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Extraccin de ADN

de una muestra
de hgado de pollo

Integrantes: Scarlet Oviedo


Soledad Rivas
Mara J. Rodrguez
Ely Provoste
Rosa Seplveda
Curso: 4 E
Profesora: Susana Vera
Asignatura: Biologa
Fecha: 27 10 - 2017
Introduccin
El cido desoxirribonucleico conocido como ADN, constituye el material gentico de los
organismos y es el componente qumico principal de los cromosomas. El ADN, almacena
y transmite toda la informacin gentica de generacin en generacin, esto es
indispensable para el desarrollo de las funciones biolgicas de un organismo. Est
formado por cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, citosina y timina), una azcar
desoxirribosa y un grupo fosfato, adems el ADN es una molcula muy larga y tiende
agruparse lo que permite retirarlo fcilmente.
Materiales utilizados en laboratorio

1.- Hgado de pollo 2.- Tijeras 3- Mortero 4.- Vaso presipitado

5.- Cuchara 6.- Agua destilada 7.- Lavalosas 8.- Sal

9.-Matras 10.-Embudo 11.- Toalla de papel 12.- Varilla fina

13.- Probeta 14.- Alcohol 15.- Tubo de ensayo 16.- Pipeta

17.- Porta ocbjetos 18.- Azul de metileno 19.-Microscopio


Procedimiento
1. Tomamos un trozo de hgado de pollo y lo molemos hasta obtener una papilla.
2. Una vez molido el hgado lo cubrimos con agua.

3. Luego en un vaso precipitado vertimos 20ml de agua ms una cucharada de


lavalozas, dos piscas de sal y 3 a 4 cucharadas de la papilla de hgado de pollo
preparada anteriormente.

4. Enseguida revolvemos con la varilla de vidrio durante 10 minutos hasta que quede
una mezcla homognea, evitando siempre que salgan burbujas.

5. Posteriormente dejamos filtrar la mezcla durante 5 minutos con un papel grueso en


un embudo sobre un matraz.
6. Ms tarde extraemos un poco de mezcla con la pipeta de Pasteur y lo vertimos en
el tubo de ensayo que contiene el acohol fro.
7. Dejando reposar la mezcla durante 3 minutos aproximadamente.

8. Por consiguiente extraemos un poco de mezcla y lo depositamos en el porta


objetos y lo teimos con azul de metileno.

9. Finalmente llevamos el porta objetos con el poco de mezcla al microscopio y


observamos.
Funcin e importancia de la solucin tampn o buffer
Esta solucin tiene como funcin mantener las condiciones necesarias para la extraccin
del ADN. En esta solucin participan como amortiguadores el lavalozas y la sal, el primero
es un producto que quita la grasa, es decir disuelve los lpidos, componentes de la
membrana celular y de la carioteca, liberando protenas, cidos nucleicos y diferentes
metabolitos. El segundo, la sal, neutraliza las cargas negativas de los grupos fosfatos del
ADN y evita que las protenas se unan a este.
Esta solucin ayuda adems a mantener un pH ptimo para el ADN, debido a su
sensibilidad a este.
Importancia del alcohol fro
El ADN es soluble en el buffer, por lo que para extraerlo de la solucin, es necesario
hacerlo insoluble mediante la adicin de etanol. Al hacer esto, el ADN se hace visible en la
solucin como una sustancia blanca filiforme gracias a que se separa de otros polmeros y
componentes celulares.
Desarrollo de gua
1. Cul es el papel del lavalozas en esta actividad?
El lavaloza disuelve las grasas por tanto la funcin que cumpli en este experimento es
disolver los componentes de la membrana nuclear (fosfolpidos), provocando su ruptura y
dejando libre al ADN.

2. Porque crees que despus se lleg solo a obtener el ADN y no a la


combinacin de otros polmeros?
Se obtuvo solo ADN por la participacin del lavalozas y la sal que lo liberan, y por ltimo el
alcohol que hace insoluble al ADN, permitiendo que se observe y desenrolle a lo largo del
tubo de ensayo.

3. Con que tcnicas (moleculares) podra marcar solo el material gentico?


Algunas tcnicas moleculares que podran marcar solo el material gentico son los
mutantes raros, polimorfismos genticos (TRAP, RLFP, AFLP, RADPs, STR, entre otros) y
los micro satlites.
En el caso de nuestro experimento de extraccin de ADN utilizamos cloruro de
metiltionina o ms conocido como azul de metileno, que tie al ADN y permite visualizar
sus hebras.

4. Cmo crees que es posible saber quines son los padres de alguna
persona que reclama paternidad?
Comparando sus secuencias de ADN, es decir el orden de sus nucletidos y bases
nitrogenadas puesto que un individuo contiene el mismo material gentico que sus
padres, por lo que una prueba de ADN comprobara con certeza la paternidad en un
99,9%.

5. Dibuja lo observado en el tubo de ensayo al finalizar la actividad. Rotula lo


observado

Hebras de ADN

ADN precipitado

Fragmentos celulares
Conclusin
El ADN es el principal constituyente del material gentico de los seres vivos y se
encuentra en el ncleo de las clulas de todos los organismos. En la actualidad es posible
extraerlo de una manera muy sencilla, tal como lo realizamos en el laboratorio de biologa.
Para esto se requiere de varias etapas bsicas, en primer lugar mediante el uso del
lavalozas se disuelve la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula y
posteriormente a la membrana nuclear para dejar libre al ADN, finalmente se agrega
Alcohol para poder separarlo de otros polmeros y componentes celulares, de modo que
podamos observar las hebras de ADN a lo largo del tubo de ensayo.
El ADN que obtuvimos fue posible de observar en un microscopio mediante el uso de
tcnicas moleculares tales como el azul de metileno, que tie al ADN y permite
visualizarlo en un microscopio. Muestras como estas podemos obtener de nuestro cuerpo
en el semen, orina, materia fecal, piel, sangre, etc.
La importancia del ADN y sus usos gracias a las muestras anteriormente nombradas son
muy conocidos, por ejemplo saber si una persona est relacionado a otra genticamente.
Esto gracias a comparaciones en sus secuencias, es decir el orden de sus nucletidos y
bases nitrogenadas.
Linkografa

Los contenidos anteriormente presentados son una recopilacin de anlisis y observaciones


realizadas en el laboratorio de biologa el da 22 de Junio, junto a la profesora Morn Contreras.

Pginas que se utilizaron para complementar:

Prueba de ADN (2010), recuperado de: http://www.delhospital.com/laboratorio/prueba-adn.html

Tcnicas de Biologa Molecular (2014), recuperado de: https://genmolecular.com/tecnicas-de-


biologia-molecular/

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