po, o Lactococcus garvieae; e a Doena
baixas concentraes de oxignio Renal Bacteriana, causada pela bactria
dissolvido. Esses fatores acarretam Renibacterium salmoninarum15,16,17.

62 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


Os peixes a serem antimicrobianos aprova-
Os peixes a serem
enviados para exame dos pelo Ministtio da
enviados para exame
laboratorial devem Agricultura Pecuria e
laboratorial devem
ser animais vivos que ser animais vivos que Abastecimento para se-
apresentem os sinais apresentem os sinais rem utilizados em fazen-
clnicos da doena. Os clnicos da doena. das de trutas-arco-ris4,13.
peixes devem ser trans- A eficincia do trata-
portados refrigerados mento com antibitico
em uma caixa de isopor e separados durante um surto ocasionado por W.
em sacos plsticos individuais, devi- ceti, no entanto, pode no ser muito alta,
damente identificados. Para o exame mesmo no caso de uso de antimicro-
bacteriolgico, o material a ser coleta- bianos a que o patgeno seja sensvel in
do so fragmentos ou swab de rim e vitro, como o florfenicol. Isso porque o
crebro, alm de fgado, olhos e fluido quadro de anorexia uma alterao que
asctico em alguns casos4. ocorre desde o estgio inicial da doen-
O isolamento bacteriano reali- a. Sendo assim, os animais acometidos
zado em gar MRS (Man, Rogosa e no ingerem a rao medicada em doses
Sharpe) ou gar bacteriolgico suple- suficientes. A dosagem recomendada,
mentado com sangue (5%), e cultiva- de 10 mg de florfenicol por quilogra-
do a 25C por 48-72 horas. Nos testes ma de peixe vivo, tem demonstrado re-
de triagem, os isolados so gram-posi- sultados eficientes, embora no tenha
tivos, catalase negativos e oxidase ne- sido realizado nenhum estudo de anti-
gativos. A confirmao do diagnstico bioticoterapia in vivo contra W. ceti em
realizada com PCR Weissella gnero trutas-arco-ris.
especfica12.
Controle e preveno
Tratamento As perdas econmicas causadas pela
O tratamento de escolha frente a bactria Weissella ceti nas truticulturas
um caso de infeco por W. ceti a an- so de grande impacto para os produto-
tibioticoterapia oral. Testes in vitro de- res, e algumas medidas podem prevenir
monstraram que a bactria sensvel ao sua ocorrncia e/ou impedir que a in-
antibitico florfenicol, e feco se dissemine no
algum perfil de resistn- O tratamento de caso de surtos. Devido
cia frente oxitetracicli- escolha frente a um caso a maior predisposio
na foi observado em al- de infeco por W. ceti de ocorrncia da doena
guns isolados de W. ceti4. a antibioticoterapia nos meses mais quentes
Esses so os dois nicos oral. do ano, algumas medidas
5. Infeco por Weissella ceti em peixes 63
devem ser tomadas nesse realizados para o desen-
Evitar o manejo dos
perodo, como: evitar o
animais; planejamento volvimento de uma vaci-
manejo dos animais; pla- na frente a esse patgeno
de produo visando
nejamento de produo
reduzir a densidade de para trutas-arco-ris com
visando reduzir a den- o intuito de prevenir a
estocagem no vero;
sidade de estocagem no doena.
evitar o trnsito e a
vero; evitar o trnsito Nos EUA, uma bac-
introduo de novos
e a introduo de novos animais na propriedade terina foi testada em tru-
animais na proprieda- tas-arco-ris juvenis em
nesse perodo.
de nesse perodo. Alm laboratrio. A bacterina
disso, o manejo sanitrio foi desenvolvida com c-
durante todo o cultivo, levando em con- lulas de amostra da bactria W. ceti iso-
siderao as boas prticas de produo, lada no pas e inativada com formalina.
devem ser observadas para prevenir a Durante o desafio, com a mesma amos-
ocorrncia tanto dessa como de outras tra, essa bacterina proporcionou uma
doenas. Adequar as densidades de es- taxa de sobrevivncia significativamen-
tocagem de cada tanque, respeitando te maior no grupo vacinado em relao
a capacidade suporte de acordo com a ao grupo controle, que no recebeu a
taxa de renovao de gua e oxigenao, vacina .
8

uma medida primordial para a preven- Recentemente, resultados ainda


o da infeco por W. ceti. mais satisfatrios foram obtidos com
Quando o produtor se deparar com uma vacina contendo clulas inativadas
surtos da doena, marcados pelas altas de W. ceti emulsificadas em adjuvante
taxas de mortalidade e animais apresen- oleoso. Essa vacina tambm foi testa-
da em trutas juvenis em laboratrio e
tando os sinais clnicos descritos, uma
valores de sobrevivncia ainda mais
amostragem de peixes do lote deve ser
elevados foram obtidos no grupo vaci-
encaminhada para exame laboratorial,
nado7,11. A vacina foi desenvolvida com
para o diagnstico correto e, em se-
uma amostra isolada no Brasil e est
guida, iniciar a antibioticoterapia. No
sendo patenteada pela Universidade
entanto, como vimos anteriormente,
Federal de Minas Gerais com o intuito
esse tratamento pode no ter a eficcia
de disponibiliz-la comercialmente para
esperada. Alm, disso existe uma preo-
uso na truticultura nacional7,11.
cupao quanto ao desenvolvimento da
resistncia ao antibitico pela bactria e Referncias bibliogrficas
o risco da presena do medicamento na 1. OUOBA, L.I.I.; NYANGA-KOUMOU, C.A.G.;
PARKOUDA, C. et al. Genotypic diversity of
carne do peixe destinada ao consumo lactic acid bacteria isolated from African tradi-
humano. Por isso, estudos vm sendo tional alkaline-fermented foods. Journal of Applied

64 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


Microbiology 108, 20192029, 2010. 10. LADNER, J.T., WELCH, J.T., WHITEHOUSE,
C.A., PALACIOS, G.F. Genome sequence of
2. RENGPIPAT, S.; RUEANGRUKLIKHIT, T.; Weissella ceti NC36, an emerging pathogen of far-
PIYATIRATITIVORAKUL, S. Evaluations of lac- med rainbow trout in the United States. Genome
tic acid bacteria as probiotics for juvenile seabass Announcements, 1, 1, 2013.
Lates calcarifer. Aquacult. Res., v.39, p.134143,
2008. 11. COSTA, F.A.A. Molecular epidemiology and de-
velopment of vaccines against emerging pathogens
3. LIU, J.Y., LI, A.U., JI, C., YANG, W. M. First descrip- for Brazilian fish farming: Streptococcus dysgalac-
tion of a novel Weissella species as an opportunistic tiae and Weissella ceti. 2013. 64f. Tese (Doutorado,
pathogen for rainbow trout Oncorhynchus mykiss Cincia Animal) Escola de Veterinria/UFMG,
(Walbaum) in China. Veterinary Microbiology 136, Belo Horizonte, MG.
314320, 2009.
12. JANG, J., KIM, B., LEE, J., JOENG, G., HAN, H.
4. FIGUEIREDO, H.C., COSTA, F.A.A., LEAL, Identification of Weissella species by the genus-spe-
C.A., CARVALHO-CASTRO, G.A., LEITE, cific amplified ribosomal DNA restriction analysis.
R.C. Weissella sp. outbreaks in commercial rain- FEMS Microbiology Letters, 212, 2934, 2002.
bow trout (Oncorhynchus mykiss) farms in Brazil.
Veterinary Microbiology 156, 359366, 2012. 13. MAPA. MINISTRIO DA AGRICULTURA E
PECURIA. Compndio de produtos veterin-
5. COSTA, F.A.A. Infeco por Weissella sp. em tru- rios. (2014). Disponvel em: <http://www.cpvs.
tas arco-ris (Oncorhynchus mykiss): caracterizao com.br/cpvs/index.html>. Acesso em: 26 fev.
da doena, vias de transmisso e perfil de resistn- 2014.
cia aos antimicrobianos. 2011. 47f. Dissertao
(Mestrado, Cincias Veterinrias) Universidade 14. WORLD ORGANISATION FOR ANIMAL
Federal de Lavras. Lavras, MG. HEALTH. Aquatic animal health code 2010.
Disponvel em: <http://www.oie.int/eng/nor-
6. VELA, A.I., FERNANDEZ, A., DE QUIROS, mes/fcode/>. Acesso em: 20 fev. 2014.
Y.B. Weissella ceti sp. nov., isolated from beaked
whales (Mesoplodon bidens). International Journal 15. CHAMBERS, E.; GARDINER, R.; PEELER,
of Systematic and Evolutionary Microbiology 61, E. J. An investigation into the prevalence of
27582762, 2011. Renibacterium salmoninarum in farmed rainbow
trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum), and wild
7. COSTA, F. A. A.; LEAL, C.A.G.; SCHUENKER, fish populations in selected river catchments in
N. D.; LEITE, R.C.; FIGUEIREDO, H.C.P.. England and Wales between 1998 and 2000.
Characterization of Weissella ceti infections in Journal of Fish Diseases, Oxford, v. 31, n. 2, p.89-96,
Brazilian rainbow trout, Onchorhynchus mykiss Feb. 2008.
(Walbaum), farms and development of an oil-ad-
juvanted vaccine. Journal of Fish Diseases (Print), 16. VENDRELL, D. et al. Lactococcus garvieae in fish: a
2014. review. Comparative Immunology, Microbiology and
Infectious Diseases, Oxford, v. 29, n. 6, p. 177-198,
8. WELCH, T.J. e GOOD, C.M. Mortality associated July 2006.
with Weissellosis (Weissella sp.) in USA farmed
rainbow trout: Potential for control by vaccination. 17. FOUZ, B., ZARGA, C., AMARO, C. First descrip-
Aquaculture 388391, 122127, 2013. tion of non-motile Yersinia ruckeri serovar I strains
causing disease in rainbow trout, Oncorhynchus
9. FIGUEIREDO, H.C.P.; COSTA, F. A. A.; mykiss (Walbaum), cultured in Spain. Journal of
LEAL, C.A.G.; CARVALHO-CASTRO, G.A.. Fish Diseases, Oxford, v. 29, n. 6, p. 3339-46, June
Aprendendo sobre uma nova doena em trutas: 2006.
septicemia hemorrgica causada pela bactria
Weissella sp.. Panorama da Aquicultura, Rio de
Janeiro, RJ, p. 30 - 37, 01 jul., 2009.

5. Infeco por Weissella ceti em peixes 65


6. Antibioticoterapia
em peixes

Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340) bigstockphoto.com

Carlos A. G. Leal (CRMV-MG 9014)


Henrique C. P. Figueiredo* (CRMV-MG 5839)
*figueiredoh@yahoo.com

1. Introduo to diretos (mortalidades) como indire-


tos (gastos para o controle e preveno
A aquicultura o ramo da produo
dos surtos). Visando ao controle de in-
animal que vem apresentando maiores
taxas de crescimento nos ltimos anos feces bacterianas, a administrao de
no Brasil e no mundo. Essa atividade ca- antimicrobianos, como os antibiticos,
racterizada pelo cultivo de organismos tem sido realizada em pisciculturas em
aquticos, especialmente peixes, tem todo o mundo2.
sido considerada uma importante e pro- Antibitico pode ser definido como
missora fonte de protenas de origem uma substncia de origem natural ou
animal para o consumo humano1. Esse sinttica que tem a capacidade de elimi-
crescimento no pas tem sido subsidiado nar ou inibir o crescimento bacteriano.
pela expanso nas reas produtivas, bem So substncias no txicas para o
como a utilizao de sistemas de cultivo hospedeiro e utilizadas como agen-
intensivos. A intensificao do sistema tes quimioterpicos no tratamento de
de produo, apesar de aumentar a pro- doenas bacterianas em plantas e ani-
dutividade, predispe o aparecimento mais3. Na aquicultura, a antibioticote-
de doenas infecciosas, principalmente rapia frequentemente realizada em
doenas bacterianas. Essas enfermida- casos de infeces bacterianas, sendo
des causam prejuzos significativos tan- a principal forma de administrao a
66 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
via oral. Riscos asso- tros; e tambm gram-
A seleo do antibitico
ciados ao uso de anti- -positivas dos g-
a ser utilizado deve
biticos na aquicultura Streptococcus,
levar em considerao: neros
incluem o desenvolvi- Lactococcus, Vagococcus,
a espcie de peixe
mento e disseminao Carnobacterium,
acometida; a
de bactrias resistentes Weissella, Mycobacterium
sensibilidade do
aos medicamentos uti-
patgeno aos diferentes e outros . Conhecer o
6,7

lizados e genes relacio- agente infeccioso envol-


antimicrobianos;
nados a essa resistn- vido no surto e sua pa-
e as caractersticas
cia. Adicionalmente, a tognese um fator im-
farmacocinticas e
presena de resduos portante para escolha do
farmacodinmicas da
de antibiticos em com- medicamento ideal para
droga.
modities aqucolas e o tratamento. Alguns an-
no meio ambiente so tibiticos atuam melhor
pontos importantes que tm sido dis- em bactrias gram-positivas, enquanto
cutidos mundialmente4. Apesar dos outros possuem maior eficcia em gram-
potenciais perigos, o uso de antibi- -negativas8. Adicionalmente, existem
ticos de maneira correta e de acordo alguns microrganismos que so natural-
com critrios tcnicos pode apresen- mente resistentes a alguns antimicrobia-
tar menor risco para o ambiente e para
nos. Por exemplo, as Aeromonas mveis
os consumidores. Esses frmacos so
so bactrias naturalmente resistentes
ferramentas essenciais para o contro-
ampicilina, assim como Weissella sp.,
le de doenas bacterianas na produo
vancomicina.
de peixes, principalmente devido atu-
A seleo do antibitico a ser utiliza-
al ausncia de mtodos alternativos de
do em um caso de surto de doena bac-
preveno, como vacinas, para a maioria
teriana em uma piscicultura deve levar
das enfermidades.
em considerao: a espcie de peixe aco-
2. Principais drogas utilizadas metida; a sensibilidade do patgeno aos
na piscicultura e seus diferentes antimicrobianos; e as caracte-
mecanismos de ao rsticas farmacocinticas e farmacodin-
Diversas espcies bacterianas tm micas da droga, principalmente quanto
sido associadas a doenas em peixes sua distribuio tecidual e concentra-
cultivados5,6. Dentre os principais pat- o atingida nos diferentes rgos. Para
genos, temos bactrias gram-negativas patgenos que acometem o sistema ner-
dos gneros Aeromonas, Flavobacterium, voso central, a capacidade de transposi-
Edwardsiella, Vibrio, Pseudomonas, o da barreira hematoenceflica uma
Photobacterium, Francisella, entre ou- caracterstica imprescindvel7. Outra
6. Antibioticoterapia em peixes 67
caracterstica importante que alguns as clulas bacterianas (vivas ou mortas),
microrganismos possuem a habilidade como no so destrudas, devero ser
de sobreviver de maneira transitria no fagocitadas e eliminadas pelas clulas
interior de macrfagos9 (Ex. Francisella do sistema imune do peixe. Assim sen-
noatunensis subsp orientalis, Streptococcus do, mesmo com a administrao desses
spp.), servindo como stio de proteo frmacos, a resposta imune do animal
para esse patgeno frente a alguns me- fundamental para eliminao da doena
dicamentos. Alm de aspectos tcnicos, e promoo da cura.
no caso da existncia de drogas com As principais caractersticas dos
aplicabilidade e eficincia semelhantes antibiticos utilizados na piscicultura
para o tratamento de uma mesma enfer- mundial, bem como seus mecanismos
midade, aspectos econmicos podem de ao nas clulas bacterianas, so
ser levados em conta na opo pelo me- apresentados na Tabela 1.
lhor frmaco a ser utilizado. A utilizao de antibiticos na
Os antibiticos apresentam es- aquicultura teve incio em meados da
truturas qumicas diversas e podem dcada de 50, quando sulfonamidas fo-
ser classificados como bacteriostti- ram empregadas no controle de surtos
cos ou bactericidas, de acordo com de furunculose (infeco causada pela
os efeitos exercidos contra a bactria. bactria Aeromonas salmonicida) em
Agentes bacteriostticos geralmente alevinos de trutas (Oncorhyncus mykiss)
inibem processos de sntese na clu- nos Estados Unidos. Desde ento, v-
la bacteriana (normalmente de pro- rios compostos antimicrobianos foram
tenas e de cido flico necessrio testados, incluindo cloranfenicol, oxite-
para sntese de ribonucleotdeos e traciclina, kanamicina, amoxicilina, qui-
desoribonucleotdeos em bactrias), nolonas, cido oxolnico, flumequina,
bloqueando a multiplicao desses eritromicina, sulfadimetoxina, sulfame-
microrganismos. Agentes bacterici- razina e florfenicol6,11.
das promovem a morte O uso de antibiti-
das clulas bacterianas. No Brasil, apenas cos na aquicultura de-
Alguns antibiticos bac- antibiticos pende de regulamentos
tericidas possuem efeito base de florfenicol locais, que variam entre
bacterioltico, promo- e oxitetraciclina os pases. No Brasil, ape-
vendo a ruptura das clu- podem ser utilizados nas antibiticos base
las bacterianas. No caso para tratamentos de florfenicol e oxitetra-
de antibiticos bacte-
teraputicos em casos de ciclina podem ser utili-
riostticos e bactericidas
doenas bacterianas em zados para tratamentos
que no promovem lise,
peixes de produo teraputicos em casos
68 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Tabela 1. Principais exemplos dos antibiticos comerciais utilizados na
aquicultura e seus mecanismos de ao6,8,10

Antibitico Mecanismo de ao
Amoxicilina Bloqueia a transpeptidao da parede celular
Eritromicina Inibe a sntese proteica por se ligar a unidade 50S do
ribossomo bacteriano
Inibe a sntese proteica a partir da ligao subunida-
Florfenicol de ribossmica 50S, inibindo a atividade tipo peptidil-
-transferase desta
Inibe a sntese proteica por ligao subunidade 30S
Oxitetraciclina
dos ribossomos, impedindo a ligao do amino-acil
tRNA ao stio A do ribossomo
Quinolonas
(cidos nalidixico e oxolnico)
Atuam bloqueando a atividade da enzima DNA girase
Fluorquinolonas necessria para a replicao do DNA bacteriano
(Enrofloxacina, Norfloxacina e
Sarafloxacina)
Competem com o PABA pela enzima diidropteroato-
Sulfonamidas
-sintetase e impedem a sntese de cido flico

de doenas bacterianas em peixes de cficos de resistncia a essa droga, no
produo12. O florfenicol (Aquaflor, seriam risco para os consumidores. O
MSD; Florfenicol 50%, FAV), deriva- florfenicol apresenta ainda boa estabi-
do fluorado do tianfenicol, um agente lidade na gua, rpida absoro pelo
bacteriosttico que inibe a sntese trato gastrintestinal dos peixes, exce-
proteica a partir da ligao subunida- lente distribuio tecidual, inclusive
de ribossomal 50S, inibindo a peptidil- crebro, e efetivo contra diversos tipos
-transferase, consequentemente, a sn- de bactrias, tanto gram-positivas como
tese proteica. Essa droga oferece maior gram-negativas13. Para piscicultura, uma
eficcia que seus anlogos (tianfenicol vantagem adicional dessa substncia
e cloranfenicol), e at o momento no advm de sua resistncia trmica. Esse
existem muitos relatos de desenvolvi- antibitico pode ser includo na mistura
mento de resistncia bacteriana. Uma da rao na fbrica e submetido aos pro-
vantagem adicional desse frmaco cessos trmicos de extruso e secagem,
que ele no utilizado no tratamento sem haver degradao significativa de
de seres humanos. Portanto, em caso sua molcula.
de patgenos com mecanismos espe- Antibiticos base de oxitetracicli-

6. Antibioticoterapia em peixes 69
na (TM 700, Phibro) so amplamente assintomticos e acarreta a persistncia
utilizados nas pisciculturas brasileiras e do agente bacteriano na fazenda pro-
possuem eficcia contra bactrias gram- dutiva14. Alm disso, peixes portadores
-positivas e gram-negativas. agente podem propiciar a disseminao da do-
bacteriosttico e inibe a sntese protei- ena entre propriedades. As principais
ca ao se ligar subunidade ribossomal indicaes de uso desses antibiticos
30S, impedindo a ligao do aminoacil- no Brasil, bem como as espcies que
-tRNA ao stio A do ribossomo. efi- podem ser submetidas administrao
ciente contra diversos patgenos de desses medicamentos, esto apresenta-
peixes; porm, amostras resistentes a das na Tabela 2.
esse medicamento tm sido descritas5.
Adicionalmente, sabe-se que esse anti-
3. Vias de administrao
bitico no capaz de promover a cura Diferentemente do tratamento de
completa em casos de infeco pela bac- espcies terrestres, o uso de antibiticos
tria Streptococcus agalactiae em tilpias, na aquicultura apresenta caractersticas
o que induz a ocorrncia de portadores prprias, desde a via de administrao

Tabela 2. Antibiticos comercias utilizados na aquicultura brasileira e as doenas


s quais so recomendadas15,16
Antibitico Espcie Doena
Septicemia Hemorrgica causada por Aeromonas
mveis
Tilpias e
hbridos
Estreptococose por Streptococcus agalactiae

AQUAFLOR
(Florfenicol)
Trutas
Doena da boca vermelha (Yersinia ruckeri)

Septicemia hemorrgica causada por A. liquefaciens


Bagres
Doenas por Pseudomonas
Doena ulcerosa (Haemophillus piscium)

Furunculose (A. salmonicida)


TM 700
(Oxitetraciclina)
Salmondeos Septicemia hemorrgica causada por A. liquefaciens

Doenas por Pseudomonas

70 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


do medicamento at a tcnica laboriosa, que
Administrao
resposta dos peixes ao necessita de sedao pr-
conduzida de seis
tratamento. A adminis- via e impraticvel para
formas diferentes: oral
trao de antibitico aos o tratamento em larga
banho, imerso, spray,
peixes pode ser condu- escala. Sua realizao
injeo e tpica.
zida de seis formas dife- justificvel apenas em re-
rentes: oral (associada produtores de alto valor
rao ou com partculas bioencapsu- zootcnico, quando a terapia prvia por
ladas), banho, imerso, spray, injeo e via oral no apresentar bons resultados.
tpica6 (Tabela 3). Porm, na prtica, a Os principais stios de injeo incluem
administrao desses produtos por via a cavidade intraperitoneal e a via intra-
oral, misturados rao, geralmen- muscular. A absoro do antibitico
te a forma mais aplicada e realizada no rpida, alcanando a corrente sangunea
Brasil8. e distribuindo-se pelos tecidos de ma-
O tratamento via injeo permite a neira eficaz. O volume requerido para
correta administrao da dose teraputi- a administrao de antibitico por essa
ca do antibitico no peixe, porm uma via baseado no peso do peixe a ser tra-

Tabela 3. Vias de administrao dos antibiticos em peixes6


Vias de Caractersticas
administrao
Oral (incorporado Necessita de componentes palatveis; risco baixo de contaminao ambiental
rao) devido pequena quantidade
Partculas Necessita de componentes palatveis; risco baixo de contaminao ambiental
bioencapsuladas devido pequena quantidade
Banho Necessrio longo tempo de exposio ao antibitico, que deve ser solvel ou
capaz de dispersar adequadamente; quantidades elevadas do antibitico
Imerso Curta exposio ao antibitico, que deve ser solvel ou capaz de se dispersar
adequadamente; problemas com a aquisio do diluente
Curta exposio ao antibitico, que deve ser solvel ou capaz de se dispersar
adequadamente; problemas com a aquisio do diluente

Spray Medicamento espalhado sobre os peixes a partir de conteno e curta expo-


sio ao ar. Deve ser solvel ou capaz de se dispersar adequadamente. Pode
causar poluio ambiental.
Injeo Realizado apenas em peixes de alto valor zootcnico; geralmente requer anes-
tesia; laborioso; insignificante o risco de poluio ambiental

Tpico Realizado apenas para o tratamento de lceras em peixes ornamentais

6. Antibioticoterapia em peixes 71
tado, dose recomendada es para realizao de
A principal via de
do antibitico e a con- tratamentos com antibi-
administrao de
centrao fornecida do
antibitico utilizada na tico via banho. Nessa
medicamento. O clculo
prtica a oral, atravs via de administrao, a
pode ser realizado a par- da incorporao do droga pode ser absorvida
tir da expresso: V = (D x medicamento rao.. via brnquias ou trato di-
P)/C, onde V o volume gestrio. Os banhos para
requerido do antibiti- serem efetivos devem ser
co; D, dosagem recomendada (mg/kg); realizados por perodos mais prolonga-
P, peso do peixe (kg); e C, concentrao dos e necessria uma maior quantida-
fornecida do medicamento (mg/mL)17. de do antibitico para alcanar o efeito
Apesar da existncia de tais recomenda- desejado5,8,17. Por esses motivos, sua
es da literatura, vale salientar que no aplicabilidade pequena no contexto da
existem produtos (antibiticos) licen- piscicultura comercial. No passado, esse
ciados no Brasil para uso injetvel em tipo de tratamento foi muito realizado
peixes de produo. Adicionalmente, os durante o transporte de alevinos em sa-
produtos base de florfenicol e oxitetra- cos plsticos. O principal produto utili-
ciclina so comercializados na forma de zado no transporte era a oxitetraciclina
p, no devendo ser administrados por e objetivo era evitar as mortalidades no
vias parenterais. No passado, diversos perodo ps-transporte, principalmente
produtores tinham por hbito admi- as causadas pela bactria Flavobacterium
nistrar por via injetvel o antibitico columnare (causadora da columnario-
oxitetraciclina em p, diludo em solu- se). Atualmente, com a adoo de boas
o fisiolgica (0,9%), principalmente prticas de manejo, o uso profiltico de
em reprodutores. Esse antibitico no antibitico na gua de transporte tem
apresenta boa solubilidade em soluo diminudo.
fisiolgica com pH prximo neutrali- A principal via de administrao de
dade (pH=7), devendo ser diludo em antibitico utilizada na prtica a oral,
solues levemente cidas. Assim, no atravs da incorporao do medicamen-
havia uma correta solubilizao e aps to rao. A incorporao pode ser reali-
a administrao formavam-se cristais de zada diretamente na fbrica de rao ou
antibitico na musculatura dos peixes. na propriedade. No Brasil, a maioria das
Devido ao carter cido dessa substn- raes comerciais para peixes so extru-
cia, era comum a ocorrncia de reas de sadas. O processo de extruso (alta tem-
necrose na local da aplicao. Essa pr- peratura e presso por um tempo curto)
tica tem se reduzido nos ltimos anos. pode promover a degradao parcial ou
Na literatura existem recomenda- total dos antibiticos. Como supramen-
72 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
cionado, o florfenicol resistente a esse cada 100 kg de rao. A quantidade de
processo. Quanto oxitetraciclina, po- antibitico a ser incorporada poder va-
rm, no existem informaes seguras. riar de acordo com o tipo de antibitico
Uma segunda forma de incorporao escolhido e o grau de pureza do mesmo.
aps o processo de extruso. Nesse A dose final do antibitico dever ser
caso, o antibitico pode ser pulveriza- calculada na unidade mg/kg de peso
do rao para sua incorporao aos vivo por um perodo pr-determinado,
pletes. No pas, apenas uma fbrica de considerando a taxa de arraoamento
rao est licenciada pelo Ministrio da de cada tanque .
8

Agricultura, Pecuria e Abastecimento 4. Tipos de tratamentos com


(MAPA) para incorporar antibiticos antibiticos
rao de peixes. Para a incorporao de
antibiticos na fbrica de rao, neces- A fim de se evitar prejuzos econ-
sria a receita emitida por um mdico micos dentro de um sistema de cultivo
veterinrio devidamente regularizado decorrente de infeces bacterianas,
nos rgos de classe. tratamentos teraputicos podem ser
A incorporao do antibitico ra- institudos. Considera-se tratamento
o dentro de uma propriedade um teraputico o uso de antimicrobianos
procedimento comumente realizado para tratar infeces j estabelecidas na
nas pisciculturas. O procedimento pode propriedade, ao passo que tratamento
ser realizado manualmente em uma su- profiltico corresponde utilizao de
perfcie limpa (o mais comum sobre antimicrobianos de forma a prevenir o
uma lona, o que facilita posteriormente desenvolvimento da infeco .
4

o recolhimento da rao medicada) ou Na aquicultura, a administrao


com uso de uma betoneira. O antibiti- de antibiticos de forma teraputica
co deve ser pesado de acordo com a dose realizada por perodos de 10 dias con-
a ser administrada; posteriormente, este secutivos, por via oral, em grupos de
misturado rao. Aps a homoge- peixes alocados em tanques. a forma
neizao, adicionado mais coerente para a uti-
leo de soja comestvel A administrao de lizao de antibiticos,
rao. O leo tem como antibiticos de forma devendo ser instituda
funo evitar que o anti- teraputica realizada a partir do diagnstico
bitico seja solubilizado por perodos de 10 do agente etiolgico res-
quando em contato com dias consecutivos, por ponsvel pelas mortali-
a gua durante o arraoa- via oral, em grupos dades (como as doenas
mento. Recomenda-se o de peixes alocados em de peixes no possuem
uso de 1 L de leo para tanques. sinais clnicos patogno-
6. Antibioticoterapia em peixes 73
mnicos, exames laboratoriais so ne- ciao desses fatores reduz a eficincia
cessrios). Entretanto, a anorexia uma do sistema imune dos peixes, tornan-
das primeiras alteraes fisiolgicas in- do-os mais susceptveis s doenas.
duzidas por infeces bacterianas em Adicionalmente, falhas no manejo e de
peixes, tornando a antibioticoterapia biosseguridade contribuem para a dis-
oral limitada nos animais acometidos. seminao do agente infeccioso dentro
Dessa forma, a administrao terapu- de um plantel. Esse cenrio resulta no
tica de antibitico por via oral evita a aumento da utilizao de antibiticos,
ocorrncia de doenas em peixes no sendo que alguns, apesar de no reco-
infectados ou em fase inicial da doen- mendado, so administrados de forma
a, que ainda consomem rao18. Nesse profiltica. Tratamentos profilticos
contexto, importante que tcnicos e so geralmente realizados a partir da
produtores sejam orientados de que, administrao do antibitico rao de
nos casos de surto, mesmo aps a intro- forma ttica, realizados prvia ou poste-
duo da antibioticoterapia oral, mor- riormente a um evento de manejo con-
talidades ainda continuaro sendo ve- siderado estressor, como classificao,
rificadas. Estas sero oriundas da morte despesca e transporte8,19. Muitos produ-
dos peixes sintomticos e anorxicos, tores ainda adotam tais prticas como
que no iro ingerir a rao medicada e rotinas em suas pisciculturas. Porm, o
morrero. Em geral, as mortalidades co- uso constante de antibiticos pode sele-
meam a diminuir de maneira significa- cionar microrganismos resistentes, tor-
tiva 4-5 dias aps o incio do tratamento. nando o tratamento institudo menos
A posologia dos principais antibiticos eficaz, como descrito8.
utilizados no Brasil para o combate das Como mencionado anteriormen-
infeces bacterianas est apresentada te, no Brasil apenas os medicamentos
na Tabela 4. base de florfenicol e oxitetraciclina
Com a intensificao da produo podem ser utilizados de forma terapu-
de peixes, houve a necessidade de se tica em surtos de doenas bacterianas.
utilizar sistemas de cultivos com altas Dessa forma, as opes na escolha de
densidades de estocagem e com empre- antibitico so limitadas. Mesmo assim,
go de grande quantidade de insumos importante conhecer algumas caracte-
durante os ciclos de produo. A asso- rsticas do agente infeccioso, como for-

Tabela 4. Posologia comumente utilizada de antibiticos em peixes6


Antibitico Posologia
Florfenicol 10 mg/peso vivo de peixe/dia durante 10 dias
Oxitetraciclina 50-100 mg/peso vivo de peixe/dia durante 10 dias

74 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


mas de transmisso, stios de infeco e qualidade e permite a comparao dos
resistncia natural a algum antibitico. dados gerados por diferentes laborat-
Previamente determinao da droga rios, em regies distintas. Isso muito
ideal a ser utilizada, pertinente a rea- importante para o monitoramento epi-
lizao de um diagnstico laboratorial demiolgico das tendncias de emer-
para identificao do patgeno, bem gncia de microrganismos resistentes
como testes de sensibilidade a antimi- no pas.20,21.
crobianos para avaliao da eficincia Apesar da existncia de protocolos
de diferentes antibiticos. Os principais internacionais, o principal problema
mtodos utilizados para a determinao para determinao da sensibilidade de
in vitro da sensibilidade dos microrga- patgenos de peixes aos antibiticos
nismos aos antibiticos so o de discos a ausncia de valores de referncia. Sem
de difuso (antibiograma) e determina- esses valores de concentrao inibitria
o da concentrao inibitria mnima mnima e o dimetro dos halos de ini-
(CIM) por microdiluio20,21. Como os bio, para muitos patgenos no pos-
patgenos de peixes possuem caracte- svel determinar se a amostra sensvel
rsticas de cultivo peculiares em relao ou resistente. Para sanar esse problema
a outros patgenos animais, tais testes j existem hoje metodologias estatsti-
devem ser realizados por laboratrios cas validadas, que permitem, a partir da
especializados no diagnstico de doen- anlise de um conjunto de amostras de
as de organismos aquticos. Alm dis- um determinado microrganismos, cal-
so, todos esses procedimentos devem cular o chamado ponto de corte epide-
ser realizados de acordo com normas miolgico. Esses valores so utilizados
internacionais, para que os resultados para classificar as amostras como selva-
e controles sejam vlidos e possam ser gem (sensveis) ou no-selvagem (resis-
comparados com outros resultados na- tentes)22. Na Tabela 5, so apresentados
cionais e internacionais. O Clinical and alguns pontos de corte epidemiolgicos
Laboratory Standards Institute (CLSI) para patgenos isolados no Brasil.
possui protocolos especficos, padroni- A associao dos resultados obtidos
zados e aceitos internacionalmente para de sensibilidade aos antibiticos e os
determinao para a realizao de anti- dados da doena na propriedade permi-
biograma e determinao da CIM para tem a escolha, pelo mdico veterinrio,
bactrias isoladas de animais aquti- do antibitico mais eficaz a ser utiliza-
cos20,21. Esses manuais apresentam todas do. Para fazendas que faam a utilizao
as etapas, insumos e controles de quali- rotineira de antibiticos para o controle
dade que devem ser realizados durante de mortalidades, recomendado o mo-
os testes. Essa padronizao garante a nitoramento peridico da sensibilidade
6. Antibioticoterapia em peixes 75
Tabela 5: Pontos de corte epidemiolgicos (PCE) provisrios calculados para
patgenos bacterianos isolados de casos de infeco em peixes no Brasil

PCE
Patgeno Antibitico PCE (CIM1) Referncia
(Disco de Difuso)
Aeromonas mveis Florfenicol 4g/mL 23 mm 24
Aeromonas mveis Biciclomicina 6,25g/mL ----- 24
S. agalactiae Oxitetraciclina 1,95g/mL 23 mm 14
Florfenicol ----- 16 mm
Eritromicina ----- 21 mm
Weissella ceti Oxitetraciclina ----- 10 mm 25
Norfloxacina ----- 7 mm
Sulfonamida ----- Resistente
Concentrao Inibitria Mnima
1

aos antimicrobianos a partir de amos- tico disperso na gua e pode resul-


tras bacterianas isoladas na proprieda- tar em uma maior presso de seleo
de. Esse monitoramento permite deter- em uma ampla variedade de bactrias
minar de maneira rpida a ocorrncia de presentes no ambiente aqutico. O am-
resistncia bacteriana s drogas utiliza- biente aqutico considerado eficiente
das e inferenciar sobre efetividade des- para a seleo de bactrias resistentes
ses produtos8. aos antibiticos, bem como para a tro-
ca de genes de resistncia, por meio de
5. Impactos decorrentes do uso
elementos genticos mveis23. Parte dos
de antibiticos na aquicultura
antibiticos incorporados rao se
O uso de antibiticos na aquicul- dissolvem na gua, e outra parte passa
tura causa elevao do custo de produ- pelo sistema digestrio do peixe sem ser
o e, s vezes, o tratamento executado absorvida, sendo esses resduos elimi-
no capaz de debelar a infeco na nados no ambiente aqutico. O antibi-
propriedade, devido a diversos fatores tico residual presente na gua pode se
mencionados anterior- depositar em sedimen-
mente. Na piscicultura, O uso de antibiticos tos ou ser ingerido por
os antibiticos so ge- na aquicultura causa outros animais, modifi-
ralmente adicionados elevao do custo de cando o perfil de micror-
rao e posteriormente produo e, s vezes, o ganismos na microbiota
so fornecidos aos pei- tratamento executado desses peixes e induzin-
xes. Esse fornecimento no capaz de do a seleo de bactrias
pode ser nocivo ao meio debelar a infeco na resistentes aos antibi-
ambiente, pois o antibi- propriedade. ticos4,8. Assim sendo, os
76 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
produtos devem ser utilizados com base 3. SERRANO, P. H. Responsible use of antibiot-
ics in aquaculture. In: Food and Agriculture
em critrios tcnicos, para o controle de Organization of the United Nations, FAO Fisheries
surtos de doenas bacterianas, e nunca Technical Paper 469. Roma, 2005.
profilaticamente ou como promotor de 4. ROMERO, J.; FEIJO, C. G.; NAVARRETE,
P. Antibiotics in Aquaculture use, abuse and al-
crescimento23. ternatives. In: CARVALHO, E. D.; DAVID, G. S.;
SILVA, R. J. Health and environment in aquaculture.
6. Consideraes finais Rijeka: InTech, 2012. 414p.

A antibioticoterapia deve ser reali- 5. NOGA, E. J. Fish disease: diagnosis and treatment.
2.ed, Iowa: Blackwell Publishing, 2010, 536p.
zada como medida teraputica de com-
6. AUSTIN, B; AUSTIN, D.A. Bacterial Fish
bate de surtos de doenas bacterianas. Pathogens. Diseases of Farmed and Wild Fish, 4.
uma medida eficiente ed. Chichester: Springer/Prazis
Publishing, 2007. 553p.
e segura quando realiza- A antibioticoterapia 7. F I G U E I R E D O,
da de forma adequada; deve ser realizada como H. C. P.; LEAL, C. A. G..
porm, somente ela no Infeces por Streptococcus
medida teraputica de spp. em peixes. In: SILVA-
resolve problemas rela- combate de surtos de SOUZA, A. T.; LIZAMA, M.
cionados sanidade de A. P.; TAKEMOTO, R. M.
doenas bacterianas. Patologia e Sanidade de orga-
organismos aquticos. nismos Aquticos. Maring: Ed.
Para obteno de uma Massoni, 2012, p. 275-292.

produo saudvel e com lucratividade, 8. FIGUEIREDO, H. C. P.; GODOY, D. T.; LEAL,


C. A. G. Antibiticos na aquicultura. Panorama da
deve-se investir na preveno e controle Aquicultura, v. 18, n. 105, p. 42-49, 2008.
das enfermidades. Isso feito atravs da 9. AGNEW, W.; BARNES, A.C. Streptococcus iniae:
realizao de manejo sanitrio dentro An aquatic pathogen of global veterinary signifi-
cance and challenging candidate for reliable vacci-
do sistema de cultivo. A associao de nation. Vet. Microbiol., v. 122, n. 1-2, p. 115, 2007.
prticas de preveno, como quaren- 10. MADIGAN, T. M.; MARTINKO, J. M.; DUNLAP,
tena e vacinao, bem como prticas P. V. et al. Microbiologia de Brock. 12. ed. Porto
Alegre: Artmed, 2010. 1160p.
de controle, como descarte de animais
11. SHAO, Z. J. Aquaculture pharmaceuticals and
doentes, tratamentos com antibiti- biologicals: current perspectives and future possi-
cos e realizao de testes laboratoriais bilities. Adv. Drug Deliv. Rev., v. 50, n. 3, p. 229-243,
2001.
de diagnstico, propiciam uma criao
12. PADUA, S. B.; MENEZES FILHO, R. N.; CRUZ,
produtiva e livre de doenas. C. Alevinos saudveis: o ponto de partida para uma
produo estvel. Panorama da Aquicultura, v. 22, n.
7. Referncias Bibliogrficas 134, p. 30-37, 2012.
1. FOOD AND AGRICULTURE ORGANI 13. FIGUEIREDO, H. C. P.; GODOY, D. T.; MIAN,
ZATION. The state of world fisheries and aquacul- G. F. et al. Estreptococose em tilpia do Nilo - parte
ture. Rome, 2014. 225 p. 2. Panorama da Aqicultura, v. 17, n. 104, p. 42-45,
2007.
2. DEFOIRDT, T.; SORGELOOS, P.; BOSSIER, P.
Alternatives to antibiotics for the control of bacte- 14. FARIA, F. C.; LEAL, C. A. G.; CARVALHO-
rial disease in aquaculture. Current Opin. Microbiol., CASTRO, G. A. et al. Carrier state induced by
v. 14, n. 3, p. 251-258, 2011. oxytetracycline therapy against streptococossis in

6. Antibioticoterapia em peixes 77
Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.). J. Fish Dis. INSTITUTE. Methods for broth dilution susceptibil-
(in print), 2013. ity testing of bacteria isolated from aquatic animals:
approved guideline VET04-A. Wayne, CLSI, 2006.
15. SCHERING-PLOUGH. Aquaflor 50% Premix.
Disponvel em: http://www.aquatropic.com.br/ 22. MILLER, A.; REIMSCHUESSEL, R.
images/Lamina%20Aquaflor.pdf. Acesso em: 24 Epidemiological cutoff values for antimicrobial
fev. 2014. agents against Aeromonas salmonicida isolates de-
termined by frequency distributions of minimal
16. PHIBRO. TM 700 Ficha tcnica. Disponvel em: inhibitory concentration and diameter of zone of
http://www.phibro.com.br/ft/TM_700.FT.pdf. inhibition data. Am. J. Vet. Res., v. 67, n. 11, p. 1837-
Acesso em 24 fev. 2014. 1843, 2006.
17. RODGERS, C. J.; FURONES, M. D. Antimicrobial 23. CARNEIRO, D. O.; FIGUEIREDO, H. C. P.;
agents in aquaculture: practice, needs and issues. PEREIRA JUNIOR, D, J. et al. Perfil de suscepti-
In: ROGERS, C.; BASURCO, B. The use of veteri- bilidade a antimicrobianos de bactrias isoladas
nary drugs and vaccines in Mediterranean aquacul- em diferentes sistemas de cultivo de tilpia-do-nilo
ture. Zaragoza: CIHEAM, 2009, p. 41-59. (Oreochromis niloticus). Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.,
18. HEUER, O. E.; KRUSE, H. GRAVE, K. et al. v. 59, n. 4, p.869-876, 2007.
Human health consequences of use of antimicro- 24. GODOY, D. T.; MIAN, G. F.; ZANOLO, R.;
bial agents in aquaculture. Clin. Infect. Dis., v. 49, n. YUHARA, T.; FARIA, F.; FIGUEIREDO, H. C.
8, p. 1248-1253, 2009. P. Patterns of resistance to florfenicol and bicyclo-
19. CABELLO, F. C. Heavy use of prophylactic anti- mycin in Brazilian strains of motile aeromonads.
biotics in aquaculture: a growing problem for hu- Aquaculture, v 285, p.255-259, 2008.
man and animal health and for the environment. 25. FIGUEIREDO, H. C. P.; COSTA, F. A. A.; LEAL,
Environ. Microbiol., v. 8, n. 7, p. 1137-1144, 2006. C. A. G.; CARVALHO-CASTRO, G. A.; LEITE,
20. CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS R. C. Weissella sp. outbreaks in comercial rainbow
INSTITUTE. Methods for antimicrobial disk suscep- trout (Oncorhyncus mykiss) farms in Brazil. Vet.
tibility testing of bacterial isolated from aquatic ani- Microbiol., v. 156, p. 359-366.
mals: approved guideline VET03-A. Wayne, CLSI,
2006.
21. CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS

78 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


7. Coleta e Remessa
de Peixes para
Diagnstico de
Doenas Infecciosas

bigstockphoto.com
Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340)
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos A. G. Leal* (CRMV-MG 9014)
*carlosleal@vet.ufmg.br

1. Introduo de exames laboratoriais so etapas fun-


damentais para a realizao de um diag-
As doenas infecciosas de peixes nstico preciso e acurado1. Amostras
apresentam diversas peculiaridades em coletadas, acondicionadas e enviadas
relao s enfermidades de animais ter- inadequadamente comprometem a rea-
restres, principalmente a ausncia de lizao dos exames laboratoriais e os re-
sinais clnicos caracters- sultados obtidos, poden-
ticos para a maioria das A coleta e a remessa do no refletir o status
infeces. Assim sendo, de peixes para de doena dos animais
a realizao de exames realizao de exames avaliados2,3.
laboratoriais pea es- laboratoriais so etapas O presente artigo
sencial no diagnstico fundamentais para descreve os principais
dessas enfermidades. a realizao de um procedimentos para a
A coleta e a remessa de diagnstico preciso e coleta e remessa de pei-
peixes para realizao acurado. xes para o diagnstico de
7. Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas 79
doenas infecciosas. Este tem como ob- tragem baseada na coleta aleatria de
jetivos fornecer informaes para auxi- um nmero de animais determinado
liar tcnicos e produtores na seleo dos pelo delineamento amostral4. Devido
animais a serem coletados, bem como as amplitude e complexidade do tema,
formas de acondicionamento e remessa o presente artigo ir se ater apenas aos
desses materiais para a obteno de re- mtodos de coleta e remessa de material
sultados confiveis. para diagnstico em casos de surtos, ou
seja, para determinao do agente etio-
2. Seleo dos animais lgico durante mortalidades.
e nmero de peixes A amostra a ser coletada to im-
coletados portante quanto o mtodo de diagns-
tico a ser empregado, pois, quando re-
Na piscicultura, a coleta de animais
para exames laboratoriais realizada alizada sem critrios, pode gerar falsos
em duas situaes distintas: 1- durante diagnsticos ou a no identificao de
surtos, em que o diagnstico realiza- microrganismos envolvidos em surtos1
do para determinao de doenas infecciosas .
da etiologia da doena; Nos casos de surtos, Nos casos de surtos,
2- para fins de monito- para o diagnstico para o diagnstico de-
ramento sanitrio, em devem ser coletados vem ser coletados pei-
que um delineamento peixes moribundos com xes moribundos com
amostral realizado em sintomatologia clnica sintomatologia clnica
funo de parmetros da doena. da doena. Nesses ani-
estatsticos e epidemio- mais a possibilidade de
lgicos. Neste ltimo caso, o objetivo sucesso no isolamento e
determinar a presena e a prevalncia de identificao do agente etiolgico sig-
patgenos na propriedade. Diferentes nificativamente maior que em animais
literaturas e ferramentas on-line esto subclnicos ou assintomticos, devido
disponveis para a realizao de delinea- maior quantidade de microrganismos
mentos amostrais para monitoramento circulantes ou nos tecidos. Na Figura 1,
sanitrio na produo animal. Um bom so apresentados exemplos de peixes
exemplo o stio Epitools, desenvolvi- moribundos, com sinais clnicos de
do pelo AusVet Animal Health Service, doenas infecciosas durante surtos.
que disponibiliza de maneira gratuita O nmero de peixes a ser coletado
ferramentas para a realizao de planos para diagnstico de uma doena infec-
amostrais (http://epitools.ausvet.com. ciosa varia de acordo com aspectos tc-
au/content.php?page=home). No caso nicos (tipo de sistema de cultivo, dispo-
de monitoramentos sanitrios, a amos- nibilidade de peixes para envio, doena
80 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
em questo, logstica de envio etc.) e exato que atenda todos os casos. Mas, na
financeiros (valor dos animais, disponi- experincia de mais de dez anos dos pro-
bilidade de recurso para envio e custeio fissionais do AQUAVET-Laboratrio
dos exames). No existe um nmero de Doenas de Animais Aquticos (EV-

Figura 1: Sinais clnicos observados em peixes acometidos por doenas infecciosas. A- truta-arco-ris
com prolapso retal; B- truta-arco-ris com exoftalmia bilateral; C- tilpia do Nilo com opacidade de cr-
nea (seta) junto com outros peixes letrgicos; D- tilpia do Nilo com perda de equilbrio; E- tilpia do
Nilo com exoftalmia bilateral e paralisia bucal (seta), e, no fundo, outro animal com perda de equilbrio;
F- tilpia do Nilo com abscesso ulcerado no pednculo caudal.

7. Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas 81


UFMG), verificou-se preferncia com aerao
O envio de 5 a 8 peixes
que o envio de 5 a 8 pei- suplementar. Isso difi-
(moribundos com sinais
xes (moribundos com si- culta e encarece a remes-
clnicos da doena)
nais clnicos da doena) sa, principalmente devi-
tem possibilitado
tem possibilitado um do distncia entre os
um diagnstico
diagnstico acurado do locais de produo e os
acurado do agente
agente etiolgico envol- laboratrios. Alm disso,
etiolgico envolvido
vido na maioria dos ca- mesmo em situaes em
na maioria dos casos
sos acompanhados. Em que possvel o envio
acompanhados.
casos em que a doena de animais vivos, em
ocorre em diferentes sis- muitos casos estes no
temas de cultivo (ex. tanques de terra, suportam o transporte. Pelo fato de j
gaiolas), necessria a coleta de animais estarem acometidos pelo agente infec-
em cada uma das unidades. cioso (moribundos) quando coletados,
Aps serem coletados, os peixes no resistem ao estresse do transporte.
moribundos podem ser enviados ao Essa forma de envio aplicvel princi-
laboratrio vivos, resfriados ou conge- palmente para o diagnstico de doenas
lados. Cada uma das formas apresenta em larvas e alevinos. Usualmente o tem-
pontos positivos e negativos que sero po de translado mximo recomendado
descritos a seguir. para esse tipo de envio
O melhor material Essa forma de de oito horas.
para a realizao de exa- envio aplicvel A forma mais co-
me laboratorial o envio principalmente para o mum de submisso de
de peixes vivos4, possi- diagnstico de doenas peixes para o diagnstico
bilitando a equipe do em larvas e alevinos. de doenas infecciosas
laboratrio avaliar os si- o envio dos animais res-
nais clnicos e realizar todos os tipos de friados. Os peixes moribundos so co-
exames (parasitolgico, bacteriolgico, locados em sacos plsticos e acondicio-
virolgico e histopatolgico). Porm, nados em caixas isotrmicas com gelo
do ponto de vista logstico, essa a (normal ou reciclvel). Esse tipo de en-
pior forma de envio de vio aumenta a acessibili-
material, principalmen- dade e viabilidade para a
A forma mais comum
te para animais adultos.
de submisso de peixes realizao de exames la-
Para chegarem vivos ao boratoriais, permitindo
para o diagnstico de
laboratrio, os peixes que amostras oriundas
doenas infecciosas
devem ser enviados em de longas distncias pos-
o envio dos animais
recipientes com gua, de sam chegar ao laborat-
resfriados.
82 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
rio. O tempo de trans- mento das amostras para
O envio de peixes
lado mximo para esse posterior envio ao labo-
resfriados
tipo de despacho de 48
particularmente vivel ratrio. Porm, o conge-
horas, podendo ser reali- lamento provoca a mor-
para diagnstico de
zado via empresas areas te de diversas bactrias
doenas bacterianas e
ou rodovirias. Apesar patognicas de peixes,
virais em peixes.
da viabilidade, o envio o que pode provocar re-
O envio de peixes
de peixes resfriados no congelados para o sultados falso-negativos.
permite a avaliao da diagnstico de doenas Essa forma de envio
sintomatologia clni- no recomendado. pode ser utilizada para
ca dos peixes, e o gelo diagnstico de doenas
pode ocasionar altera- virais; contudo, no exis-
es cutneas, gerando dvidas quanto tem descries da ocorrncia destas em
gnese ante ou post-mortem das leses. peixes tropicais no Brasil.
Alm disso, esse material no permite Cabe ressaltar que no devem ser
a realizao com segurana de exame coletados para o diagnstico de doen-
parasitolgico, pois o gelo pode matar as infecciosas peixes mortos encon-
os parasitas, ou a morte trados nos sistemas de
dos animais faz com que No devem ser cultivo. Aps a morte, o
estes se desprendam da coletados para o peixe entra rapidamente
carcaa, e histopatol- diagnstico de doenas em estado de decom-
gico, pois em seis horas infecciosas peixes posio. Isso permite
aps a morte dos peixes, mortos encontrados nos a contaminao bacte-
mesmo em condies sistemas de cultivo. riana post-mortem dos
de refrigerao, comea tecidos, com coloniza-
a ocorrer processos de o por diferentes mi-
autlise celular, dificultando a diferen- crorganismos, acelerando sua deterio-
ciao posterior de sua gnese ante ou rao e inviabilizando a realizao de
post-mortem. O envio de peixes resfria- exames laboratoriais, principalmente
dos particularmente vivel para diag- bacteriologia .
4

nstico de doenas bacterianas e virais


em peixes. 3. Procedimentos para o
O envio de peixes congelados para o envio de espcimes
diagnstico de doenas no recomen- Como supramencionado, os
dado, tendo aplicabilidade em situaes peixes podem ser encaminhados ao
muito especficas. Essa forma tem como laboratrio vivos ou resfriados. Para
vantagem a possibilidade de armazena- tanto, cada forma de envio deve seguir

7. Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas 83


procedimentos especficos, a fim de se vo diminuir a temperatura
otimizar os resultados obtidos pelos da gua, o metabolismo dos
exames laboratoriais. animais e prolongar o tempo
Os procedimentos para envio de de transporte;
amostras esto descritos a seguir, de V. Fechar a caixa trmica, ved-la
acordo com as recomendaes do com fita adesiva e prontamen-
Laboratrio de Doenas de Animais te submeter ao laboratrio;
Aquticos (AQUAVET) da Escola de VI. Identificar no exterior da caixa
Veterinria. trmica o nome do remetente,
propriedade, local de destino,
A) Envio de peixes vivos nome do laboratrio de des-
I. Encher um saco plstico resis- tino e nome do responsvel
tente com 1/3 de gua limpa; pela recepo do material;
II. Devem ser coletados, para VII. O laboratrio deve estar cien-
diagnstico de doenas infec- te do envio do material e ser
ciosas, peixes vivos com sin- avisado do provvel horrio
tomatologia clnica da doen- de chegada;
a. No submeter para exame VIII. Informaes sobre parme-
laboratorial peixes mortos ou tros produtivos, manejo, ca-
peixes sadios misturados com ractersticas dos sistemas
peixes doentes; de cultivo, histrico da pro-
III. Coletar os peixes doentes, priedade, histrico da ocor-
acondicion-los nos sacos rncia de doenas, surtos,
plsticos, completar os 2/3 tratamentos realizados, en-
restantes com oxignio e ved- tre outros, so importantes
-los com ligas de borracha ou para o esclarecimento da
outros materiais. Identificar doena e auxiliam os tcnicos
individualmente cada grupo do laboratrio durante
de peixes, colocando entre as a realizao dos exames
informaes a data da coleta, adequados para cada caso.
lote, sistema de cultivo e pro- Portanto, essas devem ser
priedade de origem; fornecidas. Caso no seja
IV. Colocar os sacos no interior de possvel o contato direto via
uma caixa trmica de isopor e e-mail ou telefone, essas in-
envolv-los com gelo picado formaes devem ser manus-
at a altura da gua no interior critas, colocadas no interior
dos sacos plsticos. O objeti- de sacos plsticos, estes poste-
84 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
riormente vedados e colados riormente coleta de todos os
no interior da tampa da caixa animais, cobrir com gelo pica-
trmica. Assim, na chegada ao do ou reciclvel (transporte
laboratrio os tcnicos tero areo). Camadas intermedi-
acesso a essas; rias de gelo podem ser coloca-
IX. Em caso de dvidas, os profis- das dependendo da altura da
sionais do laboratrio devem caixa;
ser contatados previamente IV. Identificar individualmente
para o esclarecimento e reso- cada peixe, colocando entre
luo de possveis problemas as informaes a data da co-
operacionais; leta, lote, sistema de cultivo e
X. Caso o percurso entre a origem propriedade de origem. Peixes
e o laboratrio ultrapassar 6 de diferentes lotes podem ser
horas, ou caso o responsvel acondicionados e submetidos
tenha dvidas se o animal che- em uma mesma caixa trmica;
gar vivo, os peixes devem ser porm, esses devem ser iden-
submetidos resfriados. tificados individualmente;
V. Fechar a caixa trmica, ved-la
B) Envio de peixes Resfriados: com fita adesiva e prontamen-
I. Devem ser coletados, para te submeter ao laboratrio;
diagnstico, peixes vivos com VI. Identificar no exterior da caixa
sintomatologia clnica da trmica o nome do remetente,
doena. No submeter para propriedade, local de destino,
exame laboratorial peixes nome do laboratrio de des-
mortos ou misturar peixes tino e nome do responsvel
sadios e peixes doentes sem pela recepo do material;
identific-los; VII. Fazer a reposio do gelo sem-
II. Coletar os peixes doentes, pre que possvel, dependendo
acondicion-los em sacos do tempo de translado;
plsticos individuais e identi- VIII. No congelar o material;
ficar de maneira que essa in- IX. Informaes sobre parme-
formao no se perca caso o tros produtivos, manejo, ca-
material seja molhado; ractersticas dos sistemas
III. Colocar os peixes no interior de cultivo, histrico da pro-
de uma caixa trmica (isopor priedade, histrico da ocor-
ou plstico) com uma camada rncia de doenas, surtos,
de gelo sob os peixes e, poste- tratamentos realizados, en-
7. Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas 85
tre outros, so importantes passar 48 horas, esse material
para o esclarecimento da corre o risco de se deteriorar e
doena e auxiliam os tcnicos resultados no fidedignos do
do laboratrio durante problema podem ser obtidos.
a realizao dos exames Outras formas de coleta e envio de
adequados para cada caso. peixes para exames laboratoriais esto
Portanto, essas devem ser for- descritas no Manual de coleta e remessa
necidas. Caso no seja poss- de amostras para diagnstico de enfer-
vel o contato direto via e-mail midades de animais aquticos na Rede
ou telefone, essas informaes Nacional de Laboratrios do Ministrio
devem ser manuscritas, colo- da Pesca e Aquicultura, disponvel no
cadas no interior de sacos pls- stio http://www.mpa.gov.br/images/
ticos, estes posteriormente ve- Docs/Monitoramento_e_Controle/
dados e colados no interior da sanidade_pesqueira/Manual%20
tampa da caixa trmica; de%20Coleta%20e%20Remessa.pdf.
X. O laboratrio deve estar cien-
te do envio do material e ser 4. Envio de amostras e
avisado do provvel horrio principais exames a serem
de chegada;
XI. Em caso de dvidas, os profis-
realizados
sionais do laboratrio devem De acordo com as suspeitas clnicas
ser contatados previamente de um surto dentro de uma piscicultura,
para o esclarecimento e reso- diferentes tipos de amostras podem ser
luo de possveis problemas enviados para o laboratrio e submeti-
operacionais; dos aos exames parasitolgico, bacte-
XII. Caso o percurso entre a fazen- riolgico, fngico, viral ou histopatol-
da e o laboratrio possa ultra- gico. Na Tabela 1, esto apresentadas as

Tabela 1. Amostras a serem coletadas e


formas de envio para as diferentes suspeitas clnicas3
Doenas Tipo de Amostra Forma de Envio
Doenas Parasitrias Peixe inteiro (recomendado) Vivo
Doenas Bacterianas Peixe inteiro Vivo ou resfriado
Doenas Fngicas Peixe inteiro ou amostras de larvas Vivo ou resfriado
Doenas virais (suspeitas) Peixe inteiro ou amostras de larvas Vivo ou resfriado ou congelado
Surtos atpicos com alta
Peixe inteiro ou amostras de larvas Vivo
mortalidade

86 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014


amostras e a forma de envio para o diag- vero ser eutanasiados de acordo com
nstico das diferentes doenas infeccio- as recomendaes da Resoluo CFMV
sas e parasitrias em peixes. no 1.000, de 11 de maio de 20125, exa-
minados externamente mais uma vez e
5. Recepo dos peixes no necropsiados para a coleta assptica de
laboratrio tecidos (Figura 2). Os tecidos coletados
sero submetidos ao exame bacteriol-
No laboratrio, aps o recebimen- gico e fngico a partir de estriados em
to dos peixes, todos os dados afixados meios de cultivos seletivos, seguido por
sobre o isopor so conferidos e, caso incubao e avaliao da obteno de
haja alguma irregularidade ou ausncia possveis isolados. Cada microrganismo
de dados, o contato imediato com o re- obtido ser submetido identificao
metente deve ser realizado. Os peixes fenotpica, bioqumica e molecular de
so inspecionados para certificao da acordo com a suspeita clnica.
possibilidade da execuo do exame
laboratorial (se esto vivos ou em es- 6. Consideraes finais
tado de deteriorao). Em peixes que O diagnstico de doenas infeciosas
chegam vivos, aps a inspeo inicial, em peixes uma pea fundamental para
deve ser realizado o exame parasitol- o controle das enfermidades em fazen-
gico. Posteriormente, com material e das. Para isso, a coleta e remessa de ma-
equipamento adequados, os peixes de- terial devem ser realizadas de maneira

Figura 2: Peixe a ser submetido necropsia e exame bacteriolgico.

7. Coleta e Remessa de Peixes para Diagnstico de Doenas Infecciosas 87


criteriosa. Diversas formas de coleta e lection methods (organs vs swabs) for Tasmanian
salmon reovirus detection in farmed Atlantic sal-
remessa de peixes para exames labora- mon, Salmo salar L. J. Fish Dis., v. 36, n. 4, p. 427-
toriais diferentes das apresentadas no 436, 2013.
presente artigo esto disponveis na li- 3. MINISTRIO DA PESCA E AQUICULTURA.
Manual de coleta e remessa de amostras para diag-
teratura. Mas, de posse das informaes nstico de enfermidades de animais aquticos na
e recomendaes bsicas apresentadas Rede Nacional de Laboratrios do Ministrio da
Pesca e Aquicultura RENAQUA. 1.ed. Braslia,
aqui, tcnicos e produtores podero 2013. 67p.
realizar com sucesso essa etapa crucial 4. SIMON, R. C.; SCHILL, W. B. Tables of sample
para um bom diagnstico de doenas size requirements for detection of fish infected by
em peixes. pathogens: three confidence levels for different
infection prevalence and various population sizes.
Journal of Fish Diseases, v. 7, n. 6, p. 515-520, 1984.
7. Referncias 5. NOGA, E. J. Fish disease: diagnosis and treatment.
Bibliogrficas 2.ed, Iowa: Blackwell Publishing, 2010, 536p.

1. LIMA, L. C.; LEITE, R. C. Boas coletas garantem 6. CONSELHO FEDERAL DE MEDICINA


bons diagnsticos. Panorama da Aquicultura, v. 16, VETERINRIA. Resoluo No 1.000, de 11
n. 96, p. 24-29, 2006. de Maio de 2012. Disponvel em: http://www.
cfmv.org.br/portal/legislacao/resolucoes/resolu-
2. ZAINATHAN, S. C.; CARSON, J.; CRANE, M. cao_1000.pdf. Acesso em: 22 mai. 2014.
S. J. et al. F. Laboratory evaluation of sample col-

88 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014