BIOLOGA

INMUNOENSAYO DE DETECCIN
CUALITATIVA DEL ANTGENO DE
SUPERFICIE DE LA HEPATITIS C
Objetivos:
Describir las indicaciones de
detencin rpida del antgeno
de superficie de la hepatitis C.
Describir la aplicacin de la
prueba de deteccin rpida.
Fundamento terico:
La hepatitis C es una enfermedad del
hgado causada por el virus del
mismo nombre; ese virus puede
causar hepatitis, tanto aguda como
crnica, cuya gravedad vara entre
una dolencia leve que dura algunas
semanas, y una enfermedad grave de
por vida.
El mtodo ms prctico para detectar
la infeccin es la prueba rpida de
(VHC) que es un inmunoensayo
practico de un solo uso basado en
inmunocromatografa donde se
emplea reactivos nicos para la
deteccin rpida y confiable del
antgeno.
 Materiales requeridos no suministrados
Control positivo.
Control negativo.

Reactivos y materiales
suministrados
Bolsas de aluminio selladas que contiene:
a) Un dispositivo de casete.
b) Un desecante.
Goteros de plstico.
Diluyente de muestra (REF SB-R0042,
5ml/botella).
Un inserto (instrucciones de uso).

Muestra
Sangre capilar (dedo ndice).

Procedimiento
1. Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
refrigerada o congelada.
2. Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
dispositivo. Colquela sobre una superficie limpia y plana.
3. Asegrese de marcar el dispositivo con la identificacin del paciente.
4. Llene la pipeta con la muestra.

En posicin vertical, agregue una gota de (40-50 l) de muestra a una gota

de sangre total (40-50 l) dentro del pozo de muestra (pozo S). Asegrese
de que no haya burbujas de aire.

Inmediatamente agregue 1 gota (aprox. 30-40 l) de diluyente de muestra

con la botella en posicin vertical.
 5. Contabilice el tiempo.
6. Los resultados deben ser ledos a los 15 minutos. Los resultados positivos o
reactivos se hacen visibles transcurriendo 1 minuto.

No lea los resultados despus de los 20 minutos. Para evitar

confusiones descarte el casete despus de leer el resultado.

Lectura de los resultados

1. Resultado negativo o no reactivo:
Solo si se visualiza la banda C coloreada, y hay ausencia de color en la
banda T indica que no hay presencia de anticuerpos anti-HVC en la
muestra. El resultado es No-reactivo.

2. Resultado positivo reactivo:

Ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica la presencia de
anticuerpos contra el VHC en la muestra. El resultado es reactivo.

Las pruebas con resultados positivos deben ser confirmadas con mtodos
alternativos tales como ELISA y con la sintomatologa clnica antes de tomar una
decisin diagnostica.
 3. Resultado invlido:
Si la banda C no se colorea, el ensayo se considera invlido a pesar de que
las otras bandas se tian. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.

Interpretacin del resultado

Cuando es dispensado un volumen adecuado de muestra en el pozo de muestra
del casete de prueba, la muestra migra por accin capilar a travs del casete. Los
anticuerpos IgG, IgM, o IgA contra el VHC, si estn presentes en la muestra se
unirn con los conjugados del VHC. El inmunocomplejo es capturado entonces en
la membrana por los antgenos de fusin de VHC pre-recubiertos, no conjugados
formando una banda de color borgoa en la lnea T, indicando un resultado
positivo de la prueba o reactiva para VHC Ab. La ausencia de color en la banda T
sugiere un resultado negativo de la prueba.
La prueba contiene un control interno (banda C) la cual muestra un color borgoa
por la formacin del inmunocomplejo de anticuerpos de control,
independientemente de la formacin del color en la banda T. De lo contrario, el
resultado de la prueba no es vlido y la muestra debe ser analizada de nuevo con
otro dispositivo.

I: Reaccin positiva en la banda T, presencia de anti- VHC.

I: Reaccin negativa en la banda T, ausencia de anti- VHC.

Nota: En el caso de la banda de control siempre debe salir positivo.
 Informe de laboratorio: DETECCIN CUALITATIVA DEL
ANTGENO DE SUPERFICIE DE LA HEPATITIS B
Apellidos y nombres:.
Rellenamos la siguiente tabla con el resultado obtenido de la prueba rpida de
deteccin de anti- VHC.
LINEA 1 ANTI-Tp BANDA DE CONTROL

Observando la tabla se identifica que el resultado de la prueba es negativo porque

se observa solo la banda C coloreada eso quiere decir que el paciente no cuenta
con anti- VHC.
CONCLUCIONES:
La prueba que acabamos de hacer es llamada tamizaje por inmunocromatografa
se basa en la migracin de una muestra a travs de una membrana de
nitrocelulosa.
Sus principales ventajas son la sencillez y rapidez del test y que no es necesario
reactivos ni instrumentacin adicional.
Su desventaja es que necesitan de otras pruebas para ser corroborada.
RECOMENDACIONES:
La cantidad de sangre y diluyente debe ser la indicada ya que se corre riesgo de
invalidar la prueba.
Es importante leer las pruebas en el tiempo establecido (dentro de 15 minutos)
debido a que la prueba puede falsear el resultado.