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br Arlindo Ugulino Netto MEDRESUMOS 2016 CITOLOGIA

CITOLOGIA 2016
Arlindo Ugulino Netto.

CITOESQUELETO

O citoesqueleto uma das principais estruturas da clula.

uma rede de filamentos proteicos, que se prolongam pelo
citoplasma de todas as clulas eucariticas. A capacidade das
clulas eucariticas adotarem diversas formas, organizarem os
vrios componentes em seu interior, interagirem mecanicamente
com o ambiente e realizarem movimentos coordenados so
dependentes do citoesqueleto. Observe na figura ao lado a
organizao do citoesqueleto.
Ao contrario do esqueleto sseo dos vertebrados, o
citoesqueleto uma estrutura altamente dinmica que se
reorganiza continuamente sempre que a clula altera a sua
forma, se divide ou responde ao ambiente. Ele diretamente
responsvel por movimentos em larga escala, como a migrao
de clulas sobre uma superfcie, a contrao das clulas
musculares e as alteraes no formato celular que ocorrem ao
longo do desenvolvimento de um embrio.
o citoesqueleto quem fornece a maquinaria para movimentos intracelulares como o transporte de organelas, a
segregao de cromossomos nas duas clulas-filha durante a mitose e a separao das clulas-animais no final da
diviso celular. Ele controla o posicionamento das organelas e tambm providencia o transporte que deve ocorrer entre
elas.
O citoesqueleto composto por trs tipos de filamentos proteicos:
Filamentos intermedirios;
Microtbulos;
Filamentos de Actina (Microfilamentos).

Cada tipo de filamento apresenta propriedades mecnicas distintas e formado por subunidades proteicas
diferentes. Uma famlia de protenas fibrosas forma os filamentos intermedirios que fornecem resistncia mecnica s
clulas; a Tubulina a subunidade dos microtbulos que impulsionam clulas mveis, tais como protozorios e
espermatozoides, e a Actina a subunidade dos filamentos de Actina que fornece fora de movimento para a migrao
dos fibroblastos.

PRINCIPAIS FUNES DO CITOESQUELETO

Funciona como um dinmico andaime fornecendo suporte estrutural que pode determinar a forma da clula e
resiste s foras que tendem a deform-la. A forma plana, arredondado de muitas clulas em cultura, por
exemplo, depende do arranjo radial dos microtbulos no citoplasma das clulas.
Serve como um esqueleto interno responsvel pelo posicionamento das vrias organelas no interior da clula.
Essa funo particularmente evidente nas clulas epiteliais polarizadas.
Fornece uma rede de conexes que direciona o movimento de materiais e organelas dentro das clulas.
Exemplos dessas funes incluem a distribuio de molculas de RNAm para regies especficas da clula, o
movimento de carreadores de membrana do retculo endoplasmtico para o complexo de Golgi e o transporte de
vesculas contendo neurotransmissores ao longo do prolongamento da clula.
Funciona como um aparato de fora de estmulo que move as clulas de um lado para outro. Organismos
unicelulares movem-se, deslizando sobre uma superfcie de um substrato slido ou impulsionando eles mesmos
atravs do ambiente aquoso com o auxlio de organelas locomotoras especializadas (clios e flagelos) que se
projetam da superfcie celular.

ESTRUTURA E ORGANIZAO DOS FILAMENTOS DE ACTINA E MIOSINA

ACTINA
A principal protena do citoesqueleto, na maioria das clulas, a actina, que, quando polimerizada, forma os
filamentos de actina finos e flexveis, cujas fibras medem aproximadamente 7nm de dimetro e vrios micrmetros de
comprimento. No interior da clula, os filamentos de actina esto arranjados de maneira extremamente organizada,
formando feixes ou redes tridimensionais com propriedades de gis semisslidos. Este arranjo e organizao dos
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filamentos de actina, as interligaes entre os feixes e as redes, e suas associaes com outras estruturas celulares so
regulados pela ligao com uma variedade de protenas de associao com a actina, que so componentes importantes
do citoesqueleto da actina. Os filamentos de actina so particularmente abundantes junto membrana plasmtica, onde
formam uma rede que responsvel pelo suporte mecnico, que determina a forma celular e possibilita o movimento da
superfcie celular, permitindo a migrao de clulas, a internalizao de partculas e a diviso celular.

1. Arranjo e Desorganizao dos filamentos de actina

Individualmente, as molculas de actina so protenas
globulares com 375 aminocidos. Cada monmero de actina (actina
globular G) apresenta stios de ligao que medeiam as interaes
com dois outros monmeros de actina, de modo que os monmeros
de actina polimerizam-se para formar os filamentos (actina
filamentosa F). Cada monmero faz uma rotao ao ponto de
apresentar uma estrutura hlice de dupla cadeia. Como todos os
monmeros de actina so orientados na mesma direo, os
filamentos de actina apresentam polaridades diferentes em suas
extremidades (denominadas extremidades positivas e negativas), conferindo caractersticas distintas para cada uma
delas. Essa polaridade dos filamentos de actina importante tanto para o seu arranjo como para a definio do
movimento da miosina em uma nica direo em relao actina.
O arranjo dos filamentos de actina dado por duas fases. A primeira fase, polimerizao de actina, consiste na
formao de pequenos agregados contendo trs monmeros de actina. Os filamentos de actina podem crescer, de
forma de forma reversvel, pela adio de monmeros em ambas as extremidades; porm, uma extremidade (a
extremidade positiva) cresce de 5 a 10 vezes mais rapidamente que a negativa. Os monmeros de actina tambm se
ligam ao ATP, que hidrolisado gerando ADP aps o rearranjo do filamento. Embora o ATP no seja necessrio para
que ocorra a polimerizao, os monmeros de actina que se ligam ao ATP polimerizam-se mais rapidamente do que
aqueles que ficaram ligados ao ADP. A ligao e a hidrolise de ATP desempenham um papel importante na regulao
do arranjo e da dinmica de formao dos filamentos de actina.
A actina dissocia-se do ATP com menor facilidade do que a actina ligada ao ADP, o que resulta em uma
diferena na concentrao crtica necessria para a polimerizao nas duas extremidades. Essa diferena pode resultar
em um fenmeno denominado de alongamento, que ilustra a dinmica do comportamento dos filamentos de actina. Para
o sistema, como um todo, estar em equilbrio estvel, a
concentrao de monmeros livres de actina precisa ser
equivalente na concentrao crtica necessria para a
polimerizao tanto na extremidade positiva como na negativa
do filamento de actina. O alongamento necessita de ATP para
os monmeros de actina ligados ao ATP polimerizem o
filamento atravs da extremidade positiva, enquanto os
monmeros ligados ao ADP dissociam-se da extremidade
negativa. Embora o papel do alongamento na clula no esteja
esclarecido, ele pode refletir a dinmica do arranjo e da
desorganizao dos filamentos de actina, necessrios para
permitir o movimento celular e as alteraes de forma.

OBS: Vale destacar que vrias drogas utilizadas em biologia celular atuam ligando-se actina e afetando sua
polimerizao. Por exemplo, a citocalasina liga-se a extremidade positiva do filamento de actina, bloqueando a adio de
monmeros livres de actina. Este tratamento resulta em mudanas na forma das clulas, bem como inibe qualquer tipo
de movimento celular, indicando a polimerizao da actina necessria para estes processos. Outra droga, foloidina,
liga-se fortemente aos filamentos de actina e previne sua dissociao em molculas individuais de actina.

No interior da clula, tanto o arranjo como a desorganizao dos filamentos de actina so regulados por
protenas ligadoras de actina. A renovao dos filamentos de actina cem vezes mais rpida dentro de uma clula do
que quando sintetizada in vitro, e esta sntese rpida de actina desempenha um papel importante na variedade de
movimentos produzidos pelas clulas. A protena chave responsvel pela desorganizao dos filamentos de actina no
interior das clulas a cofilina, que se liga aos filamentos de actina e aumenta a taxa de dissociao dos monmeros de
actina da extremidade negativa. Alm disso, a cofilina pode dividir os filamentos de actina, uma vez que gera mais
extremidades livres e consequentemente aumenta a desorganizao dos filamentos.
A cofilina, preferencialmente, associa-se s actinas ligadas ao ADP, e assim mantm-se ligada aos monmeros
de actina aps a desorganizao dos filamentos e o sequestra na forma ligada ao ADP, prevenindo sua reincorporao
aos filamentos. No entanto, outra protena que se liga actina, a profilina, pode reverter o efeito da cofilina e estimular a
incorporao dos monmeros de actina aos filamentos. A profilina age estimulando a troca do ADP ligado pelo ATP
resultando na formao de monmeros de actina associados ao ATP, dissociados da cofilina, tornando-se disponveis
para a associao dos filamentos. Outras protenas (protenas Arp2/3) podem funcionar como stios de nucleao para

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iniciar o arranjo de novos filamentos, ao passo que a cofilina, a

profilina e as protenas Arp2/3 podem agir em conjunto para
promover uma sntese rpida de novos filamentos de actina e
a remodelagem do citoesqueleto de actina que necessria
para uma variedade de movimentos e alteraes de forma
celular. Conforme esperado, as atividades mediadas pela
cofilina, profilina e pelas protenas Arp2/3 so controladas por
uma variedade de mecanismos celulares de sinalizao,
permitindo que a regulao da polimerizao da actina ocorra
em resposta a estmulos do ambiente.

2. Organizao dos filamentos de actina

Individualmente os filamentos de actina aparecem geralmente organizados em dois tipos de estruturas, sendo
denominados feixes de actina e redes de actina, que desempenham papeis diferentes nas clulas. Nos feixes, os
filamentos de actina esto estreitamente interligados em agrupamentos paralelos. Nas redes, os filamentos de actina
perderam as interligaes no arranjo ortogonal que gera uma malha tridimensional com propriedades de gis
semisslidos. A formao dessas estruturas governada por uma variedade de protenas que se associam actina e
geram os diferentes padres de interligaes dos filamentos de actina.
Todas as protenas que se associam actina contm, pelos menos, dois domnios de ligao actina,
possibilitando que estas interliguem dois filamentos diferentes de actina. As protenas que ligam s actinas em forma de
feixes geralmente so protenas pequenas e rgidas que fazem com que os filamentos fiquem prximos e alinhados entre
si.
Contrariamente, as protenas que organizam os filamentos de actina em redes so geralmente protenas flexveis
que podem interligar filamentos perpendiculares. Estas protenas que interligam actina parecem ser protenas
moduladoras com funes especficas. Em geral, o domnio de ligao actina da maioria dessas protenas apresenta
estrutura similar. Elas so separadas por sequncias espaadoras que variam em comprimento e flexibilidade, e so
estas diferenas nas sequncias espaadoras que so responsveis pelas diferentes propriedades de interligao das
protenas que se ligam actina.
Existem dois tipos de feixes de actina que se distinguem estrutural e funcionalmente, envolvendo diferentes
protenas empacotadoras. O primeiro tipo de feixe composto por filamentos de actina alinhados paralelamente
prximos uns aos outros, dando suporte s projees de membrana plasmtica, como microvilosidades. Nesses feixes,
todos os filamentos tm a mesma polaridade com suas extremidades positivas orientadas para a membrana plasmtica.
O segundo tipo de feixe de actina composto por filamentos com arranjo mais frouxo e so capaz de realizar contrao,
como os feixes de actina dos aneis contrteis que dividem as clulas em duas aps mitose. Esta estrutura mais frouxa
desses feixes (que so denominados de feixes contrteis) reflete a propriedade de interligao das protenas de alfa-
actinina. O aumento de espao entre os filamentos permite que a protena contrtil miosina interaja com os filamentos
desses feixes, o que possibilita a contrao destes.

3. Associao dos filamentos de actina com a membrana plasmtica

Os filamentos de actina esto preferencialmente concentrados nas regies perifricas da clula, onde formam
uma rede tridimensional junto membrana plasmtica. Essa rede de filamentos de actina e as protenas associadas
actina (denominadas de crtex celular) determinam a forma celular e esto envolvidas com uma variedade de atividades
da superfcie celular, incluindo o movimento. A associao do citoesqueleto de actina com a membrana plasmtica ,
assim, fundamental para a manuteno da estrutura e funo celular.

OBS: A principal vantagem dos glbulos vermelhos para esses estudos que eles no contm ncleos ou organelas
internas, de maneira que sua membrana plasmtica e as protenas a que esto associadas podem ser facilmente
isoladas sem contaminao das vrias membranas internas, que so abundantes em outros tipos celulares. Alm disso,
os eritrcitos humanos perderam seus outros componentes de citoesqueleto, de tal forma que o citoesqueleto cortical o
principal determinante de suas distintas formas de discos bicncavos.

A protena principal que prov base estrutural para o citoesqueleto cortical em eritrcitos a protena de ligao
actina denominada espectrina, que similar filamina. A espectrina de eritrcitos um tetrmero constitudo por duas
cadeias polipeptdicas, denominadas de alfa e beta. A cadeia beta tem um nico domnio de associao com a actina na
regio amino terminal. As cadeias alfa e beta so associadas lateralmente para formar dmeros, que so associados
cabea com cabea para formar um tetrmero com dois domnios de ligao actina separados por aproximadamente

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200 nm. As extremidades do tetrmero de espectrina associam-se, assim, com o pequeno filamento de actina,
resultando em uma rede de espectrina-actina quer forma todo o citoesqueleto cortical dos glbulos vermelhos. A
principal conexo entre a rede de espectrina-actina e a membrana plasmtica dada por uma protena chamada de
anquirina, que se liga tanto espectrina como aos domnios citoplasmticos de uma abundante protena transmembrana
conhecida como banda 3. Uma ligao adicional entre a rede de espectrina-actina e a membrana plasmtica feita pela
protena 4.1, que se liga a junes da espectrina-actina assim como reconhece o domnio citoplasmtico da glicoforina
(outra protena transmembrana abundante).
Assim como a espectrina, a distrofina forma um dmero que liga filamentos de actina a protenas transmembrana
da membrana plasmtica de clulas musculares. Essas protenas de membrana, por sua vez, ligam o citoesqueleto
matriz extracelular, que desempenha uma importante funo na manuteno da estabilidade celular durante a contrao
muscular.
Ao contrrio da superfcie uniforme dos glbulos vermelhos, a maioria das clulas apresenta regies
especializadas de membrana plasmtica que fazem contato com as clulas adjacentes, com componentes teciduais, ou
com outros substratos. Essas regies tambm atuam como stios de adeso para feixes de filamentos de actina, que
ancoram o citoesqueleto nestas reas de contato celular. Esta adeso dos filamentos de actina particularmente
evidente em fibroblastos mantidos em cultura de tecidos. Esses fibroblastos cultivados secretam protenas de matriz
extracelular e ficam aderidos superfcie do frasco de cultura pela ligao de suas protenas transmembranas matriz
extracelular. Os stios de adeso so regies discretas, que funcionam como stios de adeso para grandes feixes de
filamentos de actina denominados de fibras de estresse.
O citoesqueleto de actina ancorado de forma semelhante s regies de contato clula-clula denominadas
junes de adeso. Nas camadas de clulas epiteliais, essas junes formam uma estrutura semelhante a um cinturo
(denominado de cinturo de adeso) circundando cada clula, formando uma zona contrtil onde feixes de actina ficam
ligados membrana plasmtica. A conexo entre clulas nas junes de adeso mediada por protenas
transmembranas denominadas caderinas. As caderinas formam um complexo com protenas citoplasmticas
denominadas cateninas, as quais se associam com os filamentos de actina.

ACTINA, MIOSINA E MOVIMENTO CELULAR

Os filamentos de actina geralmente esto associados com a miosina, e so responsveis por uma srie de
movimentos celulares. A miosina um prottipo de uma molcula motora que uma protena que converte energia
qumica em forma de ATP em energia motora, gerando assim fora e movimento.
O tipo de movimentos mais intrigante dessa variedade a contrao muscular, que serviu como modelo para a
compreenso das interaes existentes entre a actina e a miosina, e auxiliou tambm na compreenso das atividades
motoras das molculas de actina. Todavia, as interaes entre actina e miosina so responsveis no somente pela
contrao muscular, mas tambm por uma variedade de movimentos no-musculares, incluindo diviso celular, de modo
que essas interaes desempenham papel fundamental em termos de biologia celular.

CONTRAO MUSCULAR
Os msculos esquelticos so assim denominados por estarem em sua grande maioria ancorados a ossos que
eles movem. Esto sob controle voluntrio e podem ser conscientemente comandados pela contrao. As clulas
musculares esquelticas so altamente especializadas para a nica funo de contrao. Para compreenso da
contrao muscular e outros movimentos celulares mediados pela actina em nvel molecular necessrio compreender
como se arranjam os elementos contrteis da fibra muscular.
Os msculos esquelticos so feixes de fibras musculares, que so clulas longas nicas, contendo mltiplos
ncleos porque cada fibra o produto da fuso de grande nmero de mioblastos mononucleados (clulas pr-
musculares) na embriognese.
As clulas musculares possuem uma estrutura interna mais organizada que qualquer outra clula do organismo.
Contm centenas de padres finos e cilndricos denominados miofibrilas. Cada miofibrila constituda de arranjo linear
repetidos de unidades contrteis, denominado sarcmero. Cada sarcmero exibe bandeamento caracterstico, dando
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fibra a aparncia estriada. Este bandeamento resultado de uma parcial sobreposio de dois distintos tipos de
filamentos, os filamentos fino e grosso. Cada sarcmero se estende de uma linha Z para a prxima linha Z e contm
vrias bandas escuras e zonas claras.
Um sarcmero contm um par de bandas I levemente coradas localizadas nas extremidades externas, uma
banda A mais intensamente corada, localizada entre as bandas I, e uma zona H, levemente corada, localizada no centro
da banda A. Uma linha M densamente corada est no centro da zona H. As bandas I contm somente filamentos finos, a
zona H somente filamentos grossos, e a parte da zona A em ambos os lados da zona H representa a regio de
sobreposio e contm ambos os tipos de filamento.
Para compreender o mecanismo de contrao muscular necessria a observao do padro de bandeamento
dos sarcmeros em diferentes estgios no processo de contrao. A organizao do sarcmero com seus respectivos
bandeamentos demonstrada nas figuras a seguir:

ORGANIZAO E COMPOSIO DOS FILAMENTOS FINOS E GROSSOS

Os filamentos finos alm de actina possuem duas outras
protenas, tropomiosina e troponina. A tropomiosina alongada e se
adapta firmemente no sulco entre as duas cadeias de actina no
filamento fino. Cada molcula de tropomiosina est associada com sete
subunidades de actina ao longo do filamento fino. A troponina um
complexo proteico globular composto por trs subunidades, cada qual
com distinta importncia e funo. A Troponina C est ligada ao Ca+, a
Troponina I a inibidora e a Troponina T se liga a tropomiosina.
Cada filamento grosso composto por centenas de molculas
de miosina junto com pequenas quantidades de outras protenas. O tipo
de miosina encontrada nos msculos (miosina II) uma protena grande constituda por duas cadeias idnticas e dois
pares de cadeias leves. Cada cadeia pesada apresenta uma regio globular e uma cadeia longa em alfa hlice. H uma
terceira protena mais abundante da fibra muscular chamada titina. uma molcula originada na linha M e estende-se
ao longo do filamento de miosina continuando adiante da banda A e terminando na linha Z. Esta protena impede que o
sarcmero colapse durante o estiramento do msculo. Tambm mantm os filamentos de miosina na posio adequada
no centro do sarcmero durante a contrao muscular.

BASE MOLECULAR DA CONTRAO

Durante a contrao, cada cabea de miosina estende-se para o exterior e liga-se firmemente aos filamentos
finos, formando ligaes cruzadas, vistas entre os dois tipos de filamentos. As cabeas de um nico filamento de miosina
interagem com seis filamentos de actina ao seu redor. Enquanto est ocorrendo a forte ligao com o filamento de
actina, a cabea da miosina sofre uma mudana conformacional induzida pela energia liberada por hidrlise do ATP. Um
pequeno movimento da cabea ento ampliado aproximadamente 20 vezes pelo movimento oscilatrio limitado por
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pescoo em alfa hlice. O pescoo alongado atua como uma rgida alavanca causando a ancoragem do filamento fino e
este desliza para o centro do sarcmero. Assim cada filamento fino est em contato com um conjunto de cem ou mais
cabeas de miosina que se batem sincronicamente uma contra a outra. Consequentemente, o filamento fino sofre
contnua movimentao durante cada ciclo de contrao, encurtando o sarcmero.

ACOPLAMENTO DE EXCITAO E CONTRAO

O impulso gerado em uma clula muscular esqueltica
propagado para o interior da clula ao longo de tubos
membranosos chamados tbulos transversais (T). Estes
terminam prximo ao sistema de membranas citoplasmticas que
formam o retculo sarcoplasmtico (RS), o qual forma uma capa
+
membranosa em torno das miofibrilas. No RS h protenas Ca -
+
ATPase cuja funo armazenar altas concentraes de Ca e
transporta-lo para o interior da luz desta organela. A liberao de
clcio do retculo sarcoplasmtico leva a um aumento da
+
concentrao de ons Ca no citosol. Assim quando os nveis de
+
Ca aumentam, esses ons ligam-se a uma das subunidades da
troponina (troponina C) promovendo uma alterao
conformacional em outra subunidade da molcula de troponina. O
movimento da troponina transmitido tropomiosina adjacente, a qual se move para o centro do sulco do filamento.
Essa alterao na posio da tropomiosina expe o stio de ligao da miosina na molcula de actina adjacente,
permitindo que a cabea da miosina se ligue aos filamentos finos. Cada molcula de troponina controla a posio de
uma molcula de tropomiosina, a qual controla a capacidade de ligao de sete monmeros de actina no filamento fino.
+
Quando a estimulao da fibra nervosa cessa, os canais de Ca da membrana do RS se fecham e o ATPase
+ +
Ca remove o excesso de clcio do citosol. Com a baixa concentrao de Ca ocorre dissociao dos stios de ligao
na troponina, que promove a movimentao das molculas de tropomiosina para a posio de bloqueio da interao
actina-miosina.

OBS: Resumo dos eventos da contrao:

1. O impulso nervoso estimula a clula muscular esqueltica e este propagado para o interior da clula ao longo
dos tbulos transversais (T).
2. O retculo sarcoplasmtico (RS) forma uma capa membranosa em torno das miofibrilas
3. A liberao de clcio do retculo sarcoplasmtico leva a um aumento da concentrao de ons Ca+ no citosol
4. Com o aumento dos nveis de Ca+ esses ons ligam-se a uma das subunidades da troponina (troponina C)
promovendo uma alterao conformacional em outra subunidade da molcula de troponina
5. O movimento da troponina transmitido tropomiosina adjacente, a qual se move para o centro do sulco do
filamento
6. Essa alterao na posio da tropomiosina expe o stio de ligao da miosina na molcula de actina adjacente,
permitindo que a cabea da miosina se ligue aos filamentos finos
7. Quando a estimulao da fibra nervosa cessa, os canais de Ca+ da membrana do RS se fecham e a ATPase
Ca+ remove o excesso de clcio do citosol
8. Com a baixa concentrao de Ca+ ocorre dissociao dos stios de ligao na troponina, que promove a
movimentao das molculas de tropomiosina para a posio de bloqueio da interao actina-miosina.

ARRANJOS CONTRTEIS DE ACTINA COM MIOSINA EM CLULAS NO MUSCULARES

Os arranjos contrteis de actina com miosina, que se assemelham s fibras musculares porm em escala menor,
esto tambm presentes em clulas no musculares. Assim como no msculo, os arranjos contrteis de filamentos de
actina esto estruturados por filamentos bipolares de miosina 2, compostos por 15 a 20 molculas de miosina 2, que
produzem contrao pelo deslizamento relativo entre estes e os filamentos de actina. Os filamentos de actina dos feixes
contrteis em clulas no musculares esto associados com a tropomiosina, que facilita sua interao com a miosina 2,
provavelmente por um processo de competio pelo stio de ligao na actina com a filamina.
As fibras de estresse e cintures de adeso esto relacionadas no envolvimento do citoesqueleto de actina nos
processos de adeso de clulas a um substrato e nos contato clula-clula. A contrao das fibras de estresse produz
tenso atravs da clula, permitindo que esta se arraste sobre o substrato onde est ancorada. A contrao dos
cintures de adeso altera a forma das camadas de clulas epiteliais, um processo que particularmente importante
durante o desenvolvimento embrionrio, quando as camadas de clulas epiteliais formam estruturas tubulares.
O exemplo mais tpico de contrao muscular de actina-miosina em clulas no musculares, no entanto, dado
pela citocinese que a diviso da clula em duas aps a mitose. Ao final da mitose em clulas animais existe a
formao de um anel contrtil composto por filamentos de actina e miosina 2 logo abaixo da membrana plasmtica. Este
se contrai, comprimindo a membrana plasmtica de forma obstrutiva e progressiva, firme e centralmente, at dividi-la em
duas. Vale ressaltar que a largura do anel contrtil mantm-se constante a medida que este contrai-se, imprimindo uma

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desorganizao nos filamentos de actina enquanto a contrao acontece. O anel desaparece completamente aps a
diviso celular.
Em clulas no musculares e em msculo liso a contrao regulada inicialmente por fosforilao de uma
cadeia leve de miosina denominada de cadeia leve reguladora. A fosforilao da cadeia leve reguladora nestas clulas
tem, pelo menos, dois efeitos: promove o arranjo da miosina em filamentos e aumenta a atividade cataltica da miosina
impedindo que a contrao acontea. A enzima que catalisa essa fosforilao, cadeia leve de miosina quinase,
2+ 2+
regulada pela associao com a calmodulina, que uma protena que se liga ao Ca . O aumento de Ca no citosol
promove a ligao da calmodulina quinase, resultando na fosforilao da cadeia leve reguladora da miosina. O
2+
aumento do Ca no citosol ento responsvel, talvez indiretamente, pela ativao da miosina na musculatura lisa e
nas clulas no musculares, assim como no msculo estriado.

MIOSINAS NO CONVENCIONAIS
Alm da miosina 2, vrios outros tipos de miosinas so encontrados em clulas no musculares. Ao contrrio da
miosina 2, as miosinas no convencionais no formam filamentos e por isso no esto envolvidas com contrao. Elas
podem, no entanto, estar envolvidas com uma variedade de outros tipos de movimentos celulares, como o transporte de
vesculas envolvidas por membranas e organelas atravs dos filamentos de actina, fagocitose e emisso de
pseudpodes em amebas.
Das miosinas no convencionais as mais bem estudadas so membros da famlia de miosina 1. As protenas da
miosina 1 contm um domnio globular que funciona como molcula motora, como a miosina 2. Contudo, os membros da
famlia de miosina 1 so molculas bem menores, pois perderam parte da calda longa, que est presente na miosina 2,
e no formam dmeros. Todavia, suas caldas podem se ligar a outras estruturas, como vesculas com membranas ou
organelas. O movimento da miosina 1 atravs do filamento de actina pode, ento, se acompanhado destas estruturas a
ela associadas. Uma funo da miosina 1 a de formar ligaes laterais entre os feixes de actina e a membrana
plasmtica nas microvilosidades intestinais. Nessas estruturas, a atividade motora da miosina 1 pode promover o
deslocamento da membrana plasmtica ao longo dos feixes de actina em direo a ponta da microvilosidade. Funes
adicionais da miosina 1 podem ser o transporte de vesculas e organelas atravs dos filamentos de actina, o movimento
da membrana plasmtica durante a fagocitose e a emisso de pseudpodos.

DESLIZAMENTO CELULAR
O deslizamento de clulas sobre superfcies representa uma forma bsica da locomoo celular empregada por
uma variedade de tipos celulares. Exemplos incluem o movimento de amebas, a invaso de tecidos por clulas
sanguneas em uma regio de reao inflamatria, a migrao de clulas envolvidas em um processo de cicatrizao e
a disseminao de clulas cancerosas durante a metstase de tumores malignos. Tipos semelhantes de movimentos
so tambm responsveis pela fagocitose e pela distenso de processos de clulas nervosas durante o
desenvolvimento do sistema nervoso. Todos esses movimentos esto baseados em propriedades dinmicas de
citoesqueleto de actina, embora os mecanismos envolvidos ainda no sejam completamente entendidos.
O deslizamento celular envolve a coordenao cclica dos movimentos que podem ser subdivididos em trs
estgios. Inicialmente, as projees, como pseudpodos, lamelipdios ou microespculas, precisam ser emitidas a partir
da superfcie celular. Logo aps, estas extenses devem aderir-se ao substrato atravs do qual a clula est migrando.
Finalmente, a extremidade posterior da clula precisa destacar-se do substrato e retrair-se para juntar-se ao corpo
celular.
Uma variedade de experimentos indica que a emisso da projeo envolve a polimerizao e a interligao entre
filamentos de actina. Por exemplo, a inibio da polimerizao da actina bloqueia a formao de projees a partir da
superfcie celular. A renovao regulada dos filamentos de actina leva a emisso de projees em processos como
filopdios e lamelipdios no deslocamento celular, e tanto a cofilina como as protenas Arp2/3 parecem estar envolvidas
nestes processos. As miosinas no convencionais podem participar na emisso de projees de superfcie celular: a
miosina 1 necessria para a emisso de pseudpodes em amebas e a miosina 4 para emisso de filopdios em
neurnios.
Aps a emisso de projees, as regies de membrana da base da clula precisam aderir ao substrato a fim de
promover a locomoo celular. Para as clulas que se movem lentamente como os fibroblastos, adeso envolve a
formao de um foco de adeso. As clulas que se movimentam rapidamente, como as amebas ou glbulos brancos,
formam regies de contato mais difusas com o substrato, onde a composio molecular desta interao no
conhecida.
O terceiro estgio do deslocamento de clulas, que a retrao da parte posterior da clula, o menos
conhecido. A adeso do segmento posterior da clula quebrada, e a regio posterior da clula retrai-se em direo ao
corpo celular. O processo parece necessitar do desenvolvimento de tenso entre as regies anterior e posterior da
clula, gerando a fora necessria para promover a retrao da poro posterior.

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FILAMENTOS INTERMEDIRIOS
Os filamentos intermedirios recebem esta denominao por apresentarem dimetro de aproximadamente
10nm, valores intermedirios entre os filamentos de actina e os microtbulos. Eles se apresentam como filamentos
slidos, de superfcie lisa e no ramificada e at agora tm sido identificados com segurana somente nas clulas
animais, diferentemente dos filamentos de actina e microtbulos que esto presentes em todas as clulas. Os filamentos
intermedirios formam uma rede elaborada no citoplasma das clulas, estendendo-se em forma de malha desde o
ncleo at a membrana plasmtica.
Alguns tipos de filamentos intermedirios aderem ao envelope nuclear aparentemente servindo como apoio para
posicionar o ncleo dentro da clula. Alm disso, os filamentos intermedirios podem associar-se no s como a
membrana plasmtica, mas tambm com outros elementos do citoesqueleto atravs de delgadas pontes. Essas pontes
de ligaes consistem em uma protena grande e alongada denominada plectina, que pode existir em vrias isoformas
diferentes. Cada molcula de plectina se liga a um local diferente do filamento intermedirio em uma das extremidades,
ligando-se ao local de outro filamento intermedirio, microtbulos ou microfilamento na outra extremidade. Essas pontes
entre filamentos intermedirios e os filamentos de actina e microtbulos parecem fortalecer e estabilizar estas
associaes, conferindo assim um aumento na estabilidade mecnica da clula.
Enquanto os filamentos de actina e os microtbulos so polmeros de um nico tipo de protena (actina e tubulina
respectivamente) os filamentos intermedirios so compostos por uma variedade de protenas que so expressas em
diferentes tipos celulares. A maioria dessas protenas encontra-se na forma polimerizada, existindo apenas uma
pequena quantidade livre no citoplasma. Isso ocorre porque, uma vez sintetizados, os monmeros tendem a se
polimerizar imediatamente. Portanto, os filamentos intermedirios so encontrados sempre na forma estvel, diferente
dos microtbulos e filamentos de actina, que s se tornam estveis pela ligao a protenas estabilizadoras. Os
filamentos intermedirios tambm diferem dos outros componentes do citoesqueleto por no estarem envolvido
diretamente com o movimento celular. Estes parecem desempenhar basicamente um papel estrutural, conferindo fora
mecnica s clulas e aos tecidos.
O papel mecnico dos filamentos intermedirios decorrente de duas propriedades principais, a alta resistncia
e a estabilidade. A resistncia diz respeito a capacidade de resistir a grandes foras de trao sem se romper, enquanto
a estabilidade confirmada por meio de experimentos que demonstraram que os filamentos intermedirios se mantm
estveis aps tratamentos drsticos com solues contendo detergente ou altas concentraes inicas, condies estas
capazes de despolimerizar os microtbulos e os microfilamentos.

PROTENAS DOS FILAMENTOS INTERMEDIRIOS

Classes de Filamentos Intermedirios
Classe Protena Local de expresso
I queratinas cidas Clulas epiteliais

II queratinas neutras ou bsicas Clulas epiteliais

III vimetina, desmina, GFAP e Periferina Clulas de origem mesenquimal

IV neurofilamentos, -internexina Neurnios

V lminas Membrana nuclear de todo tipo celular

VI nestina Precursores de clulas neuronais

Mais de 50 protenas diferentes de filamentos intermedirios tm sido

identificadas e classificadas em seis classes com base na semelhana entre suas
sequncias de aminocidos.
As classes I e II constituem os grupos das queratinas, sendo que cada
tipo composto por aproximadamente 15 protenas diferentes, que so expressas
por clulas epiteliais. Cada tipo de clula epitelial sintetiza, pelo menos, uma
queratina do tipo I (cida) e outra do tipo II (neutra / bsica), que co-polimerizam
para formar o filamento. Algumas queratinas do tipo I e II, denominadas de
queratinas de alta massa molecular, so utilizadas na formao de anexos
epidrmicos, como unhas, cabelos, chifres e cascos. Outras queratinas do tipo I e
II, as queratinas de baixa massa molecular, so abundantes no citoplasma de
clulas epiteliais, com diferentes queratinas sendo expressas em vrios tipos de
clulas diferenciadas.
Os filamentos de queratina das clulas epiteliais so firmemente ancorados
membrana plasmtica atravs do contato de duas reas especializadas, os
desmossomos e os hemidesmossomos. Os desmossomos so junes entre

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clulas adjacentes, onde o contato clula-clula mediado por protenas transmembranas semelhantes s caderinas.
Na sua poro citoplasmtica, os desmossomos so associados por protenas intracelulares, que formam uma placa
densa caracterstica onde os filamentos de queratina esto aderidos. Estas adeses so mediadas pelas
desmoplaquinas, aos quais se ligam aos filamentos e estes a outras estruturas celulares. Os hemidesmossomos so
junes morfologicamente similares entre clulas epiteliais e o tecido conjuntivo adjacente, onde os filamentos de
queratina so associados a membros diferentes da famlia das plaquinas (Ex: plectina) e so denominadas de integrinas.
importante notar que os filamentos de queratina ancoram-se a ambos os lados dos desmossomos, assim como
servem de ligao mecnica entre clulas adjacentes em uma camada de clulas epiteliais, conferindo assim uma
estabilidade mecnica a todo o tecido.
Alteraes estruturais das queratinas esto associadas a doenas genticas da pele, um exemplo a
epidermlise bolhosa simples (EBS), os portadores dessa patologia desenvolvem leses de pele por lise celular aps
traumas mnimos. Estudos revelaram que ocorrem mutaes nos genes das queratinas que interferem no arranjo normal
dos filamentos de queratina. Demonstra-se assim, o papel das queratinas na manuteno de resistncia de clulas
epiteliais a estresses mecnicos.
As protenas da classe III incluem a vimentina, que encontrada em uma variedade de clulas, como nos
fibroblastos, nas clulas de msculo liso e nos glbulos brancos. O alto grau de insolubilidade da vimentina sugere a sua
funo estrutural no citoplasma. Algumas evidncias bioqumicas e morfolgicas indicam que os filamentos de vimentina,
os de queratina esto associados membrana nuclear e plasmtica, mantendo a posio do ncleo e do fuso mittico,
durante a vida da clula. Outra protena do grupo III, a desmina, especialmente expressa em clulas musculares, onde
esta conecta os discos Z de cada elemento contrtil individualmente. Ela desempenha um papel estrutural chave na
manuteno e no alinhamento das miofibrilas das clulas musculares, e a ausncia desses filamentos intermedirios
tornam as clulas extremamente frgeis. Uma doena chamada miopatia relacionada com desmina, causada por
mutaes no gene que codifica a desmina. Pacientes com essa doena sofrem de disfunes como fraqueza da
musculatura esqueltica, arritmias cardacas e eventual deficincia cardaca congestiva. Uma terceira protena do grupo
III dos filamentos intermedirios, a protena cida do filamento glial, expressa especificamente nas clulas gliais, e
uma quarta protena, periferina, expressa em neurnios e no sistema nervoso perifrico.
As protenas da classe IV de filamentos intermedirios incluem as trs protenas dos neurofilamentos (NF),
designadas NF-L, NF-M, NF-H, respectivamente para baixo, mdio e alto peso molecular. Essas protenas so os
componentes principais dos filamentos intermedirios de vrios tipos de neurnios maduros. Estes so particularmente
abundantes em axnios de neurnios motores e parecem desempenhar uma funo importante na sustentao deste
processo longo e fino, que pode conter mais de um metro de comprimento. Outra protena do tipo IV, -internexina,
expressa em neurnios em estgios iniciais do desenvolvimento, antes da expresso das protenas dos neurofilamentos.
As protenas da classe V dos filamentos intermedirios so as
lminas nucleares, que so encontradas na maioria das clulas
eucariticas. Essas protenas formam uma trama bidimensional que
recobre internamente o envoltrio nuclear e se prestam estruturao do
ncleo, ancoragem da cromatina e a desintegrao / reestruturao do
ncleo durante a mitose.
A nestina possui todas as caractersticas para ser classificada
como um filamento intermedirio. Entretanto, como h pouca homologia
com os outros Filamentos intermedirios, ela foi integrada em uma nova
classe de Filamentos intermedirios, a classe VI. A nestina um dos
maiores filamentos intermedirios, com peso molecular entre 210-240 Kd.
Esta protena expressa tanto em estgios iniciais do desenvolvimento de
neurnios, como em clulas-tronco do sistema nervoso central.

ARRANJO DOS FILAMENTOS INTERMEDIRIOS

As vrias protenas de filamentos intermedirios apresentam uma organizao estrutural comum. Todas as
protenas apresentam um domnio central com um basto em -hlice constitudo por aproximadamente 310
aminocidos (sendo 350 aminocidos na lmina nuclear). Esse domnio central apoia-se em domnios amino e carboxi
terminais, que variam em tamanho e estrutura secundria nas diferentes protenas de filamentos intermedirios.

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As subunidades proteicas de cada classe de

filamentos intermedirios tende a se auto-agregar
rapidamente, obedecendo a um mesmo padro de
polimerizao. Dois polipeptdios interagem
espontaneamente com os seus domnios da - hlice
enlaando-se e gerando uma estrutura de espiral enrolada
para formar o dmero. Como os dois polipeptdios se alinham
paralelamente um com o outro na mesma direo, os
dmeros so polarizados, com uma terminao definida por
uma poro C -terminal de polipeptdios e na posio oposta,
N- terminal. Dois dmeros ento se associam em uma forma
antiparalela para formar tetrmeros. Estes associados com
um outro, ambos lateralmente e nas terminaes, formam
uma estrutura intermediria pouco descrita que se polimeriza
ao filamento final. Devido associao antiparalela entre
os dmeros para formar os tetrmeros, no h polaridade nos
filamentos intermedirios, esta outra caracterstica que
distingue os filamentos intermedirios dos outros elementos
do citoesqueleto.
Dependendo do tipo de filamento intermedirio,
dmero pode ser composto por monmeros idnticos
(homodmeros) ou no (heterodmeros). Por exemplo, os
filamentos de queratina esto sempre arranjados como um heterodmero composto pela combinao de polipeptdeos do
tipo I e tipo II. Contrariamente, as protenas do tipo III pode arranjar-se em filamentos compostos por um nico
polipeptdeo (como a vimentina), ou composto por duas protenas diferentes do tipo III (como o arranjo da vimentina com
a desmina).
Os filamentos intermedirios so geralmente mais estveis que os filamentos de actina ou microtbulos. No
entanto, as protenas dos filamentos intermedirios so frequentemente modificadas por fosforilaes, que podem
regular seu arranjo e desorganizao dentro da clula. O exemplo mais claro dentro da clula a fosforilao das
lminas nucleares, que provoca a desorganizao das laminas nucleares e o desaparecimento do envelope nuclear
durante a mitose.

MICROTBULOS
Os microtbulos so constitudos por cilindros ocos aproximadamente de 25
nm de dimetros. Como os filamentos de actina, os microtbulos so estruturas
dinmicas que esto em constante processo de arranjo e desorganizao dentro das
clulas. Eles agem definindo a forma celular e esto envolvidos com uma variedade
de movimentos celulares, incluindo algumas formas de locomoo, o transporte
intracelular de organelas e a separao dos cromossomos durante a mitose.

ESTRUTURA, ORGANIZAO E COMPOSIO

Os microtbulos so compostos por um nico tipo de protena globular
chamada de tubulina. A tubulina um dmero constitudo por dois polipeptdeos
intimamente relacionados, a tubulina e a tubulina que so codificadas por
pequenas famlias de genes semelhantes entre si. Alm disso, um terceiro tipo de
tubulina ( tubulina) localiza-se especificamente no centrossomo onde desempenha
uma funo crtica na iniciao dos arranjos dos microtbulos. O dmero de tubulina
polimeriza-se para formar os microtbulos que geralmente so constitudos por 13
protofilamentos lineares organizados em torno do centro do orifcio do tbulo.
Os protofilamentos so compostos por dmeros de tubulina da cabea at a cauda esto arranjados em paralelo.
Consequentemente, os microtbulos so estruturas polares com duas extremidades distintas uma de crescimento
rpido, que a extremidade positiva, e a extremidade de crescimento lento, que a negativa.

PROTENAS ASSOCIADAS AO MICROTBULO

Embora os microtbulos possam polimerizar in vitro a partir de tubulinas purificadas,
aqueles obtidos de clulas tpicas contm protenas adicionais, chamadas Protenas
Associadas ao Microtbulos (MAP). A maioria das MAPs que foram identificadas so
encontradas somente no tecido cerebral mas uma dessas protenas chamada MAP4, tem uma
ampla distribuio em clulas no neuronais. As MAPs caracteristicamente tem um domnio
que se liga ao lado de um microtbulo e outro domnio que se estende do lado externo como
um filamento a partir da superfcie do microtbulo. Algumas MAPs aumentam a estabilidade

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dos microtbulos, alteram sua rigidez ou influenciam seu grau de organizao, sua atividade controlada primariamente
pela adio e remoo de grupos fosfatos a partir de resduos de aminocidos particulares por proteinoquinases e
fosfatases.
Um nvel anormal e alto de fosforilao de uma particular MAP chamada tau, foi envolvido no desenvolvimento
de graves doenas neurodegenerativas. As clulas do encfalo de pessoas com essa doena contm estranhos
filamentos entrelaados (chamados entrelaados neurofibrilares) consistindo em molculas tau que so excessivamente
fosforiladas e incapazes de se ligar aos microtbulos. Os filamentos neurofibrilares contribuem para a morte das clulas
nervosas. Indivduos com uma dessas doenas, um tipo de demncia chamada FTDP 17, carregam mutao no gene
tau, indicando que alteraes na protena tau so a causa primaria desse distrbio.

INSTABILIDADE DINMICA
O dmero de tubulina pode despolimerizar-se assim como polimerizar-se, e os microtbulos podem sintetizar
ciclos rpidos de arranjo e despolarizao. Tanto a tubulina como a tubulina ligam-se a GTP, que funciona
promovendo a regulao da despolimerizao. Particularmente a GTP liga-se a tubulina e hidrolisada durante, ou
logo aps a polimerizao. Essa hidrolise da GTP enfraquece a afinidade da ligao da tubulina as molculas
adjacentes, favorecendo assim a despolimerizao e resultando no comportamento dinmico dos microtbulos. Os
microtbulos realizam alongamento, um processo dinmico no qual molculas de tubulina ligadas a GDP so
continuamente desligadas da extremidade negativa e as ligadas a GTP so adicionadas a extremidade positiva do
mesmo microtbulo. Nos microtbulos a hidrolise da GTP tambm resulta em um processo denominado instabilidade
dinmica, onde os microtbulos individualmente alternam ciclos de crescimento e encolhimento. Estes so determinados
pela relao da taxa de adio de tubulinas em relao a taxa de hidrolise da GTP. A medida que novas molculas de
tubulina ligada a GTP so adicionadas mais rapidamente do que a GTP hidrolisada os microtbulos retm um cap de
GTP em sua extremidade positiva, e os microtbulos crescem continuamente. No entanto, se a taxa de polimerizao
diminui, a GTP ligada a tubulina na extremidade positiva do microtbulos ser hidrolisada gerando GDP. Se isso
acontecer, as molculas de tubulina ligadas a GDP vo dissociar-se, resultando na rpida despolimerizao e na
retrao do microtbulo.
Considera-se tambm que os microtbulos tem uma funo na manuteno da organizao interna das clulas.
O tratamento de clulas com drogas que rompem microtbulos pode afetar seriamente a posio de organelas
membranosas, particularmente o Complexo de Golgi. O tratamento das clulas com nocodazol ou colchicina pode
dispersar os elementos de Golgi para regies perifricas da clula. Quando a droga removida os microtbulos so
agregados e as membranas de Golgi retornam a sua posio normal no interior da clula. Estas substncias tambm
bloqueiam a mitose e drogas semelhantes so utilizadas na quimioterapia contra o cncer.

PROTENAS MOTORAS ASSOCIADAS AOS MICROTBULOS

As cinesinas e as dinenas, os prottipos de protenas motoras associadas aos microtbulos, movimentam-se
atravs dos microtbulos em direes opostas: a cinesina em direo a extremidade positiva e a dinena em direo a
extremidade negativa. A dinena abundante nos clios. A identificao de outras protenas difcil porque elas existem
em baixas concentraes.
A cinesina uma molcula de aproximadamente 380 kd, composta por duas cadeias pesadas de 120 kd cada
uma e duas cadeias leves de 64 kd. As cadeias pesadas tm duas regies longas em hlice que se encontram
envolvidas formando uma estrutura de espiral enrolada. Os domnios amino terminais das cadeias pesadas, que so
cabeas globulares, so os domnios motores da molcula, sendo que estas se ligam tanto aos microtbulos como ao
ATP, e a hidrolise deste fornece a energia necessria para o movimento. No entanto, o domnio motor da cinesina
muito menor do que a miosina sugerindo que a miosina evoluiu de um precursor comum. A poro caudal da molcula
da cinesina constituda pela associao da cadeia leve com o domnio carboxi terminal da cadeia pesada. Essa poro
da cinesina responsvel pela ligao com outros componentes que so transportados ao longo dos microtbulos pela
ao das cinesinas motoras.

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A dinena uma molcula extremamente grande sendo constituda por duas ou trs cadeias pesadas formando
um complexo com um numero varivel de polipeptdeos leves ou intermedirios. Assim como na cinesina a cadeia
pesada da dinena forma um domnio globular motor que se liga a ATP. A poro basal da molcula inclui as cadeias
leve e intermediria, que parecem se ligar a outras estruturas.
Tanto a cinesina como a dinena formam famlias semelhantes s protenas motoras. Alguns membros da famlia
das cinesinas movimentam-se ao longo dos microtbulos em direo a extremidade positiva. Outros membros
movimentam-se em sentido oposto. Diferentes membros da famlia das cinesinas variam as sequncias das suas caudas
da regio carboxi terminal e so responsveis pelo transporte de diferentes carregamentos onde incluem-se vesculas,
organelas e cromossomos ao longo dos microtbulos.
Existem vrios tipos de dinenas axonais e dinenas citoplasmticos. Todos os membros da famlia das dinenas
movem-se em direo a extremidade negativa, mas diferentes dinenas citoplasmticas podem transportar diferentes
carregamentos.

REORGANIZAO DOS MICROTBULOS NA MITOSE, ESTABILIZAO DOS MICROTBULOS E POLARIDADE

CELULAR
Os Centros Organizadores de Microtbulos so os stios de nucleao dos microtbulos, ou seja, nesses
centros organizadores ocorre a polimerizao
(crescimento) dos microtbulos. As extremidades (-) dos
microtbulos ficam ancoradas nesses centros. Nas
clulas animais, o principal centro organizador de
microtbulos o centrossomo. Este constitudo pelo
material pericentriolar e pelos centrolos. Estes ltimos
so estruturas cilndricas formadas por nove trplex de
microtbulos, semelhantes aos corpos basais de clios e
flagelos. Como nas clulas vegetais, nas de muitos
eucariontes unicelulares e at em algumas clulas
animais (tais como os ocitos de camundongos) os
centrolos esto ausentes, acredita-se que eles no
sejam os responsveis pela nucleao dos microtbulos,
mas sim o material pericentriolar.
Vrias protenas foram identificadas na composio qumica dos microtbulos, mas seu papel na montagem dos
mesmos ainda no foi identificado. Porm, o papel da tubulina foi identificado. Em ovos de Xenopus, por exemplo,
complexos de tubulina purificados so capazes de nuclear microtbulos in vitro. Acredita-se que esses complexos (em
anel e contendo cerca de 10 a 13 molculas e 25 a 28 nm de dimetro) ligam-se s tubulinas e , servindo como stios
de nucleao para a montagem dos microtbulos.

REORGANIZAO DOS MICROTBULOS DURANTE A MITOSE

Durante a intrfase, o centrossomo localiza-se prximo ao ncleo da clula. J na mitose, toda a rede
microtubular da clula em intrfase desmontada e as tubulinas livres so reutilizadas para formar o fuso mittico,
responsvel pela duplicao das cromtides irms. Isso dirigido pela duplicao do centrossomo, formando dois
centros organizadores de microtbulos que, durante a diviso celular, migraro para polos opostos do fuso mittico.
Quando a clula entra em mitose, ocorrem concomitantemente o aumento da despolimerizao dos microtbulos
e o aumento do nmero de microtbulos que se organizam a partir dos dois novos centrossomos.
A formao do fuso mittico envolve a estabilizao seletiva de alguns microtbulos que irradiam dos
centrossomos. Os microtbulos so de trs tipos: os microtbulos dos cinetcoros, que se ligam aos centrmeros dos
cromossomos condensados por protenas especficas que formam o cinetocoro. Ao se ligarem a estas protenas, eles
so estabilizados e responsabilizam-se pela separao dos cromossomos durante a anfase; os microtbulos polares,
os quais no se ligam ao centrmero, sendo estabilizados por associao entre si no centro da clula e; os
microtbulos astrais, que se estendem do centrossomo at a periferia celular, tendo suas extremidades (+) livremente
expostas. Os microtbulos polares e os astrais contribuem para o movimento dos cromossomos, ao empurrarem os
polos do fuso para as extremidades opostas da clula.
No decorrer da mitose, os cromossomos, j condensados, alinham-se na placa metafsica, as cromtides ento
se separam, sendo puxadas para os polos opostos do fuso. O movimento dos cromossomos mediado por protenas
motoras associadas aos microtbulos do fuso. Ao fim da mitose, o envoltrio do ncleo se refaz, os cromossomos
descondensam-se e ocorre a citocinese. Cada clula-filha, ento, recebe um s centrossomo, responsvel pela
formao da nova rede de microtbulos da clula interfsica.

OBS: Alguns alcaloides de plantas ligam-se tubulina e afetam a formao dos microtbulos. A colchicina, por exemplo,
causa uma rpida despolimerizao de todos os microtbulos citoplasmticos. J o taxol, um outro alcaloide, promove
uma rpida polimerizao dos microtbulos, tornando-os estveis. A partir da estrutura molecular destes alcaloides de
plantas foram construdas drogas sintticas que tambm so capazes de se ligar s tubulinas e apresentar um efeito

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antimittico, como a vincristina e a vimblastina. Estas substncias tm sido usadas amplamente no tratamento de
cncer.

ESTABILIZAO DE MICROTBULOS PELAS PROTENAS ASSOCIADAS AOS MICROTBULOS (MAPS)

A instabilidade ou comportamento dinmico dos microtbulos pode ser modificada por interaes de
microtbulos com outras protenas, chamadas de protenas associadas aos microtbulos ou MAPs. Essas protenas
podem se ligar aos microtbulos e impedir que estes sejam despolimerizados.
Um grande nmero de MAPs tem sido identificado. Algumas encontram-se amplamente distribudas em muitos
tipos celulares, j outras ocorrendo apenas em tipos celulares especficos. As MAPs melhor caracterizadas so as
isoladas do crebro de mamferos, incluindo as protenas MAP-1, MAP-2 e tau. Cada uma possui dois domnios, um que
se liga ao microtbulo e outro que auxilia na ligao do microtbulo a outros componentes celulares. As MAPs tambm
aumentam a velocidade de nucleao dos microtbulos, porm a sua funo principal estabilizar os microtbulos,
impedindo a sada das tubulinas das suas extremidades.

PROTENAS MOTORAS SO RESPONSVEIS PELO TRANSPORTE INTRACELULAR AO LONGO DOS MICROTBULOS

Os microtbulos so responsveis por uma grande variedade de movimentos celulares. O movimento ao longo
dos microtbulos baseia-se na ao de protenas motoras, que usam energia de hidrlise do ATP para gerar fora e
movimento. Duas grandes famlias de protenas motoras so responsveis por uma variedade de transportes
dependentes de microtbulos: as cinesinas e as dinenas citoplasmticas. Elas so formadas por duas cadeias pesadas
e vrias leves. Cada cadeia pesada possui uma cabea globular e uma longa regio em -hlice, a qual se enrola sobre
a de outra molcula em uma estrutura helicoidal. A regio globular muito conservada, correspondendo aos domnios
motores da molcula. Estes domnios possuem stios de ligao para os microtbulos e para o ATP, sendo que a
hidrlise deste ltimo fornece a energia necessria para o movimento. A regio da cauda, formada pela regio longa das
cadeias pesadas associadas s cadeias leves, mais varivel e se liga aos componentes celulares que sero
transportados ao longo dos microtbulos.
Segundo estudos, cada protena motora move-se ao longo dos microtbulos somente em uma direo. As
cinesinas deslocam-se, em geral, s para a extremidade (+), enquanto as dinenas para a (-). Como os microtbulos so
orientados com suas extremidades (-) ancoradas no centrossomo e suas (+) se estendendo para a periferia celular, as
cinesinas e dinenas transportam vesculas e organelas em direes opostas pelo citoplasma.
Os microtbulos e suas protenas associadas tm a importante funo de posicionar as organelas, como o
retculo endoplasmtico o complexo de Golgi e os lisossomos, dentro das clulas eucariticas. Por exemplo, drogas que
despolimerizam os microtbulos causam uma retrao do retculo endoplasmtico para o centro da clula, indicando que
a associao aos microtbulos necessria para manter esta organela espalhada pelo citoplasma. J o complexo de
Golgi localiza-se no centro da clula, prximo ao centrossomo.
Quando os microtbulos so despolimerizados, o complexo de Golgi se fragmenta em pequenas vesculas, que se
dispersam pelo citoplasma. Quando a rede microtubular reestruturada, o aparelho de Golgi tambm volta a se
organizar com suas vesculas, sendo, aparentemente, transportadas para o centro da clula.

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