Prueba Rpida OnSite HBsAg (Suero / Plasma) Pgina 1 de 2

2. No abra el empaque sellado hasta que no se vaya a realizar la prueba.

3. No use los dispositivos si se encuentran vencidos
4. Atempere los reactivos de 15 a 30C antes de usarlos.
Catlogo Nmero R0040C 5. No utilice los componentes de otro tipo de prueba como sustituto de los componentes
de este kit.
6. No utilice sangre sangre hemolizada para la prueba.
7. Use ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los reactivos del kit y las
Diagnstico In vitro muestras clnicas. Lave sus manos despus de realizar la prueba.
8. Los usuarios de esta prueba deben seguir las precauciones universales del CDC de
USO Estados Unidos para la prevencin de transmisin del VIH, el VHB y otros patgenos
de transmisin sangunea.
La prueba rpida OnSite HBsAg es un inmunoensayo de cromatografa lateral para la
9. No fume, beba ni coma en las reas donde se manipulen muestras o reactivos del kit.
deteccin cualitativa del antgeno de superficie de la Hepatitis B (HBsAg) en plasma o
10. Deseche todas las muestras y los materiales del kit usados como residuos biolgicos
suero humana en un nivel igual o superior a 1 ng/ml. Este mtodo es usado como
peligrosos..
tamizaje y ayuda diagnostica de infeccin con el virus de la Hepatitis B (VHB).
11. Manipule los controles positivos y negativos de la misma forma como a las muestras de
Cualquier muestra que de un resultado reactivo con la prueba rpida OnSite
los pacientes
HBsAg Combo debe ser confirmada con pruebas alternativas tales como el ELISA y la
12. Los resultados de las pruebas pueden ser ledos 15 minutos despus de agregar la
sintomatologa clnica.
muestra al pozo de muestra. Leer los resultados despus de los 20 minutos puede
generar resultados errneos.
RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA
13. No procese la muestra en un lugar con fuerte corriente de aire, con ventiladores o aire
El virus de la Hepatitis B (VHB) en la causa ms comn de viremia persistente y la causa ms acondicionado.
importante de enfermedad heptica crnica y carcinoma hepatocelular. Clnicamente la
infecciones por el VHB han existido durante varios milenios. Se estima que hay cerca de 300 millones PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
de portadores crnicos de VHB en el mundo. Los tipos de portadores varan de un 0.3%
Todos los reactivos vienen listos para ser usados. El almacenamiento de los dispositivos
(pases del occidente) al 20% (Asia, frica)1.
cerrados debe ser de 2-30C. Si se almacena de 2-8C, asegrese de que el dispositivo de
2 prueba se lleva a temperatura ambiente antes de la apertura. El dispositivo de prueba es estable
El VHB es un virus ADN hepatotrpico. El core de este virus contiene ADN polimerasa , el
antgeno core (HBcAg)3 y el antgeno e (HBeAg)4. El core del VHB est encerrado en una hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa. No congele el kit o exponer el kit a ms de 30C.
capa que contiene lpidos, carbohidratos y protenas incluyendo un antgeno en la superficie
(HBsAg)3. RECOLECCIN DE LA MUESTRA Y MANIPULACION

El HBsAg es el primer marcador que aparece en sangre en la fase aguda de la hepatitis B, Considere todos los materiales de origen humano como infecciosos y manipule usando los
es detectado 1 semana a 2 meses despus de la exposicin, y de 2 semana a 2 meses antes procedimientos de bioseguridad.
de la aparicin de los sntomas. Tres semanas despus del inicio de hepatitis aguda casi la mitad
Plasma
de los pacientes todava es positivo para el HBsAg. En la fase crnica, el HBsAg persiste por
1. Recolecte la muestra en un tubo tapa lila, azul o verde (que contenga EDTA, Citrato o
un largo periodo (6-12 meses) sin seroconversin para los anticuerpos correspondientes. Por
Heparina) por venopuncin.
lo tanto, la deteccin de HBsAg es altamente recomendable para todos los donantes, las
2. Separe el plasma por centrifugacin.
mujeres embarazadas y las personas en grupos de alto riesgo.
3. Cuidadosamente transfiera el plasma a un tubo nuevo.
La prueba rpida OnSite HBsAg detecta el HBsAg en suero o plasma humana en 15 minutos
Suero
y puede ser realizada por personal mnimamente entrenado sin necesidad de equipo de
1. Recolecte por venopuncin la muestra en un tubo tapa roja (sin anticoagulantes)
laboratorio.
2. Espere la formacin del coagulo
3. Separe el suero por centrifugacin
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
4. Cuidadosamente transfiera el suero a un tubo nuevo
La prueba rpida OnSite HBsAg es un inmunoensayo cromatogrfico de flujo lateral. La Procesar las pruebas lo ms pronto posible a la toma de la muestra. Almacene las muestras
prueba del casete consiste en: 1) una membrana con conjugado coloreado de borgoa de 2C a 8C si no se van a procesar inmediatamente. Las muestras son estables
que contiene anticuerpos anti-HBsAg conjugados con oro coloidal (conjugado HBsAg Ab) y almacenadas de 2 a 8C durante 5 das. Las muestras pueden congelarse a -20 para
un control de anticuerpo conjugado con oro coloidal, 2) una membrana de nitrocelulosa almacenamientos prolongados.
que contiene la banda de prueba (banda T) y una banda de control (banda C). La banda
T esta pre-recubierta con anticuerpos HBsAg no conjugados, y la banda C esta pre- Evite mltiples ciclos de congelacin y descongelacin de las muestras. Antes del ensayo,
recubierta con un control de anticuerpo. lleve las muestras congeladas a temperatura ambiente lentamente y mezcle con suavidad.
Identificacin Banda de Lnea de Pozo de
de la muestra Control prueba
Las muestras que contengan partculas visibles, deben ser eliminadas por centrifugacin
muestra
antes de la prueba.

PROCESAMIENTO

Paso 1: Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es

Cuando es dispensado un volume adecuado de la muestra en el pozo de muestra del
casete, la muestra migra por accin capilar a travs del casete. El HBsAg si est
presente en la muestra se une con el HBsAg Ab. Este inmunocomplejo es capturado en la
membrana por el anticuerpo HBsAg no conjugado pre-recubierto, formando una
coloracin en la banda T, indicando un resultado positive para HBsAg.
La ausencia de la banda T indica un resultado negativo. La prueba contiene un control interno
(banda C) la cual muestra una coloracin borgoa por la formacin de un inmunocomplejo
de anticuerpos de control, que se forma independientemente de la banda T. El resultado de la
prueba es invlido si la banda C no se colorea y debe ser repetida en un nuevo casete de
prueba.
refrigerada o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez
descongelado.
Paso 2: Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
dispositivo. Colquelo sobre una superficie limpia y plana.
Paso 3: Asegrese de marcar el dispositivo con la identificacin del paciente.
Paso 4: Llene el gotero con la muestra. Con el gotero en posicin vertical, agregue 2-3
gotas (60-90 L) de muestra en el pozo de muestra asegurndose de que no
hayan burbujas de aire.

REACTIVOS Y MATERIALES SUMINISTRADOS

1. Bolsas de aluminio selladas que contiene:

a. Un dispositivo de casete
b. Un desecante
2. Goteros de plstico
3. Un inserto (instrucciones de uso).

MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS

Nota: Adicione 1 gota de solucin salina o Buffer de Sal-Fosfato (buffer de uso clnico
1. Control Positivo comn, no suministrados en el kit) dentro del pozo de muestra, si no se observa
2. Control Negativo
migracin de la muestra trascurridos 30 segundos, lo cual ocurre con muestras
espesas.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SE SUMINISTRAN
Paso 5: Contabilice el tiempo.
1. Reloj o cronmetro
Paso 6: Los resultados deben ser ledos a los 15 minutos. Los resultados positivos o
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES reactivos se hacen visibles transcurrido 1 minuto.
Para uso de Diagnstico in Vitro No lea los resultados despus de 20 minutos. Para evitar confusiones
1. Este inserto debe ser ledo completamente antes de la realizacin de la prueba. Si no descarte el casete despus de leer el resultado.
se sigue el inserto se pueden generar resultados errneos.
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CONTROL CALIDAD sustancias o enfermedades estudiadas no afectan el rendimiento de la prueba rpaida

OnSite HBsAg.
1. Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C. esta se
desarrolla despus de adicionar la muestra. De lo contrario, revise el procedimiento y
Note: -: Negativo; +: Positivo dbil; ++: Positivo medio
repita la prueba con un nuevo dispositivo.
ReactividadHBsAg
Substanciaspotencialmente
2. Control Externo: las Buenas Prcticas de Laboratorio recomiendan el uso de Positivo Positivo
interferentes Negativo
Dbil Medio
controles externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento
adecuado de la prueba, particularmente en las siguientes circunstancias: Control - + ++
a. Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese las muestras. Bilirubin 20 mg/dL - + ++
b. Cuando se inicia un nuevo kit. Creatinine 442mol/L - + ++
c. Un nuevo envo de kits es utilizado. Glucose 55 mmol/L - + ++
d. Cuando la temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2C - 30C. Albumin 50 g/L - + ++
e. La temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15C - 30C. Salicylic Acid 4.34 mmol/L - + ++
f. Para verificar una frecuencia mayor que la esperada de los resultados positivos o
Heparin 3,000 U/L - + ++
negativos.
g. Investigar la causa de resultados no vlidos repetidos. EDTA 3.4 mol/L - + ++
Human IgG 1,000mg/dL - + ++
INTERPRETACIN DE RESULTADOS Sodium citrate 3.8% - + ++

1. RESULTADO NEGATIVO: Si solo se colorea la banda C, indica que el nivel de
HBsAg en la muestra es indetectable (menor de 1 ng/mL). El resultado es Negativo o
No-reactivo.
2. RESULTADO POSITIVO: Si se colorean ambas bancas C y T, la prueba indica que la
muestra contienes HBsAg y el valor es igual o mayor a 1 ng/mL. El resultado es
positivo o reactivo.
Las muestras con resultados positivos o reactivos deben ser confirmados con mtodos
alternativos tales como ELISA y con la sintomatologa clnica antes de tomar una
decisin diagnstica.
3. INVLIDO: Si la banda C no se colorea, el ensayo se considera invlido a pesar de
que las otras bandas se tian. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1. El procedimiento del anlisis y la interpretacin de resultados de ensayo debe seguirse
de cerca cuando se prueba la presencia de HBsAg en suero o plasma de los pacientes.
Si no se sigue el procedimiento puede dar resultados inexactos.
2. La prueba rpida OnSite HBsAg se limita a la deteccin cualitativa de HBsAg en suero
o plasma humana. La intensidad del color de la banda no indica el ttulo de HBsAg en
la muestra.
3. Un resultado no-reactivo no excluye la posibilidad de no haberse expuesto o estar
infectado con el VHB.
4. Un resultado no-reactivo puede ocurrir si la cantidad de HBsAg presente en la muestra
es menor al lmite de deteccin del ensayo (menor de 2ng/mL), o el HBsAg detectado
no est presente durante el estado de la enfermedad cuando la muestra es
recolectada.
5. Si los sntomas persisten, y los resultados de la prueba son no-reactivos, es
recomendable tomar una nueva muestra das despus o realizar una prueba
alternativa.
6. Algunas muestras que contienen alto ttulo inusual de anticuerpos heterfilos o de
factor reumatoideo pueden afectar los resultados.
7. Los resultados obtenidos con esta prueba deben ser interpretados junto con otros
procedimientos diagnsticos y la sintomatologa clnica.
REFERENCIAS
1. Emanuel Rubin and John Farber. The liver and biliary system. Acute viral hepatitis P 721-
729. Rubin E, Farber JL ed. Pathology 2nd ed. 1994. J.B. Lippincott, Philadelphia
2. Kaplan PM, Greenman RL, Gerin JL, Purcell RH, Robinson WS. DNA polymerase
associated with human hepatitis B antigen. J Virol. 1973 12(5):995-1005.
3. Dane DS, Cameron CH, Briggs M. Virus-like particles in serum of patients with Australia-
antigen-associated hepatitis. Lancet. 1970;1(7649):695-8.
4. Magnius LO, Espmark A. A new antigen complex co-occurring with Australia antigen.
Acta Pathol Microbiol Scand [B] Microbiol Immunol. 1972;80(2):335-7.

CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO

Desempeo clnico ndice de Smbolos

Consulte las Para uso diagnstico
Un total de 560 muestras de individuos susceptibles fueron evaluados con la pruebe Utilice por
instrucciones de uso in vitro nicamente
rpida OnSite HBsAg y el kit de ELISA HBsAg con una sensibilidad del 0.5 ng/mL. La
Pruebas por
comapracin se encuentra en la siguiente tabla. REF Catlogo nmero Nmero de Lote N kit
Almacenar de 2 a Representante
Prueba Rpida OnSite HBsAg No reutilizar
30C Autorizado
HBsAg
ELISA Positivo Negativo Total Fabricante Fecha de fabricacin
Positivo 97 0 97
Negativo 0 463 463
Total 97 463 560
Sensibilidad Relativa: 100%, Especificidad Relativa: 100%, Concordancia: 100% CTK Biotech, Inc.
10110 Mesa Rim Road
Reactividad cruzada San Diego, CA 92121, USA
Reaccin cruzada con muestras de otras enfermedades infecciosas. Tel: 858-457-8698
Fax: 858-535-1739
Nmerode
Muestra ReactividadHBsAg E-mail: info@ctkbiotech.com
muestras
DenguePositiveSerum 10 Negativo PI-R0040C-Spanish Rev. G
HAVPositiveSerum 10 Negativo Effective date: 2014-02-19
HCVPositiveSerum 10 Negativo Versin en Espaol
HIVPositiveSerum 10 Negativo
SyphilisPositiveSerum 10 Negativo For Export Only, Not For Re-sale In the USA
TBPositiveSerum 10 Negativo
H.pyloriPositiveSerum 10 Negativo
ANAPositiveSerum 6 Negativo
HAMAPositiveSerum 4 Negativo
RFPositiveSerum(2,500IU/ml) 3 Negativo

Interferencia
Las sustancias comunes (tales como medicamente para el dolor y la fiebre, componentes
sanguneos), puede afectar al rendimiento de la prueba rpida OnSite HBsAg. Esto fue
estudiado mediante el fortalecimiento de estas sustancias en los controles estndar de
HBsAg. Los resultados se presentan en la siguiente tabla y demuestran que las