INSTITUTO SUPERIOR TECNOLGICO

MARA MONTESSORI

RM.226-87; DS. 14-94; RD 3109

FARMACIA TCNICA

EXTRACTO DE LA ORTIGA COLORADA Y SU

EFECTO ANTIINFLAMATORIO, ESTUDIO Y
EXPERIMENTACION EN RATAS EN LA
REGION AREQUIPA EN EL AO 2008
Presentado por:

MACHA MESTAS, Rosala

MERMA CCARHUARUPAY,
Washington.

Trabajo de tesis realizado para optar el

ttulo de:

TCNICA EN FARMACIA

AREQUIPA - PER

2009
AGRADECIMIENTO
 DEDICATORIAS

INDICE
CAPITULO 1___________________________________________________________ 1

PLANTEAMIENTO TERICO ___________________________________________________ 1

1 DESCRIPCIN DEL PROBLEMA _____________________________________________________ 1
2. FORMULACIN DE LAS INTERROGANTES ____________________________________________ 2
3. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN __________________________________________________ 2
3. 1. OBJETIVO GENERAL _________________________________________________________ 2
3. 2. OBJETIVOS ESPECFICOS _____________________________________________________ 2
4. IMPORTANCIA Y JUSTIFICACIN ___________________________________________________ 3
5. BASES TERICAS ________________________________________________________________ 3
4. 1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN _________________________________________ 3
5. 1. 4. ANTECEDENTES REGIONALES ____________________________________________ 3
5. 1. 3. ANTECEDENTES NACIONALES ____________________________________________ 6
5. 1. 4. ANTECEDENTES INTERNACIONALES _______________________________________ 6
4. 1. MARCO TERICO ___________________________________________________________ 6
5. 2. 1. DESCRIPCIN FARMACOBOTNICA DE LA PLANTA MEDICINAL _________________ 6
5.2.1.1 HISTORIA ________________________________________________________ 6
5.2.1.2 TAXONOMA _____________________________________________________ 7
5.2.1.3 DESCRIPCIN BOTNICA ____________________________________________ 7
5.2.1.4 ECOLOGA________________________________________________________ 8
5.2.1.5 HABITAD _________________________________________________________ 8
5.2.1.6 PARTES UTILIZADAS ________________________________________________ 8
5.2.1.7 PROPIEDADES CURATIVAS ATRIBUIDAS ________________________________ 8
5.2.1.8 FITOQUMICA _____________________________________________________ 8
5. 2. 2. PATOLOGA DEL TEMA: INFLAMACIN _____________________________________ 9
5.2.2.1 CONCEPTO _______________________________________________________ 9
5.2.2.2 CAUSAS DE INFLAMACIN __________________________________________ 9
5.2.2.3 TOPOGRAFA ____________________________________________________ 10
5.2.2.4 CARACTERSTICAS MORFOLGICAS __________________________________ 10
5.2.2.5 BASES MOLECULARES _____________________________________________ 12
5.2.2.6 EVOLUCIN _____________________________________________________ 34
5.2.2.7 MANIFESTACIONES CLINICO BIOLGICAS DE LA INFLAMACIN ____________ 39
5. 2. 3. TRATAMIENTO DE LA INFLAMACIN: ETOFENAMATO________________________ 41
5.2.3.1 DESCRIPCIN GENERAL: ___________________________________________ 41
5.2.3.2 FARMACOCINTICA _______________________________________________ 42
5.2.3.3 FARMACODINAMIA _______________________________________________ 42
5.2.3.4 INDICACIONES ___________________________________________________ 42
 5.2.3.5 POSOLOGA SEGN VA DE ADMINISTRACIN __________________________ 42
5.2.3.6 REACCIONES ADVERSAS ___________________________________________ 43
5.2.3.7 PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS ____________________________________ 44
5.2.3.8 CONTRAINDICACIONES ____________________________________________ 45
5.2.3.9 INTERACCIONES MEDICAMENTOSAS _________________________________ 46
5.2.3.10 SOBREDOSIFICACIN _____________________________________________ 46
5. 2. 4. FORMAS FARMACUTICAS SEMISLIDAS: POMADAS ________________________ 47
5.2.4.1 CONCEPTOS _____________________________________________________ 47
5.2.4.2 CLASIFICACIN ___________________________________________________ 47
5.2.4.3 EXCIPIENTES _____________________________________________________ 48
5.2.4.4 MTODOS GENERALES DE PREPARACIN DE POMADAS__________________ 61
5.2.4.5 ESTABILIDAD Y ENSAYOS DE POMADAS _______________________________ 64
5.2.4.6 ACONDICIONAMIENTO Y CONSERVACIN DE POMADAS _________________ 64
5. 2. 5. MTODOS DE OBTENCIN DE EXTRACTOS DE DROGAS _______________________ 65
5.2.5.1 FUNDAMENTOS FISICOQUMICOS DE LA EXTRACCIN ___________________ 65
5.2.5.2 PERCOLACION O LIXIVIACIN _______________________________________ 66

CAPITULO 2__________________________________________________________ 67

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN ________________________________________ 67

1 TIPO Y DISEO DE LA INVESTIGACIN ______________________________________________ 67
1. 1. TIPO ____________________________________________________________________ 67
1. 2. DISEO__________________________________________________________________ 67
2 MUESTRA _____________________________________________________________________ 67
2. 1. UNIDAD EXPERIMENTAL ____________________________________________________ 67
2. 2. MATERIAL BOTNICO ______________________________________________________ 68
3 TCNICAS E INSTRUMENTOS _____________________________________________________ 68
3. 1. TCNICAS ________________________________________________________________ 68
3. 2. INSTRUMENTOS __________________________________________________________ 68
3. 2. 1. DE VIDRIO: __________________________________________________________ 68
3. 2. 2. EQUIPOS DE LABORATORIO _____________________________________________ 68
3. 2. 3. REACTIVOS __________________________________________________________ 69
3. 2. 4. OTROS ______________________________________________________________ 69
4 TCNICAS DE RECOLECCIN Y PROCESAMIENTO. _____________________________________ 69
4. 1. RECOLECCIN DEL MATERIAL BOTNICO ______________________________________ 69
4. 2. MTODO DE OBTENCIN DEL EXTRACTO DE la droga ____________________________ 70
4. 3. MTODO DE PREPARACIN DE LA CREMA _____________________________________ 70
4. 4. MTODO PARA LA EVALUACIN BIOLGICA ____________________________________ 70
 4. 4. 1. INDUCCIN DE EDEMA SUBPLANTAR MEDIANTE CARRAGENINA AL 1%. _________ 70
4. 4. 2. DISEO _____________________________________________________________ 70
4. 4. 3. TRATAMIENTOS ______________________________________________________ 71
4. 4. 4. PROCEDIMIENTO _____________________________________________________ 71
4. 4. 5. EVALUACIN Y REGISTRO ______________________________________________ 71
4. 4. 6. TRANSFORMACIN DE LOS DATOS _______________________________________ 72
4. 4. 7. MTODOS ESTADSTICOS _______________________________________________ 72
4.4.7.1 PARMETROS DE DISTRIBUCIN ____________________________________ 72
4.4.7.2 PARMETROS DE DISPERSIN ______________________________________ 72
4.4.7.3 ANLISIS DE LA VARIANCIA (ANOVA) _________________________________ 72
4.4.7.4 PRUEBA DE SIGNIFICACIN _________________________________________ 73
5 PLAN EXPERIMENTAL ___________________________________________________________ 74

CAPITULO III _________________________________________________________ 75

RESULTADOS DE LA INVESTIGACIN __________________________________________ 75

CAPITULO IV _________________________________________________________ 97

DISCUSIN DE RESULTADOS DE LA INVESTIGACIN ______________________________ 97

CAPITULO V _________________________________________________________ 99

SUGERENCIAS PARA LA INVESTIGACIN _______________________________________ 99

BIBLIOGRAFA ___________________________________________________________ 101

ANEXOS ________________________________________________________________ 102

 1

CAPITULO 1

PLANTEAMIENTO TERICO

1 DESCRIPCIN DEL PROBLEMA

Se ha observado hoy en da que la gran mayora de medicamentos son

sustancias qumicas y que estos a lo largo nos podra ocasionar dao en el organismo.

Se ha observado tambin que en la regin de Arequipa crece la ortiga

colorada y que los pobladores le dan un uso como antiiflamatorio en preparaciones
caceras, tambin cabe mencionar que no existe ningn producto o forma farmacutica a
base de esta planta medicinal en el mercado farmacutico, por otro lado, existe en la
medicina tradicional y manifestaciones provenientes de la etnobotnica, que el efecto
antiinflamatorio de la ortiga colorada es muy til en el tratamiento de enfermedades
reumticas. Sumado a todo esto en la literatura cientfica, as como en trabajos de
investigacin de nuestra localidad, relacionados a plantas medicinales no existe una
investigacin dedicada al estudio de esta especie botnica.
 2

Segn lo comentado la propiedad antiinflamatoria de esta planta medicinal

aparentemente sera muy similar a los antiinflamatorios que se encuentran en el mercado
farmacutico como son los aines: diclofenaco, naproxeno, etc.; glucocorticoides como la
betametasona, dexametasona y otros anlogos.

Despus de analizar estos puntos es que nace el motivo de estudiar esta planta
medicinal como antiinflamatoria y analgsica dndole una forma farmacutica adecuada
y de fcil administracin como es una crema dando as a los pacientes una alternativa ms
para la inflamacin y dolor.

2. FORMULACIN DE LAS INTERROGANTES

- La ortiga en realidad presenta propiedades analgsicas y/o antiinflamatorias?

- Cules son las propiedades curativas de la ortiga colorada, segn la tradicin?

- Es posible la incorporacin de un extracto de ortiga colorada en una forma

farmacutica semislida y que esta sea farmacotcnicamente estable?

- La crema de ortiga colorada obtenida, en parangn con una crema antiinflamatoria

de referencia ser igualmente eficaz?

3. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN

La presente investigacin presenta los siguientes objetivos

3. 1. OBJETIVO GENERAL

- Determinar el efecto antiinflamatorio de una forma farmacutica semislida (crema)

obtenida a partir del extracto de ortiga colorada en animales de experimentacin.

3. 2. OBJETIVOS ESPECFICOS

- Obtencin del extracto a partir de la droga.

- Reconocer a la inflamacin como una manifestacin de diversas entidades

patolgicas, con una base bioqumica diversa.
 3

- Elaboracin de la crema para uso cutneo a partir del extracto y que esta sea
farmacotcnicamente estable.

- Comparar el efecto antiinflamatoria de la crema de ortiga frente a un antiinflamatorio

no esteroide tpico presente en el mercado farmacutico.

- Interpretar los resultados de la investigacin.

4. IMPORTANCIA Y JUSTIFICACIN

El presente trabajo de investigacin se presenta para poder obtener una forma

farmacutica a base de la ortiga colorada viendo que esta planta crece en la regin de
Arequipa y no se le da un uso adecuado en cuanto a su accin teraputica como
antiinflamatorio pues no hay ningn medicamento que contenga principios activos de esta
planta medicinal por lo cual hay la necesidad de investigarla dndole una forma
farmacutica y aplicndola en animales de experimentacin, especficamente en ratas.

Viendo los recursos de la institucin y los comprometidos en la investigacin

se da procedencia al trabajo de investigacin experimental.

5. BASES TERICAS

4. 1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN

5. 1. 4. ANTECEDENTES REGIONALES

INSTITUCIN: Universidad Catlica Santa Mara

FACULTAD: Farmacia y Bioqumica

AUTOR: Corazas Ramrez, Pierina amparito

Rincn Santos, Ivoone milagros

FECHA: AREQUIPA PERU 2006

 4

TITULO:Efecto Antibacteriano del Extracto de la Urtica ureas l. ortiga menor

in vitro frente a microorganismos gram negativos presentes en infecciones

urinarias

RESUMEN:

Se determino el efecto antibacteriano de los extractos secos metanlico y etanlico

de las hojas y races de la Urtica Urens L. Ortiga Menor sobre bacterias Gram

negativas presentes en Infecciones Urinarias; el presente trabajo de investigacin

se realizo en el Laboratorio de Control de Calidad de la Universidad Catlica de

Santa Mara entre los meses de Marzo Octubre del 2006.

Se obtuvieron los Extractos Secos tanto de las Hojas y Races mediante el Mtodo

de Extraccin Soxhlet; posteriormente se realizo una marcha fotoqumica

preliminar y una Cromatografa de Capa Fina (CCF) de los extractos donde se

observo la presencia de Taninos, Flavoniodes y Terpenos los que podran

proporcionar a la planta la actividad antibacteriana frente a grmenes Gram

negativos.

Luego se evalu la actividad antibacteriana mediante la determinacin de la

Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) por el Mtodo de Dilucin en Caldo Y

la concentracin Bacteriana Mnima (CBM) por el Mtodo de Dilucin en Agar

de las cuales se obtuvo en: Escherichia Coli con extracto metanlico de hojas una

CMI de 15.41 mg/ml y una CBM de 48.77 mg/ml; con el extracto etanlico de

hojas se tiene una CMI de 17.34 mg/ml y una CBM de 58.53 mg/ml; con el

extracto metanlico de Raz una CMI de 9.64 mg/ml y una CBM de 39.02 mg/ml;

con el extracto etanlico de Raz se tiene una CMI de 9.64 mg/ml y una CBM de

39.02 mg/ml.
 5

Para Proteus sp. Se obtuvo con extracto metanlico de hojas una CMI de 5.99

mg/ml y una CBM de 26.01 mg/ml; con el extracto etanlico de hojas se tiene

CMI de 7.71 mg/ml y una CBM de 30.35 mg.ml; con el extracto metanlico de

Raz una CMI de 5.14 mg/ml y una CBM de 26.01 mg/ml; con el extracto

etanlico de Raz se tiene una CMI de 5.99 mg/ml y una CBM de 21.68 mg/ml.

Para Enterobacter sp. Se obtuvo con extracto metanlico de hojas una CMI de

13.49 mg/ml y una CBM de 58.53 mg/ml; con el extracto etanlico de hojas se

tiene una CMI de 15.41 mg/ml y una CBM de 68.28 mg/ml; con el extracto

metanlico de raz una CMI de 11.56 mg/ml y una CBM de 58.53 mg/ml; con el

extracto etanlico de Raz se tiene una CMI de 13.49 mg/ml y una CBM de 48.77

mg/ml.

INSTITUCION: Universidad Catlica Santa Mara

FACULTAD: Farmacia y Bioqumica

AUTOR: FLORES ROSADO, Elizabeth Antonia

FECHA: AREQUIPA PERU 1991

TITULO: Estudio Botnico y Qumico de la Especie URTICA URENS L.

(Ortiga Menor)

RESUMEN:

Se realizo el anlisis preliminar en hojas, tallos, flores y races, encontrndose

mayor proporcin de principios activos en las hojas.

En la determinacin de cenizas, se obtuvo los siguientes minerales: SiO2

9.15%; C 1.18%; SO3 4.48%; K2O 32.11%; Na2C 7.56%; CaO

 6

36.71%; MgO 1.77%; Fe2O3 0.17%; P2O5 6.02%; Al2O30.34%; Cl-

0.51%.

El estudio fotoqumico de las hojas de la especie Urtica Urens fue realizado

aplicando la marcha de Dragendorff Shavdavffen Allen, encontrndose en

mayor proporcin resinas y protenas.

Se realizo el estudio biolgico en ratas aparentemente sanas con resultados

satisfactorios ya que realmente la Urtica Urens posee propiedades

hipoglicemiantes.

Adems se efectu un estudio comparativo con otras plantas de similar accin

teraputica, considerndose posible que las protenas encontradas al igual que las

plantas con las que se comparo, sean las responsables de la accin

hipoglicemiante.

5. 1. 3. ANTECEDENTES NACIONALES

No disponibles ya que la especie vegetal bajo estudio es propia de la regin.

5. 1. 4. ANTECEDENTES INTERNACIONALES

No disponibles ya que la especie vegetal bajo estudio es propia de la regin.

4. 1. MARCO TERICO

5. 2. 1. DESCRIPCIN FARMACOBOTNICA DE LA PLANTA MEDICINAL

5.2.1.1 HISTORIA
 7

La ortiga es una especie cuyas hojas eran ya citadas en los tratados medievales
como remedio en los estados asociados a un dficit en la diuresis. Sin embargo, desde
hace veinte aos sus partes subterrneas (races y rizomas) son objeto de inters en el
tratamiento de la hiperplasia benigna de prstata (HBP), tal y como han puesto de
manifiesto los numerosos trabajos de investigacin realizados sobre ellas. Dichas
investigaciones han permitido acceder al conocimiento de sus ms importantes principios
activos y a su actuacin sobre algunos de los factores implicados en la aparicin de la
HBP. Por otra parte, los ms recientes ensayos clnicos realizados con extractos
normalizados de ortiga indican un efecto positivo sobre los sntomas urinarios asociados
a la HBP. A ello se aade la gran tolerancia hacia los preparados elaborados con las partes
subterrneas, ya que en ensayos a seis meses slo un 0,7 por ciento de los pacientes mostr
efectos secundarios, de escasa gravedad en todos los casos.

5.2.1.2 TAXONOMA

La taxonoma de la ortiga colorada es la siguiente:

Nombre cientfico: Cajophora rosulata

Especie: ortiga colorada

Gnero: ortiga

Familia: loasaceaes

Otros nombres comunes: Ortiga colorada, ckora-quisA, llungo-llungo, puca

shinua. puca hitana, unluy shinua.

5.2.1.3 DESCRIPCIN BOTNICA

Hierba perenne, postrada o creciendo a modo de enredadera, tallo de hasta

30-60 cm; raz tpica. Hojas pinnatipartidas, pecioladas, margen lacerado y filamentoso,
superficie ampollosa, cubierta de pelos rgidos urticantes. Flores axilares, hermafroditas,
de color anaranjado fuerte; cliz gamospalo, pentadentado; corola con 5 ptalos libres,
cncavos, nectarios de color blanco, petaloides. Androceo con estambres largos y
numerosos, anteras ditsicas y basifijas; gineceo con ovario nfero, pentacarpelar,
 8

unilocular y multiovular, de estilo apical y estigma simple. Fruto, una cpsula con
dehiscencia longitudinal

5.2.1.4 ECOLOGA

Florece en cualquier poca del ao, en laderas de cerros, bordes de caminos, protegida
por otros arbustos. En la actualidad no se practica su cultivo, y se desarrolla de manera
expontnea.

5.2.1.5 HABITAD

LA encontramos bajo las piedras o plantas siempre en lugares protegidos, entre los 3500
y 4000 m de altitud. Se encuentra en las zonas altas de Arequipa como en Chivay. Y
Chihuata.

5.2.1.6 PARTES UTILIZADAS

Hojas, flores y races. En general toda la planta.

5.2.1.7 PROPIEDADES CURATIVAS ATRIBUIDAS

Se le atribuyen propiedades antirreumticas a la aplicacin local de las flores

secas bien molidas mezcladas con un poco de grasa.

Como anticonceptiva: mediante lavados vaginales con el agua de la planta.

Como emenagoga y antiinflamatoria: se prepara la infusin de sus races

secas bien molidas junto con n poco de azcar y un aclara de huevo y se aplica sobre el
vientre matriz.

5.2.1.8 FITOQUMICA

Existen referencias que la raz es rica en taninos.

 9

Su fitoqumica es completa es desconocida, por el contrario para la Urtica dioica especie

relacionada a la ortiga colorada los datos fitoqumicos son abundantes. Estos no son
recogidos en esta investigacin porque pese a estar relacionadas ambas, son especies
diferentes.

5. 2. 2. PATOLOGA DEL TEMA: INFLAMACIN

5.2.2.1 CONCEPTO

La inflamacin es una reaccin compleja, que involucra numerosos sistemas

biolgicos. Este parte estar centrada en la descripcin de varios principios generales, que
permiten establecer una definicin de inflamacin aplicable a la mayora de los casos.
As, la inflamacin puede definirse como una reaccin del tejido conjuntivo vascular,
generada por todos los agentes etiolgicos conocidos, estereotipada desde el punto de
vista morfolgico, mediada principalmente por agentes qumicos, que cursa clnicamente
con manifestaciones locales y un mayor o menor nmero de manifestaciones sistmicas,
en cuya gnesis intervienen sistemas amplificadores y redundantes, sometida a su vez a
un importante control tanto local como general y modificada por factores individuales.

5.2.2.2 CAUSAS DE INFLAMACIN

CAUSAS FSICAS

Entre ellas contamos los traumatismos mecnicos, el calor, el fro, las

radiaciones, la electricidad, produciendo la inflamacin por un mecanismo de accin y
con una intensidad diferente para cada causa. En algunos casos modifican las propiedades
fsico-qumicas del tejido, pero la inflamacin slo se desencadena si la alteracin celular
y tisular es profunda.

Su mecanismo de accin se basa en la precipitacin o desnaturalizacin de

las protenas. Al parecer as actuaran diversos txicos de origen animal y vegetal cuyo
mecanismo de accin y actuacin en forma directa sobre el sistema vascular se explicara
por la presencia de aminas bigenas, como histamina y serotonina en su composicin.

CAUSAS QUMICAS
 10

Entre ellas contamos la inflamacin causada por cidos minerales, lcalis y

gases irritantes por lesiones celulares que originan y los productos liberados en ellas. El
mecanismo de accin se basa en una precipitacin o desnaturalizacin de las protenas.

Tambin actan diversos txicos de origen animal o vegetal. El mecanismo

de accin de los venenos de origen animal y vegetal se explica por las aminas bigenas,
histamina y serotonina que contienen y que actan directamente sobre el sistema vascular.

5.2.2.3 TOPOGRAFA

La respuesta inflamatoria es una reaccin del tejido conjuntivo vascular, no

de los epitelios o parnquimas. El repertorio de respuestas de los epitelios y de las clulas
de los diferentes parnquimas a la agresin es muy limitado, siendo las dos formas
principales la degeneracin y la hiperplasia (neoplsica o benigna). Como se indicar ms
adelante, la reaccin inflamatoria precisa de forma inexcusable la presencia de vasos y
leucocitos, por lo que los tejidos avasculares (p. ej., la crnea), para reaccionar con este
mecanismo patognico, deben ser neovascularizados previamente.

5.2.2.4 CARACTERSTICAS MORFOLGICAS

La inflamacin es una reaccin estereotipada desde el punto de vista

morfolgico. Aunque algunas reacciones inflamatorias crnicas pueden cursar
inicialmente con una infiltracin por clulas mononucleares, por lo comn la respuesta
inflamatoria se desarrolla en tres fases consecutivas.

RESPUESTA VASCULAR

En los momentos inmediatos a la accin de un agente lesional, e

independientemente de su naturaleza, se produce una respuesta vasoconstrictora de breve
duracin. A continuacin sobreviene una dilatacin arteriolar, con apertura de los
esfnteres precapilares, lo que origina dos fenmenos simultneos: un incremento de flujo
en los capilares previamente funcionales y la apertura de lechos capilares que se
encontraban cerrados antes del inicio del proceso inflamatorio.
 11

El efecto comn de ambos fenmenos es el desarrollo progresivo de

hiperemia, a la que se asocia un aumento de la permeabilidad de los capilares y de las
vnulas. Como consecuencia del escape de lquido rico en protenas aumenta la
viscosidad de la sangre, lo que ocasiona un retraso de su flujo.

La suma de los fenmenos mencionados incremento del aporte sanguneo

y disminucin de la evacuacinproduce un aumento de la presin hidrosttica, lo que
tambin contribuye a la exudacin de lquido al espacio extravascular.

Por lo tanto se desarrollan tres fenmenos:

1. Hiperemia.

2. Exudacin proteica (como consecuencia de la alteracin de la permeabilidad y el

aumento de la presin hidrosttica).

3. Alteracin de la relacin espacial de las clulas sanguneas ya que, al enlentecerse el

flujo sanguneo, los eritrocitos adoptan una posicin central en el vaso, mientras que los
leucocitos se disponen en la periferia.

RESPUESTA LEUCOCITARIA INICIAL

Los leucocitos (principalmente los PMN neutrfilos y los monocitos),

confinados a la periferia del vaso por los fenmenos vasculares, se adhieren rpidamente
a las superficies endoteliales. En una segunda fase (migracin), estas clulas atraviesan
las uniones intercelulares endoteliales, sobrepasando la membrana basal por un proceso
activo. Una vez en el tejido, los leucocitos PMN y los macrfagos se dirigen hacia el lugar
donde se ha producido la lesin, a favor de un gradiente de concentracin de sustancias
con capacidad para inducir la migracin (atractantes). Este proceso se denomina
quimiotaxis y su base es la interaccin de atractantes especficos con receptores celulares.
Una vez en el foco inflamatorio, estas clulas se adhieren a los agentes patgenos y
reconocen tanto a algunos elementos de stos (p. ej., monosacridos manosafucosa de la
pared bacteriana) como a determinadas protenas del individuo lesionado (receptor Fc de
las inmunoglobulinas, fracciones del sistema de complemento) que actan como
detectores de la inflamacin, haciendo ms apto al agente causal para ser reconocido.
Este ltimo proceso se denomina opsonizacin y, en general, requiere un contacto previo
 12

del agente inflamatorio con el individuo, ya que precisa una reaccin inmunolgica frente
al agente que genere molculas detectoras. Adems de estos mecanismos especficos o
del receptor, los leucocitos pueden ingerir los agentes causales de forma inespecfica. Esta
fase, es decir la ingestin de los agentes causales en el foco inflamatorio, se denomina
fagocitosis. Una vez fagocitado el agente lesivo por los leucocitos, se producen el vertido
de enzimas lisosmicas sistema independiente del oxgeno y la activacin del
complejo enzimtico generador de radicales de oxgeno sistema dependiente del
oxgeno en el seno de la vacuola de fagocitosis, lo que produce, en la mayora de los
casos, la destruccin del agente causal de la inflamacin.

RESPUESTA LEUCOCITARIA TARDA

Los leucocitos PMN neutrfilos sucumben en el foco inflamatorio, liberando

sus componentes al medio extracelular. Muchos de estos productos poseen capacidad para
lesionar el propio organismo, circunstancia que amplifica la respuesta inflamatoria. En
trminos mercantiles sera el precio que se ha de pagar para destruir al agente causal. Los
macrfagos, sin embargo, no son destruidos y amplifican el proceso inflamatorio gracias
a su participacin en la respuesta inmunolgica. As, tras la fragmentacin del agente
causal (antgeno), generan eptopos que, una vez situados fuera de la membrana, se
ponen en contacto con los antgenos de histocompatibilidad de clase II. En trminos
inmunolgicos, a estos procesos se los denomina procesamiento y presentacin
antignica. El reconocimiento por los receptores para el antgeno de las clulas T de estos
eptopos, unido a la produccin de citocinas por los macrfagos, pone en marcha la
respuesta inmunolgica, una de cuyas finalidades es la produccin de inmunoglobulinas
especficas y clulas activadas que, por s mismas o por favorecer la accin de los
macrfagos (opsonizacin), ocasionan la destruccin total del agente causal. Estos
fenmenos producen, en el supuesto ms favorable, la eliminacin del agente productor
de la inflamacin

5.2.2.5 BASES MOLECULARES

Los aspectos morfolgicos de la inflamacin as como las consecuencias

clnicas dependen estrictamente de la interaccin entre diferentes agentes qumicos
 13

(liberados por las clulas del foco inflamatorio o presentes en el plasma y activados
posteriormente) y de la expresin de diversas molculas de membrana. Slo las fases
iniciales de la inflamacin (vasoconstriccin) parecen estar mediadas por mecanismos
neurognicos. Antes de revisar los procesos fundamentales de la inflamacin atendiendo
a estos criterios, es preciso sealar de forma detallada las caractersticas de los diferentes
mediadores y de las molculas de membrana.

MEDIADORES QUMICOS

Una caracterstica de inters, comn a todos los mediadores qumicos de la

inflamacin, es su presencia en el individuo sano como formas precursoras, bien en el
plasma como proenzimas, bien empaquetadas en el interior de las clulas (lisosomas o
formas citoplasmticas). Los principales mediadores de la inflamacin pueden
clasificarse en varios grupos cuyas caractersticas se sealan a continuacin.

Aminas vasoactivas

Las principales aminas vasoactivas liberadas durante la inflamacin son la histamina y la

serotonina procedentes de los mastocitos (clulas cebadas) y de las plaquetas. Dichas
sustancias son liberadas por diversos estmulos [traumatismos, calor, anafilotoxinas (C5a,
C3a), enzimas lisosmicas, reacciones de hipersensibilidad]. Estas aminas vasoactivas
podran ser las responsables de las reacciones

vasodilatadoras iniciales de la inflamacin por actuacin sobre los receptores celulares

especficos.

Histamina. La histamina deriva de la descarboxilacin del aminocido histidina por

medio de una enzima dependiente del piridoxal (histidina descarboxilasa). La sntesis de
esta amina vasoactiva se produce fundamentalmente en dos tipos de clulas, los basfilos
y las clulas cebadas, aunque otros tipos celulares (clulas adherentes del peritoneo y
linfocitos T) tambin pueden sintetizarla. En los basfilos y en las clulas cebadas, la
histamina sintetizada se almacena en los grnulos citoplasmticos unida a proteoglicanos
(heparina en las clulas cebadas, condroitinsulfato en los basfilos). Por accin de los
diferentes estmulos sealados se produce su liberacin al medio extracelular. Teniendo
en cuenta que las clulas cebadas se localizan en reas perivasculares, perineurales y
 14

perilinfticas, es evidente que las mximas concentraciones locales de histamina se

encontrarn en estas regiones.

La histamina ejerce su accin a travs de la interaccin con tres tipos de

receptores celulares especficos: H1, H2 y H3. Los dos primeros receptores han sido bien
caracterizados en numerosos tejidos (clulas inflamatorias e inmunitarias, mucosa
gstrica, msculo liso, endotelio, etc.). La interaccin de la histamina con los receptores
H1 determina la movilizacin del calcio citoslico a travs de la va de los fosfoinositoles,
mientras que los efectos producidos a travs del receptor H2 estn mediados
principalmente por un aumento de cAMP. Las acciones de la histamina sobre las
diferentes clulas y tejidos son complejas, ya que en muchos sistemas que poseen tanto
receptores H1 como H2, sus efectos son opuestos (en general los efectos a travs de los
receptores H1 son estimulantes, mientras que los mediados por los receptores H2 son
inhibidores).

En la respuesta inflamatoria, la histamina posee acciones relevantes en todas

las fases descritas previamente. As, en la fase inicial de la inflamacin ejerce una accin
vasodilatadora directa, mediada por ambos tipos de receptores, que incrementa la
permeabilidad endotelial debido a la contraccin de las clulas endoteliales (a travs de
los receptores H1), estimula la liberacin de acetilcolina por las terminaciones nerviosas,
incrementa la respuesta a agentes -adrenrgicos y estimula la liberacin de sustancia P.

En la fase leucocitaria precoz la histamina acta de forma autocrina sobre las clulas
cebadas y los basfilos ejerciendo diferentes efectos segn su concentracin: a bajas
concentraciones inhibe el reclutamiento de basfilos y disminuye la liberacin de la
histamina endgena, mientras que a concentraciones elevadas ejerce un efecto
estimulante de la liberacin de histamina. En lo que respecta a la accin sobre los
eosinfilos los efectos son contrapuestos: a bajas concentraciones ejerce una accin
estimulante, mientras que a dosis elevadas inhibe la quimiotaxis de estas clulas.

Los efectos de la histamina sobre los neutrfilos se ejercen principalmente a travs de los
receptores H2 y son de tipo inhibidor. Finalmente, sus acciones sobre las clulas del
sistema mononuclear fagoctico dependen crticamente del tipo de receptor sobre el que
acten. As, la accin a travs del receptor H1 produce efectos proinflamatorios, mientras
que a travs del receptor H2 sus efectos son inhibidores. Los efectos de la histamina sobre
 15

la respuesta inmunolgica son complejos y dependen de mltiples factores. De forma

general, puede afirmarse que este autacoide ejerce acciones inhibidoras

Serotonina. La serotonina (5-hidroxitriptamina) es un autacoide sintetizado en el

organismo a partir del aminocido triptfano. La mayor parte se sintetiza en las clulas
enterocromafines del tubo digestivo y en las neuronas, desde donde es liberada al plasma.
Una parte de la serotonina plasmtica es captada por las clulas endoteliales hepticas y
desaminada y el resto se acumula en las plaquetas, en las que se almacena en los grnulos
densos. La serotonina ejerce sus acciones por interaccin con receptores especficos de
los cuales se han sealado cuatro tipos principales (5-HT1, 5-HT2, 5-HT3 y 5-HT4) y
diversos subtipos. Los sistemas de segundos mensajeros inducidos por la interaccin entre
la serotonina y sus receptores, as como la diferente localizacin de stos, explican la
participacin de este autacoide en mltiples procesos fisiolgicos (ritmos sueo-vigilia,
regulacin hormonal, termorregulacin, presin arterial). En este apartado slo se
sealarn las acciones de la serotonina que tienen una relacin directa con la inflamacin.

El principal mecanismo que desencadena la liberacin de serotonina en el foco

inflamatorio es la agregacin plaquetaria. La propia serotonina es una sustancia que
incrementa este proceso. En el foco inflamatorio, la serotonina liberada puede ejercer sus
efectos a travs de la interaccin con dos tipos de receptores locales: 5-HT1, localizados
en las clulas endoteliales, y 5-HT2 situados en el msculo liso. La interaccin con los
receptores 5-HT1 endoteliales origina la produccin de xido ntrico, de prostaciclina y de
otras sustancias vasodilatadoras. Por el contrario, la interaccin con las clulas
musculares lisas de los vasos produce vasoconstriccin. El efecto neto de la serotonina
depender, por lo tanto, del estado del endotelio. As, si existe integridad endotelial,
predominar el efecto vasodilatador, mientras que en presencia de un endotelio alterado
la accin predominante ser vasoconstrictora.

Proteasas plasmticas

Varios sistemas de proteasas plasmticas intervienen en la inflamacin: sistema de las

cininas, sistemas plasmticos de la coagulacin y de la fibrinlisis y sistema del
complemento. Los aspectos generales de estos sistemas se estudian en profundidad en
otros apartados del texto. En ste, la descripcin se centrar en su papel en la respuesta
inflamatoria.
 16

El sistema de las cininas posee dos tipos de componentes: un sistema plasmtico,

constituido por el ciningeno de alto peso molecular y la precalicrena, dos precursores
que circulan unidos y un sistema tisular, formado por ciningeno de bajo peso molecular
y procalicrena. El sistema plasmtico se pone en marcha por la accin del factor XII de
la coagulacin activado (XIIa) sobre la precalicrena, a la que transforma en calicrena.
Esta enzima acta sobre el ciningeno de alto peso molecular convirtindolo en
bradicinina, una de las sustancias activas del sistema. El sistema tisular se activa por la
accin de diversas sustancias (calicrena plasmtica, enzimas tisulares, plasmina) sobre
la procalicrena generando calicrena tisular. sta acta sobre el ciningeno de bajo peso
molecular y origina la sntesis de lisilbradicinina (tambin llamada kalidina).

La bradicinina (un nonapptido) y la kalidina (lisilbradicinina) son transformadas por la

cininasa I generando metabolitos sin arginina (des-Arg9-bradicinina y des-Arg10-
kalidina), que poseen actividad biolgica. Las cininas actan sobre receptores especficos,
de los cuales los mejor caracterizados son los denominados B1 y B2, aunque existen
pruebas indirectas de la existencia, al menos en el pulmn, de un tercer tipo de receptores.
La mayora de los efectos de las cininas se producen por la interaccin con los receptores
tipo B2. Estos efectos son similares a los producidos por las aminas vasoactivas e incluyen
vasodilatacin, aumento de la permeabilidad capilar, irritacin neural responsable del
dolor y contraccin del msculo liso extravascular. La lesin tisular promueve la
activacin del sistema plasmtico de la coagulacin debido a la unin del factor XII con
el colgeno subendotelial y con las membranas basales. El factor XIIa incrementa los
fenmenos inflamatorios a expensas de una activacin del sistema cininrgico y a la
transformacin del plasmingeno en plasmina, sustancia que activa por va enzimtica el
sistema del complemento.

El sistema del complemento consta de un conjunto de protenas plasmticas, presentes en

el plasma de forma inactiva, que son activadas por estmulos especficos
(inmunocomplejos) o por estmulos inespecficos (endotoxinas, productos bacterianos,
etc.). De cualquier forma, este proceso implica la activacin del factor C3 con rotura de
la molcula en dos fragmentos: C3b (fragmento grande), que permanece unido al agente
que gener su activacin, y C3a (fragmento pequeo) que se libera al plasma. Un gran
nmero de clulas (sobre todo clulas fagocticas) poseen receptores para C3b o
productos de degradacin de esta molcula (C3bi o C3d), por lo que este factor acta
 17

como opsonina, es decir, favorece la fagocitosis de los agentes inflamatorios. Por otro
lado, el C3b contina la activacin del sistema del complemento (va comn) lo que
produce la liberacin de fragmentos colaterales de otros factores (en particular C5a) y, en
ltimo extremo, la formacin de un producto final C5-C9 (complejo de ataque) capaz de
lisar la bacteria o clula extraa que inici la respuesta inflamatoria. Los fragmentos
pequeos (C3a y C5a) ejercen dos acciones de gran inters. Por un lado poseen capacidad
anafilotxica (es decir, la capacidad para la desgranulacin de los mastocitos) con lo que
se liberan aminas vasoactivas y, por otro, aumentan la adhesividad de los neutrfilos y
las clulas del sistema mononuclear fagoctico (monocitos y macrfagos) al endotelio,
actuando adems como quimioatractantes para esas clulas.

Lpidos bioactivos

La unin de los receptores (quimiotcticos o involucrados en la fagocitosis) a sus ligandos

y las proteasas liberadas en el foco inflamatorio son, entre otros, estmulos capaces de
provocar que el cido araquidnico, anclado en la membrana plasmtica de todas las
clulas, se libere al citoplasma. La actuacin de dos sistemas enzimticos (va de la
cicloxigenasa y va de la lipooxigenasa) sobre el cido araquidnico origina la liberacin
de una serie de metabolitos denominados, de forma conjunta, eicosanoides. Los
eicosanoides ms importantes en la respuesta inflamatoria son:

1. Prostaglandinas clsicas (PGE2 PGD2), capaces de provocar vasodilatacin sostenida

y dolor por irritacin neural.

2. Prostaciclina (PGI2), que acta como un potente vasodilatador e indirectamente

incrementa la permeabilidad vascular.

3. Leucotrienos, entre ellos, el leucotrieno B4 es un potente quimioatractante, mientras

que los leucotrienos C4 y D4 denominados de forma conjunta sustancias de reaccin
lenta de la anafilaxia (SRS-A) incrementan intensamente la permeabilidad vascular
y provocan la constriccin del msculo liso extravascular (p. ej., msculo bronquial).

El otro biolpido importante en la respuesta inflamatoria es el factor activador de las

plaquetas (PAF). Realmente, ms que una molcula aislada, el PAF es un conjunto de, al
menos, 16 especies moleculares, que comparten un mismo esquema estructural (1-alquil-
2-acetil-glicero-2-fosfocolina). Esta molcula se genera tras la activacin celular por dos
vas diferentes: la biosntesis de novo a partir de acetil- CoA y dihidroxiacetona-fosfato y
 18

la va de remodelacin, a travs de un precursor anclado en la membrana plasmtica,

comn a la sntesis de eicosanoides. En la respuesta inflamatoria, el PAF puede ser
sintetizado y liberado por todos los tipos de leucocitos PMN y por las clulas del sistema
mononuclear fagoctico. En general, se considera que los linfocitos no poseen capacidad
de producir este biolpido. Aunque debido a su naturaleza lipdica el PAF interacciona
inespecficamente con las membranas plasmticas de las clulas diana, los principales
efectos de esta sustancia estn mediados por la unin a receptores especficos.

El PAF interviene de forma decisiva en mltiples procesos biolgicos esenciales, como

la reproduccin, la trombosis, la inflamacin o la respuesta inmunolgica. Por lo que
respecta a sus acciones en la inflamacin y en la respuesta inmunolgica, este biolpido
ejerce diversos efectos directos sobre las clulas inflamatorias y, por otro lado, al
estimular la liberacin de hormonas (prolactina y hormona del crecimiento) o
neuropptidos (sustancia P) regula de forma indirecta las respuestas inflamatoria e
inmunolgica. Entre los efectos generales que ejerce el PAF sobre las clulas
inflamatorias deben sealarse el incremento de la quimiotaxis, el aumento en la
generacin de los radicales libres, la modulacin de la sntesis de eicosanoides y la
liberacin del contenido de los grnulos as como la secrecin de citocinas
proinflamatorias. Por otra parte, induce la retraccin de las clulas endoteliales
incrementando la permeabilidad vascular. En cuanto a las acciones sobre las clulas T,
este biolpido incrementa la proliferacin de linfocitos T colaboradores (helper) y
disminuye la actividad citotxica. En lo que atae a las acciones sobre los linfocitos B,
ejerce un estmulo proliferativo a bajas concentraciones, pero es inhibidor a elevadas
concentraciones.

Enzimas lisosmicas

La fagocitosis macrofgica y la destruccin de los neutrfilos PMN en el foco

inflamatorio generan la liberacin de gran nmero de enzimas lisosmicas. Estas
sustancias poseen una importante capacidad destructiva del tejido conjuntivo (elastasa,
colagenasa, catepsina) as como la propiedad de activar otros sistemas (paso de
precalicrena a calicrena, activacin enzimtica del complemento).

Citocinas

Aspectos generales de las citocinas

 19

Desde hace dcadas, es bien conocido que las clulas de la respuesta inmunolgica son
capaces de producir y segregar sustancias activas con capacidad efectora, reguladora o de
crecimiento sobre otros tipos celulares. Atendiendo a su origen, inicialmente se las
denominaba monocinas (producidas por los monocitos) y linfocinas (producidas por los
linfocitos), definiendo a las que actan sobre las clulas hemopoyticas como factores
estimulantes de colonias (CSF). En los primeros estudios, realizados sobre cultivos
celulares, se encontraron actividades demostrables por ensayos biolgicos
(bioanlisis). As, se definieron los pirgenos (sustancias capaces de producir fiebre), los
interferones (productos inhibidores de la replicacin vrica) o los factores activadores. En
una segunda fase, con el empleo de antisueros frente a protenas parcialmente purificadas,
se observ que varias actividades eran desempeadas por una misma protena y, por otro
lado, que varias protenas inmunolgicamente diferentes desempeaban la misma
actividad.

La introduccin de las tcnicas de biologa molecular en el estudio de estas molculas

permiti su separacin, su identificacin y su obtencin en condiciones de pureza, con lo
que surgi una nueva denominacin genrica: interleucinas (ya que la mayor parte eran
sintetizadas por leucocitos y actuaban sobre otros leucocitos).

Estudios ulteriores demostraron que la sntesis de estas molculas puede ser realizada por
clulas no relacionadas clsicamente con la inmunidad (endotelio, clulas del tejido
conjuntivo, etc.) y que sus efectos biolgicos se ejercen, adems de sobre los leucocitos,
sobre otros tipos celulares (hepatocitos, clulas del sistema endocrino, etc.). Por ello, el
trmino ms adecuado (y, por otro lado, altamente inespecfico) para este grupo de
molculas es el de citocinas, incluyendo en este grupo las clsicas interleucinas, los
interferones, los factores de necrosis tumoral y los factores estimulantes de colonias.
Tiene inters sealar en este momento que la OMS y la International Union of
Inmunological Societies (IUIS) han acuado una serie de criterios para otorgar la
denominacin interleucina a los productos de secrecin del sistema inmunitario. Estos
criterios son los siguientes:

1. La molcula debe ser purificada, clonada y expresada. La secuencia de nucletidos

del gen y la de aminocidos de la protena deben ser diferentes de cualquier otra
molcula descrita.
 20

2. Debe demostrarse claramente que la molcula es un producto natural de las clulas

del sistema inmunitario.

3. Si la molcula es un miembro de una familia de productos ya caracterizados que

ejercen sus funciones en otros sistemas diferentes del inmunitario, es preferible
emplear una denominacin compatible con otros miembros de la familia.

4. La IUIS sugiere el empleo de trminos descriptivos de la funcin evitando en lo

posible una nueva inclusin del trmino interleucina.

Las principales citocinas se clasifican, de forma arbitraria, en cuatro grupos. En este

captulo se describirn las caractersticas comunes a todas las citocinas y las de las
citocinas inflamatorias. (Para las restantes citocinas, v. partes XIX y XXII.)

Caractersticas comunes de las citocinas

Aunque las citocinas poseen actividades funcionales muy diferentes, es posible extraer
una serie de caractersticas comunes:

1. Desde el punto de vista qumico son protenas o glucoprotenas de tamao pequeo

(grupo de la IL-8) o medio. La actividad biolgica reside en el componente proteico,
aunque sus propiedades farmacocinticas dependen del grado y del tipo de
glucosilacin (p. ej., eritropoyetina). En general no poseen homologa estructural entre
sus secuencias de aminocidos (con la excepcin de la IL-6 y el factor estimulante de
colonias granulocticas [G-CSF]), aunque la gran mayora presenta una estructura en
a-hlice. Estructuralmente la mayor parte de las citocinas son polipptidos
monomricos, si bien algunas aparecen como dmeros (p. ej., el factor de crecimiento
transformante beta [TGF-b] es un homodmero o la IL-12 un heterodmero) o trmeros
(TNF-).

2. Desde el punto de vista gentico, los genes que codifican las citocinas poseen dos
patrones estructurales caractersticos: 4 exones y 3 exones (IL-2, IL-4, IL-5, IL-8,
factor estimulante de colonias granulocticas-monocticas [GM-CSF] e interfern
gamma [IFN-]) o 5 exones y 4 intrones (IL-3, IL-6, IL-9 y G-CSF). La localizacin
de los genes codificadores es diversa aunque existen tres zonas de especial inters: el
brazo largo del cromosoma 5, en el que se localizan los genes de GM-CSF, IL-3, IL-
4, IL-5, IL-9 y una de las dos cadenas de la IL-12, lo que sugiere un papel importante
en la regulacin de la hemopoyesis; el cromosoma
 21

2, en el que estn situados los genes de la IL-1a y la IL-1b, y el cromosoma 6, en el

que se localizan los genes de TNF- y TNF-b. La presencia en el mismo cromosoma
de los genes de las IL-1 y de los TNF sugiere que derivan de duplicaciones gnicas.

3. Son producidas por mltiples estirpes celulares. En general existe un amplio

espectro de selectividad en su produccin, desde citocinas muy especficas (p. ej., la
IL-3 es sintetizada por los linfocitos T colaboradores y los mastocitos) hasta citocinas
inespecficas (p. ej., la IL-1b que puede ser producida prcticamente por todas las
clulas nucleadas).

4. En general poseen una importante pleiotropa, en el sentido de que actan sobre

mltiples rganos y sistemas. Algunas citocinas escapan a esta regla y poseen una
accin limitada (p. ej., el factor estimulante de colonias macrofgicas [M-CSF] o la
eritropoyetina).

5. Disponen de una gran capacidad redundante, ya que varias interleucinas actan

sobre un mismo tejido provocando efectos similares.

6. Tienen una gran capacidad interactiva, de forma que unas citocinas actan sobre la
sntesis de otras. Un ejemplo clsico es la cascada cronolgica de citocinas inducida
tras la inoculacin de endotoxina (lipopolisacrido). Adems, el hecho de que una
misma estirpe celular posea la capacidad de producir diversas citocinas y exprese
receptores para ellas, complica extraordinariamente la interpretacin de los resultados
de los estudios in vitro.

7. Ejercen efectos autocrinos (p. ej., la IL-6 producida por los linfocitos B en fases
finales de diferenciacin ejerce una accin autocrina estimulante), paracrinos (p. ej.,
los efectos fundamentales del IFN-, producido por los linfocitos T colaboradores se
ejercen sobre las clulas inmunolgicas locales) o endocrinos (p. ej., las acciones
sistmicas del TNF o de la IL-1).

8. Su secrecin es un fenmeno breve y autolimitado pero sus efectos son tardos

(horas) ya que requieren la activacin de genes, la transcripcin de mRNA y la sntesis
de protenas.

9. Sus acciones se ejercen sobre tres grandes reas:

 22

a) Estmulo del crecimiento y de la diferenciacin de las clulas sanguneas: IL-3,

IL-7, IL-9, IL-11, GM-CSF, GCSF, M-CSF, eritropoyetina.

b) Mediacin de la respuesta inflamatoria: IL-1, IL-6, TNF-, IL-8 y otras

intercrinas e IL-12.

c) Modulacin y regulacin de la activacin y los efectos linfocitarios. En este

grupo se incluyen las citocinas derivadas de los linfocitos T colaboradores tipo 1:
IL-2, IFN- y linfotoxina, y las derivadas en especial de los linfocitos T
colaboradores tipo 2: IL-4, IL-5 e IL-10. Tambin se incluye la IL-13 que, al menos
en el hombre, es producida por los dos tipos de linfocitos colaboradores.

Citocinas inflamatorias

Las principales citocinas inflamatorias poseen varias caractersticas comunes de inters:

1. Pueden ser sintetizadas y liberadas por mltiples estirpes celulares (inmunolgicas

y no inmunolgicas), aunque su principal fuente de produccin la constituyen las
clulas del sistema mononuclear fagoctico.

2. Se sintetizan y liberan en respuesta a antgenos y a otras citocinas.

3. Actan como intermediarios en mltiples aspectos sistmicos de la inflamacin.

4. Ejercen acciones complementarias en la maduracin y la activacin linfocitarias.

5. Su sntesis es inhibida por algunas citocinas linfocitarias (particularmente por IL-

4).

Interleucina 1. Existen dos tipos de IL-1, la y la , cada una de ellas codificada por un
gen diferente. La sntesis de ambas protenas se produce en el citoplasma en forma de
precursores (31 kD) que posteriormente son fragmentados para originar el pptido activo.
Por lo general, la IL-1 queda adherida a la membrana celular, mientras que la IL-1 es
liberada al medio extracelular. Los principales estmulos para su sntesis son de tres tipos:
antgenos (biolgicos o inorgnicos), citocinas (IL-2, TNF- e IFN-) y el contacto con
linfocitos T. Por el contrario, disminuyen su sntesis, entre otros factores, la
administracin de corticoides, la IL-4 y la PGE2.

La IL-1 y la IL- ejercen sus acciones por unin a dos tipos de receptores especficos
(tipo I y tipo II). El receptor tipo I se encuentra principalmente en los linfocitos T, las
clulas endoteliales, los hepatocitos y los fibroblastos. Este tipo de receptor posee mayor
 23

afinidad por la IL-1 que por la IL-1 y sera el responsable de la mayora de los efectos
biolgicos de esta citocina. Por el contrario, el receptor tipo II se encuentra
fundamentalmente en los linfocitos B, los neutrfilos y los monocitos y posee mayor
afinidad por la IL-1. El significado biolgico exacto de este segundo tipo de receptor no
est demasiado claro. Adems de estos receptores para IL-1 localizados en la superficie
celular, se ha demostrado la presencia in vivo de receptores solubles generados por la
rotura proteoltica de la porcin extracelular del receptor tipo II. Dichos receptores
solubles se unen a la IL-1, previniendo, por lo tanto, la unin de esta citocina con las
clulas.

Adems de los elementos sealados previamente, el sistema de la IL-1 posee otro

componente denominado antagonista del receptor de IL-1 (IL-1-RA). Esta molcula
presenta una considerable homologa estructural con IL-1 e IL-1 y es producida por
los mismos tipos celulares que aqullas. El IL-1-RA es capaz de unirse a los dos tipos de
receptores de IL-1 pero incapaz de desencadenar efectos biolgicos. La presencia en el
plasma de receptores solubles y de IL-1-RA en individuos con diferentes enfermedades
sugiere que estos sistemas forman parte de la respuesta biolgica de la enfermedad y, por
lo tanto, de la defensa del organismo frente a esta citocina. La sntesis de IL-1 y de IL-1-
RA es regulada de forma diferente incluso por la misma clula. As, por ejemplo, en
clulas estimuladas con lipopolisacrido, la produccin de IL-1b precede a la sntesis del
inhibidor. Por el contrario, el estmulo monocitario a travs de receptores Fc estimula la
produccin de IL-1-RA pero no de IL-1.

El mecanismo de accin de la IL-1 tras su unin con los receptores de las clulas diana
no est completamente aclarado, y slo se dispone de datos parciales. Entre los efectos
descritos pueden sealarse las modificaciones de los niveles de cAMP, la estimulacin de
la fosfolipasa A2 y la expresin de los genes precoces (c-fos, c-myc y c-jun). Las acciones
biolgicas de la IL-1 son mltiples. A continuacin se describen, de forma esquemtica,
las ms importantes.

Acciones sobre la inflamacin. La IL-1 induce la produccin de otras citocinas por las
clulas endoteliales y los macrfagos (sobre todo IL-6). Adems, incrementa la capacidad
procoagulante del endotelio y la expresin de molculas de adhesin leucocitaria. Por
otro lado es capaz de activar los neutrfilos indirectamente, al inducir la sntesis de IL-8
 24

por los macrfagos y el endotelio. Finalmente, estimula la fibrognesis y, por lo tanto, la

reparacin de las lesiones.

Acciones sobre las clulas hemopoyticas y linfoides. La IL-1 posee una accin
coestimulante en el desarrollo de los progenitores linfoides y mieloides (hemopoyetina
1). Por otro lado, es un coestimulante de la activacin de los linfocitos T, induce la sntesis
de IL-2 y es un factor inicial en la proliferacin de los linfocitos B.

Acciones sistmicas. Adems de las acciones locales sealadas, la IL-1 acta a distancia
provocando un gran nmero de efectos. Los ms destacables son: produccin de fiebre,
induccin de la sntesis de reactantes de fase aguda, hipotensin, caquexia y alteracin
del ritmo sueo-vigilia.

Factor de necrosis tumoral alfa. El TNF- (denominado en ocasiones caquectina) es

codificado por un gen situado en el cromosoma 6, en la regin que codifica para los
antgenos de histocompatibilidad. La transcripcin de este gen est regulada por varios
factores, entre los cuales cabe destacar el efecto inductor de una protena codificada por
el cromosoma 4 en respuesta al lipopolisacrido o el efecto positivo del IFN-. Debe
sealarse, en este contexto, que aunque son mltiples los factores capaces de estimular la
sntesis y liberacin de TNF-, el estmulo ms potente es el lipopolisacrido.

Las acciones del TNF- se ejercen a travs de la interaccin con dos tipos de receptores
especficos (p60 y p80). Al menos en el caso del receptor p60 se cree que estos efectos
estn mediados por la activacin de una fosfolipasa C. Los efectos del TNF- descritos
en la literatura son confusos puesto que no se considera la concentracin estudiada, dato
fundamental para entender los aspectos clave de la biologa de esta molcula. Por ello, a
continuacin se indicarn las acciones del TNF- atendiendo a sus concentraciones.

1. A bajas concentraciones (de unos 109 M) el TNF- acta localmente como

inmunorregulador y en la inflamacin ejerciendo los siguientes efectos:

a) Inhibe los efectos de varios factores de crecimiento sobre los progenitores

mieloides.

b) Estimula la activacin linfocitaria T y la proliferacin de los linfocitos B. Debe

sealarse, no obstante, que en estas acciones tanto la IL-1 como la IL-6 son citocinas
ms potentes.
 25

c) Focaliza la respuesta inflamatoria ya que induce la expresin de las adhesinas de

los leucocitos y de los receptores para estas molculas en el endotelio.

d) Activa los sistemas de defensa intracelulares (generacin de radicales libres de

oxgeno) y la expresin de los antgenos de histocompatibilidad de clase I.

2. A concentraciones elevadas (de unos 108 M) el TNF- accede a la circulacin sistmica

ejerciendo acciones endocrinas:

a) Produce fiebre.

b) Genera una oleada secuencial de citocinas.

c) Suprime la produccin de clulas hemopoyticas y lleva a un estado de

inmunodeficiencia. Curiosamente, la accin del TNF- sobre el endotelio es
opuesta a la anterior ya que genera un incremento de factores de crecimiento.

d) Su accin sobre los hepatocitos produce un aumento de reactantes de fase aguda

similar al inducido por la IL- 1 pero diferente al de la IL-6.

e) Activa la coagulacin al disminuir la actividad de la trombomodulina endotelial

f) Provoca caquexia por tres mecanismos complementarios: disminucin del

apetito, reduccin de la masa magra y disminucin de la masa grasa. La
disminucin de la masa magra se produce por un aumento en el consumo de
glucosa, con la consiguiente reduccin del contenido en glucgeno as como del
nmero de miofibrillas. La principal razn de la disminucin de la masa grasa se
debe a una inhibicin de la lipoproteinlipasa, que genera un aumento de los
triacilglicridos circulantes.

3. A concentraciones muy elevadas (107 M) el TNF- ejerce efectos letales:

a) Deprime la contractilidad miocrdica.

b) Provoca una intensa vasodilatacin tanto directamente como a travs de la

induccin de factores endoteliales vasodilatadores (prostaciclina y xido ntrico).

c) Ocasiona coagulacin intravascular diseminada.

d) Altera la permeabilidad vascular.

 26

Interleucina 6. Mltiples clulas, inmunolgicas y no inmunolgicas, poseen capacidad

para sintetizar y liberar IL-6. En lo que respecta a la produccin de esta citocina, existen
algunas caractersticas que la diferencian del resto de las citocinas macrofgicas:

1. En el individuo sano, la mayora de la IL-6 es producida por las clulas del sistema
mononuclear fagoctico.

2. En tejidos enfermos (p. ej., la membrana sinovial) los linfocitos B y T constituyen una
importante fuente de esta protena.

3. Las clulas foliculoestrelladas de la hipfisis producen IL-6, lo que ha llevado a

especular sobre el papel de esta citocina en la regulacin hormonal.

El gen que codifica para la IL-6 se encuentra en el cromosoma 7 humano. Los principales
estmulos para la sntesis de esta citocina difieren en funcin de la clula productora. As,
por ejemplo, en los fibroblastos el principal estmulo para su sntesis es la IL-1, mientras
que en las clulas de la mdula sea la accin principal la ejercen los factores de
crecimiento (IL-3, GM-CSF). De cualquier forma, globalmente los estmulos para la
produccin de la IL-6 son similares a los de las dems citocinas macrofgicas:
lipopolisacrido y otras interleucinas. La IL-6 acta por unin con receptores especficos,
que poseen en su peculiar estructura caractersticas que les permiten actuar tanto de
receptor tipo hemopoyetina como de receptor de la familia de las inmunoglobulinas (v.
ms adelante). Prcticamente todas las clulas inmunolgicas (en diferentes momentos
de su diferenciacin) y otras clulas no inmunolgicas (hepatocitos, queratinocitos)
poseen receptores para la IL-6. Debe sealarse, como curiosidad, que los corticoides
estimulan la expresin del receptor para la IL-6.

Las acciones biolgicas de la IL-6 se ejercen sobre distintos sistemas.

Acciones sobre las clulas inmunolgicas y las clulas inflamatorias:

1. La IL-6, de forma similar a la IL-1, es un factor importante en la maduracin inicial

de la serie mieloide.

2. Probablemente la IL-6 producida por las clulas del estroma tmico interviene de
forma esencial en la diferenciacin de los timocitos.

3. En la activacin linfocitaria B, la IL-6 es el principal factor involucrado en las fases

finales de la diferenciacin B. A travs de este mecanismo, se ha relacionado a la IL-
 27

6 con la patogenia de diversos trastornos que cursan con hipergammaglobulinemia

(mieloma mltiple, mixoma cardaco, enfermedad de Castleman).

4. Interviene en las fases iniciales de la activacin linfocitaria T de forma conjunta con

la IL-1. Algunos autores, extrapolando hallazgos experimentales, han diseado un
modelo de las primeras fases de la activacin linfocitaria T segn el cual la IL-6 sera
responsable de la iniciacin de la activacin linfocitaria T.

5. Las acciones de la IL-6 sobre las clulas del sistema mononuclear fagoctico
incluyen el bloqueo de la proliferacin, con un incremento en la diferenciacin y en la
capacidad efectora.

Acciones sobre clulas no inmunolgicas:

1. Interviene sobre el tejido nervioso de forma directa y a travs de la secrecin de

NGF por los astrocitos. De esta forma, la produccin local de IL-6 acta en la
reparacin de lesiones en el SNC.

2. Posee capacidad estimulante del crecimiento de queratinocitos. En este sentido se

ha implicado a la IL-6 en la patogenia de la psoriasis.

3. Produce proliferacin de las clulas mesangiales. De hecho, se ha postulado por

datos experimentales que la produccin disregulada de IL-6 por las clulas
mesangiales podra provocar el desarrollo de una glomerulonefritis mesangial.

Acciones endocrinas. De forma similar a las restantes citocinas macrofgicas, la IL-6 es

capaz de producir fiebre, estimular la liberacin de ACTH y, por lo tanto, de
glucocorticoides e inducir la sntesis de reactantes de fase aguda. Aunque la IL-1 y el
TNF-a tambin poseen la capacidad de inducir la sntesis de reactantes de fase aguda,
slo la IL-6 da lugar al espectro completo de respuesta hepatocitaria.

Interleucina 8 y otras intercrinas. Las intercrinas son un grupo de citocinas con varias
caractersticas comunes:

1. Poseen un bajo peso molecular (8-10 kD).

2. Incluyen cuatro residuos de cistena en su molcula, muy importantes tanto en la

estructura terciaria de dicha molcula como en su actividad funcional. En las
intercrinas existe un aminocido entre las cistenas adyacentes (intercrinas C-X-C),
mientras que en las intercrinas este aminocido est ausente (intercrinas C-C).
 28

3. Estn codificadas por genes agrupados en dos cromosomas (cromosoma 4 en el caso

de las intercrinas y cromosoma 17 en las intercrinas ).

4. Poseen funciones proinflamatorias y reparadoras.

5. Aunque inicialmente se pens que podran constituir el elemento final de la cascada

de las citocinas inflamatorias, existen datos que sugieren una importante pleiotropa.

Atendiendo a su estructura y homologa se clasifican en dos familias ( y ). Las

principales intercrinas son la

IL-8, el factor 4 plaquetario, la -tromboglobulina y dos productos de funcin

desconocida obtenidos de lneas celulares humanas (IP10- y factor estimulante del
crecimiento de los melanomas). La protena ms interesante de este grupo es la IL-8 que
ejerce su efecto principalmente sobre los neutrfilos (induciendo la quimiotaxis, la
expresin de los receptores de membrana CD11b/CD18, la exocitosis de grnulos y el
estallido respiratorio) y en menor medida sobre los linfocitos.

Los miembros de la familia de las intercrinas son las protenas inflamatorias

macrofgicas (MIP-1 y MIP-2) y la molcula RANTES (regulated on activation, normal
T expressed and secreted). La molcula mejor caracterizada del grupo es la MIP-1 que
consta de dos pptidos MIP-1 y MIP-1. Globalmente esta protena ejerce sus efectos
sobre las clulas del sistema mononuclear fagoctico induciendo la quimiotaxis, la
proliferacin de los macrfagos tisulares y la secrecin de otras citocinas macrofgicas.

Interleucina 12. Esta molcula, recientemente descrita, procede sobre todo de las clulas
con capacidad de presentacin antignica (en particular, monocitos y linfocitos B) en
respuesta a la infeccin bacteriana. Su papel biolgico parece ser doble: induccin de la
produccin de IFN- por las clulas NK y los linfocitos T, as como diferenciacin de los
linfocitos T colaboradores tipo 1 con inhibicin concomitante de los linfocitos T
colaboradores tipo 2.

Radicales libres

Durante el proceso de la fagocitosis, los PMN neutrfilos y los macrfagos generan

radicales libres del oxgeno mediante un proceso complejo, en el que intervienen varios
sistemas enzimticos. Las diferentes especies reactivas de oxgeno poseen una potencia
relativa diferente: el ms potente es el hidroxilo y el menos reactivo el perxido de
 29

hidrgeno. Inicialmente se genera el radical superxido gracias a un sistema enzimtico

especializado (NADPHoxidasa), localizado en la membrana plasmtica y en las vacuolas
de fagocitosis. Este sistema emplea como dador de electrones el NADPH y requiere como
coenzimas una flavoprotena, una ubiquinona y un citocromo b (b245 o b558). La
interaccin de dos molculas de superxido, bien de forma espontnea, bien por la accin
cataltica de la enzima superxido-dismutasa, genera perxido de hidrgeno. Aunque el
perxido de hidrgeno no es un radical libre, es capaz de ejercer efectos txicos a travs
de dos mecanismos principales: el sistema mieloperoxidasa/haluro/perxido de hidrgeno
(sistema de Klebanoff) y la formacin de radical hidroxilo. Por interaccin entre la
mieloperoxidasa, el perxido de hidrgeno y los haluros se forman compuestos txicos
(cidos hipohalosos y haloaminas) que ejercen efectos txicos sobre las membranas
celulares. La formacin del radical hidroxilo se efecta mediante la reaccin de Haber-
Weiss, en cuya formulacin final se produce la reaccin de perxido de hidrgeno y
radical superxido. El factor limitante de la reaccin de Haber-Weiss es la presencia de
hierro libre y, en menor medida, de cobre.

La generacin de radicales libres de oxgeno es un fenmeno fisiolgico relacionado de

forma esencial con la defensa antibacteriana. Sin embargo, si estos radicales libres son
vertidos en el medio extracelular lesionan las estructuras prximas al actuar sobre todos
los tipos de molculas (hidratos de carbono, lpidos, protenas y cidos nucleicos). Por
ello, el organismo dispone de sistemas antioxidantes que controlan cuidadosamente su
gnesis y liberacin o participan en la reparacin de las lesiones producidas por stos.

Recientemente se ha demostrado que algunas clulas que intervienen en la inflamacin

(en concreto, las clulas del sistema mononuclear fagoctico) producen especies reactivas
que incluyen nitrgeno en su estructura. La mejor estudiada de estas especies reactivas es
el xido ntrico, liberado principalmente por el endotelio vascular y con una potente
accin vasodilatadora. En algunas especies (en el hombre los datos son contradictorios),
el xido ntrico puede ser tambin liberado por clulas del sistema mononuclear
fagoctico y ejercer acciones citotxicas sobre las clulas diana.

Antgenos de membrana leucocitarios

Aspectos generales de los Ag de membrana

 30

Las clulas leucocitarias, y en especial las clulas mononucleares, poseen escasas

caractersticas diferenciales desde el punto de vista morfolgico. Sin embargo, desde
hace muchos aos existan datos experimentales que sugeran la existencia de diferentes
subpoblaciones funcionales. El primer mtodo de caracterizacin de las diferentes
subvariedades fue la demostracin de que unos linfocitos (linfocitos B) posean
inmunoglobulinas en la membrana plasmtica y que otro subgrupo (linfocitos T)
formaban rosetas espontneas con los hemates de carnero. Los linfocitos que no
mostraban estas caractersticas se denominaron clulas nulas.

La introduccin de la metodologa de los anticuerpos monoclonales (AcMo) permiti

descubrir en un breve plazo de tiempo la existencia de numerosos antgenos de membrana
diferentes. La primera consecuencia de este proceso fue una gran confusin, ya que cada
grupo experimental o cada casa comercial describan (mediante el anticuerpo monoclonal
correspondiente) a los diferentes antgenos con trminos muy variados. Para evitarlo, se
realizaron varias reuniones de trabajo (la ltima desarrollada en Boston en 1993) en las
que se estableci un cdigo, consistente en las siglas CD (cluster of differentiation)
seguida de un nmero para todos aquellos AcMo que reconocen el mismo antgeno.
Debido a la especificidad, en muchas ocasiones se denomina al antgeno de membrana
con este cdigo, aunque conceptualmente no sea correcto.

La aplicacin sistematizada de estos AcMo permiti demostrar que algunos antgenos

eran relativamente especficos de estirpes celulares (p. ej., CD3 de los linfocitos T, CD19
de los linfocitos B o CD14 de los monocitos), otros indicaban fases de diferenciacin
dentro de una estirpe y otros indicaban la activacin de esa clula.

En los ltimos aos, el principal objetivo en el estudio de las molculas de membrana es

su caracterizacin funcional. As, se han descrito molculas que actan como receptores
para sustancias solubles (p. ej., CD71 reconoce al receptor para la transferrina o CD25
reconoce a un tipo de receptor para la IL-2), molculas reguladoras (p. ej., algunas
protenas inhibidoras del complemento), y molculas coestimulantes (p. ej., las protenas
reconocidas por CD4 o CD8, esenciales en la funcin de los linfocitos T colaboradores y
citotxicos, respectivamente). Este apartado se centrar en las molculas de adhesin
intercelular (adhesinas) que desempean un papel esencial en la inflamacin.

Molculas de adhesin
 31

De forma genrica se denomina adhesinas a un conjunto de molculas que median la

unin fsica entre las clulas o entre stas y elementos del tejido conjuntivo. Desde el
punto de vista estructural se distinguen tres grandes grupos de adhesinas: selectinas,
integrinas y miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas.

Selectinas. Son molculas que se expresan en el endotelio y/o en los leucocitos cuya
funcin es promover una adhesin intercelular dbil en las reas de la inflamacin.
Estructuralmente estn formadas por tres elementos: un dominio lectina, una regin
homloga al factor de crecimiento epidrmico (EGF) y varias regiones SCR (short
consensus repeat). La confusa nomenclatura de este grupo de sustancias se ha
simplificado enormemente y en la actualidad se distinguen tres tipos de selectinas:

1. CD62-E o selectina E (selectina endotelial) denominada previamente ELAM-1. Las

clulas endoteliales no expresan basalmente esta protena, aunque durante la inflamacin,
y sobre todo debido a la accin de las citocinas inflamatorias, se expresa durante un breve
lapso de tiempo. Esta selectina reconoce en los leucocitos hidratos de carbono con
residuos de cido silico del grupo Lewisx y de su ismero Lewisa.

2. CD62-P o selectina P (selectina plaquetaria) denominada previamente GMP-140,

PADGEM. La selectina P se almacena en los grnulos de Weibel-Palade de las clulas
endoteliales y en los grnulos a de las plaquetas y se moviliza hasta la membrana
plasmtica por diversos estmulos inflamatorios (p. ej., trombina o histamina). Esta
selectina es capaz de unirse a los residuos mucoides de un contrarreceptor leucocitario
denominado ligando glucoproteico de la selectina P (PSGL-1).

3. CD62-L o selectina L (selectina leucocitaria) reconocida por los AcMo Mel-14, Leu-8
o TQ-1. La selectina L se expresa en la mayora de los leucocitos circulantes (con la
excepcin de una subpoblacin de linfocitos memoria). Esta selectina es capaz de unirse
a tres tipos de molculas: una molcula de adhesin celular dependiente de glucosilacin
(GlyCAM), protena de membrana que puede ser segregada, CD34 y una molcula de
adhesin celular dirigida a mucosas (MAdCAM). Esta ltima glucoprotena constituye
un ligando tanto de selectinas como de integrinas (47).

Integrinas. Son molculas cuya denominacin deriva de su propiedad de integrar el

medio intracelular (citoesqueleto) con el medio extracelular. Desde el punto de vista
funcional estas molculas participan en la adhesin intercelular as como en la interaccin
 32

de clulas con elementos de la matriz extracelular. Estructuralmente estn compuestas

por dos tipos de cadenas: cadena (comn a cada familia) y cadena (especfica de cada
molcula). Esta simplificacin no es estrictamente correcta, ya que en los ltimos aos se
ha demostrado la existencia de nuevas cadenas y la unin a cadenas a de otras familias,
por lo que la tendencia en su nomenclatura es meramente descriptiva. No obstante, se
sealarn las caractersticas principales de las familias clsicas de integrinas.

Las integrinas 1 forman la familia de antgenos de activacin muy tarda (VLA),

denominadas de esta forma porque se describieron inicialmente en la superficie de
linfocitos activados tras varias semanas de cultivo. Con posterioridad se observaron en
plaquetas y en clulas del sistema mononuclear fagoctico y ms tarde en mltiples
estirpes celulares. Su funcin bsica es la unin de las clulas con elementos del tejido
conjuntivo (laminina, colgeno, fibronectina o fibringeno), con mayor o menor grado de
selectividad. Las integrinas celulares (y particularmente la familia VLA) pueden
encontrarse en diversos estadios de activacin debido a factores intracelulares (p. ej.,
estmulo por citocinas) o extracelulares (unin de la integrina a los ligandos).

Las integrinas 2 forman la familia LeuCAM (leucoadhesinas), un grupo de molculas

que poseen una localizacin restringida (leucocitos) y sirven para la unin con otras
clulas, como el antgeno linfocitario funcional 1 (LFA-1), o con superficies recubiertas
de complemento (CR3 y CR4). La molcula LFA-1 posee como principales
contrarreceptores las molculas de la superfamilia de las inmunoglobulinas denominadas
molculas de adhesin intercelular (ICAM).

El segundo miembro de la familia de leucoadhesinas (LeuCAM) es la molcula

CD11b/CD18, denominado tambin CR3 (receptor para fragmentos del C3 tipo 3). Esta
molcula se expresa de forma restringida en las clulas mieloides (monocitos, macrfagos
y neutrfilos) y en las clulas NK y es capaz de unirse a antgenos recubiertos por iC3b
as como a residuos glucdicos presentes en el lipopolisacrido, a Leishmania, a hongos
y a bacterias. La molcula CD11c/CD18 es el CR4 (receptor para fragmentos del C3 tipo
4), expresada en leucocitos y posee en general la misma capacidad para unirse a ligandos
que el CR3.

Las integrinas 3 forman la familia de las citoadhesinas, molculas relacionadas con la

activacin plaquetaria y otros fenmenos hemostticos.
 33

Las integrinas 7 desempean un papel esencial en la recirculacin linfocitaria.

Las adhesinas de la superfamilia de las inmunoglobulinas poseen como caracterstica

comn la presencia en la estructura de su molcula de elementos similares a la regin
constante de las inmunoglobulinas. Las ms interesantes en lo que respecta a la
inflamacin son las protenas ICAM y la molcula celular de adhesin vascular 1
(VCAM-1).

Familia ICAM. Estas molculas poseen un nmero variable de dominios tipo

inmunoglobulina. La protena mejor conocida del grupo es ICAM-1, que posee cinco
ligandos: LFA-1, CR3, CD43, rinovirus y Plasmodium falciparum. El ligando habitual
de ICAM-2 e ICAM-3 es LFA-1. La regulacin de la expresin de las distintas molculas
ICAM es totalmente diferente lo que implica una funcin particular para cada una de
ellas. As, ICAM-1 es expresada por las clulas endoteliales en respuesta a las citocinas
macrofgicas, siendo esencial en la migracin celular durante el proceso inflamatorio.
ICAM-2 se expresa de forma constitutiva en las clulas endoteliales, y se postula que
interviene en la recirculacin leucocitaria normal. ICAM-3 se expresa curiosamente en la
superficie de los leucocitos y no aparece en el endotelio.

Molcula VCAM-1. Es el ligando endotelial de la molcula leucocitaria VLA-4. De forma

similar a ICAM-1, la expresin de VCAM-1 en el endotelio es estimulada por las
citocinas inflamatorias y alcanza un mximo de expresin en torno a las 24 horas. Existen
diferencias entre la expresin de VCAM-1 y de ICAM-1, dado que, por ejemplo, la IL-4
induce la expresin de la primera y reprime la de ICAM-1. Tambin puede unirse a la
molcula de adhesin linfocitaria 1 situada, en las placas de Peyer (LPAM-1).

Participacin de las molculas de adhesinen la inflamacin

Aunque el conocimiento de las diferentes molculas de adhesin y su regulacin

cronolgica es incompleto, con los datos existentes puede establecerse un modelo
provisional de los elementos bsicos implicados en el inicio de la fase leucocitaria precoz.

La presencia de un agente inflamatorio en un tejido determinado ocasiona la liberacin

de mediadores qumicos responsables, en un primer momento, de los fenmenos
vasculares descritos previamente. Sin embargo, muchas de las alteraciones son totalmente
inespecficas y no discriminan entre los diferentes tipos de leucocitos. En contraste, la
expresin de diferentes molculas de adhesin proporciona un medio de reclutamiento
 34

selectivo de los diferentes leucocitos. De esta forma, la gnesis de citocinas macrofgicas

producira al comienzo un incremento de la expresin de selectinas endoteliales lo que
favorecera la adhesin de los neutrfilos circulantes. Si el estmulo persiste ms de 6
horas disminuira la expresin de estas selectinas, incrementndose la de VCAM-1 y/o
ICAM-1 segn el tipo y los niveles de citocinas linfocitarias. La consecuencia lgica es
una menor adherencia de los neutrfilos y una mayor unin de los linfocitos T memoria
al endotelio, variando por lo tanto el tipo de infiltrado presente.

Estos fenmenos focalizan la respuesta inflamatoria en el endotelio y, aunque poseen gran

inters, no explican muchos aspectos clave de la respuesta inflamatoria.

5.2.2.6 EVOLUCIN

La evolucin ms favorable de la respuesta inflamatoria consiste en la destruccin del

agente causal y en la reparacin de las lesiones tisulares generadas. Los mecanismos de
reparacin del tejido destruido son diferentes en las clulas parenquimatosas y en el tejido
conjuntivo. As, la sustitucin de clulas nobles depende, de manera fundamental, de
la capacidad regenerativa de dichas clulas. De acuerdo con esta propiedad, las clulas se
clasifican en: a) lbiles (epitelios o clulas hemopoyticas), que continan dividindose
toda la vida del individuo; b) estables (parnquimas glandulares), que conservan la
capacidad de dividirse pero que no lo hacen en condiciones normales, y c) permanentes
(neuronas y msculo estriado) cuya capacidad de replicacin es mnima o nula. Por lo
tanto, cuando el proceso inflamatorio afecta alguno de los dos primeros tipos celulares,
el componente lesional parenquimatoso puede curar con restitutio ad integrum; esto no
ocurre en el caso de las clulas permanentes. De todas formas, la reparacin del tejido
parenquimatoso depende, en gran parte, de la indemnidad de la estroma conjuntiva por
cuanto si ste no se mantiene, lo ms probable es que la regeneracin tisular adopte un
patrn desordenado que conduzca a alteraciones funcionales del rgano afecto (el ejemplo
tpico es la cirrosis heptica). La reparacin del tejido conjuntivo, excepto en lesiones
mnimas en las que conserva su arquitectura, suele llevar al desarrollo de una cicatriz por
la acumulacin de fibroblastos y la produccin de colgeno. Este proceso se denomina
fibrognesis y su consecuencia patolgica es la fibrosis. Las consecuencias funcionales
de la fibrosis pueden ser mnimas o, por el contrario, conducir a graves manifestaciones,
 35

como estenosis de rganos tubulares (digestivos, genitourinarios), e insuficiencia en

rganos slidos (corazn, pulmn).

En algunas circunstancias (agente persistente, agente no degradable, alteracin de la

respuesta inmunolgica), la reaccin inflamatoria contina, producindose una
acumulacin de linfocitos, macrfagos y fibroblastos en el foco inflamatorio. Estas
clulas pueden distribuirse de forma uniforme en el rea lesionada adoptando patrones
intersticiales (infiltracin por clulas redondas) o disponerse de forma ordenada
(granulomas constituidos por clulas epitelioides y gigantes). Estos patrones
morfolgicos son los que definen la inflamacin crnica.

A continuacin se considerarn de forma ms concreta la fibrognesis y la formacin de

granulomas como modelos evolutivos de la inflamacin.

FIBROGNESIS

La fibrognesis puede definirse, de forma simple, como el proceso de sustitucin de un

parnquima normal por acumulacin de fibroblastos y sus productos derivados. Este
material no slo se encuentra en mayor cantidad sino que adems presenta alteraciones
cualitativas que distorsionan la arquitectura del tejido. En esta definicin se incluyen
varias ideas de inters:

1. La nocin de fibrognesis como un proceso en el sentido de progresin desde la

normalidad hasta fases de gran afectacin. Este hecho tiene gran trascendencia prctica
ya que los estudios realizados en diferentes fases de la enfermedad ofrecen resultados
distintos.

2. La importancia central del fibroblasto y de sus productos de secrecin en la

patogenia de la fibrognesis.

3. La coexistencia de lesiones cuantitativas y cualitativas en el tejido fibrtico.

En general, en la fibrognesis se ha prestado mayor atencin al estudio de los mecanismos

que incrementan la sntesis de colgeno. Sin embargo, un desequilibrio entre las
colagenasas y los factores inhibidores de stas podra conducir a un aumento de colgeno
en el tejido afecto. En este sentido, hay pruebas de una disminucin de la colagenlisis
en algunas enfermedades fibrticas pulmonares (fibrosis pulmonar idioptica, neumonitis
por hipersensibilidad).
 36

Adems de estos datos existen mltiples observaciones que sugieren que en la

fibrognesis se produce un aumento en la sntesis de colgeno. Antes de analizar las
modificaciones que ocurren en la fibrognesis se sealarn brevemente las caractersticas
generales de este proceso.

Las principales clulas productoras de colgeno en la mayora de los tejidos son los
fibroblastos. No obstante, otras estirpes celulares (p. ej., las clulas endoteliales, los
lipocitos, los hepticos, etc.) tambin tienen capacidad para producir esta protena. En la
biosntesis de las molculas de colgeno hay que destacar dos aspectos importantes:

1. Existe una retroalimentacin negativa en la produccin de colgeno determinada

por la degradacin intracelular de parte del colgeno sintetizado.

2. Las molculas de colgeno se sintetizan en forma de precursores que poseen

secuencias peptdicas en las regiones aminoterminal y carboxiterminal. La funcin de
estas secuencias es mltiple: promover la formacin de la triple hlice, prevenir la
formacin prematura de fibrillas y modular la formacin extracelular de la fibra de
colgeno.

En funcin del tipo de colgeno, estos pptidos son liberados inmediatamente antes o
despus de la secrecin del colgeno, en cantidades estequiomtricas y sirven como
marcadores potenciales de dicha secrecin. En este sentido debe sealarse que la medida
de algunos pptidos (en concreto, el pptido procolgeno III aminoterminal) ha
demostrado ser til como prueba incruenta en la monitorizacin de la actividad
fibrognica de algunos rganos (pulmn, hgado).

Una vez sealados los datos bsicos de la biosntesis de colgeno, se considerarn los
mecanismos por los que puede aumentar esta protena en los tejidos: un incremento en el
nmero de clulas productoras y un aumento de la sntesis de colgeno y otras protenas
de la matriz extracelular por cada una de las clulas.

Los tres mecanismos por los que puede aumentar el nmero de fibroblastos en un tejido
son: el reclutamiento (quimiotaxis) de estas clulas, la proliferacin local y la
transformacin de otras clulas.

Los fibroblastos son clulas mviles, tanto in vitro como in vivo, y responden a mltiples
estmulos quimiotcticos y haptotcticos generados en el foco inflamatorio. Estos
estmulos pueden proceder de la conversin de factores sricos (p. ej., fragmentos del
 37

C5), de la liberacin plaquetaria (intercrinas a, factor de crecimiento derivado de las

plaquetas [PDGF], TGF-), de sustancias liberadas por las clulas inflamatorias (LTB4,
PDGF, TGF-) o de fragmentos de elementos del tejido conjuntivo (colgeno,
fibronectina). Por la accin coordinada de estos factores se producir un aumento de
fibroblastos en torno al foco inflamatorio.

Adems del reclutamiento de fibroblastos hacia el foco inflamatorio, se ha comprobado

que la proliferacin de fibroblastos es un mecanismo esencial en la fibrognesis. En
ausencia de estmulos, los fibroblastos se encuentran detenidos en fase G0, requiriendo
para su proliferacin la accin de dos tipos de estmulos secuenciales: los factores de
competencia y los factores de progresin. Los principales factores de competencia, es
decir, los que permiten a la clula evolucionar desde la fase G0 a G1, son el PDGF, los
factores de crecimiento fibroblstico (FGF) y la fibronectina. Por otro lado, los factores
de progresin actan sobre clulas en fase G1 llevndolas a fase S y, por lo tanto, a la
divisin celular. Los factores de progresin mejor estudiados son el EGF y los factores
de crecimiento similares a la insulina tipo I (IGF-I). Evidentemente, existen factores de
competencia y progresin peor caracterizados.

El tercer mecanismo por el que puede aumentar el nmero de fibroblastos es la

transformacin de otras clulas. Este fenmeno est muy bien caracterizado en la fibrosis
heptica, en la que los lipocitos (clulas de Ito) desempean un papel fundamental en la
fibrognesis. Estas clulas, localizadas en el espacio de Disse, acumulan lpidos y
sintetizan colgeno, sobre todo tipos III y IV. Durante el proceso fibrognico, los lipocitos
se activan y proliferan transformndose en miofibroblastos. El principal factor
desencadenante de la proliferacin de los lipocitos es el PDGF, mientras que el factor
esencial en su activacin es el TGF-.

Debido a los tres mecanismos mencionados puede aumentar el nmero de fibroblastos y,

por lo tanto, la sntesis local de colgeno. Sin embargo, se ha demostrado que, adems de
aumentar el nmero de fibroblastos, durante la fibrognesis se incrementa la sntesis de
colgeno por cada clula. Los principales factores implicados en este proceso son
protenas derivadas de las clulas del sistema mononuclear fagoctico. As, se ha
comprobado que en cocultivos de clulas del sistema mononuclear fagoctico con
fibroblastos aumenta la cantidad de colgeno sintetizado y, adems, vara el tipo de
colgeno, invirtindose el cociente tipo I/tipo III. Al parecer esta variacin del tipo de
 38

colgeno depende de un aumento en el contenido de cAMP intracelular que incrementa

el catabolismo intracelular del colgeno tipo I. Estos datos coinciden con el aumento de
colgeno tipo III observado en las lesiones fibrticas iniciales. El papel concreto de los
mediadores macrofgicos es controvertido. As, en lo que respecta a la IL-1 se ha sealado
tanto que incrementa como que disminuye la sntesis de colgeno. Parece que este efecto
se debe a que la IL-1 ejerce una accin positiva sobre la sntesis de colgeno, pero dado
que incrementa la produccin de PGE2 (inhibidora de la biosntesis), el efecto neto
depender de la coexistencia con otros factores. En los ltimos aos se ha demostrado en
varios tejidos (pulmn, hgado) el papel esencial del TGF- en el incremento de la sntesis
de elementos de la matriz extracelular (colgeno, fibronectina, glucosaminoglicanos)
durante la fibrognesis.

FORMACIN DE GRANULOMAS

El granuloma puede definirse como la acumulacin local de clulas inflamatorias, sobre

todo de estirpe mononuclear fagoctica, que se produce como respuesta crnica a
estmulos persistentes. Aunque existen formas mixtas, la mayora de los granulomas se
incluyen en uno de estos dos grandes tipos: granulomas tipo cuerpo extrao y granulomas
tipo hipersensibilidad.

Independientemente de su etiologa, las clulas que predominan en los granulomas son

las de la serie mono nuclear fagoctica. Atendiendo a sus caractersticas morfolgicas se
distinguen tres variedades:

1. Macrfagos activados, caracterizados por el aumento de las organelas

citoplasmticas, la intensa expresin de receptores para la fraccin Fc de las
inmunoglobulinas y para fragmentos del complemento y una gran capacidad fagoctica.

2. Clulas epitelioides, de morfologa poligonal, con un ncleo oval y un retculo

endoplsmico rugoso y un aparato de Golgi intensamente desarrollados. En general
expresan pocos receptores de membrana y ejercen una escasa funcin fagoctica. Sin
embargo, segregan numerosas enzimas, lo que hace suponer su papel activo en la
destruccin de los irritantes que generaron el granuloma.

3. Clulas multinucleadas, entre las cuales se distinguen morfolgicamente dos tipos:

clulas gigantes (que aparecen en los granulomas tipo cuerpo extrao) y clulas de
Langhans (que aparecen en los granulomas tipo hipersensibilidad). Sin embargo, desde
 39

el punto de vista funcional ambos tipos son similares a las clulas epitelioides ya que
poseen escasa capacidad fagoctica y elevada capacidad secretora. El principal
mecanismo de formacin es la fusin de macrfagos uninucleados debido al intento de
ingestin por varios macrfagos del mismo material o al efecto de las citocinas (p. ej.,
IFN-).

Junto a las clulas del sistema mononuclear fagoctico, en los granulomas suelen
encontrarse otros tipos celulares: linfocitos B y sobre todo T (en regiones perifricas),
eosinfilos (sobre todo si el antgeno es parasitario) y fibroblastos (cementando el
granuloma).

5.2.2.7 MANIFESTACIONES CLINICO BIOLGICAS DE LA

INFLAMACIN

La reaccin inflamatoria es un proceso local pero con manifestaciones sistmicas. En la

exposicin previa se ha visto que la respuesta inflamatoria es un proceso local y no existe
ninguna situacin clnica en la que la inflamacin afecte todos los tejidos
simultneamente. Este carcter local es la base de los clsicos datos clnicos de la
inflamacin aguda:

1. Calor: provocado por la acumulacin de sangre y el incremento de la actividad

metablica en el foco inflamatorio.

2. Rubor: atribuible a la vasodilatacin y la estasis sangunea en el rea inflamada.

3. Tumor (aumento de tamao): generado por la acumulacin de sangre, la presencia

de exudado plasmtico y el aumento de clulas inflamatorias en la regin afecta.

4. Dolor: producido por la irritacin de las fibras nerviosas del rea lesionada, tanto
por el propio agente causal como por algunos mediadores del proceso inflamatorio
(bradicinina, PGE2 y otros).

5. Impotencia funcional: consecuencia directa de las anteriores.

Se debe insistir en que estos datos slo aparecen en las inflamaciones agudas de tejidos
que pueden ser observados por el clnico. As, si el proceso es interno (p. ej., una hepatitis)
o la inflamacin ya desde el inicio adopta un carcter morfolgico de cronicidad, no son
perceptibles. Junto a estos fenmenos locales, la respuesta inflamatoria se acompaa,
 40

excepto en casos muy leves, de un componente general ms o menos acusado. Los

principales factores responsables de esta respuesta general son las interleucinas
mencionadas. A continuacin se resumen las consecuencias ms importantes de sus
acciones sistmicas.

Fiebre. La IL-1, la IL-6 y el TNF- actan sobre el centro hipotalmico termorregulador

y desencadenan la fiebre por la produccin de PGE2, sustancia que ajusta al alza el control
termosttico. Por ello se estimula la conservacin de calor (vasoconstriccin) y su
produccin (tiritona por contraccin muscular) hasta que se eleva la temperatura
central y se reajusta el hipotlamo.

Alteracin del patrn habitual sueo-vigilia. Hay induccin de un estado de

somnolencia.

Neutrofilia. Aunque tras la administracin de IL-1 se produce un breve perodo de

neutropenia por la adherencia de los neutrfilos al endotelio, posteriormente aparece una
importante elevacin de los neutrfilos circulantes, al parecer debido al estmulo directo
de la liberacin por la mdula sea de precursores inmaduros. Estos datos explican la
neutrofilia y la desviacin hacia la izquierda de la frmula leucocitaria que acompaa
habitualmente a los procesos inflamatorios agudos.

Induccin de la sntesis de reactantes de fase aguda. Las tres interleucinas mencionadas

(IL-1, IL-6 y TNF-) actan sobre los hepatocitos regulando la produccin de varias
protenas (denominadas globalmente reactantes de fase aguda) a nivel postranscripcional.
Como consecuencia se produce una modificacin de la concentracin plasmtica de
dichas protenas. Aunque estos reactantes pueden medirse de forma individual (p. ej.,
protena C reactiva, 1-antitripsina, etc.), es intil por costoso y redundante
determinar todos estos reactantes en la clnica, ya que aportan la misma informacin: la
presencia y la actividad del proceso inflamatorio. Por ello, suele realizarse nicamente un
estudio indirecto de los reactantes mediante dos tcnicas sencillas y baratas: la VSG y el
proteinograma.

La determinacin de la VSG consiste en colocar una columna de sangre anticoagulada en

un tubo vertical y medir el descenso de la columna eritrocitaria al cabo de 1 hora. El factor
determinante de la VSG es la formacin de agregados de hemates (rouleaux), que, a su
vez, depende de la suma de dos factores contrarios: la repulsin elctrica entre hemates
 41

y el efecto disipador del medio. La policitemia, al elevar la repulsin entre los hemates,
disminuye la VSG. Por el contrario, la anemia (al estar disminuido el efecto repulsivo) y
el aumento de las protenas asimtricas (p. ej., fibringeno y otros reactantes de fase
aguda), que ejercen un efecto disipador de cargas, favorecen la formacin de agregados
y elevan la VSG. El proteinograma permite comprobar una disminucin de la albmina
y una elevacin de las a-globulinas. Esto ltimo se debe a que la mayor parte de los
reactantes de fase aguda poseen movilidad electrofortica alfa.

Manifestaciones generales. Otras manifestaciones generales de la inflamacin, cuya

fisiopatologa no est totalmente aclarada, son la astenia, la anorexia y el malestar general.
En los procesos inflamatorios crnicos es frecuente la aparicin de una anemia,
denominada anemia de las enfermedades crnicas, que habitualmente es normoctica y
normocrmica. Aunque el mecanismo de produccin no se conoce con exactitud, parecen
intervenir varios factores:

1. Incremento del secuestro y la destruccin de los hemates por el sistema

mononuclear fagoctico activado (componente hemoltico extracorpuscular).

2. Dficit de la respuesta medular para incrementar la produccin eritrocitaria, debida

a varios factores: disminucin de la eritropoyetina, resistencia relativa a la
eritropoyetina y supresin de la eritropoyesis por factores liberados por los macrfagos
activados (componente hipoplsico).

3. Alteraciones del manejo del hierro. As, aunque no existe ferropenia (de hecho, la
ferritina est elevada), la distribucin del hierro est alterada debido a un secuestro
de este metal en las clulas del sistema mononuclear fagoctico.

5. 2. 3. TRATAMIENTO DE LA INFLAMACIN: ETOFENAMATO

5.2.3.1 DESCRIPCIN GENERAL:

- Grupo farmacolgico: AINE derivado del cido antranili

- Categora teraputica: Analgsico, antiinflamatorio.

- Factor de riesgo para el embarazo: Categora FDA: C.

- Formulaciones que contienen Etofenamato: BAYRO IM Amp. 1g/2mL. BAYRO

CREMA 10%. Laboratorios: BAYER.
 42

5.2.3.2 FARMACOCINTICA
- Biodisponibilidad: IM: 91%.
Distribucin Unin a protenas sricas: 98 al 99%.

Excrecin:
- Biliar/fecal, 65%, renal 35%.
- La excrecin se realiza como numerosos metaboltos (hidroxlacin, desdoblamiento
de grupos ter o ster) y sus conjugados.

5.2.3.3 FARMACODINAMIA

Acciones farmacolgicas y mecanismos

El etofenamato es un antiinflamatorio no esteroide con propiedades analgsicas y

antipirticas. El pronunciado efecto antiinflamatorio ha sido establecido en animales y
confirmado en numerosos estudios en humanos basndose en una serie de efectos
individuales que intervienen en diversas etapas del proceso inflamatorio. El etofenamato
inhibe la liberacin y actividad de la ciclooxigenasa, la lipooxigenasa, la histamina, la
bradiquinina, la serotonina, la hialuronidasa y del complemento, estabiliza las membranas
lisosomales y reduce las reacciones ante cuerpos extraos.

5.2.3.4 INDICACIONES

Indicaciones:
- Analgsico: Manejo sintomtico del dolor mediano a moderado.
- Antiinflamatorio: Manejo de dolores musculares y articulares inflamatorios.
- Enfermedades reumticas de generativas e inflamatorias, y en estados dolorosos por
inflamacin no reumtica.
- Ataque agudo de gota.
- Procesos inflamatorios postoperatorios.

5.2.3.5 POSOLOGA SEGN VA DE ADMINISTRACIN

 43

Va tpica: Cutnea

Aplicar una banda de crema de aprox. 5-10 cm de longitud (correspondiente a 1,7 a 3,3 g
por aplicacin) varias veces (3-4) en funcin del tamao de las reas dolorosas y frotar
suavemente encima de un rea cutnea lo ms amplia posible.

Va parenteral: Intramuscular
IM profunda, transcutnea.

Dosis adultos y nios > 14 aos:

Dosis usual adultos:

IM: 1g/dia, IM profunda, hasta 3 dosis

Dosis nios: Evitar en < 14 aos.

Uso en geriatra:

La cintica del etofenamato es independiente de la edad. Los niveles plasmaticos de

individuos ancianos son virtualmente iguales a los de los jvenes.

5.2.3.6 REACCIONES ADVERSAS

- Generales:

Reacciones de hipersensibilidad, disnea, prurito, rash cutneo, urticaria, dermatitis,

eritema y erupciones pustulares

Puede inducir broncospasmo en pacientes con asma, alergias y pustulares.

Sensacin de cansancio, asteria depresin.

Dolor, endurecimiento, enrojecimiento, inflamacin o ardor en la zona del la inyeccin,

infiltrados, necrosis del tejido graso o absceso en la zona del la inyeccin.

- Hem: Alteraciones de la hematopoyesis.

- SNC: Cefalea, somnolencia, vrtigo, rea.1 reos, astenia. alteraciones de la visin.

- GI: Nuseas, vmitos, diarrea, epigastralga, gastritis, exacerbacin de lcera pptica,

hemorragia gstrica, esteatorrea. Alteracin de la funcin heptica. Pancreatitis,

- GU: Nefrotoxicidad, disuria, dificultad en la miccin, fallo renal.

 44

5.2.3.7 PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

- Generales:

Usar con precaucin en caso de coagulopatias, tratamiento con anticoagulantes

(derivados cumarinicos, heparina), asma o hipersensibilidad al otros AINES. Tambin en
caso de antecedente de lcera pptica, gastritis, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn,
HTA o en convalecientes de ciruga mayor.

No asociar a preparaciones que contengan salicilatos, corticoides, acetaminofn, alcohol,

agentes uricasricos o AINEs.

En caso de uso crnico, suspenderlo una semana antes de una ciruga o de una donacin
de sangre. etolenamato puede causar una inhibicin transitoria de la agregacin
plaquetaria.

Se emplear con cautela en pacientes portadores de porfiria, por el riesgo de precipitar

una crisis aguda.

- Sensibilidad cruzada y/o problemas relacionados:

Puede causar broncoconstriccin o anafilaxis en pacientes asmticos sensibles a AAS o

Etofenamato, especialmente en aquellos con plipos nasales asociados con broncospasmo
inducido por AAS.

Pacientes sensibles a otros AINEs, sulfonamidas o compuestos relacionados pueden ser

tambin sensibles a Etofenarnato.

- Embarazo:

Categora FDA: C.

Estudios en animales han demostrado que puede causar defectos en el desarrollo fetal.

La inhibicin perifrica del Etofeamato sobre la sntesis de prostaglandinas puede causar

en el ltimo trimestre del embarazo, cierre prematuro del ductus arterioso fetal en
animales de experimentacin.

Adems, en el embarazo a trmino prolongan y dilatan el parto.

 45

El etofenamato aumenta la tendencia al sangrado en la madre y en el FIN, por lo tanto,

como regla general, los productos que contengan Etofenamato deben evitarse en la ltima
etapa del embarazo.

- Lactancia:

No se recomienda su administracin dado que el principal metabolito del etofenamato, el

cido flufenmico, se excreta en la leche materna.

- Uso geriatra:

Pueden, sustituirse dosis menores sobre todo el uso a largo plazo.

- Deterioro de la funcin heptica:

Pacientes con funcin renal y/o heptica alterada deben tener precaucin.

- Efectos en la capacidad para conducir u operar maquinarias:

Etofenamato puede modificar la velocidad de reaccin, alterando la capacidad de

conducir o de manipular maquinaria. Esto es especialmente aplicable cuando se combina
con alcohol.

5.2.3.8 CONTRAINDICACIONES

- Hipersensibilidad al etotenamato, aspirina, cido flufenmico u otros AINEs.

- Antecedente de ataque de asma urticaria o rinitis aguda, tras la administracin de

Etofenamato u otros AINEs. Asma, preexistente.

- ltimo trim. del embarazo y lactancia.

Evaluar la relacin riesgo-benfico en las siguientes condiciones:

- Anemia y asma preexistente, por el riesgo de exacerbacin.

- Discrasias sanguneas, actual o historia de ella. Alteraciones en la coagulacin,

tratamiento con anticoagulantes o inhibidores de la agregacin plaquetaria. Hemofilia
u otros problemas de sangrado. Depresin de la mdula sea.

- lcera gastroduodenal, antecedente o sangrado GI activo, lcera pptica.

- Alcoholismo, uso de tabaco.

 46

- Deficiencia de la funcin renal, heptica o cardiaca. Deplecin de volumen

extracelular, especialmente cuando est asociado con enfermedades renales
preexistentes.

5.2.3.9 INTERACCIONES MEDICAMENTOSAS

Por va tpica

No se conocen hasta el momento

Por va IM

La administracin concomitante con corticosteroides o con otros antiinflamatorios no

esteroides puede fomentar la aparicin de efectos secundarios gastrointestinales.

La administracin concomitante de los antipodgricos probenecid y sulfinpirazona

conduce a una excrecin ms lenta del etofenamato.

El etofenamato puede reducir la accin de varios diurticos (p. ej., furosemida o diurticos
tiacdicos) y antihipertensivos (p. ej., betabloqueantes).

La ingesta simultnea de alcohol puede aumentar el riesgo de hemorragias

gastrointestinales.

No se dispone de investigaciones concernientes a la administracin concomitante de

etofenamato con digoxina, fenitona, litio, metotrexato o antidiabticos orales. La
experiencia disponible con compuestos de accin similar sugiere que puede aumentar el
efecto o la toxicidad de las sustancias arriba mencionadas.

Debido a su elevada capacidad de unin proteica, el etofenamato puede interactuar con

los anticoagulantes orales.

5.2.3.10 SOBREDOSIFICACIN

En caso de sobredosis de antiinflamatorios no esteroides pueden presentarse sntomas

gastrointestinales, tales como nuseas, vmitos, meteorismo, dolor abdominal y tenesmo,
diarrea y hemorragia gastrointestinal; con grandes dosis pueden presentarse alteraciones
del Sistema Nervioso Central, como cefaleas, insomnio, astenia, mareos y vrtigo,
alteracin de la visin, agitacin y confusin.
 47

Antdoto: No existe ningn antdoto especfico. En caso de intoxicacin por sobredosis

se deber aplicar un tratamiento sintomtico, vigilando el nivel de agua y electrlitos y
compensando adecuadamente cualquier desequilibrio.

El carbn activado reduce la reabsorcin de fenamatos en la circulacin enteroheptica.

5. 2. 4. FORMAS FARMACUTICAS SEMISLIDAS: POMADAS

5.2.4.1 CONCEPTOS

Las pomadas constituyen un grupo de preparados farmacuticos muy heterogneo,

caracterizado por su consistencia semislida. Estn destinadas a ser aplicadas sobre la
piel o sobre ciertas mucosas con el fin de ejercer una accin local o de dar lugar a la
penetracin cutnea de los medicamentos que contienen.

Constan de un excipiente, sencillo o complejo, en cuyo seno se disuelven o se dispersan

los principios activos.

5.2.4.2 CLASIFICACIN

Todos los preparados de consistencia semislida estn, de hecho, englobados en la

definicin genrica de "pomadas", pero a menudo se utilizan otras denominaciones ms
especficas, relacionadas con sus caractersticas fisicoqumicas y su consistencia ms o
menos blanda. As, en la Farmacopea Europea se distinguen varias categoras de
pomadas:
- Pomadas propiamente dichas: Constan de un excipiente de una sola fase en el que
se pueden dispersar slidos o lquidos.
Hidrfobas (lipfilas): No pueden absorber ms que pequeas cantidades de
agua. Las sustancias que se emplean con ms frecuencia en su formulacin son la
vaselina, la parafina, la parafina lquida, los aceites vegetales, las grasas animales,
los glicridos sintticos, las ceras y los polialquilsiloxanos lquidos.
- Absorbentes de agua: Pueden absorber grandes cantidades de este lquido. Sus
excipientes son los de las pomadas hidrfobas a los cuales se incorporan emulgentes
de lino W/O, como la lanolina, los alcoholes de grasa de lana, los steres del sorbitano,
los monoglicridos y los alcoholes grasos.
 48

Hidrfilas. Se elaboran con excipientes miscibles en agua, tales como los

polietilenglicoles lquidos y slidos (macrogoles). Pueden contener cantidades
adecuadas de agua.
- Cremas: Son pomadas multifsicas constituidas por dos fases, una lipfila y otra
acuosa.
Hidrfobas. La fase continua o externa es la fase lipfila debido a la presencia en
su composicin de emulgentes tipo W/O.
Hidrfilas. La fase externa es de naturaleza acuosa debido a la presencia en su
composicin de emulgentes tipo 0/W, tales como jabones sdicos o de
trietanolamina, alcoholes grasos sulfatados y polisorbatos, a veces combinados en
proporciones convenientes con emulgentes tipo W/0.
- Geles: Estas preparaciones estn formadas por lquidos gelificados con ayuda de
agentes apropiados.
Hidrfobos (oleogeles). Estn constituidos por excipientes como la parafina
lquida adicionada de polietileno, aceites grasos gelificados con slice coloidal o
por jabones de aluminio o zinc.
Hidrfilos (hidrogeles). Se elaboran con excipientes hidrfilos como el agua, el
glicerol y los propilenglicoles, gelificados con sustancias como goma de
tragacanto, almidn, derivados de la celulosa, polmeros carboxivinlicos,
silicatos de magnesio y aluminio.
- Pastas: Contienen elevadas proporciones de slidos finamente dispersos en el
excipiente por lo que, generalmente, su consistencia es bastante elevada.

5.2.4.3 EXCIPIENTES

El principal papel del excipiente es servir de soporte al principio activo que se desea
aplicar sobre la piel, aunque el excipiente podr influir en la penetracin del principio
activo hacia lugares ms o menos profundos situados por debajo de la zona de aplicacin
y contribuir de este modo en la eficacia del preparado.

En algunos casos (pomadas protectoras) el excipiente puede influir en la capacidad de

proteccin final de la pomada frente a diversos agentes externos o incluso desprovistos
de medicamentos propiamente dichos, puede utilizarse como protector. En otros casos, el
 49

excipiente contribuye a mantener las caractersticas fsicas y qumicas de la piel normal

(grado de humedad, pH), mejorando as sus mecanismos le defensa.

Las caractersticas que de modo general deben reunir los excipientes de pomadas pueden
resumirse en las siguientes:
- Deben ser bien tolerados y no manifestar acciones que los inhabiliten (irritantes,
sensibilizantes).
- Tienen que ser inertes frente al principio activo que incorporan (compatibilidad fsica
y qumica), as como frente al material de acondicionamiento.
- Han de ser lo suficientemente estables frente a los factores ambientales como para
garantizar su conservacin.
- Deben presentar una consistencia conveniente para que su extensin sobre la piel o
las cavidades mucosas se realice con facilidad y, adems, puedan dispensarse en
tubos.
- En determinados casos (pomadas oftlmicas) se requiere que sean esterilizables.
- Deben ceder adecuadamente el principio activo que incorporan.
- En la medida de lo posible, tienen que presentar caracteres organolpticos no
desagradables.

CLASIFICACIN DE LOS EXCIPIENTES

Los excipientes de pomadas pueden dividirse, de acuerdo con los diferentes tipos de
pomadas. En los grupos que se indican en el cuadro. Dos de estos grupos pueden utilizarse
directamente como excipientes (2 y 4) al tiempo que constituyen la base para la
preparacin de los excipientes emulsin correspondientes (3 y 5, respectivamente), que
son de uso ms extendido.
1. Excipientes hidrfobos
SISTEMAS W/O 2. Bases de absorcin (anhidras)
3. Emulsiones W/0
4. Bases emulgentes 0/W (anhidras)
SISTEMAS 0/W 5. Emulsiones 0/W
6. Excipientes hidrfilos

1. Excipientes hidrfobos
 50

Son vehculos de carcter graso o lipfilo, que pueden utilizarse aislados o en mezclas.
Tienen en comn su carcter oclusivo (denominado "emoliente" en trminos
dermatolgicos); inducen la hidratacin en la zona de aplicacin y mantienen una capa
acuosa de cierto espesor en la interfase vehculo/piel, debido a la acumulacin del agua
interna y el sudor.

En el grupo se incluyen hidrocarburos (vaselinas y parafinas), aceites vegetales, grasas

semisintticas, diversas ceras y siliconas.

Vaselina y parafinas

La vaselina y las parafinas lquida y slida se obtienen mediante tratamiento adecuado de

determinadas fracciones del petrleo bruto.

La vaselina constituye un sistema de dos fases con estructura de gel. La fase lquida, que
representa el 50-80% del total, est formada por parafinas e isoparafinas lquidas y por
hidrocarburos olefnicos. La fase slida est constituida por un componente cristalino (n-
parafinas) y un componente microcristalitio (isoparafinas).

Los hidrocarburos slidos forman un esqueleto reticular, coherente, tridimensional en el

que se alojan los hidrocarburos lquidos. Las buenas propiedades (plasticidad, tixotropa)
que caracterizan a una vaselina de alto valor farmacutico slo se presentan si existe una
relacin bien equilibrada entre parafinas cristalinas y microcristalinas por una parte, y
parafinas lquidas por otra. La ductibilidad, propiedad a la que debe la vaselina su carcter
filante, es atribuible a la porcin microcristalina de isoparafinas y parafinas cclicas. Por
el contrario, las vaselinas con un contenido relativamente alto en n-parafina poseen una
textura ms rgida. Se suelen diferenciar, en relacin con el procedimiento usado para su
obtencin, tres variedades: vaselina natural, de nafta y artificial. Esta ltima se fabrica
fundiendo conjuntamente parafinas slidas y lquidas.

El punto de fusin de las vaselinas oficinales oscila entre 38 y 60 grados, lo que garantiza
una ptima extensibilidad sobre la piel. Debido a su gran inercia qumica, es compatible
con la mayora de los medicamentos y francamente estable. En cambio, posee ciertos
inconvenientes, ya que es difcil de eliminar de la piel y mancha la ropa.

Modernamente se emplean bases grasas formadas por mezclas seleccionadas y altamente

purificadas de hidrocarburos, cuyo peso molecular medio es del orden de 1.300. Una de
ellas est registrada con el nombre de PLASTIBASE. Est constituida por cinco partes
 51

de polietileno (P. M. 21.000) y 95 partes de parafina lquida y es de gran consumo, Por

sus propiedades es sensiblemente igual a la vaselina, pero a diferencia de esta ltima su
consistencia permanece prcticamente invariable en el mbito de temperaturas que va
desde 15 C hasta +60C, y no se modifica apreciablemente cuando se le adiciona una
proporcin elevada de slidos. Su manipulacin es, en consecuencia, ms cmoda,
particularmente en la produccin a gran escala. En lo que se refiere a la liberacin de
medicamentos, parece que se comporta de modo ms favorable que la vaselina.

Siliconas

Son polmeros sintticos cuya estructura bsica est formada por cadenas que contienen,
alternativamente, tomos de oxgeno y de silicio, con sustituyentes orgnicos variables
(metilos o fenilos casi siempre) en los tomos de este ltimo.

Las ms utilizadas son las dinzeticonas, pertenecientes al grupo de los dimetilsiloxanos.

Segn el grado de polimerizacin, se obtienen desde lquidos fluidos hasta slidos

consistentes.

Las siliconas tienen cuatro propiedades bsicas que las hacen extraordinariamente tiles
desde el punto de vista farmacutico y dermatolgico:
- Hidrofobia acusada, lo que les confiere propiedades en extremo hidrorrepelentes.
- Gran inercia qumica y, en consecuencia, extraordinaria estabilidad.
- Inocuidad y ausencia de irritabilidad para la piel.
- Especial afinidad hacia la piel, sobre la que tienden a formar pelculas muy
adherentes y finas.

En Farmacia se utilizan las de consistencia fluida y no se emplean aisladas sino

adicionadas a otros excipientes, a los que proporcionan adherencia y capacidad oclusiva.
Forman parte de la fase grasa de muchas cremas de tipo emulsin que se aplican sobre la
piel en capa fina; cuando se evapora el agua, quedan recubriendo la piel en forma de
pelcula finsima, casi invisible, emoliente y protectora y, al mismo tiempo, de
oclusividad moderada debido al nfimo espesor de la capa.

Aparte de ello, se emplean para la preparacin de cremas hidrorrepelentes y protectoras

frente a los agentes qumicos (jabn, sustancias agresivas), mezclada con vaselina
(30:70).
 52

Ceras

Son excipientes no del todo hidrfobos y, por supuesto, ms polares que cualquiera de
los anteriores. La ms empleada es la de abejas, lavada y purificada, denominada en
Farmacia cera blanca, y que se presenta en forma de laminillas o grumos sensiblemente
esfricos de fcil manipulacin. Qumicamente, es una mezcla de tres tipos de
componentes principales:
- steres de cidos y alcoholes de elevado peso molecular (en torno al 70%).
Fundamentalmente son steres de cidos lineales saturados de nmero par de
tomos de carbono, entre C14 y C20, esterificados con alcoholes lineales, tambin
saturados y de nmero par de tomos de carbono, entre C14 y, C32.
- Acidos libresp0-20%) fundamentalmente de cadenas saturadas (entre CI4 y C30).
- Hidrocarburos (10-20%), sobre todo de cadenas lineales de C2-t, C29, C31 y
saturados.

Una caracterstica de las ceras es la de incorporar cierta proporcin de agua cuando estn
fundidas, aunque la mayor parte del agua se pierde al solidificar y el resto queda
incorporada en forma de casi emulsin, muy lbil, que se cede fcilmente a la piel y acta
como refrescante.

Normalmente no se emplea aislada, sino en mezcla con parafinas lquidas o semislidas,

ms frecuentemente con aceites vegetales, que rebajan su consistencia. Las pomadas que
contienen una proporcin importante de ceras se suelen denomina "ceratos".

Glicridos naturales y semisintticos

Algunas sustancias grasas utilizadas como excipientes se obtienen a partir de diferentes

semillas o frutos de distintas especies vegetales, pero los ms empleados en pomadas son
el aceite de oliva, el de almendra y el de cacahuete.

Se obtienen por expresin en fro o en caliente. El primer procedimiento es el de eleccin

para algunos aceites oficinales, ya que permite obtener aceites de excelente calidad que
presentan el inters particular de conservar los antioxidantes naturales (aceites vrgenes).

Los aceites vegetales estn constituidos esencialmente por triglicridos, es decir,

tristeres de glicerol y cidos grasos. Los cidos ms abundantes en los aceites son los de
nmero par de tomos de carbono de cadena saturada o insaturada. Los cidos grasos
saturados ms importantes son el cido lurico (C12), el mirstico (C14), el palmtico
 53

(C16), el esterico (C15) y el araquidnico (C20).

Los cidos grasos insaturados son, fundamentalmente, el cido oleico (C15, un doble
enlace), el linoleico (Cis, dos dobles enlaces) y el linolnico (Cim, tres dobles enlaces).

Los aceites vegetales contienen tambin tina pequea cantidad de cidos grasos libres y
una fraccin insaponificable en la que se encuentran los pigmentos, los esteroles y las
vitaminas liposolubles. Algunas de estas sustancias (tocoferoles) desempean el papel de
antioxidantes naturales y evitan, en parte, el enrancia-miento de los aceites. Se utilizan,
bsicamente, para reducir la consistencia de las pomadas aadidas a otros excipientes,
como las ceras o las bases de absorcin. Los aceites vegetales son sustancias afines con
la piel y bien toleradas. Por esta razn se emplean en pomadas que deben absorberse. La
pelcula aplicada sobre la piel no impide los procesos fisiolgicos de la misma.

Tambin se utilizan glicridos semisintticos preparados por esterificacin de la glicerina,

con cidos grasos saturados de longitud de cadena C12-C13, especialmente cidos lurico
y esterico.

Otros steres de cidos grasos con alcoholes diversos son tambin muy utilizados, como
el miristato de isopropilo lquido, de baja viscosidad, que solidifica a cinco grados y
resiste bien la oxidacin, de modo que apenas se enrancia.

2. Bases de absorcin anhidras

Son excipientes sin agua, constituidos por vehculos hidrfobos adicionados de

emulgentes W/O. Se usan, por s mismas, como preparados emolientes que carecen de la
marcada capacidad oclusiva que poseen los excipientes grasos, pero aun as, permiten
mantener un grado de hidratacin muy conveniente en la piel. Sin embargo, tienen tal vez
mayor inters como bases para la preparacin de los excipientes tipo emulsin W/0 por
simple incorporacin de agua y sin perder apenas su consistencia primitiva.

La denominacin de bases de absorcin se debe, precisamente, a su capacidad para

absorber agua en forma de emulsin W/O, capacidad que les confiere la presencia de un
emulgente de bajo HLB en su composicin. La capacidad de incorporacin de agua que
poseen las bases de absorcin se establece, por regla general, mediante el llamado "ndice
de agua", que equivale a la cantidad de este lquido que puede ser retenida de manera
estable por 100 gramos de base a la temperatura ambiente.
 54

Para su elaboracin se emplean sustancias hidrfobas como las vaselinas, las parafinas y
otras a las que se adicionan, como emulgentes, lanolina o sus derivados; tambin se
utilizan, con frecuencia, emulgentes sintticos.

Lanolina y derivados

La lanolina constituye, por s misma, una base de absorcin. Es un producto parecido, por
su constitucin, a las ceras, aunque ms hidrfilo y se obtiene por purificacin de la
secrecin que impregna la lana de oveja, en la cual, adems de los triglicridos del sebo,
se encuentra la cera procedente de las clulas epidrmicas queratinizadas.

En la lanolina se pueden encontrar los siguientes componentes:

- steres de cidos y alcoholes de elevado peso molecular (90-95%). Los cidos grasos
que con mayor frecuencia forman parte de estos steres son los de cadena lineal de
nmero de tomos de carbono entre 10 y C26 y tambin los hidroxicidos entre C12
y C20.

Por su parte, los alcoholes que principalmente forman los steres presentes en la
lanolina son alcoholes alifticos, esteroles y alcoholes triterpnicos.
- cidos y alcoholes libres (-4%).
- Hidrocarburos (-4%).

Contiene, normalmente, un 25-35% de agua, que puede separarse por fusin originando
la lanolina anhidra. Sin embargo, puede incorporar mayores cantidades de agua debido a
la presencia de alcoholes grasos, que actan como emulgentes W/O, entre ellos el
colesterol libre, cuya capacidad de incorporacin de agua es muy elevada.

Es altamente compatible con la piel por la similitud de su composicin con la de los

lpidos cutneos, pero posee inconvenientes: su inestabilidad, su tacto desagradable y su
elevado punto de fusin. Por ello, raramente se usa aislada, sino en combinacin con otras
sustancias o en forma de sus derivados. Uno de los cuales se conoce con nombre de
"alcoholes de lanolina" o "alcoholes de lana. Se prefieren actualmente a la lanolina por
su pureza, su mayor capacidad de incorporacin de agua y de medicamentos y su mejor
textura y finura para la piel.

Con frecuencia se acude a la utilizacin de mezclas vaselina-lanolina con el fin de

combinar la capacidad absorbente de la lanolina con la oclusividad de la vaselina. Estas
bases de absorcin, por s mismas, previenen la evaporacin y mantienen la hidratacin
 55

del estrato crneo, favoreciendo, en general, la penetracin de los frmacos.

Tambin son muy frecuentes otras mezclas en las que a la vaselina se le adicionan
alcoholes grasos alifticos (cetlico, estearlico) o triterpnicos (colesterol
fundamentalmente) con pequeas proporciones de ceras. Estas bases de absorcin tienen
composicin ms fija y son ms manejables y con mejores caracteres organolpticos.
Estas mezclas poseen una notable capacidad de incorporacin de agua, debido al carcter
emulgente W/0 de los alcoholes.

3. Emulsiones W/O

Todas las bases de absorcin citadas, por incorporacin de agua, producen excipientes
emulsin W/O aptos para la administracin de frmacos y tambin para otros usos. La
adicin de agua puede hacerse en fro en algunos casos, pero, en general, se realiza
calentando a temperatura relativamente baja (60-70 grados) la base y el agua (provista o
no del medicamento) por separado; el agua se aade a la base fundida y se agita
continuamente hasta el enfriamiento.

La utilizacin de las emulsiones W/O tiene dos vertientes:

- La preparacin de cremas refrescantes, o cold-creams.

- Como vehculos de medicamentos tpicos o penetrantes.

Las cremas refrescantes son emulsiones lbiles, que ceden el agua con facilidad cuando
se aplican sobre a la superficie de la piel; al elevarse la temperatura, la emulsin se rompe.
La evaporacin del agua produce una sensacin refrescante. Las cold-creams ms clsicas
no son otra cosa que ceratos con agua, que estn incluidos en muchas farmacopeas.

4. Bases de emulsin 0/W anhidras

Los excipientes pertenecientes a este grupo se conocen tambin con el nombre de

"excipientes lavables" porque su carcter organolptico ms relevante es el ser fcilmente
eliminables por lavado o aclarado con agua corriente. Estos vehculos generan con
facilidad, por adicin de agua, emulsiones 0/W generalmente muy estables.

Estn constituidos por mezclas de vehculos grasos o lipfilos y emulgentes 0/W, con o
sin componentes hidrfilos. El emulgente que contienen puede ser aninico, cannico,
anfoltico o no inico; por razones de innocuidad se prefieren los ltimos, siempre que
sea posible. Adems de estos emulgentes, se adicionan, muy frecuentemente, alcoholes
 56

grasos (cetlico, estearlico) que, aunque son cmulgentes de signo contrario, tienen la
propiedad de reforzar considerablemente la capacidad emulgente de los anteriores y,
adems, poseen otras ventajas, como la de mejorar la consistencia y estabilidad de las
emulsiones resultantes de la adicin de agua y la propia capacidad de incorporacin de
esta ltima. Sin embargo, aunque estos excipientes pueden incluir cantidades elevadas de
agua, en general no debe adicionarse agua a una base de este tipo en proporcin superior
al 50% dei su peso, ya que la superacin de este lmite produce una disminucin de su
consistencia que les hace perder su condicin de pomadas.

Contrariamente a lo que ocurra con las bases de absorcin, no se emplean aisladamente

casi nunca y se utilizan tan slo para preparar los excipientes tipo emulsin. En el
siguiente se renen diversas frmulas de bases de emulsin 0/W, algunas de las cuales se
incluyen en la BP.

Composicin de algunos bases do emulsin de uso muy extendido en lo preparacin de

medicamentos de aplicacin sobre la piel
AMNI CATINIC NO
CAS A INICA
COMPONENTES Cera Pomada Cera Pomada Base de
emulsiv emulsiva Lonette N9 de Cetrimida emulsin
a (BE) (BE) no fnico
(BE)
Alcohol cetoestearilico (lonetle 90 27 90 27 30
O) 10 3 10 3 10
Cetoestearilsullato sdico 20 20 10
(lanette E) 50 50 50
Cetrimida
Laura sulfato sdico (Texapn
Z)
Parafina lquida
Polisorbato 80 (Tween 80z)
Vaselina blanca

Las bases de emulsin se han clasificado, de acuerdo con el tipo de emulgenie que
 57

contienen, en amnicas, catinicos y no inicos, con el fin de facilitar su eleccin a lo

hora de preparar medicamentos que puedan presentar incompatibilidad onin-cotin

5. Emulsiones 0/W

Pueden obtenerse por adicin de agua a cualquiera de las bases de emulsin que acabamos
de citar, aunque la mayora de estos excipientes se preparan directamente del siguiente
modo:

- Fusin de los componentes grasos a temperatura moderada (60-70 grados).

- Calefaccin, a esta misma temperatura, de los componentes de la fase acuosa.
- Adicin de esta ltima, a porciones, a la fase grasa fundida, y con agitacin suave,
hasta el enfriamiento.

Estos vehculos son lavables, como las bases de las que derivan, con todas las ventajas
que ello comporta. No son tan oclusivas como las bases de absorcin y mucho menos que
los excipientes grasos, pero resultan mucho ms agradables en todos los aspectos y gozan
de mayor aceptacin por parte de los consumidores, especialmente en el campo
cosmtico.

Cuando se aplican sobre la piel, pierden agua por evaporacin con relativa rapidez, lo que
desvirta en parte sus propiedades como vehculos. Por esta razn, se suelen aadir a las
fases acuosas compuestos hidrotrpicos de punto de fusin ms alto que el agua, que
retardan la evaporacin; el ms utilizado es la glicerina, pero tambin lo son el
propilenglicol, el sorbitol y varios polioles.

Si la proporcin de fase acuosa es elevada (>80%) su evaporacin, una vez aplicada sobre
la piel, hace que no dejen residuo apreciable y la piel queda con su aspecto normal (cremas
evanescentes).

Conviene indicar adems, que las emulsiones 0/W son sensibles a la contaminacin
microbiana por lo que casi todas contienen conservantes autorizados que se incorporan
en la fase acuosa.

Asimismo pueden contener antioxidantes, ya que algunos componentes de la fase oleosa

pueden enranciarse con facilidad.

Constituyen buenos vehculos para la aplicacin de medicamentos, son muy utilizados y

existe una gran variedad de formulaciones dentro del grupo.
 58

En el cuadro siguiente se esquematiza la composicin de frmulas representativas de

emulsiones 0/W que se encuentran incluidas en farmacopeas. Estas frmulas deben
tomarse como referencia y pueden modificarse por sustitucin de parte de los
componentes de la fase oleosa para adecuar sus propiedades reolgicas o sus caracteres
organolpticos a un planteamiento especfico.

Composicin de frmulas tipo emulsin 0/W

ANINICAS NO INICA
Ungento hidrfilo Ungento hidrfilo
COMPONENTES Base de Beeler
(USP) (Hele.)
Fase grasa Alcohol esteorlico 25
Alcohol cetlico 15 10
Cera blanca (cera de abeja) 1
Aceite de cacahuete hidrogenado 20
Vaselina blanco 25
Emulgente lauril sulfato sdico (lauril ter 1 2 5
sulfato de sodio genapol )
Polisorbato 60 (Tween 609
Fase acuoso Propilenglicol 12 10 10
Agua purificado 37 72 55

Se incluyen los conservantes lantimicrobiancs, antioxidantes) que es recomendable

adicionar poro garantizar su estabilidad.

6. Excipientes hidrfilos

Son vehculos sin grasas, constituidos por materiales que, por s mismos o en presencia
de agua, adquieren consistencia semislida y son tiles como excipientes para la
aplicacin de frmacos sobre la piel.

No poseen capacidad oclusiva y no favorecen, por s mismos, la penetracin de los

frmacos. A pesar de ello, se consideran muy adecuados como vehculos de diversos
frmacos. Las ventajas de estas bases residen en su accin favorable sobre los tejidos y
su fcil eliminacin por lavado. Sin embargo, presentan algunos inconvenientes, como
son, por una parte, su tendencia a deshidratarse con prdida de su textura original y, por
otra, la necesidad, casi siempre, de adicionar conservantes que garanticen el grado de
pureza microbiana adecuado.
 59

Se explicarn, en primer lugar, las bases hidrfilas susceptibles de ser utilizadas como
excipientes anhidros y, posteriormente, los excipientes que, en presencia de agua, dan
origen a la formacin de geles con consistencia adecuada para constituir una pomada.

Excipientes anhidros

Tienen mayor margen de compatibilidad con los medicamentos y se utilizan en muchos

casos como vehculos de stos. Los ms importantes dentro del grupo son los
polietilenglicoles (macrogoles).

Los elementos de peso molecular 200-700 son lquidos de viscosidad creciente; los de
peso molecular 800-1500 tienen consistencia semislicla, y los superiores, 3.000-6.000
son creos o slidos (Carbowax). Mediante combinaciones en proporcin conveniente de
polietilenglicoles de bajo y elevado peso molecular se obtienen productos que poseen
consistencia de pomadas.

Su ventaja principal es la de ser solubles en agua. A medida que el peso molecular

aumenta, se van haciendo ms y ms compatibles con las grasas, hasta el punto de que
los ltimos forman parte de algunos excipientes grasos.

Un excipiente hidrfilo, de consistencia similar a la de la vaselina filante, es la

denominada pomada de polietilenglicol, oficina! en la Farmacopea de los Estados Unidos,
que se prepara mezclando a 65 grados los siguientes componentes:

Polietilenglicol 400 60%

Polietilenglicol 3000 40%

Es til como excipiente de medicamentos, que se le aaden, generalmente, en suspensin

y, ms raramente, disueltos en agua. Es fcil de extender y posee una buena adherencia a
la piel.

Permite la adicin de hasta un 5% de agua, pero cantidades mayores alteran su

consistencia, que se hace demasiado fluida para su aplicacin como pomada. En estos
casos, se recurre a una modificacin de su composicin adicionando un 10% de alcohol
cetlico (45:45:10), frmula tambin oficinal en la USP, que admite cmodamente
proporciones de agua superiores, hasta el 20%.

Los polietilenglicoles son tiles como vehculos de frmacos, pero poseen algunas
incompatibilidades (compuestos fenlicos, cido benzoico y algunos frmacos
 60

especficos). No obstante, por sus propiedades dermatolgicas, las bases de

polietilenglicol han alcanzado gran difusin. Su utilizacin es especialmente adecuada
para pieles seborreicas. No son irritantes, poseen una buena capacidad de adherencia y
extensibilidad sobre la piel y no impiden la transpiracin gaseosa ni la sudoracin. Su
elevada higroscopicidad hace que se consideren excelentes excipientes para el secado de
heridas; sin embargo, esta propiedad es desfavorable cuando se pretende la penetracin
del medicamento, ya que slo al cabo de un cierto tiempo se equilibran las presiones
osmticas entre la pomada y la piel, momento a partir del cual podr producirse la
penetracin.

Hidrogeles

Los hidrogeles constituyen geles en el sentido "clsico". En general, se obtienen por

esponjamiento limitado de sustancias orgnicas macromoleculares o combinaciones
inorgnicas, mediante procedimientos especiales de acuerdo con los requisitos
especficos de los diferentes agentes formadores de geles. Su contenido en agua es
elevado: 80-90%. El esponjamiento en presencia de agua de estas sustancias cursa con un
incremento de volumen. En el caso de las macromolculas lineales, como, por ejemplo,
los derivados de la celulosa, la cantidad de agua incorporada determina las propiedades
reolgicas de la preparacin que se obtiene, de tal modo que, si sta es pequea, resultan
cuerpos de consistencia elstica, mientras que con una cantidad de agua conveniente se
obtienen sistemas con deformabilidad plstica tiles, por su extensibilidad, como bases
de pomadas.

En el cuadro siguiente se incluyen las principales sustancias utilizadas en la elaboracin

de geles de uso tpico, as como la concentracin necesaria para su preparacin.

En el grupo de los hidrogelificantes inorgnicos se incluye el dixico silcico de alta

dispersin y la bentonita.
- Dixido silcico de alta dispersin. Es ms conocido por su denominacin comercial,
Aerosil, y est constituido por partculas coloidales esfricas de Si02 prcticamente
puro. Se obtiene por pirohidrlisis del SiCI.

Concentracin necesaria de diferentes sustancias gelificantes para obtener, por

dispersin en agua, preparados adecuados para su aplicacin sobre la piel
 61

GELIFICANTE CONCENTRACIN (%)

Sustancias inorgnicas 15-20
Bentonila (Veegum) 15-20
Dixido silcico (aerosol)
Sustancias orgnicos
teres de celulosa
Metilceluloso 3-10
Etilcelulosa 3-10
Hidroxietilcelulosa 10-15
Etilhidroxietilcelulosa 10-15
Carboximetilcelulosa sdico 6-12
cido poliocrlico (Carbopol) 1-5
Alcohol polivinlico (Polyviol) 12-15
Polivinilpirrolidona (Kollidon) 10-15

5.2.4.4 MTODOS GENERALES DE PREPARACIN DE POMADAS

La interposicin de la sustancia medicinal en el excipiente seleccionado es uno de los

aspectos que determinan el procedimiento utilizado en la preparacin de una pomada. De
acuerdo con las caractersticas de solubilidad de los medicamentos, stos pueden
disolverse o bien quedar incorporados en forma de suspensin en el excipiente; se puede
hablar por tanto de pomadas solucin y pomadas suspensin. Sin embargo, en la prctica
no existe una divisin tan clara; por una parte, los medicamentos incorporados en forma
de suspensin en un excipiente presentan una cierta solubilidad, aunque escasa, en el
mismo, y, por otra parte, medicamentos dotados de buena solubilidad en un excipiente,
cuando se preparan a concentraciones elevadas, pueden llegar a sobrepasar la
concentracin de saturacin, por lo que una fraccin del mismo quedar en forma de
suspensin.

Por ltimo, las pomadas elaboradas con bases grasas que contienen adems agua y
emulgentes se denominan pomadas emulsin y tambin cremas; en ellas el medicamento
se incorporar disuelto en una de sus fases (acuosa o grasa) o en forma de suspensin.

Pomadas solucin
 62

Algunos principios activos (alcanfor, mentol, timol) son suficientemente solubles en

vaselina y algunas grasas, de modo que pueden prepararse pomadas solucin. Pero las
pomadas solucin debern prepararse, en la medida de lo posible, a la temperatura que
prevalecer durante su conservacin y almacenaje.

Pomadas suspensin

Constituyen un grupo muy extenso entre las pomadas. Es necesario esforzarse para
conseguir que la sustancia medicinal quede incorporada en forma de partculas muy finas,
como mximo alrededor de 50 micras. Muchas de las sustancias habitualmente utilizadas
se adquieren ya en forma de polvos muy finos (1-10 micras) pero con gran frecuencia y
debido a fenmenos elctricos de superficie, presentan tendencia a formar aglomerados
grandes que debern disgregarse durante la preparacin de la pomada.

Otras sustancias, por su naturaleza, debern triturarse previamente y despus ser

sometidas a un proceso de tamizacin para seleccionar el tamao deseado.

Para la preparacin de estas pomadas el dispositivo ms comnmente utilizado, al menos

a pequea escala, es el mortero. La sustancia medicinal se interpone, muy finamente
pulverizada, con una pequea porcin del excipiente (en fro o en caliente) hasta obtener
una masa homognea. Despus se aade una nueva porcin del excipiente,
aproximadamente igual en masa a la pasta inicial y se mezcla homogneamente. Este
procedimiento se repite varias veces (dilucin geomtrica) hasta que la sustancia
medicinal se encuentre uniformemente dispersada en la totalidad del vehculo. A gran
escala, se recurre a la utilizacin de dispositivos agitadores malaxadores de distinto tipo
y adems se realiza posteriormente una operacin de homogeneizacin en los llamados
refinadores de pomadas.

Pomadas emulsin

La preparacin de las pomadas emulsin se realiza generalmente a temperatura superior

a la ambiente. La fase grasa se calienta a la temperatura de fusin de sus componentes,
generalmente alrededor de 70-72 C. La fase acuosa se calienta a la misma temperatura.
De este modo, la operacin de mezcla ntima de las fases se consigue con ms facilidad.
- Incorporacin simultnea de las fases en el mezclador.
- Adicin de la fase interna sobre la externa.
- Adicin de la fase externa sobre la interna.
 63

Sea cual fuere el mtodo utilizado, la mezcla emulsionada debe mantenerse

en agitacin hasta su enfriamiento. Esto es particularmente importante cuando la fase
grasa est formada por mezclas de hidrocarburos y cidos o alcoholes grasos, ya que al
no ser completamente miscibles los componentes solidificaran por separado durante el
enfriamiento.

Las sustancias medicinales pueden incorporarse disueltas en la fase acuosa o

en la oleosa (segn su solubilidad) o bien se aaden en forma de suspensin de partculas
muy finas. Los aspectos fundamentales que permitan determinar lo ms conveniente en
cada caso estn determinados por factores biofarmacuticos.

Para la elaboracin a escala industrial se emplean cubas de doble pared por

las que se hace circular fluido caliente al principio, para formar emulsin; posteriormente
se hace circular fluido cada vez menos caliente hasta que se alcanza la temperatura
ambiente.

Es bastante frecuente adaptar un equipo de vaco al sistema de fabricacin

con el fin de evitar que se incorpore aire durante la preparacin.

Despus del mezclado puede practicarse, en ocasiones, una operacin de

homogeneizacin. Puede llevarse a cabo en refinadores de cilindros, en molinos
coloidales, en homogeneizadores tipo vlvula o mediante ultrasonidos.

Hay que tener en cuenta que, en general, la homogeneizacin incrementa la

consistencia de las emulsiones debido a un incremento del nmero de gotculas de la
emulsin.

A. Hidrogeles

En la preparacin de pomadas hidrogel intervienen el agua, el agente

gelificante seleccionado, a la concentracin conveniente para obtener la consistencia
adecuada; adems, se requiere la adicin de una sustancia higroscpica como la glicerina,
el propilenglicol o el sorbitol, que impida la desecacin rpida una vez que la preparacin
se aplica sobre la piel. Estas sustancias actan, asimismo, mejorando la elasticidad y
hacen ms fcil la extensin del preparado sobre la superficie cutnea. Es conveniente,
adems, la adicin de un agente antimicrobiano.

Pueden prepararse por imbibicin lenta del agente gelificante en el agua, en

 64

la que previamente se habrn disuelto la sustancia medicinal y los dems componentes.

Si se desea, se puede acelerar el proceso de preparacin mezclando los componentes
mediante agitacin fuerte. Este procedimiento favorece la incorporacin de burbujas de
aire que restan transparencia al gel; sin embargo, si la viscosidad no es demasiado
elevada, el aire incorporado se podr eliminar manteniendo el gel en reposo durante un
tiempo ms o menos prolongado. En el cuadro 6.6 se indican algunas caractersticas de
inters para la formacin y estabilidad de los hidrogeles de uso ms extendido.

5.2.4.5 ESTABILIDAD Y ENSAYOS DE POMADAS

Los ensayos que deben practicarse dependen, en gran medida, del tipo de pomada de que
se trate y del uso a que se destine.

Aspectos que deben ser objeto de ensayo en pomadas

- Estabilidad de los componentes activos

- Estabilidad de los coadyuvantes

- Comportamiento teolgico: consistencia, extensibilidad

- Prdida de agua y otros componentes voltiles

- Homogeneidad: separacin de fases, formacin de exudados

- Tamao de partcula de la tase dispersa: distribucin do tamao pH aparente

- Contaminaciones: partculas extraas, microorganismos

5.2.4.6 ACONDICIONAMIENTO Y CONSERVACIN DE POMADAS

Las pomadas deben conservarse en recipientes cerrados y completamente

llenos y a ser posible a temperatura constante. Variaciones en la temperatura pueden
conducir a cristalizaciones de la sustancia medicinal y a modificaciones importantes en
el excipiente. Habitualmente, las pomadas se envasan en tarros de cristal o plstico o en
tubos flexibles. Las que contengan agua (emulsiones, hidrogeles) u otros componentes
voltiles deben envasarse en recipientes hermticos para prevenir la evaporacin. Las
estriles tienen que dispensarse en tubos, con el fin de proteger el producto durante su
uso, o en recipientes unidosis.
 65

Adems, en las pomadas que, por su contenido en agua, puedan contaminarse

fcilmente por diversos microorganismos, es posible adicionar antimicrobianos para
mejorar su conservacin. La eleccin del adecuado debe realizarse individualmente para
cada tipo de preparacin a la luz de los ensayos realizados con diferentes
microorganismos. Asimismo, las pomadas que contienen excipientes grasos son
susceptibles de autoxidacin con formacin de perxidos y otros productos. Tambin
algunas sustancias medicinales son fotosensibles (compuestos de mercurio, agua
oxigenada, compuestos fenlicos, nitrato de plata, etc.), por lo que el envase deber
garantizar la proteccin de la luz y otros factores ambientales.

5. 2. 5. MTODOS DE OBTENCIN DE EXTRACTOS DE DROGAS

5.2.5.1 FUNDAMENTOS FISICOQUMICOS DE LA EXTRACCIN

FASE DE LAVADO: Al resumir el lquido de extraccin con el material de la droga, las

clulas liberadas por las operaciones de trituracin, ms o menos destrudas, entran en
contacto directo con el disolvente. Los componentes celulares existentes podrn ser
fcilmente tomados por el disolvente o arrastrados por l. Se deduce, pues, que una parte
de las sustancias activas pasa casi instantneamente al disolvente en esta primera fase de
extraccin. Cuando mas fino sea el polvo de la droga tanto ms fcilmente cursa este
proceso de lavado.

FASE DE EXTRACCIN: Los restantes fenmenos son mas complicados, pues para
disolver los componentes de las clulas intactas, el disolvente tiene que penetrar primero
a ellas. Las membranas celulares arrugadas y secas existentes en la droga deben pasar en
primer lugar a un estado tal que permita el paso del disolvente al interior de las clulas.
Esto se consigue por esponjamiento, que produce un aumento del volumen de la
membrana por incorporacin de molculas del disolvente. La capacidad que tienen las
sustancias que constituyen el esqueleto de celulosa para ligar molculas de lquido, da
lugar a que esta estructura celulsica se esponje, producindose espacios intermicelares
que permiten el paso del lquido extractivo hasta el interior de las clulas. Estos
fenmenos son favorables en gran medida por el agua.

La fuerza motriz es el gradiente de concentracin existente entre la solucin situada en el

interior de la clula y el lquido extractivo, toda libre de sustancias activas, situado en el
 66

exterior. Las sustancias endocelulares pasan a lquido extractivo por difusin a travs de
la membrana, hasta alcanzar el equilibrio de concentracin entre las soluciones situadas
en el interior y al exterior de la clula.

5.2.5.2 PERCOLACION O LIXIVIACIN

La lixiviacin se realiza en recipientes cilndricos o cnicos, que poseen

dispositivos adecuados de carga y descarga. El lquido de extraccin se introduce de
forma continua por la parte superior y circula lentamente a travs de la droga que, por lo
general, esta groseramente pulverizada renovando constantemente el lquido, se consigue
prcticamente una maceracin progresiva.

En tanto que, en el caso de la maceracin simple no puede conseguirse el

agotamiento total de la droga, puesto que llega a alcanzarse un equilibrio de concentracin
entre la solucin endocelular y el lquido extracelular, en el caso de la lixiviacin es
tericamente posible la extraccin total (prcticamente se obtiene hasta el 95% de
sustancias extrables) gracias al aporte constante de disolvente nuevo y al continuo
descenso de concentracin que ello implica.
 67

CAPITULO 2

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN

1 TIPO Y DISEO DE LA INVESTIGACIN

1. 1. TIPO

La presente investigacin es de tipo Experimental.

1. 2. DISEO

El diseo es completamente aleatorizado, con el mismo tamao de muestra y con la

presencia de un placebo.

2 MUESTRA

2. 1. UNIDAD EXPERIMENTAL
 68

La unidad experimental est constituida por la especie Rattus rattus Albina Swiss, con un
peso promedio de 260g, con edades de aproximadamente de 6 meses. Antes y durante el
experimento las unidades experimentales fueron sometidas a las mismas condiciones
dietticas.

Total de unidades experimentales:

El total de unidades experimentales fue de 12.

2. 2. MATERIAL BOTNICO

El material botnico eran las partes areas de la ortiga colorada Cajophora rosulata.

3 TCNICAS E INSTRUMENTOS

3. 1. TCNICAS

Para la evaluacin de la inflamacin se utilizo medidas biofisiolgicas.

3. 2. INSTRUMENTOS

3. 2. 1. DE VIDRIO:

- Vasos de precipitado graduados de 100ml, 250ml y 500ml

- Varillas de agitacin

- Probeta graduada de 100ml

- Perlas de vidrio.

- Frascos de vidrio color caramelo con tapa hermtica.

- Embudos

3. 2. 2. EQUIPOS DE LABORATORIO

- Balanza de precisin

- Equipo de percolacin
 69

- Equipo para Bao mara.

- Estufa

3. 2. 3. REACTIVOS

- Carragenina 2%

- Propilenglicol PA. Delta qumica

- Metilparbeno

- Propilparabeno

- Agua purificada. Delta qumica

- Lauriletil sulfato de sodio. Genapol. Delta qumica

- Suero fisiolgico al 9%

- Alcohol cetlico.

- Cera pura blanca de abejas.

3. 2. 4. OTROS

- Esptulas de acero con mango de madera

- Termmetros

- Jeringa hipodrmica 3ml/aguja N 22 x

- Jeringa de tuberculina 1ml/ aguja N 27 x

4 TCNICAS DE RECOLECCIN Y PROCESAMIENTO.

4. 1. RECOLECCIN DEL MATERIAL BOTNICO

La ortiga colorada fue recolectada de la zona de Chiguata, siendo la hora de la colecta a

las 9 de la maana, mediante tijeras se retiraron las sumidades floridas de especies adultas
en perodo de floracin, aproximadamente a unos 20 cm del tallo principal.
 70

4. 2. MTODO DE OBTENCIN DEL EXTRACTO DE LA DROGA

La droga est constituida por las partes areas de Cajophora rosulata, luego de la colecta
se realiz lo siguiente:

- Recoleccin: Se hizo una seleccin del material vegetal, para retirar cuerpos
extraos o material en malas condiciones.

- Estabilizacin: Se realiz en estufa previamente calentada a 80C, durante 1

minuto.

- Desecacin: Mediante estufa a 40 a 50C durante 14 horas.

- Trituracin: Se utiliz un molino de platos, hasta obtener un grado de trituracin

moderado y til para la percolacin.

- Percolacin: Con tal fin se utiliz un percolador, que se cargo con el menstruo
constituido por 200 ml de propilenglicol, y 40 g de droga triturada. La extraccin
se realiz a una velocidad de goteo de 14 gotas por minuto, durante 24 horas. Al
final se obtuvo un percolado o extracto gliclico.

- Acondicionamiento: El extracto gliclico se rotulo y se envas en un frasco de

vidrio color caramelo con cierre hermtico.

4. 3. MTODO DE PREPARACIN DE LA CREMA

Se procedi de acuerdo al mtodo de preparacin de pomadas emulsin.

4. 4. MTODO PARA LA EVALUACIN BIOLGICA

4. 4. 1. INDUCCIN DE EDEMA SUBPLANTAR MEDIANTE CARRAGENINA

AL 1%.

A las unidades experimentales se les indujo edema subplantar mediante carragenina, para
luego ser tratadas con la crema con extracto gliclico de la droga.

4. 4. 2. DISEO

Aleatorio
 71

4. 4. 3. TRATAMIENTOS

Se procedi a realizar los tratamientos a los grupos denominados: GI, G2, G3, G4 y G5;
que consistan en:

- G1: Formulacin de la crema con extracto gliclico de Cajophora rosulata al

20%.

- G2: Formulacin comercial de etofenamato al 20%.

- G3: Formulacin de la base de la crema sin extracto (placebo).

- G4: Grupo control tratado con carragenina al 1%

- G5: Grupo tratado con solucin de NaCl al 0.9%

4. 4. 4. PROCEDIMIENTO

Se produce por la administracin de subcutnea de una solucin de carragenina a nivel

de la aponeurosis plantar de la rata provocando una reaccin de carcter inflamatorio.

La carragenina al 1% se disuelve en suero fisiolgico, luego se administra en la regin

subplantar. El producto a ensayar se puede administrar por diferentes vas:
intraperitoneal, oral, etc. La respuesta vascular mxima ocurre aproximadamente a las 3
a 4 horas de administrado la carragenina y coincide con la fase medida por las
prostaglandinas. Para nuestro experimento utilizamos la va subcutnea.

La medida del volumen de la pata inyectada y de la pata control, se realiza por medicin
con la ayuda de vernier milimtrico, a la altura del lugar de inyeccin en la aponeurosis
plantar. Las mediciones fuero cada 4 horas, despus de la aplicacin.

4. 4. 5. EVALUACIN Y REGISTRO

Transcurrida 1 hora de la infiltracin de carragenina al 1% se proceder a aplicar los

tratamientos cada 4 horas, luego de 24 horas se realizar la ltima medicin mediante
vernier milimtrico.
 72

4. 4. 6. TRANSFORMACIN DE LOS DATOS

Para evaluar el porcentaje de inhibicin los milmetros medidos mediante vernier en la

pata de los animales de experimentacin se transformaron mediante la siguiente frmula:

(C T )
% Inhibicin x 100
T

DONDE:

C= Incremento del espesor de la pata del grupo control.

T= Incremento del espesor de la pata del grupo tratado con la droga

en estudio.

4. 4. 7. MTODOS ESTADSTICOS

4.4.7.1 PARMETROS DE DISTRIBUCIN

Promedio

X
(X )
n

4.4.7.2 PARMETROS DE DISPERSIN

Varianza:

S2 (X X )
n 1

Desviacin estndar

D.S . (X X ) 2

n 1

4.4.7.3 ANLISIS DE LA VARIANCIA (ANOVA)

 73

Esta es una prueba de significancia, la cual tiene como objetivo demostrar

estadsticamente si el efecto hallado al aplicar los tratamientos es debido a los mismos (al
extracto de la droga) o a causas fuera de los tratamientos (como por ejemplo variabilidad
biolgica de los animales de experimentacin.

Se considera que existen dos nicas fuentes de variacin, entre grupos y dentro de los
grupos, como se indica en la tabla de anlisis de varianza. Los cuadrados de las medias
se obtienen dividiendo las sumas de los cuadrados por sus correspondientes grados de
libertad.

La frmula para calcular la relacin F es:

cuadrado d elas medias entre grupos

F
cuadrado de las medias dentro de los grupos

Para probar la significacin en la relacin F se recurre a la tabla del ANEXO. Se analiza

si el valor calculado para F es menor o mayor que el que se indica en las tablas de acuerdo
a los grados libertad para cada cuadrado. En el primer caso si es menor se concluir
que todas las medias de los grupos son iguales, en caso contrario si es mayor se
concluir que no todos los grupos son iguales, es decir, entre algunos o todos existe una
diferencia estadstica significativa.

4.4.7.4 PRUEBA DE SIGNIFICACIN

MTODO

Prueba HSD de Tukey

FUNDAMENTO

Se trata de una prueba de comparacin mltiple, se utiliza con frecuencia para probar la
hiptesis nula de que todos los pares de medias posibles de tratamientos son iguales si el
tamao de todas las muestras es igual. Se basa en el anlisis de variancia, siempre y
cuando est, es significativa, de ser as se procede a averiguar cul de ellos fue ms
eficiente o ms especfico.

Si se utiliza esta prueba es necesario seleccionar un nivel de significacin total de

p=0.05, esta prueba utiliza la siguiente frmula:
 74

CM residual
HSD q ,k , N k
n

DONDE:

q= valor hallado en tablas al 95% (VER ANEXO 3)

k= nmero de medias de los grupos en el experimento

N= cantidad total de observaciones

N= nmero de observaciones en el tratamiento.

5 PLAN EXPERIMENTAL

Se realiz conforme al croquis que se detalla en el ANEXO 1.

 75

CAPITULO III

RESULTADOS DE LA INVESTIGACIN
El presente trabajo de experimentacin se realiz con el objetivo de evaluar
el efecto antiinflamatorio de la crema elaborada a partir del extracto gliclico de
Cajophora rosulata (ortiga colorada) al 20% en el edema inducido experimentalmente en
ratas.

En primer lugar se considero dentro de los mtodos de obtencin de extractos

a partir de drogas vegetales, al de percolacin con propilenglicol como el ms adecuado
para obtener un extracto de ortiga colorada. Se escogi este mtodo a priori debido a que
es una extraccin continua y en frio, lo que contribuye en su eficiencia y no resulta muy
drstico para el complejo activo respectivamente.

El equipo de percolacin tuvo que ser acondicionado ya que actualmente su

adquisicin se hace muy honerosa y es bastante escasa. Este acondicionamiento se hizo
de forma tal que resulte muy similar a un equipo de percolacin o lixiviacin fabricado.
 76

Primero se cort por la base una botella de vidrio color oscuro, de forma lo
ms prxima a un cono y de cuello largo, de 600 ml de capacidad. En la boca se coloc
una torunda de algodn como medio filtrante. Como recipiente para el disolvente se
utiliz un frasco plstico vaci de dextrosa, al cual se le incorpor un equipo de venoclisis
como sistema de control de goteo. Tanto la botella cortada e invertida como el frasco de
plstico se asieron mediante pinzas de sujecin a un soporte universal (VER FIGURA
N1).

FIGURA N1: Equipo de percolacin para la

obtencin del extracto

En segundo lugar se peso 40 g de la droga sumidades floridas previamente

estabilizadas, desecadas, con un grado de trituracin moderado y humedecidas con un
poco de disolvente y se procedi a cargar el percolador, y se procedi a cubrir con papel
filtro y perlas de vidrio. En el recipiente de plstico se coloco 200 ml de propilenglicol.
Iniciada la percolacin se sincroniz la velocidad de goteo del equipo venoclisis y la del
percolador a 14 gotas por minuto. La extraccin completa duro aproximadamente 24
horas.
 77

Finalmente se recogi el percolado o extracto, que tena las siguientes

caractersticas organolpticas: color verde oscuro, olor caracterstico a hierba y de
aspecto lmpido, se procedi a acondicionarlos en frascos de vidrio color caramelo con
cierre hermtico, de tamao casi coincidente con el total de extracto, para reducir la
cmara de aire y evitar procesos oxidativos, se le coloc un rotulo (VER FIGURA N2)
y se almaceno hasta realizar los procesos siguientes.

FIGURA N2: Extracto gliclico de Cajaphora

rossulata (ortiga colorada)

Para la elaboracin de la crema de dejo en reposo el extracto durante 48 horas

y lograr la sedimentacin, y decantacin, evitando as partculas que afecten los caracteres
organolpticos de la formas semislida.

La formulacin de la crema corresponde a una emulsin O/W, que se

caracteriza por ser fcilmente aclarable en agua, particularidad que tambin presenta la
crema de etofenamato. La frmula de la preparacin es la siguiente:

Crema de extracto gliclico al 20% de Cajophora rosulata:

Alcohol cetlico 15 g

Cera de abejas refinada 1g

Laurileter sulfato de sodio 2g

Extracto gliclico al 20 % de Cajophora rosulata 10 g

 78

Agua conservante csp 100 g

En dicha frmula constituye la fase acuosa el agua y el extracto gliclico y la

fase oleosa el alcohol cetlico y la cera de abejas refinada.

Tcnica de preparacin

Se verific el funcionamiento y la limpieza de la balanza.

Se pes los componentes de la formulacin.

Se verific la limpieza de los materiales a utilizar para la preparacin de la crema.

Se procedi a preparar el agua conservante, la que se reuni con el extracto

gliclico constituyendo la fase acuosa.

Se disolvi el laurileter sulfato de sodio en la fase acuosa mediante agitacin.

La fase oleosa se reuni en recipiente aparte.

Tanto la fase oleosa y la fase acuosa de llevo a bao mara, controlando la

temperatura a 60C, hasta la fundicin de los componentes de la fase oleosa.

Luego se procedi a la emulsin, incorporando la fase acuosa sobre la oleosa,

mediante agitacin constante hasta su enfriamiento.

Se traslado la emulsin a un mortero para su total homogenizacin y refinamiento.

Posteriormente se envas en un pote, siempre teniendo cuidado de lograr una

cmara de aire mnima.

Finalmente se procedi a la evaluacin biolgica de la actividad

antiinflamatoria que consisti en la induccin o formacin de edemas experimentales
mediante infiltracin de carragenina subcutnea plantar en ratas, sobre las que se
administr los diferentes tratamientos. Para lo que se estableci los siguientes grupos que
recibieron el tratamiento detallado a continuacin:

G1: Formulacin de la crema con extracto gliclico de Cajophora rosulata al

20%; G2: Formulacin comercial de etofenamato al 20%; G3: Formulacin de la base de
la crema sin extracto (placebo); G4: Grupo control tratado con carragenina al 1%; G5:
Grupo tratado con solucin de NaCl al 0.9%; de los que se recogi resultados a las 4, 8,
 79

12, 24 y 48 horas, por medio de la determinacin del espesor promedio de la pata

inflamada.

Estas mediciones en milmetros provienen de las 3 patas inflamadas

provenientes de cada grupo a los diferentes tiempos, siendo la primera medida pasada la
primera hora de administracin de carragenina.

En el cuadro N 1 observamos los espesores en milmetros promedio de los

distintos tratamientos a diferentes horas, el mismo nos presenta la disminucin progresiva
del espesor de la pata inflamada, adems se anota su respectiva desviacin estndar, con
el fin de hacer ms notoria esta disminucin se hall el incremento de la inflamacin en
milmetros con respecto al grupo control de ClNa; estos valores se encuentran en el
cuadro N2, que tambin muestra el promedio ms la desviacin estndar.

En la FIGURA N 3 observamos que existe actividad antiinflamatoria

marcada frente al placebo y el control con carragenina, sin embargo, frente a la crema de
etofenamato las diferencias son mnimas, a pesar de que el etofenamato es un
mdicamento de sntesis y la crema de ortiga un producto natural.

En el cuadro N3 se muestra los resultados del porcentaje de inhibicin del

edema con respecto al control segn la ecuacin que se detalla en el captulo anterior, el
cuadro muestra la inhibicin producida por los tratamientos a los tiempos 4, 8, 12, 24 y
48 horas, notamos que durante todo el experimento la crema de ortiga colorada al 20%
tiene un efecto comparable a la crema de etofenamato al 10%, este resultado tambin se
puede apreciar mas notoriamente en la figura N4, por lo que la crema de ortiga colorada
puede considerarse una buena alternativa para el tratamiento tpico de un proceso
inflamatorio.
 80

CUADRO N 1: Promedio del espesor de la pata inflamada en ratas con los distintos tratamientos de las cremas aplicados a diferentes
horas

GRUPOS DE TRATAMIENTOS CONTROLES

Promedio Desviacin estndar Promedio Desviacin estandar

Tiempo
Crema con extracto
(horas) Crema de Base de emulsin Con carragenina al
de Ortiga colorada Con ClNa al 0.9%
etofenamato al 10% (placebo) 1%
al 20%

4 6.1000 0.3606 5.2667 1.1015 6.2333 0.1528 6.2333 0.6658 2.5333 0.0577

8 5.5667 0.3215 5.1333 1.2503 5.6667 0.5859 5.8333 0.8505 2.6333 0.0577

12 4.8000 0.3606 4.5667 1.4012 4.8667 0.2517 4.9667 0.4509 2.7000 0.7506

24 3.3667 0.3786 3.7333 0.7371 4.0000 0.1000 4.1000 0.1000 2.6667 0.1155

48 2.6000 0.0000 2.6333 0.0577 2.8333 0.1155 2.9000 0.1000 2.6000 0.0000

Fuente: Elaboracin propia

 81

CUADRO N 2: Promedio del Incremento en milmetros de la pata inflamada en ratas con los distintos tratamientos de las cremas aplicados
a diferentes horas

GRUPOS DE TRATAMIENTO CONTROLES

Promedio Desviacin estndar Promedio Desviacin estandar

Tiempo
Crema con extracto
(horas) Crema de Base de emulsin Con carragenina al
de Ortiga colorada Con ClNa al 0.9%
etofenamato al 10% (placebo) 1%
al 20%

4 3.5667 0.4041 2.7333 1.1504 3.7000 0.1732 3.7000 0.6083 0.0000 0.000

8 2.9333 0.3786 2.5000 1.2288 3.0333 0.6429 3.2000 0.7937 0.0000 0.0000

12 3.2500 1.0408 2.6167 1.6166 3.3667 0.9866 3.4500 0.4509 0.0000 0.0000

24 0.7000 0.2631 1.0667 0.7095 1.3333 0.2082 1.4333 0.1528 0.0000 0.0000

48 0.0000 0.0000 0.0333 0.0333 0.2333 0.2333 0.3000 0.3000 0.0000 0.0000

Fuente: Elaboracin propia

 82

FIGURA N 3: Promedio del espesor de la pata inflamada por el mtodo del edema inducido con carragenina al 1% en ratas.
 83

CUADRO N 3: Porcentaje de inhibicin de la inflamacin del edema en pata

inducido por carragenina en ratas tratadas con crema de ortiga colorada
(Cajophora rosulata).

Crema de
Crema de
ortiga Base de
Tiempo etofenamato
colorada al emulsin
al 10%
20%

4 horas 3.60% 26.13% 0.00%

8 horas 8.33% 21.88% 5.21%

12 horas 8.62% 20.69% 5.17%

24 horas 51.16% 25.58% 6.98%

48 horas 100.00% 88.90% 22.23%

Fuente: Elaboracin propia

 84

FIGURA N4: Porcentaje de inhibicin de la inflamacin en el edema plantar

inducido experimentalmente en ratas con carragenina.
 85

Para un anlisis correcto de los resultados se utiliz parmetros estadsticos

que nos sirven como gua para determinar si existi diferencias estadsticamente
significativas, en los tratamientos realizados para los distintos grupos en distintos
tiempos, cuadros que se pasan a detallar a continuacin:

CUADRO N 4: Parmetros de distribucin de los tratamientos aplicados a las 4

horas.

Crema con
extracto de Crema de Base de
Parmetros de
Ortiga etofenamato emulsin
distribucin
colorada al al 10% (placebo)
20%

Promedio(mm) 6.1000 5.2667 6.2333

Desviacin
0.3606 1.1015 0.1528
estndar

Varianza 0.1300 1.2133 0.0233

Fuente: Elaboracin propia

En el cuadro observamos que el promedio del espesor de la pata tratada con

crema de ortiga colorada es menor con relacin al grupo placebo, sin embargo la crema
de etofenamato, presenta el menor espesor.

Con relacin a la desviacin estndar existe diferencia significativa, entre la

crema con extracto de ortiga y la base de emulsin.

Se aplic un anlisis de varianza con el fin de hacer una comparacin entre

medias y evaluar si las diferencias son reales significativas o es que se deben al azar,
para el tratamiento aplicado a las 4 horas.
 86

CUADRO N 5: Anlisis de la varianza (ANOVA) de las mediciones del espesor de

la pata inflamada por carragenina, luego de 4 horas del primer tratamiento.

Origen de la Grados Suma de los Promedio de

F
variacin libertad cuadrados los cuadrados

Entre grupos 4 30.1027 7.5257 20.7509

Dentro de los 10 3.6267 0.3627

grupos

Total 14 33.7293

Fuente: Elaboracin propia

El valor de F calculado se compar con el valor tabulado (ver ANEXO N2)

de la siguiente forma

3.478 < 20.7509

F terico < F prctico

Como se observa, el valor de F prctico es mucho mayor que el de F terico,

por lo tanto, las diferencias en las mediciones del espesor de la pata inflamada observadas
son reales y no debido al azar.

Luego de este anlisis haba que determinar entre quienes exista dicha
diferencia significativa y entre quienes no la exista, con este fin se aplic la prueba HSD
de Tukey, que realiza todas las comparaciones posibles de las medias de los grupos
sometidos a experimentacin, se utiliza cuando los tamaos de las muestras son iguales,
para probar o rechazar la hiptesis nula.
 87

CUADRO N 6: Prueba HSD de Tukey (=0.05) aplicado a los distintos grupos

aplicados a las 4 horas

GRUPOS Diferencia entre Decisin estadstica HSD

Promedios de Tukey

G1 vs G2 0.8333 Rechazado

G1 vs G3 0.1333 Rechazado

G1 vs G4 0.1333 Rechazado

G2 vs G3 0.9667 Rechazado

G2 vs G4 0.9667 Rechazado

G3 vs G4 0.0000 Rechazado

Fuente: Elaboracin propia

Al aplicar la prueba HSD para los distintos tratamientos a las 4 horas,

comparamos las medias de los mismos.

Al comparar la crema de ortiga al 20% con la crema de etofenamato al 10%,

observamos que son estadsticamente iguales, del mismo modo ocurre al comparar el
etofenamato con la base, y entre estos. Del mismo modo ocurre al comparar la crema de
ortiga colorada al 20% con la base de emulsin, a un nivel de confianza del 95%.
 88

CUADRO N 7: Parmetros de distribucin de los tratamientos aplicados a las 8

horas.

Crema con
extracto de Crema de Base de
Parmetros de
Ortiga etofenamato emulsin
distribucin
colorada al al 10% (placebo)
20%

Promedio(mm) 5.5667 5.1333 5.6667

Desviacin
0.3215 1.2503 0.5859
estndar

Varianza 0.1033 1.5633 0.3433

Fuente: Elaboracin propia

En el cuadro observamos que el promedio del espesor de la pata tratada con

crema de ortiga colorada es menor con relacin al grupo placebo, sin embargo la crema
de etofenamato, presenta el menor espesor.

Con relacin a la desviacin estndar existe diferencia significativa, entre la

crema con extracto de ortiga y la base de emulsin.

Se aplic un anlisis de varianza con el fin de hacer una comparacin entre

medias y evaluar si las diferencias son reales significativas o es que se deben al azar,
para el tratamiento aplicado a las 4 horas.
 89

CUADRO N 8: Anlisis de la varianza (ANOVA) de las mediciones del espesor de

la pata inflamada por carragenina, luego de 8 horas del primer tratamiento.

Origen de la Grados Suma de los Promedio de

F
variacin libertad cuadrados los cuadrados

Entre grupos 4 21.22 5.305 9.6924

Dentro de los 10 5.4733 0.5473

grupos

Total 14 26.6933

Fuente: Elaboracin propia

El valor de F calculado se compar con el valor tabulado (ver ANEXO 0000)

de la siguiente forma

3.478 < 9.6924

F terico < F prctico

Como se observa, el valor de F prctico es mucho mayor que el de F terico,

por lo tanto, las diferencias en las mediciones del espesor de la pata inflamada observadas
son reales y no debido al azar.

Luego de este anlisis haba que determinar entre quienes exista dicha
diferencia significativa y entre quienes no la exista, con este fin se aplic la prueba HSD
de Tukey, que realiza todas las comparaciones posibles de las medias de los grupos
sometidos a experimentacin, se utiliza cuando los tamaos de las muestras son iguales,
para probar o rechazar la hiptesis nula.
 90

CUADRO N 9: Prueba HSD de Tukey (=0.05) aplicado a los distintos grupos

aplicados a las 8 horas

GRUPOS Diferencia entre Decisin estadstica HSD

Promedios de Tukey

G1 vs G2 0.4333 Rechazado

G1 vs G3 0.1 Rechazado

G1 vs G4 0.2667 Rechazado

G2 vs G3 0.533 Rechazado

G2 vs G4 0.7 Rechazado

G3 vs G4 0.1667 Rechazado

Fuente: Elaboracin propia

Al aplicar la prueba HSD para los distintos tratamientos a las 8 horas,

comparamos las medias de los mismos.

Al comparar la crema de ortiga al 20% con la crema de etofenamato al 10%,

observamos que son estadsticamente iguales, del mismo modo ocurre al comparar el
etofenamato con la base, y entre estos. Del mismo modo ocurre al comparar la crema de
ortiga colorada al 20% con la base de emulsin, a un nivel de confianza del 95%.
 91

CUADRO N 10: Parmetros de distribucin de los tratamientos aplicados a las 12

horas.

Crema con
extracto de Crema de Base de
Parmetros de
Ortiga etofenamato emulsin
distribucin
colorada al al 10% (placebo)
20%

Promedio(mm) 4.8000 4.5667 4.8667

Desviacin
0.3606 1.4012 0.2517
estndar

Varianza 0.1300 1.9633 0.0633

Fuente: Elaboracin propia

En el cuadro observamos que el promedio del espesor de la pata tratada con

crema de ortiga colorada es menor con relacin al grupo placebo, sin embargo la crema
de etofenamato, presenta el menor espesor.

Con relacin a la desviacin estndar no existe diferencia significativa, entre

la crema con extracto de ortiga y la base de emulsin.

Se aplic un anlisis de varianza con el fin de hacer una comparacin entre

medias y evaluar si las diferencias son reales significativas o es que se deben al azar,
para el tratamiento aplicado a las 4 horas.
 92

CUADRO N 11: Anlisis de la varianza (ANOVA) de las mediciones del espesor

de la pata inflamada por carragenina, luego de 12 horas del primer tratamiento.

Origen de la Grados Suma de los Promedio de

F
variacin libertad cuadrados los cuadrados

Entre grupos 4 10.844 2.711 5.6715

Dentro de los 10 4.78 0.478

grupos

Total 14 15.624

Fuente: Elaboracin propia

El valor de F calculado se compar con el valor tabulado (ver ANEXO 0000)

de la siguiente forma

3.478 < 5.6715

F terico < F prctico

Como se observa, el valor de F prctico es mucho mayor que el de F terico,

por lo tanto, las diferencias en las mediciones del espesor de la pata inflamada observadas
son reales y no debido al azar.

Luego de este anlisis haba que determinar entre quienes exista dicha
diferencia significativa y entre quienes no la exista, con este fin se aplic la prueba HSD
de Tukey, que realiza todas las comparaciones posibles de las medias de los grupos
sometidos a experimentacin, se utiliza cuando los tamaos de las muestras son iguales,
para probar o rechazar la hiptesis nula.
 93

CUADRO N 12: Prueba HSD de Tukey (=0.05) aplicado a los distintos grupos
aplicados a las 12 horas

GRUPOS Diferencia entre Decisin estadstica HSD

Promedios de Tukey

G1 vs G2 0.2333 Rechazado

G1 vs G3 0.0667 Rechazado

G1 vs G4 0.1667 Rechazado

G2 vs G3 0.3 Rechazado

G2 vs G4 0.4 Rechazado

G3 vs G4 0.1 Rechazado

Fuente: Elaboracin propia

Al aplicar la prueba HSD para los distintos tratamientos a las 12 horas,

comparamos las medias de los mismos.

Al comparar la crema de ortiga al 20% con la crema de etofenamato al 10%,

observamos que son estadsticamente iguales, del mismo modo ocurre al comparar el
etofenamato con la base, y entre estos. Del mismo modo ocurre al comparar la crema de
ortiga colorada al 20% con la base de emulsin, a un nivel de confianza del 95%.
 94

CUADRO N 13: Parmetros de distribucin de los tratamientos aplicados a las 24

horas.

Crema con
extracto de Crema de Base de
Parmetros de
Ortiga etofenamato emulsin
distribucin
colorada al al 10% (placebo)
20%

Promedio(mm) 3.3667 3.7333 4.0000

Desviacin
0.3786 0.7371 0.1000
estndar

Varianza 0.1433 0.5433 0.0100

Fuente: Elaboracin propia

En el cuadro observamos que el promedio del espesor de la pata tratada con

crema de ortiga colorada es menor con relacin al grupo placebo, sin embargo la crema
de etofenamato, presenta el menor espesor.

Con relacin a la desviacin estndar existe diferencia significativa, entre la

crema con extracto de ortiga y la base de emulsin.

Se aplic un anlisis de varianza con el fin de hacer una comparacin entre

medias y evaluar si las diferencias son reales significativas o es que se deben al azar,
para el tratamiento aplicado a las 4 horas.
 95

CUADRO N 14: Anlisis de la varianza (ANOVA) de las mediciones del espesor

de la pata inflamada por carragenina, luego de 24 horas del primer tratamiento.

Origen de la Grados Suma de los Promedio de

F
variacin libertad cuadrados los cuadrados

Entre grupos 4 4.0493 1.0123 7.0301

Dentro de los 10 1.44 0.144

grupos

Total 14 5.4893

Fuente: Elaboracin propia

El valor de F calculado se compar con el valor tabulado (ver ANEXO 0000)

de la siguiente forma

3.478 < 7.0301

F terico < F prctico

Como se observa, el valor de F prctico es mucho mayor que el de F terico,

por lo tanto, las diferencias en las mediciones del espesor de la pata inflamada observadas
son reales y no debido al azar.

Luego de este anlisis haba que determinar entre quienes exista dicha
diferencia significativa y entre quienes no la exista, con este fin se aplic la prueba HSD
de Tukey, que realiza todas las comparaciones posibles de las medias de los grupos
sometidos a experimentacin, se utiliza cuando los tamaos de las muestras son iguales,
para probar o rechazar la hiptesis nula.
 96

CUADRO N 15: Prueba HSD de Tukey (=0.05) aplicado a los distintos grupos
aplicados a las 24 horas

GRUPOS Diferencia entre Decisin estadstica HSD

Promedios de Tukey

G1 vs G2 0.3667 Rechazado

G1 vs G3 0.6333 Rechazado

G1 vs G4 0.7333 Rechazado

G2 vs G3 0.2667 Rechazado

G2 vs G4 0.3667 Rechazado

G3 vs G4 0.1 Rechazado

Fuente: Elaboracin propia

Al aplicar la prueba HSD para los distintos tratamientos a las 24 horas,

comparamos las medias de los mismos.

Al comparar la crema de ortiga al 20% con la crema de etofenamato al 10%,

observamos que son estadsticamente iguales, del mismo modo ocurre al comparar el
etofenamato con la base, y entre estos. Del mismo modo ocurre al comparar la crema de
ortiga colorada al 20% con la base de emulsin, a un nivel de confianza del 95%.
 97

CAPITULO IV

DISCUSIN DE RESULTADOS DE LA INVESTIGACIN

1. Se ha incorporado un extracto gliclico de Cajophora rosulata (ortiga colorada)

al 20 %, para tratamiento tpico de la inflamacin a travs de la siguiente
formulacin:

Alcohol cetlico 15 g

Cera de abejas refinada 1g

Laurileter sulfato de sodio 2g

Extracto gliclico al 20 % de Cajophora rosulata 10 g

Agua conservante csp 100 g

 98

2. Al observar los resultados de la investigacin observamos que la crema de

Cajophora rosulata al 20%, tiene una eficacia similar a la crema de etofenamato
al 10%. Ambas formulaciones contribuyen en la disminucin del edema plantar.

3. El anlisis estadstico a travs de la observacin de los promedios, desviacin

estndar y anlisis de la variancia, sealan que las diferencias entre los grupos de
tratamiento son reales y no producto del azar. Es decir existe diferencias
estadsticamente significativas.

4. A travs de la prueba de Tukey, corroboramos que no existen diferencias entre las

medias significativas de los grupos de tratamiento, esto es, de etofenamato, de
ortiga colorada y la base de emulsin, frente a los grupos control, confirmando as
el objetivo de las formas semislidas que tienen como objetivo el alivio de la
inflamacin, de ser coadyuvantes del tratamiento de fondo que puede ser va per
os o por una va parenteral y muchas por sus olores aromticos tienen un efecto
placebo aadido.

5. En conclusin una crema con extracto gliclico de ortiga colorada al 20% muestra
efecto antiinflamatorio similar a la crema de etofenamato al 10%, a travs de
estudios preclnicos en animales de experimentacin.
 99

CAPITULO V

SUGERENCIAS PARA LA INVESTIGACIN

Al terminar el presente trabajo de investigacin, y demostrar el efecto

antiinflamatorio, y adems, luego de hacer una observacin crtica de nuestro estudio
proponemos las siguientes sugerencias para investigacin futura complementaria, de la
especie bajo estudio:

1. Realizar la marcha fitoqumica completa para identificar la naturaleza qumica de

los complejos activos presentes en la droga.

2. Repetir la investigacin en otros animales de experimentacin, para corroborar el

efecto antiinflamatorio de la droga.

3. Durante la investigacin se observo que la crema de ortiga colorada, otorgaba un

efecto analgsico en las ratas, al notarlas mas calmadas frente a otros grupos, por
lo que se sugiere realizar una investigacin para evaluar el efecto analgsico de la
ortiga colorada, efecto denunciado tambin en su uso tradicional.
 100

4. Realizar estudios de la actividad antiinflamatoria, utilizando vas sistmicas a

travs de otras formas farmacuticas.

5. Realizar un estudio para

6. Realizar un estudio de toxicidad de la droga en animales de experimentacin.

 101

BIBLIOGRAFA

1. GARCIA GUTIERREZ, ZEA CHAVEZ: Efecto antiinflamatorio tpico de la

asociacin de Uncaria tomentosa (Ua de gato) y Calendula officinalis (calndula)
en el edema inducido experimentalmente en ratas

2. KUCKLINSKI, Claudia: Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de

origen natural, Editorial Omega S.A. Barcelona Espaa. 2000.

3. POLIT HUNGLER: Investigacin Cientfica en Ciencias de la Salud. Sexta Edicin.

Editoria Mc Graw-Hill Interamericana. Mxico 2000.

4. PR VADEMECUM, Editorial Cientfica Propesa, Edicin 2008.

5. RODES TEIXIDOR, GUARDIA MASS: Medicina Interna. Editorial Masson SA.

Espaa 1997.

6. SOTTA APAZA, Norma. Plantas Aromticas y Medicinales de la Regin

Arequipa. Editores Akuarella, Arequipa 2001.

7. THOMSON PLM PER, Diccionario de Especialidades Farmacuticas, Edicin 19,

2007.

8. THOMSON PLM PER, Diccionario de Especialidades Farmacuticas, Edicin 19,

2008.

9. VILA JATO, J.L.: Tecnologa Farmacutica, Primera reimpresin 2001. Editorial

Sntesis SA.

10. WAYNE DANIEL: Bioestadstica, Bases para el anlisis de las Ciencias de la Salud.
4 Edicin, Editorial Limusa SA. 2007.
 102

ANEXOS
 103

ANEXO N1: CROQUIS DEL EXPERIMENTO EN LOS GRUPOS DE TRATAMIENTO.

Tiempo Tratamiento G1: Tratamiento G2: Tratamiento G4: Tratamiento G1:

Tratamiento G3: Base
en crema de ortiga crema de etofenamato control con control con ClNa al
de emulsin.
horas colorada al 20%. al 10%. carragenina 2% 0.9%

Medir el espesor de la Medir el espesor de la Medir el espesor de la Medir el espesor de la Medir el espesor de la
0
pata de rata pata de rata pata de rata pata de rata pata de rata

Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor de Medicin del espesor de
4
aplicacin de la crema aplicacin de la crema aplicacin de la crema la pata de rata la pata de rata

Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor de Medicin del espesor de
8
aplicacin de la crema aplicacin de la crema aplicacin de la crema la pata de rata la pata de rata

Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor de Medicin del espesor de
12
aplicacin de la crema aplicacin de la crema aplicacin de la crema la pata de rata la pata de rata

Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor de Medicin del espesor de
24
aplicacin de la crema aplicacin de la crema aplicacin de la crema la pata de rata la pata de rata

Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor y Medicin del espesor de Medicin del espesor de
48
aplicacin de la crema aplicacin de la crema aplicacin de la crema la pata de rata la pata de rata
 104

ANEXO N2: TABLA PARA HALLAR POR INTERPOLACIN EL VALOR DE

F TERICO EN EL ANOVA
 105

ANEXO N3: TABLA PARA HALLAR POR INTERPOLACIN EL VALOR DE

q EN LA PRUEBA HSD
 106

ANEXO N4: GALERIA DE FOTOS DE LOS PROCEDIMIENTOS DE LA

INVESTIGACIN
107